UNIVERSIDAD NACIONAL DE CRDOBA

FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS, FSICAS Y NATURALES

Ctedra de Microbiologa general y de los animales

Trabajo ulico N 2:
REMEDIACION DE SUELOS ALCALINOS POR INOCULACIN DE Penicillium oxalicum CON ROCA
FOSFRICA

Profesores:
MSc. Ing. Raquel Bazn
MSc. Ing. Nancy Larrosa
Dr. Lic. Abel Lpez
Alumnos:
Massobrio Alejandro Julio
Molinari Gabriel Ignacio
Carrera: Ingeniera Qumica

Crdoba 18 de noviembre de 2010
INDICE:
Introduccin..3
Desarrollo.4
1. Caractersticas generales del microorganismo utilizado...4
2. Cultivo para produccin inicial de conidios..5
3. Cultivo a gran escala..5
3.1. Descripcin del proceso de cultivo a gran escala.6
3.1.1. Fermentador.6
3.1.2. Sustrato utilizado..6
3.1.3. Condiciones de fermentacin.6
3.1.4. Etapas del proceso..7
4. Inoculacin en campo con agregado de roca fosfrica.7
Conclusin..8
Bibliografa..9

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INTRODUCCIN:
Frente al crecimiento de la poblacin mundial, la demanda de alimentos se ha incrementado
notablemente, junto con un desplazamiento dramtico de cosechas de alimentos por cosechas
para combustibles y ms de 1,500 millones de desnutridos en el mundo, hay prcticas agrcolas
que deben ser modificadas y mejoradas para estar a la altura de los acontecimientos.
En Argentina existen grandes superficies de tierras que no son cultivadas debido a su carcter
salino. En las provincias de Santa Fe, Buenos Aires, Crdoba, Entre Ros, La Pampa y San
Luis, que abarcan cerca de 91 millones de hectreas de superficie, aproximadamente hay
alrededor de 12 millones afectadas por problemas de salinidad. Las caractersticas de estos
suelos son: PH elevado (mayor a 8), compactados, degradados y desnudos. Su carcter
alcalino imposibilita la solubilizacin de fosfatos inorgnicos insolubles, por lo cual el
fsforo presente no est disponible para las plantas.
El fsforo es uno de los principales nutrientes limitantes del crecimiento vegetal, por ello se
debe recurrir a diferentes tcnicas de fertilizacin para remediar estas deficiencias.
Frecuentemente se utilizan fertilizantes fosfatados, pero su uso de manera regular es caro e
indeseable para el medio ambiente. Las rocas de fosfato natural han sido reconocidas como
una valiosa alternativa para estos fines aunque debe ser solubilizado previamente si se
utiliza en suelos alcalinos. Muchos hongos y bacterias del suelo pueden solubilizar fosfatos
inorgnicos a travs del proceso de quelacin, reacciones de intercambio y produccin de
cidos orgnicos.
El presente trabajo propone optimizar la solubilizacin de roca fosfrica en suelos alcalinos
con la utilizacin del hongo Penicillium oxalicum y as obtener mayor crecimiento y
rendimiento de diferentes cultivos.

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DESARROLLO:
La roca fosfrica es un fertilizante natural, que presenta una adecuada relacin de precios
por unidad de nutriente, pero de menor concentracin y ms lenta solubilidad que los
fertilizantes industriales. En suelos cidos, mantiene una progresiva solubilizacin a travs
del tiempo que posibilita un aporte de P similar al de las fuentes ms solubles. Sin
embargo, en suelos alcalinos es necesario utilizar tcnicas que permitan solubilizarla.
Investigaciones recientes demuestran que el Penicillium oxalicum inoculado en suelos
alcalinos adosados con roca fosfrica produce una liberacin sostenible de fosfatos junto
con la remediacin de los mismos, aumentando el volumen de los brotes y races de
cultivos de trigo y maz en comparacin con suelos no tratados.
Analizaremos la posibilidad de inocular el hongo Penicillium oxalicum en suelos alcalinos
como microorganismo solubilizador de roca fosfrica para mejorar el crecimiento y
captacin de nutrientes en plantas cultivadas en los mismos.
1. Caractersticas generales del microorganismo utilizado:
Penicillium oxalicum:
Penicillium es un gnero de hongos muy grande, ubicuo, perteneciente a la divisin
Ascomycetes, siendo comnmente el gnero de hongos ms abundante en suelos.
El Penicillium oxalicum posee hifas transparentes septadas de 2 a 3 m de dimetro y
conidiforos ramificados con caractersticos "pinceles" biverticilados y asimtricos en
cuyas fialides terminales se forman largas cadenas de conidios de 4,5-6,5 x 3,0-4,0 m con
forma elipsoidal. Este hongo se caracteriza por la produccin de cidos orgnicos tales
como; cido actico, mlico, glucnico, oxlico, entre otros.
Requiere para su ptimo crecimiento disponibilidad de oxgeno, una fuente de nitrgeno
(podran ser sales de amonio), de manganeso y/o magnesio, de carbono, de fsforo y
micronutrientes necesarios. Se desarrolla a temperaturas entre 20 y 30 C, en un amplio rango de
pH (entre 3 y 9) y con humedad del 40% aproximadamente.
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Clasificacin taxonmica:
Reino Fungi
Divisin Ascomycetes
Clase Euascomycetes
Orden Eurotiales
Familia Trichocomaceae
Gnero Penicillium
Especie P. Oxalicum


2. Cultivo para produccin inicial de conidios:
El aislado de Penicillium oxalicum obtenido de colecciones de cultivos, se inocula en placas de
petri con Agar papa dextrosa (composicin en g/L: Papa, 200; Glucosa o sacarosa, 20; Agar-agar,
15; pH del medio, 6,5) o con Agar Pikovskaya (composicin en g/L: Extracto de levadura, 0.50;
Dextrosa, 10.00; Fosfato de calcio, 5.00; Sulfato de amonio, 0,50; Cloruro de potasio, 0,20; Sulfato
de magnesio, 0,1; Sulfato de manganeso, 0.0001; Sulfato ferroso, 0.0001; Agar, 15.00; pH del
medio, 7) durante 7 das en oscuridad a una temperatura de 28C. Luego se procede a la
separacin del micelio con alto contenido en esporas viables para ser utilizadas en la produccin
de biomasa a gran escala.

3. Cultivo a gran escala:

El cultivo a gran escala para produccin de biomasa puede llevarse a cabo en biorreactores de
medio slido.
Algunas de las ventajas del cultivo en medio slido frente a los dems mtodos de fermentacin
son:
Simplicidad de los medios de cultivo, ya que un mismo sustrato proporciona casi todos los
nutrientes necesarios, funcionando adems como medio de soporte.
Fcil produccin de esporas fngicas.
Mayor simplicidad en el diseo de los fermentadores y sistemas de control.
Mayores facilidades para la obtencin y aplicacin del inoculo, pudiendo utilizarse las
esporas directamente en la mayor parte de las situaciones.
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Reducido riesgo de contaminacin por bacterias menos aptas para soportar la baja
actividad de agua que caracteriza a estos sistemas.
Bajos requerimientos energticos.
Ambiente similar al de los hbitats naturales de los microorganismos utilizados.
Reducido volumen de efluentes.
La seleccin de un sustrato adecuado es un factor clave en el proceso de fermentacin
slida. Pudiendo utilizarse residuos agroindustriales debido a que suplen la demanda de
nutrientes requerida por los microorganismos a un bajo costo. Algunas posibilidades son el
uso de bagazo de trigo, de maz, de caa o de arroz.

3.1. Descripcin del proceso de cultivo a gran escala:

3.1.1. Fermentador:
Proponemos el uso de un fermentador de medio slido en bandejas, en el cual, el sustrato
inoculado se distribuye en bandejas inmviles formando un lecho de altura generalmente
inferior a 2 cm. Las bandejas se colocan consecutivamente en hileras una sobre otra, con
algunos centmetros de espacio entre ellas para permitir el flujo de aire y gases, y son
colocadas en una cmara de acero inoxidable bajo condiciones controladas de temperatura
y humedad. Dentro de sus ventajas, podemos mencionar: bajo costo de inversin en
equipos, facilidad de aireacin debido al aumento del rea de transferencia, manejo de altos
volmenes de material, aunque no permite un control estricto del proceso de fermentacin.

3.1.2. Sustrato utilizado:
Salvado y bagazo de trigo como fuente de nitrgeno,
carbono y minerales, sirve tambin como soporte.
Vermiculita en pequeas partculas como fuente principal de magnesio y otros minerales.

3.1.3. Condiciones de fermentacin:
Temperatura: 28C.
pH inicial: entre 5 y 6.
Humedad: debe mantenerse aproximadamente en un 40% (p/p).
Aireacin: continua durante todo el proceso.
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3.1.4. Etapas del proceso:
La tcnica de fermentacin slida consta de las siguientes etapas:
1. Preparacin de la mezcla slida.
2. Reduccin de la carga microbiana mediante la inyeccin directa de vapor de agua.
3. Inoculacin de la matriz slida con un inoculo lquido.
4. Ajuste de pH y humedad.
5. Puesta del medio en el fermentador.
6. Inyeccin continua o intermitente de aire a temperatura y humedad controladas.
7. Secado para obtener humedad deseada.
8. Molienda o adecuacin del tamao de partcula

4. Inoculacin en campo con agregado de roca fosfrica:

El inoculo es preparado con 20 gramos aproximadamente del material obtenido en la
fermentacin previamente molido (contiene biomasa, vermiculita y residuos, procurando
una cantidad de 4.8-5.4 x 105 esporas/g) junto con 10 gramos de roca fosfrica de
granulometra equiparable a la arena gruesa-grava por cada metro cuadrado de suelo a
sembrar. A este preparado tambin se agregan sales de amonio como fertilizante
nitrogenado.
Para su aplicacin en el campo proponemos incorporarlo en lnea de siembra utilizando un
sistema de labranza de siembra directa, como habitualmente se utiliza en la incorporacin
de roca fosfrica y otros fertilizantes slidos.

CONCLUSIN:
Inocular Penicillium oxalicum en presencia de roca fosfrica en suelos aparece como una atractiva
alternativa para conseguir fuentes de fosforo solubles de bajo costo, fcil aplicacin y amigables
con el medio ambiente.
En suelos alcalinos, esta tcnica podra mejorar las propiedades fsico-qumicas de los mismos,
aumentando su productividad y rendimiento. De este modo podran incorporarse millones de
hectreas, hoy improductivas, a la produccin de cultivos para satisfacer la creciente demanda de
alimentos.
Vale aclarar que los procesos descriptos son una aproximacin terica a una solucin real, ya que
no se han realizado demasiados estudios de campo referidos a la utilizacin de Penicillium
oxalicum como microorganismo solubilizador de roca fosfrica para la remediacin de suelos
alcalinos.


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BIBLIOGRAFIA:
Web:
ELSEVIER. European Journal of Soil Biology xxx (2010) 1-5
http://www.elsevier.com/locate/ejsobi
http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis23.pdf
http://www.sumobrain.com/patents/wipo/Method-promoting-tomato-plant-
growth/WO2007057486.html
http://redalyc.uaemex.mx/src/inicio/ArtPdfRed.jsp?iCve=72410301
http://cdigital.dgb.uanl.mx/te/1020074479.pdf
http://apsjournals.apsnet.org/doi/abs/10.1094/PHYTO.2002.92.8.863
http://www.reviberoammicol.com/photo_gallery/Penicillium/oxalicum/

http://www.inta.gov.ar/pergamino/info/documentos/ext09/junin/UTILIZACI%C3%93N%20DE%20
ROCA%20FOSF%C3%93RICA%20EN%20UNA_10.pdf
http://www.reviberoammicol.com/1998-15/103106.pdf
Libros:
Brock. BIOLOGIA DE LOS MICROORGANISMOS (10a ED.) de MADIGAN, MICHAEL y MARTINKO,
JOHN y PARKER, JACK