Die Heilungsprozesse unseres Krpers verstehen und nutzen
Impressum Herausgeber Bundesministerium fr Bildung und Forschung (BMBF) Referat Publikationen; Internetredaktion 11055 Berlin Bestellungen schriftlich an den Herausgeber Postfach 30 02 35 53182 Bonn oder per Tel.: 01805 - 262 302 Fax: 01805 - 262 303 (0,12 Euro/Min. aus dem deutschen Festnetz) E-Mail: books@bmbf.bund.de Internet: http://www.bmbf.de Redaktion Dr. Karsten Schrrle Autoren Dr. Rdiger Marquardt, Dr. Karsten Schrrle, DECHEMA e. V., Frankfurt/M. Gestaltung Christian Beck, Frankfurt/M. Druckerei Druckhaus Mnster, Kornwestheim Bonn, Berlin 2005 Gedruckt auf Recyclingpapier Bildnachweise Seite Autotissue GmbH, Berlin 37 Christoph Blumrich, Blumrich Illustration, Greenlawn, New York 8, 9, 28 B. Braun AG, Melsungen 18 Bundesverband Medizintechnologie e.V., Berlin 15, 20, 42 Angelo Cavalli/TIPS/Agentur Focus U1 Co.don AG, Teltow 17, 24 Deutscher Bundestag, Berlin 32 Fischer Ski 16 Dr. Andreas Emmendrffer, euroderm GmbH, Leipzig 15 Flad & Flad - Communication GmbH, "Flad & Flad BioGene", Heroldsberg 12 Fresenius Medical Care AG, Bad Homburg 29 Prof. Dr. Christoph Gleiter, Universittsklinikum Tbingen 38 GDE - Grafikdesign Erdmann, Bonn 23 Dr. Andreas Haisch, Charit, Berlin 19 Daniel Heuclin, BIOS, Paris 40 Prof. Dr. Simon P. Hoerstrup, Universittsspital Zrich 19, 20 Prof. Dr. Jeffrey Hubbell, Ecole Polytechnique Fdrale Lausanne 18 Roman Jupitz, TU Hamburg-Harburg 23 Prof. Dr. Veit Krenn, Charit, Berlin 42 Deborah Maizels, Bertelsmann Lexikon Verlag GmBH, Gtersloh/Mnchen 7 Max-Planck-Institut fr molekulare Genetik, Berlin 30 Max-Planck-Institut fr molekulare Zellbiologie und Genetik, Dresden 41 Medical Photographic Library, Wellcome Trust, London 7, 30 Prof. Dr. Heike Mertsching, Fraunhofer-Institut fr Grenzflchen und Bioverfahrenstechnik, Stuttgart 27 Prof. Dr. Stephen Minger, King's College, London 33 Adriane Polak, DECHEMA e. V., Frankfurt 31 Helmut Rohrer, MaxPlanckForschung, Mnchen 14 Prof. Andrew Swift, Medical College of Georgia, Augusta 10, 11 Teraklin AG, Rostock 29 VasoTissue Technologies GmbH, Berlin 20 VITA 34 AG, Leipzig 13 Dr. Dr. P. H. Warnke, Klinik fr MKG-Chirurgie, Universitt Kiel 21, 26 17, 25 Regenerative Medizin und Biologie Die Heilungsprozesse unseres Krpers verstehen und nutzen deutschen Biotechnologiefirmen vermarktet. Diese Erfolge sind nur durch gemeinsame Anstrengungen, vor allem durch die Zusammenarbeit von Grundlagenforschung, Klinik und Industrie mglich. Das Bundesministerium fr Bildung und Forschung frdert gezielt die Ausschpfung der Potenziale der Biomedizin. Mit dem im Jahr 2000 geschaffenen Frderschwerpunkt Tissue Engineering untersttzte das Bundesministerium fr Bildung und Forschung mit 38 Millionen Euro wichtige Akzentsetzungen insbesondere bei jungen Unternehmen. Ziel ist es, in Deutschland aus den bestehenden Strukturen heraus ein international wettbewerbsfhiges Produkt- und Dienstleistungsspektrum zu etablieren. Daher werden vor allem Kooperationen zwischen kleinen und mittleren Unter- nehmen und Forschungseinrichtungen aus Medizin sowie Natur- und Ingenieurwissenschaften gefrdert. Zustzlich zu den genannten ffentlichen Frdermitteln konnten noch- mals etwa 26 Millionen Euro private FuE-Mittel mobilisiert werden. Darber hinaus wird in dem BMBF-Frderschwerpunkt Bio- logischer Ersatz von Organfunktionen das Potenzial von Stammzellen zur Therapie verschiedener volkswirtschaftlich relevanter Erkrankungen wie zum Beispiel Parkinson, Dia- betes, Osteoporose und Herzinfarkt ausgelotet. Mit einem Volumen von neun Millionen Euro fr drei Jahre ist der Frderschwerpunkt Mitte 2001 gestartet und umfasst der- zeit 32 laufende Projekte. Zur Fortfhrung dieser Frderung ist im September 2004 ein neuer Frderschwerpunkt zur Zellbasierten, regenerativen Medizin ausgeschrieben worden. Dabei soll das bisherige Frdervolumen mit einem Umfang von drei Millionen Euro im Jahr beibehalten werden. Die gefrderten Projekte wer- den sich berwiegend im Vorfeld der Anwendung bewegen zur Vorbereitung einer spteren klinischen Anwendung. Diese Broschre gibt einen berblick ber den Stand der Ent- wicklung, skizziert das Potenzial der Regenerativen Techno- logien und wagt einen Blick in die Zukunft. Die enormen Chancen, die sich dabei abzeichnen, mssen wir nutzen in unser aller Sinne: als mgliche Patienten und fr die wirt- schaftliche Leistungsfhigkeit Deutschlands. Edelgard Bulmahn Bundesministerin fr Bildung und Forschung Das Bundesministe- rium fr Bildung und Forschung frdert For- schung fr den Men- schen. Damit ist nicht nur gemeint, dass For- schungsergebnisse zu einer verbesserten Gesundheitsversor- gung beitragen kn- nen. Forschung fr den Menschen bedeu- tet auch und dies gilt in besonderer Weise bei den Entwicklungen der modernen Biomedizin dass sie in einem angemessenen ethischen und rechtlichen Rahmen stattfindet. Regenerative Technologien gehren zu den innovativsten Zukunftsfeldern der modernen biomedizinischen und bio- logischen Forschung und Anwendung. Die Mglichkeit, die Selbstheilungskrfte des Krpers gezielt zur Behandlung von Krankheiten zu mobilisieren, ist fr die Gesundheit vieler Menschen eine beraus wichtige, wirtschaftlich sehr viel versprechende und wissenschaftlich hchst faszinierende Perspektive. Konkret umfassen die Regenerativen Technologien die Er- haltung beziehungsweise Wiederherstellung der Leistungs- fhigkeit und damit Lebensqualitt bei Patienten auch bei bisher nicht therapierbaren Krankheitsbildern. Gleichzeitig birgt sie auf lngere Sicht betrachtet konomische Potenziale bei der Behandlung selbst: Wo es ber die Stimulierung kr- pereigener Mechanismen zu einer Reparatur im Sinne einer echten Regeneration kommt, kann auf Implantate aus Stof- fen, die dem Organismus fremd und unvertrglich sind, auf lange Sicht immer fter verzichtet werden. Auch aufwndige Folgebehandlungen wie Dialyse oder Folgeoperationen knnten in Zukunft unterbleiben. Vorbild ist dabei die Natur selbst: Sie liefert mit Wirbeltieren, bei denen ganze Organe oder Krperteile nachgebildet werden, die beeindruckends- ten Beispiele fr das dahinter stehende Potenzial. Schon heute zeigen sich erstaunliche Beispiele, unter ande- rem die Mglichkeit, Hautverbrennungen durch aus Zellen nachgezchtete Haut zu heilen oder die Option, patienten- eigenen Knorpel zu zchten, um ihn in verletzte Gelenke oder als Bandscheibenersatz zu transplantieren. Diese An- stze sind bereits praxistauglich. Sie wurden von Forscher- gruppen in Deutschland entwickelt und werden auch von VORWORT Vorwort 4 INHALTSVERZEICHNIS Vorwort 3 Einleitung 5 Medizinische Grundlagen 6 Zellen- und Differenzierungspotenziale 7 Immunologie 8 Stammzellen 11 Reproduktives und therapeutisches Klonen 14 Tissue Engineering in der Praxis: einige Beispiele 15 Haut 15 Gelenkknorpel 16 Bandscheiben 17 Knochenmark und Blutzellen 17 Extrazellulre Trgermaterialien Grundlage des Fortschritts 18 Ohren 19 Herzklappen 19 Gefe 20 Anstze mit Stammzellen 21 Knochen 21 Entwicklung der Methoden der modernen Medizin 22 Die Zchtung von Zellen und Geweben 24 Herzmuskel 26 Luftrhre 27 Pankreas 28 Niere 28 Leber 29 Nerven 30 Embryonale Stammzellen die internationale Situation 32 Nationale und internationale Frderaktivitten 35 Die Zulassung von Tissue-Engineering-Produkten 36 Fallbeispiel fr die Zulassung eines TE-Produkts 37 Interview mit Prof. Dr. Christoph Gleiter 38 Regenerative Medizin die Zukunft hat schon begonnen 40 Wird sich die regenerative Medizin durchsetzen? 42 Glossar 43 Inhaltsverzeichnis 5 EINLEITUNG Gegenwrtig sind die komplexen Kausalitten der biologi- schen Regenerationsmechanismen noch weitgehend unver- standen. Hier steht die biomedizinische Grundlagenfor- schung gerade erst am Anfang. Vieles bleibt aufzuklren, zum Beispiel wie nah adulte, embryonale oder Nabelschnur- blutstammzellen an das jeweilige Therapieziel heranfhren. Diese spannenden Fragen mssen ergebnisoffen, nchtern und bei Wahrung der ethischen Grundstze angegangen werden, die notwendigen materiellen und rechtlichen Vor- aussetzungen dafr sind gegeben. Der "Heilige Gral" der Regenerativen Medizin ist schlielich die Bildung bzw. Zchtung von ganzen Ersatzorganen und Gliedmaen aus Zellen der Patienten. Auch wenn dieses Ziel noch in sehr weiter Ferne liegt, werden jetzt die ersten Schrit- te dahin gemacht. Denn die Natur hat uns bei Wirbeltieren wie Reptilien und Amphibien bereits vorgemacht, dass dies mglich ist. Die Medizin steht vor groen Entwicklungen. Dank der ra- sant wachsenden Einblicke in zellulre Prozesse verstehen wir die molekularbiologischen Mechanismen hinter den Selbstheilungskrften unseres Krpers zunehmend besser. Diese Selbstheilungskrfte gezielt zu nutzen, bedeutet eine wesentliche Erweiterung der Heilkunst um therapeutische Optionen, die oft unter dem Schlagwort der Regenerativen Medizin zusammengefasst werden. Einige Anwendungen wurden bereits Realitt. Dazu zhlen Knorpel- und Hautersatz, die durch das Tissue Engineering das heit die intelligente Kombination von Hightechmateri- alien und Zellkulturen verfgbar wurden. Hier haben ins- besondere deutsche Forschergruppen und Biotechunterneh- men viel geleistet. Trotz der Verfgbarkeit dieser Produkte sind aber manche Probleme auf dem Weg zum Markterfolg noch nicht gelst worden. So leidet die Kommerzialisierung unter den in Europa uneinheitlichen Zulassungsregularien und der zgerlichen Erstattungspraxis der Krankenversiche- rungen, wodurch letztlich die Aussichten der jungen Unter- nehmen auf Einnahmen schwinden und sich Investoren oft- mals verhalten zeigen. Dennoch hat die Regenerative Medizin ihre Zukunft noch vor sich. Die aufregenden Ergebnisse haben bereits viel verspre- chende Projekte etwa zur Reparatur defekter Gewebeberei- che angestoen, die langfristig zur Therapie schwerer und weit verbreiteter Krankheiten wie Herzinfarkte, Neurodege- nerativer Erkrankungen und Diabetes geeignet sein drften. Das konomische Potenzial derartiger Therapien wird als be- achtlich eingeschtzt nicht zuletzt in der Entlastung der Gesundheitssysteme. Einleitung 6 MEDIZINISCHE GRUNDLAGEN zahl einzelner Zellen aufgebaut sind. Die Zelle ist das verbin- dende Element aller Lebewesen, von den einzelligen Urtier- chen, die schon Leuwenhook unter dem Mikroskop beobach- tet hatte, bis hin zum Elefanten oder Wal. Diese Erkenntnisse und das zunehmende Verstndnis der Organe und Funktio- nen des menschlichen Krpers ermglichten eine neue Vor- stellung von Krankheit und neue Konzepte fr Therapien. So konnte Rudolf Virchow, ein Berliner Arzt und Politiker, unter anderem den zellulren Ursprung vieler Krankheiten erken- nen. Virchow setzte sich auch sehr fr den Aufbau eines staat- lichen Gesundheitswesens ein. Das 19. Jahrhundert erwies sich insgesamt als technik- wie forschungsfreundlich und verhalf auch der Medizin zu wich- tigen Fortschritten. So ist das Stethoskop, noch heute ein Standard-Utensil der rzte, eine Erfindung des frhen 19. Jahrhunderts. Auch fanden in der ersten Hlfte dieses Jahr- hunderts Schmerzmittel wie Morphin als aktiver Bestandteil des Opiums identifiziert, oder Narkosemittel wie Lachgas, ther und Chloroform erstmals breite und gezielte Anwen- dung. Das ermglichte wiederum umfangreiche und schwie- rige chirurgische Eingriffe. Die Medizintechnik, also die Ent- wicklung und der Einsatz speziell entwickelter Gerte fr Diagnostik und Therapie, machte seit dieser Zeit groe Fort- schritte. Eine moderne medizinische Versorgung greift ja wie selbstverstndlich auf Katheter, knstliche Gelenke, Herz- schrittmacher, Zahnimplantate und vieles mehr zurck. Auch mikrochirurgische Verfahren knnen nur dank der Ent- wicklung neuer Gerte eingesetzt werden. In der Pharmazie, bei der Entwicklung und Bereitstellung von Medikamenten, wurden gleichfalls groe Fortschritte gemacht. Ende des 19. Jahrhunderts entwickelte man bereits Metho- den, um Organe auerhalb eines Krpers funktionstchtig zu halten. Dazu wurden die isolierten Organe nicht mit Blut, sondern mit speziell dafr entwickelten Nhrlsungen durch- splt. Auch die Transplantation menschlicher und tierischer Organe versuchte man. Allerdings scheiterten diese und auch sptere Versuche an den oft heftigen und bis dahinunverstan- denen Abstoungsreaktionen der Empfnger. Erst in den 1950er Jahren gelang rzten in Boston eine erfolgreiche Nie- rentransplantation beim Menschen, wobei Spender und Empfnger eineiige Zwillinge waren und daher Abstoungs- reaktionen unterblieben. Die eigentliche ra der Organtrans- plantationen begann im Jahr 1967 mit der erfolgreichen Ver- Die ersten berlieferten Anstze einer rationalen Ausein- andersetzung mit menschlichen Krankheiten, zumindest im abendlndischen Raum, werden hufig Hippokrates zuge- schrieben, der rund 400 Jahre vor Christus gewirkt und eine eigene Lehre begrndet hat. Der Hippokratische Eid der Mediziner erinnert noch heute an ihn. Hippokrates und sei- nen Schlern ist es zu verdanken, dass Krankheiten nicht mehr als gttliche Strafe oder als Wirken von Dmonen begriffen wurden, sondern als Fehlfunktionen des Krpers, die man behandeln konnte. Fr Hippokrates ging es darum die Patienten genau zu beobachten und sie entsprechend zu pflegen, also die Selbstheilungskrfte des Krpers gezielt zu untersttzen angesichts des fehlenden Verstndnisses fr Krankheitsursachen keine schlechte Methode. Erst um das Jahr 1840 herum setzte sich die Erkenntnis durch, dass Pflanzen, Tiere und der Mensch aus einer groen Viel- Medizinische Grundlagen Bereits Hippokrates erkannte die Bedeutung der Selbst- heilungskrfte des Krpers fr die Therapie von Krank- heiten. Dass Zellen bei Krankheits- und Heilungsprozes- sen im Mittelpunkt stehen, wurde im 19. Jahrhundert klar. Heute versteht man viele ihrer Mechanismen und lernt, sie gezielt fr die Therapie zu aktivieren und zu nutzen. Aderlass 7 MEDIZINISCHE GRUNDLAGEN Zellen und Differenzierungspotenziale pflanzung eines menschlichen Herzens durch Christian Bar- nard. Mittlerweile hatte man gelernt, Spender und Empfn- ger hinsichtlich einer mglichst guten Gewebevertrglich- keit zu klassifizieren und man setzte radioaktive Bestrah- lungen oder Zytostatika ein, um die Immunantwort des Empfngers zu unterdrcken. Es bedurfte allerdings noch der Entwicklung besserer Medikamente, mit denen die Immunabwehr ohne allzu gravierende Nebenwirkungen kontrolliert werden konnte, bevor die Methode der Organ- transplantation ihren Siegeszug antrat. Die Medizin hat sich in den letzten 200 Jahren enorm entwickelt und es ist fr uns heute selbstverstndlich, dass hoch- moderne Techniken und Medika- mente zur Verfgung stehen, mit denen Verletzungen versorgt, Krankheiten gelindert oder geheilt werden knnen. Viele Erkrankun- gen kann man allerdings nur in den Symptomen, nicht aber in den Ursachen bekmpfen. Bei Organ- transplantationen ist die Nachfra- ge heute weit grer als das ver- fgbare Angebot. Leiden wie Krebs, Schlaganfall und Herzin- farkt knnen nur unzureichend behandelt werden. Die steigende Lebenserwartung fhrt dazu, dass altersbedingte Krankheiten eine immer grere Rolle spielen, wor- aus neue Anforderungen an die medizinische Versorgung resultie- ren. Dank des Wissens um den Auf- bau und das Funktionieren des menschlichen Krpers erffnet sich nun auch die Mglichkeit, das hohe Leistungspotenzial menschlicher Krperzellen fr therapeutische Zwecke zu nut- zen. Was die Schule des Hippokrates begrndet hat, nmlich die Untersttzung der Selbstheilungskrfte des Krpers, wird von der modernen Medizin in verblffender Weise aufge- nommen und weiterentwickelt. Zellen und Differenzierungspotenziale Die erste Hlfte des 19. Jahrhunderts hatte nicht nur die Er- kenntnis gebracht, dass Organismen aus einer Vielzahl einzelner Zellen aufgebaut sind. Man hatte auch die Eizelle entdeckt und untersucht, wie sich aus dieser einzelne Gewe- beschichten und schlielich ganze Lebewesen entwickeln konnten. Trotz dieser frhen Einsicht gehrt es noch heute zu den grten und spannendsten Herausforderungen in den Lebenswissenschaften zu verstehen, wie dieser Vorgang genau abluft. Auch der menschliche Organismus entsteht in seiner komplexen Gesamtheit mit rund 60 Billionen Zellen aus nur einer einzigen Zelle, der befruchteten Eizelle. Im Men- schen bilden sich ber 200 Zelltypen aus, die unterschiedlich spezialisiert sind und verschiedene Aufgaben wahrnehmen. Es leuchtet sofort ein, dass eine Leberzelle anders funktionie- ren muss als eine Herz- oder Hautzelle und dass rote Blutkr- perchen andere Funktionen haben als weie. Wie es zu dieser Spezialisierung kommt ist noch nicht endgltig geklrt. Klar ist aber, dass alle Zellen eines Organismus grundstzlich ber die gleiche genetische Ausstattung verfgen und damit im Prinzip jede Aufgabe bernehmen knnten. Die unterschied- Mitochondrium Kernhlle Zellkern Golgi-Apparat Zellmembran Glattes endo- plasmatisches Retikulum Raues endoplasma- tisches Retikulum Ribosom Kern- krperchen Zentral- krperchen Glykogen- trpfchen Freie Ribosomen Zytoplasma Mikrotubulus Zille Golgi-Veskel Herz-OP 8 Zellen und Differenzierungspotenziale MEDIZINISCHE GRUNDLAGEN Immunologie Noch als Student hatte der sptere Nobelpreistrger Karl Land- steiner zu Anfang des 20. Jahrhunderts das menschliche Blut in vier Hauptgruppen unterteilen knnen, die untereinander ver- trglich waren. Menschen mit der gleichen Blutgruppe knnen sich gegenseitig Blut spenden, ohne dass dies beim jeweiligen Empfnger zu Problemen fhrt. Stimmen die Blutgruppen dagegen nicht berein, dann kann es je nach Kombination zu Verklumpungen und schweren Problemen bis hin zum Tod des Empfngers kommen. Diese Tatsache hatte dazu gefhrt, dass die immer wieder einmal versuchten und gelegentlich sogar erfolgreichen Bluttransfusionen vor der Entdeckung Landstei- ners in Europa meist verboten waren. Landsteiner beschrieb brigens knapp 40 Jahre nach Entdeckung der vier hauptsch- lichen Blutgruppen zusammen mit Alexander Wiener auch den Rhesusfaktor, ein weiteres wichtiges Blutgruppen-Merkmal. Ursache fr die Unterschiedlichkeit der Blutgruppen sind Struk- turen auf den Oberflchen der Blutzellen, die man als Antigene bezeichnet. Landsteiner setzte seine Forschungen Anfang des 20. Jahrhunderts fort und entwickelte gemeinsam mit anderen die Theorie, dass die Antigene von bestimmten Eiweien im Blut, den Antikrpern, erkannt und gebunden werden. Als Antigene konnten dabei nicht nur Strukturen auf Zelloberflchen dienen, sondern ein riesiges Reservoir fast beliebiger Substanzen. Das Immunsystem des Menschen ist auerordentlich komplex. Unablssig berprfen spezialisierte Zellen, ob fremde Stoffe in den Krper eingedrungen sind. Ist dies der Fall, dann wird eine Kaskade von Aktivitten gestartet in deren Folge die Fremdstof- fe unschdlich gemacht werden. Auch wenn es sich bei den fremden Stoffen um Viren und Bakterien handelt, die Krper- zellen infizieren und sich dort quasi verstecken, werden sie von den Immunzellen aufgesprt. Dabei erkennen die Immunzel- len vernderte Strukturen auf den Oberflchen der befallenen Zellen und tten diese Zellen ab. Die Vermehrung der Bakterien und Viren wird dadurch unterbunden. Unser Immunsystem kann praktisch jede beliebige molekulare Struktur erkennen und mit ihr wechselwirken. Whrend ein neuer Mensch heranwchst, lernen die Immunzellen zunchst, die Zellen des eigenen Krpers als nicht fremd zu behandeln. Tatschlich sieht dieser Lernprozess so aus, dass in einer definierten Entwicklungsphase alle Immunzellen, die mit Mehr als ein Dutzend verschiedener Immunzellen, fnfzig Botenstoffe (Zytokine) und zahlreiche weitere Substanzen arbeiten im ebenso kom- plexen wie intelligenten Netzwerk des Immunsystems zusammen, um unseren Organismus gegen verschiedenste Arten von Eindringlingen und Amoklufern zu schtzen. Fresszellennehmen bakterielle Eindringlinge ins Zellinnere auf und zer- stren sie dann. B-Zellentragen auf ihrer Oberflche gleiche, aber von Zelle zu Zelle ver- schiedene Antikrper. Nach der Aktivierung durch ein Antigenvermehrt sich eine B-Zelle und bildet Hunderte von so genannten Plasmazellen, von denen jede den gegen den Eindringling passenden Antikrper in groer Menge etwa 2.000 Antikrper pro Sekunde produziert. Antikrper heften sich an freie Antigene der Erreger und markieren diese damit zur Vernichtung durch Fresszellen. Die Markierung wird durch zustzliche Anhaftung von Komplementfaktoren, das sind immunologische Wirksubstanzen aus der Leber, verstrkt. Die Fresszellen Makrophagenoder Granulozy- ten werden durch Botenstoffe der T-Zellenaktiviert. Plasmazellen gehen aus B-Zellen hervor und produ- zieren wie diese Antikrper. Folikulre dendritische Immunzellen prsentieren den B-Lymphozyten Antigene und regen sie zur Bil- dung von Antikr- pern an. Neutrophile Granulozyten attackieren Bak- terien und setzen Entzndungs- stoffe frei. Basophile Granulozyten sind fr allergi- schen Reaktionen im Blut verant- wortlich. Mastzellen sind an der Auslsung allergischer Reaktionen im Gewebe beteiligt. T-Lymphozyten zerstren von Viren befallene Zel- len und regulieren die Immun- antworten. Eosinophile Granulozyten sind vor allem an der Abwehr von Wrmern beteiligt und verantwort- lich fr Entzn- dungen bei allergi- schem Asthma. 9 MEDIZINISCHE GRUNDLAGEN Zellen und Differenzierungspotenziale bestimmten Oberflchenstrukturen auf den normalen Krper- zellen interagieren, absterben. Dadurch wird erreicht, dass die normalen, unvernderten Zellen des Krpers fr das eigenen Immunsystem unsichtbar werden. Aus der Vielzahl an Struktu- ren, die unser Immunsystem dann ein Leben lang erkennt, wer- den zunchst einmal diejenigen gezielt entfernt, die fr das jeweilige Individuum typisch sind. Diese Strukturen bezeichnet man auch als Gewebsantigene. So wie sich ein Mensch vom anderen unterscheidet, unterscheiden sich auch die Gewebsantigene voneinander. Jeder Mensch hat seine ganz eigenen, individuell geformten Gewebsantigene. Ausnahmen sind hier nur genetisch identische Individuen wie eineiige Zwillinge bei der Diskussion um das therapeutische Klonen werden wir auf diesen Umstand zurckkommen. Die Gewebespezifitt ist bei Transplantationen sehr problematisch, da das Immunsystem ja nur eigene Krperzellen toleriert, die Zellen des Spenderorgans dagegen als fremd erkennt und angreift. Als Folge davon kommt es zu Abstoungsreaktionen. Man ist heute in der Lage, die Vertrglichkeit von Geweben unterschiedlicher Individuen aufgrund einer Klassifizierung der Gewebsantigene vorherzusagen die Heftigkeit einer Immunreaktion kann je nach Typ dieser Gewebsantigene sehr unterschiedlich sein. Der Erfolg einer Transplantation hngt deshalb von der richtigen Typisierung der Gewebe ab. Aber auch davon, dass eine immer noch vorhandene Immunreaktion durch Medikamente unterdrckt wird. Der aufmerksame Leser wird sich vielleicht fragen, warum es beim Blut dann nur so wenige Hauptgruppen gibt. Auch hier mssten sich die Blutzellen ja eigentlich von Individuum zu Individuum unterscheiden. Grund dafr ist die Tatsache, dass die roten Blutkrperchen, die Erythrozyten, als einziger Zelltyp keine Gewebsantigene mehr auf der Oberflche tragen. Des- wegen spielen hier nur zwei andere Antigene eine Rolle, die man als A und B bezeichnet. Die Erythrozyten tragen entweder nur das A-Antigen (Blutgruppe A), das B-Antigen (Blutgruppe B), beide Antigene (Blutgruppe AB) oder keines dieser Antigene (Blutgruppe 0) auf der Oberflche. Eine andere Besonderheit stellt die Transplantation der Horn- haut des Auges dar. Die fehlende Abstoung beruht hier darauf, dass in der klaren Hornhaut keine Blutgefe und daher auch keine Immunzellen vorhanden sind, da die Ernhrung der Hornhaut ber das Trnensekret erreicht wird. liche Spezialisierung wird dadurch festgelegt, dass in jedem Zelltyp nur eine definierte Teilmenge der verfgbaren Gene aktiv ist. Trotz ihrer unterschiedlichen Aufgaben verfgen menschli- che Zellen ber gemeinsame Elemente. Dazu gehrt eine Membran, die den Zellinhalt, das Zytoplasma, von der Umge- bung abgrenzt und der Zelle die Form gibt. Weiterhin verf- gen die Zellen ber einen Zellkern, in dem die genetische Information gespeichert ist und aus dem diese Information, je nach Bedarf, abgerufen wird (die roten Blutkrperchen sind hier einzigartig, weil sie im Zuge ihrer Spezialisierung den Zellkern verlieren). Auerdem verfgen die Zellen ber Ribosomen, die so genannten Proteinfabriken, an denen die genetische Information in Eiweie, die Proteine, bersetzt wird. Und weil alle Prozesse Energie verbrauchen gibt es Mi- tochondrien, in denen die biochemische Energie mit Hilfe von molekularem Sauerstoff erzeugt wird. Zwei weitere wich- tige Zellelemente sind das Endoplasmatische Reticulum, eine Art Transportnetz innerhalb der Zelle und der Golgi-Apparat, mit dessen Hilfe beispielsweise festgelegt wird, ob ein neu hergestelltes Eiwei im Zellkern, in der Zellmembran oder in einem anderen Teil der Zelle landet oder von der Zelle in die Umgebung abgegeben wird. Die einzelnen Zelltypen unterscheiden sich in Funktion und Gestalt teils ganz erheblich. Die menschliche Zelle mit dem grten Zellkrper ist die weibliche Eizelle, die mit 200 Mikrometer Durchmesser dem Fnftel eines Millimeters sogar mit bloem Auge gerade noch erkannt werden kann. Nervenzellen knnen, mit den zur Signalleitung notwendi- gen langen Fortstzen, den Axonen, sogar bis zu einem Meter lang werden. Die Beschreibung der rund 200 unter- schiedlichen Zelltypen wrde den Rahmen dieser Broschre sprengen. Erwhnt seien aber noch die unterschiedlichen Zelltypen im Blut. Der wohl bekannteste Typ, das rote Blut- krperchen wissenschaflich als Erythrozyt bezeichnet ist fr den Transport von Sauerstoff und Kohlendioxid zustndig. Das eisenhal- tige Protein Hmoglobin, das dies bewerkstelligt, ist fr die rote Frbung der Zellen und damit des Bluts verant- wortlich. Die anderen rund zehn Typen, die summarisch als weie Blut- krperchen bezeichnet werden, stellen das Abwehrsystem des Krpers gegen Eindringlinge wie Bakterien und Viren dar oder sind als Blutplttchen an der Blutgerinnung beteiligt. Die roten Blutkrperchen verlieren im Zuge ihrer aueror- dentlich hohen Spezialisierung ihren Zellkern. Das Vorhan- densein genetischer Information, die im Zellkern lokalisiert ist, stellt allerdings eine zwingende Voraussetzung fr die Teilung und damit Vermehrung der Zellen dar. Die Erythro- Natrliche Killerzellen greifen entartete und viral infizier- te Zellen an. Makrophagen vernichten haupt- schlich bakteriel- le Eindringlinge. Dendritische Zellenin Geweben nehmen Antigene auf, die sie T-Lym- phozyten prsen- tieren. Rote Blutzellen 10 Zellen und Differenzierungspotenziale MEDIZINISCHE GRUNDLAGEN der Stammzellen entscheidet darber, in welche Richtung sie sich nach ihrer Aktivierung entwickeln. Dabei vollzieht sich diese Entwicklung in mehreren Schritten. Aus einer Blut- stammzelle gehen beispielsweise lymphoide und myeloide Vorluferzellen hervor, die nicht mehr alle, aber doch noch verschiedene Zelltypen des Bluts generieren knnen. Viele der Faktoren, die fr eine solche Reifung wichtig sind, kennt man heute. Verwiesen sei hier nur auf das Erythropoietin, oder kurz EPO 1 , das fr die Bildung der roten Blutkrperchen von entscheidender Bedeutung ist. Wie bei zahlreichen an- deren solcher Faktoren handelt es sich bei EPO um ein Protein, das mit Rezeptoren auf der Oberflche der Blutstammzellen interagiert und damit die Reifung der Zellen beeinflusst. Die meisten Gewebe sind in der Lage, sich zu regenerieren und verfgen ber entsprechende Stammzellen. Man bezeichnet solche gewebespezifischen Stammzellen auch als adulte Stammzellen. Selbst im Gehirn, das man noch bis vor kurzem fr nicht regenerationsfhig gehalten hatte, wurden 1 Da EPO in der Niere gebildet wird leiden viele Nierenkranke an einer Anmie, also einer zu geringen Zahl von roten Blutkrperchen. Unter Einsatz molekularbiologischer und biotechnischer Methoden kann EPO seit einigen Jahren als Medikament zur Verfgung gestellt und die- sen Menschen dadurch wirksam geholfen werden. EPO hat sich zu einem der umsatzstrksten Medikamente berhaupt entwickelt. Die blutbildenden Eigenschaften bergen aber auch die Gefahr von Missbrauch zum Beispiel im Leistungssport. zyten haben zwar eine recht lange Lebenszeit, doch sterben sie nach rund 120 Tagen ab und mssen ersetzt werden. Man hat errechnet, dass pro Minute rund 350 Millionen neue rote Blutkrperchen gebildet werden. Hier zeigt sich, dass die neuen Eythrozyten aus so genannten Vorluferzellen entste- hen, die man auch als Stammzellen bezeichnet. Stammzellen sind undifferenzierte Zellen, die sich in den unterschied- lichen Geweben finden und die Fhigkeit haben, sich in alle Zelltypen des jeweiligen Gewebes entwickeln zu knnen. Die Blutstammzellen sind im Knochenmark lokalisiert wir wer- den ihnen in dieser Broschre noch hufiger begegnen. Neben den Blutstammzellen findet sich im Knochenmark brigens noch ein weiterer Typ von Stammzellen, aus denen Stroma-, Fett-, Knorpel- und Knochenzellen entstehen kn- nen. Aus den Blutstammzellen des Knochenmarks gehen aber nicht nur die roten Blutkrperchen hervor, sondern auch alle anderen Zelltypen des Bluts. Das umgebende Milieu Zwei Arten adulter Stammzellen gibt es im Knochenmark: Blutstammzellen, aus denen sich die Vorlu- fer der verschiedenen Blutzellen bilden, und Stromazellen, aus denen Fett-, Knorpel- und Knochenzellen hervorgehen. Stroma- zellen knnten auch die Vorlufer der mesenchymalen Stammzellen und der multipotenten adul- ten Vorluferzellen (MAPCs) sein, sie sind vielleicht sogar mit ihnen identisch. Adul- te Zellen, denen Stammzelleigenschaf- ten zugeschrieben wurden, hat man mitt- lerweile in vielen Geweben gefunden: Gehirn, Haut, Muskel, Leber, Zahnpulpa, Auge, Pankreas, Blutgefe und im Magen- Darm-Trakt. Noch ist unklar, ob es sich um organtypische Stammzellen oder um eingewanderte Blutstammzellen aus dem Knochenmark handelt. dendritische Zelle B-Lymphozyt natrliche Killerzelle T-Lymphozyt lymphoide Vorlufer- zelle myeloide Vorlufer- zelle neutrophile Zelle mesenchymale Stammzelle MAPC Osteoblast Fettzelle Stroma- zelle Blutstamm- zelle Knochen- mark rote Blut- krperchen Monozyt eosinophiler Granulozyt basophiler Granulozyt Megakaryozyt Blutplttchen multipotente Stammzelle 11 MEDIZINISCHE GRUNDLAGEN Stammzellen diese Unterscheidung zwischen Pluripotenz und Totipotenz wird bei der Diskussion der rechtlichen Rahmenbedingun- gen (siehe Seite 32) noch eine wichtige Rolle spielen. Auf dem Gebiet der Stammzellforschung werden laufend neue Erkenntnisse gewonnen und die bisherigen Lehrmei- nungen geraten ins Wanken. Auch die Aussage, dass sich aus embryonalen Stammzellen keine Keimzellen entwickeln knnen, stimmt so nicht mehr. Der deutsche Forscher Hans Schler und sein Team konnten krzlich in den USA Kulturen von embryonalen Stammzellen der Maus zur Bildung von sie entdeckt. Allerdings diskutieren die Fach- leute noch darber, ob die adulten Stammzel- len tatschlich in den entsprechenden Gewe- ben bevorrated werden, oder nicht vielleicht aus dem Knochenmark stammen also viel- leicht eigentlich Blutstammzellen sind und in die jeweiligen Gewebe einwandern. Unter dem Einfluss der dortigen Umgebung knnten sie dann umprogrammiert werden und zur Bil- dung der gewebespezifischen Zelltypen fh- ren. Daneben haben manche, besonders mesenchy- male, Gewebe die Fhigkeit zur Dedifferenzie- rung. Ausdifferenzierte Zellen knnen im Falle einer vernderten Mikroumgebung stillgeleg- te Funktionen reaktivieren und sich auch wie- der teilen. Beim Menschen ist diese Fhigkeit im Fall von Lsionen oder Knochenbrchen fr die Wundheilung oder das Zusammenwachsen der Knochen von ausschlaggebender Bedeu- tung. Bei manchen niederen Tieren knnen sogar ganze Gliedmaen nachgebildet werden. Die Diskussion darber, welche Zellen und Zell- typen an diesen Phnomenen beteiligt sind, ist wissenschaftlich sehr interessant. Sie hat auch medizinische Konsequenzen wenn es um die Beantwortung der Frage geht, welche Verfah- ren zur Behandlung von Krankheiten entwi- ckelt und eingesetzt werden sollen. Stammzellen Zu Beginn des Wachstums von Sugetieren, wenn aus der befruchteten Eizelle durch die ersten Teilungen acht Zellen entstanden sind, hat jede dieser Zellen noch die Fhigkeit, einen vollstndigen Organismus zu bilden. Diese Zellen bezeichnet man als totipotent. Wenn sich durch weitere Tei- lungen die Zahl der Zellen erhht, beginnen sie sich zu spezi- alisieren. In der so genannten Blastozyste, einer kugelfrmi- gen Masse von rund 150 Zellen, lassen sich bereits eine uere und eine innere Zellmasse unterscheiden. Bei einer Schwangerschaft entwickeln sich aus der ueren Zellgrup- pe nach Einnistung der Blastozyste in die Gebrmutter Pla- zentaanteile, aus der inneren Zellmasse entwickelt sich der eigentliche Ftus. Die Zellen der inneren Zellmasse werden als embryonale Stammzellen bezeichnet. Sie sind in den Blickpunkt des Inter- esses geraten, weil sie sich in Kulturschalen vermehren lassen und in praktisch alle Zelltypen eines Organismus ausdifferen- zieren knnen. Diese Fhigkeit nennt man Pluripotenz. Die embryonalen Stammzellen knnen zwar noch fast alle Zellty- pen bilden, aber keinen vollstndigen Organismus mehr; Etwa eine Woche nach Befruchtung der Eizelle ist der menschli- che Keim zu einer Art Hohlkugel aus 100 bis 150 noch undifferen- zierten Zellen, dem so genannten Blschenkeim (Blastozyste), gewachsen. Dessen innere Zellen sind noch pluripotent, d.h. aus ihnen kann jeder Zelltyp des Krpers hervorgehen. Man kann sie als "embryonale Stammzellen" im Labor kultivieren. Aus der Schale des Blschenkeims entwickelt sich spter die Plazenta. In der dritten Woche beginnen die Zellen im Inneren des nun Becherkeim genannten Gebildes drei Zellschichten, die Keimblt- ter, auszubilden. Aus den drei Keimblttern gehen schlielich die verschiedenen Organe und Gewebe hervor. Entoderm (inneres Keim- blatt) Bauchspeicheldr- se, Leber, Schild- drse, Lunge, Blase, Harnrhre Mesoderm (mitt- leres Keimblatt) Knochenmark, Skelettmuskeln, glatte Muskulatur, Herzmuskel, Blut- gefe, Nierenk- anlchen Ektoderm (u- eres Keimblatt) Haut, Neuronen, Hypophyse, Augen, Ohren embryonale Keim- bltter und einige davon abstam- mende Gewebe und Organe befruchtete Eizelle (1. Tag) Blschenkeim (5.-6. Tag) Wandzellen innere Zellmasse wachsende Kolonien von embryonalen Stammzellen Becherkeim (14.-16. Tag) 12 Stammzellen MEDIZINISCHE GRUNDLAGEN Befruchtung ist man heute in der Lage, menschliche Embryo- nen auerhalb des Mutterleibes zu erzeugen. Doch nicht nur das. Man kann heute auch das genetische Material einer Eizelle gegen das genetische Material einer Krperzelle aus- tauschen und diese so vernderte Eizelle zu weiteren Tei- lungsschritten anregen. Dass mit dieser Methode das Klonen gelingt und sich gesunde Organismen entwickeln, hatte man bis zur Geburt des Klonschafs Dolly im Juli 1996 bei Wirbeltie- ren fr unmglich gehalten. Auch eineiige Zwillinge sind zwar genetisch identisch, entstehen aber dadurch, dass sich eine normal befruchtete Eizelle zu teilen beginnt und in einer frhen Phase zwei getrennte Zellverbnde entstehen, die sich dann zu eigenen Individuen entwickeln. Die Zwillin- ge sind zwar genetisch identisch, von Mutter und Vater aber sind sie genetisch so verschieden wie andere Kinder auch. Dolly dagegen war die genetische Kopie nur eines Eltern- teils. Anfang 2004 hat eine koreanische Forschergruppe gezeigt, dass die bei Dolly angewandte Methode prinzipiell auch beim Menschen zu funktionieren scheint. Mit den beschriebenen Verfahren lassen sich im Gedanken- experiment fr jedes menschliche Individuum embryonale Stammzellen herstellen, die genetisch mit ihm identisch sind. Man bentigt dazu eine Eizelle, aus der der Kern ent- fernt wird, und fhrt statt dessen einen Zellkern ein, den man Follikeln und von Eizellen anregen. Einer japanischen For- schergruppe gelang es kurz darauf aus embryonalen Stamm- zellen Spermien herzustellen. Diese Experimente bedeuten nicht nur wissenschaftlichen Erkenntniszuwachs, sondern werfen auch fr Juristen und Ethiker neue Fragen auf. Denn die Grenze zwischen Pluripotenz und Totipotenz ist womg- lich weniger eindeutig zu ziehen als bisher angenommen. Die meisten Erkenntnisse hinsichtlich der Bedeutung von embryonalen Stammzellen verdanken wir der Forschung an tierischen Zellen. Ihr hohes Differenzierungspotenzial macht diesen Zelltyp nun aber auch fr medizinische Anwendun- gen sehr interessant, da man sich vorstellen kann, dass em- bryonale Stammzellen die Funktion geschdigter Gewebe- teile bernehmen knnen. Fr einen solchen Einsatz sind tierische Zellen wegen der bekannten Abstoungsreaktionen ungeeignet und man muss mit menschlichen Zelllinien ar- beiten. Von experimentellen Schwierigkeiten einmal ganz abgesehen, ergeben sich bei der Forschung an menschlichen Zellen nun auch eine ganze Reihe ethischer Fragen. Denn um embryonale Stammzellen zu gewinnen muss man die Blasto- zyste zerstren und ttet damit den Embryo ab. Die recht- lichen und ethischen Aspekten der embryonalen Stammzell- forschung werden in einem der nachfolgenden Kapitel behandelt (siehe Seite 32 ). Dank der Methoden der in vitro 13 MEDIZINISCHE GRUNDLAGEN Stammzellen aber auch mit Blick auf die embryonalen Stammzellen noch nicht beantwortet. Man muss bei den Diskussionen ber die Verwendung der einen oder anderen Stammzelllinie immer bedenken, dass wir uns noch in einer frhen Phase der Erfor- schung befinden. Bezeichnungen wie Stammzelltherapien, die man immer wieder hrt und liest, suggerieren einen fort- geschrittenen Entwicklungsstand, den es so nicht gibt. Womglich muss man gar keine Stammzellen isolieren, um ihre prinzipiellen Fhigkeiten dennoch zu nutzen. Alle Kr- perzellen (mit Ausnahme der Keimzellen) verfgen ja ber die gleiche genetische Ausstattung und damit auch ber das gleiche genetische Potenzial. Wie das Beispiel des Somati- schen Zellkerntransfers belegt, ist der Kern einer ausdifferen- zierten Zelle noch einmal zu einem vlligen Neustart in der Lage. Deshalb ist es theoretisch vorstellbar, dass man Zellen oder Zellverbnde in einem Organismus quasi vor Ort repro- grammiert und zunchst dedifferenziert, um sie dann durch nachfolgendes Wachstum und eine vom Umfeld neu induzierte Differenzierung eventuelle Schden ausgleichen zu lassen. Dies wrde dann unmittelbar im betroffenen Orga- nismus geschehen. Dass der Krper ber das Potenzial ver- fgt, kleinere Schden selbst zu reparieren, sehen wir am Beispiel eines Muskelfaserrisses. Vielleicht lsst sich dieses Potenzial einmal auf grere verletzte Areale ausdehnen und auf Gewebetypen, die sich normalerweise nicht selbst rege- nerieren knnen. Aus heutiger Sicht sind dies rein theoreti- sche Optionen, die aber zeigen, welch vielfltige Mglichkei- ten sich aus unserer wachsenden Kenntnis zellulrer Ablufe einmal ergeben knnten. aus einer Krperzelle des jeweiligen Individuums gewonnen hat. Die Eizelle wird zur Teilung angeregt und aus der sich bil- denden Blastozyste werden dann die Stammzellen gewon- nen. In der therapeutischen Vision lassen sich anschlieend aus den Stammzellen beliebige Zelllinien erzeugen, die zu keinerlei immunologischen Abstoungsreaktionen mehr fhren. Wenngleich bei dieser Vorgehensweise nicht daran gedacht ist, fertige Menschen zu klonen, sondern allein die Gewinnung der embryonalen Stammzellen das Ziel ist, ste- hen ihr doch schwer wiegende ethische Bedenken entgegen. In Deutschland ist dieses therapeutische Klonen, wie in zahl- reichen anderen Lndern auch, verboten. In anderen Staaten dagegen ist es unter Auflagen erlaubt (s. Seite 32 ). Bereits seit einigen Jahren wird das Einfrieren von Stamm- zellen praktiziert, die im Nabelschnurblut enthalten sind. Unmittelbar nach der Geburt eines Kindes wird Nabelschnur- blut gewonnen und nach entsprechender Behandlung einge- froren. Dieses Blut enthlt relativ viele Stammzellen, deren Differenzierungspotenzial derzeit Thema intensiver For- schungen ist. Einleuchtend ist, dass die Stammzellen aus die- sem Blut fr das Individuum spter von Nutzen sein knnen, sollte es an einer Erkrankung wie Leukmie leiden, die ja Blutzellen betrifft. Womglich knnen diese Stammzellen aber auch bei anderen Erkrankungen eingesetzt werden, je nachdem, ber welches Differenzierungspotenzial sie tat- schlich verfgen. Sie scheinen sich sogar fr die bertra- gung auf andere Individuen recht gut zu eignen, da sie aus noch nicht gnzlich verstandenen Grnden weniger immu- nogen sind als andere Zellen. Allerdings zeigt sich hier auch sehr deutlich, dass die Forschung an und mit Stammzellen, gleich welchen Ursprungs sie sind, noch ganz am Anfang steht. Eine weitere Quelle fr Stammzellen knnen menschliche Ften sein. Insbesondere aus den sich bildenden Geschlechts- drsen der Ften knnen Stammzellen gewonnen werden, die in ihren Eigenschaften den embryonalen Stammzellen sehr hneln. Diese ftalen Stammzellen sind in der Lage, wie embryonale Stammzellen in die Zelltypen aller drei Keim- bltter zu differenzieren. Die Gewinnung und Verwendung solcher ftalen Stammzellen wird nicht nur unter wissen- schaftlichen, sondern auch unter ethischen Gesichtspunkten kritisch diskutiert. Embryonale Stammzellen sind wegen ihrer Pluripotenz besonders interessant, hinsichtlich ihrer Gewinnung aber auch besonders umstritten. Nicht zuletzt deshalb sind die adulten Stammzellen, beispielsweise die Blutstammzellen, in den Fokus des Interesses gerckt. Unter ethischen Aspekten wird die Verwendung von adulten Stammzellen als unkri- tisch gesehen, allerdings ist unklar, ob ihre Eigenschaften fr einen klinischen Einsatz ausreichend sind. Diese Frage ist Auch Nabelschnurblut ist eine Quelle fr Stammzellen 14 Reproduktives und therapeutisches Klonen MEDIZINISCHE GRUNDLAGEN Reproduktives und therapeutisches Klonen Bei der Befruchtung dringt ein Spermium in eine Eizelle ein. Der mnnliche Zellkern (mit einem einfachen Chromosomen- satz) verschmilzt mit dem weiblichen (ebenfalls mit einfachem Chromosomensatz) und generiert damit den Zellkern der befruchteten Eizelle, der nun ber einen doppelten Chromosomensatz verfgt. Das neu entstehende Individuum erhlt so eine einzigartige genetische Ausstattung, die aus einer Kombination der mtterlichen und vterlichen Erbsubstanz besteht. Der nun vorhandene doppelte Chromosomensatz wird bei allen nachfolgenden Teilungen der Eizelle gleichmig auf die Tochterzellen verteilt. 1 Beim Klonen wird das Spiel der Natur um neue Erbgutvarianten umgangen und eine bereits vorhan- dene Erbinformation gezielt eingesetzt und vervielfltigt. Dazu wird aus einer Eizelle der ursprngliche Zellkern entfernt. In diese entkernte Eizelle setzt man anschlieend den Zellkern ein, den man zuvor aus einer normalen Krperzelle desselben oder eines anderen Individuums isoliert hat. Die Erbinformation, ber die eine so behandelte Eizelle verfgt, ist identisch mit der Erbinformation des Spen- ders. Somit wird auch das Indi- viduum, das nach der beschrie- benen Methode entsteht, mit dem Spender genetisch iden- tisch sein. Die Methode wird als Somatischer Kerntransfer bezeichnet. Mit dieser Methode sind im Tierversuch bereits zahlreiche Klone generiert worden. Beim Menschen ist man sich welt- weit einig, das reproduktive Klonen das eine Schwanger- schaft und die Geburt geklon- ter Menschen zum Ziel htte zu chten (siehe Seite 32). Beim therapeutischen Klonen gehen die Meinungen dagegen aus- einander. Das therapeutische Klonen zielt nicht auf Schwan- gerschaft und Geburt ab, son- dern auf die technische Gewin- nung embryonaler Stamm- zellen, die sich ber die Metho- de des somatischen Zellkern- transfers herstellen lassen. Diese embryonalen Stammzel- len wren mit den Spenderzel- len genetisch identisch und bei einem medizinischen Einsatz am Spender wre nicht mit immunologischen Absto- ungsreaktionen zu rechnen. 1 Eine Ausnahme sind nur die Keimzellen, also Samen- oder Eizellen; bei deren Bildung wird der doppelte Chromosomensatz unter viel- fltigen Umlagerungen des Erbguts wieder auf die Hlfte reduziert. 15 TISSUE ENGINEERING Haut diesem Vermehrungsprozess sind die Vorluferzellen fr epidermale Keratinozyten, jene Zellen aus denen die Ober- flche unserer Haut besteht. Die Vorluferzellen beginnen sich nach wenigen Tagen zu vermehren. Unter organtypi- schen Kulturbedingungen differenzieren sie dann aus und bilden in einem komplexen Prozess innerhalb von zwei Wochen ein Gewebe, das in seinem dreidimensionalen Auf- bau der menschlichen Epidermis weitgehend entspricht. Die Mediziner knnen das Ersatzgewebe dann auf die vorbehan- delte Wunde aufbringen. Zur Hautregeneration bei tiefen Wunden erforscht man mit dem semisynthetischen Hautersatz gegenwrtig eine Methode, die die Regenerationsfhigkeit des Krpers nutzt. Hier wird eine bioabbaubare porse Matrix verwendet, in die Makrophagen, Fibroblasten, Lymphozyten und Gefe ein- dringen knnen. Diese Komponenten sind fr die Wundhei- lung wichtig. Man legt eine Schicht dieses Materials auf die Wunde und schliet sie vorbergehend durch eine luft- und wasserdurchlssige Silikonfolie nach auen ab. Nachdem sich die Gewebebasis regeneriert hat, entfernt man die Sili- konschicht und transplantiert darauf schlielich eine in vitro kultivierte Ersatzhaut. Erfolgreich trans- plantierte Ersatz- hute erfllen zumindest ihre wichtigste Funk- tion, das darunter liegende Gewebe von der Umwelt abzuschirmen. Allerdings ist das Erscheinungsbild anders als das der nor- malen Haut. Die neue Haut hat meistens eine andere Textur und hnelt eher Narbengewebe. Bis jetzt muss man bei Haut- transplantationen auch das Fehlen sowohl von Haar und Schweidrsen als auch Pigmenten in Kauf nehmen. Vielleicht aber nicht mehr lange: In den Haarfollikeln von Musen fanden sich nmlich Stamm- Haut Die Behandlung von groflchigen Hautverletzungen ist das bislang erfolgreichste Anwendungsgebiet fr das Tissue Engineering. Jedes Jahr verlieren Tausende Menschen durch Verbrennungen oder Vertzungen groe Flchen ihrer Haut. Auf noch grere Fallzahlen summieren sich die schweren Formen des Diabetes mellitus mit Entzndungen an den Extremitten, denen viel Haut zum Opfer fllt. In diese Fllen wird die Transplan- tation von Ersatz- haut" notwendig, die idealerweise vom Patienten stammt und daher nicht abgestoen wird. Kleinere Verletzun- gen werden routinemig durch Transplantation von Haut- gewebe aus intakten Krperregionen behandelt. Sind gre- re Flchen betroffen, muss aber Ersatzgewebe gezchtet werden. Dabei wer- den Zellen aus einer briefmarken- groen Hautbiop- sie in vitro kulti- viert, bis sie auf eine Flche von etwa Spielkarten- gre herange- wachsen ist. Ent- scheidend bei Schon heute leben schtzungsweise 25.000 Menschen in Europa mit in vitro gezchteten Haut-, Knorpel- oder Knochenzellen. Zudem sind viele neue Anstze in der klinischen Forschung darunter auch Verfahren, die das Potenzial von adulten Stammzellen nutzen. Bioreaktor mit Endprodukt Gezchteter Hautersatz Haut, histologisch Hautscheibe Tissue Engineering in der Praxis: einige Beispiele 16 Gelenkknorpel TISSUE ENGINEERING die hartgummiartige Beschichtung der Gelenkknochen naturgem ausgesetzt ist, vergrern sich die Schden. Hufig entsteht eine schmerzhafte Arthrose und oft wird der Einbau eines knstlichen Gelenks unvermeidlich. Doch es gibt therapeutische Alternativen mit Hilfe des Tissue Engineering von Knorpelgewebe. Seit etwa zehn Jahren ist das als Autologe Chondrozyten-Transplantation (ACT) bekannte Verfahren etabliert. In der Praxis gibt es mittler- weile zahlreiche Varianten, die oftmals von Kleinen und Mitt- leren Unternehmen (KMU) entwickelt und auf den Markt gebracht wurden. Das Prinzip ist recht einfach: Aus einer klei- nen, chirurgisch entnommenen Probe des Kniegelenk-Knor- pelgewebes werden im Labor Chondrozyten (Knorpelzellen) isoliert und in eine Nhrlsung gegeben. Denn im Knie selbst teilen sich Knorpelzellen sehr selten nur alle paar Monate oder Jahre. Durch das Herauslsen aus dem Zellverband dedifferenzieren Chondrozyten zu fibroblastoiden Zellen, die in der Lage sind, sich zu teilen. Danach werden diese Zellen in den Gelenkknorpel transplantiert. In der intakten Umge- bung des erhaltenen Knorpels differenzieren sie dann wieder zu Chondrozyten und produzieren Kollagen II. Die dediffe- renzierten Zellen knnen auch zu Fettzellen oder Osteoblas- ten ausdifferenzieren. Damit sind die Voraussetzungen fr die Reparatur des Ge- lenkknorpels geschaffen, fr die zahlreiche Verfahrensvari- anten entwickelt wurden: Die Chirurgen entfernen zunchst das schadhafte Knorpelgewebe. In manchen Anstzen ber- zieht man dann die Stelle mit Knochenhaut, die an anderer Stelle entfernt wurde. In den Hohlraum injizieren sie dann eine Lsung der gezchteten Zellen. Dort bildet sich inner- halb der folgenden Wochen wieder Knorpelgewebe zellen, aus denen sich auch Haar entwickelt. Einzelne dieser Stammzellen lieen sich zu Tausenden von identischen Toch- terzellen vermehren, die nach der Transplantation in haarlo- ses Hautgewebe ein Fell bildeten. Wie das natrliche Vorbild bestand es aus Haut, Follikeln, Haar und Fett absondernden Drsen, was beweist, dass die Stammzellen in verschiedene Zelltypen der Haut ausdifferenzieren knnen. Wenn sich die Experimente beim Menschen erfolgreich wiederholen las- sen, kme man der perfekten Ersatzhaut ein gutes Stck nher. Seit mehr als 20 Jahren bieten spezialisierte Unternehmen die Erzeugung von Ersatzhaut an. In Deutschland sind es klei- ne und mittlere Unternehmen (KMU) aus dem Biotechnolo- giesektor. Ihre Technologie variiert in den Herstellungsver- fahren und Applikationsformen. Ein Unternehmen beispielsweise zchtet die Ersatzhaut aus Keratinozyten-Vor- luferzellen, die in den Haarwurzeln vorkommen. Eine ande- re Firma entwickelte Haut aus der Tube": Die aus der In- vitro-Kultur gewonnenen, noch teilungsfhigen Hautzellen werden mit einem biologischen Kleber in die verletzte Region injiziert, wo sie weiterwachsen und die Wunde ver- schlieen. Gelenkknorpel Alter, bermiger Leistungssport oder bergewicht knnen auf die Gelenke gehen. Abnutzung und Degeneration von Gelenkknorpelgewebe sind in den Industrielndern weit ver- breitet. Allein in Deutschland sind 1,5 Millionen Menschen wegen degenerativer Gelenkerkrankungen in Behandlung und jhrlich erleiden 80.000 Menschen Verletzungen des Knorpels im Kniegelenk. Durch die hohe Belastung in Spit- zenwerten bis zum Siebenfachen des Krpergewichts der Fast ein Viertel unserer Krpereiweie sind Kollagene hochmolekulare Eiweie, die dem Binde- und Sttzgewe- be des Krpers Stabilitt geben. Auch die reifesten Seh- nen bestehen aus Kollagenfasern, deren Grundeinheit immer eine Dreifachhelix aus langen Aminosureketten ist. Bemerkenswert an diesen Ketten ist das hufige Vor- kommen der Aminosure Hydroxylprolin, deren Struk- tur die Dreifachwindung ermglicht. Man unterscheidet Typ1- und Typ2-Kollagene. Typ1-Kollagen ist der Hauptbe- standteil von Haut und Sehnen. Das aus miteinander ver- netzten Strngen (Fibrillen) bestehende Typ2-Kollagen bildet ein zhes dreidimensionales Netzwerk, aus dem der Knorpel aufgebaut ist. Der Gelenkknorpel besteht im Wesentlichen aus Knorpelzellen (Chondrozyten) und der extrazellulren Kollagenmatrix, die einen hohen Was- seranteil enthlt. Im gesunden Zustand besitzt der Knor- pel eine glatte Oberflche wichtig fr die 'reibungslose' Funktion des Gelenks. Extremsport kann zu Gelenkschden fhren 17 TISSUE ENGINEERING Bandscheiben delt man Bandscheibenvorflle durch Entfernen des ausge- tretenen Knorpelgewebes entweder minimal invasiv mit Hilfe des Endoskops oder durch eine Operation. In Deutsch- land sind es jhrlich mehr als 60.000 Operationen. Sie fhren meistens zum Abklingen der Beschwerden. Der Gewebever- lust kann aber von der Bandscheibe selbst nicht ersetzt wer- den und abgesehen davon, dass die Bandscheibe nun dn- ner" geworden ist, lsst sich durch die Operation die Degeneration nicht aufhalten. Weitere Verschleierschei- nungen fhren oft erneut zu Rckenschmerzen. Hier bietet das Tissue Engineering eine offensichtliche Therapiealterna- tive. Denn was fr kaputte Kniegelenke funktioniert, ist auch fr die Behandlung beziehungsweise die Regeneration von beschdigten Bandscheiben interessant. Schlielich beste- hen beide aus Knorpel. Im Sommer 2004 brachte ein Teltower Tissue-Engineering-Unternehmen ein Verfahren zur Autolo- gen Bandscheibenzelltransplantation ADCT (Autologous Disc Chondrocyte Transplantation) auf den Markt. Bei dieser Therapie von Bandscheibenvorfllen werden dem Patienten zunchst kleinste Mengen Bandscheibengewebe entnom- men und die Zellen in Kultur aufbereitet. Die Transplantation der krpereigenen Bandscheibenzellen erfolgt etwa drei Monate nach der Entnahme. Unter rtlicher Betubung inji- ziert man die Zellen in die Bandscheibe. Dort vermehren sie sich und gleichen den Gewebeverlust aus, der durch den Bandscheibenvorfall und die Operation entstanden war. Die Degeneration der Bandscheibe wird aufgehalten. Knochenmark und Blutzellen Die Transplantation von Knochenmark beziehungsweise Knochenmarkstammzellen ist ein wichtiger Schritt nach der Chemotherapie von Krebserkrankungen, um dabei zerstr- tes Knochenmark und Blutzellen zu regenerieren. Neben den Krebszellen als eigentlichem Ziel treffen Zytostatika vor allem die teilungsaktiven Zellen des Knochenmarks. Dieser Effekt ist bei der Behandlung von Leukmien sogar beabsich- tigt, um auszuschlieen, dass entartete Blutzellen berleben. Da auch Blutstammzellen zerstrt werden, versiegt die Quel- zunchst noch weich und wenig belastbar, dann immer bes- ser vernetzt und fester werdend. Das Verfahren, auch Peter- son-Verfahren genannt, ist bereits bei einigen Tausend Patienten erfolgreich eingesetzt worden. Aber es bleibt noch viel Raum fr Verbesserungen. Zum Beispiel hat der gezch- tete Knorpel nicht die Stabilitt des Originals. Das liegt daran, dass die in der Petrischale kultivierte Chondrozyten mit zunehmender Teilungszahl die Fhigkeit verlieren, das Knor- pelkollagen vom Typ2 zu bilden. Sie verhalten sich dann eher wie normale Bindegewebszellen. Biotechfirmen entwickel- ten daher Herstellungsverfahren fr komplette Matrices aus KollagenTyp2, die transplantiert werden knnen. Diese Anstze nutzten bereits vorgegebene Matrices aus Typ1-Kol- lagen, die zum Beispiel aus tierischen Sehnen prpariert wur- den. Unter In-vitro-Kulturbedingungen wachsen die isolier- ten Chondrozyten des Patienten in das Geflecht hinein, vermehren sich und wandeln das Typ1-Kollagen in eine Typ2- Kollagen-Matrix um. Die beschdigte Partie des Knorpels wird vor der Transplantation ausgestanzt und dann durch ein gleich groes Stck des Zuchtknorpels ersetzt, das in einigen Varianten noch mit Fibrinkleber fixiert wird. Die Patienten knnen die Gelenke bereits nach vier bis sechs Wochen wie- der belasten. In Deutschland werden pro Jahr rund 600 sol- cher Behandlungen vorgenommen. Bandscheiben Sie sind die Stodmpfer unserer Wirbelsule: Scheiben aus Knorpel mit hohem Wassergehalt, die, eingefasst von zh- elastischen Dichtungsringen, zwischen den Wirbelknochen sitzen. Sie knnen hohen Druck aushalten und sorgen damit fr die Flexibilitt des Knochenkunstwerks. Wenn der uere Faserring sprde und rissig wird, kann der innere gallertarti- ge Kern austreten und einen Bandscheibenvorfall verursa- chen. Quetscht die ausgetretene Knorpelmasse Nerven ein, sind Lhmungserscheinungen die Folge. Chirurgisch behan- Knorpelgewebekonstrukt Reinraumlabor 18 Extrazellulre Trgermaterialien TISSUE ENGINEERING allogenen Transplantation Verwendung, da hier im Ver- gleich zur Blutstammzell-Transplantation eine niedrigere Rate an chronischen Abstoungsreaktionen beobachtet wurde. Extrazellulre Trgermaterialien Grundlage des Fortschritts Die wichtigste Herausforderung beim Ersatz von Geweben und Organteilen, beispielsweise Herzklappen oder Adern, ist die Herstellung von dreidimensionalen Implantaten. Dafr bentigt man eine entsprechend geformte extrazellulre Matrix (EZM), die die neu wachsenden Gewebezellen beher- bergt. Die Trgermaterialien mssen hohen Ansprchen gengen: Sie sollen biovertrglich, steril, je nach Anwen- dung entweder langzeitstabil oder bioabbaubar und unter- schiedlich flexibel sein. Auerdem mssen sie manchmal auch pors sein, damit Zellen hinein wandern knnen und dabei noch fest genug, um nicht schon bei der ersten mecha- nischen Belastung zu zerreien. Als Ausgangsmaterial kom- men Kunststoffe (zum Beispiel bioabbaubare Poly-Hydroxye- ster), anorganische Substrate und aus biologischem Material gewonnene Gerstsubstrate, meistens Kollagen, infrage. Die Vielfalt der mglichen Konstrukte ist beeindruckend: schwammartige Schichten, wssrige und gummiartige Gele, le fr neue Blutzellen. Immunabwehr und Sauerstoffversor- gung des Krpers geraten in Gefahr. Voraussetzung fr das Gelingen einer Knochenmark-Trans- plantation ist die Gewebevertrglichkeit zwischen Spender und Empfnger. Dafr sind Eiweimolekle, die so genann- ten HLA-Molekle (Humane Leukozyten Antigene) auf der Oberflche jeder Krperzelle verantwortlich. Sie sind in ihrer Komposition fr ein Individuum einmalig und unverwech- selbar. Die Transplantation von einem Fremdspender (alloge- ne Knochenmark-Transplantation) ist nur mglich, wenn Spender und Empfnger in wichtigen Merkmalen des HLA-Musters bereinstimmen, was aber nur selten vorkommt. Abweichungen im HLA-Typ kn- nen zu heftigen Immunreaktionen fhren. Die allogene Knochenmarktransplantationen ist bei Leukmien der Standard, da eine autologe Trans- plantation wegen der Gefahr der bertragung von Leukmiezellen nicht sinnvoll ist. Zur Senkung der Sterblichkeitsraten durch Infektionen werden vom gleichen Spender auch virusspezifische T-Zellen isoliert, im Labor expandiert und dem Patienten zusammen mit den Stammzellen transplantiert. Mitte der 80er Jahre gelang es, auch Stammzellen aus dem Blut fr Transplantationen zu nutzen. Dabei halfen gentechnisch hergestellte blutbil- dende (hmatopoetische) Wachstumsfaktoren bei der Mobilisierung und Vermehrung der Stamm- zellen. Vor einer Krebs-Chemotherapie stimuliert man damit die Bildung der Blutstammzellen im Krper des Patienten. Dann wird ein Teil aus dem Blut isoliert, eingelagert und ihm nach der Chemo- therapie refundiert. Die rekombinanten Wachs- tumsfaktoren haben dieser Therapieform schnell zum Durchbruch verholfen. Im Jahr 2000 wurden in Deutschland 2.105 autologe und 1.438 allogene Stammzell-Transplantationen durchgefhrt. Als Stammzellquelle hat das Knochenmark bereits an Bedeutung verloren. Es findet fast nur noch bei der Synthetische Biomaterialien imitieren die Komplexitt der natrlichen extra- zellulren Matrices. Dargestellt sind Strategien zu ihrer Herstellung 19 TISSUE ENGINEERING Ohren an Typ2-Kollagen die gewnschte Bildung von ohrtypischem 'Glas-Knorpel' (Hyalin-Knorpel) anzeigt. Die spektakulren Bilder gingen um die Welt. Freiburger Mediziner verpflanzten einem Patienten erfolg- reich einen im Labor hergestellten Ohrknorpel. Zur Rekon- struktion seines verstmmelten Ohres waren ihm zuvor Knorpelzellen aus einer Rippe entnommen worden. Die Zel- len wurden ber einige Wochen in Kultur vermehrt und zusammen mit Fibrin in eine Ohrform gegossen. Dabei ent- stand ein formstabiles Transplantat, das bei der Verpflanzung mit einem Hautlappen berzogen wurde. Herzklappen Herzklappen arbeiten als Einweg-Ventile. Sie verhindern, dass das Blut in die Herzvorhfe oder in die Kammern zurck- fliet. Etwa 2,5 Milliarden Mal ffnen und schliessen sie sich bis zum 70. Lebensjahr. Der Aufbau der drei Segel einer natr- lichen Herzklappe ist entsprechend angepasst: Die Oberseite ist mit Kollagen ver- strkt, die Unterseite besteht hauptschlich aus Elastin, damit sich die Segel in Flussrich- tung biegen und in die Gegenrichtung gut schlieen. Von Geburt an, nach Infektionen oder aus Altersgrnden knnen die Herzklappen Fehler aufweisen. Dann kommt es zu Ablage- rungen von Kalk und Zellmaterial und das fhrt schlielich zu Verwachsungen und zur Blockade der Klappe. Seit Jahren werden Herzklappenprothesen routine- mig in die Herzen von Betroffenen eingebaut weltweit etwa 275.000 pro Jahr. Als Ersatz dienen mechanische Kunst- stoff- und Metallherzklappen. Sie erleichtern und verlngern das Leben dieser Menschen, haben aber auch Nachteile: Zum Beispiel mssen die Betroffenen wegen des Risikos der Gerinnselbildung weiterhin Gerinnungshemmer einneh- men, was die Gefahr von Magen- und Hirnblutungen erhht. Ihre Haltbarkeit ist meistens begrenzt und vor allem bei Kin- dern werden Mehrfachoperationen erforderlich, da die Kunstklappen nicht mitwachsen. Biologisch gewonnene Herzklappen stammen von Schweinen und Rindern. Sie machen Gerinnungshemmer berflssig, aber es besteht immer ein Risiko, dass sich der Organismus gegen die Fremd- krper wehrt. Aus diesen Grnden suchen Tissue-Ingenieure nach Alterna- tiven. Viele Versuche zielen darauf ab, krpereigene Herz- zementharte Trger und flexible, faserhaltige Rhren der Zusammenarbeit von Materialwissenschaft und Medizin sind kaum Grenzen gesetzt. Neuartige Trgermaterialien sondern sogar Botenstoffe ab, die Vorluferzellen anlocken oder das Wachstum der hinzugefgten Zellen anregen und beschleu- nigen. Mittlerweile gibt es zahlreiche Tissue-Engineering-Produkte, die auf extrazellulren Trgermaterialien basieren. Um die Probleme mit der Struktur und Durchblutung der Ersatzge- webe gleichzeitig zu lsen, nutzt man zur Erzeugung der besiedelten Matrices eine Art dreidimensionaler Tinten- strahldrucker: Der Druckkopf wird mit einem Gemisch aus Zellen und Fllmitteln geladen und spritzt dann Schicht fr Schicht Zellen in beliebige Formen. Gegenwrtig testet man das Verfahren bei der Regeneration von fehlenden Knochen. Nach genauer Vermessung der Lcke im Tomografen wan- delt ein Computerprogramm die zweidimensionalen Rnt- genbilder in ein dreidimensionales Modell um. Auf Grundla- ge dieser Mae wird das gesuchte Implantat entworfen und hergestellt. Ohren Paradebeispiel fr die Wiederherstellung eines ganzen Kr- perteils durch Tissue Engineering ist das Ohr. Ohren bestehen im Wesentlichen aus Knorpel. Daher liegt es nahe, eine aus geeignetem Material wie ein Ohr geformte Matrix mit patien- teneigenen Chondrozyten zu besiedeln. Forscher der Berliner Charit whlen hierfr stabile biokompatible Fasermateria- lien als Trger kombiniert mit Gelmatrices aus Agarose, Algi- nat und Hyaluronsure, in die zuvor kultivierte Chondrozy- ten gut hineinwachsen knnen. Auerdem umgibt aus dem Blut des Patienten gewonnenes Fibrin die Zellen als Klebstoff. Nach Transplantation unter die Haut einer Labormaus reift das Konstrukt zu einem kompletten Ohr heran, dessen Gehalt Ohrrekonstruktion: Silikonform (li.), rekonstruierter Ohrlappen. In vitro hergestellte dreiseglige Herz- klappe 20 Gefe TISSUE ENGINEERING Blutdurchfluss, um den Bedingungen im lebenden Orga- nismus nahe zu kommen. Nach zwei Wochen im Bioreaktor haben sich die Zellen der Herzklappen in Schichten organi- siert und verstrkt. Werden solche Klappen jungen Schafen eingepflanzt, hnelten sie im Verlauf von fnf Monaten immer mehr einer natrlichen Klappe: Sie werden dnner und strukturierter und unterscheiden sich makroskopisch nicht mehr von den natrlichen Herzklappen. Gefe Der Bedarf an transplantierbaren Adern nach Verletzungen, Bypassoperationen und schweren Thrombosen ist gro. Nicht immer gelingt es, ihn durch krpereigene, an anderen Stellen entnommene Gefe zu decken. Fr Bypass-Operatio- nen werden gewhnlich Teile aus Beinvenen des Patienten, aus Arterien seines Brustkorbs oder des Unterarms verwen- det. Bei etwa einem Fnftel der Patienten ist das jedoch nicht mglich, weil aufgrund von Entzndungen oder krankhafter klappensegel ausgehend von autologen Zellen zu zchten. Sie sind besonders fr die Behandlung von Kindern interes- sant, um die drei bis sieben Operationen bis zum Erwachse- nenalter zu vermeiden. Ein Ansatz nutzt die Kollagenmatrix von Schweine-Aorta- klappen als Gerst fr das neue Herzklappensegel. Sie sind in Geometrie und Abmessungen dem menschlichen Pendant vergleichbar bestehen ebenfalls aus einem mit Herzzellen bewachsenen Kollagen-Sttzgerst. Zur Umwandlung einer solchen Klappe in ein fr den Menschen vertrgliches Er- satzteil entfernt man mittels Chemikalien alle Zellen und -bestandteile aus dem Gewebe. Besonders wichtig ist die Zer- strung aller DNA-Molekle, um zu verhindern, dass mgli- cherweise Erbgut von Viren zurckbleibt. Die nun zellfreie Matrix aus Kollagen und Elastin hat immer noch eine fr die Transplantation geeignete Konsistenz. Einige Monate nach der Transplantation ist eine solche Klappe dann in vivo mit Fibroblasten und Endothelzellen besiedelt und verfgt ber die Fhigkeit zur Erneuerung. Das Konzept hat den Vorteil, dass man ein beinahe perfektes Klappendesign bernimmt und daher geeignete hmodynamische Bedingungen herr- schen. Das Verfahren ist bereits im klinischen Einsatz. Medizi- ner aus Zrich und Aachen entwickelten gemeinsam voll- stndig autologe Herzklappen mit Hilfe von bioabbaubaren Polymeren. Das Material ist in der Hitze formbar und wird von Zellen leicht besiedelt. Es ist chemisch so konzipiert, dass es sich bis zum Zeitpunkt der Implantation komplett aufge- lst hat. Dann besteht die Herzklappe nur noch aus autolo- gem Gewebe. Zur Besiedlung der Matrix im Bioreaktor ver- wenden die Forscher aus Blut- oder Nabelschnurstammzellen hervorgegangene Fibroblasten. Whrend des Wachstums belasten sie die entstehende Klappe mit einem knstlichen Echokardiografische Darstellung der Tissue Engineerten Herz- klappen acht Wochen nach Implantation Nach Einbau der knstlichen Herzklappe Teflonbypass 21 TISSUE ENGINEERING Anst ze mit Stammzellen Knochen Unflle oder Tumoren knnen Knochen schdigen und zum Verlust von Knochen fhren. Fr den Ersatz von Knochen sind gute Voraussetzungen durch das Tissue Engineering gegeben: Das Knochengewebe wird von speziellen Zellen, den Osteoblasten, gebildet. Die Osteoblasten selbst bilden sich aus Knochenmarkstammzellen. Als Gerstmaterial kommt die anorganische Knochensubstanz aus Calcium- phosphat/Hydoxyapatit in Frage. Besonders hilfreich ist hier die Mglichkeit, in der porsen Matrix bestimmte Knochen- wachstumsproteine oder -faktoren (bone morphogeneic fac- tor, BMP) einzulagern. Sie sorgen dafr, dass die Zellen ange- lockt werden und in das Material hineinwachsen. Die US- amerikanische Zulassungsbehrde Food and Drug Admini- stration (FDA) hat rekombinantes BMP-2 bereits fr ortho- pdischeAnwendungen zugelassen. Ein geradezu spektaku- Erweiterungen keine geeigneten Gefe vorhanden sind. Und die Gefprothesen aus Kunststoff haben ihre Tcken: 40 Prozent solcher knstlichen Bypsse sind nach einem Jahr bereits nicht mehr durchgngig, da der Kunststoff zur Gerinnselbildung fhren kann. Also ein klarer Auftrag fr das Tissue Engineering, autologen Ersatz zu entwickeln. Ein frher Ansatz war echte Bastelar- beit: Ein zusammenhngender in vitro kultivierter Gewebe- mantel aus glatten Muskelzellen wurde zu einer Rhre gerollt. Die Auenflche der Rolle lie man anschlieend von Fibroblasten besiedeln, dann die Innenseite von Endo- thelzellen. Die dreischichtige Prothese konnte bereits Dr- cken von 2.000 mmHg standhalten. Mit Gefprothesen, die auf Polymergersten basieren sind wir heute bereits einen Schritt weiter. Paradebeispiel sind Kunststoffrhren aus PGA (Polyglycolsure 92Prozent /Milchsure 8Prozent), die mit Fibroblasten, glatten Muskelzellen und Endothelzellen besie- delt werden. Setzt man diese Konstruktionen whrend des Wachstums in einem Durchflussbioreaktorsystem pulsieren- den Flssen aus, erhlt man konditionierte Gefprothesen, die histologisch natrlichem Gefgewebe gleichen und bes- sere biomechanische Eigenschaften aufweisen als nicht-kon- ditionierte Konstrukte. Diese Gefprothesen, genauer auto- loge endothelialisierte Prothesen, sind bereits im klinischen Einsatz. Die Anforderungen an die Gerstsubstanz der Ersatz- gefe sind sehr hoch, so dass Alternativen zu PGA gesucht wurden. Zum Beispiel Polytetrafluorethylen (PTFE), vulgo Teflon. Es ist ein interessantes Material mit Blick auf Flexibi- litt, Druck- und Reifestigkeit. Zudem ist die Gefahr der Abstoung durch Abwehrreaktionen des Immunsystems sehr gering. Leider macht die Teflonoberflche, von der sprich- wrtlich alles abfllt, Schwierigkeiten, wenn es um die Besie- delung mit Zellen zur Befestigung an die vorhandenen Gef- e geht. Mittlerweile gelingt es, Schichten von glatten Muskelzellen und Endothelzellen darauf zu zchten. Man verwendet dafr unter definierten Strmungsbedingungen kultivierte autologe mikrovaskulre Endothelzellen (MVEC). Sie werden auf das mit Fibrinkleber prparierte Kunststoff- rhrchen aufgebracht und heften sich in der knstlichen Blutstrmung besonders gut an das Prothesenmaterial an. Die Eigenschaften dieser Ersatzgefe sind viel versprechend und erste klinische Versuche wurden bereits gestartet. Anstze mit Stammzellen ber das enorme Potenzial von embryonalen und adulten Stammzellen wurde bereits an anderer Stelle berichtet (siehe Seite 11). An dieser Stelle sollen einige fortgeschrittene Forschungsprojekte vorgestellt werden, die in Pilotversuchen die klinische Phase bereits erreicht haben. Konstruktion eines Ersatzkiefers Grundlagenforschung Was ist eigentlich Grundlagenforschung? Definitionen gibt es viele, nicht zuletzt von der Europischen Kommission (Supplement zum Amtsblatt der Europischen Gemeinschaf- ten, Nr. C45/14 vom 17.02.1996), die dazu folgendes verlaut- bart: Unter Grundlagenforschung versteht die Kommission eine Erweiterung der wissenschaftlichen und technischen Kenntnisse, die nicht auf industrielle oder kommerzielle Ziele ausgerichtet sind. Diese Abgrenzung der Grundlagenfor- schung von der anwendungsorientierten Forschung gibt immer wieder Anlass zu interessanten Diskussionen. Relativ unstrittig ist, dass die Grundlagenforschung in erster Linie unseren Wissensdrang befriedigt und eine schlichte Konse- quenz der menschlichen Neugierde ist. Ziel der Grundlagen- forschung ist der Erkenntnisgewinn an sich ohne den Wert der Erkenntnis an eine sptere Verwertbarkeit zu knpfen oder zu fragen, ob die neuen Erkenntnisse in das herrschende Weltbild passen. Eine zwanghafte Entkoppelung von Grundlagenforschung und Verwertbarkeit ist allerdings nicht sinnvoll, ganz im Gegenteil. Die Grundlagenforschung ist fr die grten Inno- vationsschbe verantwortlich, da sie unverhofft Tren in vl- liges Neuland aufstt und damit Anwendungsgebiete erff- net, die zuvor nicht gesehen worden sind. Das gilt fr die Erfindung des Telefons ebenso wie fr die Entwicklung der Biotechnologie: Wer htte sich vor 40 Jahren trumen lassen, dass menschliche Gene in Mikroorganismen eingebaut und zur Herstellung hochwertiger Medikamente genutzt werden knnen? Heute arbeiten allein in der Biotechnologie-Indus- trie der USA, wo die neuen Mglichkeiten schnell in kommer- zielle Anwendungen umgesetzt worden sind, mehr als 200.000 Menschen in meist hoch qualifizierten und gut bezahlten Jobs. Bedeutung gentechnischer Methoden Mit der Entwicklung gentechnischer Methoden um 1970 erhielt auch die Medizin wichtige Impulse. Das betrifft zum einen die Produktion von Medikamenten auf Proteinbasis, die man Biopharmazeutika nennt. Zum anderen aber auch die Entwicklung diverser Zellkulturtechniken oder vllig neuer Anstze wie den der Gentherapie, auf den weiter unten noch kurz eingegangen wird. berragende Bedeutung haben gen- technische Methoden auch in der Diagnostik erlangt; die Mglichkeit zur Individualisierung der Medizin, von der heute immer wieder die Rede ist, wre ohne den Einsatz gen- technischer Methoden nicht denkbar. Auch der genetische Fingerabdruck, der beim Identifizieren von Personen heute fast schon routinemig eingesetzt wird, ist ein Resultat gen- technischer Arbeiten. Entwicklung der Methoden der modernen Medizin 22 Das erste Medikament aus gentechnischer Herstellung war das Humaninsulin, das von der Firma Genentech, dem ersten Biotechnologie-Unternehmen weltweit, entwickelt wurde. Die Pharmafirma Eli Lilly brachte es (in Zusammenarbeit mit Genentech) schon im Jahr 1982 auf den Markt. Die Gentechnik ermglicht den Austausch von Erbinformation ber die Artengrenzen hinweg; fr die Produktion von Humaninsulin war das menschliche Gen fr Insulin auf Bakterien bertra- gen worden, aus denen man nun in groen Mengen Vorlu- ferformen des Hormons gewinnen konnte. Das aktive Hor- mon konnte man dann aus diesen Vorluferformen mittels proteinchemischer Methoden herstellen. Das skizzierte Ver- fahren ist das bei der Herstellung von Biopharmazeutika bli- che Vorgehen. Man identifiziert die genetische Information fr ein menschliches Protein, isoliert diese und bertrgt sie dann auf Mikroorganismen oder Zellkulturen, von denen das entsprechende Protein in groen Mengen produziert werden kann. Natrlich muss man zunchst erst einmal wissen, wel- che Funktion das interessierende Protein hat und ob es sich als Biopharmazeutikum eignet. Gerade auch bei der Aufklrung dieser Sachverhalte sind gentechnische Verfahren unver- zichtbar geworden. Neben der Entwicklung gentechnischer Methoden kam es um 1975 zu einer weiteren bahnbrechenden Neuerung. Den sp- teren Nobelpreistrgern Khler und Milstein gelang es erst- mals, Monoklonale Antikrper herzustellen. Antikrper sind Proteine, die von bestimmten Zellen des Immunsystems gebil- det und ins Blut abgegeben werden. Der Krper verfgt ber eine enorme Zahl Antikrper produzierender Zellen, die jeweils definierte und in der Struktur einzigartige Antikrper- varianten produzieren. Die Situation ist hier hnlich wie bei den Gewebsantigenen (siehe Seite 8). Findet einer dieser Anti- krper eine molekulare Struktur, ein Antigen, an das er bin- den kann, dann werden in einer Kaskade von Reaktionen die Prozesse ausgelst, die wir als Immunantwort bezeichnen. Als Teil dieser Immunantwort beginnt auch die Zelle, die den bin- denden Antikrper ursprnglich produziert hat, sich zu teilen und mit ihren Tochterzellen grere Mengen und weitere Varianten des Antikrpers zu produzieren. Diese Varianten sind wichtig, weil sie die Zielstruktur oft noch besser binden knnen als der ursprngliche Antikrper und die Immunant- wort dadurch noch effektiver wird. Im Blut zirkuliert zu jeder Zeit eine fast unberschaubare Zahl von Antikrpern unterschiedlicher Struktur, um jedes ein- dringende Virus oder Bakterium binden und in der Folge unschdlich machen zu knnen. Die komplexe Mischung der verschiedenen Antikrper und bestimmte Subklassen von ihnen konnte man schon seit lngerem isolieren und fr medizinische oder andere Zwecke einsetzen. Die passive Imp- fung basiert darauf. Hier infiziert man Spender, beispiels- weise Pferde, gezielt mit einem Antigen. Als Folge der Immun- wie sich die Gene von gesunden und von kranken Menschen unterscheiden. Bei der Bluterkrankheit tritt beispielsweise eine Vernderung in dem Gen auf, das die Infor- mation zur Herstellung eines Proteins mit Namen Faktor VIII trgt. Dadurch wird das Protein fehlerhaft und kann seine wichtige Funktion in der Blutgerinnung nicht mehr ausben. Solche Vernderungen an Genen lassen sich heute relativ leicht nachweisen und sind die Grundlage moderner diagnos- tischer Verfahren. Es wird aber auch daran gearbeitet, in bestimmte Zellen der Patien- ten fehlerfreie Gene einzufhren, die dann zur Produktion eines funktionalen Proteins fhren sollten. Diese als somatische Genthe- rapie bezeichneten Verfahren sind interes- sant, weil sie eine Korrektur von Krankheits- ursachen ermglichen knnten. Allerdings ergeben sich bei klinischen Erprobungen immer wieder Pro- bleme, die vor einem breiteren Einsatz der Methode noch gelst werden mssen. Im Jahr 2000 wurde die Analyse der genetischen Gesamtinfor- mation des Menschen, des menschlichen Genoms, vorlufig beendet. Eine gewaltige wissenschaftliche Leistung, die gern mit der Mondlandung verglichen wird. In den Mittelpunkt des Interesses ist nun die Frage gerckt, welche genetische Information zu welchem Zeitpunkt in einer Zelle abgerufen wird und wie die einzelnen Gene und Proteine miteinander wechselwirken. Die Methoden sind so weit verfeinert worden, dass nun versucht wird den Zustand aller Gene in einer Zelle gleichzeitig zu analysieren. Die Akti- vitten gleicher Zellen unter unterschied- lichen Bedingungen werden studiert, kran- ke Zellen werden mit gesunden Zellen ver- glichen, und die ver- schiedenen Stadien in der Entwicklung eines Lebewesens werden untersucht. Damit nhert man sich auch der Beantwortung der Frage, warum bei grundstzlich gleicher genetischer Ausstattung die Zellen eines Organismus so viele unterschiedliche Funktionen ber- nehmen knnen. antwort reichern sich im Blut der Pferde verschiedene Anti- krper gegen dieses Antigen an, die man dann isolieren und fr eine passive Schutzimpfung verwenden kann. Khler und Milstein gelang es, ganz gezielt nur eine einzelne Zelle aus der Vielzahl Antikrper produzierender Zellen zu isolieren und anschlieend in Kultur zu vermehren. Die Nach- kommen dieser einen Zelle produzieren alle die exakt gleiche Antikrpervariante, so dass von dieser nun grere Mengen hergestellt werden knnen. Man spricht dann von Monoklo- nalen Antikrpern. Wichtig ist dabei, dass man die Bindungs- eigenschaften dieser Monoklonalen Antikrper durch geeig- nete Verfahren im voraus bestimmen kann. Da es sich um nur einen genau definierten Typ von Antikrper handelt, ist die Wechselwirkung mit seiner Zielstruktur hochselektiv und gut reproduzierbar im Gegensatz zu Ergebnissen, die man mit Mischungen unterschiedlicher Antikrpervarianten erhlt. Man kann die Bindungseigenschaften zum Beispiel technisch nutzen um andere Proteine zu binden und zu reinigen. Durch den Einsatz gentechnischer Methoden wurden die Eigen- schaften der Monoklonalen Antikrper immer weiter opti- miert; heute sind Monoklonale Antikrper und ihre Abkmm- linge auch die Basis fr uerst wirksame Medikamente, etwa gegen Krebs. Wichtige Aufschlsse wurden auch ber den molekularen Aufbau von Genen gewonnen. Man konnte nun vergleichen, Grundoperation der Gentechnik: Ein Stck fremder DNA (blau), das ein ganzes Gen enthalten kann, wird mit Hilfe von DNA- Scheren und DNA-Kleber in einen Ring aus bakterieller DNA, ein so genanntes Plasmid, eingefgt. Das Wirtsbakterium nimmt das rekombinante Plasmid auf , vermehrt es wie sein natrliches Erbgut und produziert die darauf codierten Proteine. 23 Zunchst werden die autologen oder allogenen Zellen in Vorkulturen angezogen, um sie in Wachstumsphasen und in ausreichender Menge auf das entsprechend der Anwen- dung vorgeformte Trgermaterial auftragen zu knnen. Die geimpfte Matrix wird dann in stationrem Milieu kul- tiviert bis man die Anhaftung der Zellen an das Trgermate- rial feststellt. Hier kommt es darauf an, dass die Zellen opti- male Wachstumsbedingungen vorfinden. Dazu gehren die wichtigen Kontakte zur Matrix und zu anderen Zellen. Jeder Zelltyp stellt ganz individuelle, oftmals zeitlich varia- ble Ansprche an seine Umgebung, die durch die mg- lichst genaue Schaffung der natrlichen Mikroumge- bung der Zellen erfllt sein mssen. Nur wenn diese Anforderungen erfllt sind, lsst sich das Konstrukt schlielich in Reaktoren unter kontinuierlicher Nhrstoff- und Luftzufuhr zu funktionalen Geweben aus- reifen, wobei mglichst physiologische Bedingungen ein- zuhalten sind. Ausdifferenzierte Krperzellen lassen sich meistens nicht so ohne weiteres in vitro vermehren. Das liegt unter anderem daran, dass sie sich in den Geweben auch nicht beliebig teilen drfen. Andernfalls gbe es keine klar begrenzten Gewebe- strukturen und Organe. Die Ausnahme sind Tumorzellen, die sich bekanntermaen ungehemmt teilen und die Organe zer- stren. Diese Fhigkeit macht man sich in der Bioprozesstech- nik zunutze, indem man Immunzellen eines bestimmten Typs mit speziellen Tumorzellen (Myelomzellen) fusioniert. Die daraus resultierenden Hybridomazellen weisen die Eigen- schaften der Immunzellen auf, sind aber wie die Tumorzellen in der Zahl ihrer Teilungszyklen nicht begrenzt. Sie eignen sich deshalb fr groe Zellkulturen zur Produk- tion wertvoller Proteine, zum Beispiel rekombi- nanter Antikrper (siehe Seite 8). Fr Zellthera- pien sind die Zellen verstndlicherweise ungeeignet. Einige somatische Zelltypen sind in vitro ver- mehrbar und knnen therapeutisch zum Ersatz ausgefallener Gewebezellen genutzt werden. Dazu gehren zum Beispiel Knorpelzellen oder die Stammzellen des Knochenmarks. Eine In- vitro-Kultur frisch isolierter Zellen eines Gewe- bes wird als Primrkultur bezeichnet. Nachdem die Zellen sich ungestrt teilen und wachsen konnten, mssen sie sptestens wenn sie den Schalenboden komplett bedecken auf neue Kul- turgefe verteilt werden (Subkultivierung). Andernfalls stellen sie das Wachstum ein und sterben ab. Sind Zellen mehr als siebzigmal nach der Primrisolation ohne Einschrnkung subkultivierbar, was nicht oft der Fall ist, spricht man von kontinuierlichen Zelllinien. Die Gewebe in einem Organismus weisen hoch funktionelle Strukturen auf. In vitro kultivierte Gewebekonstrukte unter- scheiden sich davon meistens sehr deutlich. Die Annherung an das natrliche Vorbild hngt entscheidend von den Kultur- bedingungen ab. Unbefangene Formulierungen wie die Zel- len wurden vermehrt/gezchtet mgen den Eindruck erwecken, dass es sich bei der In-vitro-Zchtung von Zellen und Geweben um etablierte, unkomplizierte Routineschritte handele. Dem ist nicht so: Die Prozessentwicklung fr das Tis- sue Engineering ist ausgesprochen schwierig und technisch anspruchsvoll. Die Herausforderungen stellen sich auf allen Ebenen, angefangen von der Gewinnung und Vermehrung der Zellen, der Auswahl der Trgermaterialien und dem Reak- tordesign bis hin zu den strengen Auflagen der Zulassungsbe- hrden an das Herstellungsverfahren (Good Manufacturing Practice, GMP). Unter Tissue Engineering versteht man auf Zellen basieren- de Therapien, die oftmals Trgermaterialien (manchmal in Kombination mit Wachstumsfaktoren) nutzen, um ge- wnschte, meist rumliche Gewebestrukturen zu ersetzen. Man verwendet in den meisten Fllen Zellen, die vom Patien- ten selbst stammen, so genannte autologe Zellen. Sie liefern dem entsprechend gut vertrgliche Transplantate. Stammen die Zellen von anderen Menschen, spricht man von allogenen Zellen. Zellen tierischer Herkunft finden sich in xenogenen Transplantaten. Die Herstellung knstlicher Gewebe beim Tissue Engineering luft grob unterteilt in drei Schritten ab: Die Zchtung von Zellen und Geweben 1. 2. 3. Bioreaktor zur Zchtung von Knorpelzellen 24 Trger mechanisch fixiert sind. Wenn man das Medium konti- nuierlich durch neues ersetzt, lassen sich konstante Ernh- rungsbedingungen realisieren. Mit diesen Reaktortypen ist es auch mglich, Konstrukte gleichzeitig mit unterschiedlichen Medien zu versorgen, zum Beispiel Nierenzellepithelien, die wie im Krper auf der einen Seite von urinartigem und auf der anderen Seite von serumartigem Medium umsplt werden. Die Bioprozessentwicklung erfordert die Zusammenarbeit von Fachleuten aus verschiedenen Disziplinen Zellbiologen, Materialwissenschaftler, Verfahrenstechniker und Mediziner. In Deutschland ist diese Expertise an zahlreichen Universitts- standorten vorhanden. Dort haben die Forscher auch Unter- nehmen gegrndet, die Tissue- Engineering-Produkte ent- wickeln, herstellen und vermarkten. Die Errichtung und der Betrieb von Pilotanlagen und Produktionseinheiten ver- schlingen groe finanzielle Mittel, oft zweistellige Millionen- Euro-Betrge. Die hohen Ansprche der Good Manufacturing Practice an Reinheit, Sterilitt und Qualitt der eingesetzten Materialien und Produkte machen unter anderem auch spe- zielle bauliche Voraussetzungen erforderlich: Hintereinan- der geschaltete, durch Schleusen abgetrennte Bereiche gewhrleisten in den Produktionsrumen Reinraumbedin- gungen wie sie nur noch in der Chipindustrie erreicht wer- den. Die Institute und Firmen mssen in der Regel ein striktes Qualittsmanagement nachweisen, um die Zulassung zu erhalten und zu behalten. Auch wenn nicht produziert wird, fallen weiterhin hohe Betriebskosten an, da die Anlagen und die Luft- und Wasserversorgung immer betriebsbereit und steril gehalten werden mssen. In der Praxis steckt die Zchtung menschlicher Zellen meis- tens voller Tcken. Zum Beispiel bleiben die Eigenschaften der in vitro kultivierten Zellen nicht lange konstant. Sie kn- nen ihre Spezifitt verlieren (Dedifferenzierung) oder im Ver- lauf der Teilungen andere Eigenschaften ausprgen. Zur Kul- tivierung von Zellen mancher Gewebetypen, die nicht in der Kulturschale wachsen, muss man den Weg ber Stamm- beziehungsweise Vorluferzellen (siehe Seite 11) beschreiten. Diese werden zunchst in vitro vermehrt und differenzieren dann in vivo, induziert durch geeignete Signale, in Gewebe- zellen aus. Zahlreiche praktische Probleme bei der Kultivie- rung sind noch nicht gelst. So wei man noch nicht genug ber die Faktoren, die die Differenzierung der Stammzellen steuern und kann deshalb nicht immer verhindern, dass sich die Zellen in der Kultur in unerwnschte Richtungen entwi- ckeln oder entarten. Die verfahrenstechnischen Herausforderungen sind eben- falls gro. Fr die Zufuhr von Nahrung und Sauerstoff und den Abtransport von Stoffwechselabfallprodukten und Kohlen- dioxid musste die Bioprozesstechnik zahlreiche apparative Lsungen finden. Petrischalen, deren Kulturmedium nicht kontinuierlich ausgetauscht werden kann, eignen sich eher fr Primrkulturen, wobei die rasch zunehmende Belastung des Mediums durch Stoffwechselprodukte der Zellen die Kul- turdauer begrenzt. Kulturflaschen mit Rhrer sind aufgrund der greren Kulturmedienvolumina auch fr die lngere Phase der Matrixbesiedlung vorteilhaft. Gewebekonstrukte hngen an einem Faden in der Flssigkeit und sind wegen des am Gefboden rotierenden Magnetrhrers einer permanen- ten Strmung ausgesetzt. Sie ermglicht den Abtransport der Abfallprodukte aus dem Inneren des Konstrukts. Derartige Kulturen knnen ber Wochen wachsen, sofern das Eindrin- gen von Bakterien oder Viren vermieden wird. Eine andere Lsung sind rotierende Bioreaktoren, bei denen die stetige Bewegung der Nhrflssigkeit durch die Drehung des trom- melfrmigen Kulturgefes erzeugt wird. Diese Reaktoren gibt es auch als nicht-geschlossene Systeme mit der Mglich- keit, das Nhrmedium kontinuierlich durch frisches zu erset- zen. Die genannten Reaktortypen eignen sich fr Knorpel und dnnlagige Zellschichten (Epithel), wo kein Kapillarnetz zum Transport von Nhrstoffen und Sauerstoff notwendig ist. Wo es aber auf die tief gehende Versorgung ankommt, kann man die Zellen mittels Hohlfasern kultivieren. Die Zellen haf- ten an den Innen- und Auenseiten der vom Nhrmedium durchstrmten Fasern. Es gibt unterschiedlich dimensionier- te Hohlfaserreaktoren, deren Module in Gre und Zahl der Hohlfaserbndel variieren. In der Zellkulturtechnik hat sich dieser Reaktortyp bei der Herstellung von monoklonalen Antikrpern aus Sugerzellkulturen durchgesetzt. Der wich- tigste Reaktortyp fr die Gewebezchtung sind Perfusionsre- aktoren. In den Perfusionskulturen umsplt frisches Kultur- medium die darin reifenden Gewebekonstrukte, welche ber Knorpelzchtung im Reinraumlabor 25 25 26 Herzmuskel TISSUE ENGINEERING ration von Herzmuskelgewebe mit Hilfe von Zellen. Man ver- wendet sowohl ausdifferenzierte Herzmuskelzellen und Ske- lettmuskelzellen als auch adulte, embryonale und ftale Stammzellen. Anstze, Herzmuskelzellen (Myokardzellen) in vitro im Biore- aktor zu zchten und dann als Ersatzmuskel zu transplan- tieren, verfolgt man seit Anfang der 1990er Jahre. Die krper- eigenen Zellen werden etwa drei Wochen vor der Herzope- ration entnommen, dann speziell aufbereitet und fr die In- jektion in den geschdigten Herzmuskel kultiviert. Die Her- ausforderungen an die Konstrukte und ihre Herstellung sind aber sehr hoch, so dass sie die klinische Praxis noch nicht er- reicht haben. In den letzten Jahren hat die Stammzellforschung der Rege- nerativen Medizin neue Impulse zur Behandlung von kardio- vaskulren Krankheiten gegeben. Zwar findet man im Her- lres Beispiel fr das Engineering von Knochen lieferten im Sommer 2004 Mediziner der Universitt Kiel. Ihnen gelang es, den durch einen Tumor zerstrten Unterkiefer eines 56 Jahre alten Patienten funktio- nal zu rekonstru- ieren. Zunchst entwarf man am Computer die Form des fehlen- den Unterkiefer- stcks. Nach die- ser Vorlage entstand ein Geflecht aus Titandraht, in das die Knochenmi- neralien, durch- mischt mit Knochenmarkzellen des Patienten, modelliert wurden. Zur Stimulierung des Zellwachstums hatte man auch BMP hinzugefgt. Die gesamte Konstruktion wurde dann in den rechten Rckenmuskel unterhalb des Schulter- blatts eingepflanzt, damit unter den krpereigenen Wachs- tumsbedingungen Knochenzellen heranreifen konnten und ein zunehmend festgefgteres Knochengewebe bildeten. Nach sieben Wochen operierten die rzte den Unterkieferteil mitsamt Blutgefen und einigen Muskelstrngen aus dem Rckenmuskel heraus. Sie setzten es in den Mund des Patien- ten ein, um dort mit dem vorhandenen Rest des Kiefers zusammenzuwachsen. Noch (Stand Winter 2004) hlt das Titandrahtgerst die Neukonstruktion zusammen. Es soll spter entfernt werden, wenn der zusammengewachsene Unterkiefer stabil genug geworden ist. Heute ist das Verfah- ren lngst kein Einzelbeispiel mehr: Ein finnisches Team konnte auf diese Weise sogar die komplette Vorderstirnplat- te einer Patientin ersetzen. Herzmuskel Jhrlich erleiden 300.000 Menschen in Deutschland einen Herzinfarkt. Wird ein Herzinfarkt bemerkt ist es meistens schon zu spt. Die ffnung der Arterien durch Gerinnungs- hemmer und Operationen kann nicht mehr verhindern, dass von der Blutzufuhr abgeschnittene Bereiche des Herzmus- kels absterben. Dabei fallen unterschiedlich groe Partien des Muskels aus, es bilden sich Narben aus Bindegewebe und hufig bleiben Funktionsstrungen unterschiedlichen Aus- maes zurck. Die Patienten bleiben in ihrer Leistungsfhig- keit eingeschrnkt vom Risiko erneuter Vorflle einmal abgesehen. Langfristige therapeutische Optionen sind rar, denn Muskelgewebe ist nicht sehr regenerationsfhig. Weltweit laufen gegenwrtig zahlreiche Studien zur Regene- Das Kieferknochenkonstrukt wchst im Rckenmuskelgewebe des Patienten heran Mit dem Katheter knnen Stammzellsuspensionen in das Infarktgewebe injiziert werden Herzmuskelgewebe 27 TISSUE ENGINEERING Luf trhre Krankenhausaufenthalte erfordert, denn bakterielle Infek- tionen sind fast zwangslufig. Dann mssen diese Patienten gefenstert werden. Sie liegen auf der Intensivstation und haben groe ffnungen im Brustkorb, um Eiter und Bakte- rien abflieen zu lassen. Forscher des Fraunhofer-Instituts fr Grenzflchen- und Bioverfahrenstechnik in Stuttgart fanden eine Methode, um die Luftrhre nach erfolgreicher Behand- lung der Infektionen wieder schlieen zu knnen. Wichtig ist die Herstellung der hauchzarten Blutgefe, die die Luftrh- re umgeben. Die Forscher isolieren die entsprechenden Blut- gefe aus Schweinedarm. Die Zellen werden chemisch- enzymatisch entfernt, sodass die feinen Wandstrukturen als zellfreie Kollagen-Rhren brig blieben. Was so einfach klingt, bedeutet viel Arbeit und ist ein schwieriges Verfahren. Die Kollagenwand der feinen Kapillaren mssen anschlie- end mit menschlichen Endothelzellen ausgekleidet werden. Dazu dient die In-vitro-Besiedlung mit Knochenmarkstamm- zellen des Patienten, die sich auf der Kollagenmatrix in En- dothelzellen ausdifferenzieren. Unter idealen Kulturbedin- gungen beginnen die Zellen, die Schweinematrix, das heit die Wand, abzubauen und ihre eigene Wand aus mensch- lichen Kollagenen zu synthetisieren. Dieser Umbau wird als Remodelling bezeichnet. Im Ergebnis erhlt man menschliche Blutgefe, die genau zu dem Patienten passen, von dem die Stammzellen aus dem Knochenmark stammten. Die gezchtete Gefwand wird schlielich in das Fenster transplantiert, wo sie anwchst und die Luftrhre wieder verschliet. Insgesamt vier Patien- ten tragen inzwischen solche biologischen Hautpflaster auf ihrer Luftrhre. Der erste Patient konnte bereits 14 Tage nach der Operation das Krankenhaus verlassen. zen nur sehr selten undifferenzierte Zellen und ihre Fhigkeit zur Neubildung von Muskelzellen ist wenig ausgeprgt. In vitro konnte man sie immerhin in mindestens drei Gewebear- ten Herzmuskel, Blutgefmuskel und Innenhaut von Blut- gefen verwandeln. Ob und in welchem Ausma sie die Umwandlung auch in vivo vollziehen, ist aber bislang noch unbeantwortet. Natrlicherweise sind sie vermutlich nur fr kleinere Reparaturarbeiten vorgesehen. Ihnen auf die Sprn- ge zu helfen, ist auf unterschiedlichen Wegen versucht wor- den. Bislang ergeben die verschiedenen Anstze aber noch kein einheitliches Bild. Auch adulte Stammzellen aus dem Knochenmark sind in der Lage, Herzmuskelgewebe zu bilden. In Museexperimenten wurden die isolierten, mit so genannten Markergenen gekennzeichneten Zellen in das abgestorbene Gewebe inji- ziert. Nach einigen Wochen fand man dort neu gebildete Zel- len, die Charakteristika von Herzmuskelzellen aufwiesen und mitunter synchron mit den vorhandenen Herzmuskelzellen kontrahierten. Da sie auch die Markergene der Stammzellen trugen, gab es keinen Zweifel ber ihre Herkunft. Es stellte sich bald heraus, dass die Qualitt der Knochenmarkzellen entscheidend ist und sich besonders daraus hervorgegange- ne so genannte endotheliale Vorluferzellen eignen, die bereits eine bestimmte Entwicklungsrichtung eingeschlagen haben. Dieser Therapieansatz wird nun auch in klinischen Versuchen beim Menschen getestet. Noch gibt es viele offene Fragen. Man wei nur wenig ber das Schicksal der in den Herzmuskel injizierten Stammzellen. So ist immer noch umstritten, inwieweit es sich bei den neu gebildeten Zellen tatschlich um echte Herzmuskelzellen handelt. Manche Experimente deuten darauf hin, dass die Vorluferzellen mit vorhandenen Muskelzellen fusionieren. Nach anderen Untersuchungen bilden die Stamm- und Vorluferzellen gar nicht in dem erwarteten Aus- ma Herzmuskelzellen, sondern tragen unter ande- rem durch die Ausschttung von Boteneiweien zur Erholung des geschdigten Herzgewebes bei. Das legen In-vivo-Experimente mit stammzelltypischen Botenstoffen nahe, die zur Ausdifferenzierung von embryonalen Stammzellen in funktionstchtige Muskelzellen notwendig sind. In diesen Experimen- ten zeigte sich, dass Stammzelltherapien bei der gro- en Mehrheit der behandelten Patienten zu einer sig- nifikanten Krftigung des Herzens fhrten. Dieser interessante Befund soll nun in einer europaweiten Studie genauer berprft werden. Luftrhre Patienten mit Atemwegstumoren sind postoperativ oft auf einen Tubus im Hals angewiesen um atmen zu knnen. Der Beatmungsschlauch verursacht dabei eine chronische Verletzung der Luftrhre, die hufige 28 Pankreas TISSUE ENGINEERING len? Adulte Pankreas-Stammzellen und Vorluferzellen hat man noch nicht zweifelsfrei identifizieren knnen. Man ver- mutet sie im Gewebe der Drsengnge. Nach neuesten Berichten htten die sehr seltenen Zellen sogar die Charakte- ristika von pluripotenten Stammzellen. Damit wren sie fr die Regenerative Medizin als Alternative zu embryonalen Stammzellen von groem Interesse. Eine Zchtung von - Zellen aus Nicht-Pankreaszellen gelang im Tierversuch mit Stammzellen des Knochenmarks (MSCs), die nach Transplan- tation in das Inselgewebe des Pankreas umdifferenzierten. Ihre Kapazitt zur Insulinproduktion war aber sehr gering. Nicht nur deshalb sind Zweifel an der Natur dieser -Zellen angebracht. hnliche Ergebnisse erzielte man durch die in- vitro-Umwandlung von humanen Inselzellen in Vorluferzel- len unter bestimmten Kulturbedingungen. Diese Vorlufer- zellen konnten gut vermehrt werden und bildeten nach Transfer in Pankreasgewebe Inselkolonien. Ihre Insulinpro- duktion war ebenfalls sehr gering. Niere In Deutschland werden jhrlich etwa 2.200 Nieren transplan- tiert, das entspricht nur einem geringen Teil des Bedarfs. Die vielen Patienten auf der Warteliste sind bis dahin mitunter ber Jahre auf die Dialyse angewiesen. Bei 53.000 gemelde- ten Dialysepatienten (im Jahr 2000) und durchschnittlich drei Dialysen pro Woche sind das etwa 8,3 Millionen Behand- lungen pro Jahr. Den Patienten geht es chronisch schlecht. Diese bedrckende Situation ist Motivation genug, nach langfristig erfolgreichen Therapien zu suchen. Die Trans- plantation von Schweinenieren wre mglich, ist unter ande- rem aber wegen der gravierenden Immunreaktionen der Empfnger sehr problematisch. Bessere Aussichten hat die Transplantation von Nieren aus Schweineembryonen, die zur Zeit im Tierversuch erprobt wird. Nicht lter als 28 Tage sind diese Organe nur einen Millimeter gro und noch ohne Blut- gefe. Aufgrund der fehlenden Gefe sind sie kaum immu- nogen. Nach der Transplantation wachsen sie im Empfnger- organismus zu funktionsfhigen, korrekt vaskularisierten Nieren heran, deren Gefe und Blutzellen dann natrlich vom Empfnger stammen. Zudem gibt es Anstze, durch gentechnische Vernderungen von Schweinezellen die immunologische Fremdartigkeit der Xenotransplantate zu reduzieren. Die geschilderten Verfahren haben aber immer noch gravierende Nachteile, insbesondere die mglichen Infektionsrisiken durch Schweineviren. Dies ist wieder eine Herausforderung fr das Tissue Enginee- ring. Ideal wre zweifellos die Regeneration beziehungs- weise Reparatur des ausgefallenen Organs durch humane, am besten autologe Zellen. Noch versteht man nicht viel von den Vorgngen bei der Bildung von Nierengewebe, aber eini- ge Optionen sind absehbar. So fand man bereits Vorluferzel- len verschiedener Nierengewebetypen, zum Beispiel En- Weiter von der klinischen Erprobung entfernt sind Stamm- zelltherapien zur Regeneration anderer lebenswichtiger Organe, Pankreas, Leber oder Nervenzelle. Im Tierversuch sind diese Konzepte zum Teil bereits erfolgreich umgesetzt worden; manche Ergebnisse sind aber noch widersprchlich. Das zeigt einmal mehr, wie schwierig und langwierig der Transfer von reiner Wissenschaft in die Anwendung ist. Pankreas Diabetes mellitus ist in Industrielndern zu einer Volks- krankheit geworden. In den USA leiden 16 Millionen und in Deutschland vier Millionen Menschen daran. Die mit 95 Pro- zent Anteil hufigste Form ist Diabetes Typ II, der so genannte Altersdiabetes. Die Krperzellen reagieren nur schwach auf den Botenstoff, der ihnen bei der Zuckeraufnahme hilft. Bei Diabetes vom Typ I ist der zerstrerische Angriff des Immun- systems auf die Insulin produzierenden -Zellen des Pankreas Grund der Krankheit. Diabetes kann dank gentechnisch her- gestellten Insulins behandelt, aber nicht kuriert werden. Das individuelle Ausma der Krankheit und die Beeintrchtigun- gen knnen gravierend sein. Was liegt nher, als zerstrte Pankreaszellen zu regenerieren, um Diabetes langfristig zu heilen? Die Insulin produzieren- den -Zellen kommen in kugelfrmigen Kolonien auf der Bauchspeicheldrse, den so genannten Langerhans'schen Inseln, vor. Stndig sterben -Zellen ab und werden in einem noch unverstandenen Prozess durch neue ersetzt. Kann der Krper die Inselzellen nicht mehr regenerieren, fllt auch die Insulinproduktion ab. Leider ist die Kultivierung von funktio- nalen -Zellen nicht mglich. Aber vielleicht mit Stammzel- Langerhanssche Insel Kapillare Drsenblschen alpha-Zelle beta-Zelle delta-Zelle 29 TISSUE ENGINEERING Leber bernehmen als Leberzellen (Hepatozyten), die darauf spezi- alisiert sind? Neue Konzepte der Knstlichen Leber basie- ren deshalb auf der Zchtung von Hepatozyten, die in geeig- neten Bioreaktoren heranwachsen, wo sie mit dem Blutplasma in Kontakt kommen. Zwei Probleme sind dabei zu lsen: Wie zchtet man die Hepatozyten? Und welches Design muss der Bioreaktor haben? Fr das Design der Knstlichen Leber als Bioreaktor scheinen sich Hohlfaser- konstruktionen zu eignen, an denen Zellen gut wachsen kn- nen und gleichzeitig groflchig von Flssigkeiten umstrmt werden. Erste Erfolge hatten amerikanische Mediziner mit immobili- sierten Leberzellen von Schweinen. Allerdings sind Schwei- nezellen problematisch: Sie knnen das Immunsystem des Patienten provozieren und heftige Abwehrreaktionen her- vorrufen. Zudem besteht das Risiko, dass sie mglicherweise schweinetypische Viren bertragen. Da sich humane Hepa- tozyten, von Tumorzellen abgesehen, schlecht vermehren lassen, kommen aus praktischen Grnden nur aus Stammzel- len gezchtete Leberzellen in Frage. Die Forschung mit adul- ten Leberstammzellen arbeitet auf Hochtouren, um die idea- len Wachstumsbedingungen und molekularen Signale zu finden, die diese Stammzellen zur Differenzierung in Hepato- zyten veranlassen. Mit Knochenmarkstammzellen gelang bereits die Zchtung von Hepatozyten, leider aber nur in vivo. Stammzellen drften auch der Schlssel zur Ideallsung sein, der in-vivo-Regeneration der Leber, und die Patienten von der Abhngigkeit von extracorporalen Ersatzleben befreien. dothelvorluferzellen (EPCs), intraglomulre Mesangialvor- luferzellen und Tubulivorluferzellen (hervorgegangen aus Knochenmarkstammzellen), die wahrscheinlich zur Regene- ration der Gewebe dienen. Noch lassen sich diese seltenen Zellen in vitro nicht gezielt zur Bildung von Nierengeweben anregen. In vivo wurde aber bereits beobachtet, dass die Vor- luferzellen in der richtigen Gewebeumgebung zu funktio- nalen Nierenzellen ausdifferenzieren. Leber Die gesunde Leber ist in groem Umfang zur Selbstregenera- tion fhig. Bei starker Schdigung durch Fibrosen und Zirrho- sen meistens als Folge von Infektionen mit Hepatitis B und C oder von Akoholmissbrauch wird diese Fhigkeit stark ein- geschrnkt. In seltenen Fllen regeneriert das Organ nach einer Therapie wieder aber sehr langsam. Oft ist eine Trans- plantation erforderlich, aber Spenderorgane sind rar. Um diese kritischen, oftmals langen Phasen zu berbrcken, haben Ingenieure Ersatzlebern entwickelt, die der knst- lichen Niere oder der Herz-Lungen-Maschine vergleichbar auerhalb des Krpers (extracorporal) arbeiten und hin- durchgepumptes Blut beziehungsweise Blutplasma von Abbauprodukten und Giftstoffen befreien. Ein System beruht auf der Reinigungsleistung von Albumin. Das Protein trans- portiert die Lebertoxine ab, die durch eine Membran aus dem Blut in eine Kammer mit der Albuminlsung diffundiert sind. Die Lsung durchluft ein Recycling durch ein Kolon- nensystem, in dem die Gifte vom Albumin getrennt werden, welches dann erneut Toxine aus dem Blut aufnehmen kann. Das Kreislaufsystem ist bereits auf dem Markt und wird von einem deutschen Unternehmen weltweit angeboten. Die Blutreinigung ist aber nur eine der Leistungen der Leber. Das Organ hat noch viele andere Aufgaben, zum Beispiel den Abbau von Biomoleklen. Wer knnte diese Aufgaben besser System zur Blutreinigung, knstliche Leber Dialyse 30 Nerven TISSUE ENGINEERING spiegel der Patienten erhht und einige Symptome waren verschwunden. Die Erkrankten waren aber nur scheinbar genesen, denn die Degeneration des Hirngewebes hatte sich nicht aufhalten lassen. Die Gesamtzahl der auf diese Weise behandelten Patienten kam daher ber 18 nicht hinaus. Bis vor wenigen Jahren galt das Dogma, dass sich neuronale Gewebe nach ihrer Bildung im Suglingsalter nicht mehr regenerieren knnen. Dann entdeckte man bei Musen und Ratten, spter auch bei Affen, dass sie durchaus in der Lage sind, abgestorbene oder entfernte Partien des Hirn-Nerven- gewebes zu ersetzen. In bestimmten Regionen des Mittel- hirns fand man schlielich neuronale Vorluferzellen auch beim Menschen. Die multipotenten Zellen bilden verschiede- ne Typen von Nervenzellen: Astrozyten, Neuronen und Oligo- dendrozyten (Glossar). Leider bereiten Kultivierung und gezielte Differenzierung dieser Zellen groe Probleme, die vor einem therapeutischen Einsatz gelst sein mssen. Zum Beispiel sind Blutgefzellen, genauer deren Endothelzellen, fr die gewnschte Ausdifferenzierung in Neuronen notwen- dig. Wie man die kultivierten Vorluferzellen gezielt in bestimmte Regionen des Zentralen Nervensystems (ZNS) lockt, um dort die richtig ausdifferenzierten Zelltypen in der richtigen Zahl und nur die richtigen Verknpfungen mit den richtigen Partnerzellen zu erhalten, sind noch ungelste Fragen. Vermutlich mssen auch je nach Krank- heit Kombinationen von Zellen aus unterschiedlichen Sta- dien verwendet werden. Die Regeneration von Nervengewebe durch embryonale Stammzellen wird ebenfalls intensiv untersucht. Neben den ethischen Aspekten sind auch bei embryonalen Stammzellen viele der bereits angesprochenen Fragen noch offen. Unter anderem bereitete die Neigung der Zellen Probleme, in Kul- Nerven Mit steigender Lebenserwartung in den Industrielndern bedrohen neurodegenerative Erkrankungen die Gesundheit der Bevlkerung. Altersdemenz (Morbus Alzheimer) und Morbus Parkinson stehen hier an erster Stelle. Allein in Deutschland sind rund 250.000 Menschen von Morbus Par- kinson betroffen. Hinzu kommen Suchtfolgeerscheinungen, Krebs, Multiple Sklerose und Verletzungen. Sehr selten treten auch Flle der Creutzfeldt-Jacob-Krankheit auf. Wegen feh- lender therapeutischer Optionen ist die Wiederherstellung neuronaler Gewebe mittels Stammzellen eine verlockende Perspektive. Das therapeutische Potenzial dieser Anstze ist schwer einzuschtzen. Noch sehr widersprchlich sind die bisherigen Forschungsergebnisse. Hufig folgen auf Erfolgs- meldungen unmittelbar widersprechende Verffentlichun- gen was einmal mehr zeigt, wie mhselig und zugleich spannend die biomedizinische Forschung ist. Bereits 1989 hatte man in Pionierversuchen in den USA Par- kinsonpatienten mittels ftaler Stammzellen behandelt. Bei der Krankheit sterben Gehirnzellen ab, die den Botenstoff Dopamin produzieren, der fr die Kommunikation zwischen den Nervenzellen wichtig ist. Die Folgen der Zerstrung sind unkontrolliertes Zittern und Lhmungserscheinungen. Vier Jahre nach der Zelltransplantation hatten sich die Dopamin- Neurale Vorluferzellen, die sich in vitro zu Gliazellen (grn) und Nervenzellen (rot) differenzieren. Blau: Zellkerne Nervengewebe 31 TISSUE ENGINEERING Nerven Funktionstchtigkeit und das Risiko der Entartung sind aber noch nicht ausgerumt. Von groem Interesse sind daher Versuche, in denen zu- nchst aus den embryonalen Stammzellen neuronale Stamm- und Vorluferzellen erzeugt werden. In Zellkulturen und in Tiermodellen zeigte sich bereits das Potenzial der so gezchteten Nervenvorluferzellen: Nach der Transplanta- tion in das Empfngergewebe integrierten sich die Vorlufer- zellen morphologisch und funktionell. Sie wanderten in ver- schiedene Hirnregionen ein, wo sie dann nicht nur selbst elektrisch aktiv wurden und Aktionspotenziale feuerten, son- dern auch Signale aus dem Empfngergehirn erhielten und verarbeiteten. Ein Ziel der auf Vorluferzellen basierenden Konzepte ist es, Epilepsie-Patienten zu therapieren. Regenerationspotenzial fr neuronale Gewebe vermutet tur bevorzugt Oligodendrozyten zu bilden. Die Kultivierung mit Wachstumsfaktoren auf einem Rasen von Nhrzellen (feeder cells) hat diese Verhltnisse verbessert. Dabei reicht es, einzelne embryonale Stammzellen in der Kulturschale zu vermehren und dann auf eine Grundlage aus bestimmten Bindegewebezellen (Stromazellen) zu schichten. Innerhalb weniger Tage entwickeln sich Dopamin-produzierende Zellen mit Neuronen-Morphologie. Viele Unklarheiten zum Beispiel ber die Stabilitt der erzeugten Nervenzellen', ihre man auch bei adulten hmatopoetischen Stammzellen (siehe Seite 10), die nach gegenwrtigem Forschungsstand in viele Gewebe transdifferenzieren knnen. Sie sind gut kultivierbar, was wichtig ist, um die fr therapeutische Zwecke meistens notwendigen Zellzahlen von mehr als fnf Milliarden zu er- reichen. Manche Wissenschaftler vermuten, dass Blutstamm- zellen natrlicherweise zur Reparatur aller Gewebe geeignet sind, Nervengewebe eingeschlossen. Dafr gibt es deutliche Hinweise: Amerikanische Forscher fanden bei drei Frauen sechs Jahre nach einer Knochenmarktransplantation Stamm- zellen im Gehirn, die Y-Chromosomen enthielten. Alle drei Patientinnen waren gegen Leukmie behandelt worden und hatten hmatopoetische Stammzellen aus dem peripheren Blut mnnlicher Spender erhalten. Da die Frauen keine Shne hatten, konnten diese als Quelle fr die Y-Chromosom-positi- ven Zellen ausgeschlossen werden. Menschliche mesenchy- male Stammzellen aus dem Knochenmark lieen sich auch in vitro in Nervenzellen verwandeln, die im Parkinson-Tiermo- dell nach der Transplantation ins Gehirn Krankheitssympto- me linderten. Japanische Forscher hatten dazu die Zellen mit einem Gen ausgestattet, das im Zusammenspiel mit einem Wachstumsfaktor die Entwicklung der Stammzellen zu Neu- ronen dirigierte. 32 Internationale Situation EMBRYONALE STAMMZELLEN dem Stichtag 1. Januar 2002 vorhanden waren. Weiterhin muss es sich bei den verwendeten Embryonen um berzhli- ge Embryonen handeln, und es durfte kein Entgelt fr die berlassung derselben gezahlt worden sein. Auerdem dr- fen die Forschungsarbeiten an diesen Zellen nur dann durch- gefhrt werden, wenn sie hochrangigen Forschungszielen dienen und sich der angestrebte Erkenntnisgewinn mit dem konkreten Forschungsprojekt voraussichtlich nur durch die Forschung an menschlichen embryonalen Stammzellen erreichen lsst. Bis zum Dezember 2004 wurden sieben sol- cher Genehmigungen erteilt. Mit dem Stammzellgesetz wurde ein Kompromiss gefunden, der die gegenlufigen moralischen Bewertungen und die unterschiedlichen Interessen respektiert und somit sicher- stellt, dass dieses wichtige Forschungsgebiet unter Beach- tung hoher ethischer Anforderungen auch in Deutschland weiterverfolgt werden kann. Einige Forscher beklagen aller- dings, dass die Qualitt der vor dem 1. Januar 2002 gewonne- nen Stammzelllinien fr manche Fragestellungen nicht aus- reiche und deshalb neue Linien gewonnen werden mssten. Weitere Einwnde richten sich in die Zukunft. Es sei fragwr- Der Einsatz von menschlichen embryonalen Stammzellen in Forschung und Therapie wird weltweit diskutiert und unter- schiedlich bewertet. Bereits die gesetzlichen Regulierungen der Stammzellforschung in den Lndern Europas decken ein breites Spektrum ab. In Deutschland ist die Gewinnung (Entnahme) von mensch- lichen embryonalen Stammzellen aus Embryonen verboten. Auch die Einfuhr und Ver- wendung von mensch- lichen embryonalen Stammzellen ist laut dem Gesetz zur Sicherstellung des Embryonenschutzes im Zusammenhang mit der Einfuhr und Verwen- dung menschlicher embryonaler Stammzel- len" vom 1. Juli 2002 (Stammzellengesetz) grundstzlich verboten und kann nur ausnahms- weise durch eine staatli- che Kontrollbehrde, das dem Gesundheitsministe- rium unterstellte Robert- Koch-Institut in Berlin, genehmigt werden. Eine der Voraussetzungen fr eine solche Genehmigung ist, dass die embryonalen Stammzellen bereits vor Embryonale Stammzellen die internationale Situation Gewinnung, Einfuhr und Forschung an embryonalen Stammzellen werden rechtlich weltweit sehr unter- schiedlich bewertet. Schon innerhalb der Europischen Union decken die gesetzlichen Bestimmungen ein breites Spektrum ab, eine endgltige Verstndigung ber die Forschung an embryonalen Stammzellen fehlt noch. Deutscher Bundestag 33 EMBRYONALE STAMMZELLEN Internationale Situation In der Schweiz regelt seit kurzem ein Bundesgesetz die For- schung an embryonalen Stammzellen (Stammzellenfor- schungsgesetz). Es erlaubt unter strengen Voraussetzungen, Stammzellen aus berzhligen Embryonen zu gewinnen und an diesen Zellen zu forschen. Es darf aber kein Embryo zu For- schungszwecken hergestellt werden. Die berzhligen Embryonen mssen aus der knstlichen Befruchtung stam- men. Die Ein- und Ausfuhr berzhliger Embryonen ber die Landesgrenze und der Handel mit berzhligen Embryonen oder embryonalen Stammzellen sind untersagt. Griechenland, Spanien, Finnland, die Niederlande und Schweden gestatten ebenfalls die Gewinnung von Stammzel- len aus berzhligen Embryonen. Belgien und Grobritan- nien haben die freizgigsten Regelungen bezglich der Stammzellforschung. In beiden Lndern ist es nicht nur er- laubt im Land selbst Stammzellen aus berzhligen Embryo- nen zu gewinnen. Es drfen auch menschliche Embryonen zur Erforschung von Therapien fr sehr schwere Krankheiten genutzt werden, die durch Zellkerntransfer hergestellt wur- den (therapeutisches Klonen). Allerdings muss in Grobritan- nien dafr eine Lizenz bei der British Human Fertilisation and Embryology Authority eingeholt werden. Bis zum Dezember 2004 wurde nur eine solche Lizenz, auf ein Jahr befristet, einem Forscherteam in Newcastle erteilt. Bei der EU-Frderung durch das 6. Forschungsrahmenpro- gramm sind zentrale bioethische Leitlinien fr die Finanzie- rung biowissenschaftlicher Forschungsarbeiten festgeschrie- ben. So werden Forschungsarbeiten zum reproduktiven Klonen, zur Keimbahnintervention und zur Zchtung menschlicher Embryonen zu Forschungszwecken einschlie- lich des therapeutischen Klonens nicht aus EU-Mitteln finan- ziert. Allerdings konnte auf EU-Ebene keine endgltige Ver- stndigung darber erzielt werden, wie man mit der dig, die vielleicht einmal verfgbaren auf embryonalen Stammzellen basierenden Therapieverfahren anzuwenden ohne auch die dazugehrenden problematischen ethischen Aspekte mitgetragen zu haben. Auch befrchtet man, dass diese Therapien mit hohen Lizenzgebhren verbunden sein werden, die dann aus dem deutschen Versicherungssystem ins Ausland abflieen werden. In ihrem am 28.07.2004 vorgelegten ersten Erfahrungsbe- richt ber die Durchfhrung des Stammzellgesetzes hat die Bundesregierung festgestellt, dass sich die Regelungen des Gesetzes bisher bewhrt haben. Die aufgrund des Stammzell- gesetzes verfgbaren humanen embryonalen Stammzellen sind fr die derzeitige Grundlagenforschung ausreichend geeignet. Wie bei allen Regelungen wissenschaftlicher Sach- verhalte muss aber die weitere wissenschaftliche Entwick- lung aufmerksam verfolgt und sorgfltig geprft werden, ob und inwieweit neue wissenschaftliche Ergebnisse, insbeson- dere neue Perspektiven fr die medizinische Therapie, in der Zukunft zu neuen Abwgungen fhren. Im internationalen Vergleich ist hinsichtlich Existenz und materiellem Gehalt vorhandener Regelungen beziehungs- weise etablierter Standards eine groe Heterogenitt festzu- stellen. Dennoch ist in den letzten Jahren eine zunehmende Tendenz zur Etablierung spezialgesetzlicher Normen fr diese Bereiche zu erkennen, die berwiegend unter bestimmten Voraussetzungen auch eine fremdntzige For- schung an menschlichen Embryonen zulassen. So ist zum Beispiel in Frankreich nach der im August 2004 in Kraft getretenen Novelle der Bioethik-Gesetze die Forschung an berzhligen Embryonen also auch die Gewinnung von Stammzellen und an embryonalen Zellen ausnahmsweise und fr einen Zeitraum von fnf Jahren unter bestimmten Voraussetzungen nach Genehmigung durch eine zentrale staatliche Behrde zulssig. Die Einfuhr embryonaler Zellen und Gewebe zu Forschungszwecken ist nach Genehmigung durch die Behrde ebenfalls zulssig. Stammzelllabor in Korea Stammzell-Unternehmen in Korea 34 Internationale Situation EMBRYONALE STAMMZELLEN embryonalen Stammzellforschung umgeht. Denn nach den geltenden Regelungen knnen mit EU-Mitteln alle aktuell verfgbaren embryonalen Stammzelllinien in Forschungs- projekten verwandt werden ohne dabei einen bestimmten Stichtag bercksichtigen zu mssen, bis zu dem die Stamm- zellen erzeugt wurde, wie von Deutschland mit anderen Mit- gliedstaaten in den Verhandlungen gefordert. Doch hat das Kabinett der alten EU-Kommission im Februar 2004 in Ergn- zung zu den rechtlich bindenden Vorgaben intern beschlos- sen, die Gewinnung von Stammzellen aus berzhligen Embryonen ebenfalls nicht mit EU-Mitteln zu frdern. Ein Antrag auf Forschungsfrderung durch die EU muss zunchst einer wissenschaftlichen Gutachterkommission vorgelegt werden. Daraufhin wird er von einer Ethik-Kom- mission bewertet, bevor er dem Programmausschuss der EU zur Frderung vorgeschlagen wird. Ob ein solcher Antrag angenommen wird oder nicht, darauf knnen die Mitglieds- staaten Einfluss nehmen, die gegebenenfalls mit einer quali- fizierten Mehrheit die Frderung eines Projektes letztlich unterbinden knnen. Die Antragsteller mssen sich bei der Durchfhrung der Projekte an die in ihrem Land jeweils gel- tenden Gesetze halten. Bis Dezember 2004 sind von der EU zwei Projekte mit menschlichen embryonalen Stammzellen zur Frderung bewilligt worden. In beiden Projekten wird mit Stammzellen gearbeitet, die vor dem deutschen Stichtag gewonnen wurden. Auch mit Blick auf das therapeutische Klonen, also die Her- stellung eines geklonten menschlichen Embryos zum Zweck der Stammzellgewinnung, hat sich Deutschland mit den meisten anderen europischen Lndern wie zum Beispiel Frankreich, Italien, Schweiz und Norwegen, fr ein generel- les Verbot entschieden. In Grobritannien und Belgien ist hingegen das therapeutische Klonen unter Auflagen erlaubt; damit vergleichbare Regelungen gelten auch in Israel, China und Singapur. In den USA gibt es keine einheitliche bundes- staatliche gesetzliche Regelung. Das therapeutische Klonen ist in einigen Bundesstaaten erlaubt, in anderen verboten. Aus Bundesmitteln ist eine Frderung der Embryonenfor- schung nicht zulssig; bezglich der embryonalen Stamm- zellforschung hat Prsident Bush am 09.08.2001 entschieden, dass aus Bundesmitteln nur solche Stammzellforschung gefrdert werden darf, bei der mit embryonalen Stammzel- len gearbeitet wird, die aus berzhligen Embryonen vor dem 09.08.2001 gewonnen wurden. Die frderfhigen Stammzelllinien sind in einem Register der NIH aufgelistet. Der US-Bundesstaat Kalifornien beschloss im November 2004 eine Initiative zur Frderung der Stammzellforschung, fr die in den kommenden zehn Jahren drei Mrd. US$ zur Verf- gung stehen werden, hnliche Initiativen gibt es auch in anderen Bundesstaaten. Gesetz zur Sicherstellung des Embryonenschutzes im Zusam- menhang mit Einfuhr und Ver- wendung menschlicher embryo- naler Stammzellen (Stammzellgesetz) StZG vom 28. Juni 2002 4 Einfuhr und Verwendung embryona- ler Stammzellen (1) Die Einfuhr und die Verwendung embryona- ler Stammzellen ist verboten. (2) Abweichend von Absatz 1 sind die Einfuhr und die Verwendung embryonaler Stammzellen zu Forschungszwecken unter den in 6 genannten Voraussetzungen zulssig, wenn 1. zur berzeugung der Genehmigungsbehrde feststeht, dass a) die embryonalen Stammzellen in berein- stimmung mit der Rechtslage im Herkunfts- land dort vor dem 1. Januar 2002 gewonnen wurden und in Kultur gehalten werden oder im Anschluss daran kryokonserviert gelagert wer- den (embryonale Stammzell-Linie), b) die Embryonen, aus denen sie gewonnen wurden, im Wege der medizinisch untersttz- ten extrakorporalen Befruchtung zum Zwecke der Herbeifhrung einer Schwangerschaft erzeugt worden sind, sie endgltig nicht mehr fr diesen Zweck verwendet wurden und keine Anhaltspunkte dafr vorliegen, dass dies aus Grnden erfolgte, die an den Embryonen selbst liegen, c) fr die berlassung der Embryonen zur Stammzellgewinnung kein Entgelt oder sonsti- ger geldwerter Vorteil gewhrt oder verspro- chen wurde und 2. der Einfuhr oder Verwendung der embryona- len Stammzellen sonstige gesetzliche Vorschrif- ten, insbesondere solche des Embryonen- schutzgesetzes, nicht entgegenstehen. (3) Die Genehmigung ist zu versagen, wenn die Gewinnung der embryonalen Stammzellen offensichtlich im Widerspruch zu tragenden Grundstzen der deutschen Rechtsordnung erfolgt ist. Die Versagung kann nicht damit begrndet werden, dass die Stammzellen aus menschlichen Embryonen gewonnen wurden. 35 FRDERAKTIVITTEN Frderung des Fort schrit t s Bercksichtigung des Themas Regenerative Medizin im kom- menden 7. EU-Forschungsrahmenprogramm (2006-2010) vorgeschlagen. In Deutschland untersttzten die Bundesregierung und eini- ge Lnder Forschungsprojekte und Initiativen im Bereich der Regenerativen Medizin. Der Beitrag aus der molekularbiolo- gischen Grundlagenforschung wird hauptschlich ber die Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) und die Max- Planck-Gesellschaft (MPG) aus Mitteln des Bundesministeri- ums fr Bildung und Forschung (BMBF) finanziert. Anwen- dungsnhere Fragestellungen der Regenerativen Medizin bearbeiten auch Institute der Helmholtz-Gemeinschaft Deut- scher Forschungszentren (HGF) und der Fraunhofer-Gesell- schaft (FhG). Das Bundesministerium fr Bildung und Forschung (BMBF) frdert die Umsetzung innovativer Forschungsergebnisse in medizinische Produkte oder Verfahren. Die Frderung soll dazu beitragen, den Weg von der Grundlagenforschung in die medizinische Anwendung zu beschleunigen. Die dafr notwendige enge Kooperation zwischen akademischen, industriellen und klinischen Partnern wird durch mage- schneiderte Programme untersttzt: Verbundprojekte im Schwerpunkt Tissue Engineering des BMBF-Frderpro- gramms Biotechnologie ebenso wie die Vorhaben in den Schwerpunkten Biologischer Organfunktionsersatz und Zellbasierte regenerative Medizin des Gesundheitsfor- schungsprogramms. ber das BMBF-Gesundheitsforschungs- programm werden auch Kompetenzzentren fr Medizin- technik finanziert, die interdisziplinr Projekte aus der Regenerativen Medizin bearbeiten. Das Thema findet sich auerdem in zueinander komplementren Programmen zur Zusammenarbeit in der klinischen Forschung, zur Unterstt- zung von jungen Unternehmen (BioChancePLUS und in der Profilbildung der Bioregionen) und zur Frderung von wissenschaftlichem Nachwuchs. Nicht zuletzt dank dieser Manahmen sind rund 40 kleine und mittlere Unternehmen (KMU) entstanden, die im Tissue-Engineering-Sektor aktiv sind und Arbeitspltze fr hochqualifizierte Mitarbeiter bieten. Die Regenerative Medizin befindet sich berwiegend im Sta- dium der Grundlagenforschung. Erst wenige Entwicklungen aus dem Tissue Engineering sind bis zur kommerziellen Anwendung gereift. Der Weg zum Markt ist lang, riskant und kostspielig. In dieser typischen Frhphase einer Hochtechno- logie kommt es entscheidend auf die Untersttzung auch aus ffentlichen Quellen an. Forschung ist eine gesamtgesell- schaftliche Investition. Eine positive Bilanz kann man oft erst nach Jahrzehnten ziehen, wenn neue Technologien und engagiertes Unternehmertum prosperierende Industrien hervorgebracht haben, die meistens auch eine gesunde Peri- pherie von Zulieferern und Dienstleistern umgibt. Computer- industrie, Maschinen- und Flugzeugbau, die der Halbleiter- technik und der Materialforschung wesentliche Impulse verdanken, sind hier Paradebeispiele. hnlich verhlt es sich mit der Pharmaindustrie, wo die Gentechnik fr Nachschub an Innovationen sorgt Stichwort Insulin. Abgesehen von den positiven Wirkungen auf Produktivitt, Arbeitsmarkt und damit fr den Wohlstand einer Gesell- schaft, fllt beim medizinischen Fortschritt auch ein hoher Gewinn an Lebensqualitt und -jahren ins Gewicht. Hier kann die Regenerative Medizin entscheidende Beitrge leisten. In vielen Industrielndern gibt es deshalb Programme zur Fr- derung der Forschung auf diesem Gebiet. Die Vereinigten Staaten, Grobritannien, Frankreich, Schweden aber auch China und Sdkorea investieren groe Summen. China und Sdkorea setzten dabei besonders auf die Stammzellfor- schung, die dort an einzelnen Zentren konzentriert ist. Der internationale Wettbewerb zwingt auch die Mitgliedstaaten der EU zu greren gemeinsamen Anstrengungen. Deutsch- land und andere Mitgliedstaaten haben deshalb die strkere Nationale und internationale Frderaktivitten Einige Industrielnder investieren bereits groe Summen in die Entwicklung der Regenerativen Medizin. In Asien setzt man besonders auf die Stammzellforschung. Die Bundesregierung und einige Bundeslnder frdern die Grundlagenforschung und die Umsetzung ihrer Ergeb- nisse in medizinische Produkte und Verfahren. 36 ZULASSUNG VON TE-PRODUKTEN dig. In die CBER-Zustndigkeit fallen Gewebetransplantate und Xenotransplantate aber keine humanen Organe. Auch Tissue-Engineering-Produkte der dritten Generation", die zum Beispiel Zytokine aus bioaktiven Matrices sekretieren, werden vom CBER geprft. Unter CDRH-Zustndigkeit fallen zum Beispiel Herzschrittmacher, Kontaktlinsen und Medika- mentenpumpen. Die zwei FDA-Einheiten haben eine tissue reference group eingerichtet. In der gegenwrtigen Umstrukturierung der FDA zeichnet sich folgende Produkt- klassifizierung ab: Gewebe fr Transplantationen einerseits und Zell- und Gewebebasierte Produkte (C&TPs) andererseits. Letztere bereiten aber immer noch Probleme bei der Zuord- nung. Nach der 'FDA Modernisation Act 2002' wird es ein Office of Combination Products geben, das in Kooperation mit den Antragstellern fr eine Einteilung mit interagency consistency sorgen soll. Richtlinien fr good tissue practice sind in Vorbereitung. In Europa sind Tissue-Engineering-Produkte bislang in den EU-Mitgliedstaaten nach jeweils unterschiedlichen Verfah- ren zugelassen worden. Ein consultation paper der EU- Kommission fr einen harmonisierten Rechtsrahmen fr Tissue-Engineering-Produkte vom 6. April 2004 schlgt die knftig zentralisierte Zulassung von allogenen Tissue-Engi- neering-Produkten durch die europische Zulassungsbehr- de EMEA vor, wobei autologe Gewebeprodukte weiterhin unter nationale Zulassung fallen wrden. Produkte tieri- schen Ursprungs und Produkte fr die somatische Zellthera- pie sind in die Regelungen nicht eingeschlossen. Die EU liee nach dem genannten Vorschlagspapier Tissue-Engineering- Produkte, die rekombinante Proteine enthielten, als Medizin- produkte zu, sofern das Protein nur Hilfsfunktion hat. In Deutschland bedrfen autologe Produkte nur einer Herstel- lungserlaubnis nach dem Arzneimittelgesetz (AMG). Darber hinaus verlangen Krankenkassen klinische Studien als Wirk- samkeits- und Kosteneffizienznachweis, bevor mglicher- weise eine Kostenerstattung in Frage kommt (siehe Seite 42). In den USA waren Ende 2004 fnf Tissue-Engineering-Pro- dukte zugelassen, eines davon als medical device und vier als biologics. In der EU waren zum gleichen Zeitpunkt 20 Haut- ersatz- (davon 15 autologe), 15 Knorpelersatz- (alle autolog), und zwei autologe Knochenersatzprodukte auf dem Markt. In Japan gab es 18 Tissue-Engineering-Unternehmen, aber noch kein Tissue-Engineering-Produkt auf dem Markt. In Korea waren zwei Produkte auf dem Markt. Ein groes Hindernis fr die erfolgreiche Vermarktung von Tissue-Engineering-Produkten bleibt die unbersichtliche Regulierung der Zulassung sowohl in den USA als auch in der EU. Sie ist auch auf die schwierige Eingruppierung in bereits regulierte Produktklassen zurckzufhren, da Tissue-Engi- neering-Produkte gleichzeitig Charakteristika von Trans- plantaten, Biopharmazeutika (biologics) und Medizinpro- dukten (medical devices) aufweisen knnen. Bei der amerikanischen FDA sind zur Zeit sowohl das Center for Biologics Evaluation and Research (CBER) als auch das Center for Devices and Radiological Health (CDRH) zustn- Die Zulassung von Tissue-Engineering- Produkten Die Zulassung von Tissue-Engineering-Produkten ist welt- weit sehr uneinheitlich geregelt. Dabei ergeben sich aus ihrem Hybridcharakter einerseits medizintechnisches Gert wegen der Trgermaterialien, andererseits Medi- kament auf Grund der therapeutisch aktiven Zellen und Wachstumsfaktoren oft Klassifizierungsprobleme. FDA-Website 37 ZULASSUNG VON TE-PRODUKTEN Fallbeispiel Fallbeispiel fr die Zulassung eines TE-Produkts Das Produkt: Matrix-P-xenogene Pulmonalklappe vom Schwein. Es handelt sich um Schweinepulmonalklappen, die in einem patentierten Verfahren vollstndig von lebenden Zellen und Erb- material befreit wurden, um bei operativen Eingriffen entnommene oder angeboren missgebildete Pulmonalklappen physio- logisch zu ersetzen. Das Verfahren Zertifizierung: Das Produkt ist in der EU als Medizinprodukt zugelassen. Zustndig als bergeordnete Behrde ist das deut- sche Bundesinstitut fr Arzneimittel und Medizinprodukte (BfArM) in Bonn. Die Zertifizierung selbst erfolgte ber eine benannte Stelle; in diesem Fall durch den TV Rheinland. Voraussetzung der Zulassung war ein validiertes Sterilisationsver- fahren bei der Herstellung des Produktes. Validierung: Ein Labor fr Funktions- und Sicherheitsprfungen fr Medizinprodukte", welches von der Zentralstelle der Lnder fr Gesundheitsschutz bei Arzneimitteln und Medizinprodukten (ZLG) akkreditiert ist, bernahm die Validierung. Die umfangreiche technische Dokumentation des Produktes sowie seiner Herstellung wurde schlielich abgenommen. Die anmeldende Firma musste unter anderem das Vorhandensein eines Qualittsmanagements gem DIN EN ISO 9001:2000 sowie den besonderen Anforderungen fr Medizinprodukte nach DIN EN ISO 13485:2000(2003) nachweisen, um die gesetz- lichen Voraussetzungen des Medizinproduktegesetzes (MPG) zu erfllen. Zulassung: CE-Zertifikate sind EU-weit gltig, mssen aber vom Vertreiber im jeweiligen Mitgliedstaat angemeldet werden. Die Zulassungsprozess dauerte nur zwei Jahre und erforderte externe Dienstleistungen durch Beratungsgesellschaften. Allein die Validierung des Sterilisationsverfahrens kostete einen fnfstelligen Betrag. Fr die Einrichtung des Qualittsmanagements wurde eine ganze Personalstelle fr etwa eineinhalb Jahre bentigt. Gegenwrtig laufen Marketing-Aktivitten des Unternehmens, das Produkt ist in einer Groklinik bereits im Einsatz. unbedingt beachtet und so weit als mglich ausgeschlossen werden mssen. Zum anderen wird aber auch die Erfllung von Erwartungen eingefordert, wenn Patienten mit TE-Produkten behandelt werden. Dazu zhlen die Therapiemglichkeit von bisher nicht oder nur unbefriedigend behandelbaren Erkrankun- gen (zum Beispiel Ersatz von Herzmuskelgewebe nach einem Infarkt), die im Gegensatz zu Organen fr eine Transplanta- tion zeitgerechte und nicht eingeschrnkte Verfgbarkeit von solchen Produkten oder auch die Verbesserung der Ver- trglichkeit einer Behandlung, zum Beispiel die Vermeidung einer lebenslangen Therapie gegen eine mgliche Absto- ung. WORIN UNTERSCHEIDEN SICH MIT BLICK AUF DIE ZULASSUNG IN DEUTSCHLAND TISSUE-ENGINEERING- PRODUKTE VON MEDIKAMENTEN? Entsprechend den Definitionen des Arzneimittelgesetzes zhlen TE-Produkte in Deutschland derzeit zu den Arzneimit- teln. Mit Blick auf die Zulassung gelten fr diese Produkte somit dieselben Regeln wie fr Medikamente. Je nachdem welcher Zelltyp bei der Herstellung von TE-Produkten ver- wendet wird handelt es sich um ein Individualarzneimittel oder um ein Fertigarzneimittel. So gibt es TE-Produkte, deren Grundlage Zellen sind, die ent- weder vom Empfnger eines TE-Produkts selbst stammen (autologe Zellen) oder in Kenntnis des zuknftigen Empfn- gers einem geeigneten Spender entnommen wurden (gerich- tete allogene Zellen). Die mit solchen Zellen produzierten TE- Produkte werden individuell fr einen Patienten hergestellt, sind also Individualarzneimittel und brauchen nach dem Arzneimittelgesetz keine Zulassung fr den therapeutischen Einsatz. Auerdem gibt es TE-Produkte, die mit humanen (allogenen) oder nicht humanen (xenogenen) Zellen sozusagen auf Vor- rat (ohne Kenntnis von Empfngermerkmalen) hergestellt werden. Diese Produkte entsprechen der Definition eines Fer- tigarzneimittels nach dem Arzneimittelgesetz. In diesem Fall mssen die Produkte vor ihrem therapeutischen Einsatz zugelassen werden und dabei smtliche zulassungsrelevan- ten Anforderungen erfllen wie andere Arzneimittel auch. Unabhngig davon, ob ein TE-Produkt fr den therapeuti- schen Einsatz eine Zulassung bentigt oder nicht, muss der Hersteller eine Herstellungserlaubnis von Seiten der berwa- chungsbehrden einholen. Damit ist sichergestellt, dass das TE- Produkt nach den Regeln der Guten Herstellungspraxis (good manufacturing practice, GMP) produziert wird und ein grtmgliches Ma an Qualitt und Sicherheit fr den Patienten gewhrleistet ist. Der gesetzliche Status von TE-Produkten wird sich voraus- sichtlich noch im Jahr 2005 ndern. Derzeit wird von der Prof. Dr. Christoph Gleiter, Geschftsfhrer des Koordinierungszentrums Klinische Studien am Universittsklinikum Tbingen Das Koordinierungszentrum Klinische Studien am Universi- ttsklinikum Tbingen (KKS-UKT gGmbH) wurde im Jahr 2000 als Tochtergesellschaft des Universittsklinikums Tbin- gen gegrndet. Das Unternehmen wird vom Bundesministe- rium fr Bildung und Forschung (BMBF) und dem Land Baden-Wrttemberg untersttzt. Die Frderer haben das Ziel, durch strukturelle Manahmen an den Hochschulen die Qualitt klinischer Forschung zu verbessern. Die KKS-UKT gGmbH schafft bei Planung, Vorbereitung, Durchfhrung und Auswertung von multizentrischen klinischen Studien die Vor- aussetzungen fr die Einhaltung internationaler Standards wie etwa den Good Clinical Practice"-Leitlinien (GCP-ICH). WELCHE ANFORDERUNGEN STELLEN MEDIZINER AN TISSUE-ENGINEERING- PRODUKTE? Zum einen handelt es sich um grundlegende Forderungen in Bezug auf Qualitt und Sicherheit der verwendeten TE-Pro- dukte. Produktversagen, produktbedingte Infektionen oder auch Entartung der im Produkt verwendeten Zellen sind mgliche Risiken bei einer Therapie mit TE-Produkten, die Interview mit Prof. Gleiter 38 INTERVIEW WO SEHEN SIE DIE GRTEN HINDER- NISSE FR DEN ERFOLG DER REGENE- RATIVEN MEDIZIN? Die Herstellung und der Einsatz von innovativen, regene- rativen Produkten verursachen hohe Kosten. Einsparungen gegenber den etablierten Therapien durch Langzeiteffekte sind bisher nicht nachgewiesen worden. Aussagekrftige kli- nische Daten, die die Wirksamkeit und Sicherheit/Vertrg- lichkeit der Produkte belegen, stehen oftmals noch nicht in ausreichendem Umfang zur Verfgung. In der Folge werden die Kosten einer solchen Behandlung durch Selbstzahler und in Ausnahmefllen durch private Krankenversicherungen erstattet, nicht jedoch durch die gesetzlichen Krankenversi- cherungen. Die Kostenerstattung fr die Entwicklung und Herstellung ist somit unzureichend. Zweitens besteht auf Seiten der Patienten und zum Teil auch der rzte ein Informa- tionsdefizit ber die Mglichkeiten der Be- handlung mit innovativen regenerativen Produkten, weshalb auch keine ausreichen- de Nachfrage nach solchen Behandlungen entsteht. Hinzu kommt, dass diese Produkte, weil sie momentan durch die nationale Gesetzge- bung geregelt sind, nicht unmittelbar auch europaweit angeboten werden knnen. Der Kreis potenzieller Patienten ist dadurch recht klein, fr eine internationale Vermarktung entstehen hohe Zusatzkosten durch Zulassung in jedem Land. WAS KNNTE MAN VERBESSERN? Ein wichtige Manahme zur berwindung dieser Hinder- nisse wren mehr valide klinische Studien mit aussagekrfti- gen und berprfbaren Ergebnissen zur Wirksamkeit einer Behandlung und zu ihrem Kosten-/Nutzenverhltnis. Dies ist primr die Aufgabe der Hersteller der Produkte, die aber hufig auf Untersttzung angewiesen sind, da es sich um kleinere Firmen handelt. Daneben sind auch Studien, durch- gefhrt von unabhngigen Dritten, sehr wnschenswert, um aus einer neutralen Position zu untersuchen, ob der Ein- satz von innovativen regenerativen Produkten eine langfris- tige Verbesserung der Patientenversorgung bringt. Auch die anstehende, europaweit einheitliche rechtliche Behandlung von innovativen, regenerativen Produkten kann den Erfolg der Regenerativen Medizin untersttzen. Dann knnten solche Produkte in ganz Europa angeboten werden. Europischen Kommission eine Verordnung vorbereitet, mit der TE-Produkte als Produktgruppe sui generis (Lex specialis) direkt der europischen Gesetzgebung unterstellt werden. Damit wird der spezifischen Wirkungsweise von TE-Produk- ten entsprochen, die mit einer im wesentlichen struktur- und funktionsorientierten Wirkung sich von Arzneimitteln mit pharmakologischer, immunologischer oder metabolischer Hauptwirkung abgrenzen lassen WELCHE ANTWORTEN SOLLEN DIE KLI- NISCHEN STUDIEN VON TE-PRODUKTEN LIEFERN? Klinische Studien zum Ersteinsatz von TE-Produkten am Men- schen liefern Erkenntnisse zur Durchfhrbarkeit der Behand- lung mit dem Produkt beziehungsweise zur Sicherheit und Vertrglichkeit der Behandlung und ent- sprechen damit den Phase-I-Studien der Arzneimittelentwicklung. Im Hinblick auf den regenerativen Charakter von TE-Pro- dukten sind die Studienteilnehmer aller- dings ausschlielich Patienten. Grundlegende Aussagen zur Wirkung und wiederum zur Sicherheit/Vertrglichkeit werden in klinischen Studien gewonnen, in denen die Therapie mit einem TE-Produkt mit einer etablierten Kontrolltherapie verglichen wird. In der Arzneimittelentwicklung sind dies Studien der Phase II. Den statistischen Beweis der Wirksamkeit und der Sicherheit beziehungsweise Vertrglichkeit der Behandlung mit einem TE-Produkt liefern prospektive, kontrollierte klinische Stu- dien mit zuflliger (randomisierter) Zuteilung der Patienten in zwei Behandlungsgruppen sowie einer statistischen Abschtzung der Anzahl notwendiger Studienteilnehmer. Die Behandlungsgruppen sind einmal Patienten, die mit einem TE-Produkt behandelt werden, und Patienten, die eine etablierte Kontrolltherapie erhalten. Diese Studien entspre- chen den Phase-III-Studien bei der Prfung von Arzneimit- teln. Klinische Studien mit TE-Produkten liefern somit im wesentlichen dieselben Ergebnisse wie Studien mit etablier- ten Therapien, zum Beispiel Arzneimittelstudien. TE-Produkte werden erst seit wenigen Jahren in der Therapie klinisch eingesetzt. Aus diesem Grund knnen Langzeiter- gebnisse in wesentlichem Umfang erst in einigen Jahren erwartet werden. WAS BRINGEN SOLCHE LANGZEITSTU- DIEN, SOWOHL BEI ARZNEIMITTELN ALS AUCH BEI TE-PRODUKTEN? Solche Studien knnen ber den dauerhaften Erfolg einer Behandlung wichtige Aussagen machen, damit auch ber die Kosten-Nutzen-Relation eines solchen Therapieprinzips. Langzeitergebnisse in wesentlichem Umfang knnen erst in einigen Jahren erwartet werden. 39 INTERVIEW 40 Die Zukunf t hat schon begonnen REGENERATIVE MEDIZIN renzierung von Stammzellen im Knochenmark Verfahren zur Zchtung empfngerkompatibler mesenchymaler (Glos- sar) Stammzellen mglich werden, die dann in Zellbanken vorgehalten werden knnen. Ausgangspunkt von Regenerations- und Reparaturprozessen sind oftmals Stammzellen. Auf sie richten sich viele Hoffnun- gen der Regenerativen Medizin. Die Erforschung ihrer Fhig- keiten steht, wie in den vorangehenden Kapiteln ausfhrlich dargestellt, noch ganz am Anfang. Hier sind aber die Zukunftsperspektiven klar: Viel Forschung! Unzhlige Fra- gen sind noch zu klren, denn die Experimente liefern oft noch widersprchliche Resultate. Hufig ist die Herkunft der beteiligten Zellen umstritten. Sind es seltene gewebetypische Stammzellen, sind sie sogar pluripotent? Sind Vorluferzel- len beteiligt? Entstanden sie durch Rckdifferenzierung aus den Gewebezellen? Oder waren eingewanderte Blutstamm- zellen verantwortlich? Manche Gewebetypen kann man offensichtlich in vivo nur durch den Kontakt mit anderen Zel- len aus Stammzellen zchten. Bei anderen Geweben, zum Beispiel Nerven, ist man fr die Regenerierung mglicher- weise auf die pluripotenten embryonalen Stammzellen ange- wiesen. ber diese wei man ebenfalls noch wenig, sie sind erst seit 1998 in vitro kultivierbar. In vivo lassen sie sich oft durch den Transfer in das Zielgewe- be zur Differenzierung stimulieren. Oftmals erinnern die Ver- fahren, mit denen undifferenzierte Stammzellen in vitro zur Ausdifferenzierung in Gewebezellen veranlasst werden, an schlichtes Ausprobieren. Zu wenig versteht man derzeit das Zusammenspiel der an der Kommunikation beteiligten Part- ner. Hier kommt es auf Wachstumsfaktoren an, die in exakten Konzentrationen einzeln oder als Cocktails in pr- zise getimten Schritten zu den Kulturen gegeben wer- den mssen, auf Teppiche von Ftterzellen (feeder cells), die als Grundlage vorhanden sein mssen und auf die blichen Randbedingungen von Nhrstoffkonzentratio- nen, Belftung und Temperaturprofilen und so weiter. Besondere Beachtung, in erster Linie bei embryonalen Stammzellen, verdient angesichts des Potenzials zur un- begrenzten Teilung das Risiko der Entartung in Tumor- Regenerative Medizin die Zukunft hat schon begonnen In unmittelbarer Zukunft erwarten Wissenschaftler Fort- schritte bei bereits etablierten Therapien. Zum Beispiel beim Hautersatz. Bislang erfllte die gezchtete Haut im Wesent- lichen ihre Aufgabe als Barriere zur Abschirmung des Gewe- bes von der Umgebung. Weiteren Anforderungen, unter anderem an Elastizitt, Narbenfreiheit, Haarwuchs und Fet- tung gengte sie nicht. Nun sind Hautersatzprodukte in der Entwicklung, die das Potenzial von Vorluferzellen nutzen, um funktionstchtige Ersatzhaut zu bilden. In geeigneter Abfolge und Schichtung aufgebracht, lassen sich die Zellen durch Wachstumsfaktoren zur Bildung von verschiedenen Zelltypen, zum Beispiel von Haar- und Fettzellen, anregen und ergeben schlielich einen Aufbau, der dem der natr- lichen Haut nahe kommt. Ein anderes Beispiel ist die Knochenmarktransplantation. Hier erwartet man, dass durch das Verstndnis der Ausdiffe- Gegenwrtig steht die Erforschung der erstaunlichen Fhigkeiten von (Stamm-)zellen bei Reparatur- und Hei- lungsprozessen im Vordergrund, aber auch noch ganz am Anfang. Die Vision, einmal ganze Organe regenerieren zu knnen, gehrt in die sehr ferne Zukunft. Dass sie im Tier- reich lngst Realitt ist, motiviert die Forscher jedoch. Ultimatives Ziel der Regenerativen Medizin ist es, ausge- fallene Gewebe und Organe, ja ganze Krperteile komplett zu ersetzen 41 REGENERATIVE MEDIZIN Die Zukunf t hat schon begonnen schwierig und viel ist noch ber die komplizierte Kommuni- kation zwischen den Zellen zu lernen, mit der die dafr not- wendigen Signale zur Teilung, Zellwanderung, Ausdifferen- zierung, Apoptose und so weiter ausgetauscht werden. Wenn die molekulare Identitt der Botenstoffe bekannt ist, kann man untersuchen, ob menschliche Zellen die gleichen Signale erkennen. Unwahrscheinlich ist es nicht, dass die Reparaturmechanismen alte Erfindungen der Natur sind, so dass sie auch bei Menschen und Sugetieren ablaufen knn- ten, die sie im Laufe der 350 Millionen Jahren seit der Tren- nung der gemeinsamen Vorfahren aufgegeben haben. Die Dresdner Forscher fanden bereits heraus, dass die Blutgerin- nung den Startschuss fr die Regeneration des verletzten Gewebes gibt, wobei ein Hormon freigesetzt wird, dass Repa- raturzellen zum Ort der Verletzung lockt. Die wichtigste Quelle fr neue Einblicke in die Reparaturme- chanismen ist die Entwicklungsbiologie. Sowohl bei der Ent- wicklung von Organismen als auch aus Entartungsprozessen kann man viel ber die Bildung von Geweben und ihre Hei- lung lernen. Experimente der Entwicklungsbiologen deuten zum Beispiel darauf hin, dass embryonale Zellen bereits sehr frh, das heit schon ab dem 10.000-Zellstadium wissen zu welchem Organ sie spter gehren werden ihre Rolle ist bereits festgelegt. Die frhe Programmierung knnte auch erklren, warum die Regenerationsfhigkeit von vielen Gewebetypen hherer Tierarten begrenzt ist und warum man bei ausgewachsenen Sugern sogar Signalstoffe findet, die die Neubildung von Nervengewebe unterdrcken. Viel versprechend ist die Forschung an Entwicklungsprozes- sen, die in spten Phasen stattfinden. Zum Beispiel die Zahn- bildung. Sie ist im Organismus genetisch angelegt, wird aber erst in spteren Stadien der Entwicklung gestartet. Das exak- te Zusammenspiel vieler Faktoren in der Mikroumgebung des Kieferknochens, von Zellpopulationen und Zell-Zell-Kon- zellen. Stammzellforschung und Entwicklungsbiologie lie- fern kontinuierlich neue Einsichten in diese beraus komple- xen Prozesse. Stck fr Stck fgt sich das immense Puzzle zu einem immer deutlicheren Bild zusammen und die moder- nen Methoden der Genom- und Proteomforschung sorgen hier fr groen Schub. Die bereits skizzierte intensive biome- dizinische Forschung zur Regeneration von Geweben und Organen profitiert unmittelbar von dieser Grundlagenfor- schung. Ultimatives Ziel der Regenerativen Medizin ist es, ausge- fallene Gewebe und Organe, ja ganze Krperteile komplett zu ersetzen. Von diesem Ziel ist die Medizin heute noch weit entfernt. Unerreichbar ist es jedoch keineswegs. Die bereits erwhnte Regerationsfhigkeit unserer Leber und die stetige Neubildung von Blutzellen untersttzen diese Annahme und die Natur liefert zahlreiche beeindruckende Beispiele. Wer hat nicht selbst schon in kleinkindlichem Forscherdrang Regenwrmer zerteilt? Meistens ohne zu ahnen, dass einige der Teile wieder zu kompletten Tieren regenerieren knnen. Auch weiter aufwrts im Stammbaum der Evolution, bei Schneckenarten und Weichtieren, findet man Arten, die groe Krperteile ersetzen knnen. Noch eindrucksvoller sind die Beispiele unter den Wirbeltieren: Haifische, denen ausgefallene Zhne whrend des gesamten Lebens nach- wachsen oder Eidechsen, die ihren Verfolgern den winden- den Schwanz als Beute berlassen und heil davonkommen. Besonderer Aufmerksamkeit der Forscher erfreut sich zur Zeit ein urtmlich aussehendes Amphibium, der Axolotl aus dem Xochimilco-See in Mexiko. Der Lurch verblfft mit der Fhigkeit, abgetrennte Gliedmaen, Augen, sogar Teile des Herzens komplett regenerieren zu knnen. Am Max-Planck- Institut fr molekulare Zellbiologie und Genetik in Dresden versucht man intensiv, dieses Geheimnis zu lften, um sie dereinst fr die Medizin zu nutzen. Die Aufgabe ist sehr Durchsichtig wie Glas erscheint der Schwanz eines jungen Axo- lotl beim Blick durch ein Mikroskop. Gut ist sichtbar ist die Seg- mentierung des knorpelartigen Rckgrats Axolotl 42 Die Zukunf t hat schon begonnen REGENERATIVE MEDIZIN reine Zukunftsmusik. Die bereits auf dem Markt befindlichen Produkte zum Haut- und Knorpelersatz haben es schwer. Hier gibt es geringere Fallzahlen und Marktvolumina und zudem starke Konkurrenz durch etablierte Verfahren. Es muss noch berzeugungsarbeit geleistet werden. Warum sollte ein orthopdischer Chirurg ber gezchteten Knorpel- ersatz nachdenken, wenn er knstliche Gelenke einbauen kann? Warum autologe Herzklappen einbauen, wenn es doch mechanische gibt? Weshalb sollten Herzchirurgen Stammzelltherapien zur Behandlung von Arhythmien erw- gen, wenn doch Herzschrittmacher zur Verfgung stehen? Die offensichtlichen Vorteile dieser Innovationen liegen nicht immer in der unmittelbaren Anwendung. Erst ihr lang- fristiger Effekt macht oft den groen Unterschied: Prothesen wie knstliche Gelenke und Herzschrittmacher mssen in regelmigen Intervallen gewartet und ausgetauscht wer- den. Das bedeutet Folgekosten und Beeintrchtigung der Lebensqualitt der Patienten. Transplantierte Ersatzgewebe sind hier deutlich vorteilhafter. Es entfielen die Folgeopera- tionen und die Kostenbelastung ber den gesamten Zeit- raum wre geringer. Die Kostentrger im Gesundheitswesen orientieren sich natrlich an den Belastungen der aktuellen Budgets. Daher ist die Bereitschaft nicht hoch innovative Therapien zu untersttzen, die zunchst recht teuer sind. Die ausbleibende Erstattung wird so zu einem Problem fr die Entwicklung neuer Produkte. Solange keine Einnahmen in Sicht sind, zgern die Investoren, weiterhin Geld in die meist kleinen Unternehmen zu stecken. Allein in Deutsch- land betrifft das rund 40 Unternehmen. Am langfristigen Erfolg der Regenerativen Medizin zweifelt niemand. Doch darauf zu warten, dass dereinst ein spektakulrer Erfolg bei der Therapie einer der groen Volkskrankheiten der Regenera- tiven Medizin insgesamt zum Durchbruch verhelfen wird, ist sicher keine Strategie fr das berleben der jungen Branche. takten, von Signalstoffen und ihren Konzentrationsvernde- rungen bestimmt dabei, ob sich Zhne bilden. Die Tatsache, dass bei manchen ausgewachsenen Sugetieren sehr selten auch beim Menschen mehr als zweimal Zhne gebildet wer- den, ermutigt die Forscher, diese Vorgnge genau aufzuklren, um den Prozess spter gezielt auszulsen. Britische Forscher konnten im Tierversuch zeigen, dass miteinander in Kontakt stehende embryonale Mundepithelzellen und Mesen- chymzellen sowohl adulte als auch embryona- le Stammzellen zur Aktivierung von Genen stimulieren, die fr die Zahnbildung charakte- ristisch sind. Nach Transplantation in Nieren- gewebe bildeten sie Zahnstrukturen und Kno- chengewebe. Wurden embryonale Zahnan- lagen in die Kieferknochen ausgewachsener Tiere transplantiert, wuchsen sie dort zu Zh- nen heran. Fr Euphorie ist es aber viel zu frh. Nur zu oft haben sich Resultate aus Museex- perimenten beim Menschen nur auf Umwegen oder gar nicht wiederholen lassen. Wird sich die Regenerative Medizin durchsetzen? Unbestritten hat die Regenerative Medizin ein groes Poten- zial, nicht nur therapeutisch, sondern auch wirtschaftlich. Das gilt besonders fr Therapien, zu denen es keine Alternati- ve gibt. Die Aussicht, zum Beispiel einmal Diabetespatienten kurieren zu knnen, bedeutet neben dem unschtzbaren Gewinn an Lebensqualitt fr die Betroffenen eine immense Entlastung des Gesundheitssystems und der Volkswirtschaft. Fr die USA allein summieren sich die direkten (92 Mrd. US$) und indirekten Kosten (132 Md. US$) durch die chronische Krankheit auf stolze 224 Milliarden US$ pro Jahr. In hnliche Dimensionen der Kostensenkung stiee man bei gezchte- tem Nierenersatz oder mit der Heilung von neurodegenerati- ven Erkrankungen. Aber noch sind diese Therapieanstze Das Potenzial zur Bildung von Zhnen ist bei Stammzellen, aber auch bei den Zellen des abgebildeten Tumors vorhanden In vielen Fllen muss das Tissue Engineering mit etablierten Verfahren konkurrieren, wie zum Beispiel hier mit knstlichen Kniegelenken 43 GLOSSAR Glossar al l ogene Zel l en/ Gewebe von Fremden stammende Zellen/ Gewebe Arthrose degenerative Gelenkerkrankung verschiedenster Ursache Astrozyten Zellen des Nervengewebes mit sternfrmigen Fortstzen, gehren wie Oligoendrozyten zu den Gliazellen autol oge Zel l en/ Gewebe vom Patienten selbst stammende Zellen/ Gewebe Chondrozyten Knorpelzellen Di f f erenzi erung Ausbildung von gewebetypischen Zellmerkmalen im Verlauf der Reifung unspezifischer Stamm- und Vor- luferzellen El asti n Hauptbestandteil des elastischen Bindegewebes Endothel einlagige Zellschicht der Gefwnde Epi thel , epi thel i al Gewebe, das aus einer oder mehreren Schichten von fast lckenlos zusammengefgten Epithelzellen besteht und keine Gefe enthlt ex vi vo auerhalb des Krpers Expressi on hier: Produktion von Proteinen entsprechend der zugehrigen Gensequenzen extracorporal auerhalb des Krpers FDA Food and Drug Administration, US-amerikanische Zulasungsbehrde fr Arzneimittel, Medizinprodukte und transgene Nahrungsmittel Fi bri n "Blutfaserstoff", der bei der Blutgerinnung entsteht Fi brobl asten dem Mesenchym entstammende Zellen, an der Bildung von Interzellularsubstanz des Bindegewebes (Grund-, Kittsubstanz, Bindegewebsfasern) beteiligt, werden danach zu Fibrozyten Fi brose krankhafte Bindegewebsvermehrung in Organen Gl i azel l en Zellen des Nervengewebes. Sie bilden das Zellgewebe, das die Rume zwischen Nervenzellen und Blutgefen aus- fllt. Sie bilden die Markscheiden und ben Sttz-, Nhr- und Phagozytosefunktionen aus hmatopoeti sch blutbildend i n vi tro im Glas i n vi vo im lebenden Organismus Kerati nozyten Keratin-bildende Zellen der Haut. Keratin ist Hauptbestandteil der Hornsubstanzen von Haut, Haaren und Ngeln Makrophagen Zelltyp des Immunsystems, M. haben eine Schlsselfunktion bei der Immunantwort, wo sie u.a. Killerzellen aktivieren Matri x, pl . matri ces Trgermaterial mit vorgegebener rumlicher Struktur Mesangi um, mesangi al sttzendes Bindegewebe der Kapillarschleifen der Niere 44 GLOSSAR Mesenchym, mesenchymal Muttergewebe des Bindegewebes. Gewebe aus sternfrmig verzweigten, locker zu einem dreidimensionalen Gitter angeordneten Zellen Mul ti potenz, mul ti potent Eigenschaft von organ-assoziierten Stammzellen, sich in unterschiedliche Zelltypen des Organs entwickeln zu knnen. Siehe dazu Seite 11 Neuronen Fr die Signalleitung im Nervensystem verantwortliche Nervenzellen. Sie verfgen berlange Fortstze (Axons) und sind nicht mehr vermehrungsfhig NI H National Institutes of Health (USA) Ol i godendrozyten Kleine und wenig verzweigte Gliazellen. Sie bilden als Satellitenzellen der Nervenzellen die Mark- scheiden. s.a. Astrozyten Osteobl asten Knochenmutterzelle mesenchymalen Ursprungs; werden nach Abschluss des Knochenaufbaus zu Osteo- zyten. Pl uri potenz, pl uri potent Potenzial von embryonalen Stammzellen, sich unter verschiedenen Bedingungen in Zellty- pen verschiedener Organe zu differenzieren. Siehe dazu Seite 11 Prol i f erati on Zellteilung und -vermehrung Stromazel l en Stromazellen des Knochenmarks sind wichtig fr Proliferation und Differenzierung hmatopoetischer Stamm- und Vorluferzellen (s. Abb. auf Seite 10). Sie untersttzen ber die Ausbildung einer Matrix, die Expression von Adhsionsmolek- len und die Herstellung von Zytokinen den ordnungsgemen Ablauf der Blutbildung. Sie produzieren den so sogenannten Stamm- zellfaktor (stem cell factor) Toti potenz, toti potent Eigenschaft frher Embryonalzellen (meistens bis zum 8-Zellstadium) sich auch nach Abtren- nung vom Embryo zu einem kompletten Organismus entwickeln zu knnen. Siehe dazu Seite 11 Xenotranspl antat Transplantat aus tierischen Zellen Zi rrhose Sammelbegriff fr Lebererkrankungen, verbunden mit Vernderung der Lppchenstruktur und Knotenbildung Zytoki ne Signalstoffe der Zell-Zell-Kommunikation, die whrend der Immunantwort freigesetzt werden, z.B. Interleukine und Interferone Zytostati kum Wirkstoff, der die Zellteilungsaktivitt stoppt Diese Druckschrift wird im Rahmen der ffentlichkeitsarbeit vom Bundesminis- terium fr Bildung und Forschung unentgeltlich abgegeben. Sie ist nicht zum gewerblichen Vertrieb bestimmt. Sie darf weder von Parteien noch von Wahl- werberinnen/Wahlwerbern oder Wahlhelferinnen/Wahlhelfern whrend eines Wahlkampfes zum Zweck der Wahlwerbung verwendet werden. Dies gilt fr Bundestags-, Landtags- und Kommunalwahlen sowie fr Wahlen zum Europischen Parlament. Missbruchlich ist insbesondere die Verteilung auf Wahlveranstaltungen und an Informationsstnden der Parteien sowie das Einlegen, Aufdrucken oder Aufkleben parteipolitischer Informationen oder Werbemittel. Untersagt ist gleichfalls die Weitergabe an Dritte zum Zwecke der Wahlwerbung. Unabhngig davon, wann, auf welchem Weg und in welcher Anzahl diese Schrift der Empfngerin/dem Empfnger zugegangen ist, darf sie auch ohne zeitlichen Bezug zu einer bevorstehenden Wahl nicht in einer Weise verwendet werden, die als Parteinahme der Bundesregierung zugunsten einzelner politischer Gruppen verstanden werden knnte.