MICROBIOLOGA

Tincin Ziehl Neelsen

ESTUDIANTE
AGOSTO, 2014














OBJETIVOS

Identifica las Bacterias Alcohol Acido resistentes (BAAR), como las del genero mycobacterium,
utilizando la tincin de Ziehl-Neelsen.

INTRODUCCIN

La tincin de Ziehl-Neelsen es una tcnica de tincin diferencial que se basa en que las paredes
celulares de ciertas bacterias contienen cidos grasos(cidos miclicos) de cadena larga (50 a 90 tomos de
carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloracin con alcohol-acido, despusde la tincin
con colorantes bsicos. Las micobacterias absorben loscolorantes solo muy lentamente debido a la elevada
proporcin de ceras ylpidos en la pared celular. Para acelerar la absorcin del colorante fuscina y as la
formacin del complejo micolatofusina en la pared celular, se calientala solucin de fuscina fenicada
aplicada sobre el preparado normalmentehasta la formacin de vapores. Una vez que las micobacterias han
absorbidoel colorante, difcilmente lo ceden a pesar del tratamiento con solucindecolorante alcohol-cido
clorhdrico. Por esto se denominan bacilos alcoholacido resistente o BARR y aparecen en el preparado
microscpico teidasde rojo, mientras que todos los microorganismos no resistentes a los cidosse tien de
acuerdo con la contratincin.1Esta tincin tiene inters desde el punto de vista del diagnstico clnicopuesto
que algunos microorganismos patgenos cido-alcohol resistentes,tales como Mycobacterimum tuberculosis
son patgenos muy importantespara los humanos.

3. MATERIAL Y REACTIVOS.-
Microscopio
Portaobjetos
Mechero de alcohol


-
Frascos lavadores


Baja lengua
Hisopos


PROCEDIMIENTO: (ver anexo 1)
1. Se fija los portaobjetos al calor con la muestra.
2. Se cubre el frotis con el reactivo de colorante de carbolfuscina y secalienta con suavidad hasta la
aparicin de vapores durante 1 minuto mediante flameo por debajo de la rejilla de sostn con un mechero de
gas.
3. Se deja actuar el colorante sobre el portaobjetos durante 4-5minutos,sin calentar.
4. Se lavan los frotis con agua destilada y se los inclina para eliminar elexceso de agua.
5. Se decoloran con acido alcohol al 3,0 % durante 2 minutos. Se lavan los frotis con agua destilada y se los
inclina para escurrir el resto deagua.
6. Se cubren los frotis con reactivo de azul de metileno durante 1minuto.
7. Se lavan con agua destilada y se dejan secar al aire.
8. Se examinan con aceite de inmersin en bsqueda de BAAR.5


INTERPRETACION DE RESULTADOS

En esta prctica no encontramos bacilos puesto que la muestra no era esputo por lo tanto vimos los siguiente
:

Muestra Que deberiamos haber visto :






CUESTIONARIO

Pasos Metodo Ac. Ol Resist No Ac Ol Resist
Colorante bsico
Fenicada
rosado rosado
Mordiente n
Decolorante - rosado Sin color
Colorante de contraste Azul de metileno rosado azul