Hematologa

La sangre es una suspensin de eritrocitos, leucocitos y plaquetas en el plasma. Fuera

del sistema vascular la sangre coagula entre 5 y 8 minutos y si se le agrega algn anticoagulante
su estado de suspensin persiste.
Para las pruebas de laboratorio una muestra que puede ser de alguno de los tres tipos siguientes,
segn la determinacin que debamos efectuar:
Sangre total con anticoagulante.
Suero.
Plasma.
Suero y Plasma.
Centrifugando sangre coagulada se separa una masa celular "A" y un fluido sobrenadante "B": el
suero.
B
A
Centrifugando una sangre adicionada de un anticoagulante se obtendrn tres capas: una masa
celular, que queda en el fondo del tubo y una sobrenadante que es el plasma. Entre ambas capas
A y B, habr una tercera capa C, ms pequea, de color grisceo rosado, llamada crema de
leucocitos, cuyo principal integrante, como su nombre lo dice, son los leucocitos, pero adems
contiene plaquetas y eritrocitos nucleados. La zona inmediatamente inferior a la capa C (si los hay)
contiene reticulocitos y parsitos del paludismo.
BContiene Fibringeno
Reticulocitos C Crema de leucocitos,
Parsito del plaquetas y eritrocitos.
paludismo
A
Nota: La diferencia entre suero y plasma es que el plasma contiene fibringeno y el suero carece
de l.
Obtencin de Muestra de Sangre.
Para efectuar anlisis clnicos, las muestras de sangre pueden ser:
Sangre capilar o perifrica.
Sangre venosa.
Sangre arterial.
Un caso especial se da en los nios recin nacidos en los que se solicita muestra del cordn
umbilical.
Sangre capilar o perifrica.
La sangre de flujo es llamada comnmente capilar o perifrica y es la que fluye despus de aplicar
una puncin superficial cutnea. Cuando no es posible obtener una muestra de sangre venosa o
no se desea puncionar la vena, algunas pruebas pueden realizarse con sangre capilar o perifrica
obtenida del lbulo de la oreja o de la yema del dedo. En los nios recin nacidos por puncin del
taln.
No es aconsejable utilizar sangre capilar para la cuenta de plaquetas por la rapidez con la que las
mismas se adhieren y agregan en el lugar de puncin y se obtienen datos falsos de cuentas bajas
de plaquetas; en cambio para preparar extendidos en laminillas es mejor hacerlo con sangre
capilar, ya que el anticoagulante puede provocar alteraciones en los leucocitos.
Sangre venosa.
La muestra de este tipo se obtiene por puncin de una de las tres venas del pliegue del codo: la
baslica, la ceflica o la mediana cubital (observar dibujo de la siguiente pgina) empleando
jeringas desechables, con agujas de tipo 21x32, 20x32 o similar, previa limpieza del rea elegida
con torunda y alcohol; antes de puncionar coloque el torniquete aproximadamente de 8 cm de
distancia arriba del pliegue del codo. Soltarlo tan pronto empiece a obtenerse la muestra.
La toma de muestra de nios pequeos es preferible en las venas yugulares externas o de las
manos.
Anticoagulantes.
Se consideran como anticoagulantes:
Mezcla de oxalatos.
Citrato de sodio.
Oxalato de sodio.
EDTA.
Heparina.
ACD.
CPD.
Mezcla de Oxalatos. Tambin llamada anticoagulante de Wintrobe. Contiene oxalato de amonio,
oxalato de potasio, formol y agua.
Para 5ml de sangre se utilizan 0.5ml de la mezcla de anticoagulante (desecado en estufa a 37C o
a temperatura ambiente antes de utilizarlo); esta solucin anticoagulante acta como tal para
fijacin de calcio y debe usarse siempre desecado para no diluir la sangre.
Mezcla de oxalatos de sodio y potasio. Es otro anticoagulante conocido como "Mezcla de Paul
Heller".
Citrato de sodio al 3.8% y oxalato de sodio al 1.4%. Se usa en relacin de una parte de
anticoagulante por cada nueve partes de sangre, habitualmente se usan 0.25ml de la solucin para
completar a 2.5ml de volumen total con la muestra de sangre.
Actan en la misma forma que la solucin anticoagulante de Wintrobe, es decir, por fijacin de
calcio.
Son los anticoagulantes de eleccin para tiempo de protrombina (TP) y tiempo de tromboplastina
parcial (TTP).
EDTA (cido etilen-diamino-tetra-actico). Las sales de sodio y potasio en este cido se
comportan como poderosos anticoagulantes y son anticoagulantes de eleccin para el trabajo de
rutina y Hematologa (se utiliza al 10%).
No afecta la morfologa de las clulas hemticas.
No modifica la velocidad de sedimentacin globular.
Sus sinnimos son versenato y secuestreno.
Se le llama secuestreno ya que secuestra al calcio y lo separa de la cascada de la coagulacin,
impidiendo que la sangre coagule. Se utilizan 0.05ml por cada 3ml de muestra de sangre. Dada la
pequea cantidad de solucin, no es necesario desecarla, ya que prcticamente no diluye la
sangre a analizar; en exceso afecta adversamente tanto a los eritrocitos como a los leucocitos,
causando su encogimiento y provocando cambios en su forma; por ello debe cuidarse de agregar
la cantidad correcta de sangre al anticoagulante. Se prefiere la sal tripotsica a la disdica, ya que
es ms soluble (10 veces ms) y ello hace efectiva la mezcla del anticoagulante con la sangre.
Heparina (heparina sdica de 1,000 unidades). La fina capa de solucin de heparina de 1,000
unidades:
Se utiliza para las gasomeras.
La heparina es un excelente anticoagulante.
No altera el tamao de los eritrocitos.
Acta inhibiendo la actividad de la trombina sobre el fibringeno y es este mecanismo, el que la
hace diferente a los dems anticoagulantes mencionados.
ACD y CPD. Son los principales anticoagulantes utilizados en los bancos de sangre (en las bolsas
para la recoleccin de sta).
El ACD contiene cido ctrico, citratos y dextrosa. En este anticoagulante la sangre se mantiene
hasta 21 das.
El CPD contiene citratos, fosfatos y dextrosa. El radical es un amortiguados que favorece el pH de
la sangre normal (7.4) permanezca as durante ms tiempo, por lo que este anticoagulante hace
que las bolsas duran 21 das + 7, siempre y cuando el plasma no presente una coloracin rojiza
(hemlisis) ni tome un color verdusco debido a la panaglutinibilidad o contaminacin bacteriana.
Manejo y Conservacin de la Muestra.
El tipo de anlisis que haya de efectuarse influye sobre las recomendaciones que para cada uso
corresponde.
Algunas muestras se deben analizar de inmediato, un ejemplo de esto es la determinacin del pH y
gases en la sangre; otras pueden ser mantenidas en refrigeracin (previa separacin del suero o
del plasma).
Las determinaciones de:
Conteo de plaquetas.
Conteo de leucocitos.
Determinacin de la velocidad de sedimentacin.
Deben de hacerse lo ms pronto posible despus de obtenida la muestra.
Durante este lapso las muestras deben tenerse refrigeradas entre 4 y 8C, y antes de ser analizada
deben dejarse 15 minutos en rotador (agitador mecnico para asegurar trabajar con una muestra
homognea y que haya adquirido la temperatura ambiente).
Criterios de rechazo de una muestra.
Identificacin inadecuada.
Volumen inadecuado.
Uso de tubo inadecuado.
Hemlisis.
Transporte inadecuado.
Razones para solicitar una prueba de laboratorio.
Para descubrir enfermedades subclnicas.
Ratificar un diagnstico sospechado clnicamente.
Obtener informacin pronstico de una enfermedad.
Establecer un diagnstico en una sospecha no bien definida.
Reconocer la respuesta teraputica.
Precisar factores de riesgo.
Alteracin de Algunas Pruebas de Laboratorio por Estasis Venosa Prolongada
Prueba o Determinacin Efecto Mecanismo de Efecto
1) Plaquetas > Debe recordarse el papel de las
plaquetas en la homeostasis.
Estasis venosa; liberacin de
agentes procoagulantes,
agregacin, etc.
2) Electrolitos # < Se provoca su difusin al
espacio intersticial.
3) Glucosa < Al estar detenida la circulacin
disminuye la concentracin.
4) Hormonas < > Penetracin de algunas que se
encuentran en el espacio
intersticial y consumo de otras.
5) Enzimas > Debido a que se encuentran
intercelularmente.
6) Hemlisis de elementos > Al romperse el eritrocito libera
todos los solutos.
7) Caso grave = En tiempos prolongados de
falsos esquistocitos.
8) Estrs, pH > Debido a una disminucin
parcial en la presin de CO.
9) Estrs, leucocitos,
catecolaminas
> La elevacin de catecolaminas
provoca un aumento en
los cidos grasos no
esterificados.
Nota:
> - incremento < - decremento # - en la mayora de los casos.
Toma de Muestra de Sangre Arterial.
Tcnica Antigua para la Funcin Arterial
1.
2. Material:
Jeringa de vidrio de 10ml con pivote de metal lubricado con grasa siliconizada estril, impregnada
en su interior con 2.5ml de heparina de 1,000 unidades.
Tapn metlico que rosque perfectamente en el pivote de metal.
Agujas hipodrmicas estriles de nmero 21 o de mayor calibre (desechables).
Rin o palangana con hielo y agua.
Agujas y jeringas hipodrmicas estriles para infiltracin.
Xilocana al 1% sin hepinefrina.
Agua y jabn.
1. Evaluar, seleccionar y localizar el pulso arterial.
Radial.
Humeral.
Femoral.
Pedia.
Hacer el aseo de la regin con agua y jabn.
Roscar perfectamente la aguja en el pivote de metal para impedir durante la puncin la entrada de
aire al interior de la jeringa.
Si es necesario infiltrar, con xilocana al 1% sin hepinefrina, en el sitio seleccionado para la puncin
cuidando de no picar la arteria.
Efectuar puncin perpendicular a la arteria y obtener aproximadamente 5ml de sangre.
Hacer compresin a la arteria por arriba del sitio de la puncin un mnimo de 10 a 15 minutos para
evitar la formacin de hematoma.
Quitar la aguja hipodrmica, sacar las burbujas de aire, si penetraron y cerrar hermticamente el
pivote con el tapn de metal.
Rotule la jeringa con el nombre del paciente y nmero de cama.
Anotar en la orden la condicin en que fue tomada la muestra (respiracin de aire
ambiental, oxgeno por catter, con asistencia ventilatoria, etc.).
Se utilizan jeringas preferentemente de vidrio ya que con las de plstico es necesario arrastrar el
mbolo, maniobra que puede permitir la entrada de burbujas de aire. Las muestras para
determinacin de gases arteriales se transportan en hielo y agua, ya que la sangre, como tejido
vivo, sigue consumiendo oxgeno y formando anhdrido carbnico aunque ya est en la jeringa. Al
reducir la temperatura se deprime elmetabolismo celular y no hay cambios considerables, por lo
que puede retardarse el procesamiento de la muestra hasta por una hora.
La cantidad de heparina de 1,000 unidades que queda en el espacio muerto de la jeringa es
suficiente para anticoagular de 4 a 5ml de sangre.
El exceso de heparina altera las determinaciones de pH, oxgeno y bixido de carbono.
Invariablemente se debe utilizar una aguja para picar el tapn de hule del frasco de heparina y otra
para puncionar la arteria.
La sangre destinada a este tipo de estudio es sangre total y obtenida en forma anaerbica.


Leer ms: http://www.monografias.com/trabajos/muestrasang/muestrasang.shtml#ixzz3AxS8zC3e

Exmenes
V.S.G (Velocidad de segmentacin globular)
Por qu hacer el anlisis?
Para detectar la presencia de infecciones, tumores, inflamacin y otras situaciones que conducen
a disfuncin orgnica (degeneracin), y/o para monitorizar la progresin de una enfermedad o la
eficacia de un tratamiento.

Cundo hacer el anlisis?
Cuando el mdico piensa que se puede estar padeciendo algunos de los trastornos citados
anteriormente y para monitorizar el tratamiento y la evolucin de una arteritis de la temporal, de
una polimialgia reumtica o de una artritis reumatoide.

Qu muestra se requiere?
La determinacin se realiza a partir de una muestra de sangre venosa.

Es necesario algn tipo de preparacin previa?
Para esta prueba no se necesita ninguna preparacin especial.

Contaje de plaquetas
Por qu hacer el anlisis?
Para determinar el nmero de plaquetas en una muestra de sangre en el curso de un examen
rutinario.; para detectar, diagnosticar o monitorizar situaciones que afectan al nmero de
plaquetas, como trastornos por sangrado, enfermedades de la mdula sea u otras condiciones.

Cundo hacer el anlisis?
Rutinariamente, como parte de un hemograma; cuando se presentan episodios inexplicables de
sangrado u otros sntomas que puedan obedecer a alteraciones de las plaquetas.

Qu muestra se requiere?
La determinacin se realiza a partir de una muestra de sangre venosa; a veces por puncin en un
dedo (adultos) o en el taln (bebs).

Es necesario algn tipo de preparacin previa?
Para esta prueba no se necesita ninguna preparacin especial.

Grupo sanguneo Y Factor RH
Por qu hacer el anlisis?
Para determinar el grupo sanguneo ABO y el tipo Rh.

Cundo hacer el anlisis?
Cuando a una persona se le ha de realizar una transfusin de sangre o de alguno de sus
componentes, o cuando se dona sangre. En las mujeres embarazadas se realiza para determinar el
riesgo de incompatibilidad Rh entre la madre y el feto.

Qu muestra se requiere?
La determinacin se realiza a partir de una muestra de sangre venosa o, en los bebs, por puncin
en el taln.

Tiempo de protombina
La protrombina (factor II de coagulacin) es una protena plasmtica producida por el hgado y
forma parte de la cascada de la coagulacin. El hgado produce 11 de los factores de la
coagulacin, por lo que frecuentemente su disfuncin se asocia a trastornos de la coagulacin. Los
factores de coagulacin se miden habitualmente en forma indirecta mediante la determinacin
del tiempo de protrombina, que mide un conjunto de factores de coagulacin del plasma. Por lo
anterior, una alteracin del tiempo de protrombina puede deberse a diversas causas, no siempre a
una disfuncin heptica.

Tiempo parcial de tromboplastina (TPT)
Es una prueba de sangre que examina el tiempo que le toma a la sangre coagularse y puede
ayudar a establecer si uno tiene problemas de sangrado o de coagulacin.

Forma en que se realiza el examen
El mdico utiliza una aguja para extraer la sangre de una de las venas y la recoge en un recipiente
hermtico. A usted se le puede colocar un vendaje para detener cualquier sangrado. Si est
tomando un medicamento llamado heparina, se lo vigilar para ver si hay signos de sangrado.
El especialista del laboratorio agregar qumicos a la muestra de sangre y observar cuntos
segundos tarda la sangre en coagularse.

Preparacin para el examen
El mdico le puede solicitar que deje de tomar ciertos medicamentos antes del examen. Los
medicamentos que pueden afectar los resultados de un examen TPT abarcan antihistamnicos,
vitamina C (cido ascrbico), cido acetilsaliclico (aspirin) y clorpromazina (Thorazine).
No deje de tomar ningn medicamento sin hablar primero con el mdico.

Lo que se siente durante el examen
Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado,
mientras que otras slo sienten un pinchazo o sensacin de picadura. Posteriormente, puede
haber algo de sensacin pulstil.

Razones por las que se realiza el examen
El mdico puede ordenar este examen si usted tiene problemas de sangrado o coagulacin de la
sangre. Cuando uno sangra, el cuerpo inicia una serie de actividades que ayudan a que la sangre se
coagule, lo cual se denomina cascada de la coagulacin. Hay tres rutas para este evento y el
examen de TPT examina protenas especiales, llamadas factores, que se encuentran en dos de
estas rutas.
El examen igualmente se puede utilizar para vigilar pacientes que estn tomando heparina, un
anticoagulante.
Este examen generalmente se hace junto con otros exmenes, como un examen de protrombina.

Plaquetas
Tambin conocido como:Trombocitos; Recuento de Plaquetas
Nombre sistemtico:Plaquetas
Pruebas relacionadas:Extensin de sangre, Factores de la coagulacin, Funcin
plaquetaria, Hemograma, Tiempo de Protrombina (TP) y Ratio Internacional Normalizada
(INR), Tiempo de Tromboplastina Parcial (TTP)

Aspectos Generales
Por qu hacer el anlisis?
Para determinar el nmero de plaquetas en una muestra de sangre en el curso de un examen
rutinario.; para detectar, diagnosticar o monitorizar situaciones que afectan al nmero de plaquetas,
como trastornos por sangrado, enfermedades de la mdula sea u otras condiciones.
Cundo hacer el anlisis?
Rutinariamente, como parte de un hemograma; cuando se presentan episodios inexplicables de
sangrado u otros sntomas que puedan obedecer a alteraciones de las plaquetas.
Qu muestra se requiere?
La determinacin se realiza a partir de una muestra de sangre venosa; a veces por puncin en un
dedo (adultos) o en el taln (bebs).
Es necesario algn tipo de preparacin previa?
Para esta prueba no se necesita ninguna preparacin especial.
En qu consiste
Qu es lo que se analiza?
Las plaquetas, tambin conocidas como trombocitos, son minsculos fragmentos de citoplasma de
clulas muy grandes llamadas megacariocitos. Las plaquetas se forman a partir de estas clulas
grandes en la mdula sea, se liberan hacia la circulacin sangunea y son esenciales para
asegurar una coagulacin normal de la sangre. El recuento de plaquetas es una prueba que
determina el nmero de plaquetas presentes en la muestra de sangre obtenida.

Cuando se produce una lesin en un vaso sanguneo o en un tejido y tiene lugar un sangrado, las
plaquetas contribuyen a controlar el sangrado por tres mecanismos: se adhieren en el lugar de la
lesin, se agregan entre ellas y liberan compuestos qumicos que estimulan la agregacin de ms
plaquetas. Todo ello conduce a la formacin de un tapn de plaquetas no muy slido en el foco de
la lesin por un mecanismo conocido como hemostasia. Simultneamente, las plaquetas activadas
propician la cascada de la coagulacin, consistente en una serie de etapas que suponen la
activacin secuencial de protenas llamadasfactores de la coagulacin. Este proceso de
hemostasia secundario tiene como consecuencia la formacin de hebras de fibrina que se
entretejen entre el tapn de plaquetas, formando una malla de fibrina comprimindose hasta formar
un cogulo estable que permanece en el lugar de la lesin hasta que sta cicatriza. En el momento
en que el cogulo ya no es necesario, otros factores se encargan de destruirlo y eliminarlo.
Para un proceso normal de la coagulacin es necesario que cada componente de la hemostasia
primaria y de la secundaria est presente, se active en el momento adecuado y adems funcione
correctamente. Si el nmero de plaquetas es insuficiente o si no funcionan adecuadamente, es
posible que no se pueda formar un cogulo estable y el individuo presentar un elevado riesgo de
sangrado.
Las plaquetas sobreviven en la circulacin sangunea entre 8 y 10 das, de manera que la mdula
sea debe estar continuamente produciendo plaquetas nuevas para sustituir las que se degradan,
se utilizan o se pierden con los sangrados. La determinacin del nmero de plaquetas en sangre
con un contador celular es de ayuda en el diagnstico de una gran variedad de trastornos
asociados a una cantidad disminuida o aumentada de plaquetas.
Cmo se obtiene la muestra para el anlisis?
Extraccin de la muestra por puncin de una vena del antebrazo; a veces por puncin en el dedo
(adultos) o en el taln (bebs)
Se requiere alguna preparacin previa para asegurar la calidad de la muestra?
Para esta prueba no se requiere ninguna preparacin especial.
NOTA: En el apartado, El laboratorio por dentro, encontrar informacin sobre la recogida y
procesamiento de las muestras de sangre y los cultivos de esputo.
Acerca de la prueba
Cmo se utiliza?
Cundo se solicita?
Qu significa el resultado?
Hay algo ms que debera saber?
Cmo se utiliza?
El recuento de plaquetas es til para detectar disminuciones o aumentos del nmero de plaquetas
en sangre. La prueba se incluye en el hemograma, que frecuentemente se solicita en los
controles mdicos.
El recuento de plaquetas puede emplearse para detectar o diagnosticar distintos trastornos y
enfermedades con repercusin sobre estos elementos de la sangre. Puede solicitarse en el
contexto de un estudio de los trastornos de la coagulacin cuando existen sangrados o estados
de hipercoagulabilidad, o en enfermedades de la mdula sea por citar algunos ejemplos.
Esta prueba tambin puede ser til en la monitorizacin de enfermedades o de tratamientos con
frmacos que pueden afectar a las plaquetas. Tambin se utiliza en la monitorizacin del
tratamiento de enfermedades de las plaquetas para verificar si el mismo est siendo efectivo.
El recuento de plaquetas puede acompaarse de otras pruebas, como por ejemplo pruebas
de funcin plaquetaria y pruebas asociadas a la coagulacin, como el tiempo de protrombina
(TP) y el tiempo de tromboplastina parcial (TTP). En caso de que estas pruebas resulten alteradas
sern necesarias otras pruebas para establecer el diagnstico final.
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Cundo se solicita?
El recuento de plaquetas suele solicitarse como parte de un hemograma, que suele realizarse en
un chequeo habitual. Casi siempre se solicita cuando una persona presenta signos y sntomas
asociados a un nmero disminuido de plaquetas o a sangrados como:
Hematomas sin causa aparente o de fcil aparicin
Sangrados prolongados an cuando la herida es pequea
Sangrados nasales frecuentes
Sangrados gastrointestinales (pueden detectarse en el anlisis de las heces)
Sangrados importantes durante la menstruacin
Pequeas manchas en la piel (petequias) - a veces recuerdan una erupcin cutnea
Pequeas manchas de color prpura en la piel (prpura) causadas por sangrados justo
debajo de la piel
Tambin se realiza la prueba si se sospecha que existen demasiadas plaquetas. Un exceso de
plaquetas puede suponer una coagulacin excesiva o a veces, si las plaquetas no funcionan
correctamente, sangrados. Sin embargo, a menudo las personas con un elevado nmero de
plaquetas no presentan signos ni sntomas, y es por este motivo que puede detectarse la alteracin
fortuitamente al realizarse un anlisis de sangre por algn otro motivo.
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Qu significa el resultado?
Son varias las enfermedades y trastornos en los que puede existir un bajo nmero de plaquetas
(trombocitopenia). Las causas normalmente se agrupan en alguna de las siguientes dos
categoras:
Trastornos en los que la mdula sea no es capaz de producir una cantidad suficiente de
plaquetas
Situaciones en las que las plaquetas se consumen o se destruyen ms rpidamente de lo
normal
Algunos ejemplos de trombocitopenia incluyen:
Trombocitopenia idioptica, debida a la presencia de un anticuerpo dirigido contra las
plaquetas; es una de las formas ms frecuentes de trombocitopenia, en ausencia de otras
enfermedades
Infecciones vricas como mononucleosis, hepatitis, infeccin por VIH o sarampin
Atribuible a frmacos como acetaminofeno, quinidina, sulfamidas, digoxina, vancomicina,
diacepam o nitroglicerina (entre otros)
Trombocitopenia inducida por heparina (TIH), que se manifiesta cuando personas a las que
se les administra o se les ha administrado heparina, desarrollan un tipo de anticuerpo (si
desea ms informacin acceda a este enlace )
Leucemia, linfoma u otros cnceres que se hayan propagado (metastatizado) a la mdula
sea - las personas con cncer suelen experimentar sangrados excesivos atribuibles a un
nmero disminuido de plaquetas. A medida que la cantidad de clulas cancerosas en la
mdula sea aumenta, las clulas normales quedan desplazadas, y por lo tanto, quedan
menos clulas productoras de plaquetas
Anemia aplsica - la produccin de clulas sanguneas est disminuida de manera
significativa
Problemas de sangrado de larga evolucin, por ejemplo sangrados crnicos por lceras
gastroduodenales (estmago y duodeno)
Sepsis, especialmente por infecciones causadas por bacterias gram-negativas
Cirrosis
Trastornos autoinmunes como lupus, en los que el sistema inmune del organismo fabrica
anticuerpos que atacan a rganos y tejidos propios y en los que tambin aumenta la
destruccin de plaquetas
Quimioterapia o radioterapia, que repercuten sobre la mdula sea
En ciertas enfermedades puede asistirse a un consumo aumentado de plaquetas. Por
ejemplo, en la coagulacin intravascular diseminada (CID), la prpura trombocitopnica
y el sndrome hemoltico-urmico (SHU) el nmero de plaquetas circulantes en sangre
puede estar disminuido
Si el nmero de plaquetas es inferior a 20.000 por microlitro, pueden aparecer sangrados
espontneos con el subsiguiente riesgo para la vida del individuo. En los casos graves, el nmero
de plaquetas se hace aumentar con transfusiones de sangre (si desea ms informacin, acceda a
este enlace ).
Cuando el nmero de plaquetas est aumentado se habla de trombocitosis y suele ser
consecuencia de algn trastorno subyacente; por este motivo recibe el nombre de trombocitosis
secundaria o reactiva:
Cncer, ms frecuentemente de tipo gastrointestinal, de ovario, de mama o un linfoma
Anemia, especialmente la anemia por dficit de hierro o la anemia hemoltica
Trastornos inflamatorios como la enfermedad inflamatoria intestinal o
la artritis reumatoide
Enfermedades infecciosas como tuberculosis
En personas a las que se les ha extirpado el bazo
Toma de contraconceptivos orales
En algunas ocasiones, la trombocitosis puede ser transitoria, por ejemplo:
Fase de recuperacin despus de sangrados graves, como en caso de traumatismos o
ciruga mayor
Despus de un ejercicio fsico extenuante
Despus de un consumo abusivo de alcohol o en dficits de folato y vitamina B12
Ms raramente, una trombocitosis puede deberse a un trastorno de la mdula sea, como en la
trombocitemia primaria o esencial; ste es un trastorno mieloproliferativo en el que la mdula sea
produce un nmero exagerado de plaquetas. No suelen existir signos ni sntomas de la
enfermedad de manera que la alteracin se detecta al realizar un control mdico por alguna otra
causa. Las personas con esta enfermedad presentan mayor riesgo de formar cogulos
(trombosis) debido al exceso de plaquetas, aunque tambin pueden tener problemas de sangrado
ya que las plaquetas no funcionan adecuadamente. Esta enfermedad se asocia a menudo a
una mutacin en el gen JAK2. En caso de sospecharse esta enfermedad, el mdico seguramente
solicitar el estudio del gen JAK2. Ms de la mitad de individuos con trombocitemia esencial
presenta la mutacin JAK2. Las personas con otros trastornos mieloproliferativos o
mielodisplsicos, como leucemia mieloide crnica, policitemia vera o algunas otras formas de
sndromes mielodisplsicos tambin pueden tener un elevado nmero de plaquetas.
Normalmente, el nmero de plaquetas en adultos oscila entre 150.000 y 450.000 por microlitro de
sangre.
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Hay algo ms que debera saber?
Vivir en grandes altitudes puede causar un aumento en el nmero de plaquetas en la sangre. El
nmero de plaquetas tambin puede aumentar tras un ejercicio fsico extenuante y despus del
parto. Entre los frmacos que pueden hacer aumentar el nmero de plaquetas se incluyen
los estrgenos y los contraceptivos orales.
Puede observarse una disminucin leve del nmero de plaquetas en las mujeres antes de la
menstruacin, y hasta un 5% de mujeres embarazadas presenta un nmero de plaquetas
disminuido en el momento de dar a luz.
Algunas enfermedades hereditarias causadas por alteraciones genticas de las plaquetas
incluyen la tromboastenia de Glanzmann, la enfermedad de Bernard-Soulier y los sndromes de
Chediak-Higashi, de Wiskott- Aldrich, de May-Hegglin y el sndrome de Down. Sin embargo la
incidencia de estas enfermedades es relativamente poco frecuente.
En algunas personas, las plaquetas quedan acantonadas o almacenadas en su bazo de manera
que el nmero de plaquetas en sangre est disminuido, aunque normalmente los individuos no
manifiestan signos ni sntomas asociados a esta peculiaridad.
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References to Laboratory Test
Preguntas comunes
1. Existen signos o sntomas que indiquen aumento o disminucin del nmero de
plaquetas a los que se deba atender?
2. En el informe de resultados constan datos como VPM (volumen plaquetar medio)
y PDW (anchura de distribucin de las plaquetas). Qu significan estos trminos?
3. En el informe de resutados consta "plaquetas gigantes". Qu significa?
4. Qu otras pruebas deben realizarse si el nmero de plaquetas es anmalo?
1. Existen signos o sntomas que indiquen aumento o disminucin del nmero de
plaquetas a los que se deba atender?
La aparicin de hematomas sin causa aparente, las hemorragias nasales, de la boca o del recto sin
una lesin evidente, perodos menstruales excesivos o demasiado prolongados o la incapacidad de
detener la hemorragia de un pequeo corte o herida pueden indicar una deficiencia de plaquetas.
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2. En el informe de resultados constan datos como VPM (volumen plaquetar medio) y PDW
(anchura de distribucin de las plaquetas). Qu significan estos trminos?
El VPM y la PDW son clculos realizados por analizadores automticos. El VPM refleja el tamao
promedio de las plaquetas en la muestra analizada mientras que la PDW indica el grado de
uniformidad en el tamao de las plaquetas. Estos datos pueden proporcionar informacin adicional
al mdico acerca de la causa de un nmero aumentado o disminuido de plaquetas. Cuanto ms
jvenes son las plaquetas, ms pronto se habrn liberado desde la mdula sea y mayor suele
ser su tamao. Las plaquetas pequeas suelen ser ms viejas y ya llevan unos das en la
circulacin.
Si existe un elevado nmero de plaquetas grandes (VPM elevado) en una persona con un nmero
total de plaquetas disminuido, puede ser que la mdula sea est produciendo plaquetas y
liberndolas a la circulacin rpidamente. Un VPM bajo en personas con un nmero disminuido de
plaquetas puede reflejar un trastorno de produccin de las mismas en la mdula sea. Si la PDW
es normal las plaquetas son homogneas en cuanto a tamao, mientras que una PDW elevada
indica que el tamao de las plaquetas es muy variable, indicio de que puede existir un trastorno
plaquetar.
A menudo unos resultados alterados se completan con otros estudios adicionales. En algunas
situaciones las plaquetas pueden agruparse de manera que parece que existan menos y que sean
de mayor tamao. Por este motivo, puede estar indicado realizar una extensin de sangre para
examinarlas al microscopio.
[Volver]
3. En el informe de resutados consta "plaquetas gigantes". Qu significa?
Se habla de "plaquetas gigantes" para describir plaquetas aumentadas de tamao, por ejemplo, del
mismo tamao que un hemate. Estas plaquetas pueden verse en algunos trastornos como en la
prpura trombocitopnica inmune o en un raro trastorno hereditario como el sndrome de
Bernard-Soulier. No obstante, como se ha comentado en el punto anterior, la evaluacin directa de
una extensin de sangre al microscopio permite saber si las plaquetas son realmente gigantes o si
se han agrupado. Si se observan agrupaciones de plaquetas, est indicado repetir la prueba
empleando un tipo de tubo con un anticoagulante distinto al utilizado previamente y que obvie o
minimice los fenmenos de agrupacin plaquetar.
[Volver]
4. Qu otras pruebas deben realizarse si el nmero de plaquetas es anmalo?
Si la causa no est clara y no puede determinarse por los datos de la historia clnica y la
exploracin fsica, es posible que el mdico solicite alguna de las siguientes pruebas (adems
del hemograma y de la extensin de sangre):
Pruebas asociadas a trastornos inflamatorios como protena C reactiva, velocidad de
sedimentacin globular (VSG) o anticuerpos especficos frente a plaquetas
Pruebas asociadas a enfermedades infecciosas bacterianas o vricas
Pruebas asociadas a trastornos de la coagulacin como tiempo de protrombina (TP),
tiempo de tromboplastina parcial (TTP), fibringeno
Pruebas para detectar enfermedad renal
Estudios relacionados con el metabolismo del hierro o niveles de vitamina B12 y folato
Pruebas para detectar enfermedad heptica
A veces, biopsia de mdula sea
Aprendiendo de los errores: fenmeno EDTA

Learning from errors: EDTA phenomenon

C Sarasa Bosque a, C Arruga Mombiela b, S Denizon Arranz b

a Mdico Interno Residente. Unidad Docente de Medicina Familiar y Comunitaria. Sector Zaragoza
II. Zaragoza. Espaa.
b Mdico de Familia. Tutor de Residentes del Centro de Salud Actur Sur. Zaragoza. Espaa.
Artculo

Sr. Director: La pseudotrombocitopenia inducida por EDTA (cido etilendiamino tetraactico) es un
fenmeno de aglutinacin in vitro de las plaquetas. Esta aglutinacin es mediada por
autoanticuerpos que reconocen antgenos de las plaquetas modificados por el EDTA1.

El fenmeno se ha descrito tanto en pacientes enfermos como en poblacin sana, y su prevalencia
vara, segn las series, desde el 0,1% hasta el 0,29%1.

El diagnstico se debe sospechar ante la ausencia de clnica hemorrgica y de alteraciones en la
hemostasia primaria, siendo la confirmacin mediante el estudio de extensin de sangre
perifrica. En la extensin se observan agregados de plaquetas generalmente de menos de 35 fl1.

La pseudotrombocitopenia dependiente de EDTA es un fenmeno causado por anticuerpos IgG
antiplaqueta EDTA dependientes. Estos anticuerpos inducen la aglutinacin in vitro de los
trombocitos, dando como resultado una dramtica disminucin de los recuentos plaquetarios.

De las distintas causas de pseudotrombocitopenia, la inducida por EDTA es la ms frecuente. La
pseudotrombocitopenia por EDTA se ha descrito asociada a enfermedades como la mononucleosis
infecciosa, enfermedad por crioaglutininas, cirrosis heptica, sepsis, y a la administracin de
frmacos de uso extendido2,8: cido valproico, anticoagulantes orales, antibiticos (ceftriaxona,
levofloxacino), olanzapina, abciximab, etc.

Consideramos que es interesante tener en cuenta este fenmeno en pacientes que presentan
trombocitopenia sin clnica; podremos evitar diagnsticos errneos y la realizacin de pruebas
complementarias y tratamientos innecesarios que iran en detrimento del paciente.

Caso clnico

Paciente varn de 24 aos, visto en consulta en junio por un cuadro febril de 4 das de evolucin,
compatible con parotiditis vrica epidmica, que fue confirmada serolgicamente durante el
seguimiento.

Entre los antecedentes personales destacaban: buen estado vacunal, migraas con aura en
tratamiento intermitente con zolmitriptn, aftas orales frecuentes y epistaxis ocasionales. No
refera intervenciones quirrgicas, otras enfermedades mdicas, ni alergias medicamentosas
conocidas.

En un hemograma de control durante la parotiditis se observ por vez primera trombocitopenia
(38.000 plaquetas/ l), que fue atribuida a infeccin vrica. Sin embargo el paciente aport un
hemograma realizado en febrero del mismo ao, en el cual presentaba trombocitopenia de 52.000
plaquetas/ l. Fue remitido a Urgencias del hospital de referencia para valoracin por
Hematologa, atribuyndose tambin all el cuadro a infeccin vrica; al estar el paciente
asintomtico, fue dado de alta para seguimiento en Atencin Primaria. No disponemos de
controles posteriores de plaquetas.

En noviembre del mismo ao nuestro paciente acudi a la consulta por presentar un episodio de
hematuria de aparicin sbita durante toda la miccin, sin cogulos hemticos, clnica miccional,
ni dolor en fosas lumbares. No refera traumatismos previos, ni toma de frmacos. Los episodios
se repitieron durante una semana, por lo que el paciente fue remitido a Urgencias, donde se
observ en tira reactiva de orina: proteinuria ++ y sangre 4+. La coagulacin fue normal. Las
plaquetas mostraron de nuevo valores bajos (12.600 plaquetas/ l).

Ante la observacin de trombopenia y los antecedentes del paciente, el hematlogo consider
repetir un nuevo hemograma con tubo de citrato, siendo el resultado de 201.000 plaquetas/ l, lo
que permiti diagnosticar un fenmeno de pseudotrombocitopenia por EDTA.

Durante la estancia del paciente en Urgencias no se repiti la hematuria y, dado su buen estado
general, fue remitido a consulta externa de Urologa para estudio.

Un mes ms tarde el paciente fue diagnosticado por cistografa de proceso ocupante de espacio
en vejiga, sugestivo de papiloma.

En el hemograma preoperatorio con tubos de citrato las cifras de plaquetas resultaron
estrictamente normales.

La pseudotrombocitopenia dependiente de EDTA fue descrita en 1969 por Gowland como una
falsa trombocitopenia en autoanalizadores, debida a la formacin de agregados plaquetarios,
siendo ms frecuente en sangre anticoagulada con EDTA.

Al realizar el recuento en una extensin de sangre tras puncin o en tubos en los que se utilizan
otros anticoagulantes, el nmero de plaquetas es normal.

Se sospecha que la causa de este fenmeno est en relacin con la presencia de anticuerpos
antiplaquetarios de tipo IgG, IgM e IgA. La diana de estos anticuerpos seran antgenos de
superficie plaquetaria, ms especficamente la glucoprotena IIb/IIIa (receptor plaquetario para el
fibringeno). El EDTA modificara la estructura bsica de estos antgenos, permitiendo la unin
antgeno-anticuerpo.

La aglutinacin plaquetaria est condicionada por la variable tiempo, es decir, la falsa disminucin
del recuento, una vez hecha la mezcla sangre-EDTA, es mayor al dejar reposar el tubo. Tambin se
ve condicionada por la temperatura entre 4 y 20 C.

Es necesario para los mdicos clnicos considerar siempre la posible presencia de este fenmeno
ante casos de pacientes que presentan cifras recurrentemente bajas de plaquetas, sin ninguna
ditesis hemorrgica objetivable, ya que no solo genera un importante malestar en el paciente y
sus familiares, sino que puede llevar a acciones iatrognicas: existen casos en la literatura de
pacientes que presentando este fenmeno, han recibido transfusiones urgentes de plaquetas e
incluso han sido esplenectomizados.

El diagnstico diferencial se realiza mediante la repeticin del hemograma, especificando la
sustitucin del habitual tubo para hemograma con EDTA por un tubo de citrato.
Pseudotrombocitopenia dependiente de
EDTA
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Detalles del recurso

Pertenece a: BOLETN DE PEDIATRA
Descripcin: Resumen Introduccin. La pseudotrombocitopenia dependiente del cido
etilendiamino tetraactico (EDTA) es el hallazgo de un recuento bajo de plaquetas en
muestras anticoaguladas con EDTA y procesadas en autoanalizadores, por la formacin
de agregados plaquetarios in vitro. Poco frecuente en poblacin peditrica. Es
importante su identificacin ya que carece de significacin patolgica y se evitarn
procedimientos diagnsticos y teraputicos innecesarios. Caso clnico. Nia de 13 aos
remitida a nuestro Hospital por trombocitopenia sin clnica hemorrgica. Recuento inicial
de plaquetas 77x109/L. En la extensin de sangre perifrica se hallaron gran cantidad
de agregados plaquetarios. El recuento de plaquetas en sangre citratada fue normal
confirmndose el diagnstico de pseudotrombocitopenia dependiente de EDTA.
Discusin. La pseudotrombocitopenia dependiente de EDTA se produce por la
formacin de agregados plaquetarios en presencia de anticuerpos IgG, IgM e IgA, que
actan sobre el antgeno de superficie plaquetar GpIIb/IIIa tras sufrir este un cambio en
su conformacin en presencia de EDTA, quedando expuesto un ?neoantgeno?.

PSEUDOTROMBOCITOPENIA EDTA-
DEPENDIENTE: ROL DEL LABORATORIO
CLNICO EN LA DETECCIN Y EL
CORRECTO CONTAJE PLAQUETARIO

M Morales
1
, A Moreno
2
, M Meja
2
e Y Bustamante
2
.
1 Servicio de Bioanlisis del Hospital Jos G. Hernndez I.V.S.S.
2 Escuela de Bioanlisis UCV
RESUMEN
La pseudotrombocitopenia EDTA dependiente (PTCP-EDTA) es definida como una falsa disminucin del contaje plaquetario
producto de un artefacto de laboratorio, que ocurre cuando en muestras sanguneas extradas con EDTA y procesadas en un
autoanalizador hematolgico se produce una agregacin plaquetaria progresiva en el tiempo por efecto de la accin de
anticuerpos fros. La falta de reconocimiento de ste fenmeno se traduce en diagnsticos errados, realizacin de exmenes
adicionales y terapias inadecuadas. En este trabajo se estudian casos de PTCP-EDTA en pacientes que asistieron al Servicio
de Bioanlisis del Hospital Jos Gregorio Hernndez del I.V.S.S., durante el periodo del 01/01/99 al 31/07/00 proponindose
diversas alternativas para correctos contajes de plaquetas en las muestras en que se observ este fenmeno. Sangre de
cinco pacientes fue tratada con diversos anticoagulantes (EDTA, citrato y oxalato) y se conservaron a temperatura ambiente
(T.A.) y 37C, en tres de ellos se tomaron muestras adicionales en EDTA para suplementarla con Kanamicina a fin de
observar los efectos de este antibitico sobre los parmetros hematolgicos. De un total de 25.390 hematologas procesadas
se detectaron 9 casos de PTCP-EDTA (incidencia 0,04%). CONCLUSIONES: el citrato no es el anticoagulante recomendado
para el correcto contaje plaquetario en estos pacientes; una buena alternativa pudiese ser la incubacin inmediata de la
muestra, a 37C, despus de ser extrada. La pre-suplementacin con Kanamicina, de muestras extradas con EDTA se
presenta como mtodo ideal para el correcto contaje automatizado de plaquetas en casos de PTCP-EDTA conocida, debido a
que evita la agregacin plaquetaria sin afectar otros parmetros hematolgicos, de igual modo el realizar contajes manuales
(Unopette), es una buena alternativa para llevar a cabo un correcto contaje de plaquetas en estos pacientes.
Palabras Claves: Plaquetas, Trombocitopenia, Pseudotrombocitopenia, EDTA.
ABSTRACT
Pseudothrombocytopenia is defined as a low platelet count
resulting from a laboratory artifact to occur in specimens extract
with EDTA and perform in automated cell-count cause progress
platelet clumping in the time for effect of platelet cold
agglutinins. If you dont recognize the phenomenon may lead
to erroneous diagnosis, unnecessary and costly additional
laboratory examinations, and inappropriate medical o surgical
therapy. This study marks pseudothrombocytopenia EDTA-
induced (PTCP-EDTA) in patients of Bioanlisis Service of "Dr.
Jos Gregorio Hernndez" Hospital-IVSS (Venezuelan Institute
of Social Security), in the period of 01-01-99 to 31-07-00
propose variety alternative for correct platelet count in
specimens with this phenomenon. The blood of five patients was
treaty with differents anticoagulants (EDTA, citrate, oxalate) and
keep a room temperature and 37C.The methodology
studioused was extract an additional sample with EDTA for
supplementary with kanamicin in three of those five patients, to
analyze the effect of kanamicin about hematology parameters.
Through 25.390 hematology performs was detect nine cases of
PTCP-EDTA. Conclusion: The citrate isnt the anticoagulant
recommend for correct platelet count in this patients; other
alternative can be keep the specimens to 37C, right after
collect. The supplementary kanamicin in the collect blood
sample in EDTA is the ideal method for correct platelet count in
automated cell-count in cases of previous diagnostic PTCP-
EDTA. Because avoid platelet clumps and it doesnt show
changes hematology parameter. Another method is collect a
finger-stick blood by using an ammonium oxalate Unopette and
to count the blood cells by phase microscopy.
Key Words: Platelet, Pseudothrombocytopenia,
Thrombocytopenia, EDTA.
__________________
INTRODUCCIN
La pseudotrombocitopenia es definida como una falsa
disminucin en el contaje plaquetario producto de un artefacto
de laboratorio
(1)
. Entre los factores que pueden ocasionarla se
han descrito: coagulacin parcial de la muestra
(1-5)
, fallas en la
tcnica de extraccin
(1-5)
, satelitismo plaquetario
(6-12)
, presencia
de plaquetas gigantes
(1-5)
y la existencia de anticuerpos
antiplaquetarios en presencia de anticoagulantes
(1-5,9,13-20)
. Las
Pseudotrombocitopenias representan aproximadamente el 49%
de las trombocitopenias que se presentan en muestras
analizadas en autoanalizadores hematolgicos. De ellas, el 72%
es debido a la agregacin por cido Etilen-diamino-tetra-actico
(EDTA)
(5)
, que es el anticoagulante recomendado por la
International Council for Standardization in Haematology (ICSH)
para la realizacin de hematologas
(21)
.
Inicialmente el fenmeno fue reconocido por Gowland et al. en
1969
(13)
y Watkins y Shulman en 1970
(14)
, quienes describieron
un factor en el suero que provocaba aglutinacin de las
plaquetas in vitro, en presencia de EDTA y a temperaturas
menores de 37C. La formacin de estos agregados es
dependiente del tiempo por lo que una progresiva reduccin del
contaje plaquetario puede ser observado al procesar las
muestras en distintos momentos.
La presencia de pseudotrombocitopenia EDTA-dependiente
(PTCP-EDTA), no se ha relacionado con alteraciones en la
morfologa y funcin plaquetaria
(1,13)
. Se ha llegado a afirmar
que este fenmeno no est asociado a enfermedades
autoinmunes ni hemorrgicas. No existiendo correlacin alguna
entre la pseudotrombocitopenia EDTA dependiente, el estado
salud-enfermedad y la edad
(4,5,19,22)
; curiosamente la
pseudotrombocitopenia EDTA dependiente prevalece en las
mujeres con un 65%.
La deteccin de este fenmeno es sumamente importante ya
que la falta de reconocimiento de este falso contaje plaquetario
puede provocar la realizacin de costosos exmenes adicionales,
diagnsticos errados y largas terapias con corticoesteroides,
suspensin de tratamientos e incluso un cambio de vida del
paciente por temor al sangrado; por todo esto es importante
que exista una buena comunicacin entre el clnico y el personal
del laboratorio para que, en casos de trombocitopenias, sean
descartadas y/o detectadas las pseudotrombocitopenias y
dentro de stas las debidas a EDTA.
Hasta ahora no est totalmente dilucidado el mecanismo por el
cual se forman los agregados plaquetarios en presencia de
EDTA. Diversos estudios demuestran que los anticuerpos en
pacientes pseudotrombocitopnicos reconocen un determinante
antignico en la GPIIb de la membrana plaquetaria lo cual es
una expresin estrictamente dependiente de la presencia de
anticoagulantes quelantes de Ca
2+
. Otro estudio plantea la
posibilidad que la unin anticuerpo-GPIIb provoca la activacin y
posterior agregacin plaquetaria
(23)
.
Sakurai et al.
(24)
en 1997, propusieron dos nuevas hiptesis
para explicar la agregacin plaquetaria inducida por EDTA. Ellos
observaron que los pacientes que exhiban un contaje normal de
plaquetas en la admisin y que luego desarrollaban
pseudotrombocitopenia EDTA-dependiente haban recibido
tratamiento con antibiticos de 4 a 10 das antes de la deteccin
de pseudotrombocitopenia. Por lo que su hiptesis primaria fue
que los anticuerpos antiplaquetario de los pacientes
pseudotrombocitopnicos en un principio eran originados contra
los antibiticos con los cuales ellos haban sido tratados, sin
embargo, en este mismo estudio se observ que no haba una
relacin especfica entre los antibiticos usados para el
tratamiento del paciente y aquellos que fueron demostrados
como efectivos en la prevencin de la agregacin plaquetaria,
sugiriendo que esta hiptesis es improbable. Una explicacin
alternativa sera que la adicin de EDTA previene la agregacin
en pacientes normales por un incremento de la carga de la
superficie plaquetaria; los anticuerpos antiplaquetarios que
inducen PTCP-EDTA dependiente pudiesen entonces disminuir la
carga de superficie de las plaquetas y antagonizar los efectos
anticoagulantes del EDTA, explicando la agregacin.

MATERIALES Y MTODOS
Del total de hematologas procesadas en el laboratorio del
Hospital "Dr. Jos Gregorio Hernndez" del Seguro Social de
Caracas, durante el perodo comprendido entre el 01 de enero
de 1999 y el 31 de julio de 2000, se reestudiaron aquellos
pacientes a quienes se les haba reportado un contaje bajo de
plaquetas y en cuyos extendidos sanguneos mostraban
agregados plaquetarios; as como aquellos que en dos o ms
hematologas se les haban reportado contajes plaquetarios
discordantes.
En total se evaluaron cinco (05) pacientes en los que se
presuma la existencia de PTCP-EDTA dependiente.

COMPORTAMIENTO DEL CONTAJE PLAQUETARIO CON
DIVERSOS ANTICOAGULANTES Y A DIFERENTES
TEMPERATURAS
Se recolectaron las muestras en cuatro (4) tubos al vaco
(Vacutainer Systems Becton Dickinson), dos de los tubos
contenan 0.057ml de EDTA-K3 al 15% para un volumen total
de 5ml, uno se incub a 37C durante todo el ensayo yel otro se
mantuvo a temperatura ambiente, un tercer tubo con 0.3ml de
citrato de sodio dihidratado al 3.8% para un volumen total de
3ml se dej a temperatura ambiente y de un cuarto tubo sin
aditivo se obtuvo suero para la realizacin de pruebas
bioqumicas.
A cada uno de los pacientes se les tom muestra capilar para el
contaje manual por el mtodo de Brecher-Cronkite utilizando
Unopette; este contaje se llev a cabo por triplicado
(25)
.
Cada muestra fue mezclada veinte (20) veces por inversin completa
manual y/o en un mezclador de muestras (Coulter Electronic INC
Hialeah Florida) antes de ser procesada e inmediatamente se elabor su
respectivo frotis por duplicado, estos frotis sanguneos fueron teidos
con colorantes tipo Romanoswky (Giemsa y Wright).
Cada 5 minutos, durante una hora se procesaron las muestras
en un contador electrnico automatizado Coulter T-890 (Coulter
Electronic INC Hialeah Florida), en la siguiente secuencia:
1. Muestra anticoagulada con EDTA-K3 conservada a
temperatura ambiente.
2. Muestra anticoagulada con EDTA-K3 conservada a 37C.
3. Muestra anticoagulada con Citrato de Sodio 3,8%
conservada a temperatura ambiente.
En los datos de la muestra citratada se realiz una correccin
por la dilucin.
Para el anlisis de los datos: el contaje de plaquetas y leucocitos
se utiliz el programa Excel del Office 98.

EFECTO DE LA SUPLEMENTACIN DEL EDTA CON
KANAMICINA EN LOS PARMETROS
HEMATOLGICOS (suplementacin inmediatamente
despus de extrada la muestra)
En tres de los cinco pacientes evaluados (3, 4 y 5) se tom una
muestra adicional con EDTA-K3 al que se le agreg
inmediatamente kanamicina. Estas muestras se mantuvieron a
temperatura ambiente y se procesaron paralelamente con las
muestras anteriormente sealadas.

RESULTADOS
De un total de 25.390 hematologas procesadas se detectaron
nueve casos (09) de PTCP-EDTA dependiente, siendo la
incidencia observada de 0,04%.
De los nueve casos reconocidos en ms de ao y medio todos
fueron del sexo femenino, ocho (08) pacientes ambulatorios y
uno (01) se encontraba hospitalizado. De los casos hallados en
este perodo, slo cinco (05) aprobaron participar en este
protocolo con edades comprendidas entre 14 y 63 aos (media
43 aos).
El comportamiento del contaje de plaquetas y leucocitos, con
diversos anticoagulantes y a diferentes temperaturas en uno de
los pacientes se observa en la Grfica 1.
El efecto de la suplementacin del EDTA con kanamicina sobre
los parmetros hematolgicos se muestra en la Tabla 1.

Grfica 1: Contaje de plaquetas con diversos
anticoagulantes y a diferentes temperaturas
Tabla 1: Variaciones de los parmetros hematolgicos
en 3 pacientes del Hosp. JGH, con PTCT-EDTA
dependiente en EDTA a diferentes temperaturas y
suplementado con kanamicina. Agosto 2000.
Parmetro
EDTA a Temperatura ambiente EDTA a 37C EDTA + Kanamicina
Media *2DS
%Coeficiente
de Variacin
Media *2DS
%Coeficiente
de Variacin
Media *2DS
%Coeficiente
de Variacin
Glbulos

Blancos
x10
9
/l

Paciente 3 10.7 1.0 4.9 9.8 0.2 1.2 9.8 0.2 1.3
Paciente 4 9.5 1.0 5.8 8.8 0.2 1.5 8.7 0.2 1.4
Paciente 5 8.4 1.0 10.3 6.9 2.1 2.1 6.0 0.2 1.9
Coulter T-890 (4.0-
11.5)x10
9
/L
Coeficiente de Variacin = menor o igual al 2%
Glbulos

Rojos x10
9
/L

Paciente 3 4.49 0.04 0.50 4.47 0.04 0.50 4.39 0.06 0.60
Paciente 4 4.80 0.04 0.50 4.80 0.06 0.70 4.70 0.08 0.80
Paciente 5 4.60 0.06 0.70 4.60 0.06 0.70 4.50 0.04 0.50
Coulter T-890 (3.00-
6.00)x10
9
/L
Coeficiente de Variacin = menor o igual al 1.5%
Hemoglobina
(Gr/Dl)

Paciente 3 11.4 0.2 0.7 11.4 0.2 0.7 11.1 0.2 0.6
Paciente 4 14.6 0.2 0.9 14.6 0.2 0.5 14.5 0.2 0.8
Paciente 5 14.5 0.2 0.7 14.4 0.2 0.7 14.4 0.2 0.7
Coulter T-890 (12.0-
18.0)Gr/Dl
Coeficiente de Variacin = menor o igual al 0.8%
Hematocrito
(%)

Paciente 3 36.6 0.4 0.7 36.6 0.6 0.9 36.0 0.8 1.1
Paciente 4 45.1 0.8 0.8 45.1 1.0 1.2 44.7 1.0 1.2
Paciente 5 44.2 0.4 0.5 44.0 0.8 0.9 43.6 0.6 0.8
Coulter T-890 (24.0-70.0)% Coeficiente de Variacin = menor o igual al 1%
Vcm (fL)

Paciente 3 81.7 1.0 0.6 81.8 1.2 0.7 82.0 1.6 0.9
Paciente 4 94.0 0.8 0.5 94.5 1.6 0.8 94.6 1.6 0.8
Paciente 5 95.6 1.2 0.6 95.5 1.0 0.5 96.4 1.4 0.7
Coulter T-890 (80.0-100.0)fL Coeficiente de Variacin = menor o igual al 1%
DISCUSIN
La incidencia de PTCP-EDTA dependiente en este centro
asistencial para el lapso comprendido entre 01-01-99 al 31-07-
00 fue de 0,04%. Estos resultados estn por debajo de los
reportados en la literatura mundial que van desde
0.07%
(3)
hasta 1.9%
(1)
. Se infiere que la causa de esta
diferencia puede ser debido a variaciones propias de la
poblacin venezolana, ya que no conocemos incidencias de este
fenmeno en la comunidad latina; o que se est presentando un
subregistro de casos en este servicio.
Todos los pacientes a quienes se le detect
pseudotrombocitopenia EDTA-dependiente en el presente
estudio fueron del sexo femenino, hecho que se corresponde
con lo descrito en la literatura
(3, 5,19, 26)
. En ninguno de los casos,
el motivo de consulta se relacion con el desarrollo de este
fenmeno. El total de los pacientes no presentaron patologas
que se pudiesen asociar con trombocitopenias verdaderas (a
excepcin de dos (02) casos de sndrome viral), la mayora de
stos asistieron al laboratorio para exmenes de control o de
rutina y slo uno estaba hospitalizado; encontrndose una
mayor prevalencia en pacientes aparentemente sanos. La edad
de los pacientes estuvo en un rango amplio de 14 a 63 aos, la
ausencia de infantes en el presente estudio se explica por el
hecho de que en este centro asistencial, se atienden en su
mayora pacientes de edad avanzada y con enfermedades
crnicas.
Las muestras analizadas presentaron un contaje inicial de
plaquetas dentro del rango de referencia normal (232-
336)x10
9
/l
(27)
. En estos pacientes se observ una disminucin
progresiva en el contaje de plaquetas de las muestras tomadas
con EDTA y mantenidas a temperatura ambiente, llegando a ser
sta hasta un 91% ms baja que el contaje inicial, a los sesenta
(60) minutos despus de extrada la muestra. A pesar de que la
disminucin fue homognea (77%-91%), la intensidad del
decrecimiento a travs del tiempo fue diferente en cada uno de
los pacientes. Paralelo a la disminucin del contaje plaquetario,
se observ un aumento en el nmero de glbulos blancos
registrados por el equipo, llegando a ser este incremento hasta
un 130% del contaje inicial.
La observacin microscpica de los extendidos sanguneos de
estos pacientes mostraron la existencia de cmulos plaquetarios
que iban aumentando en nmero y tamao gradualmente en el
tiempo, (Figura 1). La formacin de estos cmulos explicara la
disminucin progresiva del contaje plaquetario y el aumento
paralelo del contaje leucocitario, ya que los mismos al llegar a
tener un volumen mayor de 20fl no son detectados por el
autoanalizador como plaquetas, sino que son registrados como
leucocitos debido a su similitud con estos ltimos, (Figura 2).
Estos resultados son compatibles con el diagnstico de PTCP-
EDTA dependiente.

Figura 1: Agragados plaquetarios observados
en muestra extrada a los 30 minutos y
mantenidas a temperatura ambiente (100x).


Figura 2: Extendido sanguneo de muestra
extrada con EDTA y mantenida a temperatura
ambiente donde se compara el tamao de los
agregados plaquetarios con el de un
polimorfonuclear (100x).
Los resultados obtenidos en muestras anticoaguladas con citrato
exhibieron un fenmeno similar al observado en las muestras
anticoaguladas con EDTA y mantenidas a temperatura
ambiente, aunque la disminucin del contaje plaquetario se hace
menos acentuada a travs del tiempo. Llama la atencin que en
diversos reportes
(1,3,15,20,28,29,30,31,32)
se ha recomendado el uso
del citrato como alternativa para confirmar la existencia de
PTCP-EDTA dependiente e incluso lo sealan como el
anticoagulante a utilizar para la realizacin del contaje
plaquetario automatizado en pacientes que presentan este
fenmeno.
No es recomendable el uso del citrato para confirmar el
diagnstico de PTCP-EDTA dependiente, as como tampoco el
anticoagulante alternativo para el contaje de plaquetas en estos
casos, debido a que en todos los pacientes el contaje fue
disminuyendo en distintas proporciones y el coeficiente de
variacin de dichos contajes estuvo en un rango de 14% al
49%, lo que resulta poco confiable para el uso en el laboratorio
clnico de rutina. A diferencia de los contajes plaquetarios
realizados bajo las condiciones antes descrita (EDTA y citrato
mantenidas a temperatura ambiente), en los contajes
plaquetarios de las muestras extradas con EDTA y conservadas
a 37C se obtuvieron coeficientes de variacin con un rango de
1.7% al 8.8%, aunque ste es mucho menor que los obtenidos
en EDTA y citrato mantenidas a temperatura ambiente, la
mayora de los valores no estuvieron dentro del rango
establecido por el fabricante del equipo ( 3%), solo dos (02)
pacientes mostraron coeficiente de variacin aceptable. Estos
resultados indican que el mecanismo por el cual se forman los
agregados debe estar relacionado con un tipo de anticuerpo que
reacciona a temperaturas menores de 37C.; debido a que en la
mayora de los laboratorios clnicos de rutina cuentan con bao
de Mara pareciera prctico y de bajo costo la implementacin
de este protocolo para el correcto contaje de plaquetas, en
pacientes a los que se les ha reconocido previamente este
fenmeno. Cabe destacar, que en nuestros casos al igual que
los reportados por Watkins
(14)
y Sheiner
(15)
la agregacin
plaquetaria no se reverti al ser incubada la muestra a 37C.
En los experimentos al suplementar inmediatamente con
Kanamicina, las muestras de tres (03) pacientes extradas con
EDTA, se observaron contajes plaquetarios que se mantuvieron
constantes durante los sesenta (60) minutos de la prueba,
correspondindose ste resultado con un bajo porcentaje de
disminucin entre los contajes iniciales y finales (rango: 0-4%)
y un coeficiente de variacin que se mantuvo entre el 2.2% y el
3.4%, lo que refleja una precisin vlida como para que este
protocolo sea usado en el laboratorio clnico de rutina.
Al realizar el contaje manual de plaquetas por el mtodo de
referencia de Brecher-Cronkite encontramos valores entre 222-
305 x10
9
/l, observando un contaje comparable entre stos y
aquellos realizados por el autoanalizador a las muestras
suplementadas con Kanamicina (240-290 x 10
9
/l), lo que
evidencia la exactitud del protocolo propuesto. Los autores
piensan que la suplementacin con este antibitico es efectiva
no slo para evitar la agregacin sino, que adems, permite
realizar contajes plaquetarios exactos y reproducibles a travs
del tiempo en los pacientes con PTCP-EDTA dependiente. De
igual forma se analizaron los posibles cambios que esta
suplementacin pudiese ocasionar en el resto de los parmetros
hematolgicos (glbulos blancos, glbulos rojos, hemoglobina,
hematocrito y VCM), y observando que estos no se alteran,
podemos concluir que la suplementacin con Kanamicina, sera
el mtodo ideal para el correcto contaje automatizado de
plaquetas, sin alterar los otros parmetros hematolgicos, en
pacientes con PTCP-EDTA dependiente previamente
diagnosticada.
El mecanismo por el cual este antibitico es capaz de prevenir
los cmulos plaquetarios es an desconocido, aunque Sakurai et
al.
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proponen dos hiptesis que explicaran la accin de la
Kanamicina sobre los agregados.
Como alternativa factible econmica y sencilla, se propone el
uso de la Kanamicina para el diagnstico diferencial de la PTCP-
EDTA dependiente. Sin embargo su uso no excluye la posibilidad
de que se contine obviando en algunos pacientes este artefacto
de laboratorio; queda de parte del personal del laboratorio el
reconocer a tiempo y aplicar las alternativas que tenga a su
alcance para elaborar un correcto contaje plaquetario.
En este estudio se propone un mtodo alternativo para detectar
la PTCP-EDTA dependiente y como realizar un correcto contaje
plaquetario en estos casos.

PROTOCOLO PARA DETECTAR CASOS DE
PSEUDOTROMBOCITOPENIA EDTA DEPENDIENTE
En la rutina diaria del laboratorio clnico, al observar contajes
plaquetarios por debajo del rango de referencia se debe revisar
el extendido sanguneo, y si ste no se corresponde con el
nmero de plaquetas arrojadas por el equipo y adems se
observaron agregados plaquetarios, sugerimos citar
nuevamente al paciente, para extender el estudio y descartar
una PTCP-EDTA dependiente.
Procedimiento
Tomar tres muestras de sangre venosa con anticoagulante EDTA
y mantener las siguientes condiciones:
El tubo N 1 dejar a temperatura ambiente.
El tubo N 2 dejar a 37C. inmediatamente despus de
extrada la muestra.
El tubo N 3 se suplementar con Kanamicina (20
mg/ml de sangre) inmediatamente despus de extrada la
muestra.
Analizar cada una de estas muestras en el autoanalizador
hematolgico, cada 10 minutos durante una hora.
Tomar muestra capilar para realizar contaje de referencia,
Unopette (Brecher-Cronkite).