I

M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



1
INDICE PAG.
1 ANTECENDENTES 3
1.1 Origen y composicin del petrleo 3
1.2 Metodologas para la remediacin de suelos contaminados 4
1.2.1 Tratamientos in situ 4
1.2.2 Tratamientos ex situ 4
1.3 Diversidad microbiana en ambientes contaminados 5
1.4 Principales Bacterias Degradadoras de Petrleo 6
2 INTRODUCCION 7
2.1 Origen 7
2.2 Aplicaciones de la biorremediacin 9
2.3 Investigacin y Desarrollo en biorremediacin 12
3 LA BIORREMEDIACIN 13
4 LA BIODEGRADACIN MICROBIANA DE HIDROCARBUROS 15
5 TIPOS DE BIORREMEDIACIN 16
5.1 Segn el organismo empleado 16
5.1.1 Degradacin enzimtica 16
5.1.2 Remediacin microbiana 16
5.1.3 Fitorremediacin 16
5.2 Segn la tcnica utilizada 17
5.2.1 Bioaumentacin 17
5.2.2 Bioestimulacin 17
5.2.3 Inoculacin: 18
5.2.4 Land farming (cultivo de la tierra) 18
5.2.5 Biopila 18
5.2.6 Biofiltro 19
5.3 Segn el lugar de realizacin 19
6 FACTORES QUE CONDICIONAN LA BIODEGRADACIN DE
HIDROCARBUROS
20
7 FASES EN LA APLICACIN DE LA TECNOLOGA DE LA
BIORREMEDIACIN
22
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



2
8 VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LA BIORREMEDIACIN 23
9 QUE DICE EL RASH? 24
10 TCNICA MS USADA PARA LA BIORREMEDIACION EN LA
INDUSTRIA PETROLERA
24
10.1 Efectiva y econmica 25
10.2 Factores 26
10.3 Proceso 27
10.4 Importancia del pool microbiano 30
11 CONCLUSIN 33
12 BIBLIOGRAFIA 34

I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



3
BIORREMEDIACION
1 ANTECENDENTES
1.1 Origen y composicin del petrleo
El petrleo es el resultado de la degradacin anaerbica de materia orgnica, durante largos
perodos de tiempo y bajo condiciones de alta temperatura y presin, que la convierte en
gas natural, crudo y derivados del petrleo.
El petrleo crudo es una mezcla extremadamente compleja y variable de compuestos
orgnicos, donde la mayora de los ellos son hidrocarburos, que varan en peso molecular
desde el gas metano hasta los altos pesos moleculares de alquitranes y bitmenes. Estos
hidrocarburos pueden presentarse en un amplio rango de estructuras moleculares: cadenas
lineales y ramificadas, anillos sencillos, condensados o aromticos. Los dos grupos
principales de hidrocarburos aromticos son los mono- cclicos, el benceno, tolueno y
xileno (BTEX) y los hidrocarburos poli cclicos (PAHs) tales como el naftaleno, antraceno
y fenantreno.

Figura 1. Atentado contra el oleoducto Cao-Limn Coveas
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



4
1.2 Metodologas para la remediacin de suelos contaminados
Los mtodos existentes para tratar los suelos contaminados pueden ser de naturaleza
fisicoqumica, trmica o biolgica y tanto unos como otros pueden aplicarse en el lugar de
la contaminacin o como tratamiento ex situ. Al proceso de descontaminacin del suelo
tambin se le llama remediacin (Volke, 2002). Los mtodos fisicoqumicos utilizan las
propiedades fsicas y/o qumicas de los contaminantes o del medio contaminado para
degradar, separar o contener los contaminantes. Los mtodos trmicos emplean el calor
para descomponer o fundir los contaminantes en un suelo. En cambio, los mtodos
biolgicos, tambin llamados de biorremediacin, utilizan organismos vivos para la
remocin o degradacin de los compuestos txicos (Volke, 2002). A continuacin, se
incluye una clasificacin de las diferentes tcnicas empleadas, agrupadas segn su
naturaleza y la forma de aplicacin (Ortiz et al., 2006).
1.2.1 Tratamientos in situ
Fisicoqumicos: a) Extraccin con vapor, b) Lavado, c) Solidificacin y estabilizacin, d)
Separacin electrocintica.
Biolgicos: a) Biorremediacin, b) Fitorremediacin
Los tratamientos in situ tienen la ventaja de permitir tratar el suelo sin necesidad de excavar
ni transportar, adems de una potencial disminucin en costos. Sin embargo presenta
algunas desventajas como mayores tiempos de tratamiento, pueden ser inseguros en cuanto
a uniformidad (heterogeneidad en las caractersticas del suelo) y existe dificultad para
verificar la eficacia del proceso (Volke, 2002).
1.2.2 Tratamientos ex situ
Trmicos: a) Desorcin trmica, b) Incineracin
Fisicoqumicos: a) Extraccin con disolventes, b) Lavado, c) Oxido-reduccin, d)
Deshalogenacin qumica, e) Solidificacin y estabilizacin
Biolgicos: a) Biolabranza (landfarming), b) Biopilas, c) Biodegradacin en reactor
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



5
Los tratamientos ex situ presentan las siguientes ventajas como: menor tiempo de
tratamiento, son ms seguros en cuanto a uniformidad (es posible homogenizar y muestrear
peridicamente). La desventaja es que existe la necesidad de excavar el suelo, aumento en
costos e ingeniera para equipos, debe ser considerada la manipulacin del material y la
posible exposicin al contaminante (Volke, 2002).

1.3 Diversidad microbiana en ambientes contaminados
Los suelos contaminados contienen gran cantidad de microorganismos que pueden incluir
un nmero de bacterias y hongos capaces de utilizar hidrocarburos, que representan un uno
por ciento (1%) de la poblacin total de aproximadamente 104 a 106 clulas por gramo de
suelo. Tambin, se han encontrado cianobacterias y algas capaces de degradar
hidrocarburos. Los suelos contaminados con hidrocarburos contienen ms microorganismos
que los suelos no contaminados, pero su diversidad microbiana es ms reducida.

Figura 2 Microorganismo degradador de petrleo, fotografa del Centro de Investigaciones
Microbiolgicas, CIMIC
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



6
1.4 Principales Bacterias Degradadoras de Petrleo

Existe una gran variedad de microorganismos identificados en la degradacin de
compuestos derivados del petrleo, siendo hasta el presente los gneros ms utilizados:
Pseudomonas, Achromobacter, Arthrobacter, Brevibacterium, Corynebacterium,
Micrococcus, Nocardia, Bacillus, Vibrio, Acinetobacter, Flavobacterium y Rhodotorula.
Las Pseudomonas son las bacterias ms eficientes en la degradacin de compuestos txicos.
La capacidad de estas bacterias para degradar estos compuestos depende del tiempo de
contacto con el compuesto, las condiciones ambientales en las que se desarrollen y su
versatilidad fisiolgica.

Adems, aunque no han sido caracterizados en su totalidad, muchos de estos
microorganismos poseen actividades de peroxidasas y oxigenasas, que permiten la
oxidacin ms o menos especfica de algunas fracciones del petrleo. Esta oxidacin
cambia las propiedades de los compuestos, hacindolos susceptibles de ataques secundarios
y facilitando su conversin a bixido de carbono y agua. En algunas ocasiones no es
necesario llegar a la mineralizacin, sino que basta una oxidacin para disminuir
notablemente su toxicidad o aumentar su solubilidad en agua, incrementando su
biodisponibilidad.

I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



7
2 INTRODUCCION
2.1 Origen
El trmino biorremediacin fue acuado a principios de la dcada de los '80. Los cientficos
observaron que era posible aplicar estrategias de remediacin que fuesen biolgicas,
basadas en la capacidad de los microorganismos de realizar procesos degradativos.
Las primeras observaciones de biorremediacin fueron con el petrleo, despus de algunos
organoclorados y organofosforados; se advirti que los microorganismos no slo eran
patgenos, sino que adems eran capaces de absorber compuestos orgnicos, algunos
naturales, otros sintticos, y degradarlos, lo que constituye el objetivo de la
biorremediacin.

Diversidad microbiana presente en una Muestra contaminada Con crudo, fotografa del
Centro de Investigaciones Microbiolgicas, CIMIC
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



8
Uno de los muchos reporteros enviados a Alaska meditaba sobre el dao provocado por
el vertido del Exxon Valdez. Pensaba que el petrleo, sustancia natural, no provocara
un dao ambiental irreparable y tal como se ha ido observando durante dcadas, el
crudo despus de un largo tiempo es diluido y asimilado por el medio ambiente.
De esta intrnseca capacidad de la naturaleza para superar algunos desequilibrios en el
ecosistema, surge la biorremediacin, como una tecnologa que usa un elemento
biolgico, en la mayora de los casos microorganismos, para eliminar contaminantes de
un lugar, sea este suelo, sedimento, fango o mar. Esta tecnologa se ha transformado en
la colaboradora directa de la naturaleza, que no siempre es capaz de superar por s sola
grandes desequilibrios. La biorremediacin le da una ayuda al medio ambiente en la
mejora de los ecosistemas daados, acelerando dichos procesos naturales. Lo que hacen
los microorganismos es degradar los desechos en productos menos txicos, adems de
concentrar e inmovilizar sustancias txicas, metales pesados; minimizar desechos
industriales y rehabilitar reas afectadas con diversos contaminantes.
La biorremediacin surge como una rama de la biotecnologa que busca resolver los
problemas de Contaminacin mediante el diseo de microorganismos capaces de
degradar compuestos que provocan desequilibrios en el medio ambiente.
Es similar a la biotecnologa, en general sus tcnicas son especficas para casos
particulares, porque dependen directamente de las condiciones del ecosistema a
recuperar. A veces, biorremediar un ambiente contaminado puede requerir la
elaboracin de un microorganismo genticamente modificado que sea eficiente slo
para ese caso. Un evento ms sencillo de biorremediacin puede ser el del petrleo. Los
derrames de crudo provocan un desequilibrio al aumentar la cantidad de carbono, lo que
descompensa los niveles de nitrgeno y fosfato, en esas condiciones metablicamente
no se puede consumir el carbono. La biorremediacin de petrleo consiste en verter los
mismos nutrientes que estn descompensados, fosfato, nitrgeno y dejar que los
microorganismos que ya estn presentes hagan su trabajo.

I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



9
2.2 Aplicaciones de la biorremediacin
En trminos generales, las empresas que presentan un mayor inters en las tcnicas de
biorremediacin son aquellas que pertenecen a la industria petrolera y petroqumica,
asociadas a la limpieza de residuos generados en la manipulacin de hidrocarburos.
Todos los aos cerca de 1.300.000 toneladas de hidrocarburos entran al ambiente, la
mayor parte a travs de filtraciones naturales de petrleo. El hecho que las zonas
costeras no estn continuamente cubiertas con alquitrn es debido a la actividad de
microorganismos que pueden degradar el petrleo que se libera. La liberacin de
hidrocarburos a partir de filtraciones de petrleo es lenta, permitiendo que las
comunidades locales de microorganismos acten a medida que los productos
contaminantes entran en su ambiente. Por ello, las bacterias constituyen un mecanismo
natural para la limpieza de los hidrocarburos. Sin embargo, durante las filtraciones de
petrleo ocasionadas por el hombre, la cantidad de hidrocarburos volcada al ambiente
supera la capacidad de la comunidad natural microbiana, permitiendo que los aceites se
dispersen y conduzcan a problemas ecolgicos graves (Nature Reviews Microbiology,
2010).
Cuando los hidrocarburos llegan a las costas dos enfoques suelen emplearse: la
introduccin de bacterias que degraden el contaminante (tcnica conocida como
bioaumentacin) y la bioestimulacin con ciertos nutrientes para incrementar el
crecimiento de la flora microbiana natural. La inclusin de nutrientes para estimular el
crecimiento bacteriano e incrementar la tasa de remocin de hidrocarburos fue probada
en Alaska, luego del derrame del Exxon Valdez el 23 de marzo de 1989.
De tal forma, en el caso particular de los derrames de petrleo el empleo de la
biorremediacin reviste importancia. Cuando un derrame de petrleo no fue limpiado de
inmediato, la flora microbiana del suelo se somete a una seleccin natural, en la que los
microorganismos sobrevivientes son aquellos que desarrollaron capacidad degradadora,
utilizndose la flora del sitio contaminado, en lugar de agregar microorganismos de
fuera. En cambio, para limpiar derrames recientes, a veces es necesario recurrir a
preparados microbianos frescos que aumenten la eficiencia (Saval, 1999).
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



10
Tanto in situ como ex situ se explotan comercialmente mtodos para la limpieza del
suelo y el agua subterrnea asociada. As por ejemplo, la biorremediacin in situ del
suelo bajo las estaciones de servicio se ha convertido ya una prctica comn.
La creciente contaminacin industrial y agrcola ha llevado a una mayor necesidad de
procesos que eliminen contaminantes especficos tales como compuestos de nitrgeno y
fsforo, metales pesados y compuestos clorados.
Los nuevos mtodos comprenden procesos aerbicos, anaerbicos y fsico-qumicos en
filtros de lecho fijo y birreactores, en los cuales se retienen en suspensin materiales y
microbios. Los costos del tratamiento de las aguas residuales pueden reducirse mediante
la conversin de los residuos en productos tiles (EFB, 1999).
Los residuos slidos domsticos son un problema importante en nuestra sociedad de
consumo. Su eliminacin es cara y hace necesaria una vigilancia constante de la
contaminacin atmosfrica y las aguas subterrneas. Sin embargo, la mayor parte son
compuestos orgnicos rpidamente biodegradables. A este respecto, como de bio
residuos separados, pueden convertirse en un valioso recurso mediante la generacin de
compost o la digestin anaerbica. En los ltimos aos, ambos procesos han tenido
notables desarrollos en trminos de diseo del proceso y su control (EFB, 1999).
La decisin de avanzar en la limpieza de los ambientes contaminados depende de la
voluntad poltica y los costos asociados. La importancia de la legislacin ambiental para
los pases industrializados fue puesta de manifiesto por la Organizacin para la
Cooperacin y el Desarrollo Econmico (OCDE) que ha aconsejado a sus pases
miembros a implementar estndares ambientales y desarrollar legislacin en la materia,
como un puntapi inicial para la promocin de la tecnologa para la resolucin de
problemas ambientales con el objetivo de crear una demanda para nuevos productos y
servicios, en definitiva contribuir al desarrollo del mercado. Esta estrategia parece haber
funcionado en pases como Dinamarca, Alemania y Pases Bajos. En estos pases donde
existe una vasta experiencia en legislacin ambiental se ha desarrollado en gran
magnitud la tecnologa focalizada al ambiente. Como las compaas que brindan dichos
productos y servicios son competitivas a nivel internacional, el incremento de la
demanda por servicios y bienes ambientales ha derivado en una industria orientada a la
exportacin.
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



11
En los pases en desarrollo las metas ambientales son muchas veces consideradas como
secundarias en relacin con otros objetivos tales como el desarrollo econmico. De
todos modos, los pases en desarrollo suelen encontrarse ante la necesidad de la
aplicacin de leyes ambientales ms severas ya que en muchos casos las leyes
ambientales laxas son un factor negativo para la instalacin de subsidiarias de empresas
transnacionales. Para cumplir con los estndares de los pases industrializados, los
pases en vas de desarrollo con frecuencia dependen de tecnologas desarrolladas y
controladas por los pases desarrollados.
En lo que respecta a los EE.UU. la Agencia de Proteccin Ambiental1 es la dependencia
ms importante en la aplicacin de la mayor parte de la legislacin en materia de
proteccin ambiental, incluidas las leyes que controlan la contaminacin atmosfrica y
del agua, el manejo de residuos slidos y peligrosos, el saneamiento de sitios
contaminados y la regulacin de plaguicidas y sustancias txicas. La EPA elabora una
Lista Nacional de Prioridades2 en la que se incluyen las medidas de limpieza a ser
financiadas a travs del Superfund3. La mayor parte de los sitios incluidos en fueron
incorporados sobre la base de la evaluacin del Sistema de Clasificacin de Riesgos que
consiste en una lista amplia de metodologas para evaluar y comparar el grado relativo
de riesgo que algunas instalaciones y sitios especficos suponen para la salud humana y
el ambiente.
Entre las ventajas de la biorremediacin, con relacin a otras tcnicas, puede
mencionarse que suele tener costos ms bajos, provoca una menor intrusin en el sitio
contaminado y en consecuencia un dao ecolgico menos significativo en el proceso de
destruccin de los productos contaminantes. Segn la Agencia de Proteccin del
Ambiente de los EEUU (2004) ms de 102.000 sitios en ese pas fueron identificados
como afectados por distintos agentes contaminantes, de los cuales 37.000 tendran la
necesidad de ser remediados. El costo estimado de llevar a cabo dicha operacin es de
1.100 billones de dlares. En la Unin Europea (UE) aproximadamente 495.000 sitios
se clasificaron como contaminados, con costos de remediacin de entre 280 y 1.000
billones de dlares. Los costos por metro cbico para la biorremediacin de suelos
varan entre 52 y 131 dlares, muy por debajo de los 327 a 1.046 dlares en el caso de
la incineracin o 196 a 327 dlares por relleno del suelo. Aunque los beneficios
econmicos son evidentes, la inversin en investigacin para la biorremediacin es
menor en comparacin con las otras tcnicas.
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



12
2.3 Investigacin y Desarrollo en biorremediacin
Esta tecnologa surgi del conocimiento emprico de los operadores de las refineras del
petrleo pues la biorremediacin fue usada durante muchos aos por la industria
petrolera de los EE.UU.
Posteriormente fue entendida de una manera cientfica cuando investigadores y tcnicos
de las industrias llegaron a determinar que algunos microorganismos, sobre todo
algunas bacterias, podan utilizar los hidrocarburos del petrleo como alimento y fuente
de energa. Es as como algunos estudios demostraron que estos microorganismos eran
los principales responsables de la descomposicin de aceites en el suelo de los campos
de exploracin, y por consiguiente, se busc determinar las condiciones ptimas para
reproducir estas condiciones en el campo, y as acelerar el proceso. La mayora de estos
descubrimientos sobre el metabolismo de la biodegradacin de hidrocarburos fueron
realizados en laboratorios acadmicos. Luego, gracias al esfuerzo de profesionales
trabajando en la industria petrolera misma, as como en empresas dedicadas a la
restauracin ambiental, se implementaron estos descubrimientos en el campo.

La biorremediacin se mostr efectiva en algunos de los derrames de petrleo ocurridos
como en Exxon Valdez en 1989 y en el Golfo Prsico durante la guerra en 1991.
Tambin se est estudiando el desarrollo de mejores estrategias de biorremediacin in
situ. Los problemas a considerar son la diversidad de condiciones agroecolgicas que
afectan el desarrollo y las dificultades para el control de los microorganismos (densidad
del suelo, condiciones climticas, etc.).
Muchas de las investigaciones se estn focalizando en examinar sistemas catalticos de
Microorganismos no estudiados con anterioridad; estudiar los senderos de respuesta de
los microorganismos a condiciones anaerbicas en la degradacin de contaminantes;
desarrolla mtodos para el control y monitoreo de poblaciones microbianas en reactores
y a campo; desarrollar, testear y evaluar innovaciones biotecnolgicas como biosensores
para monitorear la biorremediacin in situ, y explorar la inoculacin para la
biorremediacin en sistemas contenidos y no contenidos.
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



13
Se podra concluir que las necesidades de investigacin se basan en conocer cmo la
Bioremediacin acta in situ y sus efectos a largo plazo, as como si la misma es
conveniente en trminos de costos y efectiva en cuanto a sus resultados para cada caso
en particular.
La biotecnologa moderna puede ayudar a resolver problemas ambientales a travs de la
biorremediacin, mediante el empleo de organismos genticamente modificados
(especialmente plantas y bacterias), pero ello requiere de la consideracin de normas
que regulen su introduccin en el ambiente. Cabe aadir que el mercado para
biorremediacin, empleando organismos genticamente modificados, se ha erosionado a
causa de la controversia acerca de esta tecnologa. Con los microorganismos
modificados genticamente se han realizado un nmero significativo de experimentos
piloto de liberaciones en condiciones confinadas y controladas para la realizacin de
pruebas de biorremediacin. Al respecto, se han desarrollado tecnologas de contencin
gentica y biolgica (coloquialmente conocidas como bacterias suicidas) para impedir
la transferencia de material gentico (Sebito, 2004).
3 LA BIORREMEDIACIN
La biorremediacin, se utiliza para describir una variedad de sistemas que utilizan
organismos vivos (plantas, hongos, bacterias, lombrices de tierra epgeas a nivel
experimental) para degradar, transformar o remover compuestos orgnicos txicos a
productos metablicos inocuos o menos txicos (Volke, 2002). Esta estrategia biolgica
depende de las actividades catablicas de los organismos, y por consiguiente de su
capacidad para utilizar los contaminantes como fuente de alimento y energa (Van
Deuren et al., 1997).
El proceso de biorremediacin incluye reacciones de xido-reduccin, procesos
desorcin e intercambio inico, e incluso reacciones de acomplejamiento y quelacin
que resultan en la inmovilizacin (Eweis et al. 1998).
La biorremediacin puede emplear organismos propios del sitio contaminado
(autctonos) o de otros sitios (exgenos), puede realizarse in situ o ex situ, en
condiciones aerobias (en presencia de oxgeno) o anaerobias (sin oxgeno) (Eweis et al.,
1998).
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



14
Los procesos de biorremediacin se han usado con xito para tratar suelos, lodos y
sedimentos contaminados con hidrocarburos. Tanto la biorremediacin como los
tratamientos fsico-qumicos y trmicos han demostrado eficiencia en la
descontaminacin de suelos, sin embargo los altos costos de estos ltimos los hacen
menos viables, aunque tienen la ventaja de realizarse en periodos cortos, a diferencia de
la biorremediacin que requiere tiempos ms largos. Sin embargo la biorremediacin
presenta muchas ms ventajas ya que son tecnologas benficas y compatibles con el
ambiente, los contaminanantes generalmente son destruidos, se requiere un mnimo o
ningn tratamiento posterior y son relativamente ms econmicos. Por lo que esta
biotecnologa ha demostrado ser una opcin viable y rentable para la remediacin de
suelos contaminados con compuestos a base del petrleo (Mohsen et al., 2009).

Figura 2. Imagen de la lombriz endgea Pontoscolex corethrurus.
Esta tcnica es utilizada para disminuir la contaminacin por los hidrocarburos de
petrleo y sus derivados, metales pesados e insecticidas; adems se usa para el
tratamiento de aguas domsticas e industriales, aguas procesadas y de consumo
humano, aire y gases de desecho. Afortunadamente la biotecnologa ha permitido el
desarrollo de diversas estrategias que pueden ser utilizadas con el fin de restaurar el
suelo y la calidad ambiental, de acuerdo con las necesidades y dimensiones del
problema a solucionar.
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



15

4 LA BIODEGRADACIN MICROBIANA DE HIDROCARBUROS
Cuando hablamos de biodegradacin microbiana de hidrocarburos nos referimos al
hecho de que los microorganismos pueden crecer a expensas de la utilizacin de estos
compuestos qumicos. Aunque pueda sorprendernos que un organismo sea capaz de
alimentarse a expensas de compuestos tan extraos para el ser humano como el
benceno, naftaleno o el pireno, las investigaciones llevadas a cabo por geoqumicos y
microbilogos nos ofrecen una explicacin. Observando los sucesos que han ocurrido a
lo largo de los tiempos geolgicos desde la formacin de la Tierra hasta nuestros das,
vemos que los microorganismos estn en la tierra desde hace ms de tres mil millones y
medio de aos, mientras que los organismos superiores desde hace menos de mil
millones de aos y el hombre desde hace slo 6 millones de aos, un instante a escala
de tiempos geolgicos. En la actualidad ya no se discute que el petrleo y, por lo tanto,
sus componentes mayoritarios, los hidrocarburos, tienen su origen en los compuestos
que forman parte de los organismos, los denominados biognicos. Una sucesin de
reacciones qumicas, ocurridas a altas temperaturas y durante millones de aos, que los
geoqumicos engloban con el trmino de procesos diagenticos y catagenticos, ha
conducido a la conversin paulatina de estas estructuras biognicas en hidrocarburos.
En lugares donde se han encontrado hidrocarburos, se ha podido demostrar la existencia
en etapas geolgicas anteriores de organismos que posean en sus clulas compuestos
biognicos como el pigmento eritroafina o el alcaloide veratramina. Este fenmeno
supone que los microorganismos, capaces de crecer en sus orgenes solamente a
expensas de compuestos biognicos, como los azcares o las protenas, han ido
conviviendo a lo largo de millones de aos con una serie de compuestos orgnicos que
finalmente han dado lugar a los componentes de los crudos de petrleo actuales. A lo
largo de millones de aos, han sido seleccionados enzimas que han aparecido por
mutacin o intercambio gentico en determinados microorganismos capaces de
metabolizar los hidrocarburos. Ahora s podemos entender que los microorganismos
hayan desarrollado las capacidades necesarias para metabolizar los hidrocarburos y por
el contrario presenten mayores dificultades en degradar pesticidas o explosivos,
productos sintetizados por el hombre, y que a escala de los tiempos geolgicos slo
hara un instante que estn en la tierra. Para algunos de estos compuestos, denominados
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



16
xenobiticos, los microorganismos, pese a su rpida adaptacin a nuevas situaciones,
podran no haber sintetizado todava los enzimas necesarios.
5 TIPOS DE BIORREMEDIACIN
5.1 Segn el organismo empleado
5.1.1 Degradacin enzimtica
Este tipo de degradacin consiste en el empleo de enzimas en el sitio contaminado con
el fin de degradar las sustancias nocivas. Estas enzimas se obtienen en cantidades
industriales a partir de bacterias que las producen naturalmente, o por bacterias
modificadas genticamente que son comercializadas por las empresas biotecnolgicas.
La descontaminacin se logra gracias a la capacidad natural de los organismos antes
mencionados de transformar molculas orgnicas en sustancias ms pequeas, que
resultan menos txicas.
5.1.2 Remediacin microbiana
Se refiere al uso de microorganismos directamente en el foco de la contaminacin. Estos
Microorganismos pueden existir en ese sitio o provenir de otros ecosistemas, en cuyo
caso deben ser inoculados en el sitio contaminado. Cuando no es necesaria la
inoculacin de microorganismos, suelen administrarse nutrientes, como nitrgeno, con
el fin de acelerar el proceso de degradacin.
Hay bacterias y hongos que pueden degradar con relativa facilidad petrleo y sus
derivados, benceno, tolueno, acetona, pesticidas, herbicidas, teres, alcoholes simples,
entre otros. Tambin pueden degradar, aunque parcialmente, otros compuestos qumicos
como el arsnico, el selenio, o el cromo. Los metales pesados como uranio, cadmio y
mercurio no son biodegradables, pero las bacterias pueden concentrarlos de tal manera
de aislarlos para que sean eliminados ms fcilmente. Estas caractersticas tambin
pueden lograrse por ingeniera gentica.
5.1.3 Fitorremediacin
La fitorremediacin es el uso de plantas para limpiar ambientes contaminados y
constituye una estrategia muy interesante, debido a la capacidad que tienen algunas
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



17
especies vegetales de absorber, acumular y/o tolerar altas concentraciones de
contaminantes como metales pesados, compuestos orgnicos y radioactivos, etc. Las
ventajas que ofrece la fitorremediacin frente a los procesos descritos anteriormente son
el bajo costo y la rapidez con que pueden llevarse a cabo ciertos procesos degradativos.
Segn la planta y el agente contaminante, la fitorremediacin puede producirse por
acumulacin del contaminante en las partes areas de la planta; absorcin, precipitacin
y concentracin del contaminante en races; reduccin de la movilidad del contaminante
para impedir la contaminacin de aguas subterrneas o del aire; desarrollo de bacterias y
hongos que crecen en las races y degradan contaminantes (este es el caso de mayor
utilizacin para la limpieza de contaminacin mediante hidrocarburos); captacin y
modificacin del contaminante para luego liberarlo la atmsfera con la transpiracin y
captacin y degradacin del contaminante para originar compuestos menos txicos.
5.2 Segn la tcnica utilizada
5.2.1 Bioaumentacin
La bioaumentacin es la prctica de incrementar la poblacin de bacterias nativas de un
ecosistema con la adicin de bacterias adaptadas selectivamente, las cuales han sido
desarrolladas para aumentar los rangos de reduccin orgnica o proporcionar la
habilidad de degradar compuestos previamente considerados como difciles o no
biodegradables.
Dicha tcnica no sustituye la poblacin de bacterias existentes, pero aumenta su
habilidad de responder a ciertas situaciones o degradar compuestos de la corriente de
desechos, dando como resultado una mejora del tratamiento.
La bioaumentacin posibilita controlar la naturaleza de la biomasa, y garantiza que el
tipo de microorganismos ms idneo est presente en el suelo en cantidad suficiente
para degradar en forma efectiva y eficiente los residuos contaminantes y reducirlos a sus
componentes bsicos (dixido de carbono y agua).
5.2.2 Bioestimulacin
Esta tcnica pretende modificar las condiciones del suelo (nutrientes, aireacin, pH,
humedad, entre otros) para que la actividad degradativa de inters pueda desarrollarse
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



18
en condiciones ptimas. De tal forma puede lograrse, por ejemplo, que el crecimiento
endgeno de los degradadores de petrleo sea estimulado por la adicin de nutrientes u
otros sustratos.
5.2.3 Inoculacin
Este mtodo es una forma de tratamiento in situ (en el lugar) y se refiere a tratar el suelo
contaminado sin removerlo (excavarlo). En este caso los minerales, nutrientes y a
menudo los organismos son agregados dentro del piso a travs de pozos, galeras de
infiltracin u otras formas, que facilitan que el proceso de degradacin se realice en el
sitio donde est la contaminacin.
5.2.4 Land farming (cultivo de la tierra)
La tcnica consiste bsicamente en la adicin de fertilizantes con nitrgeno y fsforo
(en cantidades proporcionales al carbono presente en el vertido), la aireacin peridica
del suelo, y el mantenimiento de niveles de pH y humedad ptimos para la actividad
microbiana. La mezcla peridica y la adicin de ms nutrientes (y/o organismos)
permite asegurar homogeneidad mientras se airea la tierra. Esta prctica se conoce a
menudo como cultivo de la tierra, pues los microorganismos son susceptibles de ser
cultivados, para facilitar la degradacin de material contaminado.
El tratamiento tambin se puede realizar ex situ (fuera del lugar) y se refiere a la
excavacin del lugar y el tratamiento de la tierra en un rea apartada donde se agregan
nutrientes minerales y microorganismos externos (si es el caso), seguido de una buena
mezcla para asegurar la distribucin a travs de toda la tierra
5.2.5 Biopila
La tcnica de biopila se basa en colocar la tierra dentro de celdas de tratamiento, usando
una red de tubos perforados que permiten que el aire fresco se mueva a travs del
material, mediante el empleo de un compresor. Esta tcnica requiere menos equipo y en
la mayora de casos un rea menor de tratamiento. Recientemente dentro de esta tcnica
se ha incorporado el compostaje, que consiste en mezclar los sedimentos contaminados
con enmiendas orgnicas fcilmente degradables, y mantener la mezcla en montones o
pilas bajo condiciones controladas de humedad y aireacin. Durante la degradacin
aerbica de esos materiales orgnicos, que va acompaada de la produccin de calor
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



19
(alcanzndose temperaturas de 45C), se desarrollan comunidades microbianas capaces
de degradar diversas sustancias txicas presentes en el suelo. Esta tcnica ya se ha
utilizado para la biorremediacin de explosivos, clorofenoles, hidrocarburos y pesticidas
(Sebito, 2004).
5.2.6 Biofiltro
Los biofiltros suelen consistir en recipientes (birreactores) en los que los
microorganismos se mantienen confinados, en medio lquido o sobre soportes slidos.
Los microorganismos se
Seleccionan por su capacidad para degradar o retener de forma especfica los
compuestos que se pretende eliminar. El medio contaminado, acuoso o gaseoso, se hace
pasar por el biofiltro, obtenindose un efluente con menor contenido en el compuesto
contaminante. Este efluente puede someterse a nuevas rondas de filtrado hasta la
eliminacin del contaminante. Tambin es posible disear biofiltros para la
inmovilizacin de contaminantes que no se pueden degradar, como los metales (cadmio,
mercurio, o uranio). Como en los biofiltros los microorganismos se mantienen
confinados y no se liberan al ambiente, puede constituir una estrategia para el empleo de
organismos que han sido genticamente modificados para mejorar sus propiedades
degradativas.
5.3 Segn el lugar de realizacin
La biorremediacin se puede realizar in situ o ex situ.
En el tratamiento in situ (tambin conocido como biorremediacin intrnseca) se puede
estimular la actividad degradativa de los organismos que estn presentes en el lugar
contaminado a travs del suministro de nutrientes (bioestimulacin), o tambin es
posible aadir organismos con propiedades especficas para degradar el contaminante
(bioaumentacin). Este tipo de tratamiento se realiza cuando los contaminantes han
llegado, por ejemplo, a las napas freticas.
En el tratamiento ex situ, el contaminante es transportado a una planta de procesamiento
donde se trata en reactores con microorganismos degradadores especializados. Cuando
el contaminante no se puede biodegradar, como sucede con los metales pesados, la
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



20
estrategia utilizada es la bioacumulacin, es decir, la acumulacin del contaminante en
el interior del organismo que posteriormente es retirado.


6 FACTORES QUE CONDICIONAN LA BIODEGRADACIN DE
HIDROCARBUROS
Existen tres grupos de factores que condicionan la biodegradacin microbiana de
hidrocarburos, los relacionados con las caractersticas del producto petrolfero, los
relacionados con el medio y los relacionados con los microorganismos presentes en el
emplazamiento (Alexander, 2004). Si bien los microorganismos pueden degradar una
parte importante de un crudo de petrleo, tienen preferencias por algunos hidrocarburos.
Recordemos que los crudos de petrleo estn formados por cuatro familias de
compuestos o fracciones: los hidrocarburos alifticos, los hidrocarburos aromticos, las
resinas y los asfaltenos. Los microorganismos degradan con facilidad los hidrocarburos
lineales de la fraccin aliftica, especialmente los que contienen menos de 28 carbonos,
aunque se han llegado a describir biodegradaciones de hidrocarburos de hasta 44
carbonos. Los isoprenoides, y los hidrocarburos cclicos o naftnicos son degradados
ms lentamente que los lineales. Respecto a los hidrocarburos aromticos, a medida que
aumenta el nmero de anillos y los substituyentes alquilo, por tanto, su peso molecular,
aumenta su resistencia a la biodegradacin (Prince, 2005). Otro aspecto importante
relacionado con las caractersticas de los productos petrolferos son su hidrofobicidad y
su facilidad para adsorberse en partculas del suelo como las arcillas o absorberse o en
la materia orgnica. Estos fenmenos, as como la difusin en microporos dan lugar a
una disminucin de su biodisponibilidad hacia los microorganismos que deben
degradarlos.
El medio donde se encuentra el contaminante debe proporcionar las mejores
condiciones a los microorganismos para que su actividad metablica sea la adecuada
para degradar los hidrocarburos. En el caso de los hidrocarburos, aunque existen
microorganismos que pueden degradarlos anaerbicamente, sabemos que el
metabolismo ms eficaz es el aerbico por lo que la presencia de oxgeno ser un
requisito imprescindible.
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



21
En el caso de la zona no saturada del suelo, una variable muy importante es la humedad
que deber encontrar un valor ptimo entre aquel que requieren los microorganismos
para su metabolismo y el que permita una buena aireacin. La transformacin ideal de
los hidrocarburos por parte de los microorganismos es la mineralizacin, que supone
que el microorganismo utiliza el contaminante como substrato de crecimiento.
Pensemos que los hidrocarburos slo contienen carbono (C) e hidrgeno (H), mientras
que una clula microbiana contiene Carbono (C), nitrgeno (N), fsforo (P), adems de
otros micronutrientes, en unas proporciones determinadas. Para que el microorganismo
pueda crecer a expensas de los hidrocarburos deber disponer en el medio de las
proporciones necesarias de N y de P adems del C y H. Es por ello que en medios
pobres en N y P se necesitar suplementar con nutrientes o fertilizantes.
Por lo que respecta a los factores relacionados con los microorganismos, se define el
perodo de aclimatacin como aquel tiempo que requieren las poblaciones microbianas
presentes en un emplazamiento para empezar a degradar los contaminantes. En este
sentido, se conocen distintos factores que pueden disminuir o aumentar este tiempo pero
en trminos generales estn relacionados con el historial de contaminacin del
emplazamiento. Si la contaminacin es remota los microorganismos estn muy
adaptados a la presencia de los contaminantes y pueden dar una respuesta rpida a una
bioestimulacin sin prcticamente un perodo de aclimatacin. En el caso de
contaminaciones accidentales, este perodo podra alargarse. Sin embargo, cabe sealar
que en el caso de la contaminacin por hidrocarburos, al tratarse de unos contaminantes
prcticamente omnipresentes, pensemos en su presencia en la atmsfera, se ha podido
constatar que se encuentran microorganismos degradadores de hidrocarburos en
prcticamente cualquier emplazamiento.

I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



22
7 FASES EN LA APLICACIN DE LA TECNOLOGA DE LA
BIORREMEDIACIN
Cuando se nos plantea un caso de suelo contaminado se deben llevar a cabo una serie de
etapas. Cada una de ellas deber llevarse a cabo por distintos profesionales
interrelacionados: gelogos, qumicos, microbilogos e ingenieros. A ttulo de resumen
deben cumplirse las siguientes etapas. En primer lugar se debe realizar una
investigacin exhaustiva del emplazamiento en relacin con los contaminantes y en
relacin con el tipo de suelo. En segundo lugar, se deben realizar unos ensayos de
tratabilidad a nivel de laboratorio, seguidos si es factible de un ensayo piloto para
finalmente implantar la tecnologa escogida que ir acompaada de un buen control de
seguimiento. Que son los ensayos de tratabilidad o factibilidad? Para llevar a cabo un
tratamiento de biorremediacin eficaz, se deben cumplir unos requisitos y se deben
identificar con anterioridad los factores especficos que condicionan el proceso.
Mediante la realizacin de experimentos a nivel de laboratorio, denominados ensayos de
tratabilidad, podremos conocer, para cada emplazamiento, las caractersticas
microbiolgicas, edafolgicas y fisicoqumicas, as como la influencia de distintos
parmetros (O2, nutrientes, etc.) antes de implementar cualquier tecnologa de
biorremediacin. Nuestro grupo ha diseado un protocolo (Sabatet al., 2004) que
hemos aplicado con xito a distintos emplazamientos.
En algunos casos puede existir reticencia en llevar a cabo estos anlisis, tanto por parte
de los propietarios como de las empresas adjudicatarias. En la mayora de los casos el
propietario exige una accin inmediata por cuestiones de tiempo y la adjudicataria de la
descontaminacin puede pensar errneamente, que ya ha adquirido suficiente
experiencia como para obviar la fase de laboratorio y llevar a cabo una accin
determinada teniendo en cuenta escenarios parecidos. Sin embargo, los ensayos de
tratabilidad representan una parte muy pequea de los costes totales de recuperacin de
cualquier emplazamiento y la informacin que pueden proporcionar es fundamental.
Puede abaratar el coste final y lo que es ms importante, aumentar las posibilidades de
xito. Por ello, es necesario no escatimar ni tiempo ni recursos en esta fase del proyecto.
En resumen, el objetivo de los ensayos de trazabilidad es evaluar el nivel y la actividad
de las poblaciones microbianas presentes, evaluar la biodegradabilidad de los
contaminantes presentes por parte de las poblaciones microbianas indgenas y,
finalmente, encontrar aquellas condiciones medioambientales que permitan optimizar la
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



23
actividad metablica de las poblaciones microbianas responsables de la eliminacin de
los contaminantes.
8 VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LA BIORREMEDIACIN
Ventajas
El material contaminado se podr convertir en un abono orgnico enriquecido, con
mayor cantidad de nutrientes, en especial nitrgeno.
Mejorar la estructura y textura del suelo, haciendo ms ligeros a los suelos arcillosos
y ms compactos a los arenosos.
Mejorar la permeabilidad del suelo: drenaje y aireacin.
Aumentar la retencin de agua en el suelo.
Aumentar el poder tampn del suelo, reduciendo las oscilaciones de pH.
Aumentar la capacidad de intercambio catinico (CIC) del suelo, con lo que
aumentar la fertilidad.
Favorecer la aireacin y oxigenacin del suelo, provocando con ello una ms intensa
actividad radicular.

Desventajas
Puede ser difcil su control
Las enmiendas introducidas al ambiente para incrementar la biorremediacion
pueden causar otros problemas de contaminacin
Puede no reducir la concentracin de contaminantes al nivel deseado
Requiere ms tiempo
Puede requerir monitoreos mas extensivos
Falta de control hidrulico
Efectividad difcil de predecir
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



24

9 QUE DICE EL RASH?
ARTCULO 74.
g) Eliminar los desechos provenientes de la limpieza de los ductos, mediante el uso de
Tratamientos de bioremediacin o disponindolos nicamente en ubicaciones aprobadas
para rellenos sanitarios.
ARTCULO 96.
b) Extraer el lodo del fondo del tanque y disponerlos en un lugar aprobado por la
Autoridad Ambiental Competente, para cuyo efecto, debern utilizarse mtodos de
bioremediacin o disposicin en un relleno sanitario.
10 TCNICA MS USADA PARA LA BIORREMEDIACION EN LA
INDUSTRIA PETROLERA
La tcnica ms usada para la biorremediacin de los lodos contaminados con
hidrocarburos y de otros desechos de la industria petrolera es la denominada
landfarming.

I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



25

Tcnica. Consiste en el tratamiento de suelos contaminados con hidrocarburos, usando
las bacterias que existen de manera natural en ellos.
Landfarming, tcnica popular en Bolivia
La tcnica de landfarming, que ha sido comprobada como ambientalmente amigable y
econmica, es la ms difundida para el tratamiento de suelos contaminados con
hidrocarburos en el pas, aplicada tanto por empresas petroleras como de servicios,
gerente de Seguridad, Salud, Ambiente y Relacionamiento Comunitario de YPFB
Chaco.
Esta tcnica de biorremediacin consiste en el tratamiento de suelos contaminados con
hidrocarburos (lodos base aceite, fondos de tanques de almacenamiento), usando las
bacterias que existen de manera natural en los suelos para oxidar los desechos con
hidrocarburos,
Precisamente YPFB Chaco viene trabajando con esta tcnica desde 1998 y actualmente
cuenta con reas de remediacin de landfarming en los campos de Carrasco, Los Cusis,
Vuelta Grande y San Roque.
Asimismo, la tcnica de landfarming es utilizada por las empresas que prestan servicios
ambientales, algunas de las cuales la utilizan en sinergia con otras biotecnologas como
Biopilas y Fitorremediacin, segn el gerente general de Tropiflor A.G., Martn
Covarrubias. Adems de Tropiflor, las empresas Buhos y Quebracho tambin trabajan
con esta tcnica.
10.1 Efectiva y econmica
Se trata de una tcnica recomendable para biodegradar hidrocarburos livianos, voltiles
y con bajas concentraciones en partes por milln (ppm).
La ventaja es que es una tecnologa fcil de aplicar y relativamente barata para
implementar. Desde el punto de vista de implementar instalaciones para aplicar esta
tecnologa implica bajos costos, hasta 2/3 menos con relacin a otro tipo de tecnologa
como por ejemplo la desorcin trmica o microencapsulado, asegura. Sin embargo, su
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



26
desventaja es que no puede tratar grandes volmenes de suelos contaminados y el
tiempo de tratamiento es tan largo que muchas veces no justifica su implementacin.
Se logra degradar cantidades moderadas (de 10.000 a 25.000 hidrocarburos totales de
petrleo TPH, bajo a moderado), ya que no es una tecnologa que tenga las
propiedades de biodegradar altas concentraciones, como tampoco logra biodegradar
algunos compuestos propios de hidrocarburos intemperizados o cadenas largas de
carbono.
YPFB Chaco, como parte del proceso de remediacin de pasivos ambientales en todas
sus reas operativas, remedi 112.000 metros cbicos (m3) de suelos con TPH con un
valor inicial de aproximadamente 35.000 ppm reduciendo hasta 1.000 ppm.
10.2 Factores

Las bacterias usan los hidrocarburos como fuente de alimento, liberando pequeas
cantidades de agua y dixido de carbono. Los factores que controlan el proceso de
bioremediacin y que afectan directamente la actividad de las bacterias incluyen:
Temperatura: Entre 20-40 C.
Humedad: Entre 50-60%
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



27
Nutrientes: Nitrgeno (N), Fsforo (P) y Potasio (K).
Control de Ph (acidez): Es importante realizar un control de pH, el mismo debe
estar entre 6 y 8.
Aireacin: Para lograr la descomposicin aerbica del material con
hidrocarburo, es importante el suministro constante de oxgeno, para lo cual se
utiliza maquinaria de volteo (tractor agrcola).
Cuando estos parmetros se combinan en proporciones adecuadas las bacterias pueden
digerir efectivamente los hidrocarburos.
Previamente es necesario determinar la concentracin de Hidrocarburos Totales de
Petrleo (TPH) del material a ser tratado.
Si la concentracin supera el valor de 50.000 partes por milln, es necesaria la adicin
de materia orgnica, con el fin de que los microorganismos puedan desarrollarse.

Figura.- Diversidad microbiana presente en una muestra de suelo contaminada con
crudo, fotografa del Centro de Investigaciones Microbiolgicas
10.3 Proceso
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



28
El landfarming se realiza trasladando los contaminantes a un suelo no contaminado, el
cual ha sido preparado con anterioridad para evitar su contaminacin y la de las aguas
subterrneas con sustancias que puedan producirse durante el tratamiento.
Para ello se efecta el diseo del lugar donde se depositan los contaminantes, aislando
el material de tratamiento del rea no contaminada con una tela impermeable.
Para empezar el procedimiento, se hace una bsqueda y seleccin de bacterias nativas
aisladas de las muestras de suelos que se encuentran contaminados, ya que estas tienen
la capacidad catablica para crecer bajo las condiciones fsico-qumicas y de estrs a las
que estn sometidas, y tendrn un mejor desempeo a la hora de la biorremediacin.
La bsqueda comienza en el procesamiento de una muestra de suelo mediante una serie
de diluciones, tratando de obtener aquellos morfotipos cultivables; ya que una gran
parte de los microorganismos del suelo no pueden ser recuperados en medios para el
cultivo de microorganismos.
Adems de una bsqueda general, se realiza una especfica a travs de medios selectivos
y diferenciales, en la cual se pretende aislar ciertos morfotipos como las Pseudomona
sp. y bacterias lactosa positivas bacterias capaces de utilizar la lactosa, debido a su
bien conocida actividad degradadora de hidrocarburos.
Luego, estas diluciones son sembradas en diferentes medios de cultivo donde grandes
familias de morfotipos se hacen presentes; stas varan en densidad y diversidad.
La diversidad est determinada por los morfotipos recuperados que se diferencian segn
su morfologa macroscpica su aspecto fsico, mientras que la densidad est
determinada por el nmero total de individuos que pertenecen a un grupo con una
morfologa macroscpica comn.
Estos datos de densidad y diversidad son de gran valor. Primero, porque nos indican
acerca de la calidad microbiana del suelo, ya que un suelo que tiene gran nmero de
morfotipos, es un suelo que tiene vida y por ende presenta una buena prospeccin para
la biorremediacin debido a su posible alta actividad microbiana. Segundo, porqu
aquellos morfotipos que se encuentren en mayor nmero sern seleccionados por su
habilidad para usarlo como fuente de energa y carbono, pues por eso estn creciendo.
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



29
Ya seleccionados los morfotipos se conforma un consorcio o pool de microorganismos
degradadores de hidrocarburos y, utilizando la estrategia de bioaumentacin, se hace
una produccin a mayor escala y en proporciones estratgicas de estos. En esta
produccin debe tenerse en cuenta el volumen de suelo contaminado para biorremediar,
la concentracin del contaminante y las clases de morfotipos que se aislaron.
Incluye anlisis mensuales.
El rea de landfarming se divide en celdas claramente identificadas. El desecho es
aplicado y monitoreado por celda y, en funcin a los parmetros monitoreado, se
agrega abono y nitrgeno peridicamente.
Cada mes se toman muestras de suelo y se realiza un anlisis para determinar el
contenido de hidrocarburo. Cuando el contenido de Hidrocarburos Totales de Petrleo
es menor o igual a 2% es posible adicionar a la celda ms desechos. Es posible operar
reas de landfarming por mucho tiempo realizando el monitoreo respectivo de la
aplicacin.



Figu
ra
Culti
vos
puro
s de morfotipos aislados de una muestra contaminada con fotografa del Centro de
Investigaciones Microbiolgicas, CIMIC
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



30
10.4 Importancia del pool microbiano
La formulacin de un pool microbiano permite combinar y complementar sus funciones
metablicas para que colectivamente biodegraden un compuesto. En muchos casos algunos
morfotipos slo pueden realizar una parte en la biorremediacin, ya que alguno de estos
puede ser patgeno para plantas, animales o el hombre por el proceso de bioaumentacin.
Sin embargo, partimos del principio de que son morfotipos ambientales, los que
inmediatamente se acabe su fuente de alimento bajan a un nmero que no cause disturbio
en el ambiente. Adems se realiza una cuidadosa revisin de reportes de enfermedades de
origen bacteriano en la zona.

Form
ulaci
n de
un
pool
degra
dador
de
hidrocarburos a gran escala, fotografa del
Centro de Investigaciones Microbiolgicas, CIMIC.
El pool que se formul es aplicado en el suelo contaminado por tcnicos e ingenieros
ambientales para dar inicio a la biorremediacin. Durante el tratamiento se hace el
monitoreo de las poblaciones microbianas, con el fin de determinar si la cantidad inicial de
microorganismos aumenta o disminuye despus de ser adicionado al suelo contaminado.
As mismo se realiza la determinacin de TPHs hidrocarburos totales de petrleo, con el
fin de observar si hubo o no degradacin (figura 9). Otros factores en la degradacin de
hidrocarburos
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



31
La transformacin de los compuestos orgnicos en el ambiente est influenciada por un
nmero de factores que se pueden agrupar en aquellos que afectan el crecimiento y
metabolismo de los microorganismos y aquellos que afectan al compuesto en s mismo. La
biodegradacin de los hidrocarburos est asociada con el metabolismo y crecimiento
microbiano, y por lo tanto cualquiera de los factores que afectan al crecimiento microbiano
puede influenciar la degradacin. La degradacin aerbica de los hidrocarburos es
considerablemente ms rpida que el proceso anaerbico [4], de modo que la oxigenacin
ser necesaria para mantener las condiciones aerbicas para una rpida degradacin.

Trabajo de Landfarming; fotografa: cortesa del ing. Hugo Vladimir Ramrez
Un suelo con una estructura abierta favorecer la transferencia de oxgeno y un suelo
anegado de agua tendr un efecto contrario. La temperatura afecta
elcrecimientomicrobiano, as que a bajas temperaturas la degradacin ser lenta. As mismo
el pH del suelo y la solubilidad del compuesto que debe ser degradado afectan el
crecimiento bacteriano. La contaminacin por hidrocarburos tambin puede estar asociada
con altos niveles de metales pesados, que pueden inhibir el crecimientomicrobiano,
dependiendo de la concentracin y tipo de metales.
Otro factor crucial es la accesibilidad del compuesto para su degradacin en el interior del
suelo, la cual est afectada por la estructura del mismo, su porosidad, composicin y por la
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



32
solubilidad del compuesto. Algunos compuestos pueden ser adsorbidos por arcillas y por lo
tanto pueden ser invulnerables a la degradacin. Para superar este problema se han aadido
surfactantes a suelos contaminados con el objeto de mejorar la accesibilidad de los
hidrocarburos.

Curva de degradacin aproximada de TPHS en una estacin en tratamiento; cortesa:
ingeniero Hugo Vladimir Ramrez.
Los surfactantes son sustancias que contienen un segmento liposoluble soluble en aceite,
y otro hidrosoluble soluble en agua, lo cual permite solubilizar el hidrocarburo desde la
arcilla. Por otra parte, la presencia de un gran nmero de microorganismos autctonos en el
suelo, capaces de degradar hidrocarburos ser claramente una ventaja, porque evita la
adicin especfica de microorganismos no autctonos, que aunque degradadores, podran
no funcionar por no estar adaptados a las condiciones fsico-qumicas del lugar.
I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



33

I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



34
11 CONCLUSIN
En general, en el proceso de landfarming se ha comprobado la eficiencia de un consorcio
microbiano sobre la utilizacin de un solo morfo tipo, debido a que los morfotipos al estar
en grupo pueden tolerar mejor los cambios fisicoqumicos en el campo y sus actividades
metablicas pueden interactuar entre s para la parcial o final biorremediacin.
Es necesario conocer las condiciones ambientales en las cuales se desea que los morfotipos
trabajen, para as poder optimizar la biorremediacin, cambiando los posibles
Parmetros fsicos o qumicos que puedan ir en contra de la actividad microbiana en el
material a biorremediar o en el ambiente.
Por ltimo hay que Por ltimo hay que resaltar la importancia que tiene la seleccin de
microorganismos autctonos aislados del lugar para la biorremediacin, debido a que
estos morfotipos se encuentran mejor adaptados al contaminante; a diferencia de
morfotipos forneos, que aunque con una gran actividad biorremediadora, pueden no
funcionar bajo las condiciones ambientales del lugar.





I
M
P
A
C
T
O

A
M
B
I
E
N
T
A
L





















































































































































B
I
O
R
R
E
M
E
D
I
A
C
I
O
N



35
12 BIBLIOGRAFIA
http://www.ingenieroambiental.com
Tecnologas de remediacin para suelos contaminados
(Tania Volke Seplveda y Juan Antonio Velasco Trejo)
Biorremediacin de residuos del petrleo
(Paola Andrea Vargas Gallego / Ren Ricardo Cullar / Jenny Dussn)
Biorremediacin: vinculaciones entre investigacin, desarrollo y legislacin
Mara Marta Di Paola Carmen Vicin
Uso de lombrices de tierra en la remediacin De suelos contaminados por hidrocarburos
Remediacin de suelos contaminados con hidrocarburos.Dr. Ignacio Daniel Coria
Estudio de inculos bacterianos como Biorremediadores de suelos contaminados Con
petrleo
Aspectos tecnolgicos y aplicacin al vertido del Prestige Biorremediacin (Jos
Luis Rodrguez Gallego Ingeniero de MinasProfesor Asociado Jess Snchez Martn
Microbilogo Profesor Titular)
La biodegradacin de hidrocarburos y su aplicacin en la Biorremediacin de suelos Anna
Maria Solanas
Mitigacin y biorremediacin de suelos contaminados por el derrame de combustible disel
2 en la Quebrada del Toro, Caman, 2009
Biorremediacin de suelos: desde el concepto a su aplicacin Eduardo Ercoli
Doctor en Qumica