Perícias Criminais04

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169
Este material deve ser utilizado apenas como parmetro de estudo deste Programa. Os crditos deste contedo so dados aos seus respectivos autores

MDULO IV

NOES DE ODONTOLOGIA LEGAL

A identificao humana o assunto mais conhecido quando as pessoas so
questionadas acerca da medicina legal, e consequentemente da odontologia legal.
No entanto, ser observado ao longo do curso que a rea de atuao do cirurgio-
dentista na odontologia legal vasta, abrangendo inclusive a deontologia
odontolgica e a orientao profissional.
Outro ramo de grande atuao do perito-odontlogo a realizao de
percias para identificao de leses presentes no sistema estomatogntico
decorrentes de traumas diversos, que sero estudados no tpico de traumatologia e
marcas de mordida. Leses no sistema estomatogntico tambm so estudadas
para a avaliao de danos resultantes de erro profissional sejam eles decorrentes de
impercia, imprudncia ou negligncia.

Regulamentao da odontologia legal no Brasil

A odontologia legal faz parte do elenco de especialidades odontolgicas
dispostas na Resoluo CFO 63/2005 Consolidao das normas para
procedimentos nos Conselhos de Odontologia (no passado: Resoluo CFO 185/93
de 26 de abril de 1993), sendo que na seo VIII, artigos 63 e 64 disposta a sua
definio e as reas de competncia do especialista:

Art. 63. Odontologia Legal a especialidade que tem como objetivo a
pesquisa de fenmenos psquicos, fsicos, qumicos e biolgicos que podem atingir
ou ter atingido o homem, vivo, morto ou ossada, e mesmo fragmentos ou vestgios,
resultando leses parciais ou totais, reversveis ou irreversveis.

170

Pargrafo nico. A atuao da Odontologia Legal restringe-se a anlise,
percia e avaliao de eventos relacionados com a rea de competncia do
cirurgio-dentista podendo, se as circunstncias o exigirem, estender-se a outras
reas, se disso depender a busca da verdade, no estrito interesse da justia e da
administrao.

Art. 64. As reas de competncia para atuao do especialista em
Odontologia Legal incluem:
a) identificao humana;
b) percia em foro civil, criminal e trabalhista;
c) percia em rea administrativa;
d) percia, avaliao e planejamento em infortunstica;
e) tanatologia forense;
f) elaborao de:
1) autos, laudos e pareceres;
2) relatrios e atestados;
g) traumatologia odontolegal;
h) balstica forense:
i) percia logstica no vivo, no morto, ntegro ou em suas partes
em fragmentos;
j) percia em vestgios correlatos, inclusive de manchas ou
lquidos oriundos da cavidade bucal ou nela presentes;
l) exames por imagem para fins periciais;
m) deontologia odontolgica;
n) orientao odontolegal para o exerccio profissional; e,
o) exames por imagens para fins odontolegais.

O exerccio da odontologia no Brasil regulamentado pela Lei 5.081 de 24
de agosto de 1966. De maneira geral, todos os procedimentos odontolgicos que o
cirurgio-dentista pode realizar esto dispostos nessa lei. As percias odontolegais
esto elencadas nos procedimentos que o cirurgio-dentista devidamente habilitado

171

pode realizar. No entanto, necessrio adquirir esse conhecimento prvio, seja no
prprio curso de graduao (regular) ou em cursos de ps-graduao. Isso
demonstra a importncia da disciplina de Odontologia Legal e Deontologia no
currculo das faculdades de Odontologia.

ART.6 - Compete ao cirurgio-dentista:
I - praticar todos os atos pertinentes Odontologia, decorrentes de
conhecimentos adquiridos em curso regular ou em cursos de ps-graduao;
(...)
IV - proceder percia odontolegal em foro civil, criminal, trabalhista e em
sede administrativa;
(...)
IX - utilizar, no exerccio da funo de perito-odontlogo, em casos de
necropsia, as vias de acesso do pescoo e da cabea.

A odontologia legal teve sua primeira publicao oficial em 1898, sendo
oficialmente reconhecida como uma cincia que auxilia a medicina legal. No entanto,
o termo utilizado na poca foi Lart dentaire em Mdicine Legal A arte dentria
da medicina legal, e foi publicado por Oscar Amedo, que era um dentista cubano
de nascimento, mas radicado em Paris. Em sua obra, relatou detalhes da
identificao dos corpos pela comparao dos tratamentos odontolgicos ante e
post-mortem (antes e depois da morte) de indivduos carbonizados em um grande
acidente.
Em 1897, aconteceu um incndio de grandes propores em Paris em um
local denominado Bazar da Caridade, que era frequentado pela alta sociedade
parisiense, resultando na morte de mais de 100 pessoas, sendo que todas se
encontravam carbonizadas. Na poca, o cnsul do Paraguai na Frana sugeriu que
as arcadas dentrias presentes nos corpos fossem comparadas com os tratamentos
dentrios documentados pelos cirurgies-dentistas da poca, resultando em cerca
de 90% de corpos identificados (Rosenthal, 2001; Vanrell, 2002).

172

Dentro da rea criminal, o cirurgio-dentista atuar como perito criminal
oficial, em Estados que no existe o cargo de odontolegista. O perito criminal e o
odontolegista um funcionrio pblico concursado, sendo que o odontolegista deve
ser obrigatoriamente graduado em odontologia e ter seu diploma validado pelos
respectivos conselhos regionais e federais.

Percia em odontologia:

Percia na rea civil

Segundo Silva (2003), as percias na rea civil em odontologia ocorrem
principalmente em ressarcimentos de danos, como nos casos de responsabilidade
profissional ou erro profissional odontolgico, em casos de acidentes como o de
trabalho, de trnsito e em casos de agresso com comprometimento de rgos
dentrios. O arbitramento judicial de honorrios profissionais, a excluso de
paternidade, a estimativa da idade, principalmente em casos de adoo e a
avaliao de equipamentos odontolgicos para fins contratuais e avaliao de
seguradoras tambm podem ser realizados no mbito civil.

TTULO IX
Da Responsabilidade Civil
CAPTULO I
Da Obrigao de Indenizar
Art. 927. Aquele que, por ato ilcito (arts. 186 e 187), causar dano a outrem, fica
obrigado a repar-lo.
Pargrafo nico. Haver obrigao de reparar o dano, independentemente de
culpa, nos casos especificados em lei, ou quando a atividade normalmente desenvolvida
pelo autor do dano implicar, por sua natureza, risco para os direitos de outrem.
(...)
Art. 935. A responsabilidade civil independente da criminal, no se podendo
questionar mais sobre a existncia do fato, ou sobre quem seja o seu autor, quando estas
questes se acharem decididas no juzo criminal.

173

Art. 943. O direito de exigir reparao e a obrigao de prest-la transmite-se com a
herana.
CAPTULO II
Da Indenizao
Art. 944. A indenizao mede-se pela extenso do dano.
Pargrafo nico. Se houver excessiva desproporo entre a gravidade da culpa e o
dano, poder o juiz reduzir, equitativamente, a indenizao.
(...)
Art. 951. O disposto nos arts. 948, 949 e 950 aplicam-se ainda no caso de
indenizao devida por aquele que, no exerccio de atividade profissional, por negligncia,
imprudncia ou impercia, causar a morte do paciente, agravar-lhe o mal, causar-lhe leso,
ou inabilit-lo para o trabalho.

Percia na rea criminal

A percia na rea criminal aquela realizada quando h a suspeita de um
crime, ou para a identificao mdico ou odontolegal. Para um melhor entendimento,
necessria a definio de crime. Segundo o Cdigo Penal (Decreto-Lei n2.848, de
7 de dezembro de 1940), o crime s existir se uma lei anterior o definir:

PARTE GERAL
TTULO I
DA APLICAO DA LEI PENAL
(Redao dada pela Lei n 7.209, de 11.7.1984)
Anterioridade da Lei
Art. 1 - No h crime sem lei anterior que o defina. No h pena sem prvia
cominao legal. (Redao dada pela Lei n 7.209, de 11.7.1984)

174

Existem diversos tipos de crimes e consequentemente punies, no entanto
em odontologia, as percias na rea criminal podem ser realizadas para a
identificao humana, leses corporais, determinao de idade para indivduos sem
identificao e outros. Baseado na diviso elaborada por Silva (2003), as percias de
identificao podem ser realizadas no vivo, no cadver e nos esqueletos, e divididas
didaticamente em:

1) Identificao no vivo:
a) Presena de marcas de mordida na vtima ou no agressor;
b) Presena de marcas de mordida em alimentos e objetos;
c) Estimativa da idade pelos dentes de indivduos com idade no
comprovada.

2) Identificao no cadver:
a) Indivduos em adiantado estado de putrefao, afogados ou
carbonizados, nos quais a identificao dactiloscpica impossvel devido
degradao ou ausncias das polpas digitais;
b) Casos de acidentes em massa como catstrofes naturais, acidentes de
aviso, entre outros, nos quais inmeras pessoas perdem a vida ao mesmo tempo
dificultando o reconhecimento;
c) Casos de dilacerao de corpos.

3) Identificao no esqueleto:
a) Identificao da espcie animal;
b) Estimativa do sexo;
c) Estimativa da idade;
d) Estimativa da estatura;
e) Estimativa do bitipo.

175

4) Leses corporais traumatologia forense:
a) Anlise do comprometimento da face e dos dentes em crimes e
acidentes;
b) Anlise da leso em casos de erro profissional odontolgico.

5) Determinao da idade:
a) De criminosos sem idade comprovada;
b) De vtimas sem idade comprovada.

6) Percias de vestgios biolgicos e manchas encontradas na cena do
crime ou no corpo da vtima
a) Diagnsticos diferenciais de manchas de saliva, esperma, mucosidade
vaginal, sangue, etc.
b) Extrao e anlise do DNA de saliva do agressor encontradas no corpo
da vtima, ou em objetos deixados na cena do crime
c) Extrao e anlise do DNA de dentes ou seus fragmentos encontrados
na cena do crime

Percias na rea trabalhista

As percias trabalhistas so normalmente realizadas quando a face e a boca
so atingidas por algum tipo de acidente do trabalho e quando ocorrem doenas
profissionais com manifestaes bucais que sero melhores estudadas no captulo
de manifestaes bucais de doenas profissionais.

Percias administrativas

As percias administrativas podem ocorrer em duas vertentes, segundo Silva
(1998):
1) Processos ticos realizados nos Conselhos Regionais de Odontologia:
o cirurgio-dentista avaliado sobre seus comportamentos ticos durante o

176

exerccio da odontologia, aps uma denncia de comportamento antitico. A percia
realizada pela comisso de percias e avaliaes de tratamentos odontolgicos e
pela comisso de tica do Conselho Regional e/ou Federal.
2) Auditorias realizadas em convnios: So realizadas auditorias
constantes que convencionalmente so denominadas de percias. O cirurgio-
dentista que trabalha com convnios declara expressamente que est ciente da
realizao dessa percia no paciente em qualquer momento do tratamento
odontolgico, tanto no comeo, como no final do tratamento. Algumas empresas
realizam, obrigatoriamente, as percias antes e depois do tratamento sendo que
outras s a realizam aleatoriamente.
Como o curso voltado s percias criminais, a seguir ser detalhado
algumas tcnicas utilizadas para a identificao humana em odontologia legal.

Estimativa do sexo por meio do estudo do crnio

A estimativa do sexo pelos elementos do crnio tem sua importncia pericial,
principalmente quando em casos que o mesmo encontrado separado do corpo, ou
existem dvidas em relao anlise da plvis (Silva, 1997). As caractersticas
femininas e masculinas de um crnio podem ser resumidamente apresentadas no
quadro 10.

Estimativa da estatura por meio do estudo do crnio e dos dentes

A estimativa da altura por meio do estudo das dimenses dos dentes
realizada pelo mtodo descrito por Correa em 1920 e estudado para a populao
brasileira por Silva, em 1971 (apud Silva, 1997). A estatura real dos indivduos
brasileiros foi de 70% entre o valor mximo e mnimo calculado por esse mtodo,
demonstrando no ser uma tcnica confivel para essa estimativa. No entanto, Silva
(1997) recomenda que todos os achados antropolgicos podem ser significativos
para chegar concluso final da percia.

177

Quadro 10: Resumo das caractersticas da estrutura do crnio quanto ao
sexo. Adaptado de Silva, (1997) e Vanrell (2003).
Estrutura do crnio Sexo Masculino Sexo Feminino
Fronte Mais inclinada Mais vertical
Glabela Mais pronunciada Menos pronunciada
Arcos superciliares Mais salientes Menos salientes
Articulao frontonasal Angulosa Curva
Apfise mastoide Rugosas e proeminentes Pouco proeminentes
Apfise estiloide Mais longa e mais grossa Mais curva e mais fina
Cndilos occipitais Mais longos e estreitos Mais curtos e mais largos
Cndilos mandibulares Mais robustos Mais delicados
Peso mdio da
mandbula
80g 63g
Capacidade do crnio 1400cm
3
ou mais 1300 cm
3

A frmula desenvolvida aps diversas pesquisas realizadas por Carrea para
a estimativa da altura de um indivduo a seguinte:

Estatura mxima =a x 6 x 10 x 3,1416
2
sendo a =mensurao do arco em milmetros

Estatura mnima =a x 6 x 10 x 3,1416
2
sendo a =mensurao da corda em milmetros

178

Medidas realizadas:
Corda: Mensurou-se o incisivo central e lateral e os caninos inferiores
com o auxlio de um paqumetro, medindo-se a:
Arco: mesial do incisivo central at a distal do canino utilizando-se uma
fita mtrica.
Contraindicaes:
Dentes apinhados;
Dentes ausentes;
Essa metodologia deve ser mais pesquisada atualmente para
checagem de variaes que possam ocorrer de indivduo para indivduo. No entanto,
quando no se tem nenhuma informao sobre a altura dessa pessoa, utiliza-se de
todas as ferramentas, inclusive essa metodologia para a sua estimativa.

179

Exemplo:

ESTIMATIVA DA IDADE POR MEIO DO ESTUDO DO CRNIO E DOS
DENTES

A estimativa da idade normalmente realizada observando-se a estatura, o
peso, a presena de rugas, caracteres sexuais secundrios e pela anlise do
desenvolvimento sseo e dental.
Uma das metodologias a ser utilizada para a estimativa da idade pelo crnio
o fechamento de suturas cranianas. Dorandeu et al (2008). Recentemente
publicou um artigo para a estimativa de idade pelas suturas cranianas (Figura 28)
com desvio padro de 1 a 18,4 anos, como demonstra a tabela 2.

Estatura mxima =19 x 6 x 10 x 3,1416 =1790,712 mm ou 1,79m
2
sendo a =mensurao do arco em milmetros

Estatura mnima =19,5 x 6 x 10 x 3,1416 =1837,836 mm ou 1,83m
2
sendo a =mensurao da corda em milmetros

180

Figura 45: Avaliao anatmica e visual do estgio da sutura craniana, segundo os estgios
dispostos na tabela abaixo.
Tabela 3: Avaliao do estgio da sutura craniana demonstrada na figura__
com a estimativa da idade e a idade real do indivduo, com o valor do desvio padro.

Estudos demonstram que os dentes so as estruturas orgnicas que
fornecem os melhores subsdios para a estimativa da idade, sofrem menos
interferncias de fatores sistmicos e de desnutrio, principalmente da vida fetal at
os 21 anos aproximadamente, que termina o desenvolvimento dentrio. Dessa
maneira, quanto mais jovem, mais prximo da idade cronolgica ser a estimativa da
idade. Para isso, maiores nmeros de informaes so necessrias, tais como a
mineralizao e sequncia de erupo dentria, presena de patologias
odontolgicas (cries, exodontias e periodontopatias) e sinais de envelhecimento
(desgastes fisiolgicos) (Silva, 1997).
A tcnica mais utilizada e recomendada para a estimativa da idade pelo
exame dos dentes aqui no Brasil, em indivduos at aproximadamente 21 anos, a
descrita por Nicodemo, Moraes e Mdici (1974): os autores relacionam os estgios
de mineralizao dos elementos dentrios (Quadro 11):
Quadro 11: Cronologia da mineralizao dos dentes permanentes entre
brasileiros, por Nicodemo, Moraes e Mdici Filho

181

Estimativa do fentipo e cor da pele por meio do estudo do crnio e
dos dentes

O crnio fornece maiores possibilidades para a pesquisa da cor da pele do
que outras estruturas sseas (Birkby, 1966), pois se preserva com maior facilidade
aps a morte e pode ser classificado de diversas maneiras.
No Brasil, existe uma grande miscigenao ao comparar com outros pases
(Arbenz, 1988; Melani, 1995). Para a realizao desses estudos, necessria a
anlise e mensurao entre distncias de pontos de reparos anatmicos especficos.
Segundo Krogman (1955, apud Silva, 1997), alguns caracteres morfolgicos
craniofaciais qualitativos so observados em diferentes tipos de grupos
populacionais (Quadro 12), fornecendo uma ferramenta a mais para o estudo
antropolgico.
Quadro 12: Resumo das caractersticas craniofaciais qualitativas em
diferentes grupos populacionais.

182

Identificao humana pelos dentes

Em muitos casos, os dentes constituem elementos preciosos na
identificao, principalmente em carbonizados ou esqueletizados (Silva, 1997;
Frana, 2001; Vanrell, 2003; Pretty e Sweet, 2001; INTERPOL, 2008). Os dados
anatmicos dos dentes so analisados e utilizados pelos peritos:
Dente decduo ou permanente;
Grupo de dente que pertence (incisivos, molares e pr-molares);
Dente central ou lateral, primeiro ou segundo;
Dente presente na arcada superior ou inferior;
Dente presente no lado direito ou esquerdo;
Alteraes dentrias de interesse pericial.
Diversas caractersticas particulares podem estar presentes na arcada
dentria, incluindo as anomalias e alteraes dentrias (Figura 46). Para que esses

183

dados sejam devidamente documentados, necessrio que, o cirurgio-dentista
realize tais anotaes em uma ficha odontolgica adequada, segundo orientaes
de grande profissionais da rea da odontologia legal, caso contrrio, a identificao
pode no ser realizada por falta ou por m preservao da documentao
odontolgica.

Figura 46: Exemplo de identificao pelos dentes (vide detalhes ao lado da figura).

A INTERPOL (2008), visando estabelecer uma padronizao da documentao
odontolgica para a identificao de vtimas de desastres, elaborou um formulrio
completo, que engloba no s dados pessoais, como todos os exames realizados
para a identificao humana. O formulrio consta duas pginas: uma ficha
odontolgica para descrio dos dentes e outra para o exame intra e extrabucal.

184

Dois formulrios idnticos so realizados para a realizao do banco de dados
(Figura 47 e 48): Figura 47: Pgina de exame clnico intra e extrabucal post-mortem do formulrio
de identificao de vtimas da INTERPOL.

Registros ante-mortem
o Com registros obtidos da prpria famlia
o Com registros obtidos de mdicos da vtima
Com registros obtidos de dentistas da vtima
Registro post-mortem obtidos do cadver ou esqueleto encontrado.

185

Figura 48: Ficha odontolgica post-mortem do formulrio de identificao de vtimas da INTERPOL.

186

Estudo do mecanismo de ao das marcas de mordidas e o processo
de identificao das impresses dentrias

Mordidas so leses complexas produzidas pela presso do apertamento
dos dentes podendo ou no romper os tecidos moles. A mordida complementada
pela presso dos tecidos moles da pele pelos lbios e pela lngua (Whittaker, 1990;
Melani, 1997). A marca de mordida pode ser encontrada na pele ou em objetos
inanimados, podendo ser produzida pelo homem ou por algum animal (Clarck,
1992). Em uma mordida, os dentes podem produzir vrios tipos de leses, incluindo
eritema, contuso, abraso, lacerao, ou avulso tecidual (Sweet & Shutler, 1999).
As marcas produzidas pelos dentes na pele podem auxiliar na identificao
do agressor em razo s particularidades morfolgicas de cada dente. A anlise da
marca de mordida no se limita exclusivamente ao estudo dos dentes do agressor.
Devem-se levar em considerao alm dos dentes do mordedor, a ao da lngua,
dos lbios e das bochechas, devido ao da musculatura, e a parte do corpo que
foi afetada (Figura 49) (Levine, 1977; Melani, 1997).

187

Figura 49: Diversos tipos de marcas de mordida enumeradas de acordo com a escala de Pretty
(2008) descrita na figura 89.

188

Para assegurar a qualidade, integridade e eficcia da anlise, registro e
estudo das marcas de mordida, o Conselho Americano de Odontologia Forense
(American Board of Forensic Odontology) elaborou normas de procedimentos
visando padronizar as metodologias de anlise. O primeiro modelo de procedimento
foi estabelecido em 1983 em um seminrio de marcas de mordida. Em 1994, o
Conselho atualizou o primeiro conjunto de normas estabelecendo metodologias para
a preservao da evidncia de marca de mordida (ABFO, 2002).
Informaes como localizao, formato, tamanho, cor e tipo de injria devem
ser observados e registrados por fotografias com a utilizao da escala ABFO, n
o
2
(Hyser & Krauss, 1988) e impresso com material de moldagem. O exame extra e
intrabucal do suspeito, juntamente com o registro fotogrfico, moldagens dos arcos
dentais e registro da mordida em cera possibilitam o estudo comparativo por
diversas metodologias, principalmente por sobreposio de imagens (ABFO, 2002).
Segundo Sweet et al. (1996), a saliva depositada na pele durante o ato da
mordida pode ser coletada para a extrao do DNA e subsequente amplificao por
reao em cadeia pela polimerase independente do tempo de deposio ou da
concentrao da saliva. Ao depositarem saliva na pele de cadveres, realizaram a
sua coleta aps 5 minutos, 24 e 48 horas. Constataram que a concentrao de DNA
extrado da saliva at 24 horas aps a sua deposio diminui, no entanto, fica
estvel a partir desse tempo at 48 horas.
Relacionando-se a saliva com as marcas de mordida, Sweet et al. (1997)
preconizaram uma metodologia de coleta de saliva depositada sobre a pele Double
Swab Technique (tcnica do duplo esfregao com algodo). A tcnica consiste em
utilizar duas hastes com algodo (swab) estreis para a remoo da saliva
impregnada na pele, sendo uma umedecida com gua estril e a outra seca, que
so usados um em seguida do outro. Segundo os autores, a tcnica permite coletar
uma maior quantidade de material biolgico para a extrao de DNA.

189

NOES DE DNA FORENSE

A identificao humana pelo estudo do perfil gentico amplamente
utilizada em casos de caracterizao de vnculo gentico familiar seja em processos
cveis exemplo: excluso ou no da paternidade como tambm em processos
criminais exemplo: cadveres e materiais biolgicos encontrados na cena do
crime.
Atualmente, a mdia tem contribudo de forma significativa para a divulgao
e popularizao dessa tecnologia, que vem evoluindo de forma significativa nas
ltimas duas dcadas.
No entanto, algumas consideraes sobre essa tecnologia no passam de
mito, pois no se pode concluir que o DNA resolve tudo, mas que a anlise do
perfil gentico pode auxiliar na identificao humana fazendo parte das provas
periciais de um determinado caso criminal ou civil.
Segundo Butler (2005) Os testes de DNA para identificao humana podem
ser utilizados para:
Casos forenses: anlise do DNA do suspeito com aquele obtido da
evidncia biolgica encontrada na cena do crime ou nas vtimas;
Teste de paternidade ou caracterizao de vnculo gentico familiar:
excluso ou no de supostos pais, filhos, mes e outros membros da famlia;
Desastres em massa: identificao dos fragmentos humanos e dos
corpos encontrados em um desastre com inmeras vtimas;
Investigaes histricas;
Investigaes de pessoas desaparecidas;
Identificao de militares;

190

Banco de DNA de criminosos ou
de evidncias biolgicas.

Fundamentos bsicos de biologia
molecular para entendimento do DNA
forense

O DNA (cido desoxirribonucleico)
armazena toda a informao gentica, sendo
encontrados nos cromossomos do ncleo e
nas mitocndrias, com a maior parte
localizada no primeiro (Figuras 50).

191

Figura 50: DNA a molcula da vida: do cromossomo a cadeia dupla de DNA.

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o
m
,
e
s
m
m

193

grupamento fosfato, constitui o nucleotdeo, que a unidade bsica de repetio na
fita de DNA (Watson & Crick, 1953).

Figura 52: Representao esquemtica da molcula de DNA.

Determinados fragmentos de DNA especificam a sntese de RNA em um
processo denominado transcrio. O cido ribonucleico (RNA) um polmero linear

194

composto de cadeia de unidades de ribose ligadas pelas posies 3 e 5 por
intermdio de grupamentos fosfodister, tendo como funo a sntese proteica e
tambm pode constituir o genoma de alguns vrus. O gene uma unidade de
transcrio que consiste de um segmento de DNA especfico que se estende do
incio do stio de transcrio ao stio de trmino de transcrio. O RNA especifica a
sntese de polinucleotdeos que formaro as protenas, sendo tal processo
denominado traduo, ocorrendo nos ribossomos, nas mitocndrias e cloroplastos
(Figura 53) (Beard & Armentrout, 1967; Srinivasan & Yathindra, 1977).

Figura 53: Fluxograma da transcrio e translao.

195

As regies de um gene que codificam protenas so denominadas xons e
aquelas que no a realizam, ntrons. Cada xon codifica uma poro especfica da
protena completa (Figura 54). Em algumas espcies, incluindo a humana, os xons
so separados por longas regies de DNA denominadas ntrons ou DNA lixo, que
aparentemente no esto associadas codificao de DNA (National Human
Genome Research Institute, 2008).
Os alelos constituem as variantes de um gene em uma particular regio, ou
lcus, em um cromossomo. Diferentes alelos produzem variaes nas
caractersticas individuais como, por exemplo, cor do cabelo ou tipo sanguneo
(National Human Genome Research Institute, 2008) (Figura 55).
A transferncia das informaes genticas de uma gerao a outra ocorre
atravs da replicao do DNA, catalisada por enzimas denominadas DNA
polimerases. Essas enzimas mediam a sntese da nova fita de DNA in vivo,
utilizando como molde ("template") a fita complementar da molcula existente.
Inicialmente, a molcula de DNA tem as suas fitas separadas pelo rompimento das
ligaes de hidrognio que mantm a dupla hlice, em um processo denominado
desnaturao, que ocorre in vivo em pH alcalino. Alm da fita molde, necessria a
presena de um oligonucleotdeo iniciador ou "primer", ou seja, um pequeno
fragmento de DNA simples, complementar a fita molde, desoxinucleotdeos
trifosfatados (dATP, dCTP, dGTC, dTTP) que sero incorporados fita duplicada. A
replicao do DNA ocorre em regies especficas denominadas origem de replicao
(Marmur & Doty, 1959).
Sucintamente, a replicao ocorre com a adio de um nucleotdeo fita de
DNA pela ligao de seu grupo fosfrico, presente no carbono 5' da desoxirribose,
com a hidroxila do carbono 3' da desoxirribose do ltimo nucleotdeo presente na
cadeia replicada. Por esse motivo que se descreve que a sntese de DNA ocorre no
sentido 5->3 (Marmur & Doty, 1959;). Todo o processo descrito acima ser base
do princpio da amplificao do DNA in vitro denominada reao em cadeia pela
polimerase (Polymerase Chain Reaction PCR) que sero estudados nos tpicos
adiante.

196

Figura 54: Diferenas entre os xons e Introns. Observe a remoo da parte em amarela
correspondente ao ntron.

197

Figura 55: Alelos correspondentes a cor de olhos ligados ao cromossomo X.

O conjunto completo de sequncias no material gentico de um organismo
denominado genoma incluindo todos os cromossomos mais qualquer DNA presente
nas organelas. O genoma nuclear humano possui cerca de 3300 Mb, distribudos em
22 cromossomos autossmicos e 2 sexuais, compostos de 30 a 35 mil genes,
caracterizando por 1,5% a 2% de DNA codificante de protenas, sendo que 46% do
total constitui-se de sequncias de DNA repetitivas (Szymasky, 2005).
O genoma mitocondrial possui particularidades que o diferenciam do
genoma cromossmico, sendo sua herana materna. Sua estrutura circular de
16,5Kb lhe fornece maior resistncia digesto enzimtica e em uma nica clula,
h a presena de milhares de mitocndrias, cada qual com uma cpia de DNA
mitocondrial, sendo que 93% do seu genoma codificante, no possuindo ntrons e
com poucas regies repetitivas (Anderson et al, 1981). Dentro de uma nica clula,
h inmeras cpias do genoma mitocondrial, ao contrrio do genoma nuclear que
possui uma cpia por clula (Budowle et al, 2003) (Figura 56).

198

Figura 56: Representao esquemtica do DNA genmico ou nuclear e do DNA
mitocondrial (mtDNA).

Marcadores de Variao Gentica

A variabilidade do DNA humano confere a diferena entre cada ser vivo,
sendo que pode ser denominada por polimorfismo se a variao gentica possuir
frequncia acima de 1% em determinada populao e mutao se abaixo desse
valor (Beiguelman, 2006).
Os Single Sequence Length Polymorphism (SSLP) ou polimorfismo de
comprimento de sequncia nica, englobam os VNTR (Variable Number of Tandem
Repeats) ou repeties consecutivas de nmero varivel ou minissatlites, e

199

tambm os STR (Short Tandem Repeats) ou repeties consecutivas curtas ou
microssatlites (Figura 57 e 58). A diferena entre eles o tamanho da sequncia
que se repete, sendo que nos microssatlites essa estrutura menor, pois possuem
repeties constitudas de 2 a 9 pares de bases, e o minissatlite, de 10 a 64 pares
de bases. Esse DNA satlite na maioria das vezes no transcrito,
consequentemente no esto associados com a expresso da informao gentica
(Edwards et al, 1991; Hamond et al, 1994).

Figura 57: Representao esquemtica comparando as VNTRs das STRs, segundo sua unidade de
repetio.

200

Figura 58: Representao esquemtica das repeties consecutivas do STR TPOX e seus
respectivos alelos.

Os Single Nucleotide Polymorphism (SNP) ou polimorfismo de nucleotdeo
nico uma variao na sequncia de DNA que ocorre quando um nucleotdeo
alterado por outro em sequncias de DNA que podem ou no codificar genes
(Delahunty, 1996) (Figura 59).

Figura 59: Representao esquemtica se sequncias de DNA de trs indivduos distintos com a
presena de um SNP e um STR mostrando suas diferenas.

201

Quadro 13: Comparao entre os STRs e SNPs (adaptado de Butler, 2005)
STR SNP
Variam de 2 a 9 nucleotdeos
que se repetem consecutivamente
Troca de bases A/T, A/G, A/C,
C/T, C/G, T/G.
Apresentam-se em diversos
alelos, normalmente mais de 5
Normalmente 2
Detectado por separao
eletrofortica em gel ou capilar
Anlise por sequenciamento ou
hibridizao em microchip.
O FBI preconiza 13 STRs Estima-se que mais de 50 SNPs
seriam necessrios para a anlise (Gill et
al, 2004)
Vantagens:
Banco de dados
populacionais realizados no mundo todo
A presena de vrios alelos
facilita a identificao de mutaes e
misturas de DNA.
Vantagens:
Os produtos de PCR
podem ser menores, resultado em maior
chance de amplificao, principalmente
em amostras biolgicas degradadas.
Aps devidamente
otimizados e estudados, pode-se
analisar mais de 1000 SNPs em um
mesmo microchip, mas essa tecnologia
ainda no amplamente empregada.

202

Estudo da metodologia aplicada identificao humana

A anlise do DNA em caracterizao do vnculo gentico engloba desde o
domnio da metodologia de coleta do material biolgico at a interpretao dos
resultados obtidos (Butler, 2005) (Figura 60). Cada qual possui sua particularidade e
cuidados inerentes tcnica que podem possuir vantagens e desvantagens de
acordo com o objetivo almejado.

Figura 60: Esquema de todos os procedimentos envolvidos em caracterizao do
vnculo gentico

Coleta do material biolgico:

Anteriormente extrao e anlise dos cidos nucleicos, um importante
passo a ser discutido relaciona-se aos cuidados relacionados coleta e preservao
do material biolgico. Os cuidados incluem utilizao de luvas descartveis,

203

instrumentos de coleta, armazenamento e anlise devem ser estreis e apropriados
para cada tipo de material, a documentao completa do vestgio eleito para a
coleta, incluindo-se fotografias da regio, tipo de armazenamento entre outros, o
armazenamento do material biolgico mido em sacos plsticos deve ser de no
mximo 2 horas, ou quando possvel, permitir que seque antes do acondicionamento
final. Cada tipo de amostra de material biolgico (sangue, saliva, osso, dente, etc.)
deve ter sua coleta e acondicionamento individualmente descrito (Secretaria de
Segurana Pblica de So Paulo SSP-SP, 1999; INTERPOL, 2001). Cada tipo de
material biolgico ter quantidades diferentes de DNA para ser extrado (Quadro 14).

Quadro 14: Quantidade de DNA extrado de diversos tipos de material
biolgico (Butler, 2005).
Tipo de amostra Quantidade de DNA
Sangue total 20000 ~40000 ng/mL
Mancha de sangue 250 ~500 ng/cm
3

Lquido seminal 150000 ~300000 ng/mL
Esfregao de material vaginal
ps-coito
10 ~3000 ng/esfregao
Fio de cabelo com bulbo 1 ~750 ng/fio
Pelo com bulbo 1 ~10 ng/plo
Saliva total 1000 ~10000 ng/mL
Esfregao bucal 100 ~1500 ng/esfregao
Urina 1 ~20 ng/mL
Osso 3 ~10 ng/mg
Tecido 50 ~500 ng/mg

204

Extrao e quantificao de cidos nucleicos:

A quantidade, a pureza e a integridade do DNA dependem de vrios fatores,
podendo ser influenciados pelas metodologias aplicadas para a sua extrao. A
tcnica mais amplamente empregada envolve em sua primeira fase, a lise celular,
seguida de desnaturao ou inativao de protenas. Com solventes orgnicos o
DNA posteriormente separado de macromolculas como as protenas atravs de
solubilizao em gua, e em seguida precipitado com etanol. Outras metodologias
com o mesmo princpio, inclusive kits comerciais, podem ser utilizadas para cada
tipo de amostra biolgica. H diferentes metodologias para a extrao de DNA de
sangue total, de esfregaos vaginais e de amostras de smen, de saliva total e de
materiais contendo saliva (Walsh D et al., 1992; Anzai et al., 2001, Anzai-Kanto,
2005); de dente humano (Oliveira et al, 2002), de osso (Hagelberg et al., 1991); de
material parafinado (Mesquita et al., 2001), entre outros.
A escolha do uso de diferentes mtodos de extrao de DNA est
relacionada ao tipo de material envolvido e influencia diretamente ao sucesso da
anlise dos STRs. Tal fator tambm se aplica ao DNA extrado de materiais
biolgicos obtidos post-mortem (Hoff-Olsen et al., 2001).
A quantificao do DNA aps a sua extrao importante para o
aperfeioamento da qualidade do produto de DNA resultante da PCR (Internacional
Society for Forensic Haemogenetics, 1992). Essa quantificao pode ser realizada
espectrofotometria devido capacidade do DNA em absorver luz ultravioleta de
260nm de onda (Walker & Rapley, 1999), incluindo equipamentos mais modernos
que quantificam com 1 L de amostra, como o espectrofotmetro Nanodrop.

Anlise do perfil gentico:

J effreys et al. (1985) foi um dos primeiros a analisar as regies de
minissatlites do DNA humano, possibilitando a investigao de paternidade e a
identificao em casos criminais.

205

Uma tecnologia que revolucionou o campo da biologia molecular foi a PCR
tendo como seu inventor Kary Mullis, recebendo o Prmio Nobel por essa
descoberta (INTERPOL, 2001). A PCR consiste na amplificao seletiva de uma
sequncia-alvo de DNA especfica a partir de uma coleo heterognea de DNA,
empregando-se um par de oligonucleotdeos iniciadores que so complementares a
certa extenso em ambas as fitas do DNA a ser amplificado (Saiki et al, 1985).
A PCR envolve trs etapas: desnaturao, hibridizao e extenso. A
desnaturao ocorre quando a molcula de DNA aquecida acima da temperatura
de 90C na qual as pontes de hidrognio da dupla hlice se rompem, ocorrendo a
separao das cadeias complementares. Os iniciadores se ligam especificamente s
sequncias de DNA complementares no processo de hibridizao, mediante a uma
temperatura que pode variar de 45 a 72C e deve ser previamente otimizada
estando relacionada temperatura de melting, que medida por meio de uma
frmula especfica que envolve a quantidade de C e G em sua sequncia. A
prevalncia de ligao dos iniciadores ocorre pela sua alta concentrao no meio da
reao. A enzima termoestvel denominada DNA polimerase direciona o
posicionamento dos precursores do DNA dNTP- iniciando a sntese de novas fitas
de DNA. Com um novo aumento de temperatura, a enzima DNA polimerase catalisa
a reao, incorporando o nucleotdeo na posio terminal do iniciador,
complementando as bases do DNA molde, promovendo a extenso da fita (Saiki,
1985) (Figura 61).
As vantagens da utilizao da PCR na cincia forense so a sua
sensibilidade, pois capaz de amplificar sequncias a partir de quantidades nfimas
da sequncia-alvo de DNA e at mesmo do DNA de uma nica clula; e sua
robustez, permitindo a amplificao de sequncias especficas a partir de material
biolgico degradado (ISFH, 1992, INTERPOL, 2001; Sambrook, 2001). No entanto,
tal eficincia e sensibilidade implicam tambm na ateno aos cuidados para evitar-
se a contaminao de DNA externo, que pode ocorrer durante todo o processo de
anlise do DNA (Internacional Society For Forensic Haemogenetics ISFH, 1992).
A eletroforese uma metodologia amplamente empregada para a
separao, isolamento, anlise e manipulao dos cidos nucleicos. Os cidos

206

nucleicos possuem uma carga geral total negativa, em razo aos seus grupamentos
fosfato do arcabouo, consequentemente, quando aplicados em um gel de agarose
ou poliacrilamida, eles migraro em direo ao nodo em um campo eltrico (Aaji e
Borst, 1972). Em condies apropriadas de tampo, voltagem e miliamperagem, os
fragmentos pequenos migraro mais facilmente do que os maiores (Figura 62).

Figura 61: Representao esquemtica da amplificao em cadeia pela polimerase (PCR).

207

Figura 62: Esquema da corrida de eletroforese com visualizao dos fragmentos de
DNA e das partculas de gel e dos poros, seguida de imagem dos fragmentos de DNA
corados com brometo de etdeo exposto a luz ultravioleta.

A variao do tipo e concentrao do gel propicia diferentes caractersticas
de separao, permitindo diferentes resolues e anlises. Em caracterizao de
vnculo gentico utiliza-se eletroforese em gel de poliacrilamida ou eletroforese
capilar para a anlise das imagens. Em incluso ou excluso de paternidade,
comparam-se os alelos presentes no filho com o do suposto pai, sendo que um seria
o alelo obrigatrio materno e o outro paterno (Figura 63).
O mesmo acontece em incluso de suspeitos de um crime, no qual se
compara o DNA encontrado na vtima, como ocorre com marcas de mordida ou
presena de smen na vtima, ou na cena de um crime. Pode ocorrer uma mistura

208

de amostras biolgicas que poder conter DNA da vtima e do agressor. Dessa
maneira, compara-se o DNA da vtima com o dos suspeitos confrontando-os com o
DNA das amostras presentes na cena do crime (Figura 64). Tais anlises so
realizadas em pelo menos 13 STRs distintos (Budowle & Moretti, 1999; INTERPOL,
2001; Secretaria Nacional de Segurana Pblica - SENASP, 2006).

Figura 63: Esquema representativo da anlise de uma eletroforese em gel de poliacrilamida
corado com prata contendo DNA de amostras biolgicas da me, do filho e do suposto pai, de um
STR amplificado pela PCR analisados juntamente com marcadores allicos.

209

Figura 64: Esquema representativo da anlise de uma eletroforese em gel de poliacrilamida
corado com prata, contendo DNA de amostras biolgicas da vtima, do material biolgico coletado de
uma marca de mordida, e de trs suspeitos distintos de um STR amplificado pela PCR, analisados
juntamente com marcadores allicos.

Os fragmentos de DNA amplificados por PCR so identificados aps a
eletroforese em gel de poliacrilamida, seguida da colorao com prata, ou pela
deteco de sinal fluorescente, na qual os iniciadores utilizados no PCR so
marcados com fluorocromos, possibilitando a anlise por sequenciador automtico
(Gill et al, 1995).
Como foi dito anteriormente, as amostras forenses normalmente
apresentam-se degradadas e em quantidades escassas. A amplificao por kits
multiplex pode auxiliar principalmente nesses casos. Pouca quantidade de DNA
nanogramas suficiente para que se amplifique pela PCR vrios loci. Os kits
multiplex so desenvolvidos para comercializao (Krenke et al. 2002) ou pelos
laboratrios de anlises clnicas para o seu prprio uso.
A importncia da evidncia de DNA dada atravs da probabilidade de que
a casualidade tenha ocorrido. Para isso, tem-se antecipadamente a frequncia dos
perfis genticos em uma dada populao. Caso o perfil gentico seja extremamente

210

raro em uma dada populao, pode-se dizer que a evidncia extremamente forte,
caso contrrio, pode consistir em uma mera casualidade. A frequncia de um perfil
gentico em uma dada populao calculada a partir da multiplicao das
frequncias do gentipo de cada lcus (Evett & Weir, 1998).
Nos EUA, o FBI implantou o CODIS - Combined DNA Index System- que se
tornou operacional em 1998, e combina a cincia forense com a tecnologia
eletrnica, formando um banco de dados de perfis genticos de DNA extrado de
evidncias biolgicas coletadas na cena do crime e DNA de criminosos condenados
por agresso sexual e outros tipos de violncia fsica. Todos os Estados americanos
podem ter acesso a esse banco de DNA e dessa maneira, h a possibilidade de
comparar os perfis genticos de um suspeito em um crime com os perfis contidos no
CODIS, averiguando se o mesmo cometeu anteriormente outra infrao (FBI, 2001).
O CODIS selecionou 13 STRs para a anlise do perfil gentico: CSF1PO,
FGA, TH01, TPOX, vWA, D3S1358, D5S818, D7S820, D8S1179, D13S317,
D16S539, D18S51, e D21S11 (Budowle & Moretti, 1999) (Figura 65). Esse conjunto
de loci se transformou em referncia para outros pases do mundo, no que se refere
cincia forense (Sun et al, 2003)

Figura 65: STRs recomendados pelo Banco de DNA vinculado ao FBI (CODIS), segundo a sua
distribuio nos cromossomos humanos. Fonte: http://www.cstl.nist.gov/div831/strbase/fbicore.htm.

211

Essa normatizao possibilita maior facilidade em comparar tanto as
frequncias allicas populacionais como os resultados dos perfis genticos, mesmo
que seja realizada em outros pases. Visando futuramente implantar um banco de
perfis genticos de criminosos como o CODIS, o governo federal brasileiro j adotou
os STRs sugeridos pelo CODIS como referncia em percias criminais em seu
Manual de Padronizao de Exames de DNA em Percias Criminais (Secretaria
Nacional de Segurana Pblica - SENASP, 2006), que est sendo utilizado como
referncia para os laboratrios que trabalham com identificao humana.
O sequenciamento de regies especficas de DNA realizado para a anlise
precisa da sua sequncia de nucleotdeos (Figura 66). O DNA mitocondrial
analisado principalmente por meio de seu sequenciamento, posto que haja
alteraes de bases nicas. Diferentemente dos STRs, que analisado pelo
tamanho da sequncia, o DNA mitocondrial analisado comparando a sequncia de
cada nucleotdeo com a sequncia preestabelecida por Anderson et al (1981) como
referncia.

Figura 66: Eletroferograma obtido do sequenciamento de um fragmento de DNA.

A anlise dos STRs, da amelogenina e do DNA mitocondrial descritos ao
longo do captulo so amplamente utilizados e continuaro nos prximos anos,
principalmente porque j so referncia no mundo todo e seus dados arquivados
(Gill et al, 2004). Entretanto, os Single Nucleotide Polymorphisms (SNPs) ou
polimorfismos de base nica como descritos anteriormente, no podem ser
excludos de uma discusso relacionada a perspectivas futuras quanto utilizao
em identificao humana, existindo vantagens na sua utilizao (Butler, 2005)
(Quadro 10).

212

Quadro 15: Comparao entre os STRs e SNPs (adaptado de Butler, 2005)
STR SNP
Variam de 2 a 9 nucleotdeos que se
repetem consecutivamente
Troca de bases A/T, A/G, A/C, C/T, C/G,
T/G.
Apresentam-se em diversos alelos,
normalmente mais de 5
Normalmente 2
Detectado por separao eletrofortica
em gel ou capilar
Anlise por sequenciamento ou
hibridizao em microchip.
O FBI preconiza 13 STRs. Estima-se que mais de 50 SNPs seriam
necessrios para a anlise (Gill et al,
2004)
Vantagens:
Banco de dados populacionais
realizados no mundo todo
A presena de vrios alelos facilita
a identificao de mutaes e misturas
de DNA.
Vantagens:
Os produtos de PCR podem ser
menores, resultado em maior chance de
amplificao, principalmente em
amostras biolgicas degradadas.
Aps devidamente otimizados e
estudados, pode-se analisar mais de
1000 SNPs em um mesmo microchip.

----------- FIM DO MDULO IV ------------

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