Mt o d o s l ab o r at o r i ai s d e i d en t i f i c a o d o

f u n g o Candida sp
Laboratorial methods for identifying Candida sp
Passo Fundo, v. 9, n. 1, p. 27-33, jan./jun. 2004
In t r o d u o
Gen er al i d ad es
Por apresentarem caracters-
ticas diferentes dosvegetais, apar-
tir de1969, osfungosforamclassi-
ficadosnumreinoprprio- Fungi.
Esses seres vivos no sintetizam
clorofilanemapresentam celulose
naparede celular, assimcomono
formam um tecido verdadeiro ,
nemarmazenam amido. Apresen-
tam, ainda, caractersticas declu-
las animais, como reserva de
glicognio, etm caractersticas
exclusivas, comoadicariofase, isto
, apresentam doisncleoshapli-
dessexualmente opostos(MOURA,
1999).Osfungospodemoriginar-se
deuma nicaclulaoudeumfrag-
mento da hifa, e sua estrutura
principalmente aparede celular,
de grande auxlio na taxonomia
(TRABULSI et al.,1999).
As leveduras so os nicos
fungos damicrobiota bucal nativa
e, pelomenos, 25gneros e167es-
pciesjforamisoladas nohomem
(STENDERUP, 1990).Determina-
das cepas deCandida sp tmpro-
priedades especficas que favore-
Nadiesca Maria Lazzari tviiouo'
Liliane Soares YurgeP
Karen Cnerubini'
Ricardo Flores Cezenove'
cema colonizao; a invaso no
hospedeiro podechegar aostecidos
musculares profundos (ZAITZet
aI., 1998;LACAZet aI., 1998).
A Candida sp um fungo
dimrfico quepodeseapresentar
comoleveduras esfricas ounafor-
ma alongada, denominada "hifa".
Ambas as apresentaes socapa-
zes decausar a candidase bucal
embora sejamencontradas junta~
ecada forma possa estar associa-
da comsade ou doena. Nos es-
tgiosiniciaisdainfeco, aforma-
odehifas podepromover aade-
rncia eapenetrao dofungonos
tecidos do hospedeiro (OLSEN,
1990b; SWEET, 1997). Comoco-
nhecimento dequeasvrias esp-
ciesdeCandida sp diferemnapro-
duo desupostos fatores deviru-
lncia ena sensibilidade aos anti-
fngicos, grandes esforos vm
sendofeitospara suaidentificao
eisolamento(WILLIAMSeLEWIS
2000). Algumas outras espciesj
descritas so C. tropicalis, C.
parapsilosis eC. stellatoidea (NE-
VES, 2001). Tambmjforamre-
feridas as espcies C. glabrata, C.
krusei, C.guilliermondi (REGEZI e
1 Aluna do Programa de Doutorado em Estomatologia Clnica da PUCRS.
, COI?utoradempEcstRomatologiaClnica pela PUCRS; coordenadora do curso de doutorado em Estomatologia
1I1Ica a U S.
3 ~:~B2'R~~ Estomatologia Clnica pela PUCRS; professora do curso de doutorado em Estomatologia Clnica
, Aluno da Faculdade de Qumica, PUCRS.
Recebido em: 29-042003 / aceito em: 20-07-03
27
SCIUBBA, 1991). Aespciedubli-
niensis, quesecaracteriza por re-
lacionar-se alta carga doHIV,
rapidez da progresso daAids ea
simultneas doenas bucais, como
alto ndice de crie e doena
periodontal, foi descrita por
Sullivanetaloem1995.Acandida-
sesistmica relatada entre 20%
e40%dospacientes comcncer e
emaproximadamente 25%dospa-
cientes submetidos atransplantes
de medula ssea (TRABULSI et
al., 1999). Dos fungos do gnero
Candida sp, aespciealbicans a
mais prevalente na cavidadeoral e
amais patognica (SWEET 1997
Nevilleet al., 1998). ' ,
Tc n i c as
laboratoriais d e
i d en t i f i c a o d e
Candida sp
Amultiplicidade dosfungose
as diferenas emseu comporta-
mento fazemcomque alguns se-
jamfacilmente identificveis nas
preparaes a fresco, porm ou-
tros requeremoemprego devrios
mtodos laboratoriais deidentifica-
o(MOURA,1999).Amaioria dos
procedimentos laboratoriais dispo-
nveis para identificao dofungo
Candida sp consistenaobservao
das suas caractersticas morfol-
gicas, fisiolgicas ebioqumicas
(MURRAYet al., 2000). Osexames
micolgicos apresentam uma se-
qncia clssica constituda por
exame direto (afresco), cultivo do
material emmeios apropriados,
provasbioqumicas, provasdeviru-
lncia e sorolgicas (MOURA,
1999). Para oisolamento dofungo
Candida sp, podemser analisadas
amostras obtidas deraspagens de
peleeunhas, urina, material pu-
rulento, aspirados, escarros, secre-
es brnquicas, sangue, swabs
orais ouvaginais etecidos. Aelei-
o dostio decoleta podeconsti-
tuir a etapa mais importante no
diagnstico, devendo ser escolhido
olocal queapresentar alesomais
caracterstica e, provavelmente, a
28
maior concentrao doagentecau-
sal (JAWETZ et al., 1998). As
amostras devemser processadas o
mais rpido possvel, comtcnica
acurada edeacordo comas nor-
mas universais debiossegurana
(MARSHALL,1995).
Exame d i r et o (a f r es c o )
Oexamemicroscpico direto
domaterial clnico uma tcnica
simples, de baixo custo, rpida,
sensvel, eficazereprodutvel, que
permite avisualizao dofungo e
suaidentificaoimediata porpro-
fissional tcnico treinado. A des-
vantagemdomtododireto ofato
deaspreparaes no seremdura-
douras (TRABULSI et al., 1999).
Essatcnicatil emmicoses
cutneas, subcutneas esistmi-
cas, bastando colocar o material
coletado numa lmina devidro,
adicionando hidrxido depotssio
(KOH)a10-20%comtinta Parker
51 permanente na proporo de
2:1. Cobre-se, ento, comlamnula
eaquece-seligeiramente aobicode
Bunsen(VERONESIeFOCACCIA,
1996; TRABULSI et al., 1999). O
KOHa10%utilizado para dissol-
ver omaterial proteinceo, facili-
tando a deteco de elementos
fngicosqueno soafetados pela
soluoalcalinaforte(MURRAYet
al., 2000). Nosesfregaos deexsu-
dato, aCandida aparececomouma
levedura gram-positiva oval, com
brotamento emcadeias (pseudo-
hifas), medindo 2a3).lmpor 4a6
um(JAWETZet aI., 1998).
Cu l t u r a
Os meios de cultura deuso
laboratorial soelaboradosdeacor-
do comas caractersticas biolgi-
casemetablicas domicroorganis-
moemestudo. Devemconter subs-
tncias essenciais para sua repro-
duo egarantir seu crescimento,
mesmotendo sidocoletado umpe-
quenoinculo.Apspreparados, os
meios de cultura devem conter
guadestilada, reagentes qumicos
isentos de contaminao, gar e
peptonas bacteriolgicas cuidado-
samente selecionadas (MOURA,
1999). Ocrescimento deCandida
sp emmeios de cultura fcil e
rpido(FERREIRAeVILA,2001).
Ainoculao dosmeiosdecultura
podeser feita por encharcamento,
pipeta, ala deplatina, swab ou
implantao (MARSHALL,1995).
Osmeiosdecultura classificam-se
em: enriquecidos, comsangue, so-
ro ououtros nutrientes; seletivos,
que inibem alguns efavorecem
outros microrganismos, eos dife-
renciais, que separam vrios mi-
croorganismos dependentes de
certos nutrientes. Os meios dife-
renciais podemser tambmseleti-
vos. Existem, ainda, os meios de
transporte, utilizados quando as
amostras nopodemser semeadas
imediatamente (MOURA,1999).
Omeio gar Sabouraud dex-
trose a4%apresenta pH cidode
5,8ealta tenso osmticapeloteor
deglicose, queseletivopara fun-
gos, pormno impedecompleta-
mente aproliferao debactrias.
Consegue-se ummeio impeditivo
para bactrias adicionandocloran-
fenicol (0,2mgpor mL), umanti-
biticoquepodeser autoclavadoe
temamplo espectro deao (Fig.
1).Aciclo-heximida(actidione) na
concentrao de0,5mg por mL,
quandoincorporada aomeio,impe-
deo desenvolvimento defungos
no patognicos de crescimento
rpido, que podemcontamin-lo
(KONEMAN et aI., 1997; TRA-
BULSI et aI., 1999).
Figura 1 - Cultura de Candida albicans em
meio gar Sabouraud dextrose
com c1oranfenicol
Aps coleta dematerial ese-
meadura emmeiodecultura, obe-
decendo-sesnormas debiossegu-
rana, obtida acultura primria
Revista da Faculdade deOdontologia
do agente etiolgico, que, nos cul-
tivos micticos, somente ser con-
siderada negativa aps quatro se-
manas de ausncia de crescimen-
to, na temperatura de25C a30C
(KONEMAN et al., 1997). Essa
cultura primria dever ser repas-
sada para um novo meio decultu-
ra, por repique comala de plati-
na, com o objetivo de aumentar
sua viabilidade emant-Ia na fase
logartmica de crescimento com
novos nutrientes. Em caso de d-
vida, deve-se executar isolamento
eidentificao detodas as colnias
at a definio do possvel agente
etiolgicoCVERONESI eFOCACCIA,
1996; FERRElRA eVILA, 2001).
Vrios testes so utilizados
para aidentificao das leveduras ,
como avaliao de aspectos mor-
folgicos macro e microscpicos,
prova de tubo germinativo, fila-
mentao emgar-fub tween 80
assimilao defontes decarbono e
nitrognio, presena de certas
enzimas, como urease efenol-oxi-
dase, e formao de ascsporos
(FERRElRA eVILA, 2001).
Na cultura por tcnica deim-
presso, usa-se um pedao de es-
ponja de 2 empor 2 em, embebido
emgua compeptona, para entrar
em contato com uma superfcie
predeterminada da mucos abucal
durante 30 segundos. Aps isso, ~
esponja colocada diretamente no
meio Pagano-Levin ou gar
Sabouraud e o crescimento da
Candida sp quantificado (OLSEN
eSTENDERUP, 1990).
Aspectos morfolgicos da colnia
As provas para diferenciao
das vrias cepas isoladas podem
incluir amorfotipagem pela anli-
se das franj as eda topografia das
colnias (ZAITZ et al., 1998).
Aspectos macroscpicos
Aps24horas dasemeadura em
meio decultura, aCandida albicans
aparece como minsculos pontos e,
em48horas (Fig. 2), surgem as col-
nias decor creme, lisas ebrilhantes ,
comconsistncia mole eodor dele-
Passo Fundo, v. 9, n. 1, p. 27-33, jan./jun. 2004
vedo (MARSHALL, 1995; JAWETZ
et al., 1998; LACAZet al., 1998).
Figura 2 - Cultura de Candida albicans
Aspectos microscpicos
Cultivo em lmina: a semea-
dura emduas linhas paralelas
feita diretamente no gar
derramado sobre lmina de
microscopia. Ocultivo eml-
mina recoberto por lamnula
ecolocado emcmara mida
em condies de assepsia. O
fungo Candida albicans per-
mite a identificao degne-
ro eespciej pelo cultivo em
lmina, pois a presena de
hifas verdadeiras eclamids-
poros tpicos, redondos eter-
minais, alm deintercalares
lhe peculiar (FERREIRA ~
VILA,2001).
Prova de tubo germinativo ou
efeito Reynolds-Braude: o
mtodo laboratorial padro
para identificao deCandida
albicans(WILLIAMSeLEWIS
2000). executado suspen~
dendo-se uma pequena por-
o deuma colnia isolada da
cultura num tubo de prova
com0,5 mL de soro humano
ou animal. Essa prova utili-
zada para C. albicans por ser
umprocedimento rpido eca-
paz de produzir tubo germi-
nativo no perodo de duas a
trs horas, temperatura de
37C. Coloca-se uma gota da
suspenso soro-levedura em
uma lmina, cobrindo-se com
lamnula, eobserva-se ao mi-
croscpio (KONEMAN et al.,
1997). Oteste ter resultado
positivo quando aparecerem
blastsporos de globosos a
ovais, apresentando tubos ger-
minativos (MOURA, 1999). O
tubo germinativo da Candida
albicans uma extenso fila-
mentosa deuma nica clula
etem sido descrito como um
tubo sem constrio na sua
origem, oque o diferencia da
C. tropicalis (KONEMAN et
al., 1997). O teste limitado
por sua baixa especificidade e
alta interferncia decontamina-
es bacterianas (SANDVEN
1990; FERRElRA e VlLA' ,
2001).
Filamentao em gar-fub
Tween 80: a filamentao de
leveduras empseudo-hifas ou
hifas verdadeiras, bem como
ahabilidade deformar clami-
dsporos, avaliada tempe-
ratura ambiente por trs
dias, emgar-fub, comtween
80, que agregado ao meio
decultura para reduzir aten-
so superficial (fub: 40g;
gar: 20 g; polissorbato 80 ou
tween 80: 10 mL; gua desti-
lada q.s.p.: 1000 mL; pR final
6,6 a 6,8) (SANDVEN 1990'
KONEMAN et al.,1997; TRA~
BULSI e~al., 1999; FER-
RElRA eAVILA, 2001). As co-
lnias tpicas apresentam
pseudomiclios em brota-
mento (JAWETZ et al., 1998).
Rifas epseudo-hifas comaglo-
merados deblastocondios so
tambm encontradas (LACAZ
et al., 1998).
Imunofluorescncia: uma
tcnica sofisticada que requer
material eaparelhagem espe-
cficos. Pode ser recomenda-
da para a verificao de al-
guns fungos, como a Candida
albicans, emcortes detecidos
eem secrees epara serem
diferenciados de outros fun-
gos morfologicamente seme-
lhantes (LACAZ et aI., 1998;
TRABULSI et aI., 1999). Esta
tcnica pode ser necessria
emformas da candidase nas
quais no seevidenciam col-
29
nias clinicamente, emespe-
cial na forma atrfica crnica
(REGEZI eSCIUBBA, 1991).
Pesquisa de antgenos cir-
culantes: foramobtidos resul-
tados satisfatrios para odiag-
nstico decertas infecespor
Candida albicans atravs da
pesquisa de antgenos cir-
culantes. As candidases sis-
tmicas podem ser diagnos-
ticadas pela pesquisa deci-
dos orgnicos por cromato-
grafia gasosa (TRABULSI et
aL,1999).
Pesquisa de anticorpos sri-
cos: podeser feitapelas tcni-
cas defixao decomplemen-
to edeimunodifuso, quees-
to indicadas quando oexame
microscpico direto eacultu-
ra no identificarem ofungo.
Outras tcnicas, comoElisa e
Western-Blot, tmsido utili-
zadas emrazo desua sensi-
bilidade (TRABULSI et aL,
1999; MORAGUES et aI.,
2001).
CHROMagar Candida (CA;
CHROMagar, Paris, Frana):
ummeio diferencial ecro-
mognico que, entre popula-
es mistas, podeidentificar
espcies deCandida sp. Aps
24 a 48h deincubao, sur-
'gern colnias coloridas por
enzimas espcie-especficas.
ABcolnias verdes indicamC.
albicans(NIIMI, SHEPHERD,
CANNON, 2001;BAUTERSe
NELIS, 2002; GEE et aI.,
2002).

Tes t es b i o qu mi c o s
Tes t es d e as s i mi l a o
Auxanograma ezimograma:
o poder discriminatrio
grande no auxanograma,
tambm chamado "teste de
assimilao", eaumentado
quando associado aprovas de
fermentao de acares, o
zimograma (TRABULSI et
al., 1999;FERREIRAeVILA,
30
2001). Aatividade bioqumica
dsfungos estudada para a
identificao de espcies de
Candida sp, utilizando-se o
mtodo deauxanograma, que
indica a capacidade deomi-
croorganismo assimilar car-
bono enitrognio.
Nitrato: aprova deassimila-
o de nitrato usada fre-
qentemente como triagem,
especialmente para Candida
sp, Cryptococcus eRhodoto-
rula (FERREIRA eVILA,
2001).
Carboidratos: afermentao
decarboidratos, juntamente
comas caractersticas morfo-
lgicas desuas colnias, dife-
rencia aCandida albicans de
outras espcies. Este teste
utilizado para avaliar acapa-
cidade de o organismo usar
umcomposto especficoanae-
robicamente. Oteste envolve
a inoculao devrios tubos
contendo o meio basal eum
carboidrato a ser avaliado.
Apscincooumais dias dein-
cubao, ostubos so avalia-
dosquanto produo degs
(JAWETZ et aL, 1998; FER-
REIRA eVILA, 2001).
Urease: esteteste importan-
te para aidentificao dele-
veduras dogrupo dosbasidio-
micetos. Algumas espcies,
como a Candida krusei, so
urease-positivas, ouseja, tm
ahabilidade deromper amo-
lcula de uria, produzindo
uma reao alcalina, porma
maioria das leveduras dein-
teresse mdicourease-nega-
tiva (SANDVEN, 1990). Dois
tipos deteste podemser fei-
tos: alcalinizao de gar-
uria deChristensen (pepto-
na 19, glicose 19, NaCI 5 g,
fosfato de potssio monob-
sico2g, vermelho defenol 12
mg, uria 20g, gar 20g, gua
destilada q.S.p. 1000mL; pH
final 6,8) eteste rpido da
urease (FERREIRAeVILA,
2001).
Fenol-oxidase: aproduo da
enzima fenol-oxidase testa-
dacomgar-Guizotia abyssi-
nica abase denger, semen-
te utilizada para alimentar
pssaros. Oextrato dessa se-
mente contm cido cafico
queservedesubstrato para a
fenol-oxidase. As leveduras,
quando crescem em meios
contendo esses compostos,
produzem, emdois a cinco
dias, colnias pretas oumar-
rons (FERREIRA eVILA,
2001).
Toxinas killer: podemser uti-
lizadas toxinas deoutras leve-
duras para diferenciao por
meio da suscetibilidade de
vrias espcies isoladas de
Candida sp edecepas deuma
mesma espcie entre si
(ZAITZet al., 1998).
Pr o va d e vi r u l n c i a
In o c u l a o em c o b ai as
Uma suspenso salina de
Candida albicans a1%, injetada na
veiamarginal daorelha docoelho,
provocar sua morte emquatro a
cincodias, apresentando, necrop-
sia, microabscessos renais. Outras
espcies deCandida produziriam
leses, porm no letais aos coe-
lhos(CRUICKSHANKet al., 1977;
MOURA, 1999).
Bi ps i a/ c o r t es
hi s t o l g i c o s
Blastocondios, hifas epseu-
do-hifas deCandida albicans ede
outras espciesdeCandida sofra-
camente corados pela hematoxi-
lina-eosina. Assim, as coloraes
usadas para cortes histolgicos so
a prata metenamina de Grocott,
queutilizada para deteco des-
ses elementos fngicos nos teci-
dos, e o cido peridico de Shiff
(PAS) (LACAZet aI., 1998; TRA-
BULSI ETAL., 1999; MURRAYet
aL, 2000). Emleses que respon-
deminsatisfatoriamente aotrata-
Revista da Faculdade deOdontologia
mento antifngico, uma bipsia de-
ver ser feita para detectar poss-
veis transformaes malignas no
epitlio (BUDTZ-JORGENSEN,
1990).
Sistemas rpidos
(kits) para
identificao de
leveduras
Os laboratrios podem lanar
mo desistemas rpidos deidenti-
ficao deleveduras disponveis no
mercado internacional para aiden-
tificao presuntiva das culturas.
Porm, nenhum deles tem capaci-
dade deabranger a totalidade dos
gneros e, muito menos, das esp-
cies deleveduras. Por esse motivo,
os chamados kits no devem ser
usados emlaboratrios depesqui-
sa cientfica e nas unidades que
do apoio vigilncia epidemio-
lgica (FERREIRA eV1LA, 2001).
Os kits comerciais disponveis
atualmente baseiam-se no cresci-
mento fngico ou em provas de
produo enzimtica (WILLIAMS
eLEWIS, 2000). Os fungos que re-
querem identificao mais elabora-
da devem ser encaminhados a um
laboratrio de referncia (MAR-
SHALL, 1995).
Sistemas exclusivos
para identificao
de Candida albicans
Sendo a Candida albicans a
espcie de maior prevalncia em
materiais biolgicos, sua identifi-
cao rpida pelos sistemas a se-
guir uma alternativa para as pro-
vas tradicionais declamidsporo e
tubo germinativo (FERREIRA e
V1LA,2001):
a) Albicans Sure (Clinical Stan-
dards Laboratories Inc. , Ran-
cho Domingues, CA, EUA):
apresenta um carto com
dois substratos para as enzi-
Passo Fundo, v. 9, n. 1, p. 27-33, jan./jun. 2004
mas B-galactosaminidase eL-
prolina amino-peptidase. Rea-
es positivas aos dois subs-
tratos indicam C. albicans. O
teste tem sensibilidade de
99%eespecificidade de 100%
(FERRE IRA eV1LA, 2001);
b) Bacti-Card-Candida (Remel,
Lenexa, Kansas, EUA);
c) Murex Candida albicans CA
50 (Murex Diagnostic Inc.,
EUA);
d) Bichro-Iatex albicans (Fur-
mouze, Frana): identifica em
cinco minutos, por reao
enzimtica, culturas deCan-
dida albieans comespecifici-
dade de99,8% esensibilidade
de 99,7%. Como emtodos os
outros testes, necessrio o
isolamento primrio das cul-
turas nas quais pode ser apli-
cado, sem a necessidade de
repiques. ummtodo def-
cil aplicao e os resultados
positivos so claramente
identificados (FERREIRA e
V1LA,2001);
e) MIS (Microbial ID Inc., Dina-
marca).
Tcnicas moleculares
An l i s e d e DNA aps
t r at amen t o c o m en zi mas d e
r es t r i o
A tcnica de hibridizao do
DNA por ligao de sondas mole-
culares ao DNA do microrganismo
em estudo tem se constitudo nu-
ma ferramenta valiosa para rpida
deteco e identificao dos rni-
croorganismos decrescimento len-
to, como as micobactrias eos fun-
gos (MURRA Y et al., 2000). Quan-
do essa tcnica efetuada emcon-
dies deextremo rigor, a deteco
do cido nuclico na amostra pode
ser altamente especfica (JAWETZ
et al., 1998). As cepas deleveduras
expostas a agentes antifngicos
freqentemente mostram caracte-
res fisiolgicos alterados. A prova
deDNA-DNA complementar pode
ser utilizada para identificar essas
cepas (OLSEN, 1990a).
PCR (po l i mer as e c hai n
r eac t i o n )
As maiores vantagens da
tipagem baseada emPCR so ne-
cessidade depouco material inicial,
aplicao universal, rapidez esim-
plicidade deexecuo (BARTIE et
al., 2001; COOPER, 2001).
No estudo de Ahmad et al.
(2002) compacientes portadores de
candidase hematgena, aidentifi-
cao das espcies deCandida pelo
mtodo deseminested PCR (snPCR)
apresentou 99% de acurcia. Foi
possvel identificar C. albieans, C.
parapsilosis, C. glabrata eC. tro-
piealis, fato quefacilita aseleo de
agentes teraputicos apropriados.
MLST (mu l t i l o c u s s equ en c e
t ypi n g )
Deficincias nos mtodos de
tipagem baseados no fentipo leva-
ram ao desenvolvimento demto-
dos de genotipagem microbiana
por seqenciamento de DNA. Ca-
ractersticas como praticidade de
uso ebaixo custo so importantes
tambm para a aplicabilidade do
mtodo (OLIVE eBEAN, 1999).
A tipagem por seqencia-
mento demultilcus um mtodo
altamente resolutivo que utilizao
seqenciamento de aproximada-
mente 450 a 500 pares debases de
fragmentos internos (loei)degenes
essenciais (housekeeping genes). A
maior vantagem desse mtodo
que os dados obtidos podem ser
facilmente comparados, permitin-
do sua troca via internet para uso
em epidemiologia global (BOUG-
NOux, MORAND, d'ENFERT,2002).
Outros testes
Na classificao deleveduras,
outros testes podem ser utilizados,
como produo de amido extrace-
lular, resistogramas, crescimento
emaltas temperaturas, produo
de amnia, produo vigorosa de
cido, tolerncia a 10% de cido
31
actico, hidrlise da arbutina, re-
duodocloretotrifenil tetrazlico
(TTC), produo das exoenzirnas
fosfolipase eproteinase eprovas
indiretas comanticorpos fluores-
centes (LACAZet al., 1998; OLI-
VEIRA et aI., 1998; CANDIDO,
AZEVEDO,KOMESU, 2000;FER-
REIRA eVILA, 2001). Tambm
podem ser feitas sorotipagem e
tipificao quanto sensibilidade
aosantifngicos, denominada "an-
tifungotipagem" (LACAZ et al.,
1998).Corantes vitais, comoodia-
cetato defluorescena eobrometo
deetdio, utilizados comfinalidade
diagnstica, demonstram maior
rapidez queocultivo erevelam-se
importantes indicadores daviabi-
lidade fngica (TRABULSI et al.,
1999).
Co n s i d er a es f i n ai s
As infeces por Candida sp
tmgerado grande interesse por
parte dos pesquisadores por se
manifestarem empacientes hospi-
talizados comcncer eimunode-
primidos. surgimento devarie-
dades deCandida sp resistentes s
drogas, levando aquadros deinfec-
es sistmicas, criou uma maior
necessidade de desenvolvimento
de mtodos fidedignos de isola-
mento eidentificao. Muitos pro-
cedimentos laboratoriais diferen-
tes esto disponveis para identifi-
caodaCandida sp, eaopopor
umououtromtododepende, prin-
cipalmente, donvel deidentifica-
odesejado, donmero deamos-
tras examinadas edadisponibilida-
deeconmica.
A reao emcadeia da poli-
meras e(PCR) ummtodo que
oferece uma criteriosa erpida
identificao daCandida sp e, com
o aprimoramento de tcnicas
moleculares, pode-se prever que
seu uso ser abasepara ostestes
nofuturo.
32
Ab s t r ac t
HN dissemination andprolon-
ged survival of AIDS patients
pointed oral candidiasis as an
important problemfor oral medi-
cine. The increment of elderly
population andlargeuseofimmu-
nosupressive therapy have also
contributed for this factoTheaim
of this work was to present aIite-
rature review about laboratory
methods foridentiyingCandidasp
associated tooral candidiasis. This
identification canbebasedonmor-
phologic, biochemical and antige-
nicfeatures ofthe microorganism.
Laboratories have to dispense
simple, objective and modern
diagnosticmethods, sincefungi can
beused as amodel for understan-
dingmolecular andgeneticproces-
ses common to every being.
Key words: Candida sp, oral can-
didiasis, diagnostic methods
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Endereo para correspondncia
NadiescaMariaLazzariMiotto
ProgramadeDoutoradoemEstomatologia Clnica
ServiodeEstomatologia
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2
andarHospital
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