Universidade Federal do Esprito Santo

Centro Universitrio Norte do Esprito Santo

Departamento de Cincias Naturais











ROTEIRO DE AULAS PRTICAS
Fsico-Qumica II







Cursos: Engenharia Qumica e Licenciatura em Qumica









Profa. Gilmene Bianco












So Mateus
2012
2

SEGURANA NO LABORATRIO


O laboratrio de qumica um ambiente de risco, pois nele so manipuladas
substncias txicas, inflamveis, corrosivas, volteis e explosivas. Para reduzir este risco
e evitar acidentes necessria uma postura sria e responsvel por parte do aluno e
mxima concentrao naquilo que est fazendo. As normas bsicas de segurana em
laboratrio esto listadas abaixo:

Evitar trabalhar sozinho
S realizar experimentos autorizados e seguindo rigorosamente o roteiro de prtica
Usar sempre jaleco, culos de segurana e sapato fechado, antiderrapante e isolante
Manipular cuidadosamente todo e qualquer produto qumico, no provar ou cheirar
qualquer substncia (salvo quando autorizado).
expressamente proibido fumar no laboratrio
Pipetar sempre com os bulbos de suco adequados (pras ou seringas)
Evitar inalar vapores orgnicos ou inorgnicos
Nunca aquecer sistema fechado
Identificar com ateno os rtulos de reagentes e solues
Evitar o contato de substncias qumicas com a pele ou a roupa
No utilizar lentes de contato no laboratrio
No manipular ou aquecer qualquer substncia prxima ao rosto
Utilizar a capela para manipular substncias volteis ou corrosivas
No utilizar solvente voltil ou inflamvel prximo de chamas
Observar o procedimento correto para descarte de substncias
Em caso de acidentes, de qualquer tipo, independente da gravidade, informar o
professor e seguir as suas instrues.






















3

EXPERIMENTO 1: MEDIDA DA TENSO SUPERFICIAL
MTODO DO PESO DA GOTA


1- INTRODUO TERICA

As molculas na superfcie de um lquido esto sujeitas a fortes foras de atrao
das molculas interiores. A resultante dessas foras, cuja direo a mesma de plano
tangente superfcie, atua de maneira a que a superfcie lquida seja a menor possvel. A
grandeza desta fora, atuando perpendicularmente (por unidade de comprimento) ao
plano na superfcie dita tenso superficial ( ).
A superfcie ou interface onde a tenso existe est situada entre o lquido e seu
vapor saturado no ar, normalmente a presso atmosfrica. A tenso pode tambm existir
entre dois lquidos imiscveis, sendo ento chamada de tenso interfacial.
As dimenses da tenso superficial so fora por unidade de comprimento, no
sistema SI = N.m
-1
.
Um dos mtodos mais utilizados para medir a tenso superficial o mtodo do
peso da gota. Este mtodo, assim como todos aqueles que envolvem separao de duas
superfcies, depende da suposio de que a circunferncia multiplicada pela tenso
superficial a fora que mantm juntas as duas partes de uma coluna lquida. Quando
esta fora esta equilibrada pela massa da poro inferior, a gota desprende-se.















Figura 1 Mtodo do peso da gota


A tenso superficial calculada pela equao (Lei da Tate):

r
g m
i
. . . 2
.

=
(1)

onde: m
i
massa de uma gota ideal
r raio do tubo (externo se o lquido molhar o tubo)
g acelerao da gravidade

4

Na prtica, o peso da gota obtido, sempre menor que o peso da gota ideal. A
razo disto torna-se evidente, quando o processo de formao da gota observado mais
de perto. A figura abaixo ilustra o que realmente acontece.




Figura 2 Fotografias de alta velocidade de uma gota caindo.

Observa-se que somente a poro mais externa da gota que alcana a posio
de instabilidade e cai. Perto de 40% do lquido que forma a gota permanece ligado ao
tubo.
Para corrigir o erro causado pelo peso da gota, introduz-se na equao um fator de
correo f. Assim:

f r
g m
i
. . . . 2
.

=
(2)

O fator de correo f uma funo do raio do tubo e do volume da gota. Estes
valores so tabelados abaixo:


Tabela 1: Fator de correo para o mtodo do peso da gota.


r/V
1/3


f

r/V
1/3


f

r/V
1/3


f
a

0.00 (1.0000) 0.75 0.6032 1.225 0.656
0.30 0.7256 0.80 0.6000 1.25 0.652
0.35 0.7011 0.85 0.5992 1.30 0.640
0.40 0.6828 0.90 0.5998 1.35 0.623
0.45 0.6669 0.95 0.6034 1.40 0.603
0.50 0.6515 1.00 0.6098 1.45 0.583
0.55 0.6362 1.05 0.6179 1.50 0.567
0.60 0.6250 1.10 0.6280 1.55 0.551
0.65 0.6171 1.15 0.6407 1.60 0.535
0.70 0.6093 1.20 0.6535

a= Os valores desta coluna so menos exatos que os das outras.





5

2- PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL


2.1- Determinao do dimetro do tubo de vidro:

O dimetro do tubo pode ser medido utilizando-se um paqumetro ou obtido a partir da
massa de uma gota de um lquido padro, cujo valor da tenso superficial seja
conhecido. A massa de uma gota de gua pura a 20C, para tubos de diferentes
dimetros, acham-se tabelados no quadro abaixo. Para temperaturas superiores ou
inferiores a 20C, mas no muito diferentes, pode-se usar a seguinte relao para
calcular a massa da gota de gua a 20C.

massa da gota a 20C = massa da gota na tC x
C t
C

20


onde a tenso superficial da gua nas respectivas temperatura.


Tabela 2: Massa de uma gota de gua que se desprende de tubos de diferentes
dimetros

massa da gota
(g)
Raio do tubo
(cm)
massa da gota
(g)
Raio do tubo
(cm)
0.033450 0.09946 0.90467 0.31891
0.042347 0.13062 0.091620 0.32362
0.046901 0.14769 0.096392 0.34188
0.054678 0.17750 0.096918 0.34385
0.059700 0.19666 0.09868 0.35022
0.068026 0.23052 0.10623 0.37961
0.069869 0.23790 0.10966 0.39262
0.072682 0.23135 0.11161 0.39968
0.007753 0.26802 0.11957 0.42765
0.079680 0.27605 0.12522 0.44755
0.084270 0.29423 0.12575 0.44980
0.084880 0.29694 0.14142 0.50087



2.2-Medidas para obteno da tenso superficial:

2.2.1-Material:

- Bales volumtricos 100 mL (10 por equipe)
- Bureta 25 mL (1 por equipe)
- Vidrinho para coleta das gotas com tampa (10 por equipe)
- Balana analtica
- Soluo de SDS (dodecil sulfato de sdio) estoque: 50,0mM.
- Bureta para soluo estoque.

6

2.2.2-Procedimento:

1. Preparar 10 solues de SDS com as seguintes concentraes: 1,0 mM;
3,0mM; 5,0 mM; 7,0mM; 8,0mM; 9,0mM; 11,0mM; 15,0mM; 18,0mM; 20,0
mM.
2. Coloque o lquido na bureta de sua bancada, iniciando pela gua pura e
em ordem da soluo menos concentrada a mais concentrada. Ajuste
para uma vazo de 1 gota por minuto.
3. Recolha 10 gotas do lquido no frasco (j pesado anteriormente com a
tampa). Anote o volume e a massa correspondente s gotas
recolhidas.
4. Determinar o peso de uma gota.
5. Determinar o volume de uma gota.
6. Calcular r/V

e obter f.
7. Calcular atravs da equao 2.

2.2.3-Precaues:

Limpeza essencial em medidas de tenso superficial. Pequenas
quantidades de impurezas afetam muito as propriedades superficiais. Portanto, limpe
muito bem o material a ser usado na experincia.
Se o lquido for voltil necessrio que as gotas sejam recolhidas em
recipientes fechados. Alm disto, a primeira gota dever ser tombada durante
aproximadamente 5 minutos para que o recipiente fique saturado nos vapores do lquido
em questo.
Neste caso, tambm necessrio fazer duas medidas. Uma com
aproximadamente 15 gotas e outra com 5 gotas.
A diferena de peso entre as duas medidas dar o peso de uma gota livre do
peso do vapor.

Peso 15 gotas peso 5 gotas = peso 10 gotas sem vapor


3- QUESTIONRIO

1. Defina tenso superficial e tenso interfacial.
2. D exemplos de substncias que aumentem a tenso superficial da gua
3. Como so constitudos e como se classificam os surfactantes ? D exemplos
4. Desenhe uma estrutura para a micela?
5. Como agem os xampus e condicionadores?


4- BIBLIOGRAFIA

1. ADAMSON, A.W., Physical Chemistry of Surfaces, John Wiley & Sons, 4
a
edio.
2. SHAWN, D.J., Qumica dos colides e de superfcies, Editora Edgard Blucher,
captulo 4.
3. BALL, D.W., Fsico-Qumica, 1
a
. ed., Vol. 1 e 2, Thomson Learning, 2005.
4. RANGEL, R.N., Prticas de Fsico-Qumica, 3
a
. ed., Edgard Blucher, 2006.
5. ATKINS, P. W., PAULA, J., Fsico-Qumica, Vol. 1, 2 e 3, LTC, 2004.
6. MOORE, J.W. Fsico-Qumica, Vol.1 e 2, 4
a
ed., Editora Edgard Blucher, 1976.
7


EXPERIMENTO 2: DENSIDADE RELATIVA DE LQUIDOS
MTODO DO PICNMETRO

1- Introduo

Os estados da matria podem, de forma simplificada, ser agrupados em slido,
lquido e gasoso. Uma das propriedades macroscpicas que geralmente distingue esses
trs estados da matria a densidade especfica (massa/volume), pois em geral (mas
nem sempre) a densidade de gases menor do que a de lquidos, e essa menor ainda do
que a de slidos. A densidade uma grandeza intensiva, isto , no depende da
quantidade de matria. Assim, a densidade da gua pura contida em um litro ou numa
colher de 5ml a mesma. De forma geral, se a substncia homognea, ento a sua
densidade a mesma em todos os pontos do volume que ocupa. A densidade depende
do tipo de substncia, mas em geral influenciada pela temperatura e pela presso.


2- Contexto Terico

Densidade absoluta ou massa especfica de uma substncia qualquer de massa m
e volume V definida por


V
m
= (1)

ou seja, a razo entre a massa de um corpo pelo volume que o mesmo ocupa.
Densidade relativa definida pela razo entre as densidades absolutas de duas
substncias

2
1
2 , 1

= (2)
onde
2
geralmente escolhida como padro. comum considerar a gua como tal
padro, pois alm da convenincia de sua abundncia, sua densidade absoluta gua
1,00 g/cm
3
para temperatura ambiente (25C).

Picnmetro. Trata-se de um pequeno frasco de vidro construdo cuidadosamente de
forma que o volume do fluido que contenha seja invarivel. Ele possui uma abertura
suficientemente larga e tampa muito bem esmerilhada perfurada na forma de um fino tubo
longitudinal. Neste experimento vamos utiliz-lo para medir a densidade relativa (em
relao gua) de um lquido.

Usando o picnmetro para se medir densidade de lquidos. Sejam:
m
1
= a massa do picnmetro vazio,
m
2
= a massa do picnmetro cheio com o lquido (etanol) cuja densidade
relativa que deseja determinar, e
m
3
= a massa do picnmetro cheio de gua pura (na prtica, gua
destilada).

A densidade relativa do lquido em questo obtida a partir da equao acima:

8

O H
ETANOL
O H ETANOL
m
m
2
2
,
= (3)

onde: m
ETANOL
= m
2
- m
1
a massa do lquido em questo (ETANOL) que ocupa o volume
V do picnmetro, e m
H2O
= m
3
m
1
, a massa da gua pura que ocupam o mesmo
volume V. Este resultado pode ser demonstrado facilmente, por meio da aplicao do
conceito de densidade (Eq.1), e pela definio de densidade relativa (Eq.2).

Cuidados preliminares:
No toque o picnmetro com os dedos (proteja-os com papel absorvente).
Eliminar cuidadosamente as bolhas de ar que se aderem superfcie interna do
picnmetro.
Lavar muito bem o picnmetro na troca de lquidos, usando na ltima etapa da lavagem
(sempre que possvel) o lquido da pesagem seguinte.
Secar o picnmetro externamente, evitando tocar na parte superior do mesmo (tampa).
Anote a temperatura de trabalho.

3- Objetivos

Abordar o conceito geral de densidade e desenvolver uma tcnica para medir
densidade de lquidos, utilizando o mtodo dos picnmetros.

4- Parte Experimental

A- Calibrao do volume do picnmetro.

Pese o picnmetro vazio em balana analtica. Encha o picnmetro com gua
(conforme instrues dadas na aula), mantenha o picnmetro no banho por cerca de 10
minutos a 25C, e a seguir enxugue a parte externa e determine a massa do mesmo com
a gua. Use a densidade da gua para determinar o volume do picnmetro.

Tabela 4.1 - Densidade absoluta da gua
1


T/
o
C d/(g cm
-3
) T/
o
C d/(g cm
-3
)
10 0,999700 20 0,998203
11 0,999605 21 0,997992
12 0,999498 22 0,997770
13 0,999377 23 0,997538
14 0,999244 24 0,997296
15 0,999099 25 0,997044
16 0,998943 26 0,996783
17 0,998774 27 0,996512
18 0,998595 28 0,996232
19 0,998405 29 0,995944

B- Medidas da densidade de lquidos
Determinao da densidade do etanol e butanol:
9

Lave trs vezes o picnmetro com um pequeno volume do lquido cuja
densidade ser determinada (etanol e butanol) para remover os resduos de
gua do seu interior.
Em seguida encha o picnmetro com o solvente termostatizado. Mantenha o
picnmetro no banho por cerca de 10 minutos. Adicione o lcool (sugesto:
ao encher o frasco com lcool, tome cuidado para no haver a formao de
bolhas, pois isto acarretaria erros nos resultados) e coloque a tampa de
maneira que o excesso de lquido escorra pelo capilar. Com um pano ou
papel poroso, enxugue o lquido presente na parte externa do picnmetro.
Pese o picnmetro (contendo o lquido) em uma balana analtica. Repita a
pesagem mais duas vezes retirando o picnmetro da balana a cada
pesagem. Utililize um pedao de papel para carregar o picnmetro.
Mea a temperatura do lquido.
Complete a Tabela 4.2. A diferena entre essa massa e a massa do
picnmetro vazio permitir determinar a massa do lcool. Como o volume do
lcool corresponde ao volume do picnmetro, determinado durante a
calibrao, a densidade do lcool poder ser facilmente determinada.
Repita o mesmo procedimento para o outro lcool.
Tabela 4.2 - Resultados referentes aos lcoois.
Grandeza Resultado (etanol) Resultado (butanol)
Massa picnmetro vazio
Massa (picnmetro +
lcool)

Massa do lcool
Volume de lcool
Densidade do lcool


C- Medidas da densidade de slidos
Lave o picnmetro com lcool.
Adicione o estanho. Coloque gua destilada at aproximadamente metade
do volume do picnmetro e mergulhe-o em um bquer contendo gua
destilada em ebulio para remover as bolhas de ar que ficaram aderidas na
superfcie do slido.
Deixe o picnmetro em um banho termostatizado durante 10 minutos.
Retire o picnmetro do banho, preencha-o com gua destilada. importante
tomar cuidado ao encher o frasco com a gua, para no ocorrer formao de
bolhas. Isso acarretaria erros nos resultados.
Coloque a tampa de maneira que o excesso de gua escorra pelo capilar.
Com um pano ou papel poroso, enxugue o lquido presente na parte de fora
do picnmetro.
Pese novamente o picnmetro contendo (amostra + gua destilada) e anote
sua massa. Pese mais duas vezes retirando o picnmetro da balana a cada
pesagem. Utililize um pedao de papel para carregar o picnmetro.
Repita a operao para a outra amostra (prego).
Complete a Tabela 1.7 para cada uma das amostras (prego e Sn) e calcule
os valores de suas densidades.
10

Tabela 4.3 - Resultados referentes determinao da densidade de slidos.
Grandeza Resultado
(estanho)
Resultado (prego)
Massa picnmetro vazio
Massa (picnmetro + amostra)
Massa do amostra
Massa
(picnmetro+amostra+gua)

Massa da gua
Volume da gua
Volume da amostra
Densidade da amostra

5- Referncias
1- Baccan, N.; de Andrade, J.C.; Godinho, O.E.S. e Barone, J.S., "Qumica
Analtica Quantitativa Elementar", 3 ed., Editora Edgard Blcher Ltda, So
Paulo, 2004, p.292.
2- BALL, D.W., Fsico-Qumica, 1
a
. ed., Vol. 1 e 2, Thomson Learning, 2005.
3- RANGEL, R.N., Prticas de Fsico-Qumica, 3
a
. ed., Edgard Blucher, 2006.
4- CASTELLAN, G. Fundamentos de Fsico-Qumica. Livros Tcnicos e
Cientficos Editora, 1986.
5- ATKINS, P. W., PAULA, J., Fsico-Qumica, Vol. 1, 2 e 3, LTC, 2004.
6- MOORE, J.W. Fsico-Qumica, Vol.1 e 2, 4
a
ed., Editora Edgard Blucher, 1976.












11

EXPERIMENTO 3: VISCOSIDADE INTRNSECA

1- INTRODUO

Medidas de viscosidade intrnseca tm sido usadas para caracterizao de
macromolculas desde que foi comprovada sua existncia. um dos mtodos mais
simples para a determinao de massa molar de polmeros, mas permite tambm a
obteno de informaes referentes a interaes polmero- solvente.
A diferena entre a viscosidade de uma soluo diluida e a do solvente
o
uma
medida da viscosidade de molculas individuais de soluto. A relao entre esta diferena
e a viscosidade do solvente fornece a viscosidade especfica (
sp
)
1
0 0
0
=

sp


onde a razo entre as viscosidades da soluo e do solvente (/
o
) denominada
viscisidade relativa. Em um viscosmetro capilar, a viscosidade do lquido proporcional
sua densidade e ao tempo de escoamento,

= k t

onde k uma constante do viscosmetro,
a densidade do lquido
t o tempo de escoamento.

Para se determinar a viscosidade relativa, no necessrio conhecer a constante
do viscosmetro, uma vez que

o o o
t k
t k

Para uma soluo diluda, podemos assumir que a densidade da soluo seja da
mesma ordem de grandeza da densidade do solvente e a viscosidade relativa
simplesmente a razo entre os tempos de escoamento da soluo e do solvente puro. A
viscosidade aumenta com a concentrao de soluto e a relao
sp
/c chamada
viscosidade reduzida (
red
). A extrapolao de
red
para concentrao zero fornece a
viscosidade intrnseca [], que uma medida do volume hidrodinmico das
macromolculas em soluo. A [] d informao quanto ao tamanho das
macromolculas e qualidade do solvente. A relao entre viscosidade intrnseca e
massa molar dada pela equao de Staudinger- Mark- Houwink, [ ]=K M
a
.

As
constantes K e a podem ser determinadas experimentalmente e constantes para um
determinado sistema polmero/solvente numa determinada temperatura. Portanto, a partir
da viscosidade intrnseca possvel determinar a massa molar.
A viscosidade de polmeros tem grande importnia prtica. Polmeros so
utilizados, por exemplo, como aditivo para leos de motores. Um bom leo deve ter baixa
viscosidade em temperaturas baixas, mas no deve ser muito fluido em temperaturas
mais elevadas. Como o leo puro se torna menos viscoso medida que a temperatura
aumenta a soluo para o problema adicionar molculas de polmeros cuja viscosidade
reduzida aumente com a temperatura.

12

2- PROCEDIMENTO

1) Prepare uma soluo estoque do polmero a ser estudado em um solvente adequado.
Por exemplo, poli(acrilamida) em gua.

2) A partir da soluo acima prepare, por diluio, 25 mL de soluo de 5 concentraes
diferentes (entre 5x10
-4
e 25x10
-4
g.mL
-1
).

3) Lave o viscosmetro capilar com HNO
3
concentrado e vrias vezes com gua
destilada.

4) Mea o tempo de escoamento no viscosmetro para o solvente puro e as solues na
temperatura indicada pelo professor. Para a poli(acrilamida) em gua, 30C. Deixe a
soluo em banho termostatizado por 10 minutos antes de medir. Utilize sempre o
mesmo volume de lquido no viscosmetro.

5) Calcule a viscosidade relativa e a viscosidade especfica para cada soluo e
construa uma curva de
sp
/c em funo de c.

6) Obtenha a massa molar mdia do polmero usando a equao [ ]=K M
a
. Para a
poli(acrilamida) em gua a 30C, as constantes da equao de Staudinger-Mark-
Houwink so: K = 6,31x10
-3
mL/g e a = 0,80.

.
3- QUESTIONRIO

1. Mostre numa tabela os tempos de escoamento obtidos para cada soluo, indicando o
desvio mdio para cada medida. Inclua nesta tabela os valores correspondentes de
viscosidade relativa, viscosidade especfica e a razo da viscosidade especfica pela
concentrao.

2. Determine graficamente a viscosidade intrnseca.

3. Determine a massa molar do polmero.

4. Qual seria o procedimento experimental para determinar as constantes K e a para um
determinado sistema polmero/solvente?

5. Que cuidados experimentais devem ser considerados quando se determina a
viscosidade intrnseca?

6. Utilize os dados da tabela a seguir para calcular a massa molar mdia de uma
amostra de poliestireno. Os dados correspondem ao tempo de escoamento de
solues de poliestireno em benzeno em um viscosmetro de Ostwald.


Concentrao (g/100mL) 0 1,8 1,2 0,85 0,49 0,16 0,09

Tempo de escoamento (s) 58 246 158 118 87 66 62

13

Para o poliestireno em benzeno, a equao de Mark-Houwink a esta temperatura
[]=6,3x10
-3
mL/g M
0,7 8



4- REFERNCIAS

1. J. Brandrup e H.Immergut, editores. Polymer Handbook. JohnWiley & Sons, New York,
1975.
2. F. Daniels. Experimental Physical Chemistry. McGraw-Hill Book Co., 6 edio. 1962,
p.296-300.
3. D.P.Shoemaker e C.W.Garland.Experiments in Physical Chemistry. McGraw-Hill
Kagakusha, 2 edio, 1967, p. 278-286 .
4. F.Rodriguez . Principles of Polmer Systems, McGraw - Hill International Book Co. ,
2
a
. edio , 1885, p. 162- 168 .
5. K. E. Van Holde. Bioqumica Fsica. Editora Edgard Blucher. So Paulo, 1975,
cap.2 e 7.
6. D. J. Shaw. Introduo Qumica dos Colides e de Superfcies. Editora



































14

EXPERIMENTO 4: ISOTERMA DE ADSORO


1- OBJETIVO:

Estudar a adsoro do cido actico sobre carvo vegetal.
Calcular as constantes de adsoro em funo da concentrao do cido usando o
modelo de Freundlich.

2- TEORIA

Quando um sistema constitudo por duas fases, uma condensada e outra lquida
ou em soluo e as duas estiverem em contato, geralmente h um aumento ou diminuio
da concentrao do soluto na interface. Este fenmeno denominado adsoro.
H dois tipos principais de adsoro sobre slidos: adsoro qumica e adsoro
fsica. Na adsoro fsica as molculas fixam-se na superfcie do adsorvente utilizando as
foras de van der Waals podendo formar vrias camadas, enquanto que na adsoro
qumica h uma reao qumica entre as molculas da fase condensada e as da soluo
atravs das valncias livres dessas molculas.
H. Freundlich, estudando o fenmeno da adsoro empiricamente, chegou
seguinte equao:



Onde: x a quantidade de soluto adsorvido pela massa m do slido, m massa do
adsorvente slido, c a concentrao de equilbrio e K e n so constantes empricas.
Para adsores fsicas de cido em carvo, n tem valores entre 0,1 e 1,0 e uma funo
que depende da natureza do sistema.
Para um dado sistema a quantidade de soluto adsorvido funo da concentrao
do adsorvato, da rea superficial do adsorvente (fase slida) e da temperatura. Assim,.
quando a adsoro medida por (x/m), dada em funo do concentrao a uma
temperatura fixa, tem-se uma a isoterma de adsoro. Para calcular as constantes K e n.
necessrio fazer um grfico de log (x/m) versus log (c) .
15



3- MATERIAL:

6 erlenmeyers de 250 mL, 2 buretas de 50 mL, 1 pipeta de 10 mL, 1 pipeta de 25 mL, 1
pipeta de 50 mL, 6 bales volumtricos de 100 mL, 1 bquer de 250 mL, 1 funil, papel
filtro, 200 mL de cido actico 1M, 500 mL de hidrxido de sdio 1M, 20 g de carvo ativo
e fenolftalena.

4- TCNICA EXPERIMENTAL


Coloque 10g de carvo ativo num bquer, lave-o com gua destilada filtre-o
coloque-o na estufa a120
o
C por uma hora. Retire-o e deixe-o esfriar em dessecador sob
vcuo.
Prepare 200 mL de uma soluo de cido actico 0,5 M e padronize-a, titulando-a
com 25 mL de uma soluo de NaOH 0,5 M, usando fenolftalena como indicador. Com o
restante da soluo padronizada prepare 5 solues de 100 mL de cido, nas
concentraes 0,25 a 0,01M. Para isto, use cinco bales volumtricos de 100 mL usando
os volumes da tabela abaixo:

SOLUO 1 2 3 4 5
c. Actico padro, mL 50 25 10 5 2
gua destilada, mL 50 75 90 95 98
Concentrao obtida, M 0,25 0,125 0,05 0,025 0,010


Pese 5 erlenmeyers com rolha e 5 amostras de carvo de 0,25g cada (faa as pesagens
rapidamente, para evitar adsoro de umidade da atmosfera). Transfira as solues
preparadas para os erlenmeyers que contem carvo ativo e comece a anotar o tempo.
Deixe a mistura sob agitao por 45 minutos. Em seguida deixe o carvo decantar e filtre.
Use 10 mL da amostra 1 e titule com hidrxido de sdio 0,5 M, utilizando como indicador a
fenolftalena. Faa a mesma titulao com as amostras 2, 3, 4 e 5.

5- TRATAMENTO DOS DADOS EXPERIMENTAIS:
A partir da titulao inicial do cido actico, das quantidades colocadas em cada
frasco e dos resultados das titulaes, complete a tabela seguinte:
16



Faa um grfico de log (x/m) versus log c. Calcule as constantes K e n atravs do
grfico pelo coeficiente linear e angular usando a equao da reta.

6- QUESTIONRIO

1. Discuta os valores de K e n calculados.
2. Faa um grfico de x/m versus c e discuta a sua forma em relao a concentrao do
cido.
3. Explique o mecanismo responsvel pela adsoro.
4. Quais os fatores que podem influenciar a adsoro.
5. Discuta algumas aplicaes gerais da adsoro.
6. A adsoro do cido actico em carvo vegetal, uma adsoro qumica ou fsica? Por
qu? Segundo sua resposta, foi vlido usar a isoterma de Freundlich neste
experimento?

7- BIBLIOGRAFIA

1. Shaw, D. J. . Introduo a Qumica dos Colides e Superfcies. Traduo Juergen H.
Maar. So Paulo Edgar Blucher, 1975. 4
a
Edio em ingls, 1992.
2. Hunter, R. J. Introduction to a Modern Colloid Science, Oxford University Press, 1993.
3. Atkins, P. W. Phisycal Chemistry. Oxford University Press, 1990.










17

EXPERIMENTO 5: DETERMINAO DE FUNES TERMODINMICAS:
ENTALPIA, ENTROPIA E ENERGIA LIVRE DE GIBBS

Nesta prtica iremos determinar as trocas de energia na forma de calor envolvidas
em processos qumicos e fsicos. Estas experincias sero realizadas em um calormetro
adiabtico e determinaremos algumas funes termodinmicas, tais como: entalpia,
entropia e energia livre de Gibbs.

1. Determinao da capacidade equivalente do calormetro, C
calormetro

Colocar 50 mL de gua destilada no calormetro e anotar a temperatura inicial (T
1
)
Aquecer 50 mL de gua destilada at atingir a temperatura T
2
= 40
o
C. Esta temperatura
deve permanecer constante. Introduzir rapidamente a gua destilada aquecida no
calormetro
Agitar bem e anotar a temperatura de equilbrio (T
3
)
Determinar a capacidade do calormetro (C
calormetro
) a partir da relao:
Q
cedido
= Q
recebido
onde Q = CT e C = m c, c = calor especfico e m = massa
50 (T
2
T
3
) = C
calormetro
(T
3
T
1
) + 50 (T
3
T
1
)
Geralmente, a capacidade calorfica do calormetro expressa em relao a massa de
gua. Esta considerao correta? Por que?

2. Determinao da entalpia de dissoluo do NaOH
Adicionar 100 mL de gua num calormetro e anotar a temperatura T
1
, em seguida,
introduzir no calormetro NaOH agitar bem. Medir a variao da temperatura com o tempo.
A temperatura deve atingir o estado de equilbrio (T
2
). O calor desenvolvido no caso a
entalpia de dissoluo e ser igual :
C
EQUIVALENTE
(T
2
T
1
) = H ,
onde C
EQUIVALENTE
= C
calormetro
+ C
H2O


Determine o calor de dissoluo para as seguintes massas de NaOH:
0,5 g, 1,0 g, 2,0 g, 3,0 g, 4,0 g e 5,0 g. Calcule a entalpia de dissoluo, a entropia e
energia livre em J/mol e faa um grfico destas funes de estado em funo da
quantidade de matria de NaOH.

3. Determinao da entalpia, entropia e energia livre de neutralizao de
cidos
18


3.1. Preparar 100 mL de NaOH 0,5 mol/L. Retire uma alquota de 50 mL e introduza no
calormetro. Medir a temperatura T
1
. Preparar 50 mL de uma soluo 0,5 mol/L de HCl.
Anotar a temperatura da soluo T
2
. Quando as temperaturas T
2
= T
1
, introduzir a
soluo de HCl no calormetro. Homogeneizar e medir a variao da temperatura de 0 em
10 segundos at atingir o equilbrio, T
3
.

3.2. Coloque 50 mL de NaOH 0,5 mol/L no calormetro e anote a temperatura T
1
. Preparar
50 mL de uma soluo 0,5 mol/L de CH
3
COOH. Anotar a temperatura da soluo T
2
.
Quando a temperatura T
2
= T
1
, introduzir a soluo de CH
3
COOH no calormetro.
Homogeneizar e medir a variao da temperatura de 10 em 10 segundos at atingir o
equilbrio.
4- Referncias
1- Baccan, N.; de Andrade, J.C.; Godinho, O.E.S. e Barone, J.S., "Qumica
Analtica Quantitativa Elementar", 3 ed., Editora Edgard Blcher Ltda, So
Paulo, 2004, p.292.
2- BALL, D.W., Fsico-Qumica, 1
a
. ed., Vol. 1 e 2, Thomson Learning, 2005.
3- RANGEL, R.N., Prticas de Fsico-Qumica, 3
a
. ed., Edgard Blucher, 2006.
4- CASTELLAN, G. Fundamentos de Fsico-Qumica. Livros Tcnicos e
Cientficos Editora, 1986.
5- ATKINS, P. W., PAULA, J., Fsico-Qumica, Vol. 1, 2 e 3, LTC, 2004.
6- MOORE, J.W. Fsico-Qumica, Vol.1 e 2, 4
a
ed., Editora Edgard Blucher, 1976.







19

EXPERIMENTO 6 - EQUILBRIO DE FASES

Fase uma palavra de origem grega que representa aparncia. Assim, o nmero
de fases em um sistema tradicionalmente associado ao nmero de sistemas com
diferente aparncia que coexistem em uma determinada condio. Uma ou mais fases
podem estar em equilbrio em sistemas de um ou mais componentes, e a identificao do
tipo de sistema que esperado em certa condio de grande importncia para
processos industriais. Uma maneira concisa de representar estas informaes atravs
do que se chama diagrama de fases. Nestes grficos, representa-se o nmero e tipo de
fases em equilbrio em um certo sistema, em funo de parmetros chamados variveis
intensivas
O estudo de equilbrio de fase deve muito a contribuio de J.W. Gibbs, que
enunciou uma regra em que se baseia toda a determinao de diagramas de fase.
Enuncie e explique esta regra, aplicando-a a um diagrama de fase de sua escolha.
Este experimento versar sobre a determinao de dois diagramas de fase e da
discusso das informaes que podem ser obtidas a partir dele. Os sistemas a serem
estudados, um binrio e outro ternrio, encontram-se descritos em mais detalhes a seguir.
Ao trmino dos experimentos, espera-se que o aluno tenha clareza sobre os seguintes
conceitos: condio de equilbrio em sistemas de mais de uma fase, construo e
interpretao de diagramas de fase, regra das fases de Gibbs, significado de graus de
liberdade em equilbrio de fases, utilizao da regra da alavanca, entre outros.
Metodologia

1. Determinao do Equilbrio Lquido-Lquido em um Sistema Binrio

Neste experimento, determinaremos a curva de miscibilidade de uma mistura de
fenol com gua, em funo da temperatura.

ATENO : tome muito cuidado com o manuseio do fenol, pois este extremamente
custico. obrigatrio o uso de luvas e culos durante este experimento. Em caso
de contato com o fenol, lave o local imediatamente com bastante gua.

O diagrama de fases do fenol ser obtido a partir da preparao de misturas com
diferentes composies e da determinao da temperatura de miscibilizao de cada
mistura. Primeiramente, adicione 4 g de fenol a um tubo de ensaio (as massas devem ser
anotadas com o valor exato). Adicione, sucessivamente, gua at os seguintes volumes
finais (utilize uma bureta, a massa de gua adicionada ser obtida a partir de sua
densidade): 2; 3; 4 e 6 mL. Para cada composio, aquea o tubo em um banho-maria at
que a soluo esteja homognea (sugere-se que este banho seja mantido em torno de 70-
80 C). Remova o tubo do banho e, com um termmetro mergulhado no tubo (que pode
ajudar na sua homogeinizao), mea a temperatura em que se inicia a turvao. Repita
esta medida pelo menos mais uma vez, obtendo resultados que devem ser ter diferenas
menores que 1 C.
Em outro tubo de ensaio, repita os procedimentos acima partindo de 1 g de fenol e
adicionando gua at: 2; 3; 4 e 5 mL. Repita a operao em outro tubo, agora utilizando
0,5 g de fenol e adicionando gua at: 3; 3,5 e 5 mL.
Represente o diagrama de fases graficando a temperatura mdia de homogeinizao
(indique tambm a incerteza destas medidas) em funo da composio da mistura (em
termos de frao mssica).
Questes para serem respondidas no relatrio:

20

i) qual a temperatura crtica do sistema fenol/gua? Este do tipo TCS ou TCI
(discuta o que isto representa em termos das interaes intermoleculares).

ii) Com base no diagrama obtido, caracterize o sistema composto por 4 g de fenol e
6 g de gua, na temperatura de 50 C (nmero de fases e a sua composio e
quantidade).


2. Determinao do Equilbrio Lquido-Lquido em um Sistema Ternrio

O sistema estudado neste experimento ser a mistura de gua + cido actico +
clorofrmio. A representao usual para o diagrama de fases de um sistema ternrio usa
grficos triangulares.
Prepare as misturas indicadas na Tabela 1, adicionando o componente indicado
como a determinar com o auxlio de uma bureta at a visualizao de turvao
permanente (sinal de transio para regio de duas fases). Os volumes exatos
adicionados de cada componente devem ser anotados. Registre tambm a temperatura
no incio e fim do experimento.

Tabela 1. Misturas preparadas para determinao do diagrama de fases.

Vol. gua/mL Vol. HAc/mL Vol. CHCl
3
/mL
1 24 16 Determinar
2 8 12 Determinar
3 5 15 Determinar
4 1 9 Determinar
5 Determinar 4 36
6 Determinar 5 15
7 Determinar 8 12
8 Determinar 12 8

Preparar duas das misturas indicadas na Tabela 2 (evitem repetir as mesmas
escolhas em todos os grupos). Espera-se at que a separao das fases tenha-se
completado e retiram-se alquotas de 5 mL de cada fase (retire pelo menos duas alquotas
de cada fase, tendo cuidado para evitar que estas se misturem). Estas alquotas devem
ser pesadas. Titule cada uma destas alquotas com a soluo de NaOH (1,0 mol/L)
padronizada que est disponvel (use fenolftalena como indicador), e determine a
quantidade de cido actico em cada fase.



Tabela 2. Sistemas sugeridos para determinao da composio das fases em equilbrio.

Vol. gua/mL Vol. HAc/mL Vol. CHCl
3
/mL
1 18 4 18
2 14 8 18
3 10 12 18
4 6 16 18

ATENO : todos os procedimentos devem ser realizados em capela, devido utilizao
de cido actico glacial e clorofrmio.
21


Relatrio

i) apresente o diagrama de fases para este sistema ternrio, inclusive com as linhas
de amarrao determinadas.

ii) Aplique a regra das fases nas diferentes regies do diagrama de fases.

iii) Calcule a massa das fases em equilbrio nos dois sistemas escolhidos da Tabela
2.

iv) Discuta algumas propriedades deste sistema (miscibilidades parciais, interaes
entre componentes, inclinao das linhas de amarrao).


3- Referncias
1- BALL, D.W., Fsico-Qumica, 1
a
. ed., Vol. 1 e 2, Thomson Learning, 2005.
2- RANGEL, R.N., Prticas de Fsico-Qumica, 3
a
. ed., Edgard Blucher, 2006.
3- CASTELLAN, G. Fundamentos de Fsico-Qumica. Livros Tcnicos e Cientficos
Editora, 1986.
4- ATKINS, P. W., PAULA, J., Fsico-Qumica, Vol. 1, 2 e 3, LTC, 2004.
















22

EXPERINCIA 07 - DETERMINAO DA CONSTANTE DE DISSOCIAO
DE UM INDICADOR POR ESPECTROFOTOMETRIA.

Objetivos:
Analisar o comportamento de indicadores na presena de solues de pH variados.
Utilizar um espectrofotmetro para determinar a constante de dissociao de um
indicador.

1. Teoria
Denomina-se indicador ( HIn) uma substncia cuja cor depende do pH do meio.
Geralmente caracteriza-se por ser um base ou cido orgnico fraco, que se ioniza na
forma:

HIn H
+
+ In
(Cor A) (Cor B)

A constante de ionizao (K) do indicador dada por:

[ ][ ]
HIn
In H
K
+
=
.
(1) ou
[ ]
[ ] HIn
In
pK pH

= log


Segundo o princpio de Le Chatelier-Braun, pode-se concluir que, se o indicador se
encontra em solues de pH's abaixo do pKIn, sua cor ser a da forma no ionizada HIn
(Cor A) e se acima do pKIn, ser da forma ionizada In (Cor B). Isto quer dizer que
fazendo-se vrias solues de concentrao conhecida a diferentes pH's tem-se uma
escala de cores que vai da cor A at a cor B. Assim tendo-se solues de pH conhecido
ser possvel conhecer suas cores.

Tabela 1: Exemplo de indicadores cujo pH de viragem conhecido*.

Indicadores pKIn Cor A Cor B

Faixa de
viragem Transio de Cor
Alaranjado de metila 3,7 2,9 4,6 Vermelho Alaranjado
Azul de bromofenol 4,1 2,8 4,6 Amarelo Azul
Vermelho de metila 5,0 4,2 6,3 Vermelho Amarelo
Bromocresol prpura 6,1 5,2 6,8 Amarelo Prpura
Azul de bromotimol 7,1 6,0 7,6 Amarelo Azul
Vermelho de cresol
(bsico)
8,2 7,2 8,8 Amarelo Vermelho
Prpura de cresol 8,3 7,4 9,0 Amarelo Prpura
Fenoftalena 9,6 8,3 10,0 Incolor Rosa
*Voguel Anlise qumica quantitativa 5
0
Ed.

Em funo de suas cores, a constante de dissociao dos indicadores pode ser estudada
utilizando-se um aparelho chamado de espectrofotmetro na regio da luz visvel. A teoria
baseia-se no fato de que um feixe de luz de intensidade inicial Io ao atravessar uma
soluo lquida pode ser absorvido em parte por uma substncia, de tal modo que sua
intensidade transmitida ser I . A variao da intensidade funo da natureza da soluo
e depende do coeficiente de absortividade molar ( ), do caminho tico (b) e da
23

concentrao da soluo (C). A relao entre I e Io dada pela equao de Lambert-Beer
equao 2.




O fator - log(I / Io) = A a absorbncia a um comprimento de onda particular que depende
da substncia (indicador). Para a dissociao de um indicador as concentraes das
espcies presentes podem ser relacionadas com a absorbncia atravs das relaes 3 e
4:


Desta forma, substituindo na equao 1 tem-se;


Fig-2- Espectros de Hin em sol. Tampes
de diferentes pH.


Conhecendo-se as absorbncias (A, AHin e AIn-) a vrios pH's, pode-se determinar o valor
de pK e do K usando a equao 5. Conforme figura 2, a absorbncia AHin corresponde a
curva 1 e a Absorbncia AIn- corresponde a curva 6. As outras curvas so as
absorbncias (A) das outras amostras. Desta forma determina-se 4 valores de pK cuja
mdia ser o valor experimental do pK da experincia.

Outra forma de calcular o pK atravs de um grfico de pH versus

A A
A A
In
HIn
log
Neste caso o coeficiente linear ser o pK.



24


2. Material

-2 buretas de 10 mL; 1 pipeta graduada de 0,2 mL
-1 pipeta volumtrica de 5 mL
- 1 bquer de 250 mL, 2 de 50 mL
- 12 tubos de ensaio mdios
- 100 mL de fosfato de sdio 0,2 mol L-1 (Na2HPO4.x H2O)
- 100 mL de cido ctrico 0,1 mol L-1.

3. Procedimento experimental


Figura 3- Indicador vermelho de metila

1. (Parte 1) Prepare 15 mL de soluo tampo (srie McIlvaine ) conforme tabela 2, em
6 tubos de ensaio numerados de 1 a 6.

Tabela 2: Srie McIlvaine obtido pela mistura de hidrognio fosfatodissdico e cido
ctrico.


OBS: Os volumes devem ser medidos com preciso.

2.Transfira 5 mL (pipeta volumtrica) das sol. de cada tubo para uma nova srie de 6
tubos numerados, reserve-os para executar a parte 2.

3. Calibre o pH-metro com padres de pH 7,0 e 4,0 e mea o pH das solues da 1 srie
de 6 tubos (complete os dados da tabela 3), em seguida adicione uma gota de cada
indicador conforme Tabela 3, de acordo com o pH respectivo.

4. Parte 2- Adicionar 0,2 mL de Vermelho de Metila diludo a cada tubo contendo os 5 mL
das solues da 2a srie de 6 tubos de ensaio.

5. Mea as absorbncias ( A) de cada soluo contendo os 0,2 mL de vermelho de
metila diludo (2a srie) variando o comprimento de onda de 400 nm a 600 nm.

25

Assuma que o valor da absorbncia em pH=3 corresponde a AHIn e em pH=8 a AIn .

Tabela 3: Determinao do pH aparente

Serie Mcllvaine Indicador Colorao da Soluo pH Medido
pH 3,0 Alaranjado de metila
pH 4,0 Vermelho do congo
pH 5,0 Vermelho de metila
pH 6,0 Bromocresol prpura
pH 7,0 Azul de bromotimol
pH 8,0 Vermelho de fenol


4. Questionrio e clculos

1.Com os dados de absorbncia extrados dos espectros, determine pK e a constante de
dissociao (K) do indicador utilizando a equao 5 (Figura 2). Obs: Os valores de
absorbncia para os clculos devero ser obtidos do grfico em 520 nm
(aproximadamente). A constante de dissociao corresponde a mdia aritmtica dos
quatro valores encontrados.
2. Faa um grfico conforme figura 3 e calcule o pK. Compare o pK do indicador calculado
algebricamente (questo 1) e atravs do grfico, discuta os resultados.
3. Obtenha na literatura o valor terico do pK do indicador e calcule o erro experimental.
4. possvel observar a existncia de ponto isosbstico nos espectros de absorbncia
que voc obteve? O que ponto isosbstico ? Quando isto acontece?
5. O que so espectros de absoro? Explique.
6. Que tipo de molculas apresenta absoro no ultravioleta e/ou no visvel?

5. Referncias

1. Garret Morris, Fsico-Qumica para Bilogos.
2. N.Baccan, J.C. de Andrade, E.S. Godinho e J.S. Barone, Qumica Analtica Quantitativa
Elemetar. 2o Ed. 1992.
3. Voguel, Anlise Qumica Quantitativa, 5o Ed., LTC - Livros Tcnicos e Cientficos
Editora S.A., R.J., 1992.
5. H. D. Crockford, J. W. Nowell, " Laboratory Manual of Physical Chemistry", John Wiley &
Sons, New York, 1976.
6. R. Chang, Physical Chem. Whit Appllic. To Biol. Systems. 2o Ed. 1981.






26

EXPERINCIA 8- INFLUNCIA DA TEMPERATURA NA CONSTANTE DE
VELOCIDADE DA REAO


1- INTRODUO

A determinao da constante de velocidade de decomposio do acetato de etila
em meio cido pode ser descrita como:

CH
3
CO
2
C
2
H
5
+ H
2
O CH
3
CO
2
H + C
2
H
5
OH
H
+

A reao de decomposio do acetato de etila catalisada por cidos uma reao
de pseudoprimeira ordem e depende da concentrao do ster. Por ser uma reao de
pseudoprimeira ordem obedece relao:

log (a
o
- x) = log a
o
K
v
t/2,303

onde a
o
a concentrao no tempo igual a 0 e (a
o
x) concentrao num tempo t.

Na determinao da constante de velocidade pelo mtodo de extrao de
amostras, a concentrao inicial do ster (a
o
) proporcional a V-V
o
, onde V o volume
de NaOH gasto no tempo final da reao e V
o
o volume de NaOH gasto no tempo zero,
apenas para determinar a quantidade de HCl adicionada. A concentrao (a
o
-x)
equivalente a V-V
t
, onde V
t
o volume de NaOH gasto num tempo t qualquer. A
equao acima pode ser reescrita como:

log (V -V
t
) = log (V -V
o
) - K
v
t/2,303

A constante de velocidade pode ser calculada atravs do coeficiente angular da
representao de log (V -V
t
) em funo de t.

A constante de velocidade da reao depende da freqncia de colises, da energia de
ativao e da temperatura. A equao que relaciona estes parmetros foi proposta por
Arrhenius e dada por:

K
V
= A exp (E
AT
/RT)

A uma constante denominada de fator de freqncia, E
AT
a energia de ativao e T a
temperatura

log K
V
= log A E
AT
/RT)

Conhecendo-se o valor da constante de velocidade em duas temperaturas possvel
determinar a energia de ativao:

log [K
V,2
/K
v,1
]

= -E
AT
/2,303R[ 1/T
2
1/T
1
]

27

2 - EXPERIMENTAL

1. Preparar 500 mL de uma soluo de NaOH 0,25 mol/L. Retirar trs alquotas de 10 mL
cada e padronizar com hidrognio ftalato de potssio ou biftalato de potssio. Secar
biftalato de potssio (padro primrio) em estufa a 110
o
C por 1 a 2 h. Resfriar em
dessecador. Como indicador utilizar fenolftalena.

2. Preparar 250 mL de HCl 1,0 mol/L. Retirar 5,0 mL desta soluo e titular com NaOH
0,25 mol/L padronizado. Como indicador utilizar fenolftalena. Determine V

.

3. Preparar um banho de gelo e em cada um deles coloque um erlenmeyer

Parte I: Determinao da constante de velocidade a 25
o
C


1.1. Num erlenmeyer colocar 100 mL de HCl 1,0 mol/L e 5,0 mL de acetato de etila
concentrado. Homogeneizar bem a soluo. Manter a temperatura constante.
1.2. Decorridos 25, 40, 55, 70, 85, 100 minutos retirar uma alquota contendo 5,0 mL
da soluo reacional, colocar no erlenmeyer introduzido no banho de gelo e titular
com NaOH 0,25 mol/L. Como indicador utilizar fenolftalena. Isto permitir medir o
volume de cido actico liberado num tempo qualquer (V
t
).
1.3. Decorridos 180 minutos da reao retirar uma alquota de 5,0 mL e determinar V

Parte II: Determinao da constante de velocidade a 40
o
C

2.1. Num erlenmeyer colocar 100 mL de HCl 1,0 mol/L e 5,0 mL de acetato de etila
concentrado. Homogeneizar bem a soluo. Manter a temperatura de 40
o
C
2.2. Decorridos 25, 40, 55, 70, 85, 100 minutos retirar uma alquota contendo 5,0 mL da
soluo reacional, colocar no erlenmeyer introduzido no banho de gelo e titular com
NaOH 0,25 mol/L. Como indicador utilizar fenolftalena. Isto permitir medir o
volume de cido actico liberado num tempo qualquer (V
t
).
2.3. Decorridos 180 minutos da reao retirar uma alquota de 5,0 mL e determinar V










28

EXPERINCIA 9: CINTICA DE REAES ENZIMTICAS


Objetivo: Estudar reaes catalisadas por enzimas.
Usar espectofotmetro para acompanhar um processo cintico.

1- INTRODUO

Enzimas so protenas que catalisam reaes qumicas com uma eficincia
formidvel. A enzima catalase, por exemplo, que catalisa a decomposio do perxido de
hidrognio segundo a reao:

2H
2
O
2
(aq) 2H
2
O + O
2


So catalisadores to eficientes que uma simples molcula da enzima pode
decompor milhes de molculas de perxido de hidrognio por minuto, correspondendo a
um aumento da velocidade da reao de 10
7
a 10
8
vezes.
A regio da molcula onde a enzima e o substrato interagem para formar um
complexo denominado de centro ativo. Uma das explicaes para a eficincia da enzima
que o complexo enzima-substrato (ES) apresenta uma conformao bem prxima do
estado de transio da reao, reduzindo desta forma a energia de ativao da reao. A
reao total se processa de acordo com o esquema abaixo

E + S [ES] E + P

onde (E) representa a enzima, (S) o substrato e (P) o produto.
Outra caracterstica importante da enzima a sua especificidade, cada enzima
combina-se com o seu substrato bem especfico ou com uns poucos bem semelhantes em
estrutura, sugerindo que uma enzima e substrato encaixam-se juntos como uma chave e
fechadura.
Cintica: Medindo a velocidade inicial
(V
O
) de uma reao simples (S P), quando
esta catalisada por uma dada concentrao
de enzima (E
O
) sob condies constantes de
reao, verifica-se, que (V
O
) varia com a
concentrao de substrato [S]. Fazendo um
grfico de V
O
versus concentrao de [S],
obtm-se uma curva hiperblica retangular,
(Fig. 1 ao lado), que demonstra que, em baixas
conc. de [S] a velocidade inicial diretamente
proporcional conc. [S], e que, em conc. altas
de [S], a velocidade inicial mxima (V
max
) e
seu valor independe da conc. [S]. Desta forma
a equao experimental que relaciona V
O
com
[S] normalmente escrita na forma:



Figura 1
29


Esta equao conhecida como equao de Michaelis-Menten e K
m
chamado de
constante de Michaelis-Menten.
Experimentalmente, os valores de V
max
e K
m
podem ser determinados pelo mtodo de
Lineweaver e Burk, que utiliza o fato de que o inverso da equao de uma hiprbole
retangular a equao de uma reta, portanto, o inverso da equao 1 :

Fazendo um grfico de 1/V
O
versus 1/[S], obtm-se uma reta cujo coeficiente angular
K
m
/V
max
e o coef. linear 1/V
max
(Figura 2).

Figura 2
Nesta experincia vamos utilizar a enzima polifenoloxidase extrada da batata, na
reao descrita abaixo:

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Polifenoloxidase uma enzima que pertence ao grupo das oxidorredutase. Esta enzima
catalisa a remoo do hidrognio (oxidao) do catecol passando-o para o oxignio
molecular formando gua e a quinona correspondente.

2- PROCEDIMENTO

1. Prepare 100 mL de catecol 0,005 M, se for necessrio.
2. Prepare extrato de batata amassando meia batata. Filtre o amassado recolhendo o
lquido num bquer pequeno. Voc s precisa de 1,0 mL de extrato.
3. Ligue o termostato e coloque-o na temperatura desejada.
4. Ligue o espectrofotmetro e acerte, zero absorbncia no comprimento de onda (max)
de 458 nm. Para operar corretamente o aparelho siga as instrues no manual ou pea
ajuda ao professor.
5. Faa quatro cinticas com concentraes de catecol diferentes, como especificado
abaixo.
a) Coloque 0,5 mL de catecol 0,005 M + 2,5 mL de gua numa cubeta, adicione uma gota
de H
2
O
2
10% em volume.
b) Coloque a cubeta no suporte de amostra do aparelho e deixe-a termostatizar por 3
minutos, acerte o zero absorbncia. Verifique se a cubeta est na posio correta.
c) Agindo com rapidez adicione duas gotas de extrato de batata na cubeta, coloque a
tampa na mesma e agite a soluo.
d) Coloque a cubeta no aparelho feche-o e faa a primeira leitura de absorbncia,
disparando imediatamente o cronmetro.
e) Faa leituras de 20 em 20 segundos at aproximadamente 10 min. Ao terminar esta
faa um espectro da soluo como indicado no item 6.
6. Faa um espectro do produto final da reao variando o comprimento de onda de 400
nm a 530 nm, anotando o valor da absorbncia a cada 10 nm. (no precisa repetir o
item 6 para as outras cinticas).

7. Repita o item 5 variando as quantidades de catecol 0,005 M para 0,75 mL; 1,0; 1,5 mL,
sempre completando o volume final na cubeta para 3,0 mL.

No final do experimento veja como armazenar corretamente ou tratar os resduos
qumicos gerados.

3- CLCULOS

1. Calcule as conc. de catecol usadas na experincia, ou seja a concentrao
final dentro da cubeta. Use esta conc. nos clculos.
2. Calcule a velocidade inicial (V
O
, coeficiente angular) para todas as cinticas realizadas
(4) fazendo um grfico de absorbncia versus tempo, (Figura 3).
3. Calcule K
m
e V
max
para a enzima, como mostrado na Figura 2.
4. Faa um grfico com os valores obtidos no item 7, absorbncia versus comprimento de
onda. (baseado no espectro, justifique porque as cinticas foram acompanhadas em
458 nm).

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Figura 3

4- QUESTIONRIO

1. Como podem ser definidas as enzimas? O que substrato?
2. Que fatores podem explicar a alta eficincia das enzimas como catalisadores?
3. Qual a definio e o significado de K
m
e V
max
na reao veja as unidades ?
4. O que inibidor enzimtico, quais os tipos de inibio e os principais fatores que
diminuem a atividade de uma enzima para atuar como catalisador?
5. O que acontece se voc mudar o pH ou a temperatura do meio reacional e mantiver a
concentrao de enzima e substrato constantes. Explique.
6. Cite dois exemplos de enzimas que atuam em sistemas biolgicos e explique a sua
atuao.
7. As enzimas podem ser desnaturadas quando em contato com soluo de surfactantes.
Como isso pode ser explicado?
8. Com a ajuda da literatura, descreva sucintamente os 04 mecanismos principais atravs
dos quais as enzimas podem acelerar uma reao: Catlise cido-Base; Toro de
Substrato; Catlise Covalente; Diminuio da Entropia.
9.Que tipo de resduos qumicos foram gerados neste experimento e como foram tratados
ou armazenados. Explique.

5- BIBLIOGRAFIA

1. Fsico-Qumica para Bilogos, J. Gareth Morris, Ed. 1972.
2. Princpios de Bioqumica, A.L. Lehniniger, Editora Sarvier 1991.
3. CHANG, R.,Physical-Chemistry with Applications to Biological Systems. Macmillan
Publishing Co. New York, 1981.