TEMA : CIDOS NUCLEICOS ESPECIALIDAD : ENFERMERA TCNICA PROFESOR : EDGAR FLORES M. CURSO : BIOQUMICA INTEGRANTES : - HENRIQUEZ SNCHEZ, Meliss G!" - MENDIETA HENRIQUEZ, R#sl$ - RO%AS ALFARO, Sil&i - 'ERDE 'I'ES, M("li) - BARRERA TORRES, 'e(*)i+ - ESTRADA CRUZ, ,#&) TURNO : MA-ANA AULA : N . /00 CICLO : III LIMA PER 2006 DEDICATORIA El presente trabajo va dedicado a nuestros Padres, ya que gracias al apoyo que recibimos de parte de ellos, iluminan nuestro camino acia la superaci!n personal y pro"esional de cada uno de nosotros# INTRODUCCIN Los cidos nucleicos son biopolmeros, de elevado peso molecular, formados por otras subunidades estructurales o monmeros, denominados nucletidos. El descubrimiento de los cidos nucleicos se debe a Meischer (186!, el cual traba"ando con leucocitos # espermato$oides de salmn, obtuvo una sustancia rica en carbono, hidr%eno, o&%eno, nitr%eno # un porcenta"e elevado de fsforo. ' esta sustancia se le llam en un principio nucleina, por encontrarse en el n(cleo. ')os ms tarde, se fra%ment esta nucleina, # se separ un componente proteico # un %rupo prost*tico, este (ltimo, por ser cido, se le llam cido nucleico. En los a)os +,, -ossel comprob .ue tenan una estructura bastante comple"a. En 1/+, 0ames 1atson # 2rancis 3ric4, descubrieron la estructura tridimensional de uno de estos cidos, concretamente del cido deso&irribonucleico ('56!. "CIDOS NUCLEICOS I#PORTANCIA 1. 'lmacenan # transmiten la informacin %en*tica. 7. 5iri%e la 8iosntesis de todas las protenas celulares. +. 'daptacin de las c*lulas a los cambios fisiol%icos # del medio ambiente. 9. :esponsables de las mutaciones en la 3onstitucin ;en*tica de un or%anismo sean naturales o inducidas. /. 5eterminan la %ran variabilidad individual dentro de una especie. DE$INICIN Los cidos n%cleicos son macromol*culas, polmeros formados por la repeticin de monmeros llamados nucletidos, unidos mediante enlaces fosfodi*ster. <e forman as lar%as cadenas o &olin%cletidos. =ueden alcan$ar tama)os %i%antes (millones de nucletidos!, siendo las mol*culas ms %randes .ue se conocen. <on las mol*culas .ue tienen la informacin %en*tica de los or%anismos # son las responsables de su transmisin hereditaria. CO#PONENTES ESTRUCTURALES DE LOS "CIDOS NUCLEICOS ' "CIDO $OS$RICO Es el encar%ado de unir a los 6ucletidos> otor%a el carcter ?cido de los ?cidos 6ucleicos # le da la propiedad de unirse a colorantes bsicos. 5e frmula .umica @+=A9, cido .ue constitu#e la fuente de compuestos de importancia industrial llamados fosfatos. ' temperatura ambiente, el cido fosfrico es una sustancia cristalina con una densidad relativa de 1,8+. Biene un punto de fusin de 97,+/ C3. 6ormalmente, el cido fosfrico se almacena # distribu#e en disolucin. <e obtiene mediante el tratamiento de rocas de fosfato de calcio con cido sulf(rico, filtrando posteriormente el l.uido resultante para e&traer el sulfato de calcio. Atro modo de obtencin consiste en .uemar vapores de fsforo # tratar el &ido resultante con vapor de a%ua. El cido es mu# (til en el laboratorio debido a su resistencia a la o&idacin, a la reduccin # a la evaporacin. Entre otras aplicaciones, el cido fosfrico se emplea como in%rediente de bebidas no alcohlicas, como pe%amento de prtesis dentales, como catali$ador, en metales ino&idables # para fosfatos .ue se utili$an, como ablandadores de a%ua, fertili$antes # deter%entes. ' PENTOSA Las &entosas son monosacridos (%l(cidos simples! formados por una cadena de cinco tomos de carbono. 3omo en los dems monosacridos aparecen en su estructura los %rupos alcohlicos (A@!. 'dems, tambi*n pueden llevar %rupos cetnicos o aldehdicos. La frmula %eneral de las pentosas es 3 / @ 1, , / . ' continuacin se citan las pentosas ms importantesD 'ldopentosaD Bambi*n llamada ribosa. 3omo su nombre indica contiene la funcin aldehdo. Es uno de los compuestos .ue forman el ':6. 3etopentosa (o ribulosa!D 3ontiene la funcin cetona. Es un compuesto .ue interviene en la fotosntesis. :ibulosaD En realidad no es una pentosa #a .ue carece del %rupo A@ en el carbono 7, aun.ue se estudia como tal debido a las similitudes estructurales con *stas. La ribulosa es tambi*n llamada 7 deso&irribosa # forma parte del '56. ' (ASE NITRO!ENADA Las )ases nitro*enadas son compuestos or%nicos cclicos, .ue inclu#en dos o ms tomos de nitr%eno. <on parte fundamental de los nuclesidos, nucletidos # cidos nucleicos. 8iol%icamente e&isten cinco bases nitro%enadas principales, .ue se clasifican en dos %rupos, )ases &%r+nicas (derivadas de la estructura de la purina! # )ases &irimid+nicas (derivadas de la estructura de la pirimidina!. La adenina ('! # la %uanina (;! son purnicas, mientras .ue la timina (B!, la citosina (3! # el uracilo (E! son pirimidnicas. Las cuatro primeras bases se encuentran en el '56, mientras .ue en el ':6 en lu%ar de timina e&iste el uracilo. =or comodidad, cada una de las bases se representa por la letra indicada. En punto fundamental es .ue las bases nitro%enadas son complementarias entre s, es decir, forman pare"as de i%ual manera .ue lo haran una llave # su cerradura. La adenina # la timina son complementarias ('FB!, al i%ual .ue la %uanina # la citosina (;F3!. 5ado .ue en el ':6 no e&iste timina, la complementariedad se establece entre adenina # uracilo ('FE!. La complementariedad de las bases es la clave de la estructura del '56 # tiene importantes implicaciones, pues permite procesos como la replicacin del '56 # la traduccin del ':6 en protenas. NUCLETIDO ,Nt- En Gn%cletido. es un compuesto formado por una base nitro%enada, un a$(car de cinco tomos de carbono (pentosa! # cido fosfrico. 8ases nitro%enadasD derivan de compuestos heterocclicos aromticos, la purina # la pirimidina. o 8ases nitro%enadas purnicasD son la adenina ('! # la %uanina (;!. 'mbas entran a formar parte del '56 # del ':6. o 8ases nitro%enadas pirimidnicasD son la timina (B!, citosina (3! # uracilo (E!. La timina # la citosina intervienen en la formacin del '56. En el ':6 aparecen la citosina # el uracilo. =entosaD el a$(car de cinco tomos de carbono puede ser ribosa (':6! o deso&irribosa ('56!. ?cido fosfricoD de frmula @ + =A 9 . NUCLETIDOS Monmeros constitu#entes de los cidos nucleicos. Bodos los nucletidos estn compuestos de una base nitro%enada (un compuesto cclico con tomos de nitr%eno!, un a$(car (ribosa o deso&irribosa!, # un %rupo fosfato. <i el a$(car es ribosa se trata de un ri)on%cletido/ constitu#ente del ':6. <i el a$(car es deso&irribosa se trata de un deso0irri)on%cletido/ constitu#ente del '56. E&isten slo cinco bases nitro%enadasD adenina ('!, timina (B!, %uanina (;!, citosina (3! # uracilo (E!. <lo las cuatro primeras bases se encuentran en el '56, mientras .ue en el ':6 la timina es reempla$ad por el uracilo. Es decir, e&isten ribonucletidos # deso&irribonucletidos con ', ; # 3, pero slo un deso&irribonucletido con B # un ribonucletido con E. La secuencia de nucletidos .ue componen un cido nucleico se representa por comodidad indicando las bases nitro%enadas .ue forman parte de cada nucletidoD p.e., ;'BB'3' indicara una secuencia de '56 (ha# timina!. La misma secuencia de ':6 sera ;'EE'3', con el uracilo reempla$ando a la timina. $%nciones de los N%cletidos Bodos los tipos de c*lulas (de mamferos, bacterianas # ve%etales! contienen una %ran variedad de nucletidos # sus derivados. <us principales funciones sonD 12 =apel en el metabolismo ener%*ticoD El 'B= se %enera en las c*lulas mediante la fosforilacin o&idativa # la fosforilacin a nivel de sustrato. El 'B= se utili$a para impulsar las reacciones metablicas, como un a%ente fosforilante, # est implicado en procesos como la contraccin muscular, transporte activo # mantenimiento de la inte%ridad de la membrana celular. En su accin como a%ente fosforilante, el 'B= es un dador de fosfato para la %eneracin de los otros nuclesidos /HFtrifosfatos (por e". ;B=, EB=, 3B=!. 32 Enidades monom*ricas de los cidos nucleicosD los cidos nucleicos, 56' # :6', estn compuestos por unidades monom*ricas de los nucletidos. En las reacciones en las .ue se sinteti$an los cidos nucleicos, los nuclesidos /HF trifosfatos son los sustratos .ue se unen al polmero a trav*s de enlaces fosfodi*ster +HF/H con liberacin de pirofosfato. Mediadores fisiol%icosD otras funciones de los nucletidos son a.uellas en las .ue act(an como mediadores de procesos metablicos clave. El 'M=c act(a como segundo mensajero en el control de la %luc%enolisis # %luco%*nesis mediado por la adrenalina # el %luca%n. 42 3omponentes de coen$imasD 3oen$imas tales como el 6'5, 2'5 # coen$ima ' son constitu#entes metablicos importantes de las c*lulas .ue estn implicados en muchas rutas metablicas. Intermediarios activadosD Los nucletidos tambi*n sirven de portadores de intermediarios activados necesarios para diversas reacciones. En compuesto tal como la E5=F%lucosa es un intermediario clave en la sntesis del %luc%eno # de las %lucoprotenas. La ;5=Fmanosa, la ;5=Ffucosa, la E5=F%alactosa # el 3M=Fcido silico son intermediarios clave de reacciones en las .ue las porciones a$(car son transferidas para la sntesis de %lucoprotenas. El 3B= se utili$a para %enerar 35=Fcolina, 35=Fetanolamina # 35=Fdiacil%liceroles los cuales estn involucrados en el metabolismo de fosfolpidos. 52 Efectores alost*ricosD Muchos de los pasos re%ulados en las vas metablicas estn controlados por las concentraciones intracelulares de nucletidos. POLI#ERI6ACIN Los nucletidos se unen mediante el Enlace 2osfodiester para formar lar%as cadenas de =olinucletidos. El Enlace 2osfodiester se forma asD El ;ru)o @idr&ido del 3, de la =entosa de un 6ucletido reacciona con el ;rupo @idr&ido del ?cido 2osfrico del otro nucletido # se elimina una mol*cula de a%ua (:eaccin de 3ondensacin!. CLASI$ICACIN DE LOS "CIDOS NUCLEICOS <on dos tiposD 56' # :6' Caracter+sticas del DNA7 1. (icatenaridadD El 56' est constituido por 7 cadenas de =olinucletidos en sentido +J /J. 32 Anti&aralelismo +. 8elicoidalidad7 El 56' tiene forma plectonimica. Esto implica .ue las 7 cadenas de =olinucletidos al unirse se enrollan adoptando la forma de escaleras en caracol. 9. Com&lementariedadD Las 8ases 6itro%enadas se a%rupan de la si%uiente formaD Ti&os de DNA7 DNA 9 AD =resenta espira mu# lar%a, presenta un %iro hacia la derecha. DNA 9 (D Es el ms com(n propuesta por 1atson K 3ric4. =resenta %iro hacia la derecha. DNA 9 6D =resenta sus espinas con %iro a la i$.uierda. <u funcin es desconocida. DNA #ONOCATENARIOD 3onstituido por una sola hebra. =uede serD 12 Lineal 32 3ircular DNA (ICATENARIOD 3onstituido por 7 hebras. =uede serD 1. 3ircularD /L9,, =ol#oma, 8acterias, Mitocondrias, 3loroplastos. 7. LinealD Es bacteriofa%os B7, B/, BM, =77 # en el n(cleo de las 3*lulas Eucariotas. CIDO NUCLEICO Estr%ct%ra del DNA 8istoria Del Adn El '56 fue aislado por primera ve$ por el cientfico alemn 2riedrich Miescher en 186. 5ebido a .ue lo encontr en los n(cleos de las c*lulas, denomin a este compuesto nuclena. ' medida .ue se fue conociendo la estructura .umica de esta mol*cula, se lo llam cido nucleico # por (ltimo cido deso&irribonucleico ('56!. En 119, el .umico alemn :obert 2eul%en describi un m*todo para te)ir el '56 por medio de un colorante llamado fucsina. Etili$ando este m*todo, descubri .ue el '56 se encontraba formando parte de los cromosomas. <eis a)os ms tarde, el bio.umico =.'. Levene, anali$ los componentes del '56. Encontr .ue contena cuatro bases nitro%enadasD citosina, timina, adenina # %uanina> el a$(car deso&irribosa> # un %rupo fosfato. =or medio de su descubrimiento conclu# .ue cada unidad bsica del '56, llamada nucletido, est compuesta de una base nitro%enada unida a un a$(car # *sta unida a su ve$ a un %rupo fosfato. ' Estr%ct%ra Primaria El '56 est compuesto por una secuencia de nucletidos formados por deso0irri)osa. Las bases nitro%enadas .ue se hallan formando los nucletidos de '56 son Adenina, !%anina, Citosina # Timina. 6o aparece Eracilo. Los nucletidos se unen entre s mediante el %rupo fosfato del se%undo nucletido, .ue sirve de puente de unin entre el car)ono :. del &rimer nucletido # el car)ono 4. de si*%iente nucletido. 3omo el primer nucletido tiene libre el carbono /G # el si%uiente nucletido tiene libre el carbono +G, se dice .ue la secuencia de nucletidos se ordena desde /G a +G (:. 4.!. ' Estr%ct%ra Sec%ndaria ,; 9 Do)le 8<lice- La estructura secundaria del '56 fue propuesta por 0ames 1atson # 2rancis 3ric4, # la llamaron el modelo de do)le =<lice de ADN. Este modelo est formado por dos =e)ras de n%cletidos. Estas dos hebras se sit(an de forma anti&aralela, es decir, una orientada en sentido :. 4. # la otra de 4. :.. Las dos estn paralelas, formando &%entes de 8idr*eno entre las bases nitro%enadas enfrentadas. 3uando en una hebra encontramos Adenina, en la otra hebra hallamos Timina. 3uando en una hebra encontramos !%anina, en la otra hallamos Citosina. Estas bases enfrentadas son las .ue constitu#en los puentes de @idr%eno. 'denina forma dos puentes de @idr%eno con Bimina. ;uanina forma tres puentes de @idr%eno con la 3itosina. Las dos hebras estn enrolladas en torno a un e"e ima%inario, .ue %ira en contra del sentido de las a%u"as de un relo". Las vueltas de estas h*lices se estabili$an mediante puentes de @idr%eno. Esta estructura permite .ue las hebras .ue se formen por d%&licacin de ADN sean copia complementaria de cada una de las hebras e&istentes. ' Estr%ct%ra Terciaria El '56 es una mol*cula mu# lar%a en al%unas especies #, sin embar%o, en las c*lulas eucariotas se encuentra alo"ado dentro del min(sculo n(cleo. 3uando el '56 se une a protenas bsicas, la estructura se compacta mucho. Las protenas bsicas son 8istonas o Protaminas. La unin con 8istonas %enera la estructura denominada n%cleosoma. 3ada n%cleosoma est compuesto por una estructura voluminosa, denominada core, se%uida por un eslabn o NLin>erN. El core est compuesto por un octmero de protenas, 8istonas, denominadas @7', @78, @+ # @9. 3ada tipo de histona se presenta en n(mero par. Esta estructura est rodeada por un tramo de '56 .ue da una vuelta # +O9 en torno al octmero. El Lin4er est formado por un tramo de '56 .ue une un nucleosoma con otro # una histona @1. El con"unto de la estructura se denomina ?i)ra de cromatina de 1@@A. Biene un aspecto repetitivo en forma de collar de &erlas, donde las perlas seran los nucleosomas, unidos por los lin4er. El '56 debe encontrarse ms compacto en el n(cleo de los es&ermatoBoides. En este caso, el '56 se une a protenas de carcter ms bsico, denominadas Protaminas. El '56 se enrolla sobre estas protenas, formando una estructura mu# compacta, denominada estr%ct%ra cristalina del ADN ' Estr%ct%ra C%aternaria La cromatina en el n(cleo tiene un %rosor de +,,P. La fibra de cromatina de 1,,P se empa.ueta formando una ?i)ra de cromatina de 4@@A. El enrollamiento .ue sufre el con"unto de nucleosomas recibe el nombre de solenoide. Los solenoides se enrollan formando la cromatina del n(cleo interfsico de la c*lula eucariota. 3uando la c*lula entra en divisin, el '56 se compacta ms, formando los cromosomas. S+ntesis del DNA #odelo SemiconserCador. Las 7 cadenas de la doble h*lice pueden separarse # cada cadena de =olinutidos sirve de molde para la sntesis de una nueva mol*cula de 56'. La replicacin del 56' si%ue la re%la de apareamiento de 8asesD ' con B # ; con 3. 5ado .ue cada una de las 7 dobles h*lices conserva slo una de las cadenas =olinucletidos ori%inales, se dice .ue el =roceso es semiconservatorio. D%&licacin del DNA Las etapas .ue tiene lu%ar durante el =roceso de 5uplicacin de 56' en eucariotas sonD 12 $ormacin de la (%r)%Da de re&licacin ,EREPLICN/ DUPLICN-7 a. La duplicacin de 56' comien$a en un sitio llamado QAri%enR (<itio Ari! el .ue es rico en ' # B. Este sitio es reconocido por la en$ima 56' polimerasa III mediante su subunidad 8. b. La en$ima @elicasa act(a inmediatamente sobre el 56' ocasionando la separacin de las 7 cadenas complementarias del 56'. La helicasa es una en$ima dependiente de 'B= .ue desestabili$a los =uentes de @idr%eno e&istente entre 'SB # 3S;. Esta en$ima forma una hor.uilla de :eplicacin. La accin de esta en$ima %enera un superenrollamiento del 56' por delante de la hor.uilla aumentando el %rado de tensin # torsin del 56'. c. La en$ima topoisomerasa rela"a el superenrrollado cortando una o las 7 cadenas del 56', ocasionando su desenrrollamiento, lue%o sella la muesca. La topoisomerasa no consume 'B=, rompe enlaces fosfodiester, desenrolla al 56' # vuelve a formar el enlace 2osfodiester. d. 5etrs de la hor.uilla de :eplicacin las cadenas de 56' son estabili$adas por una serie de =rotenas llamadas Q5esestabili$adores de los @*liceR o <<8 (del in%l*s <I6;LE <B:'65 8I65I6;!. 32 S+ntesis de RNA ce)adores Ena ve$ formada la 8urbu"a de :eplicacin las en$imas llamadas :6' =rimasas forman pe.ue)os fra%mentos de :6' 3ebadores (S=:IME:<!. Estos fra%mentos de :6' son mol*culas iniciadoras # se sinteti$an en la direccin /J +J. <obre una cadena de molde de 56' (BEM=L'BE!, se forma un solo :6' cebador, mientras .ue sobre la otra se forman varios :6' cebadoras. 42 S+ntesis Semidiscontin%a del DNA Los :6' 3ebadores de"an libre su e&tremo + donde tienen un ;rupo A@ (A&idrilo! sobre el .ue la 56' =olimerasa III puede incorporar nucletidos de 56'. Ena de las cadenas se duplica de forma continua mientras .ue la otra lo hace de forma discontinua, a este proceso se le llama Q<EMI5I<3A6BI6E'R. D%&licacin Contin%a ,Adelantada- <e reali$a sobre la cadena del 56', a la .ue se ha incorporado un solo :6' cebador. Esta cadena de 56' se denomina QLder o 'delantadaR. La 56' polimerasa III incorpora deso&irribonucleotidos trifosfatados por servicio /J +J. Los nucletidos incorporados son complementarios a los del 56' molde. Lue%o catali$a la formacin de enlaces fosfodiester> en el proceso se libera pirofosfato (7=I!. La nueva cadena se sinteti$a de forma continua. D%&licacin Discontin%a , RetraBada o Retardada- <e reali$a sobre la cadena del Avidos por la 56' polimera$a I. Esta en$ima act(a como e&onucleasa cuando e&pulsa al :6' cebador terminal de la sntesis continua, # como endonucleasas, cuando e&pulsa a los :6' cebadoras de la sntesis discontinua. La 56' polimerasa lleva los espacios de"ados por la remocin de los cebadores. En la duplicacin discontinua la en$ima li%asa una los fra%mentos de A-'<'-I formando enlace fosfodiester. RNA ,"CIDO RI(ONUCLEICO- Es el '6 ms a)%ndante en la c*lula, # puede purificarse fcilmente. Ena c*lula tpica contiene 1, veces ms :6' .ue 56'. El a$(car presente en el :6' es la ri)osa. Esto indica .ue en la posicin 7G del anillo del a$(car ha# un %rupo hidro&ilo (A@! libre. =or este motivo, el :6' es .umicamente inestable, de forma .ue en una disolucin acuosa se hidroli$a fcilmente. En el :6' la )ase F%e se a&area con la A es U, a diferencia del 56', en el cual la ' se aparea con B. En la ma#or parte de los casos es un polmero monocatenario, pero en ciertos casos puede presentar $onas en su secuencia con a&areamientos intracatenarios. @a# tres clases principales de :6'D ' RNA #ENSAGERO El :6' mensa"ero (:6' m ! se sinteti$a sobre un molde de 56' # sirve de pauta para la sntesis de protenas (trad%ccin!. <u peso molecular es alto # contiene (nicamente los nucl*otidos ', E, ; # 3. 'dems de contener codificada la secuencia de una protena, contiene se)ales para la iniciacin (codn 'E;, .ue codifica al aminocido metionina! # terminacin de la sntesis (codones E'', E'; o E;'!. En eucariotas, el :6' m maduro presenta unas caractersticas especiales, #a .ue adems de los codones de iniciacin ('E;! # de terminacin (E';! presenta en su e0tremo :. una estructura comple"a llamada Nca&%c=aN (cap!, # en su e0tremo 4. una cadena de &oliA de lon%itud variable. Estas modificaciones tienen por ob"eto aumentar la vida media de estas mol*culas en el citoplasma. ' RNA DE TRANS$ERENCIA ,RNAt- Las mol*culas de :6' transferente (:6' t ! tienen entre M/ # , nucletidos, # su peso molecular es de unos 7/,,, dalton. <e conocen unos 6, :6' t distintos, # se encuentran en todas las c*lulas. Intervienen en la sntesis de protenas, #a .ue van unidos a un aminocido. =ueden presentar n%cletidos &oco %s%ales (cido pseudouridlico, cido inoslico! e incluso bases caractersticas del 56' como la timina. <u estructura secundaria presenta un ple%amiento comple"o en donde alternan $onas apareadas # $onas no apareadas, # en donde se pueden distin%uir $onas crticas, como la Bona de %nin a aminocidos # la Bona F%e reconoce los codones del RNA m ' RNA RI(OS#ICO ,RNAr- El :6' ribosmico (:6' r ! est presente en los ribosomas, or%nulos intracelulares implicados en la sntesis de protenas (2i%ura de la i$.uierda!. <e conocen + 9 tipos distintos de :6' r . <u estructura secundaria # terciaria presenta un ple%amiento comple"o .ue le permite asociarse tanto a las protenas inte%rantes de los ribosomas como a otros :6' r # participar en el proceso de sntesis proteica. (I(LIO!RA$HA @errera, E.(Eds.!. 8io.umica. 'spectos estructurales # vas metablicas. (Lols. I # II! (7T edicin!. InteramericanaFMc;raUF@ill. Madrid, 11. ;riffiths, '.> Miller, 0.> <u$u4i, 5.> LeUontin, :., # ;elbart, 1.> Introduccin al anlisis %en*tico. /T Ed. 1/. Mc;raU @illF Interamericana. 5evlin, B. M. (Ed!. 8io.umica. Libro de te&to con aplicaciones clnicas. Editorial :everte, <.'., 8arcelona, 188. 5irecciones en InternetD o httpDOOUUU.ehu.esObiomoleculasO'6Oan+.htmVr o httpDOOUUU.biopsicolo%ia.netOfichasOpa%eW1//.html o UUU.arra4is.esOXlluen%oOanucleicos.html o UUU.es.Ui4ipedia.or%OUi4iO?cidoWnucleico
Manual de Carreteras - ETG para Construcci+ N - EG-2013 - MTC (Caratula - Presentaci+ N - Secci+ N 507 Tuber+¡a Corrugada Met+ílica - Secci+ N 807 Guardav PDF