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TRABAJO PRCTICO N 4
TEJIDO CONECTIVO
Tejido conectivo propiamente tal

Objetivos
a) Analizar los componentes del tejido conectivo: sustancia fundamental, fibras y clulas.
b) Reconocer algunos tipos de tejidos conectivos, relacionando los componentes del tejido
con la funcin del mismo.

PREPARACIN N 1
a) Material biolgicos: Glndula mamaria en reposo (no lactante)
b) Objetivo: Observar la distribucin de los distintos tipos de
tejido conectivo observados en esta glndula.
Reconocer el tejido conectivo laxo, tejido conectivo
denso desordenado y tejido adiposo, estudiando sus
distintos componentes: clulas fibras y sustancia
fundamental.
c) Tipo de Corte: Indeterminado
d) Tincin: Hematoxilina y Eosina (H- E)


1.- Con aumento topogrfico, identifique grupos ms o menos redondeados constituidos
por acmulos de estructuras canaliculares (ductos y alvolos glandulares que forman
lobulillos). Los mismos se encuentran delimitados por gruesas porciones de tejido
conectivo denso que posee numerosas bandas de colgeno (interlobulillar) y tambin por
tejido adiposo.
Identifique las clulas adiposas de gran tamao, redondas, de citoplasma blanco (ya que
posee una gran gota de lpidos que es evacuado con la tcnica utilizada y aparecen
pticamente vacas) y ncleo celular hacia la periferia citoplasmtica, de forma aplanada.
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2.- Observe con atencin el tejido conectivo denso desordenado o irregular que limita
estas unidades glandulares. Las bandas de colgeno son eosinfilas y si usted cierra el
condensador al mximo observar que las mismas muestran cierta refringencia. Observe
la presencia de clulas entre las bandas de colgeno.
3.- Con aumento mediano analice alguna de estas unidades glandulares. All encontrar
una mezcla de conductos (los mayores) y alvolos (ms pequeos) pero generalmente de
difcil diferenciacin en la glndula en reposo o no lactante. Ambos presentan un epitelio
simple cilndrico o cbico, rodeado por clulas mioepiteliales (que en esta preparacin
aparecen muy prominentes y de citoplasma claro, dando la sensacin de tener epitelio
estratificado). Observe el tejido conectivo laxo que se encuentra entre los conductos y
alvolos (intralobulillar). Compare las fibras de colgeno y la cantidad de clulas de este
tejido con las del tejido conectivo denso desordenado interlobulillar.
Actividad: Realice un dibujo esquemtico representando las caractersticas propias de
los distintos tipos de tejidos con sustancia fundamental que observa en la preparacin.
Destaque las diferencias histolgicas que observa entre ellos: tejido conectivo laxo
(intralobulillar) y tejido conectivo denso y tejido adiposo (interlobulillar) a 40X. Rotule todo
lo dibujado.

PREPARACIN N 2

a) Material biolgico: Piel delgada
b) Objetivo: Observar la localizacin y caractersticas del tejido
conectivo en la piel. Reconocer diferentes tipos de
tejidos conectivos y su localizacin.
c) Tipo de corte: Indeterminado
d) Tincin: Hematoxilina y Eosina (H - E)
Tejido conectivo
Denso
desordenado
Tejido conectivo
laxo
Epitelio
glandular
Lobulillo
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Esta corresponde a la misma preparacin observada con anterioridad.
Identifique el tejido de revestimiento (epidermis) y dirjase a las capas subyacentes al
mismo (dermis).
La unin dermo-epidrmica generalmente posee un contorno irregular. El sector de
tejido conectivo que se ubica inmediatamente por debajo de la epidermis, se denomina
dermis papilar, debido a que el tejido conectivo protruye formando unas zonas elevadas
con aspecto de papilas. Este tejido conectivo es de tipo laxo, con una delicada red de
fibras colgenas, reticulares y elsticas.
Por debajo de la dermis papilar (ms profundamente) se encuentra la dermis reticular,
que, generalmente es ms gruesa que la anterior, pero puede tener un espesor variable.
Consta de un tejido conectivo denso desordenado, con gruesos haces (colgeno tipo I,
principalmente) y fibras elsticas.
Por debajo de la dermis reticular (hipodermis) puede encontrarse tejido adiposo blanco
o unilocular, msculo liso e incluso en ocasiones msculo estriado esqueltico.
Actividad: realice un esquema a 10X que muestre el epitelio de revestimiento (no es
necesario el detalle de este tejido) donde se observe la localizacin y diferentes
caractersticas de los tejidos conectivos mencionados ( en este si deben aparecer
detalles). Rotule todo lo representado.


PREPARACIN N 3

a) Material biolgico: Piel delgada
b) Objetivo: Comparar la informacin entregada al emplear una
tincin de rutina versus una tincin especial.
c) Tipo de corte: Indeterminado
d) Tincin: Tricrmico de Mallory

Al colocar la muestra, verifique que se encuentre en la misma posicin que la observada
anteriormente.
Intente localizar los distintos tipos de tejidos que hemos analizado con la tincin
habitual. Notar que los perfiles celulares no son notorios con esta tcnica; y debido a
su composicin, algunos tejidos se pueden estudiar con mayor facilidad. Intente
determinar qu tejidos son stos y qu componente de ellos es el que destaca este
mtodo de tincin.



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TRABAJO PRCTICO N 5

TEJIDO CONECTIVO ESPECIALIZADO

Cartlago y hueso
Objetivos
a) Analizar los componentes de algunos ejemplos de tejidos conectivos especializados y
sus principales componentes.
b) Identificar cartlago de tipo hialino y fibroso, adems del hueso compacto, estudiar sus
componentes relacionando sus particularidades con su funcin

PREPARACIN N 1
a) Material biolgico: Trquea
b) Objetivo: Estudiar el cartlago hialino
c) Tipo de corte: Transversal
d) Tincin: H y E


1.- Con aumento menor aumento ubique a la estructura canalicular que constituye la
trquea. Recorra el preparado y localice las distintas capas que componen a este
rgano. Revistiendo al lumen, la capa mucosa: constituida por un epitelio y una lmina
propia subyacente de tejido conectivo laxo. Por debajo se localiza la submucosa,
compuesta por tejido conectivo apenas ms denso que el de la lmina propia, que
adems consta de glndulas. Luego se observa la capa de cartlago y finalmente lo
ms externo es la adventicia, compuesto por tejido conectivo laxo.
La zona de cartlago (resalta por su coloracin basfila) est compuesta por anillos
incompletos de cartlago hialino cuyos extremos de localizacin posterior se
encuentran unidos por msculo liso.
2.- Con aumento medio y mayor estudie el cartlago hialino. Observe la forma y
disposicin de las clulas de las zonas ms perifricas y de la porcin central. Analice
las diferencias de coloracin de la matriz en sus distintas zonas con la tincin utilizada.
3.-Observe el pericondrio que rodea al cartlago. Reconozca las capas que lo constituyen.

Actividad: Realice un dibujo esquemtico del cartlago hialino con aumento 40x, que
incluya una zona de pericondrio. Rotule todos los elementos observados.
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PREPARACIN N 2
a) Material biolgico: Difisis de hueso largo descalcificado
b) Objetivo: Estudiar el tejido seo de tipo compacto
c) Tipo de corte: Transversal
d) Tincin: H y E

1- Identifique una estructura con forma de anillo eosinfila con un contenido plido.
Con menor aumento recorra la preparacin y dirjase a la zona del anillo perifrico
eosinfilo. Observe la presencia de pequeas cavidades rodeadas por clulas
dispuestas en distintas capas, de disposicin concntrica a cada pequeo orificio.
Estas estructuras compuestas por una cavidad central rodeada de osteocitos de
disposicin concntrica se denominan osteonas o sistemas de Havers. La cavidad
central se denomina conducto de Havers y contiene vasos sanguneos y nervios.














pericondrio
Matriz
interterritorial
Conducto de
Havers
Disposicin de
los
osteocitos en
forma
concntrica al
conducto
de Havers
Osteocito
Conducto de
Volkman
Matriz
territorial
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2.- Observe la zona central ms plida del preparado. All encontrar tejido mieloide y
tejido adiposo.
3.- Con mayor aumento observe las clulas que forman parte del tejido seo y las
caractersticas tincionales de la matriz extracelular. Identifique canales de Havers y de
Volkman
4.-Identifique el periostio y sus componentes.
Actividad: Realice un dibujo esquemtico de las estructuras observadas a 40X.
(Osteonas, periostio y cavidad medular). Rotule todo lo dibujado.


PREPARACIN N 3
a) Material biolgico: Menisco
b) Objetivo: Estudiar un tipo de cartlago que constituye los meniscos:
fibrocartlago
c) Tipo de corte: Indeterminado
d) Tincin: H y E

Coloque la preparacin y observe a 4X. Observe como destaca la coloracin eosinfila
bastante homognea con este aumento.
Al mirar con ms aumento, reconocer hileras de condrocitos y formando grupos
isgenos. La matriz posee abundantes fibras de colgeno dispuestas ms o menos en
forma paralela entre los condrocitos. Este tipo de cartlago adems no presenta
pericondrio.


PREPARACIN N 4
a) Material biolgico: Menisco
b) Objetivo: Estudiar el menisco comparando la coloracin que adquieren
sus distintos componentes con una tcnica especial
c) Tipo de corte: Indeterminado
d) Tincin: H E y Azul de Alcian

Recorra la preparacin mientras la observa con 4X. Observe, como a diferencia de la
preparacin anterior, se pueden identificar, debido a sus caractersticas tincionales, los
componentes del fibrocartlago: cartlago hialino y tejido conectivo denso ordenado. La
intensa acidofilia observada en el fibrocartlago corresponde principalmente a las fibras
colgenas del tejido conectivo denso desordenado. Las zonas de intensa tincin celeste-
turqueza corresponden al cartlago hialino; los condrocitos son muy pequeos y
dispuestos principalmente en hileras.
Con 40X observe el detalle de los componentes que constituyen al fibrocartlago.

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Actividad: Realice un dibujo esquemtico, con 40X, en el cual queden representados
todos los componentes del fibrocartlago y puedan compararse las caractersticas que
observa en las preparaciones 3 y 4.
Actividad: Investigue qu componentes de la matriz cartilagnea se tien de color
celeste- turquesa.

TRABAJO PRCTICO N 6

TEJIDO MUSCULAR
Msculo liso, estriado esqueltico y estriado cardaco
Objetivos
a) Analizar como estn constituidos los tres tipos de msculos y relacionar su estructura
con la funcin que cumple.
b) Identificar las caractersticas de cada uno de los tejidos analizados, sus clulas, y
componentes extracelulares.


PREPARACIN N 1

a) Material biolgico: Raz lingual
b) Objetivo: Estudiar msculo estriado esqueltico.
c) Tipo de corte: Transversal
d) Tincin: H y E



Observe este rgano con menor aumento. Recorra la superficie y observe nuevamente el
tejido de revestimiento superficial y el tejido conectivo subyacente. Dirjase a zonas ms
profundas y reconozca distintos tipos de tejidos.
Con mediano aumento enfoque los sectores ms profundos e identifique las fibras
musculares que disponen en distintas direcciones, entre las cuales es posible reconocer
glndulas (clasifquelas) y tejido adiposo, adems de estructuras vasculares y nerviosas.
Enfoque con mayor aumento las fibras musculares estriadas esquelticas. Observe un
sector donde stas aparezcan cortadas a lo largo, con los ncleos ovalados y en hilera
paralelas. Generalmente a simple vista (pero an mejor si desciende el condensador o
cierra el diafragma, de forma de disminuir la luz) identificar la presencia de estriaciones
transversales (porque atraviesan en forma perpendicular el eje mayor de la fibra) que se
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repiten en forma ordenada y regular. Tambin es posible identificar estriaciones
longitudinales, menos evidentes por lo general, que se observan paralela el eje mayor de
las fibras ( a que corresponde esta estriacin?)
Ahora enfoque un sector donde las fibras aparezcan cortadas transversalmente.
Identifique los perfiles celulares redondeados que se amoldan unos a otros. Reconozca
los ncleos celulares localizados en la periferia. El citoplasma celular eosinfilo en el que
se observan un puntillado correspondiente a las miofibrillas cortadas transversalmente.
(Campos de Conheim)
Actividad: Realice un dibujo esquemtico de las fibras musculares estriadas esquelticas
en corte longitudinal y transversal con aumento 40X. Rotule todo lo dibujado
PREPARACIN N 2
a) Material biolgico: Estmago
b) Objetivo: Estudiar el msculo liso que forma parte de la pared del
estmago
c) Tipo de corte: Transversal
d) Tincin: H y E

Observe a simple vista la preparacin identificando un fragmento ms o menos
rectangular que presenta una de las dos superficies de mayor longitud, de aspecto
ondulado. Esta superficie ondulada corresponde a la zona de la mucosa. Cuando
coloque la preparacin en el microscopio deber asegurarse de que esta superficie
quede mirando hacia usted, de forma que al observar esta aparezca hacia arriba.
Con aumento topogrfico recorra toda la pared del rgano prestando atencin a los
distintos sectores con distintas tonalidades con hematoxilina y eosina.
Desde la superficie superior (que corresponde a la superficie que linda con el lumen del
estmago) hacia el sector inferior se reconoce:
Capa mucosa, que ocupa gran parte del espesor de la pared y cuyo lmite inferior lo
comprende una capa delgada y eosinfila que se llama muscular de la mucosa. Por
debajo de sta se extiende otra capa de tonalidad ms plida y gran cantidad de vasos
sanguneos y, que por estar debajo de la mucosa, se denomina capa submucosa. Por
debajo de esta se encuentra la capa muscular o muscular propia (o externa). La
ltima capa hacia abajo, o contraria a la mucosa (recubriendo la superficie externa del
rgano) es la capa serosa, extremadamente delgada.
Luego de ubicar la capa muscular del rgano, enfoque con mayor aumento y observe
las fibras musculares, cortadas en sentido longitudinal (en el sector ms interno de esta
capa o ms hacia el lumen del rgano, o hacia la capa mucosa) y en sentido
transversal (en el sector ms externo de esta capa y de menor espesor). Determine la
forma de las clulas musculares lisas, cantidad de ncleos celulares, forma y
localizacin de los mismos.
Analice a qu se debe el hecho de que no observa ncleo en todos los perfiles
celulares, en el corte transversal.
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Entre las dos capas de msculo liso (disposicin longitudinal y transversal) podr
reconocer tejido nervioso formando parte del plexo nervioso mientrico o de Auerbach.
Ahora est en condiciones de buscar este tipo de msculo liso en otras regiones de la
pared gstrica que no sea en la capa muscular propia del rgano dnde ms
encuentra este tipo de fibras musculares?
Actividad: Realice un esquema de la capa muscular propia, en disposicin longitudinal
y transversal de las fibras a 40X (ambos en un mismo crculo dividido a la mitad).
Rotule
Consigne las caractersticas principales que le permiten identificar a este tipo de
msculo como liso.


PREPARACIN N 3

a) Material biolgico: Corazn
b) Objetivo: Estudiar msculo estriado cardaco.
c) Tipo de corte: Transversal
d) Tincin: H y E

Analice la preparacin a simple vista y reconozca un fragmento de tejido de aspecto
macizo. Corresponde a un trozo de la pared del corazn.
Observe con menor aumento, la zona perifrica del corazn, de coloracin plida
constituido por tejido conectivo laxo, tejido adiposo blanco con numerosos vasos
sanguneos.
Dirjase a la profundidad del mismo y observe la presencia de msculo estriado cardaco,
de coloracin eosinfila. Las fibras musculares cardacas se disponen en grupos ms
irregulares que en el msculo estriado esqueltico y generalmente rodeadas por
abundante tejido adiposo. Las fibras musculares en corte longitudinal presentan dimetro
irregular con ramificaciones y anastomosis.
Con aumento mediano y mayor, identifique una zona donde las fibras estn cortadas a lo
largo de su eje mayor y reconozca las estriaciones longitudinales y transversales de las
fibras. Ubique los ncleos celulares. Busque una zona donde las fibras se observen
cortadas lo ms transversalmente posible y examine la localizacin de los ncleos.
Tambin observe los cortes oblicuos de las fibras que aparecen en gran cantidad.
(El msculo cardaco se caracteriza por presentar disco intercalares o trazos
escaleriformes que son zonas de unin especializadas entre las fibras musculares.
Dichas uniones son escasamente visibles mediante las tcnicas habituales (H y E), para
poder distinguirlas adecuadamente se necesitan tinciones especiales). Sin embargo en
nuestras preparaciones puede llegar a distinguirlas bajando el condensador o cerrando el
diafragma.
Actividad: Realice un dibujo esquemtico de un rea de msculo cardaco donde
observe corte longitudinal y transversal de la fibras a 40X. Destaque las caractersticas
que permita reconocerlo como tal y adems diferenciarlo de los otros tipos de msculo.
Rotule.
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TRABAJO PRCTICO N 7
TEJIDO NERVIOSO
Objetivos
a) Analizar como est constituido el tejido nervioso en el sistema nervioso central (SNC) y
perifrico (SNP) estableciendo las diferencias ms importantes entre ellos.
b) Identificar neuronas (constituyen la unidad funcional del tejido nervioso) y clulas
gliales y analizando su relacin con las neuronas

PREPARACIN N 1

a) Material biolgico: Cerebelo
b) Objetivo: Estudiar la organizacin celular de un sector del sistema
nervioso central, analizando las caractersticas y
composicin celular del tejido nervioso
c) Tipo de corte: Sagital
d) Tincin: Cajal

Antes de la observacin microscpica, al examinar la muestra a simple vista,
comprobamos que se trata de un rgano macizo.
Al recorrer la preparacin con aumento topogrfico se observa que las superficies
laterales de la muestra estn cortadas con bistur. Debemos colocar la porcin que posee
un reborde delgado de color caf oscuro, casi negro, hacia nosotros, para que al mirarlo al
microscopio se observe hacia arriba. Esta corresponde a un recubrimiento llamado
meninges (en particular la capa llamada piamadre).
Al recorrer el sector por debajo de esta superficie, identificar la presencia de tres capas
que van siguiendo en forma paralela una disposicin plegada. Dos de ellas son bien
evidentes. La capa superficial o molecular (de color amarillo) y otra capa profunda o
granulosa (de color caf debido a la presencia de numerosas clulas redondeadas y caf
oscuras). Entre medio de ambas capas y dispuesta en forma paralela se encuentra una
hilera discontinua de clulas grandes y de color caf, denominada capa de clulas de
Purkinje, debido a las clulas ( neuronas de Purkinje)que la constituyen tienen ese
nombre.






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Estas tres capas mencionadas, paralelas y plegadas que recorren toda la superficie del
cerebelo corresponden a la sustancia gris (que no se ve gris en nuestra preparacin).
Profundamente ubicada a las anteriores se localiza la llamada sustancia blanca (que no
es de color blanco en nuestra preparacin) y que se mete en el centro de los profundos
pliegues descritos. Esta ltima pose coloracin caf clara y menos nmero de clulas,
adoptando un aspecto ms fibrilar.

Identifique cortes de vasos sanguneos que con esta tcnica aparecen como imgenes
de ramas de rboles secos.

Coloque mayor aumento y observe con atencin cada una de los sectores y capas
analizados.
Es posible observar toda la extensin de cada clula con esta tcnica histolgica?

Actividad: Realice un esquema a 10 o 40X de la corteza cerebelosa (incluya las tres
capas de la corteza o sustancia gris)

PREPARACIN N 2
a) Material biolgico: Nervio
b) Objetivo: Estudiar las caractersticas histolgicas de un nervio como
ejemplo de una estructura que pertenece al sistema nervioso
perifrico (SNP).
c) Tipo de corte: Transversal y longitudinal
d) Tincin: H y E

Capa molecular
( ill )
Capa granulosa
Capa de clulas de Purkinje
Sustancia blanca
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La observacin de la lmina a simple vista permite reconocer la presencia de varios
fragmentos de pequea magnitud. Algunos redondeados y generalmente uno solo
alargado.

El fragmento alargado constituye un corte de tipo longitudinal del nervio, es decir
constituye un corte que es paralelo al eje mayor de las fibras nerviosas.
Observe con aumento mediano (10X) y reconozca fibras nerviosas dispuestas a lo largo,
de color eosinfilo y aspecto espumoso. Entremedio de las fibras se reconocen ncleos
celulares basfilos y alargados que corresponden a ncleos de clulas de Schwan.

(Tambin se observan espacios blancos, entremedio del tejido que corresponden a
artefactos, roturas del material biolgico).

Con mayor aumento, intente identificar lneas eosinfilas muy delgadas (axn), rodeado
de un material de aspecto espumoso (vaina de mielina). Tambin reconocer la presencia
de vasos sanguneos de pequeo calibre (capilares).

Ahora dirjase a los fragmentos redondeados u ovalados. Los mismos corresponden a
cortes de nervio, transversales y oblicuos.
En los cortes oblicuos observar algo similar a lo descrito anteriormente. En aquellos
sectores que aparecen las fibras nerviosas cortadas en sentido bien transversal es posible
identificar varias secciones pequeitas y redondas que poseen un punto central eosinfilo
fuerte (que corresponde al axn cortado transversalmente, tenga en cuenta que en
algunos casos puede haberse eliminado con la preparacin de la muestra). El axn se
encuentra rodeado de una estructura de aspecto espumoso, blanquecino con pequeas
lneas.
Identifique ncleos de clulas de Schwan tambin en este corte.


Corte transversal de nervio Corte transversal de nervio
(4 X) (40X)
















Ahora dirjase hacia la periferia del nervio en ambos tipos de corte.
Identifique la presencia de tejido conectivo laxo y un poco ms denso en algunos
sectores. Las zonas compuestas por tejido conectivo denso irregular, corresponden al
llamados epineuro. Rodeando a cada fascculo nervioso se reconocen una o dos capas
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concntricas de tejido conectivo que se encuentra formando una barrera especializada,
que se denomina perineuro.
Rodeando a cada fibra nerviosa (axn y su vaina de mielina) se reconoce un tejido
conectivo laxo, escaso constituido principalmnente por fibras reticulares y una matriz de
proteoglicanos, conocido como endoneuro.

Reconozca adems vasos sanguneos (vasa nervorum) de mayor calibre a nivel del
epineuro y ms pequeos en el peri y endoneuro.

Actividad: Realice un dibujo esquemtico a 10 o 40 x que represente un corte transversal
y otro longitudinal con los principales elementos estudiados en clase y que permiten
reconocer las estructuras analizadas.