FYTI. Tema 07.

ANTIGENOS Curso 07-08

Tema 7

Inmungenos, antgenos y haptenos.
Adyuvantes


La respuesta inmune adaptativa se produce como consecuencia de la exposicin a
molculas extraas. Estas sustancias extraas se definen del siguiente modo:

Inmungeno, sustancia que induce la respuesta inmune adaptativa.

Antgeno, cualquier agente capaz de unirse especficamente a los componentes de la
respuesta adaptativa (receptor del linfocito B [BCR] y anticuerpos solubles, as como al
receptor del LT [TCR]) Hay compuestos que no son capaces de inducir una respuesta
adaptativa pero, en cambio, reaccionan con los componentes de la respuesta elaborada
frente a ellos. Es decir, todos los inmungenos son antgenos, pero no todos los
antgenos son inmungenos.

Hapteno. Esta diferencia se hace obvia en el caso de las sustancias de bajo peso
molecular (grupo en el que se incluyen muchos antibiticos y drogas), que no son
capaces, por si mismos, de inducir una respuesta inmune pero que cuando se unen a
molculas de peso molecular alto (tales como las protenas) forman conjugados capaces
de inducir una respuesta inmune. Estas molculas, de peso molecular bajo, se
denominan Haptenos y la molcula a la que se acoplan Portadores (carrier). Por tanto,
un Hapteno es un compuesto incapaz, por si mismo, de inducir una respuesta inmune
pero que reacciona con los componentes de la respuesta que se induce cuando se
conjuga con una molcula portadora.

Se ha comprobado que se puede producir respuesta inmune frente a todas las familias de
compuestos bioqumicos conocidas, incluyendo carbohidratos, lpidos, protenas y
cidos nucleicos. Tambin se pueden inducir la respuesta a drogas, antibiticos, aditivos
alimentarios, cosmticos y pequeos pptidos sintticos, pero solo cuando se acoplan a
un portador.

Caractersticas de los inmungenos
Para que una sustancia sea inmunognica debe tener las siguientes caractersticas:
Ser extraa (1)
Peso molecular alto (2)
Complejidad qumica (3)
Estructura (4)
Poderse degradar a pptidos que interaccionen con las protenas del CMH (5)

(1) El organismo normalmente no responden frente a lo propio; esta es la es la primera
condicin para que un compuesto sea inmunognico. Cuanto ms extraa sea la
sustancia (ms distancia gnica) mayor ser su inmunogenicidad.

(2) Las sustancias necesitan un peso molecular mnimo para ser inmunognicas; 5-6
KDa se consideran el peso mnimo para la inmunogenicidad y esta aumenta en funcin
del peso molecular.

Pgina 1 de 5
FYTI. Tema 07. ANTIGENOS Curso 07-08
(3) Un inmungeno debe tener una complejidad qumica mnima. Homopolmeros de un
solo aminocido con peso molecular alto (p.e. poli-lisina de Pm 30 KDa) es muy raro
que sean inmunognicos. Pero si se les unen molculas pequeas o se introducen otros
aminocidos (sobre todo si son aromticos), la molcula se torna inmunognica. En
general, el aumento de la complejidad qumica es directamente proporcional al aumento
de la inmunogenicidad.

(4) La mayora de los inmungenos son protenas y la respuesta adaptativa reconoce
muchos caracteres estructurales de estos compuestos. Por ejemplo, los anticuerpos
pueden reconocer caractersticas estructurales de una protena, tales como las
estructuras:
Primaria (secuencia de los aminocidos en la cadena)
Secundaria (plegamientos de la cadena primaria, que pueden ser en hlices alfa o en
estructuras planas beta)
Terciaria (formada por los plegamientos de la estructura secundaria mantenidos por
puentes disulfuro, puentes de hidrgeno, interacciones hidrofbicas, etc.)
Cuaternaria (formada por la yuxtaposicin de varias subunidades proteicas)

(5) Para que los antgenos interaccionen con las clulas T (que son las que ponen en
marcha y coordinan la respuesta adaptativa) tienen que ser capaces de unirse a las
molculas CMH que se expresan sobre las CPAs. Estas clulas primero degradan
mediante enzimas a los antgenos (procesamiento) y luego unen los fragmentos
producidos (epitopos) a las molculas CMH para ensear el conjunto sobre la superficie
(presentacin).

Otros requerimientos
Hay, adems, otros factores que influyen en la inmunogenicidad, tales como la base
gentica (genotipo) del hospedador, la dosis, va de administracin, etc. Las dosis
insuficientes y las demasiado abundantes no provocan la puesta en marcha de la
respuesta adaptativa, ya que inducen la tolerancia de los linfocitos. Pero adems de la
dosis adecuada tambin influye en la respuesta el nmero de dosis administradas (pauta
de inoculacin).
En cuanto a la va de administracin, la subcutnea da normalmente muy buenos
resultados, ya que el antgeno se deposita en la vecindad de las clulas de Langerhans
(DCs inmaduras de la piel), que son las CPAs ms potentes del organismo. Estas clulas
emigran a los ganglios linfticos prximos, donde se elabora la respuesta adaptativa.
Los antgenos administrados por va intravenosa llegan al bazo, donde pueden inducir
tolerancia o, si se presentan por CPAs, inducir respuesta. La va oral induce respuestas
locales de anticuerpos en la lmina propia del intestino y, con frecuencia, provoca
tolerancia sistmica a tal antgeno. La va respiratoria (intranasal) es frecuente que
provoque respuestas alrgicas.
Como la respuesta adaptativa depende de las interacciones celulares, el tipo y la
intensidad de la respuesta refleja la poblacin celular presente en el rgano al que llega
finalmente el antgeno.

Respuestas primaria y secundaria
El primer contacto con un inmungeno provoca una respuesta primaria, tras una serie
de interacciones entre clulas T, CPAs y clulas B. La curva de anticuerpos que se
produce es caracterstica.
Pgina 2 de 5
FYTI. Tema 07. ANTIGENOS Curso 07-08
El siguiente contacto con el mismo inmungeno induce una respuesta secundaria que
difiere de la primaria (ms rpida, ms amplia, ms eficaz), como si el organismo
recordara que ya haba estado expuesto a ese inmungeno antes. De hecho, la
respuesta secundaria y las subsecuentes explotan el aumento del nmero de linfocitos
especficos para el inmungeno producidos durante la respuesta primaria. Esta respuesta
tambin se llama respuesta de memoria o anamnsica y los linfocitos que participan
en ella se denominan clulas de memoria.

Antigenicidad y sitio de unin al antgeno
La respuesta inmune genera anticuerpos y/o linfocitos que reaccionan especficamente
con alguna porcin del antgeno, a la que se denomina epitopo (tambin se le llama
determinante antignico). El sitio de unin de un anticuerpo o del receptor de un
linfocito al epitopo presenta una estructura nica que es complementaria del mismo.
La porcin del anticuerpo (Ig) que se une especficamente al epitopo est situada en una
zona hipervariable de la molcula, que forma la llamada regin determinante de la
complementariedad (CDR). El tamao del epitopo del antgeno que se combina con el
CDR de un anticuerpo es de 5-7 aminocidos. Lo que reconoce el receptor del linfocito
T son secuencias de 8-12 aminocidos asociados en forma no covalente a protenas del
Complejo Principal de Histocompatibilidad (CMH) en la superficie de las CPAs
(clulas presentadoras de antgenos).

Reconocimiento antignico por parte de los linfocitos B y T
Caractersticas Linfocitos B Linfocitos T
Interaccin con el Ag

Naturaleza del Ag

Fijacin Ags solubles
Epitopos reconocidos
El receptor B (Ig de
membrana) fija al Ag
Protenas, hidratos de
carbono, lpidos
SI
Accesibles (secuenciales
o conformacionales)
El receptor T fija al conjunto
Ag-CMH
Pptidos

NO
Secuenciales, procedentes del
procesamiento

Los epitopos que reconocen las clulas B y T.
Como se ve en la tabla, los epitopos reconocidos por las clulas B difieren de los que
reconocen las clulas T. En general, los receptores de los linfocitos B reconocen y fijan
antgenos libres, en solucin. Por tanto, los epitopos tienen que estar en la superficie de
la molcula antignica donde son accesibles al receptor B. La parte terminal de las
cadenas laterales de polisacridos y las porciones hidroflicas de las molculas de
protena generalmente forman los epitopos B, aunque tambin los hay procedentes de
los plegamientos (epitopos conformacionales).
Las clulas T no son capaces de fijar a los antgenos solubles. La interaccin de un
epitopo con el receptor T requiere que una CPA procese enzimticamente al antgeno
(lo degrade a pptidos pequeos) para que las porciones se asocien a las molculas
CMH. Por tanto, los receptores T solo pueden reconocer epitopos lineales
(secuenciales), pues los conformacionales se destruyen durante el procesamiento de la
protena. Normalmente, estos epitopos lineales son porciones hidrofbicas internas de la
protena.
El resultado de todo esto es que los polisacridos solo contienen epitopos reconocibles
por los linfocitos B, mientras que las protenas contienen epitopos reconocible tanto por
las clulas B como por las clulas T.
Pgina 3 de 5
FYTI. Tema 07. ANTIGENOS Curso 07-08
El nmero de epitopos de una molcula puede ser solo uno (hapteno) o mltiple y en
una protena normalmente hay muchos y distintos, mientras que en los azcares suelen
ser iguales (repetitivos).

Clases de antgenos
Polisacridos. Son inmungenos cuando se asocian a portadores proteicos, como ocurre
con los que forman parte de molculas ms complejas (glicoprotenas), que inducen una
respuesta inmune parte de la cual es especfica para la parte hidrocarbonada de la
molcula. Pero tambin se puede inducir una respuesta inmune de anticuerpos frente a
muchos tipos de polisacridos, como los que forman parte de microorganismos y clulas
eucariotas. El ejemplo clsico de antigenicidad de los polisacridos es la respuesta a los
antgenos sanguneos del sistema ABO, que son polisacridos de la superficie de los
glbulos rojos.
Lpidos. Son normalmente poco inmunognicos, pero pueden inducir respuesta si se
unen a protenas portadoras. Los lpidos de las mycobacterias se reconocen por un
subtipo especial de clulas T; los Tgd, que forman parte de la respuesta ancestral.
cidos nucleicos. No son muy inmunognicos, salvo que se asocien con protenas
portadoras. Los anticuerpos anti-DNA son caractersticos de varios procesos
autoinmunes.
Protenas. Virtualmente, todas las protenas son inmunognicas y la gran mayora de los
inmungenos son protenas. Cuanto mayor es la complejidad de la protena ms fuerte
es la respuesta. Normalmente contienen muchos epitopos.

Reacciones cruzadas
Se producen por la presencia de epitopos comunes en molculas distintas. Un ejemplo
es la toxina diftrica que puede manipularse para que pierda su toxicidad conservando la
capacidad inmunognica; se ha transformado en toxoide. La inmunizacin con el
toxoide (inocuo) da lugar a la formacin de anticuerpos que neutralizan a la toxina
diftrica cuando se produce la infeccin. Estamos usando determinantes comunes para
vacunar, sin usar la toxina.
Hay otros casos de reactividad cruzada donde las sustancias que reaccionan no estn
relacionadas, excepto en que tienen una o ms reas con caractersticas tridimensionales
similares. A estas sustancias se las llama antgenos heterfilos. Por ejemplo el antgeno
sanguneo A reacciona con los anticuerpos formados frente al antgeno capsular
(polisacrido) de un tipo de neumococo.

Adyuvantes
Son los aditivos que se usan para aumentar la respuesta a un inmungeno dado. El
nombre viene del latn adjuvare (ayudar). Aunque su uso viene de antiguo, el inters
actual se debe a que los inmungenos que se estn desarrollando para hacer nuevas
vacunas (sobre todo las basadas en pptidos sintticos) presentan una inmunogenicidad
muy pobre.
El mecanismo de los adyuvantes incluye:
Aumento de la vida media biolgica o inmunolgica de los antgenos de las
vacunas
Aumento de la produccin local de citocinas inflamatorias
Mejora en la liberacin del antgeno y en su procesamiento y presentacin por
las CPAs, especialmente por las clulas dendrticas.

Pgina 4 de 5
FYTI. Tema 07. ANTIGENOS Curso 07-08
Se sabe de modo emprico que los mejores adyuvantes son los que contienen
componentes microbianos (p.e. extractos de mycobacterias). Estos componentes de
patgenos inducen la expresin de molculas coestimuladoras en las CPAs (macrfagos
y DCs) as como la produccin de citocinas. Ahora se ha comprobado que tal induccin
por los componentes microbianos se debe a que contienen patrones moleculares
(PAMPs); su unin a los TLRs de las CPAs genera las seales que llevan a la expresin
de molculas coestimuladoras y a la sntesis de citocinas.
Los adyuvantes autorizados hasta ahora para uso humano son los que se basan en
hidrxido de aluminio o fosfato de aluminio (almina). La almina se fija a las
protenas y las hace precipitar, induciendo as una respuesta inflamatoria que potencia
de forma inespecfica la inmunogenicidad del antgeno. El antgeno precipitado se libera
ms despacio en el sitio de inyeccin, lo que unido al aumento de tamao que se genera
en la precipitacin propicia una mayor probabilidad de que el antgeno se fagocite por
una clula presentadora.
En los animales de experimentacin se han usado muchos adyuvantes, siendo uno de los
ms corrientes el Adyuvante Completo de Freund (FCA), consistente en mycobacterias
muertas suspendidas en aceite mineral. Al aadir la solucin acuosa del antgeno se
genera una emulsin que, inyectada, libera lenta y continuamente al antgeno con lo que
mantiene constante la estimulacin durante mucho ms tiempo.
Otros microorganismos usados como adyuvantes son el bacilo de Calmette-Guerin
(BCG), que es una micobacteria atenuada, Corynebacterium parvum y Bordetella
pertussis. En realidad, todos utilizan las propiedades estimuladoras de las molculas
asociadas al microbio cuando se fijan sobre los TLRs de las clulas presentadoras
(especialmente las DCs).
Los ISCOM (complejos inmuno-estimuladores) son unas mezclas de colesterol y
saponinas que forman unas estructuras similares a jaulas en las que queda atrapada la
solucin acuosa del antgeno. Esta jaulas se funden con los lpidos de las membranas
celulares y depositan as su contenido en el citosol. El resultado es una vacuna que
induce una respuesta celular mediada por linfocitos T citotxicos, en lugar de los
anticuerpos que inducen las restantes vacunas.

Pgina 5 de 5