3

Membranas Biolgicas



3.1
Os limites das clulas


Figura. 3.1 Estrutura de uma clula animal. (modificada de Biologia Molecular da
Clula, 4 edio, Alberts, B., Bray, D., Lewis,J., Artmed editora, 2004.)
Os limites das clulas so formados por membranas celulares biolgicas, as
barreiras que definem o interior e o exterior de uma clula (Berg et al., 2004,
Johnson et al., 2004). Estas barreiras impedem que as molculas geradas dentro da
clula vazem para fora e que molculas indesejadas se difundam para dentro. A
membrana plasmtica engloba a clula e mantm as diferenas essenciais entre o
citosol e o ambiente extracelular. A espessura da maioria das membranas est
compreendida entre 6 nm e 10 nm. No interior de clulas eucariticas, as
membranas do retculo endoplasmtico, o aparelho de Golgi, a mitocndria e
outras organelas limitadas por membranas mantm as diferenas caractersticas
entre os contedos de cada organela e os do citosol.
A especializao funcional no decurso da evoluo esteve intimamente
ligada formao dos compartimentos intracelulares. Sistemas especficos
evoluram para permitir o endereamento de protenas selecionadas para dentro de
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determinadas membranas internas, ou atravs delas e, da, para organelas
especficas. Membranas internas e externas possuem caractersticas essenciais em
comum.
As membranas so to diversas em estrutura quanto em funo, servem para
inmeras funes indispensveis vida. Apesar das suas funes diferenciadas,
todas as membranas biolgicas tm uma estrutura geral comum: cada uma um
filme muito fino de molculas lipdicas e proticas mantidas unidas
principalmente por interaes no covalentes. As membranas so estruturas
dinmicas nas quais protenas nadam em um mar de lipdeos. Os componentes
lipdicos da membrana formam uma barreira de permeabilidade. As protenas
componentes agem como um sistema de bombas e canais que dotam membrana
a permeabilidade seletiva. As molculas proticas que atravessam a bicamada
lipdica servem de mediadores para praticamente todas as outras funes da
membrana. So necessrias muitas protenas de membrana diferentes para que
uma clula possa funcionar e interagir com o ambiente que a envolve. De fato,
estima-se que aproximadamente 30% das protenas que so codificadas no
genoma de uma clula animal sejam protenas de membrana.

3.2
A Bicamada Lipdica

Os lipdeos so biomolculas insolveis em gua, muito solveis em
solventes orgnicos, tal como o clorofrmio. Eles tm varias funes biolgicas:
servem como alimento energtico, como armazenamento altamente concentrado
de energia, como molculas sinalizadoras e como componentes estruturais de
membranas. Notoriamente, dentre as propriedades mais significativas dos
lipdeos, esto suas propriedades hidrfobas. Estas propriedades so devidas
principalmente ao seu componente principal, os cidos graxos. cidos graxos so
cadeias hidrocarbonadas, com vrios comprimentos e grau de insaturao, que
terminam em carboxilas, grupamentos cidos. Em sistemas biolgicos, no entanto,
os cidos graxos contm um nmero par de tomos de carbono, tipicamente entre
14 e 24. Aqueles com 16 e 18 carbonos so os mais comuns.
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Figura 3.2 Trs vises de uma membrana celular. (A) Uma micrografia eletrnica da
membrana plasmtica de uma clula vermelha do sangue vista numa seo transversal
(B e C). Vises bi e tridimensionais da membrana celular. (modificada de Biologia
Molecular da Clula, 4 edio, Alberts, B., Bray, D., Lewis,J., Artmed editora, 2004)
Os fosfolipdeos so abundantes em todas as membranas biolgicas. Uma
molcula de um fosfolipdeo feita de quatro tipos de componentes: cidos
graxos, uma estrutura qual se prendem estes cidos, um fosfato e um lcool
unido ao fosfato. As cadeias dos cidos graxos fornecem uma barreira hidrfoba,
ao passo que o restante da molcula tem propriedades hidrfilas que permitem a
interao com o meio aquoso. Os fosfolipdeos derivados do glicerol so
chamados de fosfoglicerdeos. Um fosfoglicerdeo constitudo de um glicerol, ao
qual se prendem duas cadeias de cidos graxos e um lcool fosforilado. Os
fosfolipdeos encontrados nas membranas celulares so modificados no grupo
fosfato.
A bicamada lipdica ficou estabelecida definitivamente como a base
universal da estrutura das membranas celulares. facilmente visvel por meio de
microscopia eletrnica, apesar de que tcnicas especializadas, como difrao de
raios X e microscopia eletrnica de criofratura, sejam necessrias para revelar os
detalhes da sua organizao. A estrutura de bicamada pode ser atribuda s
propriedades especiais das molculas lipdicas, que fazem com que elas se
agrupem espontaneamente em camadas duplas, mesmo sob condies artificiais
simples.
A formao das membranas uma conseqncia da natureza anfiptica
anfiflica das molculas, ou seja, molculas que contm tanto uma poro
hidrfila quanto uma hidrfoba. Os fosfolipdeos so comumente ilustrados
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contendo duas partes, um corpo hidroflico e uma cauda hidrofbica. Os
fosfolipdeos geralmente agrupam-se em trs formas distintas em soluo. As
lminas de bicamadas, as micelas vesculas com um interior hidrofbico e os
lipossomos vesculas com interior aquoso (Fig. 3.3).

Figura 3. 3 Representao das seces da estrutura de micela, lipossoma e bicamada
de fosfolipdeos. (http://bioweb.wku.edu/courses/biol22000/2Bonds/images/F02-20.JPG)
A estrutura favorecida para a maioria dos fosfolipdeos e glicolipdeos em
meios aquosos uma estrutura de bicamada, em vez de uma micela. O motivo
que as cadeias de cidos graxos de um fosfolipdeo ou glicolipdeo so muito
volumosas para se adaptarem no interior de uma micela. Em contraste, os sais de
cidos graxos - tais como o palmitato de sdio, um constituinte do sabo - formam
micelas prontamente. A formao de bicamadas em vez de micelas de
importncia biolgica crtica. Uma micela uma estrutura limitada, geralmente
com menos de 20 nm de dimetro. Por outro lado, uma lmina bimolecular pode
ter dimenses macroscpicas, de at um milmetro 10
6
nm. Fosfolipdeos e
molculas similares so constituintes importantes de membranas, porque formam
prontamente extensas lminas bimoleculares. A formao de bicamadas lipdicas
um processo de automontagem. Em outras palavras, a estrutura do agregado
intrinsecamente dependente da estrutura das molculas lipdicas constituintes.
O crescimento de bicamadas lipdicas a partir de fosfolipdeos um
processo rpido e espontneo na gua. As interaes hidrfobas so as principais
foras diretoras da formao de bicamadas lipdicas. Alm disso, a fora atrativa
de van der Waals entre as caudas hidrocarbonadas favorecem o empacotamento
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das caudas. Finalmente, h as atraes eletrostticas e as pontes de hidrognio
entre as cabeas polares e molculas de gua. Deste modo, as bicamadas lipdicas
so estabilizadas por todo o conjunto das foras que participam das interaes
moleculares dos sistemas biolgicos. Como as bicamadas lipdicas so mantidas
juntas por muitas interaes no covalentes de reforo predominantemente
hidrfobas, elas so estruturas cooperativas. Estas interaes hidrfobas tm trs
conseqncias biolgicas significativas: (1) as bicamadas lipdicas tm uma
tendncia inerente a serem extensas; (2) as bicamadas lipdicas tendem a fechar-se
sobre si mesmas para que no haja bordas com cadeias hidrocarbonadas expostas,
o que resulta na formao de compartimentos e (3) as bicamadas lipdicas so
auto-selantes porque um orifcio em uma bicamada energeticamente
desfavorvel.

3.3
A mobilidade dos lipdeos na membrana

As membranas plasmticas no so estruturas rgidas, estticas. Pelo
contrrio, os lipdeos e muitas protenas de membrana esto em constante
movimento lateral, em um processo denominado de difuso lateral,
proporcionando uma fluidez membrana. O coeficiente de difuso dos lipdeos
em vrias membranas em torno de 1 m
2
s
-1
. Esta velocidade significa que uma
molcula lipdica pode se locomover de uma extremidade de uma bactria para
outra em um segundo. A ordem de grandeza do coeficiente de difuso observado
indica que a viscosidade da membrana cerca de cem vezes maior do que a da
gua, bem prxima do azeite de oliveira.
Por outro lado, as protenas variam muito em sua mobilidade lateral.
Algumas protenas so quase to mveis quanto os lipdeos, ao passo que outras
so virtualmente imveis. Os lipdios tambm podem girar em torno de seu
prprio eixo, apresentar movimentos de flexo por causa das cadeias de
hidrocarbonetos e migrar de uma monocamada para outra. Embora a difuso
lateral possa ser rpida, a rotao espontnea de lipdeos de uma face de uma
membrana para a outra um processo bem lento. O deslocamento de uma
molcula de uma superfcie da membrana para a outra chamado de difuso
transversa, ou flip-flop. Uma molcula de fosfolipdeo leva cerca de 10
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mais
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tempo para fazer flip-flop atravs de uma membrana do que para se difundir por
uma distncia de 50 na direo lateral. As barreiras de energia livre para difuso
transversa de molculas de protenas so ainda maiores do que para lipdeos,
porque as protenas tm regies polares mais amplas. De fato, no foi observada a
difuso transversa de uma molcula de protena.
O colesterol, abundante na estrutura de membranas de clulas animais, um
lipdeo com uma estrutura bem diferente da dos fosfolipdeos. um lipdeo com
ncleo esteride, constitudo de quatro anis hidrocarbonados ligados. Uma cauda
hidrocarbonada est ligada em uma extremidade do esteride, e uma hidroxila na
outra. Nas membranas, a molcula orientada paralela s cadeias de cidos
graxos dos fosfolipdeos, e a hidroxila interage com as cabeas de fosfolipdeos
prximas.

3.4
O Modelo do Mosaico Fluido


Figura 3. 4 Modelo em mosaico fluido (Singer, S. J.; Nicolson, G. L., Science 175: 723,
1972.) http://lamp.tu-graz.ac.at/~hadley/nanoscience/week4/membrane.jpg.
Com base nas propriedades dinmicas das protenas nas membranas, S.
Jonathan Singer e Garth Nicolson propuseram, em 1972, o conceito de um modelo
em mosaico fluido para a organizao global das membranas biolgicas (Fig. 3.4).
A idia do modelo organizar as membranas como solues bidimensionais de
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lipdeos orientados e de protenas globulares. A bicamada lipdica tem um duplo
papel: um solvente para protenas integrantes de membrana e tambm uma
barreira de solubilidade. As protenas de membrana so livres para difundirem
lateralmente na matriz lipdica, a menos que sejam restritas por interaes
especiais.
As protenas de membranas podem ser classificadas como sendo perifricas
ou integrantes, dependendo da dissociabilidade da protena. As protenas
integrantes de membrana interagem amplamente com as cadeias lipdicas. A
maior parte das protenas integrantes de membrana conhecidas atravessa a
bicamada lipdica. As protenas perifricas de membranas ligam-se primariamente
s cabeas polares dos lipdeos, por interaes eletrostticas e pontes de
hidrognio. Estas interaes polares podem ser rompidas pela adio de sais ou
por alterao do pH.
No obstante a variedades de tipos de membranas, algumas caractersticas
comuns das membranas podem ser enunciadas:
(1) As membranas so constitudas principalmente de lipdeos e protenas.
Sua proporo de massas vai de 1:4 a 4:1. As membranas tambm contm
glicdeos que se ligam aos lipdeos e s protenas;
(2) Os lipdeos de membranas so molculas relativamente pequenas que
tem tanto uma poro hidrfila quanto uma hidrfoba. Estes lipdeos formam
espontaneamente bicamadas fechadas em meios aquosos. Estas bicamadas
lipdicas so barreiras ao fluxo de molculas polares;
(3) Protenas especficas exercem funes distintas nas membranas. Elas
funcionam como bombas, canais, receptores, transformadores de energia e
enzimas. As protenas de membrana so embutidas em bicamadas lipdicas, as
quais criam ambientes adequados a sua ao;
(4) As membranas so montagens no covalentes. As molculas de
protenas e de lipdeos que as constituem so mantidas juntas por muitas
interaes no covalentes, interaes que so cooperativas;
(5) As membranas so assimtricas. As duas faces das membranas
biolgicas sempre diferem uma da outra;
(6) As membranas so estruturas fluidas. As molculas lipdicas difundem-
se rapidamente no plano da membrana, assim como as protenas, a menos que
sejam ancoradas por interaes especficas. Em contraste, as molculas de
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lipdeos e protenas no giram facilmente atravs da membrana. As membranas
podem ser consideradas como solues bidimensionais de protenas e lipdeos
orientados.

3.5
Bombas e Canais de Membrana

A bicamada lipdica das membranas biolgicas intrinsecamente permevel
a ons e molculas polares. Contudo, sua permeabilidade seletiva conferida por
duas classes de protenas de membrana, as bombas e os canais. Abaixo temos uma
ilustrao da bomba de Na
+
-K
+
ATPase.

Figura 3. 5 Bomba de Na
+
-K
+
ATPase. (modificada de Biologia Molecular da Clula, 4
edio, Alberts, B., Artmed editora, 2004.)
As bombas utilizam uma fonte de energia livre como o ATP ou a luz para
impulsionar o transporte termodinamicamente desfavorvel de ons ou molculas.
A ao das bombas um exemplo de transporte ativo. A concentrao de K
+

tipicamente de 10 a 20 vezes maior no interior celular que no exterior, enquanto
que com Na
+
ocorre o inverso. Estas diferenas de concentrao so mantidas por
uma bomba chamada de bomba de Na
+
-K
+
ATPase ou, simplesmente, de bomba
de Na
+
, que encontrada na membrana plasmtica de todas as clulas animais.
A bomba de Na
+
, K
+
-ATPase opera como um antiporte, bombeando Na
+

ativamente para fora da clula contra seu acentuado gradiente eletroqumico, e
bombeando K
+
para o interior. Devido ao fato de a bomba hidrolisar ATP para
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bombear Na
+
para o meio extracelular e K
+
para o meio intracelular, ela tambm
conhecida como uma bomba Na
+
, K
+
-ATPase. O gradiente de Na
+
produzido pela
bomba dirige o transporte da maioria dos nutrientes para clulas animais e
tambm apresenta um papel fundamental na regulao do pH citoslico.
A bomba tambm regula o volume celular pelos seus efeitos osmticos,
evitando assim o rompimento de muitas clulas animais. Ela controla a
concentrao de soluto dentro da clula regulando, portanto, a osmolaridade -
tonicidade - que pode fazer uma clula murchar ou inchar.
Uma vez que a bomba Na
+
-K
+
move trs ons carregados positivamente para
o exterior celular para cada dois que bombeia para dentro, ela eletrognica. Esse
efeito eletrognico da bomba raramente contribui mais do que 10% para o
potencial de membrana. Sendo os outros 90% dependentes da bomba Na
+
-K
+

apenas indiretamente.
Canais inicos, por outro lado, permitem aos ons flurem rapidamente pelas
membranas num sentido termodinamicamente favorvel. A ao dos canais ilustra
o transporte passivo ou a difuso facilitada. As protenas de canal formam poros
hidroflicos atravs das membranas no estado conformacional aberto. Os grupos
polares parecem revestir a parede do poro, enquanto que as cadeias de
aminocidos hidrofbicos interagem com a bicamada lipdica. O poro afunila para
dimenses atmicas em uma regio em que a seletividade inica do canal
grandemente determinada.
Figura 3.6 Canal inico tpico flutuando entre as conformaes aberta e fechada.
(modificada de Biologia Molecular da Clula, quarta edio, Alberts, B. et al., Artmed
editora, 2004.)
Duas propriedades importantes distinguem canais inicos de simples poros
aquosos. Primeiro, eles mostram seletividade a ons, permitindo a passagem de
alguns ons inorgnicos, mas no de outros. A segunda distino importante entre
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os canais inicos e os poros aquosos simples que os canais inicos no esto
abertos continuamente, eles so controlados, o que lhes permite abrir por um
breve tempo e ento fechar novamente.
Os dois fatores que determinam se uma molcula cruzar uma membrana
so: a permeabilidade da molcula em uma dupla camada lipdica e a
disponibilidade de uma fonte de energia. Determinadas molculas podem passar
pela membrana porque se dissolvem na bicamada lipdica. Tais molculas so
denominadas de lipfilas. Tais molculas passaro atravs de uma membrana a
favor de seu gradiente de concentrao, num processo dito de difuso simples. De
acordo com a segunda lei da termodinmica, as molculas movem-se
espontaneamente de uma regio de maior concentrao para uma de menor
concentrao. Portanto, um aumento de entropia impulsiona o transporte atravs
da membrana.
Na maioria dos casos um canal inico abre em resposta a um estmulo
especfico. Os principais estmulos conhecidos por causar a abertura de canais
inicos so: mudana de voltagem atravs da membrana, nos canais controlados
por voltagem, um estresse mecnico, nos canais controlados mecanicamente ou a
ligao de um ligante, nos canais controlados por ligantes. O ligante pode ser
tanto um mediador extracelular, especificamente um neurotransmissor, canais
controlados por transmissor, ou um mediador intracelular, como um on, canais
controlados por ons, ou um nucleotdeo, canais controlados por nucleotdeo.
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