Manual EvaluaciÃ N Corregido Anestesicos

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

AUTORES

Mara Teresa Griselda Fuentes Lara
Esperanza Jimnez Castaeda
Juana Rosado Prez
Estela Valencia Platas

COLABORADORES

Adrian Flores Barrera
Sandy Isabel Hernndez Ortega
Guadalupe Nlida Ortega Soto
Javier de Jess Pin Ortega
Karina De los santos Mendoza

Sptimo Semestre 2012
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Manual de Evaluacin de Frmacos y Medicamentos II

Tabla de Contenido

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A Manera de Prologo 3
Introduccin 4
Prctica No. 1: Valoracin del Efecto Analgsico 5
Introduccin 6
Objetivos 7
Material, Equipo y Reactivos 7
Metodologa 8
Procedimiento 1 8
Procedimiento 2 9
Cuestionario 10
Referencias 10
Prctica No. 2: Bloqueadores de la Placa Neuromuscular 11
Introduccin 12
Objetivos 12
Metodologa 13
Cuestionario 14
Referencias 14
Prctica No. 3: Anestsicos Locales 15
Introduccin 16
Objetivos 17
Metodologa 17
Mtodo 1: Uso del Simulador 17
Mtodo 2: Uso de Lombrices de Tierra 18
Cuestionario 19
Referencias 19
Prctica No. 4: Anestsicos Generales 20
Introduccin 21
Objetivos 23
Metodologa 23
Cuestionario 24
Referencias 24
Prctica No. 5: Valoracin del Efecto Anticonvulsivante 25
Introduccin 26
Objetivos 27
Metodologa 28
Cuestionario 29

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Referencias 29
Prctica No. 6: Frmacos Cardiotnicos 30
Introduccin 31
Objetivos 32
Metodologa 33
Mtodo 1: Uso del Simulador 33
Mtodo 2: Uso de la Pulga de Agua 33
Cuestionario 34
Referencias 34
Prctica No. 7: Diurticos 35
Introduccin 36
Objetivos 38
Metodologa 38
Cuestionario 40
Referencias 40
Prctica No. 8: Determinacin espectrofotomtrica de sodio en orina. 41
Introduccin 42
Objetivos 43
Metodologa 44
Cuestionario 46
Referencias 46
Prctica No. 8: Efecto de los Frmacos Hipoglucemiantes 47
Introduccin 48
Objetivos 49
Metodologa 50
Cuestionario 51
Referencias 51
Anexos 52
Anexo Prctica No.3: Simulador 52
Anexo Prctica No.6: Simulador 61
Anexo Prctica No.8: Diagramas de flujo 69

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A Manera de Prlogo

Generalmente esta parte la escribe una persona reconocida en el mbito a tratar
en el texto, pero a menudo a los lectores, y sobre todo a los estudiantes, esta persona nos
parece completamente lejana o ajena a nosotros y sus palabras no llegan a tener gran
influencia. Es por esto que decidimos aclarar que tambin somos o fuimos estudiantes de
la UNAM, tus compaeros de la FES Zaragoza, que cursamos la materia justo como ests a
punto de hacerlo t.
El Manual de Prcticas de Laboratorio de Evaluacin de Frmacos y
Medicamentos II que ahora tienes en tus manos contiene un acercamiento general a la
informacin que como profesionista requerirs y es resultado de la exigencia de cientficos
mejor preparados pero con una conciencia ms responsable con el planeta
Hoy en da, los cientficos tenemos que estar al da en la legislacin nacional e
internacional y en esta se han dado grandes avances conforme al uso y manejo adecuado
de animales de experimentacin en donde destaca la Regla de las 3R (Remplazar, Reducir
y Refinar). Es por esto que en el presente manual encontrars nuevas tcnicas de
experimentacin como simuladores computacionales, manejo de organismos de rdenes
menores y lotes experimentales de menor tamao que hoy se emplean con mayor
frecuencia en la vida profesional.
En cada prctica encontrars una pequea introduccin cuya nica finalidad es
guiarte en la bsqueda de informacin. Es fundamental comprender que todo el tiempo
necesitars buscar profundizar en el tema lo mayor posible con la idea de que tu
educacin depende principalmente de ti y de lo que quieras lograr. De la misma manera
recomendamos que tus fuentes de informacin sean lo ms actuales posible ya que la
ciencia es un mundo en constante construccin y lo que es cierto hoy puede no serlo del
todo maana.
Uno de los objetivos primordiales de este manual es que realices toda esa
bsqueda de informacin antes de la actividad en el laboratorio para que no trabajes a
ciegas, por lo cual se proponen una serie de cuestionarios que junto con la introduccin te
guiarn en la informacin bsica que debes conocer del tema.
Con toda la nueva filosofa de trabajo y una serie de pensamientos de personajes
clebres al inicio de cada prctica se pretende que el estudiante genere una educacin
universal y responsable haciendo honor al lema de la UNAM de Jos Vasconcelos POR MI
RAZA HABLAR EL ESPRITU recordando que los estudiantes de hoy sern los
profesionistas del maana que moldearn al pas y a la sociedad.
Sabemos que la carrera es pesada pero, aunque no lo creas, la humanidad
depende de ti as que no te rindas.
TUS COMPAEROS
FES Zaragoza, UNAM
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Introduccin

En la presente edicin del Manual de Prcticas de Laboratorio de Evaluacin de
Frmacos y Medicamentos II de la carrera de QUMICA FARMACUTICO BIOLGICA, se ha
tratado de mantener los criterios que en un inicio tuvieron los profesores del modulo,
respetando su valioso trabajo, pero a su vez, se implementaron algunos cambios que, a
nuestro criterio, van de acuerdo a la actualidad, sin que con ello el alumno se pierda en un
mar de informacin.
El principal objetivo de este manual, fue el crear una gua que constituyera una
herramienta eficaz para el aprendizaje, para lo cual, se tuvo el cuidado de que en cada
prctica se incluyeran los siguientes puntos:

Introduccin: Que sustenta los principios bsicos de cada prctica.
Objetivos: Proporcionan directrices a los estudiantes sobre lo que deberan saber
para desarrollar adecuadamente las prcticas.
Metodologa: Clara y precisa que facilita las actividades a realizar.
Figuras, Esquemas y Tablas: Que dan un diseo ms didctico y sencillo.
Cuestionario: Cuya funcin es indicadora del grado de conocimiento adquiridos
previos a la prctica.
Referencias: til como gua para la bsqueda de informacin adicional.
Anexos: Contienen suplementos de los simuladores computacionales as como el
tratamiento de los datos obtenidos.

Se ha procurado que todo el manual tenga el mismo formato para un mejor uso
del mismo, por todo lo anterior, desde nuestro punto de vista, el manual cumple
con su cometido, ser un texto bsico para estudiantes.

LOS AUTORES
FES Zaragoza, UNAM
Mxico 2012

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Prctica No. 1
Valoracin del Efecto Analgsico
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Tabla 1.1 Ejemplos de AINES


Introduccin
Al considerar que el trmino Analgesia proviene de los vocablos griegos, An que
significa sin y LGESIS dolor, es fcil deducir que un analgsico es cualquier frmaco que
administrado de manera adecuada disminuye o calma la Sensacin de Dolor.
En general, los analgsicos se pueden dividir en dos grandes categoras, segn su
naturaleza qumica, los opioides y los no opioides (o no esteroideos). Los opioides son de
exclusiva prescripcin mdica y su uso es ms frecuente en el paciente hospitalizado, un
ejemplo es la morfina. El nico de stos que puede ser parte del botiqun es la codena.
Dicha sustancia es muy efectiva en dolores agudos de los huesos y las articulaciones,
sobre todo despus de una ciruga.
Los analgsicos no esteroideos comprenden una amplia lista de sustancias. Estos
son los calmantes adecuados para el botiqun por su utilidad en diversos tipos de dolor y
la seguridad con que pueden ser usados a las dosis recomendadas. El prototipo de stos
es la aspirina, este grupo tambin recibe el nombre de Analgsicos Antiinflamatorios No
Esteroideos (AINES).

La mayora de los AINES, son frmacos que tienen otras propiedades como
antiinflamatorios y/o antipirticos (reducen la fiebre).
Los analgsicos Opioides incluyen los derivados de los alcaloides, ya sean
naturales o sintticos. El prototipo de estos es la Morfina, obtenida a partir de la amapola,
tambin se encuentra la Metadona, Meperidina y Propoxifeno (analgsico dbil).

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DERIVADOS DE: EJEMPLOS
cido Salicilico cido acetil-salicilico (aspirina).
p-aminofenol Acetaminofn.
cido actico Indometacina, ketorolaco y diclofenaco.
cido propionico Ibuprofeno, naproxn y oxaprozina.
Fenamatos cido mefenmico y cido meclofenmico
cidos enlicos Piroxicam, fenilbutazona y dipirona
Alcanonas Nabumetona
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Definicin del Dolor
Para poder entender cmo es que actan estos frmacos, es necesario tener una
idea de lo significa el Dolor, aunque es muy difcil hacerlo, pues es subjetivo.
La definicin ms comnmente aceptada del dolor es la proporcionada por la
Asociacin Internacional para el Estudio del Dolor (Internacional Association for the Study
of Pain, IASP):
"El dolor es una experiencia sensorial y emocional no placentera relacionada con
dao potencial o real del tejido, o descripta en trminos de tal dao. El dolor siempre es
subjetivo".
La cuestin de que el dolor siempre es subjetivo es muy importante y enfatiza que
el dolor es una experiencia somatopsquica. Aristteles se refiri a esto cuando describi
al dolor como una "pasin del alma". Esto enfatiza que una variedad de factores diversos
pueden causar o agravar el dolor, lo cual debe considerarse en la evaluacin y
tratamiento. Una definicin clnica ms prctica es:
"El dolor es lo que el paciente dice que es. Es lo que el paciente describe y no lo que los
dems piensan que debe ser. Por lo que el dolor es una respuesta del organismo ante el
dao, leve o severo y se convierte as en un signo de alerta.
La sensacin se desencadena cuando, se producen ciertas sustancias llamadas
Prostaglandinas estas sustancias a su vez generan la accin de enzimas que actan
sobre otros componentes de las clulas. Una de las enzimas que favorece la produccin
de prostaglandinas es la llamada Ciclooxigenasa, de las cuales existe la I y la II. La
primera se encuentra en todos los tejidos mientras que la segunda solo est en el rion y
en los sitios en que ocurre inflamacin y dolor es a este nivel donde actan los AINES.

Accin de los Analgsicos
Los analgsicos bloquean la produccin de las prostaglandinas necesarias para
desencadenar la sensacin del dolor, gracias a que inhiben la accin de las enzimas
denominadas ciclooxigenasas Por eso mismo, los analgsicos tienen tambin
propiedades antiinflamatorias y antipirticas (controlan la fiebre). El Acetaminofn es el
nico cuya forma de accin no afecta las prostaglandinas.
El otro mecanismo de accin es mediante la fijacin a los receptores opiceos
produciendo analgesia; a nivel del SNC bloqueando y modulando las seales dolorosas a
los cordones espinales y cerebro, esta accin es caracterstica del el D-Propoxifeno
(dextropropoxifeno)

Objetivo
Observar y valorar el efecto analgsico del Propoxifeno en ratn, administrado en
dosis variadas por va intraperitoneal (I.P.) valorando el efecto a diferentes
tiempos.

Material, Equipo y Reactivos
MATERIAL BIOLGICO
Cinco ratones adultos (20-30gramos)

MATERIAL Y EQUIPO
Una pinza de mosco con mango de hule (tipo caimn)
Dos jeringas de 1 mL (tipo insulina)
Una balanza granataria con canastilla para pesar animales.
Un reloj
REACTIVOS

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Analgsico (Propoxifeno u otro similar)
Solucin salina

Metodologa
El mtodo que se utilizar, se basa en producir dolor experimentalmente en los
animales de laboratorio, y medir el tiempo en que tarda en aparecer una conducta o
sntoma indicativo del dolor. Este procedimiento se lleva a cabo en ausencia y en
presencia del analgsico.
Los mecanismos para producir dolor son fsicos (se aplica una pinza sobre la cola
del animal, se coloca al animal sobre una placa caliente o bien se sumerge la cola en
agua a 50 C), y qumicos (se inyecta un agente qumico al animal).

Procedimiento 1
1. Colocar la pinza de mosco (o caimn) a 1 cm de la base de la cola del ratn.

Imagen 1.
Forma correcta de
colocar el caimn
en la base de la
cola del ratn.

2. La respuesta positiva al dolor se caracteriza por vocalizacin y/o movimientos para
alcanzar o morder la pinza, en un lapso de 10 segundos. En caso contrario,
deseche al anormal y tome otro.
3. Enseguida pese y numere a cada
ratn.
4. Administre a cada ratn por I.P. la
dosis del frmaco (asignada
aleatoriamente) de acuerdo a la
siguiente tabla:

Tabla 1.2 Dosis de Administracin

Preparar soluciones a partir de la solucin madre de 10 mg/mL,
para inyectar 0.1 mL de cada solucin por 10 g de peso.

5. Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo.
Imagen 2.
Administracin
Intraperitoneal en
ratn.

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RATN Dosis (mg/Kg)
1 100 (solucin 10 mg/mL)
4 35 (solucin 3.5 mg/mL)
5 Control 0.1 mL Solucin Salina/ 10g
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Tabla 1.3 Resultados por Equipo
Tabla 1.4 Resultados por Grupo


6. Aplique nuevamente la pinza arterial de la manera antes descrita, a los 15', 30',
60', y 90', y evale la respuesta de cada ratn.
7. Si muerde la pinza (positivo al dolor) no existe analgesia.
8. Si no muerde la pinza (negativo al dolor) existe analgesia.
9. Anote sus resultados en la siguiente tabla:

10. Los resultados de todos los equipos se anotarn en la tabla 1.4.

11. Con los resultados obtenidos construya una curva de tiempo vs efecto para
cada dosis. 12. Si los resultados lo permiten, calcule la dosis efectiva
media (DE50) con el tiempo de efecto mxime
Procedimiento 2
Existe una variante del mtodo 1, que consiste en lo
siguiente:

1. Calentar aproximadamente 100 mL de agua a 50 C.
2. Colocar un ratn dentro de un cono (o algo
parecido), de tal manera que la cola salga del mismo.
Imagen 3.
Ratn en
cono con
cola saliendo

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RATN DOSIS MG/KG VALORACIN DEL EFECTO
15' 30' 60' 90'
1
2
3
4
5
DOSIS MG/KG LOG Dosis
Animales (sin dolor)
Animales Probados
% RESPUESTA
15' 30' 60' 90' 15' 30' 60' 90'
100
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3. Introducir la mitad de la cola por 10 segundos en el agua.
4. La respuesta positiva al dolor se caracteriza por
vocalizacin y/o movimientos bruscos para extraer la cola
del agua o salir del cono. En caso contrario, deseche al
animal y tome otro.
5. Enseguida pese y numere a cada ratn.
6. Administre a cada ratn por va I.P. la dosis del frmaco
(asignada aleatoriamente) de acuerdo a la tabla 1.2.
7. Una vez administrado el frmaco, mida el tiempo.
8. Repita los pasos del 1 al 3 a los 15', 30', 60', y 90',

9. Evale la respuesta de cada ratn.
10. Si su actitud no es agresiva, es decir, si no le afecta el agua
caliente, existe analgesia.
Imagen 4.
Ratn en agua
caliente

11. Anote sus resultados en la tabla 1.3.
12. Los resultados de todos los equipos se anotarn en al tabla 1.4.
13. Con los resultados obtenidos construya una curva de tiempo vs efecto para cada
dosis.
14. Si los resultados lo permiten, calcule la dosis efectiva media (DE50) con el tiempo
de efecto mximo.

Cuestionario
1. Describa el papel que juegan las prostaglandinas en el dolor.
2. Cul es el mecanismo de accin analgsica de la aspirina, naproxeno y
piroxicam?
3. Cul es el mecanismo de accin del Propoxifeno?
4. Qu funcin tienen las Ciclo-oxigenasas 1 y 2, y como afectan al organismo?
5. Cules son las teoras del dolor y que dice cada una de ellas?
6. Cul es la norma oficial mexicana que aborda el manejo y sacrificio correcto de
los animales empleados en el laboratorio?
7. Realice una gua de manejo y sacrificio para ratas, ratones, conejos y ranas.

Referencias
1. Goodman L.S.& Gilman A. 1996. The Pharmacological Basis of Therapeutics. 9a.
edicin. McGraw Hill. U.S.A.
2. Barastegui, AC, Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Espaxs, Espaa 1976.
3. Bertrand G. Katzung, Farmacologa Bsica y Clnica, 8a ed. Manual Moderno, Mxico
2002.
4. NOM-062-Z00-1999 Especificaciones Tcnicas para la Produccin, Cuidado y Uso
de los Animales de Laboratorio.

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Prctica No. 2

Bloqueadores de la Placa
Neuromuscular
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Introduccin
Durante el siglo XVI los exploradores europeos encontraron que los nativos de la
cuenca del Amazonas usaban un veneno en la punta de sus flechas que produca la
muerte.
Despus de muchas investigaciones se encontr que el curare es el extracto crudo
activo de varias especies de plantas cuyo principio activo es la D-tubocurarina.
El msculo esqueltico voluntario est inervado por neuronas motoras cuyos
axones son capaces de conducir potenciales de accin a altas velocidades. Al rea del
msculo que yace junto a la terminacin axnica se le conoce como placa motora y a la
sinpsis qumica que existe entre ambas como unin neuromuscular.
Los frmacos que actan en la unin neuromuscular pertenecen a dos grupos:

PRESTNPTICOS:
Frmacos que inhiben la sntesis de acetilcolina por ejemplo hemicolinio.
Frmacos que inhiben et almacenamiento de la acetilcolina en las vesculas por
ejemplo el AH5183.
Frmacos que inhiben la liberacin de acetilcolina por ejemplo la estreptomicina.

POSTSINPTICOS
Frmacos no despolarizantes. Antagonistas competitivos de los receptores
nicotnicos de la acetilcolina. Ejemplo la D-tubocurarina'
Frmacos despolarizantes. Activan los receptores nicotnicos produciendo una
despolarizacin inicial, pero bloquean la accin subsecuente de los receptores.
Ejemplo la succinilcolina.

Estructura de la Succinilcolina

Objetivo
Demostrar experimentalmente el efecto de la succinilcolina en la unin
neuromuscular de ratones balb/c.

Material, Equipo y Reactivos.

MATERIAL BIOLGICO
4 ratones balb/c.

MATERIAL Y EQUIPO
2 cajas para ratones.
1 rejilla para caja de ratones
4 jeringas de 1mL
Vaso de precipitados de 1L

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Mechero Bunsen con manguera
Tripie
Toalla o trapo absorbente
Balanza granataria con canastilla para pesar animales
Cronometro

REACTIVOS
Solucin de succinilcolina
Solucin salina

Metodologa

Prueba de escalada.
1- Por equipo tomar 4 ratones balb/c en una
caja con tapa (reja).
2- Pesar cada uno de los ratones en una
balanza con canastilla y registrar los valores
marcando la cola de cada ratn para su
posterior identificacin (del 1 al 4).
3- Inclinar la tapa de la caja de los ratones para
que forme un ngulo de 80 con respecto a la
mesa y poner a escalar cada uno de los ratones.

Prueba de nado.
4- En una segunda caja para ratones colocar
agua hasta a mitad.
5- Calentar agua con un mechero bunsen en
un tripi y mezclar con el agua de la caja,
midiendo la temperatura hasta obtener un
valor entre 35C y 38C.
6- Tomar el ratn marcado con el nmero 1,
que previamente ya escal la reja, e
introducirlo con cuidado al agua para que
nade 30 segundos aproximadamente.
7- Sacar de la caja y secar al ratn
perfectamente con una toalla, cuidando
mantenerlo caliente para evitar que muera por
hipotermia.

Administracin del frmaco y pruebas.
8- Por medio del peso del ratn y la
concentracin de la solucin de
succinilcolina hacer el ajuste para
administrar al ratn 1 una dosis de 0.7
mg/Kg va intramuscular.
9- Inmediatamente despus repetir la prueba
de escalada y registrar el tiempo que tarda
el ratn en caer por no poderse sujetar
correctamente.

Imagen 3.
Imagen 1.
Prueba de escalada con
rejilla a 80 de inclinacin.

Imagen 2.
Prueba de nado en caja
con agua a 35-38C.
Administracin intramuscular en ratn.

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10- Sucedido lo anterior repetir la prueba de nado y registrar el tiempo que tarda el
ratn en no poder nadar ms.
11- Repetir la prueba de escalada y de nado hasta que el efecto pas y registrar el
tiempo transcurrido.
12- Continuar de la misma forma con los ratones 2 a 4 uno tras otro (No realizar las
pruebas simultneamente) administrando dosis de 0.9 mg/Kg y 1.1 mg/Kg a los
ratones 2 y 3. Al ratn 4 se le administra 0.1 mL/g de peso de solucin salina
(Control).
13- Reportar los resultados en la siguiente tabla:

Cuestionario
1. Haga un esquema de la placa neuromuscular.
2. Cmo se clasifican los frmacos que actan en la unin neuromuscular? Indique
cada grupo.
3. Describa el mecanismo de accin d la succinilcolina.
4. Menciona el perfil farmacocintico de la succinilcolina.
5. Usos clnicos y efectos adversos de la succinilcolina.
6. lnvestiga las interacciones farmacolgicas de la succinilcolina.
7. Qu pasa al estimular directamente el msculo?, Por qu?

Referencias
1. Goodman, L.S. & Gilman A. 1996. The Pharmacological Basis of Therapeutics. 9a.
edition. McGraw HiII. U.S.A.
2. Flores J. 2000. Farmacologa Humana. Masson Barcelona.
3. Rang H, Dale M. y Ritter J. 2000. Farmacologa. 4a. edicin., Harcourt. Espaa
4. Taylor M. y Reide P. 1999. Harcourt. Espaa.
5. Velasc A. 2003. Farmacologa. McGraw Hill. Espaa.

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Ratn Dosis
(mg/kg)
Tiempo de latencia Tiempo de duracin
del efecto
Tiempo de
recuperacin
1
2
3
Control
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Prctica No. 3
Anestsicos Locales
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Introduccin.
Los anestsicos locales son frmacos que previenen o alivian el dolor al
interrumpir la conduccin nerviosa. Cuando se aplica de manera local en el tejido nervioso
en concentraciones apropiadas, actan en cualquier parte del sistema nervioso en
cualquier tipo de fibra nerviosa. Este grupo de frmacos no produce inconciencia y su sitio
de accin es la membrana celular de las clulas excitables, como la membrana nerviosa.
El uso efectivo y seguro de los anestsicos locales requiere no solo que los frmacos
bloqueen la conduccin de algunos nervios, sino tambin que esta accin sea rpida y
totalmente reversible y que no tenga efectos txico sistmicos mayores.
Mecanismo de accin: El aspecto singularmente mas importante de las acciones
de los anestsicos locales es la reduccin del aumento transitorio de la permeabilidad al
sodio asociada con la fase de ascenso es decir la despolarizacin- del potencial de
accin. Esta reduccin de la permeabilidad al sodio se debe a los efectos de los frmacos
sobre los canales de la membrana del sodio sensibles al voltaje.
Los anestsicos locales son aminas de pKa que varia entre 8 y 9. Por lo tanto
puede existir en solucin como la especie cargada (catinica) o no cargada, y el pH
depender del medio, Fig. 3.1. La lidocana (xilocana) y la procana (novocana) se
consideran agentes prototipo de los anestsicos locales. La lidocana introducida en 1948,
actualmente es uno de los anestsicos locales ms ampliamente utilizados. La estructura
se muestra en la Fig. 3.1. se utiliza como anestsico local en procedimientos
odontolgicos, en el tratamiento de disritmias ventriculares (especialmente cuando estas
se presentan ene le infarto de miocardio o en ciruga cardiaca), atenuacin de la
respuesta vaspresora (presin arterial sistmica/presin intracraneana) en la intubacin y
en la atenuacin de las fasciculaciones provocadas por succinilcolina.

Fig. 3.1.
Estructura qumica de un anestsico local

FARMACOCINETICA DE LA LIDOCANA: inicio, rpido: duracin, moderada (60-120 min); T1/2 1.6 h; Vd de
91 L; depuracin, 91 L/min; unin a protena del 65%. Efecto: antiarrtmico. Sedacin, bloqueo nervioso;
disminuye la conduccin de los canales de sodio. Su eliminacin es por metabolismo heptico produciendo
metabolitos activos y txicos; eliminacin renal (10% sin metabolizar). Toxicidad: los efectos adversos de la
lidocana que se observan al aumentar la dosis consisten en vrtigo, convulsiones, desorientacin, bloqueo
cardiaco o hipotensin arterial. Concentracin srica teraputica = 1.5 mg/L

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Objetivos
Por medio del uso de un programa de simulacin que el alumno aprenda el efecto
de los anestsicos locales al aplicar un estimulo nervioso.
Demostrar el bloqueo del impulso nervioso por la accin de un anestsico local, al
aplicar un estmulo en una preparacin citico-gastrocnemio por medio del uso de
un programa de simulacin.
Que el alumno de manera practica conozca el efecto de los anestsicos locales al
aplicar un estimulo nervioso (qumico, fsico o trmico).


PARTE 1 (1 Sesin)
MATERIAL BIOLGICO
NO

MATERIAL Y EQUIPO
Computadora personal con simulador instalado

REACTIVOS
NO

PARTE 2 (2 Sesin)
MATERIAL BIOLGICO
Lombrices de tierra.

MATERIAL Y EQUIPO
Termmetro
Mechero
Tripi
Vaso de precipitados de 600 ml
Aguja

REACTIVOS
Lidocana 2%
Acido clorhdrico 0.1 N

Metodologa

Mtodo 1: Uso del Simulador

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1. DETERMINACION DEL ESTIMULO UMBRAL
1.1- Seleccionar Fisiologa del impulso nervioso.
1.2- Seleccionar en men EXPERIMENTO: Inhibir efecto nervioso.
1.3- Fijar el voltaje a 1.0 V.
1.4- Pulsar ESTIMULAR.
1.5- Aumentar el voltaje en 0.5 V hasta obtener respuesta.
1.6- Guardar el valor umbral.

2. INHIBICIN CON LIDOCAINA
2.1- Borrar grfica anterior.
2.2- Seleccionar gotero con lidocana.
2.3- Aplicar lidocana entre los electrodos.
2.4- Pulsar ESTIMULAR y guardar.
2.5- Presionar el botn LAVAR.
2.6- Presionar ESTIMULAR y guardar.

REPETIR EL MISMO PROCEDIMIENTO EN EL SIMULADOR CON EL CURARE Y EL
ETHER, REGISTRAR Y OBSERVAR LOS CAMBIOS QUE SE EFECTUAN AL
ADICIONAR CADA SOLUCION.

Mtodo 2: Uso de lombrices de tierra.

3. EFECTO DE LA LIDOCANA EN LOMBRIZ DE TIERRA.

3.1- ESTMULO QUIMICO.
3.1.1- Tomar tres lombrices y colocarlas en una caja Petri.
3.1.2- Colocarles tres gotas de HCL 1.0N en la cola de la lombriz (zona
ms anillada), observar la reaccin de la lombriz.
3.1.3- Despus de haber observado la reaccin de la lombriz colocarle
unas gotas de lidocana dejar reaccionar aproximadamente 5 min.
3.1.4- Pasados los 5 min de efecto de la lidocana adicionar nuevamente
unas gotas de HCl 0.1 N observar y registrar los resultados.

3.2- ESTMULO TRMICO.
3.2.1- Calentar agua a 40C.
3.2.2- Colocar tres lombrices en una caja Petri.
3.2.3- Dejar caer de manera continua y con ayuda de una pipeta pasteur
agua previamente calentada a 40 C y observar si reaccionan, de no ser
as intentarlo con otras lombrices hasta ver que reaccionen.
3.2.4- Seguir calentando el agua hasta los 50 C.
3.2.5- Colocar unas gotas de lidocana e la cola de las lombrices dejar 5
min a que haga el efecto anestsico.
3.2.6- Pasados los 5 min verter de manera contante un poco de agua
previamente calentada a 50 C.
3.2.7- Observar si reaccionan o no y registrarlo.

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3.3- ESTMULO FSICO.
3.3.1- Colocar tres lombrices en una caja Petri.
3.3.2- Picar la cola de la lombriz (la zona ms anillada y mvil) con una
aguja, observar la reaccin de la lombriz.
3.3.3- Adicionar unas gotas de lidocana y dejar hacer efecto por un
aproximado de 5 min.
3.3.4- Tras pasar los 5 min volver a picar la cola de la lombriz con la
misma aguja observar y registrar si hubo o no reaccin.

Cuestionario
1. Mencione brevemente el mecanismo de accin de un anestsico local.
2. La estructura qumica de un anestsico local consta de:
3. En la preparacin citico-gastrocnemio, menciona el sitio de accin del anestsico
local.
4. Que se observa al colocar los electrodos directamente en el msculo?
5. Usos clnicos de los anestsicos locales.
6. Por qu se tiene que descerebrar y desmedular a la rana en la preparacin
citico-gastrocnemio?
7. Defina Umbral de excitacion
8. Al aadir un vasoconstrictor, como la adrenalina a un anestsico loca, la absorcin
aumenta o disminuye.

Referencias
1. William Catterall y Kenneth Mackie. Anestsicos locales. In Goodman and Gilman,
las bases farmacolgicas de la teraputica, 9th ed. (Ardian JUL, Limbird LE,
Molinoff PB, Rudon RW Eds). Ed. McGrawn-Hill. Inc., New York 1996.
2. Cedric M. Anestsia local y anestsicos locales. In farmacologa, 1. Ed. (Smith,
CM., Reynard, AM Eds). Buenso Aires, Argentina, 1993, pp. 219-230
3. Mary J, Myce, Sheldon B, Gertner, Maria Mena Perper. In farmacology,
Lippincotts illustrated Reviews. (Harvey RA., Champe PC Eds) J.B. Lippincott
Company, 1992.

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Prctica No. 4
Anestsicos Generales
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Introduccin
La definicin de anestesia general ha sufrido pocas modificaciones desde su
descubrimiento en 1845, con las experiencias de Wells con xido nitroso y de Morton en
1846 con ter. Clsicamente, se la ha definido como una depresin descendente y
controlada de las funciones del SNC inducidas farmacolgicamente. Otra forma ms
prctica de definir la anestesia general es en funcin de los objetivos que persigue, como
un estado reversible de depresin del SNC, caracterizado por prdida de la conciencia
(hipnosis), de la sensibilidad (analgesia), de la actividad refleja (proteccin
neurovegetativa) y de la motilidad (relajacin muscular).
En la actualidad se habla de estado anestsico, que se define como el resultado
de la accin combinada y dinmica de diversos efectos farmacolgicos que pueden
aparecer por la activacin de diversos grupos de receptores, dando lugar a hipnosis,
analgesia, bloqueo de la unin neuromuscular, amnesia y bloqueo de la respuesta
vegetativa al estrs. Dinamismo (cambio de las necesidades de efecto farmacolgico) y
sinergia (potenciacin de los efectos) son dos aspectos fundamentales en la combinacin
necesaria para mantener este estado anestsico.
Al obtener mayor informacin sobre el mecanismo de accin de los anestsicos
generales, se han diferenciando dos componentes fundamentales en la representacin
grfica del concepto de anestesia moderna. Un componente sera el cortical, que
integrara inconsciencia y amnesia, y el segundo o subcortical, que correspondera a la
antinocicepcin (analgesia) y la estabilidad motora y autnoma (relajacin muscular y pro-
teccin neuro vegetativa).
A pesar de las investigaciones realizadas, an no est claro el mecanismo de
accin de los anestsicos generales. Se ha considerado que los agentes
anestsicos generales eran frmacos de accin inespecfica que modificaban las
propiedades fisicoqumicas de la membrana neuronal.
Meyer y Overton postularon la teora de un lugar de accin lipofilo y relacionaron la
potencia del anestsico con su solubilidad lipdica.
En la actualidad se piensa que los anestsicos generales ejercen su efecto en la
transmisin sinptica y no en la conduccin axonal. Actuaran fundamentalmente
sobre protenas y no sobre lpidos, de forma que los estudios que se realizan en la
actualidad se dirigen a los mecanismos moleculares de la anestesia.
Una serie de receptores, canales de iones (Ca
2+
, K
+
) dependiente de voltaje,
canales de iones dependientes de ligando (GABA, NMDA) y neurotransmisores se
han considerado lugares especficos en los que actuaran los anestsicos gene-
rales.
Coeficiente de particin sangre/gas. El agente inhalatorio pasa desde el alvolo a la
sangre para luego llegar al cerebro. Este coeficiente informa de la solubilidad en sangre
(agua) del frmaco y es, por lo tanto, inversamente proporcional a la rapidez de su accin.
Coeficiente de particin aceite/gas. El tejido cerebral es rico en lpidos. Cuanto ms
liposoluble sea el agente, ms se retendr en el SNC. Por lo tanto, es un ndice
directamente proporcional a la potencia del agente anestsico.

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Etapas de la anestesia
Perodo I: induccin-analgesia. Abarca desde el inicio de la anestesia hasta la
prdida de conciencia. Se comprueba la ausencia de respuesta a las rdenes verbales,
no hay prdida de respuesta al dolor, aunque el grado de analgesia depende del tipo de
anestsico empleado.
Perodo II: excitacin o delirio. La respiracin es irregular, hay retencin de la
respiracin, posibilidad de laringospasmo y secreciones. El ritmo cardaco aumenta e
incluso puede haber arritmias. La respuesta a estmulos fsicos est aumentada. Es el
periodo de mayor peligro para el paciente porque pueden aparecer complicaciones, como
obstruccin de las vas respiratorias superiores por relajacin de la musculatura de la
faringe, laringospasmo, regurgitacin o aspiracin del contenido gstrico, acumulacin
excesiva de secreciones e hipotensin secundaria a una depresin miocrdica o a
vasodilatacin perifrica.
Los dos primeros perodos constituyen la induccin, que se caracteriza por la
prdida rpida de la conciencia y el paso al plano superficial de la anestesia quirrgica.
Perodo III: anestesia quirrgica propiamente dicha: En este periodo, que incluye
cuatro planos, la respuesta somtica a los estmulos disminuye progresivamente hasta ser
nula en la anestesia profunda. Al principio, el ritmo cardaco y la frecuencia respiratoria
son regulares, pero sta va deprimindose hasta presentar apnea. La frecuencia cardaca
se mantiene estable en cuanto al ritmo, pero se inicia un ligero descenso de la presin
arterial; se produce relajacin muscular.
Perodo IV: parlisis bulbar. Se produce por depresin de los centros bulbares
hasta el paro respiratorio, coma y muerte. Esta situacin puede ocurrir por un accidente
anestsico al profundizar la anestesia.

Tipos de anestesia general
Segn el tipo de frmaco empleado para garantizar la hipnosis, se distinguen los
siguientes tipos de anestesia:
Monoanestesia. Se empleaba un solo frmaco. Este tipo era caracterstico en las
anestesias con ter y cloroformo.
Anestesia general balanceada. Generalmente se utiliza un inductor hipntico
intravenoso, se mantiene con un agente inhalatorio y se combinan con opioides y
relajantes musculares.
Anestesia intravenosa total. Se emplea propofol como inductor y en perfusin para
el mantenimiento de la hipnosis. Se prescinde por completo de los inhalatorios y
se emplean analgsicos y relajantes musculares.
Anestesia con induccin y mantenimiento inhalatorio total. Se emplea un agente
inhalatorio para la induccin anestsica (generalmente sevoflurano) y se mantiene
la hipnosis con l. No se utiliza propofol ni otros hipnticos intravenosos. Se
combina con analgsicos centrales y relajantes musculares.
Neuroleptoanestesia. Se empleaban neurolepticos (deshidrobenzoperidol)
asociados a opiceos. Mayor efecto antiemtico, despertar ms lento. En desuso.
Anestesia analgsica. Se basa en el efecto hipntico colateral de los opioides
cuando se emplean en dosis muy altas. Muy empleada en ciruga cardaca.

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Anestesia disociativa. Se emplea ketamina como hipntico. No tiene efecto
depresor cardiorrespiratorio y proporciona una analgesia eficaz.

Objetivo
Demostrar la anestesia general en camarones, producida por frmacos o
sustancias con propiedades anestsicas.
Identificar las etapas de la anestesia general
Identificar el tiempo en que produce su efecto el frmaco, y el tiempo de
recuperacin del camarn

MATERIAL BIOLGICO
Cuatro camarones de tamao mediano.
MATERIAL Y EQUIPO
Dos Peceras
Bomba para oxigenacin
Vaso de precipitados 500 mL
Jeringas de 1 mL
REACTIVOS
Metodologa
1. Colocar los camarones en una pecera
con oxigenacin, para observar su
comportamiento inicial, si es necesario
inducir el movimiento con ayuda de una
varilla de vidrio, picando en los costados
del camarn.
3. Colocar uno de los camarones en la

pecera con halotano y picar de la misma
forma con la varilla de vidrio. Registrar
el tiempo de latencia.
4. Segui r regi strando el t i empo de
excitacin (sobrerreaccin al estmulo),
hipnosis (movimiento pero no reaccin
al estmulo) y anestesia (se voltea
completamente de cabeza y se encorva)
5. Cambiar al camarn a la pecera con
oxigenacin y registrar el tiempo de
Imagen 1.
Camarn mediano y 3
camarones pequeos en pecera.

recuperacin.
Imagen 2.
Estimulo con
varilla de vidrio.

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2. En otra pecera colocar 0.5 ml de
cloroformo en 500 mL de agua.
ISOLFURANO Y CLOROFORMO
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Cuestionario
1. Cul es el mecanismo de accin de los anestsicos generales?
2. Mencione las etapas de la anestesia general.
3. Qu otros frmacos adems del halotano existen como anestsicos generales?
4. Qu otras sustancias se administran en conjunto con los anestsicos generales y
cmo funcionan?
5. A qu se refiere el CAM de un anestsico general y que representa?
6. Qu es el coeficiente de particin?

Referencias
1. Goodman & Gillman's, Las bases Farmacolgicas de La teraputica, 10
a
ed.,
Me. Graw Hill, Mxico 2003
2. BertrandG. Katzung, Farmacologa Basica y Clnica, 8a ed., Manual Moderno,
Mxico 2002

24
6. A la pecera con cloroformo agregar otros 0.5 ml de este ANESTSICO y colocar
al otro camarn.
7. Realizar el mismo procedimiento que con el primer camarn, con el isoflurano, solo
que adicionando en el primer paso 1.0 ml de ste y en la segunda ocasin 0.5 ml.
ANEXO
3. C. Barastegui Almagro. Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Editorial Espax, 1976,
Barcelona, Espaa.
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Prctica No. 5

Valoracin del Efecto
Anticonvulsivante
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Introduccin
El trmino epilepsia, es una enfermedad crnica que se refiere a un grupo de
sndromes del SNC, caracterizado por accesos de descargas neuronales sincrnicas
sostenidas, los cuales son sbitos, transitorios y recurrentes. Afectan los siguientes
sistemas: autonmico, psquico, sensitivo y motor, creando gran variedad de signos y
sntomas. El trmino convulsin se utiliza como sinnimo de epilepsia. La etiologa es
multifactorial (causas metablicas, defectos cerebrales congnitos, prenatales, perinatales
(durante el parto), postnatales y convulsiones provocadas por agentes qumicos).
Como ejemplos tenemos: hipoglucemia, hidrocefalia, infecciones, dao cerebral
por parto prolongado, cisticercosis y las provocadas por pentilentetrazol, etc. Son varios
los mecanismos neurofisiolgicos y bioqumicos que intervienen en la enfermedad:
cambios bioqumicos locales, isquemia, prdida de sistemas inhibitorios vulnerables,
descargas sincrnicas de otras clulas, etc.
Las crisis epilpticas se clasifican en:

1- Parciales (focales y locales)
a. Parciales simples
b. Parciales complejas
c. Parciales generalizadas de tipo secundario
2- Crisis Generalizadas Convulsivas o No Convulsivas
a. Crisis de ausencia
b. Crisis de ausencia atpicas
c. Mioclnicas
d. Clnicas
e. Tnicas
f. Tonico clnicas (Gran Mal) status epilptico
g. Atnicas

Por lo tanto, para tratar la epilepsia se debe descartar si hay un solo tipo de crisis o
si se presentan varios tipos ya que de eso depende un buen tratamiento.
Los anticonvulsivos se clasifican en varios grupos para tratar los diferentes tipos
de crisis:
1- Hidantoinas: hidantoina (Canales de Na
+
)
2- Iminoestilbenos: carbamazepina (Canales de Na
+
)
3- Barbitricos: fenobarbital (Mediadores GABA)
4- Desoxibarbitricos: primidona
5- Succimidas: etosuccimida (Canales de Ca
2+
)
6- Oxazolindionas: parametadiona (Canales de Na
+
)
7- Benzodiacepinas: diacepam (Mediadores GABA)
8- Otros grupos: cido valproico (Canales de Na
+
)

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Los ms utilizados para crisis generalizada son las hidantoinas y la carbamazepina
y para las ausencias la etosuccimida. Para el estado epilptico el ms recomendable es el
Diazepam.

Estructura del Diazepam

El mecanismo de accin de los anticonvulsivos (del tipo benzodiacepinas) es
disminuir la entrada de calcio por bloqueo de los conductos de sodio (despolarizacin) y
potenciar los efectos inhibitorios debido a la estimulacin de vas GABAergicas por
aumento de descargas de abertura de los canales de cloro.
Para la valoracin de nuevos medicamentos, se utiliza el pentilentetrazol para
crear crisis convulsivas. Esto provoca hipoxia por espasmo vascular lo que ocasiona
cambios degenerativos en la corteza cerebral debido al antagonismo fisiolgico.

Objetivos
Demostrar el efecto anticonvulsivante del diazepam en las convulsiones
producidas por el pentilentetrazol,
Observar que tipo de convulsiones produce el pentilentetrazol.


MATERIAL BIOLGICO
Dos ratas Wistar

MATERIAL Y EQUIPO
Dos jeringas para insulina

REACTIVOS
Solucin de Pentilentetrazol de 65 mg/mL
Diazepam de 5 mg/mL

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Tabla 1: Anlisis del efecto Preventivo
Tabla 2: Anlisis del efecto Anticonvulsivo


Metodologa

1. Pesar cada rata y marcarlas, una se usar para probar el efecto preventivo y en la
otra el efecto curativo del diazepam.
2. En la rata marcada como 1,administrar diazepam 2mg/kg va intraperitoneal
3. Esperar 20 minutos.
4. Aplicar una dosis de pentilentetrazol 64mg/kg va intraperitoneal.
5. Observar si se presenta algn tipo de convulsin.
6. En caso de que ocurra se anota la latencia del pentilentetrazol y tipo de
convulsin.
7. Para observar el efecto curativo del diazepam, administrar a la rata marcada como
2, una dosis de 64mg/kg de pentilentetrazol va intraperitoneal.
8. En cuanto aparezca la convulsin aplicar la dosis de diazepam 2mg/ kg va
intraperitoneal.
9. Tomar el tiempo de latencia para el inicio del efecto del diazepam.
10. Realizar el sacrificio de los animales con ayuda de cloroformo.
11. Anote sus resultados en las siguientes tablas

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Equipo Tiempo de latencia del Diazepam No Convulsion
1
2
3
4
5
6
Equipo Tiempo de latencia del Pentilentatrazol No Convulsion
1
2
3
4
5
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Cuestionario
1. Defina estado epilptico
2. Escriba la clasificacin de las crisis convulsivas
3. Escriba la clasificacin de los anticonvulsivos
4. Escriba y analice el mecanismo de accin de los anticonvulsivos
5. Cules son los efectos adversos generales de los anticonvulsivantes?
6. Describa la farmacocintica del Diazepam
7. Cules son los efectos adversos del Diazepam?
8. Cules son los usos clnicos del Diazapam y del Pentilentetrazol?
9. Cules son las interacciones del Diazepam?

Referencias
1. Hardman, J. Limbird L. Molinof P. Ruddon R. and Goodman A. 1996. Goodman &
Gilman. Las Bases Farmacolgicas de la Teraputica. 9 Edicin. Vol. 1. Ed.
McGraw Hill Interamericana. E.U.
2. Katzung, B. 2001. Farmacologa Bsica y Clnica. 8 Edicin. Ed. Manual Moderno,
Mxico.
3. Smith, C. Reynard A. 1993. Farmacologa. Ed. Mdica Panamericana. Argentina.

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Prctica No. 6

Frmacos Cardiotnicos
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Introduccin
Los digitlicos son los cardiotnicos ms antiguos utilizados en el tratamiento de la
insuficiencia cardiaca congestiva (lCC). Son sustancias de origen natural, cuya fuente
importante de obtencin es la Digitalis purprea o Digitalis lanata y el prototipo es la
digoxina, medicamento compuesto por un ncleo esteroidado con un anillo lactona de
cinco miembros no saturados en posicin 17 y una serie de azcares unidos al carbono 3
del ncleo, cuya relacin estructura-actividad le confiere las actividades farmacocinticas
y farmacodinmicas. Siendo el ncleo esteroide y la lactona responsables de su actividad
cardiotnica, los residuos glucosdicos influyen en la absorcin, la vida media y su
biotransformacin.

Actividad Farmacocintica

Actividad Farmacolgica

Digoxina

La digoxina tiene un margen de seguridad muy estrecho, lo que lleva a presentar
con facilidad efectos txicos. Su mecanismo de accin molecular lo ejerce inhibiendo la
Na
+
, K
+
ATPasa lo que se manifiesta en mltiples efectos cardiovasculares tanto directos
como indirectos, asi como modificacin del funcionamiento mecnico y elctrico del
corazn lo que se traduce en aumento de la fuerza de contraccin o inotropismo positivo y
una disminucin del automatismo y decremento en la velocidad de conduccin del
sistema de Purkinje o conotropismo negativo. Los efectos txicos de estas sustancias son
en gran medida consecuencia de una manifestacin exagerada de su mecanismo de
accin como sera: bradicardia y paro sinusal, bigeminismo, bloqueo aurculo-ventricular
de segundo grado y otros tipos de arritmias cardiacas, hasta llegar al paro cardiaco.
Todas estas manifestaciones, tienden a ser compensadas o antagonizadas por el Sistema
Nervioso Autnomo del organismo como el sistema Simptico y Parasimptico.

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Objetivo
Se alcanzar y demostrar el efecto txico de un glucsido cardiaco (digoxina)
aplicado al corazn de la pulga de agua
Se demostrarn los efectos inotrpicos positivos y cronotrpico negativos de la
digoxina aplicada al corazn de la pulga de agua
Se compararan los efectos producidos de la digoxina con otras substancias
cardiotnicas administradas a la pulga de agua


PARTE 1 (1 Sesin)
MATERIAL BIOLGICO
NO

MATERIAL Y EQUIPO
Computadora personal con simulador instalado

REACTIVOS
NO

PARTE 2 (2 Sesin)

MATERIAL BIOLGICO
Pulgas de agua (1 bolsa por grupo)

MATERIAL Y EQUIPO
Microscopio
Cronometro
1 Caja de Petri
2 Pipetas Pasteur
6 jeringas de 1 ml
2 Portaobjetos

REACTIVOS
Digoxina
Epinefrina
Atropina
Pilocarpina
Solucin de cloruro de sodio al 2% p/v
Solucin de cloruro de potasio al 2% p/v
Solucin de cloruro de calcio al 2% p/v

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Metodologa


1.1.Estimulacin elctrica
1.1.1 Seleccionar el ejercicio de Fisiologa cardiovascular de rana en el
men principal
1.1.2 En la barra superior dar click a experimento y seleccionar
Estimulacin elctrica
1.1.3 Tomar el electrodo para la estimulacin directa, y colocarlo en el
soporte
1.1.4 Observar el ritmo cardiaco basal y proceder a estimular el corazn
Ensayar para estimulos simples y mltiples.
1.1.5 Una vez visualizados los efectos proseguir con la estimulacin del
nervio vago con el otro electrodo.
1.2. Modificadores de la frecuencia cardiaca
1.2.1 Seleccionar el experimento de frecuencia cardiaca en la barra
superior
1.2.1 observar la frecuencia cardiaca y guardar datos
1.2.2 Seleccionar una solucin y aplicar sobre el corazn de la rana
1.2.3 Dejar actuar y guardar datos hasta que el ritmo se marque como
estable
1.2.4 Enjuagar con la solucin Ringer a 23C
1.2.5 Ensayar con las otras soluciones y con el efecto de la temperatura


2.1 Coloque suficiente agua que contenga a las pulgas de agua en una caja de
Petri y con una pipeta Pasteur tome una pulga de agua.
2.2 Deposite la pulga de agua sobre
un portaobjeto cuidando de no
dejar un excedente de agua.
2.3 Enfoque a la pulga de tal manera
que pueda observar claramente
los latidos del corazn.
2.4 Cuente los latidos durante quince
segundos y tmelo como una
medida basal; el conteo se
realiza entre dos personas, la
primera indicara el inicio y fin de

los 15 segundos y la segunda
persona contara los latidos.
2.5 Aada una gota de una de las
substancias a evaluar, deje que
acte por un minuto y proceda a
Imagen 1.
Pulga de agua vista a 10x en el
microscopio. En la parte trasera
se puede observar fcilmente el
corazn.

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contar los latidos por 15
segundos.
2.6 Evale cada substancia con una pulga diferente y registre el efecto
presentado en una tabla indicando si el efecto fue positivo o negativo.

Cuestionario

1. Qu es un cardiotnico y que un glucsido cardioactivo, anotar ejemplos?
2. Cul es la relacin estructura -actividad de los glucsidos cardioactivos?
3. Qu diferencias farmacocinticas existen entre los digitlicos?
4. Qu parte de la estructura del digitlico le da las propiedades farmacocinticas?
5. Cul es el mecanismo de accin de los glucsidos cardioactivos y como se manifiesta
en la funcin cardiaca?
6.Cules son los efectos txicos de los glucsidos cardioactvos?
7.Cules sern los usos o indicaciones de los glucsidos cardioactivos?
8. Haga un esquema de la anatoma de la pulga de agua, localice el corazn e indique
cuntos latidos realiza por minuto

Referencias

1. Goodman & Gillman's, Las bases Farmacolgicas de La teraputica, 10" ed., Mc. Graw
Hill, Mxico 2003
2. Bertrand G. Katzung, Farmacologa Bsica y Clnica, 8a ed., Manual Moderno, Mxico
2002
3. Barastegui, AC, Esquemas y prcticas de Farmacologa. Espaxs, Espaa 1976.

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Substancia Efecto Inotropismo Cronotropismo
Digoxina
Epinefrina
Atropina

Pilocarpina
Calcio
Sodio
Potasio
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Prctica No. 7

Diurticos
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Introduccin
Los diurticos (o salurticos) son frmacos que incrementan la produccin de orina
(diuresis) y la excrecin de sodio (Na). Actan principalmente sobre el rin, inhibiendo la
reabsorcin de NaCI y agua, aumentando por tanto la excrecin urinaria de estas
sustancias. Se utilizan principalmente para el tratamiento del EDEMA.

Fisiologa De La Nefrona
Los riones controlan el volumen del fluido extracelular ajustando la excrecin de
NaCI y H20. Diariamente los riones filtran ms de 22 moles de Na
+
, los cuales se
reabsorben por los tbulos renales, para mantener el equilibrio.
El cuerpo mantiene la presin sangunea a expensas del volumen del fluido
extracelular. Cuando la ingesta de NaCI es mayor que su eliminacin (p.ej. en falla
congestiva cardiaca o falla renal) se desarrolla edema.
La reabsorcin de sodio se debe primeramente a la adenosin trifosfatasa (ATPasa)
localizada en la parte lateral de la membrana de las clulas epiteliales del nefrn. La
bomba de Na
+
/K
+
necesita energa para intercambiar un Na
+
por cada dos K
+
,
manteniendo una baja concentracin de Na
+
y alta concentracin de K
+
en el interior de la
clula. En el lado de la luz tubular, existen vas pasivas para el movimiento del Na
+

electroqumico del lumen a la clula. Esas clulas son las bases fisiolgicas de la accin
diurtica.

Farmacologa De Los Diurticos.
EL primer acierto de los diurticos es la reduccin del edema por reduccin del
volumen del fluido extracelular, y para que esto ocurra, la secrecin de Na
+
deber
exceder a su ingesta.
En principio, los diurticos previenen la entrada de Na
+
a las clulas tubulares. Una
vez que el diurtico entra al fluido tubular, el sitio de la nefrona donde acta determina su
efecto. Es decir, el sitio de accin determina tambin que otros electrolitos, adems del
Na
+
, sern afectados.
Todos los diurticos, excepto la ESPIRONOLACTONA, ejercen sus efectos en el lado
luminal de la nefrona. Por eso deben alcanzar el fluido tubular para tener efecto. Por
ejemplo, el manitol lo hace por filtracin en los glomrulos; los dems diurticos, como
estn fuertemente enlazados a las protenas, se filtran escasamente, llegando al lumen
por secrecin a travs del tbulo proximal (va secretoria de bases y cidos orgnicos).
El bajo flujo sanguneo renal o falla renal, disminuyen la eficacia de los diurticos,
as como drogas que compiten por la bomba secretoria como el PROBENECID para las
drogas cidas, o la CIMETIDINA para drogas bsicas.
Diurticos Con Accin En El Tbulo Contorneado Proximal.
El tbulo proximal determina el grado de liberacin de Na
+
y H20 a zonas ms
lejanas de la nefrona. Una amplia variedad de transportadores acoplan el paso del Na
+
al
interior de la clula, al movimiento de aminocidos, glucosa, fosfato, y otros solutos,
MANITOL: ES un diurtico osmtico no metabolizable y es filtrado haca el espacio
tubular incrementando la osmolalidad del fluido tubular. Esto trae como consecuencia

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reabsorcin aumentada de fluido resultando en excrecin aumentada de agua
acompaada de un poco de Na
+
.
Inhibidores De La Anhidrasa Carbnica (Acetazolamida)
El bicarbonato se reabsorbe en el tbulo proximal. El in H
+
es secretado al lumen
en donde se une con bicarbonato filtrado (HC03+) para formar H2C03 el cual es convertido
en H20 y C02 por accin de la anhidrasa carbnica. EL C02 difunde al tbulo proximal en
donde se combina con H20 para formar H2C03, el cual a su vez forma H
+
y HC03+. Este
ltimo sale del tbulo hacia la sangre, mientras H
+
es secretado nuevamente a la luz
tubular, resultando en reabsorcin de HC03+. Si la actividad de la anhidrasa carbnica se
reduce, la reabsorcin de HC03+ tambin disminuye y la sale al tbulo proximal en
cantidades mucho ms grandes. Aunque el Na
+
es el principal catin que acompaa la
salida del HC03+ del tbulo proximal, se reabsorbe ampliamente en el tbulo distal el
intercambiado por K
+
. Por lo tanto, la ACETOLAMIDA causa principalmente un incremento
de HC03+\ K
+
y H20 urinario.
Diurticos De Asa
Actan principalmente bloqueando el co-transportador de Na
+
/K
+
/Cr en la
membrana apical de la rama ascendente del asa de Henle. Como en este sitio se
concentra y diluye la orina, los diurticos de asa disminuyen al mximo la concentracin
y dilucin urinaria. En esta parte ascendente del asa se reabsorbe Ca
++
y Mg
++
, proceso
dependiente de la reabsorcin normal de Na
+
y CI
-
. Por lo tanto los diurticos de asa
incrementan la excrecin urinaria de agua, Na
+
, K
+
, Ca
++
y Mg
++
.
EJEMPLOS: Furosemida, bumetanida y cido etacrinico.

Diurticos De Tbulo Contorneado Distal.
Tiazidas y drogas anlogas inhiben el transporte de Na
+
y CI
-
a nivel de tbulo
distal. A comparacin de los diurticos de asa, poseen accin diurtica suave o
moderada debido a que en esta parte del glomrulo se reabsorbe menos Na
+
. Adems,
si los rangos de filtracin glomerular declinan, menos fluido llegar al tbulo distal y las
tiazidas tendrn un impacto mnimo sobre la excrecin de agua y Na
+
.
EL uso de la tiazidas incrementa la reabsorcin de fluidos y solutos en el tbulo
proximal. Se manifiesta un incremento de la absorcin de Ca
++
y cido rico en el tbulo
proximal.
Diurticos de Tbulos Colectores.
ESPIRONOLACTONA: ES un antagonista competitivo de la aldosterona. Bloquea la
reabsorcin de Na estimulada por aldosterona y la excrecin de K
+
y H
+
en tbulos distal

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y colector. Tambin reduce la amoniognesis estimulada por aldosterona a lo largo del
nefrn.
AMILORIDE Y TRIAMTERENE: Inhiben el canal de Na
+
en la membranas apicales de
los tbulos distal y colector. Debido a que en esta zona de la neurona la secrecin de K
+

y H
+
se explican principalmente por los gradientes electroqumicos generados por la
reabsorcin de Na
+
, se reduce el transporte de K
+
e H
+
haca la orina.
El estudio de estos frmacos generalmente se basa en la determinacin de la
diuresis y en los electrolitos eliminados al administrar estos frmacos en animales de
experimentacin. Para ello se recomienda usar ratas o perros debido a que su patrn de
excrecin urinaria es ms regular. Los mtodos que nicamente miden diuresis son
cualitativos, como el usado en esta prctica. Existen otros mtodos para estudiar
mecanismos y sitio de accin de estos medicamentos (mtodos de aclaracin renal,
mtodos de diuresis interrumpida, mtodos de micropuncin y mtodos de
microperfusin en segmentos de la nefrona).

Objetivo

Demostrar la diuresis en ratas producida por frmacos o sustancias con
propiedades diurticas.


MATERIAL BIOLGIO
1 Rata Wistar de 150-200 gramos de peso, de preferencia del mismo
sexo y edad.
MATERIAL Y EQUIPO
Jaula Metablica
Probeta Graduada
Balanza Granataria
Jeringas de 1 y 5 mL
REACTIVOS
Solucin fisiolgica (NaCI 0.9 %), que se utiliza como control negativo.
Furosemida (Control positivo)

Metodologa

1. Pesar e identificar a cada animal de experimentacin.
2. Al grupo control negativo (sin tratamiento) se administra 25 mL/kg de solucin
salina va I.P.
3. Al grupo control positivo (con tratamiento) se le administrar por va I.P. 25
mL/kg de solucin salina ms una dosis de furosemida (20 mg/kg de peso).

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4. Se colocan las ratas en jaulas metablicas durante 2.5 horas.
5. Se mide el pH y el volumen de orina excretada cada 15 minutos, durante las 2.5
horas.
6. Se determina la orina acumulada durante las 2.5 horas.
7. Terminado el experimento, se retiran los animales de las jaulas metablicas.
8. Determinar y tabular: pH, densidad y volumen de cada una de las muestras.

CLCULOS:

Realizarlos siguientes clculos para cada animal de experimentacin:

Excrecin urinaria:

Accin Diurtica:

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Cuestionario

1. El mtodo usado en este experimento permite determinar la diuresis de diferentes
frmacos, es suficiente para evaluar el efecto diurtico? Diga que otro tipo de
anlisis realizara y porqu.
2. Qu otros mtodos existen para investigar el mecanismo de accin de los
diurticos?
3. La eleccin de la rata como animal de experimentacin, es correcta? Fundamente su
respuesta.
4. Esquematice el mecanismo de accin de la furosemida.
5. Indica los factores fisicoqumicos involucrados en la accin de los diurticos en
general.

Referencias

1. FLISER D, SCHROTER M, NEUNECK M, RITZ E. Coadminis-tration of thiazides
increases the efficacy of loop diuretics even in patients with advanced renal faiiure.
Kidney int 199;446(2):482-8.
2. SUKI WN, STINEBAUGH BJ, FROMMER JP, EKNOYAN G. Physiology of diuretic action.
En: Seldin DN, Giebisch G. eds. The kidney: physiology and pathophysiology. New
York: Raven, 1985:2127-62.
3. BYERS J, GOSHORN J. How to manage diuretic therapy. Am J Nurs 1995;95(2):38-43.
4. MELILLO L. Diuretic plants in the paintings of Pompeili. Am J Nephrol 1994;14(4-6):423-
5.
5. VAN MEYEL JJ. Comparison of the diuretic effect and absorption of a single dose of
furosemide and free and the fixed combinations of furosemide and triamterene in
hearthy male adults. EUR J CLIN PHARMACOL 1990;39(6):595-7.
6. KANG MJ, YOON WA, KIM ON, LEE MG. Effects of water deprivation for 48 hours on
the farmacodynamics of furosemide in rats. J Clin Pharm Ther 1995;20(1): 13-21.
7. Goodman & Gillman's, Las bases Farmacolgicas de La teraputica, 10
a
ed., Me.
Graw Hill, Mxico 2003
8. BertrandG. Katzung, Farmacologa Basica y Clnica, 8a ed., Manual Moderno, Mxico
2002
9. C. Barastegui Almagro. Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Editorial Espax,
1976, Barcelona, Espaa.
10. Cairo M., Fresneda M.V., Campos D. Determinacin del efecto diurtico de
Cymbopogon citratus (DC) Stapf (Caa Santa). Rev. Cubana Plant. Med. 1(3): 13-
17, sept.-dic. 1996.
11. Nedi, T. ET AL Diuretic effect of the crude extraets of CARISSA EDULIS in rats. Journal

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Determinacin Espectrofotomtrica
de sodio en orina.
Prctica No 8
Servicio social.
Elabor: De Los Santos Mendoza Karina
Asesora: Jimnez Castaeda Esperanza
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Introduccin
Los diurticos aumentan la excrecin urinaria de agua y electrolitos y se administran para
reducir el edema asociado a la insuficiencia cardaca, el sndrome nefrtico o la cirrosis
heptica. Algunos diurticos se administran a dosis ms bajas para reducir la presin arterial
elevada.
Los diurticos de asa, o diurticos de techo alto, como la furosemida, son los ms
potentes y rpidamente producen una diuresis intensa dependiente de la dosis de duracin
relativamente corta. La furosemida por va oral produce diuresis en los 30-60 minutos de la
administracin, con el efecto diurtico mximo en 1-2 horas. La accin diurtica dura 4-6
horas. La furosemida intravenosa produce diuresis a los 5 minutos, con el efecto diurtico
mximo en 20-60 minutos y diuresis completa en 2 horas.
Los diurticos de asa inhiben la reabsorcin desde el asa ascendente de Henle en el
tbulo renal, y son tiles sobre todo en situaciones en las que es necesaria una diuresis
eficaz y rpida, como la reduccin del edema pulmonar agudo secundario a insuficiencia
ventricular izquierda. Tambin se utilizan para tratar el edema asociado a enfermedades
renales o hepticas y se administran a dosis altas en el tratamiento de la oliguria por
insuficiencia renal crnica. Los diurticos de asa pueden ser eficaces en pacientes que no
responden a los diurticos tiacdicos.

MECANISMO DE ACCION:

Los diurticos de asa provocan la excrecin del 20-25% del sodio (Na+) filtrado por los
riones, de ah que tambin se les conozca como diurticos de alto techo. Actan
fundamentalmente sobre la rama ascendente del asa de Henle, inhibiendo el transporte de
sodio (Na+) y cloruro (Cl-) desde el tbulo renal hacia el tejido intersticial (reabsorcin
tubular). Esto tiene un efecto adicional, ya que al llegar ms electrlitos a la parte distal de la
nefrona, tambin se reduce la reabsorcin de agua, como consecuencia del aumento de la
presin osmtica de la orina. Los diurticos del asa inhiben el sistema co-transporte
sodio-potasio-cloruro, situado en la membrana luminal de las clulas del asa gruesa
ascendente, esencial para la reabsorcin fisiolgica de estos electrlitos. Los diurticos del
asa parecen ser responsables del desarrollo de una accin venodilatadora, aunque se
ignora si sta es de tipo directo o indirecto. Se debe a la liberacin de algn factor renal
(posiblemente, prostaglandinas). El efecto venodilatador podra contribuir significativamente
al efecto diurtico de estos frmacos.
Mecanismo de accin de los diurticos de asa Reduccin de la reabsorcin tubular de sodio
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El siguiente mtodo sirve para determinar sodio en orina mediante la precipitacin del
sodio del sobrenadante libre de protenas como triple sal. La disminucin resultante de la
absorbancia de la mezcla de reactivo de color-sobrenadante es proporcional al contenido
de sodio de la muestra, por lo cual al determinar el sodio excretado por una rata a la que se
le administre un diurtico de asa podremos determinar el tiempo mximo de diuresis.
Objetivo:
Determinar el tiempo mximo de diuresis, cuantificar el sodio en orina y con esto demostrar el
mecanismo de accin de los diureticos de asa.
Material
Tres pipetas de 0.5ml
Una pipeta de 5ml
Doce tubos de ensayo
Gradilla.
Material biolgico
Orina de rata (Prctica 7: diurticos)
Equipo:
Espectrofotmetro
Centrifuga
Reactivos:
Reactivo de color:
Solucin de acetato de uranilo, 20g/100ml de agua y acetato de zinc 60g/100ml de agua
con cido actico (4ml y 2ml respectivamente) y adicionar un volumen equivalente a las
dos disoluciones de etanol (200mlaprox.).
Reactivo precipitante:
Solucin acuosa de cido tricloroactico (TCA) al 25%
Estndar de sodio:
Cloruro de sodio, 4,091g/L en solucin de cido tricloroactico. Equivalente a 140mmol/L.
Agua destilada.

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Preparacin de los reactivos:
Reactivo de color (1L)
De acuerdo a las proporciones ya mencionadas pesar 50g de acetato de uranilo y
disolver en 250ml de agua en ebullicin con 10ml de cido actico.
Por otra parte pesar y disolver 150g de acetato de zinc en 250ml de agua en ebullicin
con 5ml de cido actico.
Una vez preparadas las dos disoluciones mezclar ambas y colocarlas a ebullicin hasta
que sea una disolucin transparente de color amarillo homogneo.
Enfriar la mezcla y en caso de observar algn precipitado filtrar, posteriormente la
cantidad resultante de esta medirla en una probeta y adicionar una cantidad igual de
etanol.
Nota: En caso de que das posteriores se observe un ligero precipitado filtrar o calentar
nuevamente hasta disolverlo.
Precaucin: No se almacene en refrigeracin ni se exponga a la luz.
Reactivo precipitante (100ml)
Pesar 25g de cido tricloroactico y disolver en 100ml de agua destilada.
Estndar de sodio (20ml)
Pesar con exactitud 0.08g de Cloruro de sodio grado analtico y disolver en un matraz
volumtrico de 20ml y aforar con agua destilada.
Metodologa:
Enjuagar todo el material con poca agua destilada y secar perfectamente con papel
limpio.
De la orina recolectada de la prctica de diurticos tomar 0,5ml de cada tiempo con
una pipeta y colocarla en un tubo de ensayo cada una teniendo la precaucin de
etiquetar correctamente, posteriormente con otra pipeta agregar 0,5ml del reactivo
precipitante y agitar vigorosamente, despus dejar reposar por cinco minutos a
temperatura ambiente. Transcurridos los cinco minutos centrifugar por cinco minutos
ms (Para precipitar protenas).

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Tubos RB S U15 U30 U45 U1h U1h15 1h30 U2h U2h30 Uc-
Agua destilada 0.5ml - - - - - - - - - -
Estndar - 0.5ml - - - - - - - - -
Sobrenadante minuto 15 - - 0.5ml - - - - - - - -
Sobrenadante minuto 30 - - - 0.5ml - - - - - - -
Sobrenadante minuto 40 - - - - 0.5ml - - - - - -
Sobrenadante 1 hora - - - - - 0.5ml - - - - -
Sobrenadante 1h 15min - - - - - - 0.5ml - - - -
Sobrenadante 1h 30min - - - - - - - 0.5ml - - -
Sobrenadante 2horas - - - - - - - - 0.5ml - -
Sobrenadante 2h 30min - - - - - - - - - 0.5ml -
Sobrenadante control negativo - - - - - - - - - - 0.5ml
Reactivo de color 2.5ml 2.5ml 2.5ml 2.5ml 2.5ml 2.5ml 2.5ml 2.5ml 2.5ml 2.5ml 2.5ml
Por otra parte etiquetar 11 tubos con las siguientes leyendas, RB, S, U
15
, U
30
, U
45
, U
1h
,
U
1h15
, U
1h30
, U
2h
, U
2h30
y U
C-
(Reactivo blanco, estndar, muestra al minuto 15..muestra a
las 2h y media y muestra control negativo respectivamente). Al tubo RB adicionar 0,5ml de
agua destilada, al S 0.5ml del estndar de sodio y a todos los U 0,5ml de la muestra
desproteinizada que le corresponde. Ya que cada tubo tenga lo correspondiente adicionar
sin excepcin a todos los tubos 2,5ml del reactivo de color y agitar vigorosamente para
homogenizar (ver tabla de abajo), realizado todo esto dejar reposar por 10 minutos a
temperatura ambiente y centrifugar a alta velocidad por 5 minutos ms.

Para obtener la cantidad de sodio en orina es necesario ajustar el espectrofotmetro con
agua destilada a 0 de absorbancia con una longitud de onda de 420nm. Luego leer el
contenido de los tres tubos ajustando entre lectura y lectura con agua.
Los resultados registrados sustituirlos en la siguiente frmula:
Mmol de Na =
() ()
() ()
x 140

46
Absorbancia
RB 1.183
S 0.785
Tiempo
(minutos)
Absorbancia mmol Na
15 0.84 120.65
30 0.816 129.09
45 0.719 137.88
60 0.822 126.98
90 0.836 122.06
120 0.837 121.7
150 0.837 121.7
Control
negativo
0.903 98.49
15 30 45 60 90 120 150
120.65 129.09 137.88 126.98 122.06 121.7 121.7
110
115
120
125
130
135
140
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(
m
i
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t
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)

Concentracin (mmol de Na)
Determinacin espectofotomtrica de sodio
en orina

Cuestionario:
1.- Qu resultados se esperaran obtener al cuantificar el sodio despus de administrar un
diurtico de asa?
2.- Porqu con los diurticos de asa hay un incremento de sodio en orina?
3.- Qu tipo de protenas se pueden encontrar en la orina?
4.- Aparte del sodio que otro tipo de electrolitos se encuentran en la orina de forma
cotidiana?
Bibliografa:
1. A Photometric Method For The Estimation Of Sodium And Its Application To Serum
Sodium Determinatione. C. Butterworth. J. Clin. Path, (1951), 4, 99.

2. C.Barastegui Almagro. Esquemas y Prcticas de Farmacologa. Editorial Espax,
1976, Barcelona, Espaa.

3. http://ocw.uv.es/ciencias-de-la-salud/farmacologia-clinica-aplicada-a-la-enfermeria/l
eccion24.diureticos.pdf

De los resultados obtenidos graficar la cantidad de sodio en mmol excretados, por el tiempo
en el que se tom la muestra y analizar los resultados con respecto al control negativo.
Ejemplo de cmo se deben organizar los resultados y como graficarlos:
N
O

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Prctica No. 9

Efecto de los Frmacos
Hipoglucemiantes
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Introduccin
Una de las enfermedades ms importantes a nivel mundial, que es un serio problema
de salud publica y que ataca a toda sociedad sin importar su estado de desarrollo de la
DIABETES MELLITUS, el 8.2% de la poblacin entre los 20 y 69 aos de edad la
padecen y cerca del 30% de estos individuos afectados desconoce si es diabtico.
Adems ocupa el tercer lugar de la mortalidad.
En condiciones normales el control del metabolismo de los carbohidratos se da por un
antagonismo fisiolgico entre dos hormonas: la insulina, que disminuye la glucemia
mientras que el glucagn la aumenta. Ambas son secretadas por el pncreas en lugares
diferentes, la insulina en las clulas y el glucagn en las clulas de los islotes de
Langerhans.
La DIABETES MELLITUS TIPO I (Diabetes Juvenil), se desencadena por la
destruccin de las clulas produciendo carencia de insulina y por lo tanto hiperglucemia,
por lo que, quienes la padecen son candidatos a la administracin de insulina como
terapia de sustitucin. La Diabetes Mellitus tipo II se desencadena por factores
metablicos incluyendo una funcin deficiente de las clulas beta y la resistencia a la
insulina en musculo esqueltico, tejido adiposo e hgado, actualmente se sabe que su
origen es gentico. El tratamiento en este caso se sabe que es con el uso de
hipoglucemiantes orales con diferentes mecanismos de accin.

Secretagogos de insulina: nitaglenida, repaglinida y sulfonilureas (estimulan a
las clulas beta del pncreas para incrementar la liberacin de insulina)
Antihiperglucemiantes: inhibidores de alfa glucosidasas, (retrasan la
absorcin de los carbohidratos en la luz intestinal), las biguadinas y las
tiazolidinedionas (aumenta la sensibilidad de la insulina).

En el caso de la prctica nos enfocaremos a dar las caractersticas generales de la
insulina que es el frmaco a evaluar como hipoglucemiante.
La insulina es una protena sintetizada en las clulas beta en los islotes de Langerhans
en el pncreas y est formada por dos cadenas peptdicas (A con 21 aminocidos, B con
30) unidas por dos puentes disulfuro. Su funcin fisiolgica es promover la captacin de
glucosa por las clulas de todos lo rganos, pero los sitios especiales para el
almacenamiento de sta, es el hgado, tejido adiposo y musculo esqueltico.
Su mecanismo de accin se da cuando se une a un receptor en la membrana celular,
desencadenndose una seria de fosforilaciones incluyendo la del transporte de glucosa
que al estar fosforilado promueve la captacin de sta al interior de la celular.

Fig.7.1 Mecanismo de
accin de la insulina a
nivel celular y
molecular

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Antiguamente se utilizaban insulinas de origen bovino y porcino que hasta ahora ya
han desaparecido del mercado. Hoy en da todas las insulinas humanas sintetizadas por
ingeniera gentica (DNA reconbinante) por lo que estn purificadas y solo contiene una
fraccin proteica de la insulina. El nico factor que las diferencia es la duracin de accin,
razn por la cual se adquieren en preparaciones inyectables que retardan la liberacin.

Dicho retardo se logra:

Mediante la unin a otras protenas (protamina)
Mediante una cristalizacin

Dependiendo de cada sistema de retardo de su accin las insulinas pueden ser
rpidas, intermedias y lentas.
La va de administracin adecuada para pacientes ambulatorios es la subcutnea, solo
en coma diabtico se usa la va intravenosa y es recomendable la accin rpida en estos
casos.
Como una alternativa a un futuro corto, se esta evaluando la administracin por va
inhalatoria; ya se estn realizando estudios donde se observa que la tendencia de
preferencia de los pacientes varia en un 10% con respecto a la va de administracin
convencional.

Objetivo

Demostrar el efecto hipoglucemiante de la insulina en ratas hiperglucemicas,
determinando la concentracin de glucosa en sangre.


MATERIAL BIOLGICO
1 Rata

MATERIAL Y EQUIPO
3 jeringas de insulina
3 jeringas de 10 mL
Reloj
Equipo para bao Mara

REACTIVOS
Tiras reactivas para la medicin de glucosa en sangre.

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Metodologa

En este procedimiento la evaluacin del frmaco (insulina) se lleva acabo comparando
el efecto hipoglucmico en el animal experimental contra controles, un positivo
(previamente cargado de solucin glucosada) y un negativo manipulado igual que el de
experimentacin y C
+
, en vez de solucin glucosada se le administra el mismo volumen de
solucin salina. A ningn control se le administra insulina. Esto es con el fin de que se vea
el efecto del frmaco administrado exgenamente contra el efecto ms lento que se
observar de la insulina endgena previa estimulacin por la carga de glucosa (control (+)
) y el control (-) servir como referencia de la concentracin de glucosa normal y para
asegurar que la disminucin de glucosa en sangre del animal experimental se debe al
frmaco y no a la manipulacin.

1.- Marcar las ratas del 1 al 4. Tomar una muestra a tiempo cero antes de manipular al
animal, para obtener el valor basal de glucosa. La muestra se toma realizando una
incisin en la arteria caudal de la cola de la rata.
2.- La rata marcada ser utilizada segn la siguiente indicacin
Rata 1 (control -): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin
salina.
Rata 2 (control +): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin
glucosada.
Rata 3 (experimental): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin
glucosada.
Rata 4 (experimental): Administrar por va intraperitoneal 7mL de solucin
glucosada.
3.- Tomar muestra cada 10 minutos hasta los treinta minutos.
4.- Para observar la absorcin de glucosa; despus de la ltima toma administrar el
volumen correspondiente de solucin salina, insulina o matarique, dependiendo del
nmero de rata:

Rata 1: Administrar el volumen correspondiente de solucin salina va
subcutnea.
Rata 2: Administrar el volumen correspondiente de solucin glucosada va
subcutnea.
Rata 3: Administrar 3 unidades de insulina va subcutnea.
Rata 4: Administrar el volumen correspondiente de la infusin de
matarique.
5.- Posterior a esta administracin tomar muestras cada 15 minutos hasta los 90
minutos o hasta alcanzar el nivel basal de glucosa.
6.- La determinacin de la concentracin de glucosa se realiza por medio de tiras
reactivas (ver las instrucciones para correcta lectura del resultado), la lectura la deber
realizar una sola persona. Con los resultados obtenidos construya una grfica de
concentracin de glucosa contra el tiempo.

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Nota: conjuntar los resultados de todo el grupo para sacar promedio y graficar
como se indica anteriormente.

Cuestionario

1. Indica la clasificacin de la Diabetes Mellitus.
2. Qu es la insulina?
3. Qu son los hipoglucemiantes orales?
4. Cules son las vas de administracin de la insulina?
5. Explique el mecanismo de accin de la insulina?
6. Por qu razn la insulina no se administra por va oral
7. A qu se refiere el trmino de antagonismo fisiolgico entre la insulina y el
glucagn?
8. Qu importancia tienen los controles utilizados en la prctica?

Referencias

Tbar Mass F J y Escobar Jimnez F. Diabetes mellitus en la prctica clnica.
Argentina; Medica panamericana. 2009.
Goodman Luis S y Gilman Alfres. Bases farmacolgicas de la teraputica. 5 ed.
Mxico; Interamericana.1978. 1281- 1285
Rang H.P et al. Farmacologa 6 ed. Espaa: Elsevier. 2008. 397- 408

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Anexo Prctica 3 : Simulador

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Anexo Prctica 6: Simulador

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Anexo Prctica 8

Janet Edith Santamara Vquez

69
Anexo Prctica 8

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Manual EvaluaciÃ N Corregido Anestesicos

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