MDULO III

Fundamentos de toxicologia

A intoxicao humana abrange uma ampla variedade de processos fisiopatolgicos
relacionados com a interao entre um agente de natureza qumica ou biolgica e o
organismo. A condio primria para que a intoxicao acontea consiste na exposio
ao agente txico o qual, dever alcanar o stio-alvo, aps vencer as barreiras impostas
pelo organismo. Portanto, a expresso da toxicidade de uma substncia sobre um sistema
biolgico depender de inmeros fatores que incluem as propriedades fsico-qumicas do
agente txico, as condies de exposio e, fundamentalmente, de uma srie de eventos
que ocorrem dentro do organismo, ou seja, de seu comportamento toxicocintico e
toxicodinmico.
Este mdulo tem por objetivo fornecer elementos tericos para a compreenso da
intoxicao como fenmeno biolgico. Para isso, sero abordados os processos que se
sucedem desde que o agente txico penetra no organismo, a partir da superfcie de contato
com o meio externo, at alcanar o stio de ao, com discusso das variveis que afetam
a introduo e o transporte do toxicante, as modificaes causadas no seu metabolismo e
os mecanismos atravs dos quais ele exerce sua ao txica. Ao mesmo tempo, o enfoque
clssico dos tpicos fundamentais de Toxicologia, adotado nesta apresentao, propiciar
a normalizao de termos e conceitos bsicos empregados em Toxicologia.
MDULO III


Fundamentos de Toxicologia




A Toxicologia a cincia que tem como objeto de estudo o efeito nocivo decorrente da
interao entre um agente txico e um sistema biolgico, com a finalidade principal de
prevenir o aparecimento desse efeito, ou seja, estabelecer condies seguras de exposio
a essas substncias e assim, permitir que o homem se beneficie das conquistas
tecnolgicas da era atual.
A toxicologia apia-se, ento, em trs elementos bsicos:
1. a existncia de uma substncia (agente txico) capaz de interagir com um sistema
biolgico e produzir uma resposta;
2. o sistema biolgico com o qual o agente txico interage para produzir o efeito;
3. a resposta (efeito) que dever ser considerada nociva ao sistema biolgico com o
qual interage.
reas da Toxicologia
A toxicologia uma cincia multidisciplinar que compreende um vasto campo de
conhecimentos bsicos e aplicados, relacionando-se estritamente com diversas outras
cincias. desenvolvida por especialistas com diferentes formaes profissionais que
oferecem contribuies especficas em uma ou mais reas de atividade permitindo assim,
o aperfeioamento dos conhecimentos e o desenvolvimento de cinco reas de atuao, de
acordo com a natureza do agente txico ou a maneira pela qual este alcana o sistema
biolgico.
Toxicologia de Alimentos: rea relacionada ao estudo da toxicidade das substncias
veiculadas pelos alimentos, ou seja, a rea da toxicologia que estabelece ndices de
segurana para que os alimentos, de origem natural ou industrial, possam ser ingeridos
sem causar danos sade, tanto no que se refere sua obteno quanto ao seu
armazenamento.
Toxicologia Ambiental e Ecotoxicologia: essa rea do conhecimento toxicolgico
preocupa-se com o estudo das aes e dos efeitos nocivos de substncias qumicas, quase
sempre de origem antropognica, sobre os organismos vivos. Em geral, empregam-se os
termos Toxicologia Ambiental para os estudos dos efeitos diretos causados pela interao
desses agentes contaminantes do ambiente (ar, gua, solo) com o organismo humano e,
Ecotoxicologia, para os estudos dos efeitos txicos desses compostos sobre os
ecossistemas e seus componentes no humanos. Como o homem se encontra no topo de
muitas cadeias alimentares e existem poucos ecossistemas nos quais os seres humanos
no participam, essa distino , portanto, bastante frgil.
Toxicologia de Medicamentos e Cosmticos: nessa rea estudam-se os efeitos nocivos
produzidos pela interao dos medicamentos e cosmticos com o organismo, decorrentes
do uso inadequado ou da suscetibilidade individual.
Toxicologia Ocupacional: a rea que se ocupa do estudo das aes e efeitos nocivos
de substncias usadas no ambiente de trabalho sobre o organismo do indivduo exposto.
Nessa rea, busca-se, principalmente, a obteno de conhecimentos que permitam
estabelecer critrios seguros de exposio ocupacional.
Toxicologia Social: embora no mundo contemporneo a Toxicologia seja uma cincia de
carter social em sua natureza, o termo Toxicologia Social designado para a rea que
estuda os efeitos nocivos decorrentes do uso no mdico de drogas ou frmacos, com
prejuzos ao prprio usurio e sociedade. Trata do estudo das chamadas drogas de
abuso, lcitas ou no, cujo uso, sempre voluntrio, visa modificar o estado de conscincia
ou evitar o desconforto ocasionado pela interrupo do uso da substncia, mesmo que por
um curto perodo de tempo.
No mbito de cada uma dessas reas, podem ser abordadas questes relacionadas a
aspectos analticos, clnicos, mdico-legais, regulatrios, entre outros. Como
conseqncia da ampliao das reas de aplicao da Toxicologia, imposta pela sua
abrangncia multidisciplinar e multiprofissional, essa cincia pode ser dividida, de acordo
com os diferentes campos de trabalho, em trs reas ou ramos fundamentais.
A Toxicologia Clnica ou Mdica trata do atendimento do paciente exposto ao agente
txico ou intoxicado, com a finalidade de prevenir, diagnosticar a intoxicao ou aplicar,
se necessrio, uma medida teraputica especfica.
A Toxicologia Analtica ocupa-se da deteco do agente txico ou de algum parmetro
bioqumico relacionado com a exposio a ele em fluidos biolgicos, alimentos, ar, gua
e solo, com o propsito de diagnosticar ou prevenir as intoxicaes. No exerccio dessa
modalidade, de fundamental importncia o domnio de qumica analtica e de
instrumentao, pois ela busca mtodos com preciso, exatido e sensibilidade adequadas
para a identificao e/ou quantificao inequvocas do toxicante ou para a avaliao de
alteraes bioqumicas funcionais do organismo. As anlises toxicolgicas so
empregadas com as mais variadas finalidades: no aspecto forense ou mdico-legal, na
monitorizao teraputica ou acompanhamento do paciente submetido a tratamento
prolongado com medicamentos, na monitorizao biolgica da exposio ocupacional s
substncias qumicas, no controle antidopagem em competies esportivas, no
diagnstico da intoxicao aguda ou crnica em emergncias mdicas, entre outras.
E, por fim, a Toxicologia Experimental, que desenvolve estudos para elucidar os
mecanismos de ao dos toxicantes sobre os sistemas biolgicos e avaliar os efeitos
decorrentes dessa ao. A avaliao de toxicidade das substncias feita atravs de
estudos conduzidos em diferentes espcies animais, seguindo rigorosas normas
preconizadas pelos rgos reguladores nacionais e internacionais.
Conceitos Bsicos
Considerando-se o carter multidisciplinar e o fato de que muitas pessoas com diferentes
formaes acadmicas se interessam em estudar e trabalhar com Toxicologia, torna-se
necessria a observao do uso apropriado de termos empregados em toxicologia e
apresentados a seguir.
Agente txico, toxicante ou xenobitico
uma substncia qumica ou agente fsico capaz de causar dano a um sistema biolgico,
alterando seriamente uma funo ou levando-o morte, sob certas condies de
exposio. A maioria das substncias consideradas como agente txico so exgenas, sem
papel fisiolgico conhecido e denominadas xenobiticos. Outros termos que merecem ser
mencionados so apresentados abaixo.
Toxina: referese substncia txica produzida por um organismo vivo (microrganismo,
animal ou planta). Existe um campo de estudo especfico, denominado Toxinologia, que
estuda os efeitos nocivos dessas substncias.
Veneno: termo de uso popular que, embora em princpio, possa ser utilizado como
sinnimo de agente txico, reservado especificamente para designar substncias de
origem animal ou vegetal, utilizadas para autodefesa ou predao, como o caso dos
venenos ofdicos, de abelhas, entre outros.
Frmaco: toda substncia de estrutura qumica definida, capaz de modificar ou explorar
o sistema fisiolgico ou estado patolgico, em benefcio do organismo receptor.
Droga: toda substncia capaz de modificar ou explorar o sistema fisiolgico ou estado
patolgico, utilizada com ou sem inteno de benefcio do organismo receptor. A palavra
droga, tem aceitao popular para designar frmacos, medicamentos, matria prima de
medicamentos, alucingenos e agentes txicos.
Qualquer substncia pode atuar como toxicante. Tanto os produtos exgenos como os
prprios constituintes do organismo, quando se encontram em propores excessivas,
podem produzir efeitos nocivos. Os agentes txicos apresentam estruturas qumicas
variadas e podem ser classificados utilizando-se diferentes critrios, conforme a
finalidade de seu estudo. Assim, o toxicante pode ser classificado segudo:
1. estruturas qumicas gerais: aminas aromticas, hidrocarbonetos alifticos,
hidrocarbonetos aromticos, metais, etc.
2. estado fsico:
o slidos ou lquidos;
o gases: so fludos sem forma que permanecem no estado gasoso em
condies normais de presso e temperatura. Ex.: CO, NO e NO2, O3, etc.
o vapores: so as formas gasosas de substncias normalmente slidas ou
lquidas nas condies ambientais. Ex: vapores resultantes da volatilizao
de solventes orgnicos como benzeno, tolueno, xileno, entre outros;
o partculas ou aerodispersides: partculas de tamanho microscpico, em
estado slido ou lquido. Ex: poeiras e fumos; neblinas e nvoas.
3. estabilidade ou reatividade qumica: explosivo, inflamvel, oxidante, radioativo.
4. rgos-alvo: rim, fgado, sistema nervoso central, sistema hematopoitico, outros.
5. ao txica: local ou sistmica.
6. efeitos txicos: carcinognicos, mutagnicos, neurotxicos, nefrotxicos,
hepatotxicos, .
7. usos: agrotxicos, solventes, aditivos alimentares.
8. mecanismo de toxicidade: anticolinestersico, metemoglobinizante, entre outros.
9. potencial de toxicidade: extremamente txicos, moderadamente txicos,
levemente txicos, pouco txicos.
Toxicidade
a capacidade inerente a uma substncia de produzir danos aos organismos vivos, ou
seja, a medida relativa do potencial txico da substncia sob certas condies
controladas de exposio. Uma substncia muito txica causar dano a um organismo se
for administrada em quantidades muito pequenas, enquanto uma substncia de baixa
toxicidade somente produzir efeito quando a quantidade administrada for muito grande.
O conhecimento da toxicidade das substncias qumicas se obtm atravs de
experimentos em laboratrio utilizando animais. Os mtodos so empregados com todo
rigor cientfico com a finalidade de fornecer informaes relativas aos efeitos txicos e,
principalmente, para avaliar riscos que possam ser extrapolados para o homem.
Risco e segurana
O termo risco traduz a probabilidade estatstica de que se produzam efeitos adversos ou
danos por exposio a um agente txico, em virtude das propriedades inerentes ao mesmo,
bem como das condies de exposio. Nem sempre a substncia de maior toxicidade
a que oferece maior risco para o homem. Dependendo das condies de uso ou exposio,
uma substncia classificada como muito txica (elevada toxicidade intrnseca) pode ser
menos apresentar menor risco do que uma pouco txica. Por exemplo, embora o tolueno
seja um solvente carcinognico, no oferece risco se estiver adequadamente armazenado.
A existncia de risco associado ao uso de uma substncia qumica, torna necessrio o
estabelecimento de condies de segurana. Portanto, define-se como segurana, a
certeza de que no haver efeitos adversos para um indivduo exposto a uma determinada
substncia, em quantidade e forma recomendada de uso. Ou seja, quando se fala em risco
e segurana, significa a possibilidade ou no da ocorrncia de uma situao adversa.
No entanto, no fcil estabelecer o que um risco aceitvel no uso de substncia
qumica. Esta deciso bastante complexa e envolve o binmio risco-benefcio. Na
utilizao das substncias qumicas para diversos fins, alguns fatores devem ser
considerados na determinao de um risco aceitvel: a necessidade do uso da substncia;
a disponibilidade e a adequao de outras substncias alternativas para o uso
correspondente; os efeitos sobre a qualidade do ambiente e conservao dos recursos
naturais; as consideraes sobre o trabalho (no caso de ser usada em ambiente de
trabalho); a avaliao antecipada de seu uso pblico (ou seja, o que ela poder causar
sobre a populao em geral) e consideraes econmicas.
Efeito txico, adverso ou deletrio
uma alterao anormal, indesejvel ou nociva decorrente da exposio a substncias
potencialmente txicas. Todo efeito txico indesejvel e nocivo, mas, nem todos os
efeitos indesejveis so txicos. A morte o efeito adverso mais drstico que pode
ocorrer. No caso de medicamentos, em particular, devem-se distinguir os efeitos
colaterais e a toxicidade propriamente dita. Portanto, os efeitos colaterais de agentes
teraputicos so aqueles indesejveis, mas, muitas vezes tolerveis, que aparecem durante
a farmacoterapia, enquanto a toxicidade representa a manifestao de efeitos lesivos de
maior gravidade, podendo levar at morte.
Alvo
o termo usado com freqncia para designar o stio ou local do organismo que interage
com o agente txico e apresenta a resposta biolgica correspondente. Pode ser referido
como uma molcula (DNA, protena, etc.), um receptor ou um rgo (fgado, rim,
crebro, etc.).
Destoxificao
o processo de transformao qumica que converte uma substncia em formas mais
facilmente excretveis (menos txica), geralmente atravs de reaes de
biotransformao.
Antdoto e antagonista
So substncias capazes de neutralizar ou reduzir os efeitos de uma substncia
potencialmente txica. O antdoto a substncia que se ope ao efeito txico atuando
sobre o toxicante, enquanto o antagonista impede o toxicante de se ligar a seu alvo ou
exerce ao oposta do agente txico (agonista).
Intoxicao
o conjunto de efeitos nocivos representados por manifestaes clnicas (sinais e
sintomas) ou laboratoriais que revelam o desequilbrio orgnico produzido pela interao
entre o agente txico com o sistema biolgico. Por envenenamento, entende-se o
transtorno produzido por toxinas.
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A intoxicao humana compreende uma ampla variedade de processos fisiopatolgicos
resultantes da interao de um agente txico com o organismo. Porm, para que o efeito
txico ou adverso sobre o sistema biolgico seja produzido, necessrio que o toxicante
ou seus produtos de biotransformao (metablitos) alcancem stios especficos (alvo) no
organismo e permaneam em contato com os mesmos por um perodo de tempo suficiente
para produzir a ao txica.
Dessa forma, a intoxicao inicia-se com a exposio do organismo ao agente txico que,
aps vencer as defesas do organismo, chega ao local de ao na forma ativa. Essas defesas
consistem, fundamentalmente, em mecanismos que restringem a sua mobilidade e
diminuem o perodo de exposio do tecido alvo, ou seja, o organismo atua impondo
barreiras distribuio do toxicante para determinados tecidos, diminuindo sua
difusibilidade atravs das membranas celulares e/ou facilitando sua excreo.
Os processos de transporte e as transformaes que o agente txico sofre, desde a
superfcie epitelial de contato, at alcanar os rgos nos quais se armazena ou causa
leses, so muito complexos. Por convenincia, para facilitar o estudo dos complexos
eventos envolvidos desde a exposio do organismo ao agente txico at o aparecimento
de manifestaes clnicas e/ou laboratoriais, a intoxicao pode ser desdobrada em quatro
fases:
Fase I Exposio: corresponde ao contato do agente txico com o organismo.
Representa a disponibilidade qumica das substncias e passveis de serem introduzidas
no organismo.
Fase II Toxicocintica: consiste no movimento do agente txico dentro do organismo.
composta pelos processos de absoro, distribuio, biotransformao e excreo.
Todos esses processos envolvem reaes mtuas entre o agente txico e o organismo,
conduzindo disponibilidade biolgica (biodisponibilidade).
Fase III Toxicodinmica: corresponde ao do agente txico no organismo.
Atingindo o alvo, o toxicante ou o seu produto de biotransformao interage
biologicamente causando alteraes morfolgicas e/ou funcionais, produzindo danos.
Fase IV Clnica: caracterizada pelas manifestaes clnicas e/ou laboratoriais
resultantes da ao txica.
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Esta fase representada pelo perodo em que o ser humano fica exposto substncia
txica. o contato do toxicante com as superfcies externas ou internas do organismo.
Nessa etapa, de suma importncia a disponibilidade qumica do agente txico, ou seja,
a concentrao da substncia em condies de ser introduzida no organismo. Alm da
magnitude, deve-se considerar tambm, a durao e a freqncia da exposio, as vias de
introduo e a suscetibilidade individual.
Dose ou concentrao
A dose ou concentrao determina o tipo e a magnitude da resposta biolgica. Por
definio, dose a quantidade de um agente administrado para um indivduo e,
geralmente, expressa usando-se unidades de massa por massa (ex, mg de agente txico
/ kg de peso corpreo).
O termo concentrao aplica-se exposio do indivduo a uma determinada
concentrao de um agente presente em um compartimento (ex, solo, gua, ar). Neste
caso, no se sabe exatamente quanto do agente efetivamente penetrou no organismo. A
concentrao expressa em unidades de massa por volume do meio (ex, mg de agente
txico / m3 de ar; mg de agente txico / litro de gua, mg de agente txico / m3 de solo),
mas, tambm pode ser por massa do meio (ex, mg de agente txico / g de solo). A
concentrao tambm comumente expressa atravs das unidades ppm (partes por
milho) ou ppb (partes por bilho).
Para facilitar, ser usado somente o termo dose no resto desse mdulo, mas, no se
esqueam de que, se a exposio for ambiental, o termo correto concentrao. Com
relao dose deve-se distinguir:
Dose efetiva 50 (DE50)
Trata-se da quantidade de substncia (em mg, g ou mL por Kg de peso corporal) que, em
condies bem determinadas, produz um determinado efeito na metade de um grupo de
animais de certa espcie.
Dose letal mdia (DL50)
a dose calculada estatisticamente, em mg/Kg, de um determinado agente qumico ou
fsico, necessria para matar 50% dos organismos vivos de uma populao de animais,
sob um conjunto de condies definidas. Os agentes qumicos podem ser classificados,
segundo cinco classes de toxicidade, de acordo com os valores de DL50.
Tabela 1 - Classificao quanto ao grau de toxicidade
Categoria de toxidade aguda DL50 oral para ratos
Extremamente txica
Altamente txica
Moderadamente txica
Levemente txica
Praticamente no txica
< ou = 1mg/kg
> 1 a 50 mg/kg
> 50 a 500 mg/kg
> 0,5 a 5 g/kg
> 5 g/kg

Esta classificao utilizada para consultas rpidas, qualitativas, com finalidade de obter
informaes relativas toxicidade intrnseca das substncias. A falha desta classificao
est no fato dela se basear apenas na toxicidade intrnseca da substncia que um
parmetro extremamente varivel, sendo influenciado por uma srie de fatores,
relacionados principalmente ao agente qumico, ao organismo e exposio. Em
situaes prticas no se deve conhecer somente a toxicidade das substncias,
representadas geralmente pela DL50, pois to importante como conhecer a toxicidade dos
agentes qumicos, conhecer e saber avaliar o risco txico de uma substncia qumica.
Concentrao efetiva 50 (CE50) e concentrao letal 50 (CL50)
Quando se estuda a toxicidade de uma substncia introduzida no organismo por inalao,
considera-se sua concentrao no ar e, portanto, fala-se em CE50 e CL50, devendo ser
mencionada a durao da exposio do animal ao agente txico.
Vias ou locais de exposio
As principais vias de introduo dos toxicantes no organismo humano compreendem o
trato gastrintestinal (ingesto), os pulmes (inalao) e a pele (cutnea). As vias
parenterais (intramuscular e intravenosa) constituem meios normais de introduo de
medicamentos que, dependendo da dose e das condies fisiolgicas ou patolgicas do
indivduo, podem produzir efeitos adversos acentuados, com leses graves em diversos
rgos.
A via de introduo pode influenciar na toxicidade da substncia qumica. Por exemplo,
espera-se que um agente que destoxificado pelo fgado seja menos txico quando
introduzido no organismo por via oral (passagem pela circulao porta) do que por
inalao (circulao sistmica). A comparao da dose letal de um toxicante por
diferentes vias de exposio tambm fornece informaes teis relacionadas sua
absoro. Nos casos em que as doses letais por via oral e drmica so similares quela
administrada por via intravenosa, pressupe-se que o agente pronta e rapidamente
absorvido por essas vias. Por outro lado, quando a dose letal drmica muito maior que
a dose letal oral, significa que a pele constitui uma barreira efetiva absoro do agente
txico.
As substncias qumicas penetram no organismo humano, a partir das vias de exposio,
em velocidades diferentes dependendo de suas propriedades fsico-qumicas e das
condies existentes na superfcie de contato como, por exemplo, a rea e permeabilidade
da membrana e o fluxo sangneo no local de contato. Assim, a intensidade do efeito
txico e a rapidez da resposta em funo da via de exposio apresentam-se na seguinte
ordem decrescente de eficincia: endovenosa, respiratria, intraperitoneal, subcutnea,
intramuscular, intradrmica, oral e cutnea.
Essas vias possuem maior ou menor destaque, de acordo com a rea da Toxicologia em
estudo.
Assim, as vias pulmonar e cutnea so as mais importantes na Toxicologia Ocupacional
e Ambiental e a via gastrintestinal em Toxicologia de Alimentos e de Medicamentos e,
tambm, nas intoxicaes intencionais (suicdios e homicdios). As vias parenterais tm
importncia na Toxicologia Social e de Medicamentos.
Durao e freqncia da exposio
O tempo e a freqncia com que o organismo permanece em contato com o toxicante so
importantes na determinao e intensidade do efeito txico. Entretanto, em seres
humanos, essas condies de exposio no so claramente definidas como nos estudos
conduzidos em animais. Porm, os mesmos termos so usados para descrev-las:
exposio a curto prazo (aguda) quando o contato de curta durao e a
absoro do toxicante rpida. A dose administrada pode ser nica ou mltipla
num perodo de tempo no superior a 24 horas;
exposio a mdio prazo quando as exposies so freqentes ou repetidas num
perodo de um ms ou menos (sobreaguda) ou no perodo de um a trs meses
(subcrnica);
exposio a longo prazo (crnica) quando as exposies se repetem durante um
longo perodo de tempo (meses, anos ou toda a vida).
Com relao freqncia, observa-se que, uma simples exposio a um agente txico que
produz um efeito drstico, pode determinar manifestaes de menor intensidade ou no
produzir efeitos se a mesma dose ou concentrao total for fracionada e o tempo de
exposio no for aumentado. importante ressaltar que a reduo do efeito provocado
pelo aumento da freqncia (fracionamento da dose) somente acontecer se:
a velocidade de eliminao for maior do que a de absoro, de forma que os
processos de biotransformao e/ou eliminao ocorram no intervalo entre duas
exposies;
o efeito txico causado pela substncia for parcial ou totalmente revertido antes
da exposio seguinte.
Se no houver nenhumas dessas situaes, o aumento da freqncia poder resultar em
efeitos crnicos.
Para inmeras substncias, os efeitos txicos observados nas exposies agudas so
diferentes daqueles produzidos por exposies repetidas. Por exemplo, a principal
manifestao txica aguda do benzeno a depresso do sistema nervoso central, enquanto
exposies repetidas, podem resultar em toxicidade para a medula ssea com aumento do
risco para o desenvolvimento de leucemia. Nas exposies agudas, as substncias
qumicas so rapidamente absorvidas e os efeitos produzidos geralmente so imediatos.
Entretanto, algumas vezes, nota-se a ocorrncia de efeitos retardados, similares ou no
aos efeitos produzidos nas exposies a longo prazo. Por outro lado, as exposies
crnicas a um agente txico podem produzir efeitos imediatos (agudos) aps cada
administrao, alm dos efeitos produzidos a longo prazo (crnicos) em baixas
concentraes do agente.
Suscetibilidade individual
A variabilidade da resposta biolgica em funo da suscetibilidade de cada indivduo
um outro fator importante em Toxicologia. Existem situaes em que exposies iguais
determinam respostas iguais e outras, nas quais se observam respostas diferentes. Por
exemplo, para dois trabalhadores que desempenham funes iguais durante 30 anos e,
portanto, expostos no mesmo ambiente e nas mesmas condies, possvel que apenas
um deles desenvolva uma enfermidade determinada pela exposio aos toxicantes
presentes no ambiente de trabalho. Nenhuma pessoa igual outra e, portanto, as
respostas txicas podem variar de um indivduo para outro.
Como so observadas respostas diferentes entre indivduos de uma mesma espcie,
espera-se que ocorram diferenas importantes nas respostas entre indivduos de espcies
diferentes. Essas diferenas interindividuais e intraespecficas devem-se a diferenas
metablicas que podem ser determinadas pelo estado fisiolgico ou pela estrutura
gentica do organismo. Portanto, a suscetibilidade do organismo est mais diretamente
interligada s fases II e III da intoxicao, ou seja, aos processos toxicocinticos e
toxicodinmicos.

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Nessa fase tem-se a ao do organismo sobre o agente txico, procurando diminuir ou
impedir a ao nociva da substncia sobre ele. de grande importncia, porque dela
resulta a quantidade de toxicante disponvel para interagir com o stio alvo e,
consequentemente, exercer a ao txica.
A toxicocintica constituda pelos seguintes passos:
Absoro
Distribuio
Biotransformao
Excreo
A movimentao do agente txico no organismo, desde a sua entrada at a sua
eliminao, envolve a transposio de membranas celulares. Assim, de suma
importncia o conhecimento dos fatores que influenciam no transporte das substncias
qumicas pelas membranas, os quais podem ser agrupados em duas classes distintas.
Fatores relacionados com a membrana
As membranas celulares tm espessura de 7 a 9 nm, em mdia e so constitudas por
uma camada lipdica bimolecular, contendo em ambos os lados, molculas de protenas
que penetram e s vezes transpem esta camada. Os cidos graxos presentes na camada
lipdica no possuem uma estrutura cristalina rgida, ao contrrio, em temperatura
fisiolgica eles tm caractersticas quase fluidas. Assim, o carter fluido das
membranas e, portanto, sua permeabilidade, determinado, principalmente, pela
estrutura e proporo relativa de cidos graxos insaturados presentes na regio. Este
modelo denominado de mosaico fluido, foi proposto por Singer e Nicolson, em 1972,
e continua sendo o mais aceito at hoje.
Considerando-se as caractersticas das membranas celulares, as substncias podem
atravess-las por diferentes mecanismos, apresentados a seguir.
Transporte passivo
Esse mecanismo dividido em dois subtipos:
- Difuso simples - a maioria dos agentes txicos atravessa as membranas do
organismo por difuso simples e o grau de penetrao determinado pelo coeficiente
de partio lipdio/gua, pelo gradiente de concentrao na membrana e pelo pKa. A
proporo de um composto atravessar a membrana por difuso simples pode ser
determinada pela lei de Fick, expressa pela seguinte equao:

p = proporo do composto capaz de atravessar a membrana
k = constante de difuso
A = rea disponvel para a difuso
d = espessura da membrana
C1 = concentrao do composto no compartimento extracelular do sistema
C2 = concentrao do composto no compartimento intracelular do sistema
Desse modo, se os valores de A e d forem constantes, a capacidade de difuso da
substncia pode ser determinada pela expresso k (C1 C2). No incio, o processo de
difuso bastante rpido porque a diferena entre C1 C2 significativamente alta.
Entretanto, com a efetivao do processo, h uma diminuio dos valores de C1 e
aumento conseqente de C2, com uma tendncia de equilbrio das concentraes nos
dois compartimentos do sistema. O movimento unidirecional do composto atravs da
membrana ocorre porque o valor de C2 tende sempre a diminuir em funo da sua
distribuio, biotansformao e excreo, de tal forma que C1 ser sempre maior que
C2, at que o processo de difuso se complete.
- Filtrao - considerando-se o fluxo de gua atravs dos poros da membrana, as
substncias polares de baixo peso molecular (at 600 daltons) passaro atravs dos
poros aquosos. O processo de filtrao dependente, portanto, alm da
hidrossolubilidade da substncia, do tamanho dos poros da membrana que so
relativamente grandes nos glomrulos renais (cerca de 40 ) e pequenos na maioria
das clulas (8 ).
Transportes especializados
Existem inmeros compostos, cujo movimento atravs das membranas, no pode ser
explicado por difuso simples nem por filtrao. Alguns so muito grandes para passar
atravs dos poros ou muito insolveis em lipdios para se difundirem na membrana
lipdica. Entretanto, essas substncias so rapidamente transportadas atravs das
membranas, mesmo contra gradientes de concentrao. Para explicar esse fenmeno,
foram propostos mecanismos de transportes especializados. Esses sistemas so
responsveis pelo transporte de muitos nutrientes como acares, aminocidos e cidos
nuclicos e tambm de xenobiticos.
So eles:
transporte ativo - esse processo caracteriza-se pelo consumo de energia,
movimento da substncia contra gradiente de concentrao e a existncia de
protenas carregadoras de molculas, as quais apresentam seletividade pelas
substncias e se saturam em altas concentraes.
difuso facilitada - nesse processo, a substncia tambm transportada por
um carregador, sem contudo, haver consumo de energia. Outra diferena com
o processo de transporte ativo que na difuso facilitada a passagem acontece
a favor de um gradiente de concentrao.
endocitose - um mecanismo especial no qual a membrana celular, sofre um
processo de invaginao, devido a variaes na tenso superficial pela presena
de macromolculas no fluido extracelular, e engloba partculas lquidas
(pinocitose) ou slidas (fagocitose). Esse tipo de transferncia tem se mostrado
til na remoo de material particulado dos alvolos pelos fagcitos e do
sangue pelo reticulo endoplasmtico do fgado e rim.
Fatores relacionados com a substncia qumica
A passagem dos toxicantes atravs das membranas celulares, de natureza lipoprotica,
ser grandemente determinada por suas propriedades fsico-qumicas. Entre elas
destacam-se:
Solubilidade
Devido constituio lipoprotica das membranas biolgicas, as substncias qumicas
lipossolveis, ou seja, apolares, tero capacidade de transp-las facilmente, pelo
processo de difuso passiva. J as substncias hidrossolveis no atravessam essas
membranas, a no ser que tenham pequeno tamanho molecular e possam ser filtradas,
atravs dos poros aquosos. A hidrossolubilidade conferida molcula por
grupamentos que permitem a formao de pontes de hidrognio com as molculas de
gua em soluo como, por exemplo, os grupos hidroxila (-OH), carboxila (-COOH),
amino (-NH2); sulfidrila (-SH) e carbonila (-C=O). A lipossolubilidade dada
molcula pela presena de grupos alqulicos, fenlicos, naftlicos, etc.
Coeficiente de partio leo/gua

o parmetro que permite avaliar o grau de lipossolubilidade das substncias
qumicas, ou seja, dado pela relao lipossolubilidade/hidrossolubilidade. Este
coeficiente obtido ao se agitar um agente qumico em uma mistura de solvente
orgnico e gua (em condies de pH e temperatura controladas). As substncias
polares, hidrossolveis, concentram-se na fase aquosa e as apolares, lipossolveis, na
fase orgnica. Quanto maior for a concentrao da substncia na fase orgnica, maior
ser a sua lipossolubilidade. Ex.: coeficiente de partio n-octanol/gua a 37o C e pH
7,4 de algumas substncias:
clorpromazina = 79,7
cido acetil saliclico = 11,7
paracetamol = 1,79
Grau de ionizao ou de dissociao

A maioria dos agentes txicos comportam-se como cidos ou bases fracas que possuem
um ou mais grupos funcionais capazes de se ionizarem. A extenso desta ionizao
depender do pH do meio no qual a substncia se encontra e do seu prprio pKa
(logaritimo negativo da constante de dissociao da substncia). importante
relembrar que a forma ionizada polar, hidrossolvel e com pouca ou nenhuma
capacidade de transpor membranas por difuso passiva pela fase lipdica. O grau de
ionizao das substncias, em diferentes pH, poder ser obtido atravs da aplicao da
equao de Henderson-Hasselbach, para cidos fracos e bases fracas.

Para cidos fracos:

[NI] = forma no ionizada
[I] = forma ionizada

Para bases fracas:


Tomando-se como exemplo o cido acetilsaliclico (um cido fraco com pKa=3,4),
qual ser o seu comportamento no estmago e no plasma? No suco gstrico, com um
valor de pH=1,4 tem-se:
3,4 - 1,4 = log NI/I
2 = log NI/I
NI/I = 10
2
, ou seja, uma relao de 100 molculas no ionizadas para cada uma que se
dissocia.
Portanto prevalece a forma molecular, lipossolvel e capaz de vencer a membrana
celular.
No plasma, onde o valor pH de 7,4 tem-se:
3,4 - 7,4 = log NI/I
-4 = log NI/I
NI/I = 10
-4
nesse caso, a relao de uma molcula no ionizada para cada 10 mil que
se dissocia.
Portanto, prevalece a forma no ionizada, no lipossolvel e incapaz de transpor a fase
lipdica da membrana.
Esses dados permitem evidenciar que a difuso no sentido sangue ? estmago
praticamente no ocorre, o que resulta na absoro do cido acetilsaliclico no
estmago e conseqente distribuio. O contrrio acontecer com uma base fraca.
Portanto, as substncias cidas passam as membranas muito mais facilmente em pH
cido, enquanto as de natureza alcalina encontro melhores chances em pH alcalino.
Quando o pH do meio igual ao pKa de um composto, a metade deste estar na forma
ionizada e a outra metade na forma no-ionizada. Importante ressaltar que o pKa
sozinho no indica se um composto tem carter cido ou bsico, j que os cidos fracos
possuem pKa elevado, mas as bases fortes tambm. Da mesma maneira, os cidos
fortes apresentam pKa baixo assim como as bases fracas.
Tamanho e carga da partcula (molcula ou on)

A existncia de poros na membrana celular permitem a passagem de partculas
hidrossolveis menores que 8 . Aquelas com tamanho superior no sofrem esse
processo de filtrao. Alguns ctions tambm tm sua passagem dificultada, uma vez
que os poros apresentam cargas positivas em razo da presena das protenas e clcio.
Os nions passaam com maior facilidade.

MDULO III


Fundamentos de Toxicologia



A absoro pode ser definida como o processo por meio do qual o agente txico
atravessa as membranas celulares para alcanar a circulao sangnea.
Vias de absoro
Distinguem-se como principais vias de introduo dos agentes txicos no organismo:
Via oral, digestiva ou trato gastrintestinal (TGI)
Uma vez no TGI, um agente txico poder sofrer absoro desde a boca at o reto,
geralmente pelo processo de difuso passiva. Poucas substncias sofrem a absoro
na mucosa oral, porque o tempo de contato pequeno nesse local. Estudos feitos
experimentalmente, no entanto, mo stram que a cocana, a estricnina, a atropina e
vrios opiides podem sofrer absoro na mucosa bucal. Esta absoro dependente,
principalmente, do coeficiente de partio leo/gua (quanto maior este coeficiente
mais fcil a absoro) e resulta em nveis sangneos elevados, j que as substncias
no sofrero a ao dos sucos gastrintestinais.
No sendo absorvido na mucosa oral, o toxicante poder sofrer absoro na poro
do TGI onde existir a maior quantidade de sua forma no-ionizada (lipossolvel).
Para se conhecer a frao da substncia no ionizada, ou aquela apta a sofrer absoro
por difuso passiva, importante a utilizao da frmula de Handerson-Hasselbach.
Um dos fatores que favorecem a absoro intestinal de nutrientes e xenobiticos a
presena de microvilosidades, que proporcionam grande rea de superfcie.
Embora a grande maioria dos agentes txicos sofram absoro no TGI por difuso
passiva, muitas substncias sero absorvidas por processos especiais, mais
precisamente por transporte ativo. Exemplo: o chumbo absorvido por transporte
ativo e utiliza o sistema que transporta o clcio; o tlio transportado pelo sistema
carregador responsvel pela absoro de ferro, etc.
Fatores que interferem na absoro pelo TGI

Alm das propriedades fsico-qumicas dos toxicantes, j discutidas, outros fatores
podero interferir na absoro:
estado de plenitude ou vacuidade gastrintestinal: a absoro ser favorecida
se o estmago estiver vazio, devido ao maior contato do toxicante com a
mucosa. importante considerar a apresentao do produto (slida ou
lquida). Alimentos com elevado teor gorduroso como o leite e o tipo de
veculo utilizado na formulao podem facilitar a absoro de substncias
lipossolveis;
concentrao enzimtica e acidez: estes sucos digestivos, seja por sua acidez
inica, seja por ao enzimtica, podem provocar mudanas na atividade ou
na estrutura qumica do agente, alterando assim a velocidade de absoro.
Ex.: o pH estomacal das crianas possui menor acidez que o dos adultos. Isto
implica em um desenvolvimento maior de microrganismos, principalmente a
Escherichia coli, bactria que reduz, no estmago, o nitrato a nitrito. Como
as crianas possuem dietas ricas em nitratos, estes sero reduzidos a nitritos,
que so rapidamente absorvidos pela mucosa estomacal, o que pode ocasionar
metemoglobinemia;
motilidade intestinal: a alterao do tempo de esvaziamento gstrico e da
motilidade intestinal (pelo toxicante ou alimentos) poder aumentar ou
diminuir o tempo de contato do agente txico com a mucosa e,
consequentemente, a absoro nesse local. Deve-se considerar ainda, a
capacidade da substncia de provocar irritao e vmito;
efeito de primeira passagem pelo fgado: as substncias absorvidas no
estmago e duodeno entram na circulao porta e passam pelo fgado,
podendo ser biotransformadas de maneira mais ou menos intensa. Este efeito
pode ser responsvel pela menor biodisponibilidade de algumas substncias,
quando estas so administradas por via oral.
Alguns fatores que interferem na absoro pelo TGI podem variar de acordo com o
sexo e, no feminino, entre as gestantes e no gestantes. Este fato importante na
avaliao da intensidade de absoro de xenobiticos por essa via.
Via cutnea
A pele um rgo formado por mltiplas camadas de tecidos e contribui com cerca
de 10% de peso corpreo. No estado ntegro, a pele constitui uma barreira efetiva
contra a penetrao de substncias qumicas exgenas. No entanto, alguns
xenobiticos podem sofrer absoro cutnea, dependendo de fatores tais como a
anatomia e as propriedades fisiolgicas da pele e das propriedades fsico-qumicas
dos agentes.
A pele formada por duas camadas, a epiderme que a camada mais externa da pele
a derme, que formada por tecido conjuntivo e onde se encontram vasos sangneos,
nervos, folculos pilosos, glndulas sebceas e sudorparas. Estes trs ltimos
elementos da derme permitem o contato direto com o meio externo.
As substncias qumicas podem ser absorvidas, principalmente, atravs das clulas
epidrmicas ou folculos pilosos.
Absoro transepidrmica
A absoro dos agentes qumicos pela pele tem sua velocidade limitada pela regio
crnea da epiderme, mais precisamente pelo extrato crneo contnuo. As substncias
lipossolveis penetram por difuso passiva atravs dos lipdios existentes entre os
filamentos de queratina, sendo a velocidade desta absoro indiretamente
proporcional viscosidade e volatilidade do agente. J as substncias polares, de
baixo peso molecular, penetram atravs da superfcie externa do filamento de
queratina, no extrato hidratado. A absoro transepidrmica o tipo de absoro
cutnea mais freqente, devido ao elevado nmero de clulas epidrmicas existente,
embora no seja uma penetrao muito fcil para os toxicantes.
Absoro transfolicular

A absoro nessa regio menos significativa do que a transepidrmica. Algumas
substncias qumicas podem penetrar pelos folculos pilosos, alcanando
rapidamente a derme. uma penetrao fcil para os agentes qumicos, uma vez que
eles no necessitam cruzar a regio crnea. Qualquer tipo de substncia qumica, seja
ela lipo ou hidrossolvel, ionizada ou no, gs ou vapor, cida ou bsica, pode
penetrar pelos folculos. uma absoro tambm importante para alguns metais.

Fatores que interferem na absoro cutnea
Existem vrios fatores que podem interferir na absoro atravs da pele. Geralmente
eles so agrupados em quatro classes diferentes.
1. Fatores relacionados ao organismo
superfcie corprea: a superfcie corprea total no homem maior do que na
mulher (mdia de 1,70 a 1,77 m2 no homem e de 1,64 a 1,73 m2 na mulher).
Este fato pode aumentar a absoro transepidrmica no homem (maior
superfcie de contato com o xenobitico);
volume total de gua corprea: quanto maior o volume aquoso corpreo,
maior a hidratao da pele e consequentemente, a absoro cutnea. Quando
comparado mulher, o homem possui maior volume aquoso total, extra e
intracelular, o que favorece a absoro cutnea. Este fato deve ser
considerado, tambm, quando se compara mulheres grvidas e no grvidas.
As gestantes apresentam maior volume aquoso corpreo e, em conseqncia,
maior hidratao do extrato crneo. Isto possibilita maior absoro cutnea
de xenobiticos;
abraso da pele: com a descontinuidade da pele, a penetrao torna-se fcil;
fluxo sangneo atravs da pele: deve-se considerar a vascularizao das
reas expostas, uma vez que, quanto mais vascularizada a regio, maior o
fluxo sangneo no local. Estudos demonstram que, em mdia, 5% do sangue
bombeado pelo corao passa pela pele, com fluxo em torno de 120
mL/kg/min. Inflamao ou fatores que levam hiperemia aumentaro a
absoro cutnea. Durante a gestao tambm ocorrem aumentos
significativos no fluxo sangneo das mos (em at 6 vezes) e ps (at 2
vezes), o que poder influenciar a absoro cutnea de xenobiticos nas
gestantes expostas;
queimaduras qumicas e/ou trmicas: apenas as leves ou moderadas, j que as
severas destroem totalmente o tecido, formando uma crosta de difcil
penetrao;
pilosidade: nas reas em que existem plos, a absoro cutnea pode ser 3,5
a 13 vezes maior do que nas regies glabras.
2. Fatores relacionados ao agente qumico (j discutidos anteriormente)
volatilidade e viscosidade;
grau de ionizao;
tamanho molecular.
3. Fatores ligados presena de outras substncias na pele
vasoconstritores: estes vo reduzir a absoro cutnea, devido diminuio
da circulao sangnea;
veculos: podem auxiliar na absoro, mas no promovem a penetrao de
substncias que, normalmente, no seriam absorvidas pela pele ntegra;
gua: a pele tem normalmente 90 g de gua por grama de tecido seco. Isto faz
com que a sua permeabilidade seja 10 vezes maior do que aquela do extrato
totalmente seco. O contato prolongado com gua pode aumentar a hidratao
da pele em 3 a 5 vezes, o que resultar em um aumento na permeabilidade
cutnea em at 3 vezes;
agentes tensoativos: os sabes e detergentes so substncias bastante nocivas
para a pele. Eles provocam alterao na permeabilidade cutnea, mesmo
quando presentes em pequenas concentraes. Alteram, principalmente, a
absoro de substncias hidrossolveis, devido s modificaes que
provocam na estrutura do filamento de queratina;
solventes orgnicos: estes aumentam a absoro cutnea para qualquer tipo
de agente qumico, pois removem lipdios e lipoprotenas presentes no extrato
crneo, tornando-o poroso e menos seletivo.
4. Fatores ligados s condies de trabalho (exposio ocupacional)
tempo de exposio;
temperatura do local de trabalho: pode haver um aumento de 1,4 a 3 vezes na
velocidade de penetrao cutnea de agentes qumicos, para cada 10oC de
aumento na temperatura.
Como j mencionado, o sexo e o estado gestacional podem alterar parmetros
fisiolgicos importantes e, consequentemente, a intensidade da absoro cutnea
O contato dos agentes qumicos na pele podem determinar:
efeito nocivo local sem ocorrer absoro cutnea. Ex.: cidos e bases fortes.
efeito nocivo local e sistmico. Ex.: o arsnio, benzeno, etc.
efeito nocivo sistmico, sem causar danos no local de absoro: por exemplo,
inseticidas carbamatos (exceo feita ao aldicarbque um carbamato com
potente ao local).
Via respiratria, pulmonar ou inalatria
A via respiratria de suma importncia para a Toxicologia Ocupacional. Muitas
intoxicaes ocupacionais so decorrentes da aspirao de substncias contidas no
ar. A superfcie pulmonar total de aproximadamente 90 m
2
, a superfcie alveolar de
50 a 100 m
2
e o total de rea capilar cerca de 140 m
2
. O fluxo sangneo contnuo
exerce uma ao de dissoluo muito boa e muitos agentes qumicos podem ser
absorvidos rapidamente a partir dos pulmes. Os agentes passveis de sofrerem
absoro pulmonar so os gases e vapores e os aerodispersides. Estas substncias
podero ser absorvidas, tanto nas vias areas superiores, quanto nos alvolos.
Absoro de gases e vapores
Pelas vias areas superiores (VAS)
Em geral, no se d muita ateno para a absoro desses compostos nas vias areas
superiores. No entanto, muitas vezes, a substncia pode ser absorvida na mucosa
nasal, evitando sua penetrao at os alvolos. A reteno parcial ou total dos agentes
no trato respiratrio superior, est ligada hidrossolubilidade da substncia. Quanto
maior a sua solubilidade em gua, maior ser a tendncia de ser retido no local. Visto
sob este ngulo, a umidade constante das mucosas que revestem estas vias, constitui
um fator favorvel. H, no entanto, a possibilidade da ocorrncia de hidrlise
qumica, originando compostos nocivos, tanto para as vias areas superiores quanto
para os alvolos.
Ex.: tricloreto de fsforo + H2O HCl + CO2;
dixido de enxofre (SO2) + H2O cido sulfrico.
Os produtos formados, alm dos efeitos irritantes, favorecem tambm a absoro
deles ou de outros agentes pela mucosa j lesada. Assim, nem sempre, a reteno de
gases e vapores nas vias areas superiores sinnimo de proteo contra eventuais
efeitos txicos.
Pelos alvolos
Nos alvolos pulmonares duas fases esto em contato, uma gasosa formada pelo ar
alveolar e outra lquida representada pelo sangue. Essas duas fases so separadas por
uma barreira dupla: o epitlio alveolar e o endotlio capilar. Diante de um gs ou de
um vapor, o sangue pode se comportar de duas maneiras diferentes: como um veculo
inerte, ou como meio reativo. Em outras palavras, o agente txico pode dissolver-se
simplesmente por um processo fsico ou, ao contrrio, combinar-se quimicamente
com elementos do sangue. No primeiro caso tem-se a dissoluo do toxicante no
sangue e no segundo caso, a reao qumica.
Dissoluo do toxicante no sangue neste caso, deve-se considerar o agente
qumico como o soluto e o sangue como solvente. Em relao ao soluto, o
fator que interfere na absoro pulmonar a sua concentrao no ar alveolar
(presso parcial). Na verdade, se estabelece uma troca de molculas entre o
ar alveolar e o sangue, no sentido do local onde a presso parcial menor.
Assim, se a presso parcial no ar alveolar for maior que no sangue, ocorrer
absoro e se for maior no sangue do que no ar alveolar, haver excreo.
evidente, portanto, a importncia de fatores ambientais, tais como
temperatura e presso, j que estes fatores alteram a presso parcial de gases
e vapores.
Em relao ao solvente, deve-se considerar a constituio do sangue. Este
tecido orgnico apresenta tanto uma caracterstica aquosa (3/4 do sangue
gua) quanto orgnica (protenas, lipdios, e outros componentes). Sendo
assim, mais do que a lipo ou hidrossolubilidade de um agente txico, deve-se
aqui, considerar a sua solubilidade no sangue. A importncia deste fator surge
de maneira mais evidente, quando se recorda que a durao do contato entre
o ar alveolar e o sangue de uma frao de segundo apenas. Ento, para os
gases e vapores que no estabelecem combinaes qumicas, apenas suas
solubilidades no sangue asseguraro uma boa absoro pulmonar. Uma
maneira prtica de se observar a solubilidade de uma substncia no sangue
determinar o chamado coeficiente de distribuio (K). Esse coeficiente
expresso pela relao entre a concentrao do agente txico no ar alveolar
pela concentrao do agente txico no sangue, no momento em que se instala
o equilbrio. Alguns autores utilizam a correlao: concentrao do toxicante
no sangue por concentrao do toxicante no ar alveolar, para avaliar a
solubilidade da substncia.
Ento um coeficiente baixo implica em uma boa solubilidade no sangue e isto
conduz a uma concentrao elevada do agente neste meio. No entanto,
justamente devido a esta alta solubilidade, a saturao sangnea ser lenta, a
reteno do agente neste local ser mais longa e a transferncia aos tecidos
tardia. Quando o coeficiente de distribuio alto, os fenmenos inversos
acontecem. Assim, o K permite avaliar a concentrao do agente no sangue
conhecendo-se sua concentrao no ar alveolar.
Pode-se observar que dois fatores foram destacados at aqui: a presso parcial
do gs ou vapor e sua solubilidade no sangue. No foi considerada a presena
das membranas alveolares e capilares interpostas entre o ar e o sangue. Isto
porque estas membranas possuem espessura muito pequena (cerca de 1?m) e
superfcie muito grande, no representando um obstculo absoro das
substncias qumicas. Se o agente txico tem pequeno tamanho molecular e
boa solubilidade no sangue, poder ser absorvido pelos pulmes.
importante considerar tambm fatores fisiolgicos, tais como a freqncia
cardaca e respiratria, que podem aumentar ou diminuir a saturao
sangnea e, consequentemente, a absoro. A influncia desses fatores difere
de acordo com o tipo de substncia analisada. Assim, para substncias com
valores de K baixo, ou seja, muito solveis em gua, o aumento da freqncia
respiratria favorecer a absoro. J para as substncias de K elevado (pouco
solvel no sangue), a absoro ser favorecida pelo aumento na freqncia
cardaca. Deve-se ressaltar que, no caso do sexo feminino, o estado
gestacional pode alterar esses parmetros fisiolgicos e, em conseqncia, a
intensidade da absoro pulmonar.
Combinao qumica do agente qumico com o sangue - ao contrrio da
dissoluo, que puramente fsica, ocorre aqui uma fixao entre o agente
txico e o sangue que depender da afinidade qumica entre estes dois
elementos. No caso da combinao qumica, no ocorrer um equilbrio entre
agente qumico presente no ar alveolar e no sangue. So vrias as substncias
que se ligam quimicamente no sangue como, por exemplo, o monxido de
carbono (CO), o chumbo e o mercrio.
Absoro de material particulado ou aerodispersides
Aerodispersides so partculas slidas ou lquidas de pequeno tamanho molecular,
que ficam em suspenso no ar, por um perodo longo de tempo. Geralmente, somente
as partculas com dimetro menor ou igual a 1?m atingiro os alvolos e podero
sofrer absoro. As partculas que possuem dimetro maior, ficaro retidas nas
regies menos profundas do trato respiratrio.
A penetrao e reteno dos aerodispersides no trato pulmonar depende de fatores
como:
dimetro da partcula: este nem sempre indica o seu comportamento no
aparelho respiratrio. importante considerar o dimetro aerodinmico que
funo do tamanho (dimetro fsico) e da densidade da partcula. Quanto
maior o dimetro aerodinmico, menor a penetrao ao longo das vias areas
superiores. Assim, se existem duas partculas com o mesmo dimetro fsico,
a de maior densidade ter o maior dimetro aerodinmico e penetrar menos
ao longo das vias areas superiores (VAS).
hidrossolubilidade: devido umidade existente nas VAS, as partculas
hidrossolveis tendero a ficar retidas na parte superior do trato pulmonar,
sem alcanar os alvolos.
condensao: o tamanho das partculas no aparelho respiratrio pode ser
alterado pela aglomerao ou por adsorso de gua, originando partculas
maiores. Influenciam a condensao, a carga da partcula, as propriedades
fsico-qumicas da substncia, o tempo de reteno no trato respiratrio, etc.
temperatura: ela pode aumentar o movimento browniano (movimento natural
e ao acaso de partculas coloidais pequenas), o que provocar maior coliso
das partculas e, consequentemente, sua maior condensao e maior reteno.
Mecanismos de reteno dos aerodispersides

As partculas que medem mais de 30?m no conseguem penetrar no trato pulmonar,
uma vez que, devido fora da gravidade, elas se sedimentaro rapidamente no
ambiente. Entretanto, quando a fora de inspirao aumentada (por exemplo em
trabalhos pesados), pode ocorrer a penetrao dessas partculas. Aquelas com
dimetro menor que 30?m, entretanto, so capazes de penetrar no trato pulmonar,
sendo que o mecanismo de reteno e remoo das mesmas varia de acordo com a
regio do trato pulmonar.
Regio nasofarngea: nessa regio, as partculas com dimetro aerodinmico
entre 30 e 5?m depositam-se pelo processo de impactao. Como o dimetro
da partcula e a velocidade do ar inspirado so elevados e as vias dessa regio
tm uma mudana brusca de direo, as partculas se chocam com as paredes
e ficam retidas.
Regio traqueobronquial: partculas com dimetro aerodinmico entre 5 e
1?m se depositam nessa regio, por sedimentao. Como o ar no tem muita
velocidade e nem h mudanas bruscas de direo nesta regio, as partculas
ficam mais tempo no local e se sedimentam devido fora de gravidade.
Regio alveolar: apenas partculas com dimetro menor de 1?m conseguem
atingir esta regio, onde se depositam por um processo de difuso. Como a
velocidade do ar praticamente nula, e a fora da gravidade pouco influi (as
partculas so muito pequenas), os aerodispersides, devido ao movimento
browniano, vo se chocando com as partculas dos gases presentes nos
alvolos (O2 e CO2) e assim difundem-se at s paredes, onde se depositam.
Mecanismos de remoo dos aerodispersides do trato pulmonar

Nem todas partculas que se depositam no aparelho pulmonar sero retidas nele. Os
mecanismos de remoo dependem do local de deposio.
Regio nasofarngea: as partculas so removidas pelo muco, associado ao
movimento dos clios, que vibram em direo faringe. o chamado
movimento mucociliar.
Regio traqueobronquial: o processo de remoo o mesmo anterior
(movimento mucociliar), sendo que a tosse, ocasionada pela presena de
corpo estranho na regio, pode auxiliar nesta remoo. Algumas substncias
tais como o SO2, amnia e tambm a fumaa de cigarro diminuem a
velocidade de remoo neste local.
Regio alveolar: os epitlios dos bronquolos e dos alvolos so desprovidos
de clios. O muco est presente devido secreo das clulas epiteliais. Esse
muco se move em direo ao epitlio ciliado, atravs de um processo de
migrao, ainda bastante discutido. Sabe-se que este mecanismo capaz de
remover as partculas em direo s vias areas superiores e que ele
estimulado pela presena das prprias partculas nos alvolos. Outro
mecanismo de remoo a fagocitose, realizada pelos macrfagos presentes
em grande nmero na regio.
Os fagcitos contendo as partculas podem migrar em duas direes: - at aos
brnquios onde so eliminados pelo movimento mucociliar (que o mais comum); -
at ao sistema linftico, atravs da penetrao pelas paredes dos alvolos. A
fagocitose pode remover at 80% das partculas presentes nos alvolos. A velocidade
do clearence no trato pulmonar pode variar tambm de acordo com a regio. Na
regio nasofarngea a velocidade muito rpida. A remoo ocorre em minutos. Na
regio traquebronquial a velocidade rpida e a remoo ocorre em minutos ou
horas. Em regies mais profundas dos brnquios esta velocidade de remoo
moderada (cerca de horas). E na regio alveolar a velocidade de clearence lenta,
podendo levar de dias at anos para ocorrer. Ela vai depender do tipo de partcula e
do mecanismo de remoo. As partculas presentes nos alvolos, que no foram
removidas ou absorvidas, podem ficar retidas na regio, causando as chamadas
pneumoconioses.



Fundamentos de Toxicologia



Entende-se por distribuio de um agente txico, sua localizao e concentrao em
diferentes tecidos do organismo. Portanto, a distribuio no a ao de transportar
o toxicante. Por exemplo, quando se diz que uma substncia se distribui nos rgos
A, B e C, no se quer dizer como ela se deslocou da superfcie de contato at esses
rgos, mas sim que essa substncia aparece nesses rgos com uma concentrao a,
b e c, respectivamente.
Aps a entrada do agente txico na corrente sangnea, atravs da absoro ou por
administrao direta, ele estar disponvel para ser transportado pelo organismo com
diferentes destinos:
stio de ao
um ou vrios stios de armazenamento locais onde o composto pode ser
armazenado e que, para a maioria dos agentes txicos, no corresponde ao
seu stio de ao
diversos rgos para sua biotransformao
Fatores que afetam a distribuio
Normalmente a distribuio ocorre rapidamente e a velocidade e extenso desta,
depender do fluxo sangneo, da velocidade de difuso nas interfaces sangue-tecido
a qual dependente do coeficiente de partio e do grau de ionizao, da
permeabilidade da membrana e da afinidade do tecido pelo composto. Esses fatores
so agrupados em duas categorias.
Fatores ligados substncia
lipossolubilidade e grau de ionizao (j discutidos)
afinidade qumica do agente durante a distribuio, o agente alcanar o seu
stio alvo, que o rgo ou tecido onde exercer sua ao txica, mas, poder,
tambm, se ligar a outros constituintes do organismo, concentrando-se em
algumas partes do corpo. Em alguns casos, estes locais de maior concentrao
so tambm os stios de ao e disto resulta efeitos altamente prejudiciais.
o caso do monxido de carbono para o qual o sangue representa, tanto o local
de concentrao quanto o de ao txica. Felizmente para o homem, a maioria
dos toxicantes atingem seus maiores nveis em locais diferentes do stio alvo
(exemplo: Pb armazenado nos ossos e atua nos tecidos moles). Este acmulo
do agente txico em outros locais que no o de ao, funciona como uma
proteo ao organismo, uma vez que previne uma elevada concentrao no
stio alvo. Os agentes txicos nos locais de concentrao esto em equilbrio
com sua forma livre no sangue e, quando a concentrao sangnea diminui,
o agente que est concentrado em outro tecido liberado para a circulao e
da pode atingir o stio de ao.
Fatores ligados ao organismo
fluxo sangneo quanto maior a irrigao de um rgo, maior ser o contato
do toxicante com o mesmo. Dessa forma, rgos como o fgado, os rins e
bao, que recebem cerca de do fluxo sangneo do organismo, tendem a
acumular os agentes txicos. Nesse aspect, os rins merecem destaque porque,
embora representem menos de 1% do peso corporal, recebem de 20 a 25% do
dbito cardaco.
contedo de gua ou lipdio de rgos e tecidos os agentes txicos se
fixaro em rgos ou tecidos de acordo com sua afinidade por esses
contedos. Por exemplo, substncias lipossolveis como solventes orgnicos
e compostos organomercuriais, tero preferncia por tecidos ricos em gordura
como o SNC e, nesse caso, os efeitos de suas aes txicas sero decorrentes
dessa localizao. Por outro lado, compostos inorgnicos ionizveis e
solveis em gua fixam-se, preferencialmente, nos rins como, por exemplo,
o mercrio inorgnico, que lesa o parnquima desse rgo.
biotransformao do agente txico o organismo tem capacidade de
biotransformar a molcula de alguns agentes txicos transformando-as em
derivados de maior lipossolubilidade, o que dificulta sua eliminao renal e
facilita sua acumulao. Como exemplo, tem-se o caso do DDE
(diclorodifenileteno), produto de biotransformao do DDT
(diclorodifeniletano), um inseticida organoclorado.
integridade do rgo a leso de um rgo pode determinar a acumulao
do toxicante. O mercrio inorgnico, por exemplo, tem afinidade pelo tecido
renal, porm, danifica o nfron, o que pode causar oligria ou anria, o que
dificulta sua eliminao e aumenta ainda mais sua deposio renal.
O sangue tem grande importncia no estudo da distribuio, no s porque o
principal fluido de distribuio dos agentes txicos, mas, tambm por ser o nico
tecido que pode ser colhido repetidamente sem distrbios fisiolgicos ou traumas
orgnicos. Alm disto, como o sangue circula por todos os tecidos, algum equilbrio
pode ser esperado entre a concentrao do agente no sangue (dose interna) e nos
tecidos, inclusive no stio de ao (dose efetiva). Assim, a concentrao plasmtica
fornece melhor avaliao da ao txica do que a dose (a no ser quando a
concentrao plasmtica muito baixa em relao concentrao nos tecidos).
Stios de armazenamento no organismo
A distribuio do toxicante, atravs do organismo ocorre de maneira no uniforme,
devido a uma srie de fatores que podem ser reunidos em dois grupos: afinidade por
diferentes tecidos e presena de membranas. O papel da ligao s protenas
plasmticas na distribuio desigual dos xenobiticos o fator mais estudado. Os
principais locais de depsito so discutidos a seguir.
Afinidade por diferentes tecidos
Ligao s protenas plasmticas
Vrias protenas do plasma podem se ligar a constituintes endgenos (ex.: cidos
graxos, triptofano, hormnios, bilirrubinas, etc.) e tambm aos xenobiticos. A
principal protena, sob o ponto de vista da ligao a xenobiticos, a albumina.
Algumas globulinas tambm apresentam papel relevante na ligao aos agentes
exgenos, especialmente queles de carter bsico. Destaca-se aqui a 1-
glicoprotena cida.
Com exceo das substncias lipossolveis de carter neutro que, geralmente, se
solubilizam na poro lipdica das lipoprotenas, a ligao de frmacos s protenas
plasmticas feita, usualmente, pela interao de grupos polares ou no polares dos
toxicantes com o(s) grupamento(s) protico(s).
Ex.: os frmacos de carter cido, ligam-se em um nico stio de albumina,
possivelmente, ao nitrognio do aminocido terminal, que , no homem, o cido
asprtico.
O elevado peso molecular das protenas plasmticas impede que o complexo
toxicante protena plasmtica atravesse as membranas dos capilares restringindo-o
ao espao intravascular. Assim, enquanto ligado s protenas plasmticas, o agente
txico no estar disponvel para a distribuio no espao extravascular. Deve-se
observar, no entanto, que esta ligao reversvel (geralmente feita por pontes de
hidrognio, foras de van der Waals, ligao inica) e, medida que o agente livre
se difunde atravs da membrana capilar, a frao ligada se dissocia das protenas
tornando-se apta para ser distribuda. Esta ligao atua, portanto, graduando a
distribuio dos xenobiticos e, consequentemente, a chegada ao stio de ao.
Efeitos txicos severos podem aparecer quando h um deslocamento anormal dos
xenobiticos de seus stios de ligao protica. Entre os fatores que afetam esta
ligao destacam-se:
competio entre toxicantes - as protenas plasmticas no possuem stios
especficos de ligao e duas ou mais substncias que se ligam ao mesmo stio
protico, iro competir entre si por esta ligao. Esta competio pode ocorrer
entre dois ou mais xenobiticos ou entre xenobiticos e substratos endgenos.
Como conseqncia ocorrer um aumento na concentrao livre de uma das
substncias e, portanto, o risco de intoxicao. Ex.: sulfonamidas e bilirrubina
competem pelo mesmo stio da albumina; a varfarina (anticoagulante)
geralmente deslocado pelo cido acetil-saliclico.
condies patolgicas - algumas doenas alteram a conformao do stio de
ligao na protena, outras alteram o pH do plasma e podem provocar a
ionizao do complexo agente-protena e outras, ainda, modificam a
quantidade de protenas plasmticas. Ex.: a sndrome nefrtica, que permite
a eliminao da albumina atravs da urina, causando hipoalbuminemia.
concentrao do agente - quanto maior a concentrao do frmaco no
plasma, maior a ligao protica. Ex.: fenitona. Se a concentrao deste
anticonvulsivante for muito elevada no plasma a ligao protica aumenta
mais do que o esperado e a frao livre disponvel para a distribuio e ao
pequena. Neste caso o efeito teraputico pode no ser alcanado.
concentrao protica - o aumento das protenas plasmticas resulta em
maior ligao dos xenobiticos. Ex.: aumento de lipoprotena implica em
maior ligao da imipramina.
pH - para alguns toxicantes o pH do plasma altera a ligao s protenas. Ex.:
a teofilina ter uma maior ligao s protenas plasmticas quando o pH do
sangue est aumentado.
idade - a concentrao de algumas protenas plasmticas alterada com a
idade. Ex.: as crianas possuem quantidade de albumina menor do que o
adulto. Conseqentemente, os toxicantes que se ligam essencialmente
albumina estaro mais livres e sero mais rapidamente distribudos, causando
efeitos txicos mais severos, mesmo com doses no muito grandes.
Ligaes celulares
Embora menos estudado que a ligao s protenas plasmticas, a ligao a outros
tecidos exerce um papel muito importante na distribuio desigual dos agentes pelo
organismo. A ligao de toxicantes a componentes teciduais poder alterar
significativamente a distribuio dos xenobiticos, j que a frao destes ligada aos
tecidos ser inclusive maior do que a ligada s protenas plasmticas. Sob o aspecto
de ligao a xenobiticos, o tecido heptico e o renal tm um papel especial. Esses
rgos possuem elevada capacidade de se ligarem aos agentes qumicos e apresentam
as maiores concentraes destes (e tambm de substncias endgenas), quando
comparados com outros rgos.
Os mecanismos atravs dos quais estes rgos removem os agentes do sangue no
esto bem estabelecidos, no entanto, sabe-se que as protenas intracelulares so
componentes fundamentais na ligao dos agentes txicos ao tecido heptico e renal.
Por exemplo, a protena Y ou ligandina, presente no citoplasma das clulas
hepticas, tem alta afinidade pela maioria dos cidos orgnicos e parece ter
importante papel na transferncia de nions orgnicos do plasma para o fgado.
A metalotinena, outra protena tecidual, tem sido encontrada no fgado e rins ligada
ao cdmio, cobre e zinco. A rapidez com que o fgado se liga a xenobiticos pode ser
exemplificada pelo chumbo que, 30 minutos aps a administrao, tem sua
concentrao heptica 50 vezes maior do que a plasmtica.
Tecido adiposo
Como a lipossolubilidade uma caracterstica fundamental para o transporte por
membranas, lgico imaginar que os agentes txicos lipossolveis, de uma maneira
geral, podero se concentrar no tecido adiposo. Os xenobiticos armazenam-se nesse
local atravs da simples dissoluo fsica nas gorduras neutras do tecido.
Assim, um agente txico, com elevado coeficiente de partio leo/gua, pode ser
armazenado no tecido adiposo em grande extenso e isto diminuir a sua
biodisponibilidade (concentrao disponvel para atingir o stio alvo). O tecido
adiposo constitui 50% do peso de um indivduo obeso e 20% de um magro. Sendo o
armazenamento um mecanismo de defesa, pode-se pensar que a toxicidade de uma
agente qumico ser menor para a pessoa obesa como para uma pessoa magra. Mais
real, no entanto, pensar na possibilidade de um aumento sbito da concentrao do
agente txico no sangue e no stio de ao, devido a uma rpida mobilizao das
gorduras.
Tecido sseo
Um tecido relativamente inerte como o sseo pode tambm servir como local de
armazenamento de agentes qumicos inorgnicos, tais como flor, chumbo e
estrncio. O fenmeno de captura dos xenobiticos pelos ossos pode ser considerado
essencialmente um fenmeno qumico, no qual as mudanas ocorrem entre a
superfcie ssea e o lquido que est em contato com ela. O lquido o fluido
extracelular e a superfcie envolvida a matriz inorgnica do osso. Recordando: a
superfcie ssea possui uma matriz orgnica e outra inorgnica, esta sendo formada
pelos cristais de hidroxiapatita [3Ca3(PO4)2Ca(OH)2]. Aps ser trazido at o cristal
sseo atravs do fluido extracelular, o toxicante poder penetrar na superfcie do
cristal, de acordo com o seu tamanho e sua carga molecular. Assim, por exemplo, o
fluoreto (F
-
) pode ser facilmente colocado no lugar da hidroxila (OH
-
) e o chumbo e
estrncio no lugar do clcio.
O armazenamento de xenobiticos no tecido sseo poder, ou no, provocar efeitos
txicos no local. O chumbo no nocivo para os ossos, mas o flor pode provocar
fluorose ssea e o estrncio radioativo, osteossarcoma e outras neoplasias.
Esse armazenamento no irreversvel. O agente txico pode ser liberado dos ossos
por dissoluo da hidroxiapatita pela atividade osteoclstica (destruio do tecido
sseo provocado pela ao dos osteoclastos, clulas do prprio tecido sseo que tm
tal funo); aumento da atividade osteoltica (destruio do tecido sseo provocada
por substncias qumicas, enzimas, etc) pela ao do paratormnio, hormnio da
paratireide, que tem ao descalcificante ssea pois, se no lugar do clcio o osso
contiver um toxicante, este ser deslocado para a corrente sangnea, aumentando a
sua concentrao plasmtica e por troca inica.
Leite materno
A mulher que amamenta e se expe a agentes txicos poder pass-los para o leite
com conseqentes prejuzos para o lactente. Por ser mais cido que o plasma, os
compostos bsicos podem se concentrar no leite. Ao contrrio, a concentrao de
substncias cidas no leite menor que a do plasma. No eletrlitos como etanol, por
exemplo, distribuem-se prontamente no leite e atingem concentraes similares do
plasma, independente do pH deste lquido.
Presena de membranas ou barreiras de excluso
As substncias qumicas, como foi visto, podem se acumular em determinados stios,
mas, podem tambm ser excludas de outros.
Barreira Hematoenceflica
A chamada barreira hematoenceflica, que protege o crebro da entrada de
substncias qumicas, um local menos permevel do que a maioria de outras reas
do corpo. A barreira do sistema nervoso central (SNC) possui trs mecanismos de
excluso:
as clulas endoteliais dos capilares do SNC so muito finas e encontram-se
intimamente unidas e no deixam poros aquosos entre elas. Isto impede a
difuso de substncias polares de baixo peso molecular;
os capilares do SNC so circundados pelos astrcitos (tecido conectivo glial),
o que impe uma pelcula a mais a ser transposta;
a concentrao protica no fluido intersticial do SNC a mais baixa de todo
o organismo.
Assim, em contraste com outros tecidos, o toxicante tem dificuldade em se mover
entre os capilares, tendo que atravessar no somente o endotlio capilar, mas tambm
a membrana das clulas gliais, para alcanar o fluido intersticial. Como este fluido
pobre em protenas, o agente txico no pode usar a ligao protica para aumentar
a distribuio dentro do SNC. Estes fatos juntos atuam como um mecanismo de
proteo, que diminui a distribuio e ao dos toxicantes no SNC, j que eles no
entram no crebro em quantidades significativas. A eficincia da barreira
hematoenceflica varia de uma rea do crebro para outra. Ex.: o crtex, o
nucleopineal e o lbulo posterior da hipfise so mais permeveis do que outras reas
cerebrais. No est claro se a maior permeabilidade destas reas decorre de um
suprimento maior sangneo ou de uma permeabilidade mais adequada da barreira
ou dos dois fatores juntos.
Os princpios que regem o transporte das substncias atravs de membranas so
tambm os que comandam a entrada de xenobiticos no crebro. Assim, somente a
forma livre estar apta para entrar no crebro, desde que seja lipossolvel. A
lipossolubilidade um fator preponderante na velocidade e quantidade de toxicante
que entra no SNC, ou seja, a velocidade de entrada no SNC proporcional ao
coeficiente de partio leo/gua da substncia.
A barreira hematoenceflica no est totalmente desenvolvida por ocasio do
nascimento e esta seria uma das razes para a maior toxicidade de substncias
qumicas em recm-nascidos.

Barreira Placentria
Durante anos, o termo barreira placentria demonstrou o conceito que a principal
funo da placenta era proteger o feto contra a passagem de substncias nocivas
provenientes do organismo materno. Sabe-se hoje, que ela possui funes mais
importantes, tais como a troca de nutrientes (O2, CO2, etc.). Esse material vital,
necessrio para o desenvolvimento do feto, transportado por processo ativo, com
gasto de energia. J a maioria dos xenobiticos que se difundem atravs da placenta
o fazem por difuso passiva. Na verdade, a placenta no representa uma barreira
protetora efetiva contra a entrada de substncias estranhas na circulao fetal.
Anatomicamente a placenta o resultado de vrias camadas celulares interpostas
entre a circulao fetal e materna. O nmero de camadas varia com a espcie e com
o perodo de gestao e isto, provavelmente, afeta a sua permeabilidade. Na espcie
humana ela possui ao todo seis camadas, trs de origem materna e trs de origem
fetal.
Poderia se pensar que as espcies que apresentam placenta com maior nmero de
camadas so mais protegidas contra agentes txicos durante a gestao. Entretanto,
a relao entre o nmero de camadas e a permeabilidade placentria no est
suficientemente estudada. Embora no totalmente efetiva na proteo do feto contra
a entrada de xenobiticos, existem alguns mecanismos de biotransformao, que
podem prevenir a passagem placentria dessas substncias.
Volume aparente de distribuio (VD)
O volume aparente de distribuio (VD) uma forma de relacionar a quantidade de
agente txico presente no organismo com a sua concentrao plasmtica, ou seja,
um parmetro toxicocintico que indica a extenso de sua distribuio. calculado,
dividindo-se a dose administrada pela concentrao plasmtica e expresso em litros.
VD = dose (mg) / concentrao plasmtica (mg/L)
Os compostos que se ligam fortemente com as protenas ou que so muito lipoflicos,
apresentam-se em concentraes muito baixas no plasma, fazendo com que sejam
estimados volumes aparentes de distribuio muito grandes, 100 litros ou mais, o que
indica que o xenobitico distribui-se a vrios compartimentos do organismo e
encontra-se em baixa concentrao no plasma. Ao contrrio, para uma substncia
com VD relativamente pequeno, a maior frao permanece no plasma,
provavelmente, como resultado da fixao protica.
Assim, a toxicidade do xenobitico depende de seu VD, mas, nem sempre o local
que contm a maior frao do toxicante o mais lesado. Muitas vezes, esse stio
funciona como um simples depsito. Entretanto, a reduo do VD pode determinar
um aumento nas concentraes plasmticas com risco de ocasionar intoxicao.
Redistribuio
O trmino do efeito txico de uma substncia costuma ocorrer por biotransformao
ou excreo, mas, tambm pode resultar da redistribuio da substncia do seu stio
de ao para outros tecidos. Entretanto, ela ainda estar armazenada nestes locais na
forma ativa e sua sada definitiva depender de biotransformao e excreo. Se
houver saturao do local de armazenamento com a dose inicial, uma dose
subseqente pode produzir efeito prolongado.
Um exemplo clssico o uso endovenoso do anestsico tiopental, um frmaco
altamente lipossolvel. Como o fluxo sangneo cerebral muito alto, o frmaco
alcana sua concetrao mxima no crebro, cerca de um minuto aps sua
administrao. Aps o trmino da injeo, a concentrao plasmtica do tiopental
cai, medida que ele se difunde para outros tecidos como os msculos. A
concentrao do frmaco no crebro segue a do plasma, porque h pouca ligao com
componentes cerebrais. Desse modo, o incio da anestesia rpido e o trmino
tambm, pois ambos esto diretamente relacionados com a concentrao da
substncia no crebro.



MDULO III


Fundamentos de Toxicologia




Para reduzir a possibilidade de uma substncia desencadear uma resposta txica, o
organismo apresenta mecanismos de defesa que buscam diminuir a quantidade da
mesma, que chega de forma ativa ao tecido alvo assim como, diminuir o tempo de
permanncia desta em seu stio de ao. Para isso, necessrio diminuir a
difusibilidade do toxicante e aumentar a velocidade de sua excreo.
A propriedade fsica que facilita a absoro de muitos xenobiticos atravs da pele,
pulmes e trato gastrintestinal denominada lipofilicidade - constitui um obstculo
sua eliminao, porque as substncias lipoflicas podem ser reabsorvidas e tendem
a se acumular no organismo. Os compostos hidroflicos, por sua vez, apresentam
absoro mais precria, porm, so facilmente excretados pelos rins.
Conseqentemente, a eliminao de um xenobitico, freqentemente, depende de sua
converso para compostos hidrossolveis atravs de um processo conhecido como
biotransformao, o qual catalisado por enzimas presentes no fgado e em outros
tecidos.
Assim, se uma substncia lipoflica, que se difunde rapidamente, for transformada
em um composto mais polar, tem-se uma reduo na velocidade de difuso e um
aumento da solubilidade em gua, o que facilita sua excreo urinria. Por exemplo,
a destoxificao do benzeno, que apresenta uma solubilidade de 1g em 1.500 mL de
gua, consiste em sua oxidao a fenol, que 100 vezes mais hidrossolvel. A
posterior sulfatao do fenol produz um composto que possui uma solubilidade em
gua de 1g em 3 mL. Como resultado dessas duas reaes, obtm-se uma substncia
que 500 vezes mais hidrossolvel do que o xenobitico original (benzeno) e que,
portanto, ser muito mais facilmente excretada pela urina.
A biotransformao pode ser, ento, compreendida como um conjunto de alteraes
qumicas (ou estruturais) que as substncias sofrem no organismo, geralmente,
ocasionadas por processos enzimticos, com o objetivo de formar derivados mais
polares e mais hidrossolveis.
Embora existam autores que consideram a biotransformao como um dos processos
de eliminao, esse passo da toxicocintica ser abordado, aqui, separadamente.
Mecanismos de biotransformao
A biotransformao pode ocorrer atravs de dois mecanismos:
mecanismo de ativao ou bioativao - que produz metablitos com
atividade igual ou maior do que o precursor. Ex.: a piridina biotransformada
no on N-metil piridnico que tem toxicidade cinco vezes maior que o
precursor. O mesmo ocorre com o inseticida paration que biotransformado
em paraoxon, composto responsvel pela ao txica do praguicida;
mecanismo de desativao - quando o produto resultante menos txico que
o precursor.
comum encontrar-se na literatura cientfica, os termos metabolizao e
destoxificao como sinnimos de biotransformao. Hoje, no entanto, utiliza-se o
termo metabolismo para descrever o comportamento geral das substncias
(endgenas e exgenas) no organismo, o que inclui absoro, distribuio,
biotransformao e eliminao. Esse termo comumente usado para se referir
biotransformao o que compreensvel, visto que os produtos da biotransformao
de xenobiticos so conhecidos metablitos.
Entretanto, a destoxificao no sinnimo de biotransformao. Isto porque,
destoxificao significa diminuio de toxicidade e nem todas as reaes de
biotransformao, como citado acima, produziro metablitos menos txicos ou
ativos que o seu precursor.
Stios de biotransformao
A biotransformao pode ocorrer em qualquer rgo ou tecido orgnico como, por
exemplo, no intestino, rins, pulmes, pele, testculos, placenta, etc. No entanto, a
grande maioria das substncias, sejam elas endgenas ou exgenas so
biotransformadas no fgado.
O fgado o maior rgo do corpo humano com diversas e vitais funes,
destacando-se entre elas, as transformaes de xenobiticos e nutrientes. Por ser o
stio primrio para a biotransformao, o fgado potencialmente vulnervel ao
txica de um xenobitico que sofre bioativao. A biotransformao efetuada,
geralmente por enzimas, principalmente, aquelas existentes nos chamados
microssomas hepticos (pequenas vesculas presentes no retculo endoplasmtico) e
na frao solvel do citoplasma (citosol). As mitocndrias, ncleos e lisossomas
possuem menor capacidade de biotransformao. Assim, as reaes de
biotransformao so referidas, freqentemente, como microssmicas ou citoslicas,
de acordo com as localizaes subcelulares das enzimas envolvidas.
Fases da biotransformao
As reaes de biotransformao so categorizadas, no somente pela natureza da
reao envolvida (oxidao, reduo, etc.), mas, tambm pela seqncia normal com
que elas ocorrem. Essas reaes catalizadas pelas enzimas biotransformadoras de
xenobiticos so classificadas em reaes de fase I (ou pr-sintticas) e reaes de
fase II (sintticas ou de conjugao).
A fase I compreende um conjunto de reaes de oxidao, reduo e hidrlise que
preparam os toxicantes para as reaes da fase II. Essas reaes, geralmente,
modificam a estrutura qumica da substncia mediante adio de um grupo funcional
(-OH, -NH2, -SH, ou -COOH), o que resulta em um pequeno aumento de
hidrofilicidade. As reaes de biotransformao de fase II, tambm chamadas de
reaes de conjugao, incluem glicuronidao, sulfonao (mais conhecida como
sulfatao), acetilao, metilao, conjugao com glutationa e conjugao com
aminocidos. Os substratos endgenos dessas reaes interagem com grupos
funcionais presentes na molcula do xenobitico ou que foram introduzidos ou
expostos durante a fase I. Na maioria das reaes de conjugao formam-se
compostos altamente polarizados e hidrossolveis que so prontamente excretados
pelos rins.
As substncias que possuem grupos funcionais hidroflicos sofrem conjugao direta,
com formao de produtos facilmente excretveis. Entretanto, para os compostos
lipossolveis, pouco polares, tem-se sempre as reaes pr-sintticas como condio
para posterior conjugao. Portanto, a velocidade de excreo do agente txico est
relacionada com sua estrutura qumica.
Um bom exemplo o fenol que excretado aps conjugao direta, enquanto a
biotransformao do benzeno requer ambas as reaes, ou seja, ele inicialmente
biotransformado em fenol pela introduo de um grupo hidroxila (-OH) durante a
fase I (oxidao) e, o fenol formado, ento conjugado por uma reao de fase II
(sulfatao) em fenil sulfato.
Reaes de fase I
1. Oxidao
A oxidao uma reao qumica na qual o substrato perde eltrons. A reao por
adio de oxignio foi a primeira a ser descoberta e, por essa razo, recebeu essa
denominao. Como exemplo de reaes por adio de oxignio destacam-se a
hidroxilao, epoxidao e sulfoxidao. Entretanto, muitas reaes de oxidao no
envolvem oxignio. A mais simples delas a desidrogenao que consiste na
remoo de hidrognio da molcula. A maioria dessas reaes so evidenciadas pelo
nome da reao ou enzima envolvida. Por exemplo: desidrogenao alcolica,
hidroxilao aromtica, desaminao, desalquilao, dessulfurao, entre outras.
O principal sistema enzimtico responsvel pela oxidao de xenobiticos o
Citocromo P450. Esta enzima uma hemoprotena, com o tomo de ferro em seu
ncleo, chamado de P450 porque, em sua forma reduzida est ligado ao monxido de
carbono, e tem um pico de absorbncia no comprimento de onda de 450nm. O Cit
P450 parece estar localizado nas camadas profundas na membrana do retculo
endotelial liso, mais especificamente, nos microssomos hepticos. Esta enzima a
oxidase terminal do sistema de oxidases mistas que recebe os eltrons provenientes
de outras fases da reao, se reduz e se liga ao oxignio e ao toxicante, promovendo
de fato a oxidao do composto. Outras enzimas esto presentes nos microssomos
hepticos e, embora menos conhecidas e importantes que o Cit P450 podem tambm
biotransformar xenobiticos. o caso, por exemplo, do citocromo b5, que est
localizado fora das membranas do retculo endoplasmtico.
2. Reduo
Essa uma reao qumica atravs da qual o substrato ganha eltrons. So catalisadas
por redutases microssmicas e citoslicas e pelas bactrias intestinais. As reaes de
reduo podem ocorrer atravs da formao de duplas ligaes nitrognio-nitrognio
(azo-reduo) em grupos nitro (NO2). Nesses casos, os compostos amino formados
so oxidados e formam metablitos txicos. Assim, as reaes de reduo,
freqentemente resultam na ativao do xenobitico em vez de destoxificao. A
natureza dessas reaes tambm evidenciada pela sua denominao, como por
exemplo, azo-reduo, desalogenao redutora, reduo de carbonila entre outras.
A reduo pode ser efetuada enzimaticamente, envolvendo enzimas microssmicas
ou no. A enzima Cit P450 redutase, NADPH dependente, localizada fora da
membrana do REL, responsvel pela reduo de uma srie de produtos.

3. Hidrlise
uma reao na qual a adio de uma molcula de gua separa o toxicante em dois
fragmentos ou molculas menores. O grupo hidroxila (-OH) incorporado em um
fragmento e o hidrognio no outro.
Certos xenobiticos so lisados antes de sofrerem outras reaes de
biotransformao. A mais comum destas reaes a hidrlise de steres, embora
amidas, nitrilas e hidrazidas, tambm possam ser hidrolizadas. A hidrlise de steres
(R-COOR) feita pelas enzimas denominadas esterases, que podem ser de origem
microssmica ou no. Geralmente essas esterases no possuem uma boa
especificidade, ou seja, uma esterase pode, alm de hidrolisar steres, provocar a
quebra de acetanilidas, amidas e outros derivados da anilina.

Reaes de fase II
Um fator importante na toxicidade de um xenobitico a sua capacidade de ser
excretado, e parece que os rins dos vertebrados constitudo de maneira e excretar
eletrlitos mais facilmente que no eletrlitos. Assim, quanto mais ionizado estiver
um cido orgnico no pH do meio, mais rapidamente ele ser excretado pelos rins. A
ionizao, por sua vez, depende do chamado momento dipolo (ou grau de
polaridade), ou seja, da distncia entre o centro geomtrico de todas as cargas
positivas e de todas as cargas negativas. claro que molculas com momento dipolo
baixo (carga positiva perto da carga negativa) tero uma simetria maior e, portanto,
uma ionizao mais difcil. J molculas com grandes dipolos (ou seja, molculas
onde as cargas positivas e negativas esto distantes) tero uma menor simetria e,
conseqentemente, maior ionizao.
Nas reaes de conjugao, os xenobiticos, provenientes ou no da fase pr-
sinttica, ligam-se a substratos endgenos do organismo formando metablitos com
tamanho molecular elevado e, conseqentemente, mais excretveis e menos txicos.
Ou seja, na conjugao observa-se: aumento do tamanho maior polaridade maior
ionizao maior excreo menor toxicidade.
Os principais compostos endgenos envolvidos nas reaes de conjugao so:
Aminocidos e seus derivados, tais como a glicina e cistena
Carboidratos e seus derivados, especialmente o cido glicurnico
Conjugao com compostos simples como, por exemplo, sulfato e acetato
O composto endgeno envolvido na conjugao est, geralmente, na sua forma
ativa, ou seja, ligado a uma coenzima da qual transferido para o xenobitico. As
enzimas envolvidas incluem a coenzima A, onde est ligado o acetato ou outros
cidos graxos de cadeia curta, a adenosina ou fosfoadenosina fosfato (PAP) onde est
ligado o sulfato, metionina e etionina e a uridina difosfato (UDP) onde se liga o cido
glicurnico e a glicose. As conjugaes mais freqentes so aquelas feitas com cido
glicurnico e com o sulfato.
1. Conjugao com cido glicurnico
O cido glicurnico um derivado 6-carboxil da glicose, formado durante o
metabolismo desse acar. Sua forma forma ativa, o cido uridino difosfato
glicurnico (UDPGA) formado enzimaticamente na frao solvel do fgado. Esta
forma ativa doa o cido glicurnico para se conjugar com o xenobitico e esta reao
catalisada pela transglicuronilase ou glicuroniltransferase, presente na frao
microssmica heptica. Os conjugados glicurnicos ou glicurondios so muito
polares e, portanto, facilmente excretados do organismo. Em relao s substncias
endgenas, so poucas aquelas capazes de sofrerem conjugao glicurnica.
Exemplo: tiroxina e bilirrubina. como se o organismo tivesse guardado este tipo
de conjugao para a biotransformao de xenobiticos.
2. Conjugao com sulfato
Este tipo de conjugao quase to comum quanto a anterior. Os produtos da
conjugao com sulfatos so sais de sulfatos cidos (SO3) ou de sulfamatos (NHSO3),
que, em pH fisiolgico so totalmente ionizados e rapidamente excretados pelos rins.
Os ons sulfatos presentes no organismo tambm tero que ser ativados para se
conjugarem com os xenobiticos. Esta ativao envolve o uso de ATP e feita pelas
enzimas ATP-sulfato-adenil-transferase e ATP-adenil-sulfato-3-fosfotransferase.
Forma-se, ento, o PAPS (3-fosfoadenosina-5-fosfossulfato), que a forma ativa do
sulfato, presente na frao microssmica heptica e que sob ao da sulfoquinase
cede o sulfato ao xenobitico, formando o conjugado.
3. Conjugao com aminocidos
A reao consiste na formao de uma ligao peptdica entre o grupo amino de um
aminocido, geralmente, a glicina, e o grupo carbonila do xenobitico. Para que essa
reao ocorra, indispensvel que o toxicante possua um grupo carboxila. Os
compostos formados so excretado na urina porque o sistema de transporte do rim
reconhece o aminocido.
4. Conjugao com glutationa
Nessa reao, a glutationa (GSH), atravs de seu grupo sulfidrila (nucleoflico), une-
se a um carbono eletroflico do toxicante. A reao catalisada pela enzima
glutationa-S-transferase que tem como cofator o prpio glutation. A glutationa um
tripeptdio (cido glutmico-glicina-cistena). O conjugado formado se rompe nos
rins produzindo o Cis-derivado, que se acetila para produzir um conjugado do cido
mercaptrico que excretado pela urina. Essa reao importante na destoxificao
de epxidos e perxidos. A glutationa-S-transferase encontra-se em clulas de muitos
tecidos do organismo. Se essa reao diminui significativamente os nveis celulares
de glutationa, o organismo pode sofrer danos considerveis devido peroxidao
lipdica ou por outros tipos de agresso qumica.
5. Metilao
Tem papel de menor importncia na biotransformao de xenobiticos, exceto na
destoxificao do arsnico. Os compostos inorgnicos do arsnico transformam-se
em metablitos mono e dimetilados, que so menos txicos. A reao consiste na
transferncia de um grupo metila (-CH3) a um grupo funcional hidroxila, amina ou
sulfidrila, catalisada pelas metiltransferases e o composto doador de grupos metila
a SAM (S-adenosil-metionina). A metilao uma reao importante na
transformao de compostos endgenos e participa da biossntese de vrios
aminocidos e esterides, assim com na metilao do DNA. Enquanto as reaes de
fase I ativam grupos funcionais, a metilao os mascara, impedindo que participem
das reaes de fase II e, portanto, se o xenobitico metilado, sua taxa de eliminao
diminui.

Fatores que modificam a biotransformao
A eficincia dos processos de biotransformao depende de vrios fatores que
incluem dose e freqncia de exposio, espcie, idade, gnero, variabilidade
gentica, estado nutricional, estado patolgico e a exposio a outros agentes que
podem inibir ou induzir as enzimas biotransformadoras de xenobiticos.
Dose e freqncia da exposio - a dose geralmente altera a via de
biotransformao. Certas enzimas possuem elevada afinidade, mas baixa capacidade
para biotransformar substncias exgenas. Por isso, sero rapidamente saturadas
quando doses elevadas do agente txico so administradas e outras vias secundrias
passam a ter um papel mais importante. Exemplo: cerca de 90% do acetaminofeno
(paracetamol), em doses baixas (15 mg/Kg), biotransformado atravs da
conjugao com sulfato. Em doses elevadas (300 mg/kg), apenas 43% ser excretado
como tal, passando a serem significativas as excrees como glicurondio e cido
mercaptrico (conjugao com glutationa). Em relao freqncia, esta pode levar
a uma sensibilizao ou induo de receptores enzimticos, aumentando a
biotransformao.
Espcie as diferenas interespecficas na capacidade de biotransformao de
substncias qumicas so bem conhecidas e constituem, normalmente, a base da
toxicidade seletiva, utilizada para o desenvolvimento dos testes de segurana de
medicamentos realizados em animais.
Variabilidade gentica a capacidade biotransformadora varia amplamente de um
indivduo para outro em funo de diferenas genticas. Por exemplo, a reao de
acetilao da isoniazida em humanos particularmente influenciada por fatores
genticos. Algumas pessoas conseguem acetilar essa substncia rapidamente,
enquanto outras, o fazem lentamente.
Gnero - para algumas substncias, existem diferenas entre as respostas txicas em
animais machos e fmeas. Estudos realizados em ratos demonstraram que as fmeas
so mais suscetveis a uma dose de hexobarbital do que os machos (elas dormem por
um tempo maior). Esse fato explicado pela menor capacidade do fgado das fmeas
de biotransformar xenobiticos, tornando-as mais suscetveis ao da maioria dos
agentes txicos. A menor atividade heptica em fmeas, no entanto, diminuir a ao
de substncias que so biotransformadas pelo mecanismo de bioativao (ex.: o
tetracloreto de carbono e halotano). Acredita-se que as diferenas entre os gneros
sejam causadas pelos hormnios sexuais, tendo em vista que, ao se administrar
testosterona s fmeas, ocorre aumento na capacidade de biotransformao e com a
castrao de machos h uma diminuio dessa capacidade. A influncia do sexo
sobre a biotransformao tambm pode ser observada em processos que ocorrem em
outros rgos como, por exemplo, nos rins. Ex.: animais machos so mais suscetveis
ao txica do clorofrmio, provavelmente, por biotransformar mais rapidamente
este solvente, originando o fosgnio, metablito intermedirio ativo. Embora essas
diferenas sejam mais pronunciadas em ratos, outras espcies, entre elas o homem,
tambm apresentam estas modificaes (ex.: nicotina, cido acetilsaliclico,
heparina, etc.).
Idade - com relao idade, tanto os animais jovens, quanto os velhos, apresentam
menor capacidade de biotransformar xenobiticos e, conseqentemente, so mais
suscetveis aos seus efeitos txicos. Geralmente, o Cit P450 dos recm-nascidos tem
apenas 20% a 50% da atividade observada em adultos. Em relao aos idosos, no
s a atividade diminuda do Cit P450, mas tambm outros fatores, tais como menor
fluxo sangneo e menor eficincia no sistema da excreo renal e biliar, contribuem
para a menor biotransformao dos xenobiticos.
Dieta e estado nutricional - o estado nutricional bastante importante para a
biotransformao pois pode alterar a atividade do Cit P450 (oxidase ou redutase). As
deficincias em vitaminas, especialmente, a C, E e do complexo B, reduzem a
velocidade de biotransformao. Elas esto direta ou indiretamente envolvidas na
regulao do Cit P450. Alm disso, suas deficincias podem alterar a energia e o
estado redox das clulas, diminuindo a produo de cofatores necessrios para a fase
de conjugao. Dietas pobres em protenas diminuem a sntese enzimtica e,
conseqentemente, a biotransformao e, dessa forma, podem aumentar a toxicidade
de substncias ativas, mas, podem tambm reduzir o potencial txico daqueles
agentes que necessitam de biotransformao prvia para se tornarem ativos.
Estado patolgico muitas patologias podem alterar a capacidade individual de
biotransformao de xenobiticos, em particular, as doenas hepticas como cirrose,
ictercia obstrutiva, carcinomas e hepatite, devido a uma reduo drstica das
atividades enzimticas do fgado. Distrbios cardiovasculares, que acarretam
diminuio do fluxo sangneo, modificam igualmente a biotransformao e a
depurao dos agentes txicos.
Inibio e induo enzimtica - o sistema enzimtico Cit P450 influenciado por
uma srie de substncias, que podem induzir ou inibir a sua atividade, alterando a
biotransformao de determinados compostos. Por exemplo, a fenilbutazona
(antiinflamatrio e antireumtico) e o cloranfenicol podem inibir a biotransformao
enzimtica da tolbutamida, medicamento hipoglicemiante. Com isto, uma dose
teraputica desse medicamento poder causar graves crises de hipoglicemia, devido
diminuio excessiva de glicose no sangue. A inibio enzimtica envolve
mecanismos diversos, desde a inibio da sntese protica at a competio entre os
substratos pelos centros ativos comuns das enzimas. Ao contrrio, o fenobarbital e o
lcool so exemplos de indutores enzimticos, que aumentam a concentrao do Cit
P450 e, conseqentemente, a biotransformao de vrias substncias e a sua prpria,
o que pode resultar em tolerncia farmacocintica.


MDULO III


Fundamentos de Toxicologia



Os xenobiticos que penetram no organismo so, posteriormente, excretados atravs da
urina, bile, fezes, ar expirado, leite, suor e outras secrees, sob forma inalterada ou
modificada quimicamente. Este processo , muitas vezes, denominado "Eliminao",
embora pelo conceito atual a eliminao envolve o processo de biotransformao. A
excreo pode ser vista como um processo inverso ao da absoro, uma vez que os fatores
que interferem na entrada do xenobitico no organismo, podem dificultar a sua sada.
Basicamente existem trs classes de excreo:
eliminao atravs das secrees, tais como a biliar, sudorpara, lacrimal, gstrica,
salivar, lctea;
eliminao atravs das excrees, tais como urina, fezes e catarro;
eliminao pelo ar expirado.
O processo mais importante para a Toxicologia a excreo urinria.
Excreo urinria
A capacidade de um rgo realizar uma determinada funo est intimamente relacionada
com a sua anatomia, e os rins possuem um elevado desenvolvimento anatmico, voltado
para a excreo de substncias qumicas.
Os glomrulos renais filtram cerca de 20% do fluxo cardaco (os rins recebem 25% deste
fluxo) e apresentam poros bastantes largos (cerca de 40 enquanto o de outros tecidos
medem cerca de 4 ). Assim, os glomrulos filtram substncias lipossolveis ou
hidrossolveis, cidas ou bsicas, desde que tenham peso molecular menor do que 60.000
daltons.
A filtrao glomerular um dos principais processos de eliminao renal e est
intimamente ligado a um outro processo que a reabsoro tubular. As substncias, aps
serem filtradas pelos glomrulos, podem permanecer no lmem do tbulo e serem
eliminadas, ou ento, podem sofrer reabsoro passiva atravs da membrana tubular. Isto
depender de alguns fatores, tais como o coeficiente de partio leo/gua; o pKa da
substncia e o pH do meio. De modo geral, as substncias de carter alcalino so
eliminadas na urina cida e as substncias cidas na urina alcalina. Isto porque nestas
condies, as substncias se ionizaro, tornando-se hidrossolveis e a urina , em sua
maior parte, formada de gua.
Outro processo de excreo renal a difuso tubular passiva. Substncias lipossolveis,
cidas ou bsicas, que estejam presentes nos capilares que circundam os tbulos renais,
podem atravessar a membrana por difuso passiva e carem no lmem tubular.
Dependendo do seu pKa e do pH do meio, elas podem, ou no, se ionizarem e,
conseqentemente, serem excretadas ou reabsorvidas.
O terceiro processo de excreo renal a secreo tubular ativa. Existem dois processos
de secreo tubular renal, um para substncias cidas e outro para as bsicas. Estes
sistemas esto localizados, provavelmente, no tbulo proximal. A secreo tubular tem
as caractersticas do transporte ativo, ou seja, exige um carregador qumico, gasta energia,
um mecanismo competitivo e pode ocorrer contra um gradiente de concentrao.
Algumas substncias endgenas, tais como o cido rico, so excretadas por este
mecanismo e a presena de xenobiticos excretados ativamente, pode interferir com a
eliminao de substratos endgenos. A Penicilina um exemplo de xenobitico secretado
ativamente pelos tbulos. O uso de Probenecid (frmaco excretado pelo mesmo sistema)
evita que este antibitico seja secretado muito rapidamente do organismo. Geralmente, o
que ocorre no organismo uma combinao dos trs processos de excreo renal, para
permitir uma maior eficcia na eliminao dos xenobiticos.
Excreo pelas fezes e catarro
No so processos muito importantes para a Toxicologia. Os toxicantes encontrados nas
fezes correspondem frao ingerida e no absorvida ou ento ao agente txico que
sofreu secreo salivar, biliar ou gstrica. As partculas que penetram pelo trato pulmonar
podem ser eliminadas pela expectorao no trato gastrintestinal e, se no forem
reabsorvidas, sero, tambm, excretadas pelas fezes.
Excreo pela bile
Dentre as secrees orgnicas, a mais significativa para a excreo de xenobiticos a
biliar. O fgado tem uma posio vantajosa na remoo de substncias exgenas do
sangue, principalmente, daquelas absorvidas pelo trato gastrintestinal. Isto porque, o
sangue proveniente do trato gastrintestinal, atravs da circulao porta, passa inicialmente
pelo fgado, e somente depois entra na circulao sistmica. No fgado parte do
xenobitico pode ser biotransformado e os metablitos ou mesmo o produto inalterado
podem ser secretados pela bile no intestino.
Existem trs sistemas de transporte ativo para a secreo de substncias orgnicas na bile:
para substncias cidas, bsicas e neutras. quase certa a existncia de um outro sistema
para os metais. Uma vez secretado no intestino, os xenobiticos podem sofrer reabsoro
ou excreo pelas fezes. No se conhece o mecanismo que determina se a excreo ser
urinria ou biliar.
Esquematicamente tem-se:


o chamado ciclo entero-heptico, e a
morfina um exemplo tpico de
xenobitico que apresenta esse ciclo. Ela
conjugada com cido glicurnico no
fgado e o glicurondio de morfina
secretado pela bile no intestino. Neste
local, pela ao da enzima -
glicuronidase, a morfina liberada e
reabsorvida. O glicorondio que no for
lisado ser excretado pelas fezes.
importante observa que os agentes txicos
que apresentam recirculao entero-
heptica, podem ter sua ao prolongada.
Excreo pelo ar expirado
Gases e vapores inalados ou produzidos no organismo so parcialmente eliminados pelo
ar expirado. O processo envolvido a difuso pelas membranas que, para substncias que
no se ligam quimicamente ao sangue, depender da solubilidade no sangue e da presso
de vapor. Estes xenobiticos so eliminados em velocidade inversamente proporcional
reteno no sangue, assim, gases e vapores com coeficiente de distribuio K elevado
(pouco solveis no sangue) so rapidamente eliminados, enquanto os de K baixo (muito
solvel no sangue) so lentamente excretados pelo ar expirado. A freqncia cardaca e
respiratria afetam a excreo destes agentes: a primeira nos de K alto e a segunda nos
de K baixo. Em relao presso de vapor, os lquidos mais volteis sero, quase
exclusivamente, excretados pelo ar expirado.
Excreo por outras vias
A eliminao atravs da secreo sudorpara j conhecida h alguns anos. Desde 1911
sabe-se que substncias tais como iodo, bromo, cido benzico, cido saliclico, chumbo,
arsnio, lcool, etc., so excretadas pelo suor. O processo parece ser o de difuso passiva
e pode ocorrer dermatites em indivduos suscetveis, especialmente quando se promove a
sudorese para aumentar a excreo pela pele.
A secreo salivar significativa para alguns xenobiticos. Os lipossolveis podem
atingir a saliva por difuso passiva e os no lipossolveis podem ser eliminados na saliva,
em velocidade proporcional ao seu peso molecular, atravs de filtrao. Geralmente as
substncias secretadas com a saliva sofrem reabsoro no trato gastrintestinal.
Existe interesse em relao secreo de xenobiticos no leite, pois este acaba sendo
ingerido por recm-nascidos. Geralmente as substncias apolares sofrem difuso passiva
do sangue para o leite e como esta secreo mais cida (pH = 6,5) do que o sangue, os
compostos bsicos tendem a se concentrarem nesse lquido. J os compostos cidos
apresentam concentrao lctea menor que a sangnea. Vrias substncias so,
sabidamente, eliminadas pelo leite: DDT, PCB (bifenil policlorados), chumbo, mercrio,
arsnio, morfina, lcool, entre outros.
Fatores que interferem na velocidade e via de excreo
Via de introduo: a via de introduo interfere na velocidade de absoro, de
biotransformao e, tambm, na excreo;
Afinidade por elementos do sangue e outros tecidos: geralmente o agente txico
na sua forma livre est disponvel eliminao;
Facilidade de ser biotransformada: com o aumento da polaridade a secreo
urinria est facilitada;
Freqncia respiratria: em se tratando de excreo pulmonar, uma vez que,
aumentando-se a freqncia respiratria, as trocas gasosas ocorrero mais
rapidamente.
Funo renal: sendo a via renal a principal via de excreo dos xenobiticos, qualquer
disfuno destes rgos interferir na velocidade e proporo de excreo.

MDULO III


Fundamentos de Toxicologia





Uma vez que o agente txico alcana o seu alvo em concentrao adequada, ele
desencadear alteraes bioqumicas e fisiolgicas que sero responsveis pelo seu efeito
deletrio.
Algumas substncias precisam, antes, passar pela bioativao para ento desencadearem
os efeitos txicos. A bioativao envolve a biotransformao da molcula original
levando formao de um metablito txico. Assim sendo, os desencadeadores do efeito
txico podem ser:
Agente txico original: ex. chumbo, tetrodotoxina, cianeto;
Metablito do agente txico: ex. fluorocitrato (metablito do fluoroacetato), cido
oxlico (metablito do etilenoglicol);
Espcies reativas de oxignio ou de nitrognio: formao do radical hidroxila
desencadeada pelo herbicida paraquate;
Compostos endgenos: ex. bilirrubina deslocada da albumina pela sulfonamida.
Quanto ao modo de ao, os agentes txicos podem ser:
Inespecficos: ex. cidos ou bases que atuam indistintamente sobre qualquer
tecido, causando irritao e corroso nos tecidos de contato;
Especficos: so mais seletivos e causam injrias em determinado(s) tecido(s),
sem lesar outros. A suscetibilidade de determinado(s) tecido(s) deve-se presena
de molculas nas quais o agente txico se liga. Essas molculas-alvo exercem
importantes funes no organismo e podem ser enzimas, molculas
transportadoras, canais inicos, protenas reguladoras, cidos nuclicos, etc.
Logicamente, quanto menor for a distribuio da molcula-alvo pelo organismo, mais
seletiva ser a ao do agente txico.
Entretanto, no s a presena da molcula-alvo entre os diferentes tecidos que confere
seletividade de ao aos agentes txicos. s vezes, um agente pode ser potencialmente
txico para vrios tecidos, mas como ele se distribui em maior concentrao para
determinados tecidos, esses se tornam os alvos. Essa distribuio seletiva pode ser devido
a:
porosidade do endotlio capilar: clulas endoteliais dos sinusides hepticos e
capilares peritubulares renais tm fenestras maiores que as de outras clulas. Isto
favorece acmulo de agentes txicos nos rins e fgado, fazendo destes rgos
alvos freqentes;
transporte de membrana especializado: por exemplo, no pneumcito existe um
carreador de membrana que captura o herbicida paraquate e, assim, a concentrao
deste herbicida no pneumcito pode ser at 50 vezes maior do que nas outras
clulas. Isto faz do pneumcito o principal alvo da intoxicao com paraquate;
ligao a compostos intracelulares: como exemplo, podemos citar a ligao da
neurotoxina MPTP (1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridina) ao pigmento
melanina presente em grande quantidade na substncia negra enceflica. Devido
essa afinidade, a MPTP acumula-se nesta estrutura e, quando metabolizada pela
enzima monoaminooxidase-B, presente nos astrcitos, gera o metablito MPP+
(1-metil-4-fenilpiridina) que lesar seletivamente os neurnios dopaminrgicos da
substncia negra.
Relao dose-resposta ou concentrao-resposta
Um conceito fundamental na Toxicologia o da relao dose-resposta proposta por
Paracelsus: Somente a dose correta diferencia o veneno do remdio." Ela correlaciona a
exposio e a intensidade dos efeitos txicos produzidos. As curvas dose-resposta so
construdas a partir de observaes feitas em estudos experimentais com animais ou
clulas isoladas, bem como observao clnica ou epidemiolgica de humanos.
Acredita-se que, quanto maior a dose, maior e mais intensos (quanti e/ou
qualitativamente) sero os efeitos e que deve existir uma condio de exposio que seja
segura para a sade humana, com exceo das substncias mutagnicas.
Dependendo da varivel que estiver sendo avaliada, existem dois tipos de relaes
possveis:
Quantitativa: para variveis que podem ser mensuradas em intensidade. Neste
caso, quanto maior a dose do agente, mais intenso o efeito. Alguns toxicologistas
chamam a relao quantitativa de relao dose-efeito. Ex: hipertrofia heptica;
Quantal: para variveis do tipo tudo ou nada, como por exemplo, morte,
convulso. Nesse caso, quanto maior a dose, maior o nmero de indivduos que
apresentam tal efeito. Sempre ser expressa em porcentagem de indivduos que
respondem a determinado efeito e s pode ser avaliada quando uma populao de
indivduos estudada, ao contrrio da quantitativa, que pode ser avaliada em um
indivduo.
Existem dois tipos de curvas dose-resposta:
1. Para efeitos que apresentam limiar de segurana (threshold): a curva geralmente tem
a forma de uma curva sigmide e baixas doses no so txicas, j que o organismo tem
capacidade para biotransformar o agente txico, bem como reparar eventuais injrias que
tenham sido causadas. O ponto no qual a toxicidade comea a se manifestar conhecido
como limite de segurana (threshold).


2. Para efeitos que no apresentam limiar de segurana (threshold): a curva linear,
pois se assume que qualquer dose produzir um efeito deletrio. Esse tipo de curva
usada para agentes mutagnicos.

Mecanismos de toxicidade
Os mecanismos pelos quais os diferentes agentes txicos especficos produzem seus
efeitos deletrios podem ser agrupados em:
1. Alterao da expresso gnica;
2. Alterao qumica de protenas especficas;
3. Alterao do funcionamento de clulas excitveis;
4. Prejuzo da sntese de ATP;
5. Aumento de clcio intracelular;
6. Induo de estresse oxidativo.
Alterao da expresso gnica
O DNA composto por genes que codificam a sntese de protenas estruturais e
regulatrias. No processo de transcrio, uma das fitas do DNA lida, gerando o RNA
mensageiro. Uma vez formado, o RNA mensageiro levar sntese de protenas, processo
chamado de transduo.
Muitos so os mecanismos pelos quais um agente txico pode influenciar a expresso
gnica. Lembrem-se de que expresso gnica inadequada pode levar a alterao do
nmero ou da estrutura da protena que est sendo sintetizada. Alterao na expresso
gnica pode levar a efeitos txicos como carcinognese, teratognese, etc.
Abaixo esto dois exemplos de agentes txicos que desencadeiam seus efeitos por alterar
a expresso gnica:
Herbicida amitrole: hormnios da hipfise anterior exercem efeitos mitognicos
sobre glndulas perifricas agindo em receptores na membrana plasmtica. A
produo dos hormnios pela hipfise controlada por retroalimentao negativa
dos hormnios produzidos pelas glndulas perifricas. O herbicida amitrole, ao
inibir a produo de hormnios tireoideanos estimula a secreo do hormnio
tireo-estimulante (TSH) pela hipfise. Isso estimular a diviso celular na tireide
levando neoplasia tireoideana.
Arsenito: este composto promove uma ativao sustentada do fator de
crescimento epidrmico, aumentando a transcrio do DNA e, conseqentemente,
promovendo mitose. Sugere-se que esse seja o mecanismo envolvido na formao
de neoplasias de pele pelo arsenito.
Alterao qumica de protenas especficas
Alguns agentes txicos so capazes de se complexar com protenas especficas, ativando
ou inibindo-as. Metais, complexam-se com o grupamento sulfidrila de protenas e inibem
a funo das mesmas. Os praguicidas organofosforados inibem a funo da enzima
acetilcolinesterase, responsvel pela degradao do neurotransmissor acetilcolina, porque
se ligam e fosforilam tal enzima.
Alterao do funcionamento de clulas excitveis
O funcionamento das clulas excitveis (neurnios, msculo cardaco, msculo liso e
msculo esqueltico) regulado por molculas sinalizadoras (neurotransmissores) que
agem em receptores de membrana. A ligao dos neurotransmissores aos receptores
levar manifestao do efeito biolgico por aumento dos nveis de clcio intracelular,
fosforilao protica ou alteraes do potencial de membrana (potencial de repouso).
Os agentes txicos podem alterar o funcionamento de clulas excitveis agindo em
diferentes estgios da neurotransmisso. A seguir esto relacionados os principais
estgios que podem ser alterados e exemplos de agentes txicos que atuam nos mesmos.
Alterao da disponibilidade do neurotransmissor
Para alterar a disponibilidade do neurotransmissor, um agente txico pode alterar a
sntese, a liberao, a recaptura ou a metabolizao do mesmo. So exemplos:
a toxina botulnica, que promove paralisia flcida por clivar os microfilamentos
que ancoram as vesculas de armazenamento da acetilcolina, impedindo a
exocitose do neurotransmissor decorrente do desencadeamento de um potencial
de ao;
a cocana, que bloqueia a bomba de recaptura de noradrenalina, dopamina e
serotonina aumentando a concentrao dessas monoaminas na fenda sinptica e,
conseqentemente, os efeitos mediados pelas mesmas.
Interao com o receptor
Os agentes txicos podem se ligar a receptores e ativ-los ou no. Se o agente ativar o
receptor, ele ser chamado de agonista e, se no ativ-lo, de antagonista. O efeito do
antagonista decorrer da preveno da ligao do neurotransmissor ao seu receptor. Como
exemplos, pode-se citar:
o alucingeno cido lisrgico (LSD) agonista do receptor 5-HT2A da serotonina,
envolvido no controle da percepo e humor;
o relaxante muscular curare antagonista do receptor nicotnico da acetilcolina,
presente nas fibras musculares esquelticas e responsvel pela contrao
muscular.
Interao com canais inicos
A ao em canais inicos influenciar diretamente o potencial de membrana e,
conseqentemente, a probabilidade de um potencial de ao ser deflagrado e estimular a
clula. Os agentes txicos podem tanto bloquear quanto abrir canais inicos. Alguns
exemplos:
a tetrodotoxina, uma toxina presente em algumas espcies de peixe comuns no
Japo (no Brasil, encontrada no baiacu), bloqueia canais de sdio do msculo
esqueltico induzindo paralisia flcida;
os antidepressivos tricclicos bloqueiam canais de sdio na musculatura cardaca
promovendo arritmias;
os praguicidas piretrides bloqueiam canais de cloro no sistema nervoso central
levando hiperexcitabilidade neuronal;
a batracotoxina, uma toxina encontrada na pele de algumas espcies sul-
americanas de sapo, e os praguicidas organoclorados prolongam o tempo de
abertura do canal de sdio promovendo hiperexcitabilidade celular.
Alterao da fluidez das membranas
Acredita-se que compostos muito lipoflicos, como os solventes orgnicos, possam se
intercalar na fase lipdica da membrana plasmtica desestruturando-a e prejudicando seu
funcionamento.
Prejuzo da sntese de ATP
Em condies aerbias, a sntese de ATP ocorre em trs estgios:
produo de acetil-coenzima A (acetil CoA) a partir de aminocidos, cidos
graxos ou piruvato (produzido na gliclise);
ciclo do cido
ctrico (Krebs ):
acetil CoA
oxidada
enzimaticamente
na matriz
mitocondrial at
CO2 e a energia
liberada
conservada nos
transportadores de
eltrons
reduzidos;
fosforilao
oxidativa: nas
cristas
mitocondriais, os
transportadores so oxidados, desfazendo-se de prtons (H
+
) e eltrons. Os
eltrons so conduzidos ao longo da cadeia respiratria (protenas integrais da
membrana capazes de aceitar ou doar eltrons) at uma molcula de oxignio (O2),
o qual eles reduzem para formar gua. A transferncia de eltrons acompanhada
pelo bombeamento de prtons para fora da membrana mitocondrial interna, o que
leva a uma diferena transmembrana na concentrao de prtons, j que a
membrana interna impermevel aos mesmos. Essa diferena de concentrao de
prtons gera energia eletroqumica, chamada de fora prton-motora. Entretanto,
na membrana, existem transportadores para os prtons representados pela enzima
ATP-sintase. medida que os prtons fluem passivamente de volta para a matriz
atravs dos poros formados por esta enzima, a energia eletroqumica impulsiona
a ATP-sintase a catalisar a incorporao de um fosfato ao ADP formando um
ATP. Esse processo chamado de fosforilao oxidativa e notem que a
fosforilao do ADP acoplada transferncia de eltrons e uma etapa no ocorre
sem a outra.
Os agentes txicos podem interferir com a formao de ATP:
inibindo a formao de acetil-CoA: como exemplo, temos o etanol que reduz a
formao de coenzima A; o arsenito que inibe a piruvato desidrogenase;
inibindo o ciclo do cido ctrico: como exemplo, o fluoracetato que inibe a
aconitase; o etanol que inibe a -cetoglutarato; a diclorovinilcistena que inibe a
succinato desidrogenase;
inibindo o transporte de eltrons: pode-se ter tanto compostos que funcionam
como aceptores de eltrons (tetracloreto de carbono, doxorrubicina) quanto
compostos que inibam as protenas da cadeia respiratria (rotenona, cianeto, CO);
inibindo a chegada de oxignio cadeia transportadora: agentes que causam
paralisia respiratria (depressores do sistema nervoso central, agentes
convulsivantes); agentes que causam isquemia (alcalides do ergot, cocana);
agentes que inibem o transporte de oxignio pela hemoglobina (monxido de
carbono, agentes metahemoglobinizantes);
inibindo a fosforilao do ADP tem-se dois grupos: os inibidores da ATP-sintase,
representados pela oligomicina, DDT, clordecona e os agentes chamados
desacopladores da fosforilao oxidativa. Estes agentes prejudicam a formao da
fora prton-motora por serem ionforos, ou seja, formam poros na membrana
levando dissipao do gradiente eletroqumico. Como exemplos, destaca-se o
fungicida pentaclorofenol, vrios herbicidas e a amiodarona.
Logicamente, a depleo de ATP, por qualquer um dos mecanismos citados acima, ter
conseqncias importantes na clula, pois interferir com a integridade da membrana,
funcionamento de bombas inicas, sntese protica, enfim, todos os processos ATP-
dependentes. Se for intensa, levar perda das funes celulares e morte celular.
Aumento de clcio intracelular
O clcio essencial para vrias funes celulares, como exocitose, contrao muscular,
ativao de algumas enzimas, etc. Entretanto, em excesso, ele citotxico. Assim, a
clula dispe de vrios mecanismos para manter os nveis intracelulares de clcio dentro
de uma faixa adequada de concentrao, como por exemplo, as bombas de clcio e de
clcio-sdio (responsveis pela extruso de clcio da clula); seqestro de clcio no
retculo endoplasmtico e na mitocndria. interessante notar que, como o transportador
presente na mitocndria tem menor afinidade para o clcio do que o transportador
presente no retculo endoplasmtico, o seqestro pela mitocndria importante em
elevadas concentraes citoplasmticas de clcio.
Os agentes txicos podem aumentar o clcio intracelular atravs dos seguintes
mecanismos:
Aumento do influxo (entrada) de clcio: pode ocorrer por abertura de canais
inicos de clcio operados por ligante (ex, glutamato) ou dano membrana
plasmtica. Os agentes que danificam podem ser ionforos (clordecona,
metilmercrio), enzimas hidrolticas (fosfolipases ofdicas), indutores de
peroxidao lipdica (tetracloreto de carbono).
Diminuio do efluxo (sada): ocorre quando o funcionamento dos
transportadores responsveis pela sada do clcio da clula ou pela captura do
mesmo pelo retculo endoplasmtico ou mitocndria prejudicado. Isso pode
ocorrer quando os agentes se ligam ao carreador prejudicando sua funo (ex,
paracetamol, clorofrmio, tetracloreto de carbono, DDT) ou por diminuio dos
nveis de ATP, j que tais transportadores so ATP-dependentes.
Mobilizao de reservatrios intracelulares: pode ocorrer com agentes que lesem
a membrana mitocondrial ou do retculo endoplasmtico ou que sejam agonistas
do receptor para inositol trifosfato (IP3), o qual est acoplado a canais de clcio
na membrana do retculo endoplasmtico e cujo estmulo promove abertura desses
canais com conseqente sada do clcio. O praguicida lindano possui tal atividade.
O aumento de clcio intracelular pode trazer, como conseqncias:
Depleo das reservas de ATP: com a elevao dos nveis citoplasmticos de
clcio, ocorre uma diminuio da sntese do ATP, bem como aumento do seu
consumo. A diminuio da sntese ocorre tanto porque a captura do clcio pela
mitocndria dissipa a fora prton-motora da membrana quanto porque o clcio
ativa enzimas oxidativas que produzem espcies reativas lesivas membrana. J
o aumento do consumo provocado pelo aumento do trabalho dos transportadores
de clcio na tentativa de reduzir seus nveis citoslicos.
Dissociao dos microfilamentos: filamentos de actina mantm a morfologia
celular por ancoramento a protenas presentes na membrana plasmtica. O
aumento do clcio citoplasmtico dissocia a actina dessas protenas levando
formao de bolhas na membrana (blebbing) e predispondo-a a rupturas.
Ativao de enzimas hidrolticas: existem proteases, fosfolipases, DNAses e
RNAses clcio-dependentes. A ativao sustentada dessas enzimas levar
citotoxicidade.
Gerao de espcies reativas de oxignio e nitrognio: o clcio ativa enzimas
envolvidas na gerao de espcies reativas, como desidrogenases, xantina
oxidase, etc.
Induo de estresse oxidativo
Radicais livres so tomos, ons ou molculas que tm um eltron no pareado no orbital
externo. Caracterizam-se por uma grande instabilidade e, conseqentemente, elevada
reatividade por tenderem a acoplar o eltron no pareado a um outro presente em
estruturas prximas sua formao (pois tm meia-vida curta), como protenas, lipdios,
carboidratos. Eles tambm iniciam reaes autocatalticas, ou seja, as molculas com as
quais eles reagem so convertidas em radicais livres, ocorrendo leso em cadeia.
Vrias reaes do metabolismo celular levam formao de radicais livres e, portanto,
nosso organismo possui um sistema de defesa antioxidante para remover radicais livres
conforme eles vo sendo formados. Esse sistema composto por enzimas (superxido
dismutase, catalase, glutationa peroxidase) e pequenas molculas sem atividade
enzimtica (cido ascrbico, tocoferol, glutationa).
Em condies normais, existe um equilbrio entre a formao e a remoo de radicais
livres no organismo e agentes txicos podem desequilibrar esse sistema aumentando a
formao de radicais livres (ex, tetracloreto de carbono, paraquate, paracetamol, cromo)
e/ou diminuindo a funo do sistema de defesa antioxidante (chumbo, mercrio). Nesta
situao de desequilbrio, temos o chamado estresse oxidativo, que pode levar a injria
celular. Trs reaes so importantes para a injria celular decorrente de estresse
oxidativo:
Peroxidao lipdica das membranas: o dano oxidativo comea quando a ligao
dupla de cidos graxos insaturados atacada por radicais livres, especialmente
radical hidroxila. Isso leva formao de perxidos que tambm so instveis e
reativos e uma reao autocataltica em cadeia iniciada (propagao), que pode
resultar em dano extenso membrana plasmtica;
Peroxidao protica: radicais livres oxidam resduos de aminocidos de cadeias
laterais, formam ligao cruzada entre protenas e alteram a estrutura protica.
Com isso, podem levar fragmentao da protena e/ou perda de funo;
Leses ao DNA: radicais livres podem interagir com o DNA, modificando bases
e produzindo mutaes.
Consideraes finais
Como pde-se observar, muitos so os mecanismos de toxicidade. O objetivo desta seo
foi familiarizar os leitores com os principais mecanismos existentes.
importante reconhecer:
Mais de um mecanismo pode ser responsvel pela toxicidade de um agente e eles
podem ocorrer concomitantemente ou seqencialmente. O chumbo altera
protenas especficas, mobiliza clcio e gera estresse oxidativo ao mesmo tempo.
J a toxicidade do herbicida paraquate inicia-se com a gerao de radical livre no
pneumcito o que lesa a membrana e leva, secundariamente, ao aumento de clcio
intracelular.
Alguns agentes txicos tm mecanismos mais seletivos enquanto outros tm
mltiplos mecanismos e induzem mltiplos efeitos. Como exemplo de agente
mais seletivo temos o curare que um antagonista do receptor nicotnico da
acetilcolina e produz, na sua intoxicao, paralisia flcida. J o chumbo leva a:
efeitos hematolgicos por inibir enzimas com grupamento sulfidrila; efeitos
neurotxicos por alterar a neurotransmisso; hipertenso por induzir estresse
oxidativo e alterar os nveis de clcio.
Alguns efeitos txicos resultam de mltiplos mecanismos. Assim, a hipertenso
induzida pelo chumbo origina-se da gerao de espcies reativas de oxignio que
so vasoconstrictoras; da inibio da enzima oxido ntrico-sintase que produz o
xido ntrico, importante vasodilatador endgeno; do aumento de tnus vascular
promovido pelo aumento de clcio na musculatura lisa; da liberao de renina
provocada pelo aumento de clcio nas clulas justaglomerulares.

Interaes
Geralmente, estamos expostos a uma mistura de substncias qumicas e no a uma
substncia qumica isolada. Por exemplo, na gua de beber podemos encontrar pequenas
quantidades de praguicidas, metais, solventes, produtos formados durante a clorao, etc.
Logicamente, essas diferentes substncias qumicas podem interferir nos efeitos umas das
outras, tanto os aumentando quanto os diminuindo. Esta interferncia chamada de
interao. Apesar da comunidade cientfica reconhecer a existncia e a importncia deste
fenmeno, a compreenso da toxicologia de misturas ainda est longe de ser atingida
devido dificuldade de se prever quali e quantitativamente as combinaes possveis.
Existem trs mecanismos de interaes:
Toxicocintica
Ocorre quando um agente txico modifica a toxicocintica (absoro, distribuio,
biotransformao ou a excreo) do outro.
Como exemplo de uma interao toxicocintica que resulta em aumento de efeito,
podemos citar a interao entre o anticoagulante varfarina e o antiinflamatrio
fenilbutazona. A taxa de ligao da varfarina albumina de, aproximadamente, 98%, o
que significa que somente 2% fica na forma livre (farmacologicamente ativa). Como a
fenilbutazona tambm se liga albumina, na presena dela h um aumento da frao livre
da varfarina, o que pode causar hemorragia fatal.
Como exemplo de uma interao toxicocintica que resulta em diminuio de efeito,
podemos citar a alcalinizao da urina com bicarbonato feita em pacientes intoxicados
agudamente com barbituratos. Como o barbiturato um cido fraco, a elevao do pH
urinrio pelo bicarbonato aumenta a frao do barbiturato na forma inica (polar) e,
portanto, aumenta a taxa de eliminao do mesmo.
Toxicodinmica
Ocorre quando um agente modifica o efeito do outro por ligao aos seus receptores ou
estruturas-alvo.
O lcool produz depresso do sistema nervoso central por aumentar a ligao do
neurotransmissor inibitrio acido gama-aminobutrico (GABA) no receptor GABAA e
por diminuir a ligao do neurotransmissor excitatrio glutamato no receptor NMDA. Os
benzodiazepnicos tambm so drogas depressoras do sistema nervoso central que atuam
aumentando a ligao do GABA no receptor GABAA. Assim, dizemos que a interao
entre lcool e benzodiazepnicos toxicodinmica e resulta em um aumento do efeito dos
dois compostos.
Um outro exemplo de interao toxicodinmica a que ocorre entre opiides (morfina,
herona) e a naloxona (Narcan

). Os opiides produzem seus efeitos ligando-se a

receptores opioidrgicos presentes no organismo. A naloxona um antagonista destes
receptores, ou seja, liga-se a eles, no os estimula, mas impede os agonistas (morfina,
herona) de se ligarem. Neste exemplo temos uma interao toxicodinmica que resulta
em diminuio do efeito do agente txico.
Qumico
Envolve uma interao qumica direta entre os dois agentes txicos. O exemplo clssico
deste tipo de interao a que ocorre entre metais e agentes quelantes (dimercaprol,
EDTA, etc). Devido grande afinidade que os metais tm por alguns grupos funcionais
dos quelantes, quando uma pessoa intoxicada com metais tratada com um quelante, o
metal liga-se ao agente quelante e deixa de produzir seus efeitos txicos, pois o complexo
metal-quelante desprovido de atividade txica.
Como visto, uma vez que uma interao tenha ocorrido, o efeito resultante poder ser
maior ou menor. As interaes do tipo adio, sinergismo e potenciao resultam em
aumento de efeito, enquanto o antagnismo resulta em diminuio de efeito. Esses tipos
de interao so discutidos a seguir.
Adio um tipo bastante comum de interao caracterizada quando o efeito
induzido por dois ou mais compostos juntos, igual soma dos efeitos de cada
agente em separado. Assim, quando dois praguicidas organofosforados esto
presentes, observa-se um prejuzo da conduo nervosa igual ao que se observaria
se fossem somados o efeito de cada um deles separadamente.
Sinergismo - o tipo de interao na qual o efeito induzido por dois ou mais
compostos juntos maior do que a soma dos efeitos de cada agente em separado.
Quando os agentes so sinrgicos, a toxicidade dos mesmos deve ser reavaliada
considerando suas propriedades sinergsticas, pois o sinergismo pode ter srios
efeitos sobre a sade. Como exemplo, podemos citar a interao entre cigarro e
exposio a asbesto. Sabe-se que a exposio a esses dois compostos produz um
risco de desenvolvimento de cncer de pulmo muito maior do que a soma dos
riscos de cada composto em separado.
Potenciao - este tipo de interao ocorre quando um agente desprovido de
atividade txica aumenta a toxicidade de um agente txico. Um exemplo a
interao entre o tetracloreto de carbono e isopropanol. Embora o isopropanol no
seja hepatotxico, ele aumenta a hepatotoxicidade desencadeada pelo tetracloreto
de carbono. Um outro exemplo o que ocorre entre os componentes do ch de
Santo Daime, usado em seitas religiosas. Este ch feito com um cip
(Banisteriopsis caapi - mariri) e folhas de (Psychotria Viridis - chacrona).
Quando administradas individualmente, nenhuma das duas plantas produz
alucinao. Entretanto, quando administradas em conjunto, observa-se alucinao
e isso ocorre porque o mariri impede o metabolismo de primeira passagem do
princpio ativo alucingeno dimetiltriptamina, encontrado na chacrona.
Antagonismo - no antagonismo, um agente leva diminuio do efeito de um
outro agente. Na Toxicologia, este efeito sempre desejado, j que resulta em
uma diminuio da toxicidade e o modo de ao de muitos antdotos usados no
tratamento de diferentes intoxicaes.
Os diferentes livros de Farmacologia apresentam diferentes classificaes dos tipos de
antagonismo. Nesta seo, optou-se pela mais simplificada para facilitar a compreenso.
Assim sendo, de uma maneira geral, existem trs tipos principais de antagonismo:
Antagonismo farmacolgico: aquele no qual um agente diminui a ao do outro
evitando sua ligao no receptor. Existem dois tipos de antagonismo farmacolgico:
Competitivo: o antagonista combina-se com o mesmo stio do receptor que o
agonista mas no induz nenhuma resposta. O antagonista compete com o agonista
pelo stio de ligao do receptor. Liga-se ao receptor aquele composto que estiver
em maior concentrao na biofase e, portanto, o antagonismo reversvel. Como
exemplos, cita-se o antagonismo entre naloxona e opiides; atropina e
acetilcolina; curare e acetilcolina, etc.
No competitivo: o antagonista liga-se no receptor ou em um stio fora do receptor
do agonista alterando estruturalmente o receptor. Assim, o antagonismo
irreversvel pois no adianta aumentar a quantidade de agonista na biofase, uma
vez que no haver receptor para ele se ligar. Como exemplo, pode-se citar a
fenoxibenzamina que forma ligaes covalentes com adrenoceptores.

Antagonismo funcional: aquele no qual dois agentes txicos atuam em receptores
diferentes produzindo efeitos opostos. Assim, indiretamente, cada um deles ir anular ou
reduzir o efeito do outro. Como exemplo, podemos citar a interao entre DDT e
benzodiazepnicos. O DDT promove hiperexcitabilidade neuronal por lentificar o
fechamento dos canais de sdio, deixando a membrana parcialmente despolarizada. Os
benzodiazepnicos promovem hiperpolarizao da membrana por aumentarem a ao do
neurotransmissor inibitrio GABA, que abre canais de cloreto. Por isso, uma pessoa
intoxicada com DDT que apresenta convulso tratada com benzodiazepnico.
Antagonismo qumico: j descrito acima na interao medicamentosa do tipo qumica.
O quadro abaixo, retirado do site do NIH (National Institutes of Health), ilustra
qualitativamente a porcentagem da populao afetada pela exposio aos agentes A e B
em separado, bem como a uma combinao dos dois, simulando os diferentes tipos de
exposio.
Tipo de
interao
Efeito txico do
agente A
Efeito txico do
agente B
Efeito combinado de A
+ B
Adio 20% 30% 50%
Sinergismo 5% 10% 100%
Potenciao 0% 20% 50%
Antagonismo 20% 30% 5%
interessante notar que diferentes tipos de interaes podem ocorrer em diferentes
sistemas com a mesma combinao de agentes. Por exemplo, inseticidas clorados e
solventes halogenados (presentes nas formulaes), podem produzir uma interao do
tipo adio quanto hepatotoxicidade e uma interao do tipo antagonismo funcional no
sistema nervoso central, j que os inseticidas so estimulantes e os solventes, depressores
do sistema nervoso central.


MDULO III


Fundamentos de Toxicologia


Essa fase caracterizada pela exteriorizao dos efeitos do agente txico, ou seja, o
aparecimento de sinais e sintomas da intoxicao ou alteraes laboratoriais causadas
pela substncia qumica. No diagnstico das intoxicaes, deve-se lembrar que um
mesmo rgo pode ser afetado por uma grande variedade de toxicantes e que uma nica
substncia qumica pode atingir vrios rgos ou produzir diferentes efeitos relacionados
a um mesmo rgo. Nesse amplo espectro de efeitos txicos, distinguem-se:
Efeito imediato, crnico e retardado
efeitos imediatos ou agudos - so aqueles que aparecem imediatamente aps uma
exposio aguda, ou seja, exposio nica ou que ocorre, no mximo, em 24
horas. Em geral so efeitos intensamente graves e a evoluo pode levar o paciente
morte, ou a uma recuperao total ou parcial com seqelas ou leses persistentes.
efeitos crefeitos crnicos - so aqueles resultantes de uma exposio crnica, ou
seja, exposio a pequenas doses, durante vrios meses ou anos. Nas intoxicaes
crnicas, os sinais clnicos podem advir de dois mecanismos:
o somatria ou acmulo do agente txico no organismo: a velocidade de
eliminao menor que a de absoro, assim, ao longo da exposio o
toxicante vai sendo somado no organismo, at alcanar um nvel txico.
Como exemplo, destaca-se o saturnismo (intoxicao crnica pelo
chumbo);
o somatria de efeitos: ocorre quando o dano causado irreversvel e,
portanto, vai sendo aumentado a cada exposio, at atingir um nvel
detectvel ou, ento, quando o dano reversvel, mas o tempo entre cada
exposio insuficiente para que o organismo se recupere totalmente. esse
tipo de efeito exemplificado pela exposio crnica ao dissulfeto de
carbono (CS2). As alteraes bioqumicas ou fisiolgicas se acentuam
aps cada exposio ao agente at o surgimento dos sintomas clnicos.
Quando o efeito apresenta um quadro intermedirio classificado como sobreagudo. As
intoxicaes por exposies repetidas podem conduzir o indivduo a estados progressivos
de deficincia biolgica que impedem a sua recuperao e tornam sua reabilitao
deficiente.
efeitos retardados - so aqueles que s ocorrem aps um perodo de latncia,
mesmo quando j no mais existe a exposio. Exemplo: efeitos carcinognicos
que tm uma latncia de 20-30 anos.
Deve-se, no entanto, fazer distino entre exposio a curto prazo (aguda) ou a longo
prazo (crnica) e os efeitos agudos e crnicos. Por exemplo, uma exposio a curto prazo
(aguda) pode determinar um efeito crnico, ou seja, a exposio a uma nica dose de
triortocresilfosfato (TOCP) pode produzir, no homem, leso persistente no SNC. Em
certos casos, como nas exposies agudas ao tlio, paraquate e derivados cumarnicos, a
intoxicao se manifesta no decorrer de alguns dias (efeito sobreagudo).
Efeito local ou sistmico
O efeito local refere-se quele que ocorre onde acontece o primeiro contato entre o agente
txico e o organismo. Os xenobiticos que possuem ao irritante direta sobre os tecidos,
reagem quimicamente, no local de contato, com componentes destes tecidos. Dependendo
da intensidade da ao pode ocorrer irritao, efeitos custicos ou necrosantes. Os
sistemas mais afetados so pele e mucosas do nariz, boca, olhos, garganta e trato
pulmonar. Destacam-se nesse grupo, a ao dos gases irritantes (fosgnio, gs mostarda,
NO2, cloro) e lacrimognicos (acrolena, bromo, cloro). Outra ao irritante de tecidos
a dermatite qumica. Os xenobiticos que apresentam esta ao txica (substncias
vesicantes como as mostardas nitrogenadas ou agentes queratolticos como o fenol),
lesam a pele e facilitam a penetrao subseqente de outras substncias qumicas.
O efeito sistmico, de ocorrncia mais comum, produzido em local distante do stio de
penetrao do toxicante, portanto, exige uma absoro e distribuio da substncia, de
modo a atingir o stio de ao, onde se encontra o receptor biolgico. Existem substncias
que apresentam os dois tipos de efeitos. (ex.: benzeno, chumbo tetraetila, etc.).
Efeito reversvel ou irreversvel
O efeito reversvel desaparece quando cessa a exposio, enquanto o irreversvel persiste
mesmo aps o trmino da exposio. So exemplos de efeitos irreversveis os carcinomas,
as mutaes e cirrose heptica. A manifestao de um ou outro efeito depende,
principalmente, da capacidade do tecido lesado em se recuperar. Assim, leses hepticas
so geralmente reversveis, j que este tecido tem grande capacidade de regenerao,
enquanto as leses no SNC so, geralmente, irreversveis, uma vez que as clulas
nervosas so pouco renovadas.
Reaes idiossincrsicas
As reaes idiossincrsicas correspondem s respostas anormais a certos agentes txicos,
provocados por alteraes genticas. O indivduo pode ter uma resposta adversa com
doses baixas (no-txicas) ou ento ter uma resposta extremamente intensa com doses
mais elevadas. Exemplo: sensibilidade anormal aos nitritos e outros agentes
metemoglobinizantes, devido deficincia, de origem gentica, na NADH-
metemoglobina redutase.
Reaes de hipersensibilidade ou sensibilizao
Corresponde ao aumento na suscetibilidade do organismo. Aparece aps exposio nica
ou aps meses/anos de exposio. Os principais tipos de reaes de hipersensibilidade
so:
alergia qumica - esse tipo de ao txica s desenvolvida aps absoro do
xenobitico pelo organismo e ligao com a protena formando o antgeno (o
agente txico funciona como hapteno). Com a formao do antgeno, ocorre,
conseqentemente, o desenvolvimento de anticorpos e do complexo
antgeno/anticorpo. Este complexo se liga s clulas teciduais ou basfilos
circulantes, sensibilizando-as, ou seja, desenvolvendo grnulos internos, contendo
histamina, bradicinina, entre outros. Quando ocorre uma segunda exposio do
organismo ao mesmo xenobitico, os anticorpos previamente desenvolvidos
promovem a alterao da superfcie celular com conseqente degranulizao
celular. Estes grnulos secretam na corrente sangnea histamina e bradicinina,
que so os responsveis pela sintomatologia alrgica. Essa sintomatolgia
bastante semelhante, independente do tipo de xenobitico que a desencadeou. Os
rgos mais afetados so pulmes e pele. As reaes alrgicas ou alergia qumica,
tambm conhecidas como de hipersensibilidade ou sensibilizao, so reaes
adversas que ocorrem somente aps uma prvia sensibilizao do organismo ao
agente txico, ou a um produto quimicamente semelhante.
Alguns autores no concordam que as alergias qumicas sejam efeitos txicos, j
que elas no obedecem ou apresentam uma relao dose-resposta (elas no so
dose-dependente). Entretanto, como a alergia qumica um efeito indesejvel e
adverso ao organismo, pode ser reconhecido como efeito txico.
fotoarlegia (prometazina, sabes, desodorante, hexaclorofeno): as caractersticas
deste tipo de ao txica so bastante semelhantes s da alergia qumica. A
diferena primordial entre as duas que, na fotoalergia, o xenobitico necessita
reagir com a luz solar (reao fotoqumica), para formar um produto que funciona
como hapteno. Aps a sensibilizao, sempre que houver exposio ao sol, na
presena do xenobitico, haver o aparecimento dos sintomas alrgicos.
importante ressaltar que a fotoalergia s aparece aps repetidas exposies.
fotossensiblizao (agentes branqueadores, furocumarinas): esses xenobiticos,
quando em contato com a luz solar, formam radicais altamente reativos que
produzem leses na pele, muito semelhante s queimaduras de sol. Essa reao
pode aparecer logo na primeira exposio. As leses resultantes da
fotossensibilizao podem persistir sempre que houver contato com o sol, mesmo
sem nova exposio ao agente qumico.
Efeitos morfolgicos, funcionais e bioqumicos
efeitos morfolgicos - os efeitos morfolgicos referem-se s mudanas micro e
macroscpicas na morfologias dos tecidos afetados. Muitos desses efeitos so
irreversveis como, por exemplo, a necrose e a neoplasia.
efeitos funcionais - em geral, representam mudanas reversveis nas funes dos
rgos-alvo. Essas mudanas geralmente so detectadas antes ou em exposies
a baixas doses quando comparadas s alteraes morfolgicas.
efeitos bioqumicos apesar de todos os efeitos txicos estarem associados a
alteraes bioqumicas, quando se faz referncia a efeitos bioqumicos, significa
que os efeitos manifestam-se sem modificaes morfolgicas aparentes. Por
exemplo, a inibio da acetilcolinesterase decorrente da exposio a inseticidas
organofosforados ou carbamatos.
Efeitos somticos ou germinativos
Os efeitos somticos so aqueles que afetam uma ou mais funes vegetativas e os efeitos
germinais correspondem s perturbaes determinadas nas funes de reproduo, sobre
a integridade dos descendentes e desenvolvimento de tumores.