METODO DE KENDAHL: Determina el contenido de Nitrgeno total. NT : NP + NNP NT: 6.25 El resultado sale de que la protena tiene 16% de Nitrogeno. 5 gramos Macro Kendahl : diferencia entre la cantidad de muestra que se necesita. 0.15 gramos 1.- DIGESTION: Digerir la muestra. Destruir las materia organica a travez de un acido fuerte. Solo debe quedar el nitrgeno de la protena El acido usado es el Ac. Sulfurico al 98% Se utiliza un catalizador que reacciona con el acido. El catalizador es el Sulfato de Cobre T 400C x 3 horas y 30 minutos. MATERIALES 12 tubos de digestin de Micro Kendhal Muestras de alimentos medidas Pipetas Perlas de vidrio Bloque de digestin de 12 muestras Balanza de precisin
2.- DESTILACION: Lo que queda en el tubo es la unin de Ac. Sulfurico y Amonio. Sulfato de Amonio REACTIVOS: Hidroxido de Sodio 40 % Na OH ( NH4)2 SO4 Ac. Borico 4 % Indicador: ( Azul de Metileno y Rojo de Metileno)
MATERIALES: Matraz Agua destilada
EQUIPO: Destilador Balanza de precisin
3.- TITULACION: El procedimiento final es el Borato de Amonio. Acido Clorhdrico EQUIPOS: Bureta digital PROCEDIMIENTO DE CLCULO
El contenido de nitrgeno total sal en base fresca igual 1.4 x el volumen de gasto de Ac. Cl orhidrico Vol. Ac Clorhidrico x Normalidad del Ac. Clorhidrico ( 0.25) y multiplicar por un factor de cor reccin.
Para conocer el contenido de protena en base fresca NT X 6.25 % PC bf: % NT bf x F % PC bf : % PC bf x % MS 105 100
4.- EXTRACTO ETEREO: Grasa cruda, Grasa bruta Se considera grasa al extracto etereo que se obtiene cuando la muestra es sometida a extr accin con un solovente organico ( Eter de petrleo de 40 o 60 ) Ademas de: Esteres de Acidos grasos + glicerol. Trigliceridos Fosfolipidos Lecitinas Esteroles HCL 0.25 N %NTbf : 1.4 x ( vhcl 1 VHCL 0 ) x ( N x FC) Ceras Ac. Grasos libres Vitaminas liposolubles A( Caroteno) D ( Alfalocoferol) Clorofilas. METODO UTILIZADO SOXHLET MATERIALES: Muestra molida y seca Dedales o cartucho de celulosa ter de petrleo de 40 o 60 Guantes de latex Pinzas Pinza magnetica para manipulacin de cartuchos. EQUIPOS: Extractor de grasa por el mtodo Soxhlet Balanza de precisin
PROCEDIMIENTO: Secado de la muestra a 105 C durante 3 horas Tarado de los vasos ( registrar el peso vacio de los vasos) El recipiente ser un vaso de aluminio. Preparacin de la muestra ( se muele y se registra el peso en un cartucho de celulosa de 01 gr. Aprox.) Colocacin de los vasos y el solvente en el extractor En cada vaso se colocara 50 ml de solvente. ( Eter de petrleo). Con esto la unidad esta lista para la extraccin Presentar 4 fases dentro del extractor
FASE DE BOILING: La muestra se sumerge en estado de ebullicin 30 a 45 minutos. FASE RISING: Las muestras son sometidas a niveles del solvente que ha sido condensado 4 0 a 60 minutos. FASE RECUPERACION DEL SOLVENTE: se recupera el solvente que ha sido utilizado en la e bullicin no en un 100% solo se recupera un 25 a 30%. PROCESO DE EVAPORACIN: Dado el carcter gravimtrico de la tcnica, cualquier resto d e solvente que quedara en el vaso ser considerado como grasa Lo que queda de solvente en el vaso se lleva a la estufa a 105 C y solo queda grasa. PARA EL CLCULO LA FORMULA ES: Se calcula el peso inicial ( Vaso de aluminio mas la muestra)
Calculamos el valor de A:
Peso final : tara + grasa PF : (T + G)
Muestra rechazo de Chia : Proteina Peso : 1.0213 Peso salida : 0.1543 Peso vaso : 24.0201 Datos: Ajonjol 1. Estado seco - al aire, total 2. Estado hmedo pacial 105 grados Ajonjol MST Tara = 15. 0974 Muestra = 2.0369 Pi : T + M A : Pi - PF PF : (T + G) b : M - A FC: 1.1765 N : 0.25 T + MS = 16. 9744 PC: VHCL3 = 5.77 ml VHCL0 = 0.02 ml FC HCl = 1.1765 M = 0.1531 EE: T= 23.8967 M= 1. 0190 T + G = 23.9113 C25 : T + C25 = 15.4848 T = 15. 0974 M = 1. 8770