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INSTRUMENTACIN DE BIORREACTORES

La instrumentacin y control de un biorreactor requiere de sensores que midan las variables de un proceso
fermentativo, y sistemas que ajusten el equipo a un punto ptimo de operacin. Idealmente, los sensores deben de
estar en lnea, para medir las propiedades fsicas del cultivo, estos sensores deben ser esterilizables para asegurar la
asepsia del proceso. Sin embargo, no todas las mediciones pueden ser hechas en lnea, algunas medidas fuera de lnea,
requieren de tomar muestras y analizarlas, lo cual consume tiempo y hace lenta la respuesta de control (biomasa,
sustrato, metabolitos, etc.). En la Ilustracin, podemos observar los principales instrumentos de medicin en un
biorreactor.
Los sensores de propiedades fsicas pueden ser monitoreados continuamente, y son la temperatura, presin, poder de
agitacin, velocidad de agitacin, viscosidad del medio, flujo y concentracin de gases y fluidos, espuma, volumen y
masa. Los utilizados son de agitacin, temperatura y nivel de lquido. Para la medicin de las propiedades qumicas se
utilizan electrodos esterilizables al vapor, de pH, redox, oxgeno disuelto y CO2. El ms utilizado es el de pH, aunque no
tiene utilidad para todas las fermentaciones, slo en las de tipo continuo donde se necesita mantener un valor estable
de acidez o basicidad. Para ello, contamos con sensores de pH y oxgeno disuelto.

Ilustracin 1 Instrumentacin de un biorreactor.

COEFICIENTE VOLUMTRICO GLOBAL DE TRANSFERENCIA DE MASA (kLa).

La determinacin por separado del coeficiente de transferencia de masa kL y el rea interfacial a, es laboriosa y algunas
veces imposible. Es conveniente, por tanto, calcular directamente el producto de estos, usualmente llamado coeficiente
volumtrico global de transferencia de masa (kLa).
En los fermentadores aerbicos, kL y a dependen de las condiciones hidrodinmicas existentes alrededor de las
burbujas. Por ello, se ha investigado ampliamente la relacin entre kLa y parmetros como el dimetro de la burbuja, la
velocidad del lquido, la densidad, la difusividad del oxgeno; y a su vez, se han desarrollado correlaciones empricas
entre coeficientes de transferencia de materia y las principales variables de operacin. En el Anexo C se renen algunas
de estas expresiones para diferentes sistemas. Una de las ms frecuentes en columnas de burbujeo es la propuesta por
Yoshida y Akita:

En la prctica, la exactitud de las correlaciones aplicadas a los sistemas biolgicos es generalmente pobre. Debido a que
los lquidos de fermentacin contienen cantidades variables de sustratos, productos, sales, agentes tensoactivos y
clulas, la qumica de la superficie de la burbuja y, por tanto, la transferencia de materia llega a ser muy compleja.
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Adems, la mayora de las correlaciones existentes para calcular los coeficientes de transferencia de oxgeno se
determinaron en tanques agitados a escala de laboratorio, los cuales se caracterizan por una elevada turbulencia en
todo el recipiente, y utilizando aire puro en agua; por ello, es muy difcil modificar estas correlaciones para aplicarlas en
equipos a gran escala o para diferentes composiciones del lquido.
Con el modelo de dos comportamientos aplicados a fermentadores a gran escala se obtienen mejores resultados ya que
se emplean diferentes correlaciones para la zona mezclada cercana al difusor y la zona de burbujas alejada de l.
El coeficiente global de transferencia de masa est determinado por la velocidad a la cual las molculas de oxgeno
pasan a travs de la capa lmite. ste puede incrementarse por la reduccin del tamao de la capa lmite al hacer ms
turbulenta la fase lquida y por el aumento de la velocidad del movimiento de las molculas a travs de la interfase.
Asimismo, debe recordarse que la resistencia al transporte de las molculas en el lado gaseoso (1/kG) es despreciable
con respecto a la que ofrece el lado del lquido (1/kL).

Balance de materia en biorreactores de dos fases

En esta seccin se examina el transporte de oxgeno desde la fase gaseosa a la fase lquida. En la mayora de
biorreactores, el comportamiento del flujo de ambas fases depende de la escala del equipo empleado. A pequea
escala, equipo de laboratorio, la fase lquida generalmente puede ser considerada bien mezclada, mientras que el
comportamiento de la fase gaseosa podra ser bien mezclado o flujo pistn, dependiendo de si se emplea agitacin
mecnica o no. Es importante reconocer estos dos tipos de comportamiento al plantear los balances de materia
apropiados para la transferencia de oxgeno de una fase a la otra.
Se desarrollan ecuaciones de balances tanto para un sistema de fase lquida y fase gaseosa bien mezclada, como para un
sistema de fase lquida bien mezclada y fase gaseosa en flujo pistn. Si la fase lquida no es bien mezclada, es menester
cuantificar de alguna manera la dispersin del lquido. Por encima de una velocidad crtica del impulsor, la mayora de
los reactores agitados mecnicamente con fluidos de baja viscosidad se aproximan al comportamiento de bien
mezclado. En grandes reactores, la situacin es menos clara y se debe tener cuidado para delinear el rgimen del flujo
del lquido. En casos donde el grado de absorcin es alto, la suposicin de comportamiento bien mezclado o flujo pistn
de la fase gaseosa puede predecir velocidades de absorcin las cuales difieren por un orden de magnitud. Es as que se
debe tener cuidado en el desarrollo de modelos de estos sistemas de dos fases.

Sistema aire agua.

Fase lquida bien mezclada y fase gaseosa bien mezclada. Si tanto la fase gaseosa como la fase lquida pueden
ser consideradas bien mezcladas, se pueden desarrollar ecuaciones acopladas que describan la transferencia
desde el gas a la fase lquida.


La velocidad de transferencia de oxgeno desde el gas a la fase lquida, est dada por:
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El balance de materia en la fase gaseosa incluye trminos de flujo de entrada y de salida del reactor y el trmino que
describe el transporte de oxgeno desde la fase gaseosa, as:

Donde a.VL es el rea total para la transferencia de materia, NVLVb es el volumen total de gas, N es el nmero de
burbujas por volumen de lquido, Vb es el volumen de la burbuja y el coeficiente global de transferencia de materia en la
fase gaseosa KG incluye las resistencias de pelcula del gas y el lquido, dado por:


Implcitamente se aduce que el volumen de la burbuja permanece constante y para la solucin de las ecuaciones,
teniendo en cuenta que en estado estable la presin no cambia con el tiempo, se asumir P = PLM. Sin embargo, si hay
una variacin significativa de la presin dentro de la columna de burbujeo, su dependencia con la altura de la columna
debe ser incluida. La consideracin de un volumen de burbuja constante puede ser precisa para el oxgeno si la cantidad
transferida de ste es pequea. El balance de materia de la fase lquida para el oxgeno se plantea como:

Donde F es el caudal de la fase lquida y rO2 es la velocidad volumtrica de consumo de oxgeno por reaccin en la fase
lquida. Puede asumirse fases de gas y lquido bien mezcladas solamente en reactores pequeos con lquidos no
viscosos. En grandes reactores la fase gaseosa puede estar sustancialmente agotada de oxgeno a medida que las
burbujas de gas ascienden a travs del lquido. Requerimos entonces considerar la variacin de la concentracin de
oxgeno en la fase gaseosa con la altura del tanque.

Fase lquida bien mezclada y fase gaseosa en flujo pistn. Existe una dependencia axial de la composicin en la
fase gaseosa as como de la variacin en el tiempo. El balance total de oxgeno en la fase gaseosa es:



La velocidad de ascensin de la burbuja es UB y a es la relacin rea superficial de burbuja por volumen de burbuja
(note que sta es diferente de a, el rea interfacial por volumen de fase lquida). Si la concentracin de oxgeno en la
fase gaseosa puede ser considerada invariante con el tiempo (como puede ser el caso en reactores continuos de tanque
agitado en estado estable), la fraccin molar de la fase gaseosa y depende solamente de la posicin z (y = y (z)) y la
concentracin de oxgeno en el lquido podra solamente depender del
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tiempo (CO2 = CO2 (t)), desacoplando as la ecuacin (1.4.5). Ahora se puede resolver el balance de la fase gaseosa
asumiendo que el volumen de la burbuja Vb permanece constante. En este caso, la velocidad de ascensin UB y a'
pueden ser constantes.




Del teorema del valor medio, la fraccin molar promedio de oxgeno est dada por:

Sustituyendo la expresin anterior en la ecuacin y resolviendo, la fraccin molar en la fase gaseosa es:

As el balance de oxgeno en la fase lquida bien mezclada es:

En estado estable la derivada con respecto al tiempo de la concentracin de oxgeno vale cero. As, dividiendo por F,
sustituyendo la constante a por aVbN y organizando se obtiene:

La cual puede ser resuelta si se conoce la expresin de velocidad volumtrica de consumo de oxgeno (rO2) obtenida para
el sistema microbiano o enzimtico bajo consideracin. En sistemas sin consumo de oxgeno este valor es cero, por lo
que la concentracin de oxgeno disuelto en el medio igualar rpidamente la concentracin de saturacin de oxgeno.
Estas ecuaciones pueden ser empleadas directamente dependiendo de los modelos de flujo en el tanque bajo
consideracin. En columnas de burbujeo las cuales tienen grandes relaciones de altura a dimetro, el ascenso del gas a
travs de la fase continua induce a un modelo de circulacin de lquido el cual no es bien mezclado y debe considerarse
entonces una dispersin axial del lquido.
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CLCULO DEL COEFICIENTE VOLUMTRICO GLOBAL DE TRANSFERENCIA DE MASA (kLa)

Bailey cita los siguientes autores para el clculo del coeficiente volumtrico global de transferencia de masa kLa:

Van't Riet: Tanques agitados


Bello et.al: Reactores de tiro de aire

Wang y Fan: Columnas de burbujeo



Blanch cita la correlacin propuesta por Yagi para el coeficiente de transferencia de materia en sistemas viscosos, en los
cuales se pueden distinguir dos tipos de comportamiento del caldo:

a. Cultivos donde la viscosidad se debe a la estructura micelial
b. En sistemas tales como fermentaciones de polisacridos donde la viscosidad se debe a los polmeros emitidos por el
organismo.


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ESCALAMIENTO DE BIORREACTORES

El escalamiento involucra el estudio de los problemas asociados a transferir la informacin obtenida en el laboratorio
(mL) a escala de planta piloto (L) y desde escala de planta piloto (L) a escala industrial (m
3
).
La seleccin del criterio de escalamiento depender de cul es la variable ms importante para el crecimiento del
microorganismo y para la produccin de producto deseado, por ejemplo:
Fragilidad del m.o.
Trasferencia de O
2


Generalmente el escalamiento se hace en base de principios de semejanza entre 2 sistemas. Esta semejanza se refiere a
similitud entre las 2 escalas. Dichas similitudes pueden ser:
Similitudes geomtricas: Las razones entre las longitudes correspondientes deben ser iguales en ambos sistemas.
Similitudes cinemticas: Las razones entre las velocidades en puntos equivalentes deben ser iguales en ambos
sistemas.
Similitudes dinmicas: Las razones entre las fuerzas en puntos equivalentes deben ser iguales en ambos
sistemas.

Criterios de escalamiento

1. Coeficiente de transferencia de oxgeno
Si lo ms importante es mantener el nivel de transferencia de oxgeno en el cultivo, se debe considerar este criterio.
Los pasos a seguir son:

a) Determinar kLa ptimo desde experimentos a nivel de piloto (kLa debe medirse o estimarse).
b) Relacionar kLa con variables de diseo de la escala a la cual se desea escalar (kLa) escala1 = (kLa) escala2

2. Potencia por unidad de volumen
Resulta el criterio clsico de escalamiento en Ing. Qumica, permite mantener el nivel de agitacin. Al momento de
aplicarlo se debe tener cuidado de no sobrepasar los lmites tanto de esfuerzo de corte mximo y nivel de trasferencia
de oxgeno mnima.
(Pg/V) escala1 = (Pg/V) escala2

Dado que siempre se cumple que: Pg/V a N
3
Di
2
, a partir de ello se puede deducir que (Probarlo):

(N
3
Di
2
) escala 1 = (N
3
Di
2
) escala 2
3. Velocidad tangencial de agitacin
Permite mantener el nivel de agitacin, esta variable deber ser simple evaluada dado que se puede estar trabajando con
microorganismos o micelas que no resistan esfuerzos de corte mayores que los establecidos.
Al momento de escalar con otros criterios puede ocurrir que se sobrepasen los esfuerzos de corte mximo aceptable, en
ese caso debe prevalecer este criterio.
(N Di) escala 1 = = (N Di) escala 2

4. Mantencin del nmero de Reynolds
Asegura un nivel de agitacin adecuado, pero se deben tener en cuenta los mismos puntos que para el criterio de
potencia por unidad de volumen.
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(N Di
2
/) escala1 = (N Di
2
/) escala2

5. Velocidad de Bombeo de aire
Asegura una adecuada aireacin del sistema, lo cual no asegura una adecuada transferencia de oxgeno, por lo cual se
debe verificar. Siempre se cumple que la razn de bombeo es proporcional a la velocidad de agitacin, F/V N.
Entonces al aplicar este criterio de escalamiento se cumple:
(N) escala 1 = (N) escala 2

MTODO DE ESCALADO Y EJEMPLO DE APLICACIN

Paso 1: Especificacin del proceso y de la tarea de escalado
Este primer paso implica especificar el proceso y obtener su Modelo Semifsico de Base Fenomenolgica (MSBF): i )
definir cules sern las variables de estado x (que especificarn el PdeO), cules sern variables manipuladas (o de
escala) u y cuales variables de diseo z , todas con su valor correspondiente al PdeO de la Baja Escala (PdeO
BE
), y ii )
declarar el valor de la VdeC * a la que se quiere llegar: PdeO de la Alta Escala (PdeO
AE
), y precisar la eficiencia mnima a
lograr en ese PdeO
AE
.
El proceso tomado como ejemplo en este trabajo es la fermentacin continua de un jarabe glucosado, complementado
con fosfatos, sales de potasio y fuentes de nitrgeno, cofactores de la ruta metablica por la cual la levadura
Saccharomyce cerevisiae convierte, en fase lquida, la glucosa a etanol y CO 2 (Abril y Abril, 2009). Para la fermentacin
se utiliza un reactor cilndrico cerrado y enchaquetado, que se agita mediante una turbina tipo Rushton. Esta clase de
agitacin produce flujos axiales y radiales que garantizan la homogeneidad del sistema. Al comienzo del proceso, la
produccin de CO
2
desplaza el aire presente, lo cual garantiza las condiciones anaerobias propias de la fermentacin de
etanol con la levadura. El volumen efectivo del medio corresponde al 70% del volumen total del reactor. En el arranque,
el reactor es inoculado con la levadura en su etapa de crecimiento exponencial. Inocular la levadura en esta etapa de
crecimiento garantiza las mejores condiciones para la produccin de etanol.

El reactor opera en continuo con un flujo de alimentacin del jarabe y renovacin de clulas cuando se presente prdida
de viabilidad de stas. El reactor tiene dos corrientes de salida: una en fase lquida, constituida por el medio de
fermentacin residual y etanol, y la otra en fase gaseosa, principalmente formada por CO
2
y vapor de agua. El modelo se
obtiene aplicando el principio de conservacin en slo un sistema de proceso: fase lquida del fermentador. Por
esa razn, slo se efectan balances de masa y energa para el medio sumergido. La nomenclatura de variables es la
usual en modelos de bioprocesos. Se remite al lector a Bastin y Docheim (1990), para observar dicha nomenclatura. Las
condiciones de operacin para la temperatura, el pH y el nivel de agitacin en el proceso se establecen de acuerdo con
el metabolismo de la levadura cuando produce etanol a partir de glucosa (Ferreyra y otros, 2009, Araya y otros, 2007,
Caldern-Santoyo y otros, 2010, Roeva y otros, 2007).
El vector de estados est formado por: x = [X, P, S, T], con X, P, S concentraciones de biomasa, producto y sustrato
respectivamente, y T la temperatura de proceso. Los valores nominales esperados para el PdeO son: X=20kg/m
3
,
S=150kg/m
3
, P=30kg/m
3
y T=30C. Las variables manipuladas u son: u=[F in Cv S in U g ], con F
in
, Cv, S
in
y U
g
el flujo de
alimentacin, el coeficiente de apertura de la vlvula de control de nivel, la concentracin de sustrato de alimentacin y
el coeficiente global de transferencia de calor, respectivamente. Finalmente, las variables de diseo z son:
z=[F
in
X
in
S
in
P
in
], con X
in
y P
in
las concentraciones de biomasa y producto en la entrada respectivamente. Ntese que en
el vector z existen variables que tambin figuran en el vector u, lo que sugiere que los valores de F
in
y S
in
que se hallen
para las variables de diseo sern los valores nominales (iniciales o bias value ) que tomen los controladores de esas
variables cuando empiezan a operar en lazo cerrado.

En el caso tratado aqu, se desea escalar hasta un volumen de 1000 litros, por lo que VdeC=1000 l. La eficiencia del
proceso esperada es aquella que brinde al menos 30kg/m
3
de Etanol en estado estacionario (Pee). Para el RdeO se
espera que la dinmica dominante del proceso corresponda a la dinmica de la concentracin de etanol (P). Finalmente,
el MSBF se realiza mediante los balances de masa en el biorreactor, considerando la cantidad de biomasa que entra con
el flujo, ante el caso eventual de una renovacin celular. Tambin se considera la biomasa generada y la biomasa que
pierde viabilidad. Los siguientes son los balances de sustrato biomasa, producto y energa del proceso explcitos, con las
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ecuaciones constitutivas que explican los trminos involucrados en los balances. Todas estas ecuaciones constituyen el
Modelo Semifsico de Base Fenomenolgica (MSBF) del proceso.
Balance de sustrato
Considera, adems del sustrato que entra y sale, el sustrato consumido para crecimiento y mantenimiento celular.
Tambin considera el sustrato convertido en etanol, as como el sustrato que dejan de consumir las clulas por prdida
de su viabilidad. Es decir, la cintica de produccin de etanol considera la viabilidad de todas las clulas por lo tanto se
corrige este trmino teniendo en cuenta el sustrato que no es convertido a etanol.


Con S concentracin de sustrato en [kg/m
3
], P concentracin de producto en [kg/m
3
], F flujo volumtrico en [m
3
/s], y X
concentracin de biomasa en [kg/m
3
]. X
mx
y P
mx
corresponden a la mxima concentracin de biomasa y producto,
respectivamente. Y P/S es el rendimiento de P respecto a S.

Balance de biomasa Balance de biomasa
En este balance, se consider como ecuacin constitutiva la velocidad de crecimiento de biomasa propuesta por Monod,
pero corregida por efectos de presin y concentracin de biomasa. La velocidad mxima de crecimiento celular es
funcin de la velocidad de crecimiento ptimo, pH y temperatura del medio de fermentacin. Esa velocidad mxima de
crecimiento es un parmetro emprico, cuyo valor se tom de Casablancas y otros (1998).

Balance de producto
Considera el producto que entra, porque la velocidad de generacin de producto est directamente asociada al
crecimiento de la clula. Tambin incluye la velocidad de generacin de producto por la reaccin metablica y la
cantidad de producto que no se genera por prdida de viabilidad celular, de forma anloga al balance de sustrato.

Balance de energa
Considera la energa que entra y sale con los flujos y la generacin e intercambio de energa con el medio.
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Donde: h
i
Coeficiente convectivo en el lado del caldo (W/m
2
K), he Coeficiente convectivo en el lado del fluido (W/m
2
K)
y e Espesor de la pared de intercambio (m).

Paso 2: Calcular la matriz de Hankel para el proceso
Para esto se debe primero linealizar el MSBF del Proceso y llevarlo a la forma cannica:
x=Ax + Bu; y = Cx
y con ese modelo formular la Matriz de Hankel H. Para linealizar, se deriva respecto a cada uno de los estados y variables
reales manipuladas, considerando f como el lado derecho de cada Ecuacin Diferencial del MSBF. De este modo se llega
a las matrices A y B, mientras que C se deduce desde la configuracin de sensores instalada en el proceso. Para la
consideracin hecha en todo este trabajo, y
i
=x
i
,C es la matriz identidad.
La matriz H que se obtiene para el fermentador no se muestra aqu por cuestiones de espacio. Basta con decir que es
una matriz de funciones. Para ilustrar esto, se presenta a continuacin de manera expandida slo una parte de la
primera columna de H:

Paso 3: Construir la curva de jerarqua de dinmicas con datos de proceso en la baja escala
Se incrementa la VdeC del proceso desde su valor de Baja Escala (VdeC
BE
) hasta un valor deseado de Alta Escala
(VdeC
AE
), calculando para cada nuevo valor de la VdeC el IEI de cada estado. Se utilizan para eso los valores de las
variables de diseo z en la Baja Escala reemplazados en H, para calcular la descomposicin en valores singulares de H. Se
recomienda tomar un paso VdeC, con VdeC
k
=VdeC
k-1
+ VdeC, lo suficientemente grande para que el nmero de
clculos no sea exagerado, pero tan pequeo que evidencie (de existir) los cambios en la jerarqua dinmica, al
incrementar la capacidad del proceso.

Paso 4: Normalizacin del ndice de Estado Impactable (IEI) y verificacin del RdeO
En este paso se debe normalizar cada secuencia deI EI i dividiendo por el mximo valor que alcanza el IEI
I
de cada uno de
los estados calculados en el paso anterior. Aparece as el IEI Normalizado (IEI
N_I
) que permite determinar el RdeO
(jerarqua de las dinmicas).Se debe verificar que la dinmica de inters (en este ejemplo corresponde a la dinmica de
producto P), sea dominante respecto a las dems dinmicas segn el IEI
N_I
, en el valor de la VdeC
BE
. Si esta condicin no
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se cumple, se debe regresar al Paso 1 y confirmar el valor del PdeO y de la eficiencia mnima del proceso que se desea,
operando a la variable de capacidad especificada en dicho punto de operacin.

Paso 5: Verificacin del RdeO en todos los valores de la Variable de Capacidad (VdeC)
Graficar el vector de VdeC
K
vs. IEI
N
y verificar en que intervalos de la VdeC la dinmica de inters es dominante respecto a
las dems dinmicas. Existen dos opciones: i ) El RdeO se cumple en el valor de la VdeC
AE
, pero el RdeO no se cumple en
valores intermedios de la VdeC. En este caso los puntos que no cumplen no se pueden utilizar como valores intermedios
para el escalado (Paso 8). ii ) El RdeO no se cumple en el valor de la VdeC AE . En este caso se debe determinar el
intervalo de valores de la VdeC alrededor del valor de la VdeC AE que cumplen. En los dems valores de la VdeC tambin
es posible realizar el escalado pero se debe determinar el valor del IEI
N_I
que mantendra el RdeO y proponer valores
alrededor del PdeO especificado en el Paso 1, que generen este IEI
N_I
. Los IEI N para el fermentador del ejemplo, frente a
cambios en el volumen del biorreactor.
En la figura se observa que a medida que se incrementa en el volumen del biorreactor (VdeC), la dinmica del producto
presenta un comportamiento dominante frente a las dems dinmicas. El comportamiento dominante de la dinmica de
producto est determinado por valores del IEI
N
superiores para esta variable, frente a valores inferiores del IEI
N
para las
dems dinmicas. Realizando en dicha grfica un acercamiento para volmenes inferiores a 3 litros, como se muestra en
la Figura, se observa que la dinmica de producto es dominante para volmenes superiores a 3 litros, pero si el volumen
es menor de 3 litros , la dinmica de la biomasa presenta un comportamiento dominante frente a las dems dinmicas,
lo cual concuerda con el comportamiento del proceso real. Por tanto, el RdeO por debajo de 3 litros no corresponde al
especificado en el Paso 1.

Paso 6: Determinacin del valor crtico de la Variable de Capacidad (VdeC*)
Determinar el valor crtico de la Variable de Capacidad (VdeC*) como el valor a partir del cual se cumpla que el mayor
IEI
N_I
corresponde al estado asociado con la dinmica de inters (lo que implica respetar el RdeO en su primera variable),
y verificar que la eficiencia en ese VdeC* est de acuerdo con la especificada en el Paso 1. Si esto ltimo no se cumple,
verificar que las condiciones de entrada en VdeC
BE
(Paso 1) son correctas y dan la eficiencia requerida. Si no es as,
determinar un nuevo valor para el PdeO en VdeC
BE
(que sea superior al dado inicialmente).

Ilustracin 2: RdeO mediante los IEIN para los estados de X, S, P y T del fermentador.
En la Ilustracion 3 se muestra valores bajos de la VdeC frente al IEI
N
que permite determinar el ndice de estado
impactable de cada uno de los estados con las entradas como un todo. Como se ve, para el caso del fermentador del
ejemplo, la dominancia de la dinmica de producto permite realizar escalado a partir de un volumen de 3 litros , en el
cual se mantiene el RdeO hasta un volumen de 1000 litros . Por lo tanto en este caso el VdeC*=3 l. Las dinmicas
relevantes del proceso corresponden a biomasa y producto, mientras que las dinmicas de temperatura y sustrato
presentan un comportamiento secundario en el sistema. Estos valores del IEI
N
fueron calculados con el PdeO que
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corresponde a la Baja Escala. En la Figura 4 se presenta el estado estacionario de la concentracin de producto frente al
incremento en el volumen del biorreactor, calculado con condiciones de la Baja Escala (sin ajustes de escala).

Ilustracin 3: VdeC* segn el RdeO para los estados.
Como se observa en la Figura 4, usando las condiciones de la baja escala como constantes a cualquier VdeC, para
volmenes superiores a 500 litros no se cumple con la concentracin de producto esperada. Por consiguiente, con la
proyeccin de las condiciones de operacin en la escala baja, no es posible realizar un escalado de proceso para
volmenes superiores a 500 litros que cumpla con la eficiencia mnima del proceso especificada en el Paso 1. Para evitar
ese error se debe realizar el escalado de forma adecuada, que como se ver ms adelante, se cumple siguiendo el
procedimiento propuesto en este trabajo.

Ilustracin 4: Estado estacionario de la concentracin del producto.
Paso 7: Determinar una ecuacin que permita calcular el IEI real
De acuerdo con la forma de la curva VdeC
K
vs. IEI
N_n
, obtenido en el Paso 6, indicando el subndice n la dinmica de
inters, seleccionar un nmero de puntos para (VdeC
K
) que permitan la mejor representacin de toda esa curva.
Calcular en cada VdeC
K
seleccionado el IEI
N_n
con condiciones de entrada del proceso reportadas o experimentales para
ese VdeC
K
particular. Hallar una ecuacin que ajuste bien las parejas (VdeC k , IEI
N_n
), para calcular IEI
N_n
= f ( VdeC
K
). El
IEI
N_n
as calculado se denominar IEI
N_n Real
. En este caso se tomaron tres parejas de datos, puesto que la forma continua
de la curva permite una buena aproximacin con slo tres puntos. La mejor ecuacin de ajuste de la curva (ajuste a los
puntos del 99.68%), corresponde para el fermentador del ejemplo a:
IEI
N_n Real
= (VdeC
f
)
0.01
x IEI
N_n

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En la que IEI
N_n_Real
es el IEI al volumen final o variable de capacidad a la que se quiere escalar (VdeC
F
), IEI
N_n
es el IEI al
volumen final que se quiere escalar pero proyectado con las condiciones de operacin en el volumen crtico (Baja
Escala). De la curva correspondiente a esta ecuacin se obtiene un IEI
N_n
_ Real = 127.89para un volumen de 1000 litros y
un IEI
N_n
=71.85.

Paso 8: Escalar con valores entre baja escala y alta escala
Iniciar en el valor de la VdeC BE y tomando entre dos y tres valores de la VdeC intermedios entre VdeC
BE
y VdeC
AE
,
escalar como se indica a continuacin. Tomar sucesivamente cada nuevo valor de la VdeC usando las condiciones de
entrada de la VdeC inmediatamente anterior, hasta llevar al valor de laVdeC
AE
: i) De la descomposicin en valores
singulares de H, tomar las componentes U
n1
, U
n2
, U
n3
,...U
nn
de U, con n el nmero de la fila de la variable de estado de
inters. ii) De la misma descomposicin, tomar los valores singulares s
11
, s
22
, s
33
, ...s nn mayores que cero de S y calcular
las proporciones de cada s ii respecto al primero (s
11
). iii) Calcular la sumatoria:


iv) Con el valor de la VdeC actual y la ecuacin de la curva del IEI
N_n_ Real
, calcular IEI
N_n_ Real
. v ) Despejar s
2
11
,estimado
de:

Donde n_real en el subndice del IEI se refiere al ndice de Estado Impactable real para la dinmica n en la alta escala.
vi) Usando las proporciones entres
22
, s
33
... s
nn
y s
11
, estimar nuevos ss ii (en adelante denominados s
ii,estimados
) y con ellos
estimar la nueva matrizS.vii) Determinar una nueva H=USeV
T
con U y V calculadas para el valor de la VdeC
inmediatamente anterior, con Se la matriz de valores singulares estimados. viii) Leer los valores de las h ij componentes
de H, que contienen informacin de las condiciones de entrada del proceso a la nueva escala. ix) Igualar los valores de
los h
ij
con sus ecuaciones expresadas a partir de las matrices A, B y C de la linealizacin y calcular las condiciones de
entrada para la VdeC actual.

Paso 9: Verificacin del escalado y resultados para la alta escala
Con las condiciones de entrada para la VdeC
AE
, se resuelve el modelo para estimar la eficiencia del proceso en la Alta
Escala y con el vector IEI a VdeC
AE
se verifica que el RdeO se cumpla. Si la eficiencia no se ajusta a lo esperado, se revisa
el PdeO y se ajustan las condiciones de entrada hasta lograr la eficiencia deseada. En caso que alguna de las condiciones
del proceso est por fuera de los lmites normales de operacin, ajustarla al valor ms prximo vlido para esta
condicin (dentro del intervalo de valores permitidos para dicha variable alrededor del PdeO). Con esto se finaliza el
escalado.

Al realizar este clculo para el fermentador del ejemplo, para un volumen de 16 litros y para un volumen de 740.000
litros, se obtienen los resultados mostrados en la Tabla 1, los cuales se compararon con los resultados obtenidos en la
industria de destileras en Colombia y con datos reportados en la literatura. Para cada volumen se comparan las
condiciones de entrada reales con las condiciones halladas aplicando la metodologa propuesta en este artculo. Para los
diferentes volmenes no se encontr diferencia en los valores obtenidos de temperatura, lo cual corresponde al
comportamiento real del proceso, del cual puede decirse que auto-regula la temperatura. Los errores entre los valores
predichos y los entregados por el procedimiento de escalado, en todos los casos se encuentran alrededor del 10%, lo
cual est de acuerdo con los mtodos utilizados en Ingeniera de Procesos durante las etapas de diseo. Los errores
negativos corresponden a condiciones reales inferiores a las condiciones estimadas, pero que siguen estando dentro de
los intervalos de valores para estas variables que hacen eficiente el proceso, lo cual se confirma con los datos de
producto obtenido y guardan congruencia entre los valores de las variables, en un mismo volumen.
Ingeniera en alimentos PROCESOS BIOTECNOLGICOS


Tabla 1: Porcentajes de error a diferentes volmenes entre las condiciones de entrada real y estimada con el mtodo de escalado propuesto.






Bibliografa

Rodrguez Arvalo, A.C., Cabrera Llanos, A.I., Valencia Flores, J.I., Diseo y construccin de los instrumentos de
medicin para un biorreactor prototipo, Instituto Politcnico Nacional. Unidad Profesional Interdisciplinaria de
Biotecnologa., Revista Mexicana de Ingeniera Biomdica, Mxico, 2003.

Montoya Guzmn, D. A., Bermdez Segura, M. Y., Modelamiento de la transferencia de oxgeno para el cultivo de
microorganismos en un biorreactor de columna de burbujeo, Universidad Nacional de Colombia, Facultad de ingeniera
y arquitectura carrera de ingeniera qumica, Manizales, 2003.

Ruiz Ramrez, J. E., Construccin y Monitoreo de Variables de un Prototipo para el Tratamiento Biolgico de un Efluente
con Colorante Naranja II, Mediante el Hongo Trametes Versicolor, Centro Nacional de Investigacin y Desarrollo
Tecnolgico Departamento de Mecatrnica, Cuernavaca, Morelos, Mxico. Octubre de 2010.

Ruiz, A. A., lvarez, H., Escalamiento de Procesos Qumicos y Bioqumicos basado en un Modelo Fenomenolgico,
Escuela de Procesos y Energa, Facultad de Minas, Universidad Nacional de Colombia-Medelln, Colombia, 2011.