Microbiologa General

2006 - 2007
Tema 5: Transmisin de la informacin gentica
Transmisin de la informacin
gentica
Reparto del material gentico en procariontes y eucariontes.
Transferencia horizontal del material gentico en procariontes
Transformacin
Conjugacin
Transduccin.
Transmisin horizontal de informacin gentica en eucariontes.
Aplicaciones biotecnolgicas de la gentica microbiana
Transcripcin y traduccin en procariontes y en eucariontes.
Regulacin de la expresin gnica.
El modelo del opern: operones inducibles y represibles
Secuenciacin de genomas.
Dogma Central de la Biologa Molecular
Informacin
Replicacin
del ADN
Transcripcin:
sntesis de de ARN
Informacin
ncleo
citoplasma
Informacin
Membrana nuclear
Traduccin:
sntesis de protenas
ribosoma
protena
Protena
Dogma Central de la Biologa Molecular
Entre clulas de la
misma generacin
Entre clulas de
diferente generacin
Dentro de una clula
Clula
parental
Replicacin
Divisin celular
Protena
Metabolismo y
crecimiento celular
Traduccin
Transcripcin
Recombinacin
Clula recombinante
Clulas hijas
Transcripcin y
traduccin en
bacterias
Protena
Traduccin
Direccin de la
transcripcin
RNA polimerasa
Polirribosoma
Ribosoma
Direccin de la traduccin
Transformacin
Transformacin de E. coli con un gen de resistencia a ampicilina (AMP) y un
marcador de fluorescencia
Transformacin
Str. pneumoniae
virulento, muerto
Str. pneumoniae
avirulento, vivo
Str. pneumoniae
encapsulado (virulento)
y vivo
Ratn vivo
Ratn muerto
Ratn vivo
Cpsula
Factor de
virulencia
Transformacin bacteriana
Bacteria
competente
Competente
natural
Competente
inducida
Streptococcus
pneumonia
Escherichia
coli
DNA externo
Otra bacteria
Otra organismo
Bacteria
transformada
recombinacin
Transformacin
permanente
Restriccin = destruccin
Eliminacin del
ADN externo
Transformacin bacteriana
Bacteria
competente
Bacteria
transformada
Multiplicacin
del plsmido
con la bacteria
Plsmido Fragmento de ADN con un origen de replicacin
autnomo
Codifica genes responsables de funciones
prescindibles
Proporciona algunas funciones nuevas a la clula
en condiciones especiales
La transformacin es un sistema de baja eficiencia
Una buena eficiencia es 10
9
ufc/g de DNA
Tamao del plsmido: aprox. 3 -10 kpb
Peso molecular del plsmido:
660 x 3 x 10
3
= 1980 x 10
3
2 x 10
6
por tanto, entre 2 y 6 x 10
6
.
1 g de DNA plasmdico equivale a entre 2 y 5 x 10
-13
moles de plsmido y a ms de 10
11
molculas
Por tanto, slo 1 de cada 100 molculas del plsmido
transforma realmente una clula
Conjugacin bacteriana
Clulas de E. coli en
proceso de conjugacin
Pelo F
F
E. coli portadora
del plsmido F
E. coli F
+
E. coli sin
plsmido F
E. coli F
-
F
F
F
F
E. coli F
+
E. coli F
+
F
F
E. coli F
+
E. coli F
+
En la conjugacin se transmite el plsmido F de la cepa donadora (F
+
) a la receptora (F
-
) a travs del pelo F.
En este proceso, la clula receptora (F
-
) se convierte en una nueva donadora (F
+
)
Conjugacin bacteriana: clulas Hfr
Clulas de E. coli en
proceso de conjugacin
Pelo F
F
E. coli portadora
del plsmido F
E. coli F
+
F E. coli Hfr
E. coli portadora del plsmido
F integrado en el cronmosoma
E. coli F
-
F
F
F
F
En las clulas Hfr, el plsmido F est integrado en el cromosoma de la bacteria donadora.
Durante la conjugacin, la bacteria donadora pasa a la receptora su cromosoma
En la clula receptora se puede producir recombinacin entre el ADN entrante y el propio de la bacteria
La clula receptora se convierte en Hfr si se consigue transmitir todo el cromosoma de la donadora
Virus bacterianos: ciclos
lticos y lisognicos
Receptor especfico
Bacterifago
Infeccin
Ciclo lisognico. El virus se integra en el cromosoma
bacteriano y se multiplica con la bacteria como un gen ms
Ciclo ltico. El virus se multiplica en la bacteria y termina causando
su lisis, lo que produce la liberacin de ms viriones
En condiciones de estrs, los virus
lisognicos pueden pasar a ciclo ltico
Transduccin generalizada
Infeccin con el fago
El ADN bacteriano se fragmenta
y el virus se multiplica
Se sintetizan las protenas de la
cpsula del virus bacteriofago
En algunas cpsulas vricas se
empaqueta por error ADN
bacteriano
Algunos viriones liberados en
la lisis llevan ADN bacteriano
El virin portador de ADN bacteriano lo introduce en otra
bacteria en cuyo cromosoma puede integrarse por recombinacin
Transduccin especializada
Infeccin con el fago
El virus se integra (ciclo lisognico) en una
posicin dada del cromosoma bacteriano
Al activarse el ciclo ltico, en
algunos casos, el virus se escinde
llevando un fragmento del ADN
bacteriano
Los viriones liberados en la
lisis llevan ADN bacteriano
Al producirse una nueva infeccin lisognica, el virus introduce
un fragmento del ADN de la bacteria infectada en primer lugar
Sistemas de
modificacin-restriccin
GAATTC
ATTAAG
Las enzimas de modificacin
(metilacin) reconocen secuencias
especficas y las metilan
- TCGTGAATTCATGT-
- AGCACTTAAGTACA-
- TCGTG AATTCATGT-
- AGCACTTAA GTACA-
- TCGTGAATTCATGT-
- AGCACTTAAGTACA-
Las enzimas de restriccin
reconocen secuencias especficas
no metiladas y las cortan
EcoRI
Metilasa
EcoRI es inactiva sobre el
AND modificado
modificacin No restriccin
No modificacin
Restriccin
Aplicaciones biotecnolgicas
de la gentica microbiana
Aplicaciones biotecnolgicas
de la gentica microbiana
lacZ lacY lacA
P P
lac
O
represor
R
RR
P
RNApol
PP
t
DO
550
-gal
Opern Inducible
Opern de la lactosa
Los genes de catabolismo de lactosa no se expresan
cuando este azcar no est disponible en el medio
en el que se encuentran las clulas.
lacZ LacY lacA
P P
lac
O
represor
R
P
RNApol
P
R
lactosa
P
-gal
permeasa
transacetilasa
t
DO
550
-gal
INDUCCIN
Opern Inducible
Opern de la lactosa
Los genes de catabolismo de lactosa se expresan
cuando este azcar est disponible en el medio en
el que se encuentran las clulas.
E
P P
O
represor
R
t
DO
550
trpB
D C B A
P
RNApol
P
P
Expresin gnica
Sntesis endgena de trp
Opern Represible
Opern del triptfano
Los genes de anabolismo del triptfano se expresan
cuando no hay ninguna fuente externa de este
aminocido que puedan utilizar las clulas
E
P P
O
represor
R
t
DO
550
trpB
D C B A
triptfano
R
P
RNApol
R
P
Represin
Bloqueo de la sntesis
endgena de trp
Opern Represible
Opern del triptfano
Los genes de anabolismo del triptfano no se
expresan cuando hay una fuente externa de este
aminocido que puedan utilizar las clulas
Secuenciacin de genomas