UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS

CENTRO DE CINCIAS AGRRIAS

DOUTORADO EM PROTEO DE PLANTAS


TTULO DO PROJETO:

ESTUDO DO COMPORTAMENTO BIOLGICO E FISIOLGICO DE ISOLADOS DE
Curvularia eragrostidis OBTIDOS DO INHAME (Dioscorea cayennensis Lam.) NO ESTADO
DE ALAGOAS

Coordenador (es): Prof.Dr. Ricardo Brainer Martins
Instituio :Universidade Federal de Alagoas- Campos Arapiraca
Vinculao : Professor de Fitopatologia

Coordenador (es): Prof. Dr. Edna Peixoto da Rocha Amorim
Instituio :Universidade Federal de Alagoas
Vinculao : Professora de Fitopatologia

Coordenador (es): Prof.Dr. Maria de Ftima Silva Muniz
Instituio :Universidade Federal de Alagoas
Vinculao : Professora de Fitopatologia

Colaboradores: Discentes

Nome : Izael Oliveira Silva
Instituio :Universidade Federal de Alagoas
Participao no Projeto: Elaborao, coleta, identificao dos isolados e execuo do projeto.

Nome : Nelson Augusto do Nascimento Jnior
Instituio : Universidade Federal de Alagoas
Participao no projeto: Elaborao, coleta, identificao dos isolados e execuo do projeto.

Nome : Rui Fernando da Silva
Instituio : Universidade Federal de Alagoas
Participao no projeto: Elaborao, coleta, identificao dos isolados e execuo do projeto.
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1. Resumo do projeto
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O inhame (Dioscorea cayennensis Lam.), constitui um dos principais alimentos das regies
tropicais (MOURA, 1997). Na Amrica Latina, o Brasil o principal produtor (FAO, 2005), com os
Estados de Alagoas, Pernambuco e Paraba destacando-se a nvel nacional. A ocorrncia de doenas
limitante da produo de inhame, em que se destaca a queima das folhas, causada por Curvularia
eragrostidis (Henn.) Meyer (MAFRA, 1986; MOURA, 1997; SANTOS, 1996). Essa enfermidade
caracteriza-se por manchas foliares necrticas de colorao marrom-escuras, frequentemente
circundadas por um halo amarelo, que prejudica o desenvolvimento das plantas e pode levar ao
completo desfolhamento, reduzindo drasticamente a produo de tberas devido a diminuio da
rea fotossinttica (EMATER/IPA, 1985; MOURA, 1997; SANTOS, 2007).
Apesar da importncia da queima das folhas do inhame, existem poucos estudos no Brasil sobre as
caractersticas biolgicas e fisiolgicas desse fungo. Nesse sentido, torna-se necessria a realizao
de estudos que visem a maior produo de propgulos de C. eragrostides em meio de cultura, o que
facilitaria sua utilizao em pesquisas posteriores com esse fitopatgeno.
Este trabalho tem como objetivo caracterizar cinco isolados de Curvularia eragrostidis que
causam queima de folhas em inhame. Quanto ao crescimento micelial, produo de condios em
diferentes regimes de luminosidade e em trs substratos naturais, e a compatibilidade vegetativa
entre os isolados.




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2. Justificativa de Execuo do Projeto
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O inhame (Dioscorea cayennensis Lam.), constitui um dos principais alimentos das regies
tropicais (MOURA, 1997). Na Amrica Latina, o Brasil o principal produtor (FAO, 2005), com
os Estados de Alagoas, Pernambuco e Paraba destacando-se a nvel nacional. Segundo
OLIVEIRA (2010), o inhame tem desempenhando importante papel scio-econmico no
Nordeste do Brasil, especialmente nos Estados da Paraba, Pernambuco, Alagoas, Bahia e
Maranho, considerados os maiores produtores. O estado de Alagoas responsvel pela quinta
maior produo do pas, com 27,172 t e rea plantada de 2.292 ha. Os principais municpios
produtores so Ch Preta, Paulo Jacinto, Viosa (Vale do Paraba), Taquarana e Unio dos
Palmares (IBGE2008).
A ocorrncia de doenas limitante da produo de inhame, em que se destaca a queima
das folhas, causada por Curvularia eragrostidis (Henn.) Meyer (MAFRA, 1986; MOURA, 1997;
SANTOS, 1996). Essa enfermidade caracteriza-se por manchas foliares necrticas de colorao
marrom-escuras, frequentemente circundadas por um halo amarelo, que prejudica o
desenvolvimento das plantas e pode levar ao completo desfolhamento, reduzindo drasticamente a
produo de tberas devido a diminuio da rea fotossinttica (EMATER/IPA, 1985; MOURA,
1997; SANTOS, 2007.).
Embora a queima das folhas tenha sido reportada pela primeira vez no Brasil h mais de 30
anos (MEDEIROS e AQUINO, 1964), pouco se conhece sobre a biologia e fisiologia desse
fitopatgeno, principalmente quando se considera o Vale do Paraba, a principal regio produtora
do Estado de Alagoas.
O desenvolvimento fngico influenciado por vrios fatores nutricionais e ambientais,
como fontes de nutrientes, relao carbono/nitrognio, potencial solvel do meio, luminosidade,
umidade, aerao e pH (Cochrane, 1958). Geralmente, a esporulao favorecida por condies
nutricionais adversas ao crescimento vegetativo, assim como, condies ambientais favorveis
para o crescimento vegetativo podem ser inadequadas a esporulao, ou seja, no existem
condies universais para o crescimento e esporulao de fitopatgenos (Pea et al., 1997).
Portanto, estudos envolvendo tcnicas de produo de propgulos vegetativos e reprodutivos,
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assexuais ou sexuais so importantes por propiciarem informaes consistentes sobre o cultivo
de fungos (Lilly e Barnett, 1951).
Apesar da importncia da queima das folhas do inhame, existem poucos estudos no Brasil
sobre as caractersticas biolgicas e fisiolgicas desse fungo. Nesse sentido, torna-se necessria a
realizao de estudos que visem a maior produo de propgulos de C. eragrostides em meio de
cultura, o que facilitaria sua utilizao em pesquisas posteriores com esse fitopatgeno.

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3. Objetivos e Metas
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Objetivos

Geral:
O presente trabalho tem como objetivo o estudo do comportamento biolgico e
fisiolgico de isolados de C. eragrostides obtidos de inhame (D. cayennensis Lam.) no
estado de Alagoas.

Especficos:

Analisar a compatibilidade vegetativa entre os isolados.
Analisar o desenvolvimento de C. eragrostides em diferentes meios de cultura, avaliando
o crescimento micelial, peso micelial e a esporulao.
Analisar a influncia dos diferentes meios de cultura testados sobre a capacidade
fitopatognica dos isolados de C. eragrostides.








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4. Metodologia e Estratgia de Ao
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O trabalho ser conduzido no laboratrio de Fitotecnia e Fitossanidade do Centro de
Cincias Agrrias da UFAL, Rio Largo/AL.

1. Fitopatgeno

Sero utilizados cinco isolados do fungo, obtidos de folhas de inhame apresentando
sintomas da doena, oriundas de reas de plantio do estado de Alagoas, localizadas nos
municpios de Viosa (CE-1 e CE-2), Ch Preta (CE-3 e CE-4) e Paulo Jacinto (CE-5).
Em todos os experimentos, o fungo ser cultivado inicialmente em BDA (batata, 200g;
dextrose, 20g; gar, 17g e gua destilada, 1000mL) durante 7 dias, temperatura ambiente, em
claro contnuo.

2. Compatibilidade vegetativa entre os isolados de Curvularia eragrostidis

No estudo da compatibilidade vegetativa entre os isolados de C. eragrostidis, discos de
5mm de dimetro de meio de cultura contendo miclio do fungo sero transferidos para placas
contendo BDA, posteriormente pareados em posies opostas e equidistantes um do outro. Sero
realizadas quatro repeties. A incubao ser feita temperatura de 25 2 C, em regime de luz
alternada com fotoperodo de 12 h. Aps a incubao durante 10 dias, as placas sero avaliadas
macroscopicamente observando-se a presena ou no de zonas de averso na regio de contato
micelial (Serra, 2005).

3. Influncia de diferentes meios de cultura no desenvolvimento e patogenicidade de
Curvularia eragrostidis.

No estudo da influncia de diferentes meios de cultura sobre C. eragrostidis sero
utilizados os seguintes meios de cultura: BDA (batata, 200g; dextrose, 20g; gar, 17g; gua
destilada, 1.000mL), AA (flocos de aveia, 75g; gar, 17g; gua destilada, 1.000mL) IDA
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(inhame, 200g; dextrose, 20g; gar, 17g; gua destilada, 1.000mL) e FIDA (folhas de inhame,
100g; dextrose, 20g; gar, 17g; gua destilada, 1.000mL).
Na avaliao do crescimento micelial e esporulao de isolados de C. eragrostidis, discos
de meio de cultura contendo estruturas do fungo sero transferidos individualmente para o centro
de placas de Petri, contendo 20 mL, aproximadamente, dos diferentes meios testados, enquanto
para a avaliao do peso seco, os discos sero transferidos para Erlenmeyers, contendo os
diferentes meios lquidos (sem adio de gar). Em seguida, as placas sero incubadas
temperatura ambiente, mantidas em alternncia luminosa.
A avaliao do crescimento micelial consistir na medio diria do dimetro da colnia,
em dois sentidos diametralmente opostos, com rgua milimetrada, obtendo-se a mdia para cada
repetio. As avaliaes sero realizadas at que o fungo atinja o dimetro completo da placa em
qualquer repetio ou tratamento. Os dados obtidos sero comparados estatisticamente e sero
elaboradas as curvas de crescimento de C. eragrostidis. A taxa de crescimento expressa em
mm/h ser obtida atravs da anlise dos dados por regresso linear simples.
Aps 20 dias da implantao do experimento ser estimada a esporulao de C.
eragrostidis com o auxlio de uma cmara de Neubauer. As suspenses sero preparadas pela
adio de 20mL de gua destilada esterilizada a cada placa, em seguida, efetuar-se- a raspagem
da colnia utilizando escovas de cerdas macias e a filtragem em camada de gaze dupla.
Aps a determinao da esporulao, ser realizado o teste de patogenicidade, que
consistir na asperso das suspenses, com concentraes ajustadas para 1,0 x 10
4
, em folhas de
inhame da Costa, com 80 dias de cultivo, as quais sero mantidas em cmara mida por 72
horas. A severidade da doena ser determinada pela porcentagem de rea foliar lesionada em
cada folha, com o auxlio de uma escala diagramtica variando de 0 a 32% de rea foliar
lesionada (MICHEREFF et al., 2000).
Para determinao do peso seco, ao final de 20 dias de incubao, o meio contendo o
crescimento fngico ser filtrado em tecido de nylon e a massa micelial retida na malha,
colocada em recipiente de alumnio previamente tarado. O material ser mantido em estufa a
40C, durante 72 horas, aps o qual ser procedida a pesagem.
O delineamento experimental ser inteiramente casualizado, em arranjo fatorial 5x4 (5
isolados de C. eragrostidis e 4 meios de cultura), com quatro repeties, sendo cada uma
constituda por uma placa de Petri ou Erlenmeyer. As mdias do ltimo dia de crescimento, taxa
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de crescimento, esporulao e peso seco sero comparadas utilizando-se o teste de Tukey, ao
nvel de 5% de probabilidade.
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5. Resultados e Impactos Esperados
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Atravs do comportamento fisiolgico (in vitro) do patgeno poderemos entender como
ele se comporta em diferentes meios de cultura, visto que o meio alternativo desenvolvido com
extrato de folha e tubrculo de inhame possa exercer no patgeno um melhor desenvolvimento
tanto em seu crescimento micelial e esporulao se comparados aos outros meios utilizados no
trabalho.
Durante a execuo dos trabalhos, os resultados sero divulgados por meio de
publicaes de artigos em peridicos de circulao nacional e/ou internacional e apresentao de
resumos em eventos tcnicos-cientficos nacionais e/ou internacionais.
.
6. Riscos e Dificuldades (mximo de 1/2 pgina)
______________________________________________________________________

Devido aos inmeros trabalhos em execuo no laboratrio de Fitopatologia/UFAL e ao pouco
espao na casa de vegetao para o plantio do inhame o teste de patogenicidade e a parte voltada
a epidemiologia ser dificultada, pois necessitaremos de plantas de inhame que no apresentem
os sintomas da pinta preta para podermos concluir o trabalho.
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8. Referncias Bibliogrficas
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COCHRANE, V.W. Physiology of fungi. New York: John Wiley & Sons, 1958. 438p.

EMATER/IPA. Sistemas de produo para car da costa: Agreste Setentrional, Agreste
Meridional e Mata Norte. Recife: Empresa de Assistncia Tcnica e Extenso Rural do Estado
de Pernambuco/Empresa Pernambucana de Pesquisa Agropecuria, 1985. 48p. (EMATER/IPA.
Srie Sistema de Produo. Boletim, 11).

FAO. FAOSTAT/ - Agricultural statistics database. Rome: World Agricultural Information
Centre, 2005. (http://faostat.fao.org/default.). Site visitado em 12/05/2012.

IBGE. SIDRA - Sistema IBGE de recuperao automtica. Rio de Janeiro: Instituto Brasileiro de
Geografia e Estatstica. Censo Agropecurio do Brasil, 1996. (http://www.sidra.ibge.gov.br -
verso 09/05/2005).

IBGE. SIDRA - Sistema IBGE de recuperao automtica. Rio de Janeiro: Instituto Brasileiro de
Geografia e Estatstica. Censo Agropecurio do Brasil: IBGE, 2008.
(http://www.sidra.ibge.gov.br) Site visitado em 12/05/2012.

LILLY, V.G.; BARNETT, H.L. Physiology of the fungi. New York: Mc Gram-Hill Book Co.
Inc., 1951. 464p.

MAFRA, R.C. Recomendaes tcnicas para o cultivo do car. Braslia: Centro Nacional de
Pesquisa de Hortalias - EMBRAPA, 1986. 15p.

MEDEIROS, A.G., AQUINO, M.L.N. Ocorrncia de Curvularia maculans (Bancroft) Boedijn
var. macrospora, nova variedade, em folhas de car (Dioscoreaceae) no Estado de Pernambuco.
Recife: Instituto de Pesquisas Agronmicas, 1964. 10p. (IPA. Boletim Tcnico, 7).
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MICHEREFF, S.J., MAFFIA, L.A. & NORONHA, M.A. Escala diagramtica para avaliao da
severidade da queima das folhas do inhame. Fitopatologia Brasileira, Braslia, v.24, n.4, p.174-
180, 2000.

MOURA, R.M. Doenas do inhame (Dioscorea cayennensis Lam. var. rotundata Poir). In:
KIMATI, H., AMORIM, L., BERGAMIN FILHO, A., CAMARGO, L.E.A., REZENDE, J.A.M.
(Eds.). Manual de fitopatologia: Doenas das plantas cultivadas. 3. ed. So Paulo: Ceres, 1997.
v.2, p.463-471.

OLIVEIRA, Francisca Joseanny Maia e. Tecnologia de Produo do Inhame (Dioscorea
cayennensis L.) pelo Sistema de Formao de mudas e Transplantio. Disertao (Mestrado em
Agronomia), Centro de Cincias Agrrias, Universidade Federal da Paraba, Areias, 2010.

PEA, M.D.; BERMAIN FILHO, A.; AMORIN, L. Avaliao de diferentes meios de cultura na
esporulao de Colletotrichum lindemuthianum, Phaeoisariopsis griseola e Alternaria sp.
Summa phytopathologica, Jaboticabal, v.23, n.2, p.181-183, 1997.

SANTOS, E.S. Inhame (Dioscorea spp.): aspectos bsicos da cultura. Joo Pessoa: EMEPA-
PB/SEBRAE, 1996. 158p.

SANTOS, E.S; CAZ FILHO, J.; LACERDA, J.T.; CARVALHO, R.A. Inhame (Dioscorea sp.)
Tecnologias de Produo e Preservao Ambiental. Tecnol. & Cin. Agropec., Joo Pessoa, v.1,
n.1, p.31-36, set. 2007.

SERRA, I.M.R.S. & SILVA, G.S. Caracterizao biolgica e fisiolgica de isolados de
Sclerotium rolfsii obtidos de pimenta no estado do Maranho. Fitopatologia Brasileira v.30. 61-
66p. 2005.

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9. Plano de Atividades
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As atividades de pesquisa sero desenvolvidas pelo bolsista de mestrado, com a colaborao de
outros pesquisadores da UFAL, nos laboratrios de Fitopatologia do Departamento de Fitotecnia
e Fitossanidade da Centro de Cincias Agrrias. As atividades de pesquisa sero conduzidas em
4 meses, de acordo com o seguinte cronograma:


Atividade (Meses)
Junho Julho Agosto Setembro
Coleta de isolados de Dioscorea cayennensis X X
Analisar a compatibilidade vegetativa entre os isolados. X X
Analisar o desenvolvimento de C. eragrostides em
diferentes meios de cultura,
X
Analisar a influncia dos diferentes meios de cultura
testados sobre a capacidade fitopatognica (virulncia)
dos isolados de C. eragrostides

X

Apresentao de trabalhos em eventos cientficos X
Elaborao e artigo para publicao X



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10. Oramento e Cronograma de Desembolso (mximo 1 pgina)
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A) Despesas de Custeio: 10.000,00
Construo de uma casa de Vegetao;
Viagens para coleta.