DOCENTE : RUBN D AZ CABANI LLAS

CURSO : BI OQU MI CA I I

CI CLO : VI

I NTEGRANTES :

Angulo Valverde I vn
Cerna Quevedo Walter
De la Cruz Martnez Elita
Gonzlez Failoc Sara
Guerra ique Manuel
Gutirrez Castro Nathaly
Mestanza Llanos Susana
Vargas Ruiz Katherin
Velsquez Pita Roxana Gasdaly
TRUJ I LLO PERU
2014


1. INTRODUCCION
La hemoglobina es una protena tetrmera, que consiste de cuatro cadenas
polipeptdicas con estructuras primarias diferentes. La hemoglobina presente
en los adultos (HbA) tiene dos cadenas y dos cadenas . La cadena
consiste de 141 aminocidos y una secuencia especfica, mientras que la
cadena consiste de 146 aminocidos con una estructura primaria diferente.
Estas cadenas son codificadas por genes diferentes y tienen estructuras
primarias diferentes. En el caso de las cadenas y de otros tipos de
hemoglobina humana, como la hemoglobina fetal (HbF) es muy similar a la
cadena . La estructura tetrmera de los tipos comunes de hemoglobina
humana son las siguientes: HbA1 tiene 22, HbF tiene 22 y HbA2 (tipo
menos comn en los adultos) tiene 22. Las cadenas y de la hemoglobina
tienen un 75% de hlices alfa como estructura secundaria, con 7 y 8
segmentos respectivamente. Cada cadena polipeptdica de la hemoglobina
est unida a un grupo hemo para formar una subunidad. Las cuatro
subunidades de la hemoglobina en su estructura cuaternaria forman un
tetraedro. Y sus subunidades se unen entre ellas por puentes de sal, que
estabilizan su estructura.
El grupo hemo est localizado en un hoyuelo entre dos hlices de la cadena de
la globina y a su vez est protegido por un residuo de valina. Los grupos vinilo
no polares del grupo hemo se encuentran en el interior hidrofbico del hoyuelo,
mientras que los grupos profirina polares cargados se encuentran orientados
hacia la superficie hidroflica de la subunidad. Tambin se encuentran residuos
de histidina de las cadenas polipeptdicas, que se enlazan al tomo de hierro y
se designan como histidinas proximales, ya que estn presentes cerca al grupo
hemo. Mientras que la histidina distal se encuentra lejos del grupo hemo. El
tomo de hierro se encuentra en el centro del anillo de profirina y tiene seis
valencias. El hierro est unido al nitrgeno de los cuatro anillos de pirol por
cuatro de sus valencias, su quinta valencia se une al nitrgeno de la histidina
proximal y la sexta est ocupada por la hisitidina distal o por oxgeno.
PRACTICA 01: HEMOGLOBINA

El comportamiento cooperativo de la hemoglobina es indispensable para un
transporte eficiente del oxgeno dentro del cuerpo. En los pulmones, la
hemoglobina se satura en un 98% de oxgeno.


2. OBJETIVOS

Determinar la concentracin de hemoglobina, que contiene una muestra
de sangre problema, por el mtodo de la cianometahemoglobina.

Determinar cuntos gr de hemoglobina (Hb) hay en toda la sangre
circulante, para tener un diagnstico clnico ya que se pueden variar
diversas enfermedades debido a un valor anormal de Hemoglobina.

3. FUNDAMENTO DEL MTODO
El reactivo de Hemoglobina VALTEK se basa en el mtodo de una
cianmetahemoglobina. Los eritrocitos son lisados por accin de un
agente tensio activo presente en el reactivo, liberando su contenido de
Hemoglobina en la solucin.
La hemoglobina liberada es oxidada a metahemoglobina por el
ferricianuro, siendo esta ltima convertida en cianmetahemoglobina por la
presencia de cianuro. La absorbancia de cianmetahemoglobina es
medida a 540 nm., siendo la intensidad del color obtenida, directamente
proporcional a la concentracin de Hemoglobina en la muestra.
4. REACTIVOS Y TCNICA
Reactivos
Reactivo Drabkin: Conservado entre 2 y 25 C y protegido de la luz.
Composicin:
- Ferricianuro de Potasio 0,6mM
- Cianuro de Potasio 0,7nM
- Sterox-SE 1ml/L
- Buffer y estabilizantes no reactivos c.s.
Solucin Standard de Hemoglobina: Metahemoglobina disuelta en
reactivo de hemoglobina equivalente a 18 g/dL de Hemoglobina.
Conservada entre 2 y 8C y protegido de la luz.
Preparacin del reactivo trabajo: Diluir el reactivo Drabkin 1:10 con agua
destilada antes de usar.
Tcnica:
Blanco Desconocido
Muestra (ml) ---- 0.01
Reactivo trabajo (ml) 2.50 2.50

Mezclar e incubar 3 minutos a temperatura ambiente (sobre 20C), o 10
minutos si la temperatura ambiental es muy baja. Leer las absorbancias
llevando a cero el equipo con el blanco reactivo. El color obtenido es
estable por a lo menos 1 hora.



5. RESULTADOS

CALCULOS

Factor = ______18______
Abs. Standard

Hemoglobina(g/dL) = FACTOR x Absorbancia Desconocido




DESARROLLO:

Factor = __18__ = 23.5
0.767

Hemoglobina(g/dL) = 23.5 x 0.46 = 10.81 g/dL
Fuente: Alumnos del VI ciclo del curso de Bioqumica II de la Universidad
ULADECH_Trujillo 2014.





6. CONCLUSIONES

Esta prctica nos es til para Poder determinar el volumen de Hb que
hay en la sangre.
Los exmenes de laboratorio pueden realizarse por muchas razones,
como investigacin rutinaria de salud o sospecha de enfermedad o de
toxicidad. Tambin pueden ser utilizados para determinar si la
efectividad de un medicamento mejora o empeora. Los exmenes
pueden medir el xito o fracaso de un tratamiento. Pueden ser
solicitados por razones mdicas o legales

7. DISCUSION

La hemoglobina es una protena conjugada que sirve para el transporte
de oxgeno y dixido de carbono. La masa total de eritrocitos de un
adulto contiene unos 600gr. De hemoglobina capaces de transportar
800ml de oxgeno.
Una molcula de hemoglobina consta de 2 pares de cadenas
polipepticas (unin de aminocidos) (globina) y 4 grupos proteicos HEM
que contienen cada uno un tomo de fe en estado ferroso. Cada punto
HEM se localiza en una zona determinada de una de las cadenas de
polipepticos. Localizando cerca la superficie de la molcula, el HEM se
combina de forma reversible con una molcula de oxgeno y dixido de
carbono. Este grupo HEM es el responsable del color rojo de la
hemoglobina (hb).
La parte proteica o globina tiene 4 cadenas poli peptdicas que se
denominan con las letras , , , . Existe una cadena ms la que est
presente durante los 3 primeros meses de vida se diferencian unas de
las otras en el numero o posicin (de los aminocidos de los que estn
compuestas). Por lo tanto existen varios tipos de hb. En el ser humano
se pueden encontrar las siguientes hemoglobinas normales:
Hemoglobina A: consta de 2 cadenas y 2 cadenas en un adulto
normal corresponde a ms del 95% del total.
Hemoglobina A: consta de 2 cadenas y 2 cadenas en un adulto sano
est en porcin menor de 3%.
Hemoglobina F (fetal): consta de 2 cadenas y 2 cadenas . Es la
hemoglobina principal en el feto desde el 4 mes del embarazo hasta
aproximadamente los 6 meses de edad. La Hb F tiene mayor afinidad
por el oxgeno.
Hemoglobina Gower: consta de 2 cadenas y 2 cadenas . Desaparece
casi por completo en el tercer mes de embarazo y empieza a aparecer la
Hb fetal.











8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS


FUENTES ARDERIU, x. CASTIERAS LACAMBRA, M. QUERALT
COMPA,J. Bioqumica clnica y patologa molecular. Volumen 02.
Editorial Revert S. A. Impreso en Barcelona, 1998. P. 768.

VOET, Donald. G. VOET, Judith. Bioqumica. Tercera Edicin. Editorial
Mdica Panamericana. Impreso en Buenos Aires Argentina, 2006. P.
333.

F. RODAK, Bernadette. Hematologa: fundamentos y aplicaciones
clnicas. Segunda edicin. Editorial Mdica Panamericana. Impreso en
Argentina, 2005. Pp. 107 108.





9. ANEXOS