La hormona de crecimiento es un poliopptido globular de 191 aminocidos

que contiene dos puentes disulfuro y un peso molecular de 22 bp kda. Es conocida

tambin como somatotropina, producida en la pituitaria anterior del cerebro de las
personas, la cual se secreta durante toda la vida, siendo en mayor concentrado
durante la noche y teniendo picos altos durante la pubertad. Sus funciones principales
son la regeneracin celular, el crecimiento del esqueleto, crecimiento postnatal y
metabolismo adecuado de lpidos, minerales, carbohidratos y nitrgeno. Mediante
procesos de sntesis de protena y rompimiento de cidos grasos para la produccin
de energa. Su deficiencia, puede causar enanismo, dao tisular, deficiencia de
cicatrizacin de heridas, enfermedades como el sndrome de Turner e insuficiencia
renal crnica. En tiempos pasados, se obtena nicamente la hormona de crecimiento
en la pituitaria anterior del cerebro de cadveres, sin embargo esta practica ceso
debido al alto porcentaje de obtener muestras contaminadas y producir el virus fatal
por la enfermedad de creutzfeldt-jakob. Desde entonces se ha realizado distintas
tecinas de produccin de hormona de crecimiento biosinteticamente.
El objetivo principal de este proyecto es el estudio de la hormona de crecimiento de
produccin genticamente modificada de organismos distintos como bacterias, virus,
hongos, etc para el tratamiento de traumatismos por quemaduras de primer, segundo
y tercer grado. En la actualidad se ha podidos sintetizar la hormona de crecimiento a
partir de la Pichia Pastoris y la E. Coli. Sin embargo, estos mtodos tienen niveles de
purificacin especficos para el tratamiento del enanismo o problemas hormonales,
mas no se ha sintetitazado de forma directa para el tratamiento especifico de
traumatismos por quemaduras. La hormona de crecimiento puede ser sintetizada en
bioreactores, a partir de animales transgnicos por extraccin de sangre, por
secrecin y extraccin de hormona de la leche (aunque no hubo mayor efectividad),
secrecin y extraccin de la hormona de la orina, por medio de microinyeccin de la
UPII-hGH transgnico en huevos fertilizados de ratn, en donde modifica la
informacin gentica original del animal de manera que puede garantizar la economa
tanto para las personas que la consumen como la para las que lo producen, facilidad y
menor aplicacin de tiempo.

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El mtodo se basa en la microinyeccin de la UPII-hGH transgnico
en huevos fertilizados de ratn continuando con la misma teora que
en los casos anteriores se modifica la informacin gentica original
del animal, posteriormente se espera al nacimiento de stos y
posteriormente se observa que en la orina se encuentra presente
concentracin significativa de la protena deseada en ste, la
hormona del crecimiento, que se purifica obtenindose grandes
cantidades de ste producto.
Una de las principales ventajas que presenta ste mtodo con
respecto a los anteriores es el hecho de que la purificacin se
vuelve un proceso muy simple puesto que la orina contiene
prcticamente una nula cantidad de lpidos (no es necesario
purificacin especfica para estos) y con respecto a protenas
tambin es baja la concentracin por lo que los costos se reducen
en gran manera, otra de las ventajas es que la cantidad neta
obtenida de la hGH es mucho mayor que la que se obtiene de la
leche y de la sangre por medio de biorreactores ya que aunque en
una sola produccin de leche se puede obtener ms protena, sta
forma est muy limitada a las hembras en cierto rango de edades y
en ciertos perodos de tiempo dependiendo de la especie.
En cambio la hormona obtenida por medio de la orina aunque en
menores cantidades puede extraerse de continuo a partir del
nacimiento del animal sin importar su sexo, su edad e inclusive su
especie por lo que ha resultado ser un gran avance en la ciencia
adems de que es obvio que no se le causa ningn dao fsico al
biorreactor en el momento de la extraccin contrario al mtodo de
extraccin de la hormona de la sangre.
Diagrama de Flujo:









Produccin de la Hormona de Crecimiento por fermentacin a
altas densidades de E. coli recombinante 4
Este mtodo se basa en la utilizacin de E. coli k802 como el lugar
de hospedaje para el plsmido recombinante que contenga la
informacin de produccin de la hGH (pSSM). Se hace una
inoculacin de la misma en un medio LB (polipeptona 10 g/l,
extracto de hongo no filamentoso 5 g/l y cloruro de sodio 5 g/l) a un
pH ajustado a 7, se le da como fuente de carbono glicerol en vez de
glucosa, para disminuir el tiempo de fermentacin y evitar que
produzca subproductos como el acetato que inhibe su crecimiento.
Las semillas de E. coli cultivadas se transfieren a un tanque que
contiene 200 ml de el medio LB con 100g/ml de concentracin de
ampicilina donde se hace una incubacin durante toda la noche a
37C y 220 rpm en un agitador orbital.
El contenido total de este tanque se utiliza para inocular el
fermentador que contiene un medio con 45 g de KH2PO4; 256g de
NaHPO4 * 12H2O; 15 g de NH4Cl; 7.5 g de MgSO4 * 7H2O; 0.5 g
de CaCl2; 7.5g de NaCl; 750 g de triptona; 375 g de extracto de
hongo no filamentoso y 121 de agua de osmosis inversa que se
agreg al medio para un proceso batch de duracin aproximada
de 10 horas a 37C y pH controlado de 7.2, oxgeno disuelto
controlado por medio de la incrementacin de la agitacin desde
300 rpm hasta 600rpm, seguidas de adiciones de mezclas de aire y
oxgeno puro de 1 vol/vol/min (flujo total) para mantener relativo
oxgeno disuelto sobre el 20% de saturacin. Todo esto se llev a
cabo con una alimentacin batch de fermentacin de soluciones
consistentes de triptona 200 g/l; extracto de hongo no filamentoso
100 g/l; glicerol 21 y 21 de agua de osmosis inversa agregada a la
solucin. Inicialmente se aliment a una velocidad de 2ml/min 50%
de glicerol.
Despus de 2 horas se elev a 5 ml/min y de 6 horas en adelante
se mantuvo la velocidad de 5 ml/min pero en vez de glicerol se
aadi la solucin anteriormente mencionada para mantener la alta
densidad de la fermentacin. Finalmente, se extrae la hormona de
crecimiento acumulada de manera intracelular.
Este mtodo ha sido desarrollado para mejorar la productividad y
dar ventajas tales como reduccin de volumen, bajos costos de
produccin y bajos costos de inversin en equipo.
Los mayores beneficios de la biofarmacutica sobre el cultivo de
clulas (utilizacin de microorganismos recombinantes) son los
bajos costos de produccin, y la relativa facilidad de utilizar una
escala ms grande. Sin embargo, la produccin de animales
transgnicos de granja requiere una inversin considerable de
tiempo.
Diagrama de Flujo:






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SITUACIN ACTUAL EN MXICO
Existen varias marcas de medicamentos que contienen la Hormona
del Crecimiento Humana en Mxico y son usados para el
tratamiento de personas con deficiencia de esta hormona
presentando un nivel bajo de crecimiento; adems de estar
relacionada con la restauracin de la masa muscular, la reduccin
de la grasa corporal, el aumento de energa, la normalizacin de la
presin arterial y un mejoramiento de la funcin inmune entre otros.
Este medicamento se da por inyeccin en un msculo o bajo la piel.
Usualmente se aplica tres veces a la semana. Para mejores
resultados debe de ser usado exactamente como se prescribi. En
cada caja de ampolletas se encuentra un instructivo en donde se
seala la mejor manera de aplicarse, los efectos secundarios que
pudiera tener (como dolores de cabeza, fatiga o dolor del msculo).
Tambin se mencionan las precauciones que se debe tener
dependiendo del historial mdico (si padece de alergias, diabetes, o
en el embarazo) y que en caso de perder una dosis, no se debe de
aplicar dos veces para ponerse al corriente con el tratamiento.
La Hormona del Crecimiento Humana se puede adquirir en
farmacias bajo el nombre de Humatrope. Esta solucin inyectable
de ADN recombinanate se presenta en ampolletas de 13.3
unidades y posee un valor de $1,416 o de 4 unidades con un precio
de $506.
Tambin se puede conseguir va Internet bajo el nombre de
Protropin, Nutropin, PRO hGHTM, mostrandose una larga
explicacin del producto anexa. Una onza de Protropin se consigue
en 75 USD y una caja de PRO hGH en 89 USD, tres por 259 y cinco
por 419 USD.
Se entrevist a un doctor experto en endocrinologa en el Hospital
Mdica Sur quien nos inform que la hormona del crecimiento si es
una alternativa conveniente para el tratamiento del enanismo desde
la edad en que se detecta, as como para problemas musculares y
osteoporosis entre otros en personas de edad avanzada
principalmente. Esta Hormona se emplea de manera indistinta en
hombres o mujeres.
Conclusin
La hormona del crecimiento humana result ser una muy buena
alternativa para tratar las enfermedades mencionadas, en base a la
informacin obtenida en endocrinologa en el Hospital Mdica Sur,
ya aproximadamente en el noventa por ciento de los casos tratados
se obtienen los resultados esperados.
Estamos conscientes de que uno de los grandes impedimentos
tanto para que se recete as como para que se contine su
tratamiento es el alto costo del producto.
Al haber realizado este trabajo nos pudimos dar una mejor idea de
lo que la produccin de un producto biotecnolgico involucra, as
como sus ventajas sobre otros mtodos de obtencin.
Bibliografa: