03/07/2013

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www.grupoidealbr.com.br
Contedo: Anlise Instrumental
Professor (a): Msc.Luiza Esteves
Mini currculo:
Graduao:Qumica Industrial UNIFAL;
Mestrado: Engenharia Qumica UFMG;
Doutoranda em Eng. Qumica UFMG;
Politec (Qumica Analtica, Anlise
Instrumental e Corroso desde 2010).
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Espectrofotometria no UV/VIS
So mtodos que se baseiam nas interaes
da radiao eletromagntica com a matria.
Ondas
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Fonte de radiao;
Compartimento da amostra;
Seletor de comprimento de onda;
Transdutor Detector;
Processador de Sinal - Registrador
Componentes
02 - Um sistema constitudo por lmpadas de
deutrio e tungstnio, rede de difrao e
sistema de fendas, alm de fotomultiplicadora
ou fotodiodos tpico de um:
a) espectrofotmetro.
b) potencimetro.
c) condutivmetro.
d) cromatgrafo gasoso.
e) cromatgrafo lquido de alta eficincia.
Exerccio
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A) Questo. O monocromador, parte fundamental
do espectrofotmetro, tem a funo de:
a) ( ) Transformar o poder radiante em sinal eltrico.
b) ( ) Converter o sinal eltrico em um sinal grfico.
c) ( ) Dividir o poder radiante proveniente da fonte
em dois feixes luminosos, sendo que um deles ir
de encontro amostra e o outro de encontro
referencia.
d) ( ) Separar a radiao policromtica que vem da
fonte luminosa no comprimento de onda desejado.
e) ( ) Calibrar 100% de transmitncia na escala do
registrador.
Exerccio
Tipos de Espectrofotmtros
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Simples feixe:
Vantagens:
Simples,
barato,
robusto,
fcil operao
Simples feixe:
Desvantagens:
Rudo alto,
difcil obteno
de espectro
Onde:
T: Transmitncia
I: Intensidade de
radiao incidente
I
0
: Intensidade de
radiao transmitida
Modos de Aquisio do Espectro
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Resumindo: A= - log T = - log P
o
/P
Modos de Aquisio do Espectro
A = .b.c
Onde:
A = Absorvncia;
= absortividade molar (intrnseco ao
material) [L/mol.cm];
b = caminho ptico [cm];
c = concentrao do analito [mol/L].
Quantitativo Lei de Beer
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15 - A medida da absoro da luz na regio do
ultravioleta/ visvel por uma soluo contendo
molculas governada pela lei de Lambert-Beer.
Segundo esta lei a absoro da energia luminosa
correlacionada com:
a) cor e concentrao da soluo;
b) concentrao e viscosidade do meio;
c) viscosidade do meio e tamanho do caminho tico;
d) tamanho das molculas e viscosidade do meio;
e) concentrao da soluo e tamanho do caminho
tico.
Exerccio
19) (Cesgranrio 2011 Transpetro) - A lei de Beer relaciona a
absorvncia de uma substncia com a sua concentrao, o que
permite o uso da fotometria de absoro em anlise quantitativa. A lei
de Beer:
a) vlida para qualquer faixa de concentrao de substncia.
b) uma lei multiplicativa, isto , se duas substncias absorvem num
mesmo comprimento de onda, a absorvncia total observada ser
igual ao produto das absorvncias individuais das substncias.
c) permite encontrar a percentagem da radiao incidente (num dado
comprimento de onda) que transmitida atravs da substncia.
d) usada para determinar a potncia radiante da luz refletida na cela
da amostra.
e) prova que diferentes tipos de substncias absorvero luz na mesma
intensidade, desde que suas concentraes sejam iguais.
Exerccio
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21) (Cesgranrio 2011 Petrobrs - Qumico) - Uma soluo
de uma dada amostra apresenta absortividade de 200 Foi
analisada por espectroscopia na regio do UV/Vis em um
comprimento de onda na qual se obedece lei Lambert Beer na
concentrao empregada nesse experimento. Considere que o
caminho ptico de 1 mm, e a absorbncia observada 0,4.
Empregando esse resultado na equao de Lambert-Beer,
conclui-se que a concentrao da amostra , aproximadamente.
a) 0,01 mol. L-1
b) 0,02 mol. L-1
c) 0,002 mol. L-1
d) 8,0 mol. L-1
e) 80 mol. L-1
Exerccio
24) (UFAL 2012) - Para a determinao por colorimtrica (espectrometria no
comprimento de onda do ultravioleta) necessrio que a substncia tenha na
sua estrutura um grupo cromforo.
Dadas s afirmativas seguintes,
1) A quantidade de luz absorvida e dada pela expresso ...
l = comprimento da cubeta em cm.
2 - Cada substncia tem um (coeficiente de absortividade molar)
caracteristico.
3 - A absorvncia pode ser medida a qualquer temperatura.
4 - A absorvncia medida independe do comprimento de onda usado.
correto afirmar que:
a) 1 e 4 so corretas e 2 e 3 incorretas.
b) 1 e 2 so corretas e 3 e 4, incorretas.
c) 1 e 3 so corretas e 2 e 4, incorretas.
d) 1, 2 e 4 so corretas e 3, incorreta.
e) 1, 2 e 3 so corretas e 4, incorreta.
Exerccio
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Limites Reais:
Solues diludas
No exceder
Concentraes
0,01 mol/L
Desvios da Lei de Beer
Interao
depende da
Concentrao
Exerccios UV/VIS
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Espectrofotometria de
Fluorescncia
Espectrofotometria de
Fluorescncia
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A fluorescncia molecular medida
excitando-se a amostra no comprimento
de onda de absoro, tambm conhecido
como comprimento de onda de excitao, e
medindo-se a emisso a um comprimento
de onda mais alto denominado comprimento
de onda de
fluorescncia.Fotoluminescncia
Espectrofotometria de
Fluorescncia
Curiosidade:
Espectrofotometria de
Fluorescncia
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Espectrofotometria de
Fluorescncia
Espectrofotometria de
Fluorescncia
Fluorescncia e Estrutura
Os compostos que contm anis aromticos apresentam emisso fluorescente
mais intensa e mais til. Enquanto certos compostos carbonlicos
alicclicos e alifticos, bem como as estruturas de ligaes duplas
altamente conjugadas, tambm fluorescem, existem muito pouco desses
compostos comparando-se com o nmero de compostos que contm
anis aromticos e que fluorescem.
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PAPILOSCOPISTA - PCPA - 2006 CESPE (Fsica, questo 34). A
fluorescncia um fenmeno muito til na visualizao de impresses
digitais. Produtos fluorescentes, como a Rodamina, por exemplo,
permitem a visualizao de impresses digitais quando fixadas
apropriadamente e quando expostas luz forense. Acerca do fenmeno
de fluorescncia e de conceitos correlatos, assinale a opo
correta. (cd. Q06030)
a) Na fluorescncia ocorre emisso de ftons com comprimento de onda
menor que o dos ftons usados para excitao do material fluorescente.
b) O fenmeno da fluorescncia compreende os mecanismos de absoro
para um nvel de energia alto, relaxao para um nvel mais baixo e emisso
de luz, a partir deste nvel para outro mais baixo.
c) Em um tomo, a excitao para um nvel eletrnico mais alto corresponde
passagem de um eltron para uma rbita mais externa. Essa afirmao
pressupe um modelo atmico do tipo planetrio, em que o eltron
considerado como uma onda.
d) Na visualizao de impresses digitais com a tcnica de fluorescncia,
pode-se utilizar filtros bloqueadores de UV frente da fonte de luz forense e
culos protetores feitos com filtros bloqueadores de luz visvel.
Exerccios Fluorescncia
Cromatografia
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Cromatografia Lquida (CLAE)
Fase estacionria = material que retm os
componentes da amostra que se deseja separar;
Fase mvel = material que se desloca pela fase
estacionria, transportando os analitos.
Cromatografia Lquida (CLAE)
Separao
Componentes com
menor interao pela
fase estacionria.
Tempo de reteno
Componentes com
maior interao pela
fase estacionria.
Tempo de reteno
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Cromatografia Lquida (CLAE)
k: Fator de reteno;
t: Tempo de reteno do analito;
t
o
= tempo morto.
01- A figura abaixo ilustra os caminhos percorridos por duas molculas
durante a eluio. Nesse processo, correto concluir que:
Exerccio
a) a molcula 1 possui maior afinidade pela
fase estacionria que a molcula 2.
b) a molcula 2 possui maior afinidade pelo
eluente que a molcula 1.
c) a molcula 2 possui maior tempo de
reteno que a molcula 1.
d) a fase estacionria utilizada inadequada
para a separao das molculas 1 e 2.
e) o eluente inadequado para a separao
das molculas 1 e 2.
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Em geral, as polaridades dos grupos
funcionais orgnicos na ordem crescente
so:
Hidrocarbonetos alifticos < olefinas <
hidrocarbonetos aromticos < haletos <
sulfetos < teres < compostos nitro <
steres ~ aldedos ~ cetonas < alcois
aminas < sulfonas < sulfxidos < amidas <
cidos carboxlico < gua.
Fase Mvel: Polaridade
10 - A escolha de solventes para cromatografia
uma etapa que merece muita ateno do analista: A
cromatografia em fase reversa utiliza mistura de
solventes polares. Dentre as misturas a seguir, qual
seria mais eficiente neste sistema?
a) Hexano: clorofrmio.
b) Ciclohexano: gua.
c) Diclorometano: etanol.
d) Metanol: gua.
e) ter etlico: clorofrmio.
Exerccio
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20) (Cesgranrio 2011) - A separao cromatogrfica de duas
substncias feita usando fase estacionria apolar e fase mvel polar
de composio constante (gua/ propanol 40/60% v/v). Nessas
condies, a substncia M aparece com tempo de reteno (tR1)
igual a 10,2 min, enquanto o tempo de reteno (tR2) da substncia
N 15,2 min.
A respeito desse procedimento de separao, afirma-se que a (o):
a) separao ocorre em regime de gradiente de fase mvel.
b) substncia M mais polar que a substncia N.
c) procedimento descrito tpico de cromatografia lquida de fase
normal.
d) aumento da polaridade da fase mvel no afetar os valores de tR1
e tR2
e) aumento da proporo de propanol na fase mvel aumentar a
polaridade da fase mvel.
Exerccio
onde:
t
R
= tempo de reteno do
pico;
W = largura do pico na sua base W (em
unidade de tempo);
Nmeros de Pratos Tericos (N)
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A resoluo de uma coluna
cromatogrfica uma medida quantitativa
da sua habilidade em separar os analitos
A e B.
Resoluo de uma Coluna
A CLAE apresenta vantagens sobre a
cromatografia a gs para as anlises de
combinaes orgnicas. Amostras no
volteis e termolbeis so,
preferencialmente, analisadas por CLAE.
Cromatografia Lquida (CLAE)
Bomba Injetor
Coluna
Cromatogrfica
Detector Registrador
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Na cromatografia por partio lquido-
lquido, a fase estacionria um solvente
que imobilizado por adsoro sobre a
superfcie das partculas do recheio.
Na cromatografia por partio de fase
normal, a fase estacionria polar e a
fase mvel, apolar. Na cromatografia por
partio de fase reversa, a polaridade
dessas fases so invertidas.
Cromatografia Lquida (CLAE)
07 - A Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (HPLC) uma tcnica
de separao que, em menos de trinta anos, passou a ser um dos
mtodos analticos mais utilizados para fins qualitativos e quantitativos.
Quanto tcnica de cromatografia lquida, est correto afirmar que:
a) a qualidade de coluna deve ser verificada quando houver variaes
de reprodutibilidade.
b) na cromatografia lquida de fase reversa, o analito mais polar elui
depois do analito menos polar.
c) os solventes em cromatografia lquida so injetados sob baixa
presso.
d) uma pr-coluna com composio de fase estacionria distinta da
coluna cromatogrfica deve ser instalada para aumentar a vida til do
sistema.
e) quanto mais apolar for o solvente, maior a sua fora eluente, e
quanto maior a fora eluente, mais rapidamente os solutos sero
eludos da coluna.
Exerccio
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Na cromatografia de fase normal, o analito
menos polar eludo primeiro. Na
cromatografia de fase reversa, por ltimo.
O sucesso da cromatografia por partio
requer um equilbrio adequado entre as
foras intermoleculares existentes entre os
trs participantes no processo de separao
o analito e as fases mvel e
estacionria.
Cromatografia Lquida (CLAE)
Exerccio
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12 - Eluio o desenvolvimento da amostra no sistema cromatgrfico.
Considerando essa afirmao, pode-se dizer que:
I - a eluio por gradiente apresenta a desvantagem de aumentar o tempo de
anlise;
II - denomina-se eluio isocrtica, quando a composio qumica da fase
mvel alterada durante a eluio;
III - a separao por gradientes tem a vantagem de aumentar a resoluo e
reproduzir picos mais finos e simtricos;
IV - a separao por gradiente apresenta as desvantagens de aumentar o
custo, j que necessita de bomba com misturador, e no ser compatvel com
todos os detectores.
Est correto apenas o contido em
a) I e II.
b) I e III.
c) II e III.
d) III e IV.
e) II, III e IV.
Exerccio
A cromatografia de alta eficincia uma tcnica de
anlise instrumental de grande utilidade porque
permite fazer, com grande eficincia, a separao, a
identificao e a quantificao de compostos em
misturas complexas. Acerca de cromatografia e
tcnicas afins, julgue os seguintes itens.
V F
a) Na cromatografia lquida por partio, tanto a fase
estacionria quanto a fase mvel so lquidas.
b) Na cromatografia quantitativa, a injeo de um
padro interno feita com o intuito de evitar
interferncias decorrentes da matriz da amostra.
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Um detector ideal para a CLAE seria aquele com as seguintes
caractersticas:
a) Alta sensibilidade e baixo limite de deteco
b) Resposta rpida a todos os solutos
c) Insensibilidade a mudanas nas temperatura e na vazo da
fase mvel.
d) Resposta independente da fase mvel
e) Pequena contribuio ao alargamento do pico pelo volume
extra da cela do detector.
f) Resposta que aumente linearmente com a quantidade do
soluto
g) No destruio do soluto.
h) Segurana e convenincia de uso.
i) Informao qualitativa do pico desejado.
Detector
Detector
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Mais amplamente utilizados (Absoro
UV/VIS (espectrofotmetro));
Mais modernos (Fotodiodos);
Detector de ndice de refrao,
Detector eletroqumico
Detector
Antes de realizar experimentos de validao ou
mesmo anlises de amostras, deve-se avaliar
se o sistema utilizado para a anlise capaz
de fornecer dados de qualidade aceitvel. Esta
avaliao alcanada com experimentos de
conformidade do sistema, que pode ser
definido por um conjunto de testes que
visam garantir que o equipamento utilizado
est apto a gerar resultados de exatido e
preciso aceitveis (FDA).
Adequabilidade
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Resoluo (R) e Pratos tericos;
Repetibilidade (DPR) 2% (n=5);
Fator de cauda (T) (iguala 1 se for
simtrico);
Testes de Adequabilidade
Email: luizaeq@yahoo.com.br
A persistncia o menor caminho do xito.
Charles Chaplin