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Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Y CONTROL DE CALIDAD EN


INMUNOSEROLOGIA PARA CENTROS DE HEMOTERAPIA Y BANCOS DE
SANGRE
INDICE
1. Introduccin ..... 3
2. Finalidad.. 3
3. Objetivos.... 3
4. Base Legal ........................ 4
5. bito de !"licacin....................... 4
#. $ondiciones de Bioseguridad... 4
CAPITULO I
%rocediientos de las %ruebas en Inunoserolog&a de las In'ecciones
(eotransisibles............... 5
1. !s"ectos )enerales de los %rinci"ales !gentes (eotransisibles a
*ai+ar... 5
1.1 ,irus de la Inunode'iciencia (uana -,I(.... 5
1.2 ,irus Lin'otr"ico de las $/lulas * (uano -(*L, I 0II.. #
1.3 (e"atitis ,irales. #
1.3.1 ,irus de (e"atitis B -,(B. 1
1.3.2 ,irus de (e"atitis $ -,($............... 2
1.4 *r3"anosoa $u+i -4n'eredad de $5agas................. 2
1.5 *re"onea %allidu -6&'ilis............................................. 7
2. 8/todos serolgicos "ara tai+aje .. 19
2.1 */cnica 4LI6! 19
2.2 */cnica de :%:. 1#
CAPITULO II
$ontrol de $alidad Interno en Inunoserolog&a "ara $entros de (eotera"ia 3
Bancos de 6angre.....................................................................................17
2. $ontrol de $alidad. 17
2.1 %rocediientos generales. 17
2.2 Fuentes de variacin 29
2.3 4valuacin de los /todos serolgicos 21
2.3.1 Indicadores del valor de las "ruebas de tai+aje.. 21
2.4 4studio estad&stico de los datos serolgicos.. 23
2.5 8onitoreo de los "rocesos serolgicos del tai+aje 23
2.5.1 $ontrol Interno 24
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Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
2.5.2 )r;'icas de control 24
2.5.3 <so de suero control e=terno. 24
2.5.4 Inter"retacin de la gr;'ica de control de Leve3 >ennings 2#
2.5.5 :eglas ?lti"les de 65e@ard.. 2#
2.# $ontrol de calidad de la "rueba 4LI6!. 21
2.1 $ontrol de calidad del :%: 22
3 8anteniiento 3 calibracin de eAui"os.. 39
3.1 !nali+ador de 4LI6!. 39
3.2 Lavador de icro"lacas 4LI6!. 39
3.3 4Aui"o autoati+ado.............. 31
3.4 Incubadora.............................. 31
3.5 :otador serolgico.................... 31
3.# 8icro"i"etas............................ 31
ANEXOS.......... 34
!ne=o ! (I, 3 (*L,........................ 34
!ne=o B (Bs !g 3 !ntiB(Bc ........................... 35
!ne=o $ (,$ ........................ 3#
!ne=o C 6i'ilis ........................ 31
!ne=o 4 4n'eredad de $5agas............................ 32
!ne=o F %rotocolo de trabajo 4LI6! .......................... 37
!ne=o ) %rotocolo de trabajo :%: .......................... 49
1. :es"onsabilidad..... 42
2. !breviaturas................... 42
7. )losario de t/rinos... 43
19. Bibliogra'&a .................................. 41
2
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
1.- INTRODUCCION
4l control de la transisin de las en'eredades in'ecciosas 5eotransisibles es un reto no
slo "ara Auienes desarrollan sus actividades en el ca"o de la edicina trans'usionalD sino
tabi/n "ara Auienes se encuentran co"roetidos en la salud "?blica de un "a&s.
6eg?n lo establece el !rt. #E de la Le3 FG 2#454D Aue declar de Orden "?blico e inter/s
nacional D HLos Bancos de 6angre son estableciientos destinados a la e=traccin de
sangre 5uanaD "ara trans'usionesD tera"ias "reventivas 3 a investigacinI 'uncionan con
licencia sanitaria 3 est;n encargados de asegurar la calidad de esta 3 sus co"onentes
durante la obtencinD "rocesaiento 3 alacenaientoJI 3 el !rt. 1E es"eci'icaK HLos Bancos
de 6angre deben reali+ar obligatoriaente las "ruebas corres"ondientes "ara la sangre 3 sus
co"onentesD seg?n las noras internacionales de la Organi+acin 8undial de la 6alud
vigentesJI al a"aro de /ste arco legalD el %rograa Facional de (eotera"ia 3 Bancos de
6angre estableci la obligatoriedad del tai+aje de todas las unidades de sangu&neas con los
siete arcadores serolgicos Aue en la actualidad ejecutan los servicios trans'usionales del
nivel nacionalK 6&'ilisD (e"atitis B -!nt&geno de su"er'icie 3 $ore.D (e"atitis $D ,I( 1B2D (*L, I L
II -virus lin'otr"icos de c/lulas * 5uanas. 3D $5agas.
4l "resente anual de "rocediientos 3 control de calidad en inunoserolog&a "ara $entros de
(eotera"ia 3 Bancos de 6angre se constitu3e en una 5erraienta Aue "eritir; orientar al
"ersonalD sobre las t/cnicas 3 "rocediientos adecuados Aue "eritan garanti+ar la
con'iabilidad de los resultadosD uni'ori+ando los criterios "ara su inter"retacin 3 validacin.
*odos los es'uer+os "ara disinuir esta 'ora de transisin ser;n in'ructuosos si no se
asue el co"roiso de actuali+ar 3 'ortalecer los "rocesos de tai+ajes inunoserolgicos
Aue los $entros de (eotera"ia 3 Bancos de 6angre "or "arte del nivel o"erativo 3 gerencialI
as& coo de i"leentar en /ste servicio en un %rograa de $ontrol de $alidad Interno 3
"artici"ar en un %rograa de 4valuacin 4=terna del Cese"eMo en Inunoserolog&aD coo
reAuisitos conte"lados en el 6istea de )estin de la $alidad del %:OF!(4B!6.
2.- FINALIDAD
4standari+ar los "rocesos 3 "rocediientos de inunoserolog&a 3 control de calidad Aue se
desarrollan en los $entros de (eotera"ia 3 Bancos de 6angre del nivel nacional.
3.- OBJETIVOS
1. Ci'undir los "rocediientos t/cnicos estandari+ados "ara las "ruebas de Inunoserolog&a
en los $entros de (eotera"ia 3 Bancos de 6angre en el tai+aje de las unidades de
sangreI 3 uni'ori+ar criterios "ara la inter"retacin 3 validacin de resultados.
2. 4stablecer los "rocediientos 3 criterios "ara el control de calidad interno en las "ruebas
de inunoserolog&a.
3. 6ervir coo docuento de consulta en los "rocesos 3 "rocediientos de inunoserolog&a
3 control de calidad.
4. Fortalecer la seguridad sangu&nea en los $entros de (eotera"ia 3 Bancos de 6angre a
nivel nacional.
3
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
4.- BASE LEGAL
Le3 FG 2#242D Le3 )eneral de 6alud.
Le3 FG 21#51D Le3 del 8inisterio de 6alud.
Le3 FG 2#454D Le3 Aue declar de orden "?blico e inter/s nacional la obtencinD
donacinD conservacinD trans'usin 3 suinistro de sangre 5uana.
Cecreto 6u"reo FG 913B2992B6!D :eglaento de la Le3 del 8inisterio de
6alud.
Cecreto 6u"reo FG 93B75B6!D :eglaento de la Le3 FG 2#454.
:esolucin 8inisterial FG 223B77B6!BC8D establecen noras de "rocediientos
"ara controlD edidas de seguridad 3 sanciones en relacin con la obtencinD
donacinD conservacinD trans'usin 3 suinistro de sangre 5uana.
:esolucin 8inisterial FG 153B2994B8IF6!D a"rueban HFora */cnica de
%revencin 3 $ontrol de In'ecciones Intra5os"italariasJ.
:esolucin 8inisterial FG 22#B299508IF6!D a"rueban HForas "ara la
elaboracin de docuentos norativos del 8inisterio de 6aludJ
:esolucin 8inisterial FG #14B299408IF6! Aue a"rueba las Foras */cnicas del
6istea de )estin de la calidad del %:OF!(4B!6
5.- AMBITO DE APLICACION
4l "resente anual es de a"licacin en todos los estableciientos de salud del 6ector
6alud.
.
6.- CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD
4l "ersonal del laboratorio de inunoserolog&a debe reali+ar el tai+aje cu"liendo
con las noras descritas en el 8anual Bioseguridad "ara Bancos de 6angre del
%:OF!(4B!6.
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Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
CAPITULO I
PROCEDIMIENTOS DE LAS PRUEBAS EN INMUNOSEROLOGA DE LAS
INFECCIONES HEMOTRANSMISIBLES
. ASPECTOS GENERALES DE LOS PRINCIPALES AGENTES HEMOTRANSMI-
SIBLES A TAMI!AR
. V"#$% &' () I*+$*,&'-"."'*.") H$+)*) /VIH0
Los virus de la inunode'iciencia 5uana -,I(B1 3 ,I(B2. son retrovirus !:F con envolturaD
se transiten "or v&a se=ualD sangu&nea 3 "erinatalD "riariaente in'ectan a los lin'ocitos.
La situacin del ,I( 0 6IC! en el %er? de acuerdo a datos consignados en el Bolet&n
4"ideiolgico 8ensual de la O'icina )eneral de 4"ideiolog&a de 4nero del 299#D durante el
"eriodo 1723 L 2995D se re"ortoK 12D957 casos de 6IC!D 24D447 casos de ,I( noti'icados al 31
de 4nero del 299#
4l tai+aje "ara ,I( tiene "or objetivo la deteccin de anticuer"os 30o ant&genos de este virus
en el donante. ! "esar Aue las "ruebas de tai+aje son u3 sensiblesD la ausencia de
anticuer"os contra el virus no descarta totalente la in'eccin 3a Aue durante la "riera
in'eccinD e=iste re"licacin viral sin Aue 5a3a una e="resin serolgica de los anticuer"os
contra el ,I(. 4sta eta"a denoinada H"er&odo ventanaJ "uede "rolongarse "or varias
seanas.
Las "ruebas de tai+aje con resultados reactivos indican la "robabilidad de Aue la sangre est/
in'ectada. *oda uestra reactiva debe re"etirse "or lo enos una ve+ con la isa "rueba de
tai+aje.
!unAue las "ruebas utili+adas "ara detectar los anticuer"os antiB,I( son suaente sensiblesD
es"ec&'icas 3 re"roduciblesD se debe reAuerir Aue las "ruebas de tai+aje tengan una
sensibilidad 199N 3 "or lo enosD un 71N de es"eci'icidad.
La "rueba de tai+aje as utili+ada en los $entros de (eotera"ia 3 Bancos de 6angre "ara
la deteccin de anticuer"os 30o ant&geno antiB,I( es la t/cnica 4LI6!. Las "rieras "ruebas
desarrolladas utili+aron lisados virales -ant&genos utili+ados en estas "ruebas se "re"araron a
"artir de viriones del ,I(.. 4stas t/cnicas son conocidas coo 4LI6! de "riera generacin
las cuales tienen alta sensibilidad "ero "oca es"eci'icidad.
%osteriorente se desarrollaron las 4LI6! de segunda generacin las cuales utili+aron
ant&genos recobinantes "re"arados "or ingenier&a gen/ticaD luego las 4LI6! de tercera
generacin cu3os ant&genos son "/"tidos sint/ticos obtenidos "or s&ntesis Au&ica 3 'inalente
las 4LI6! de cuarta generacin Aue ade;s de detectar anticuer"os detecta el ant&geno "24
del ,I(B1 ediante la introduccin de anticuer"os onoclonales en el so"orte slido.
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Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
.2 V"#$% L"*-,1#23"., &' ()% C4($()% T H$+)*, /HTLV I5II0
4l virus de ti"o I lin'otr"ico "ara la c/lula * -(*L,BI. esta relacionada con el desarrollo de
leuceias0lin'oas 3 de ielo"at&a crnica "rogresiva o "ara"aresia tro"ical es";stica. Los
casos de in'eccin con (*L,BI en !/rica LatinaD no sie"re se observan aco"aMados "or
s&ntoas cl&nicos. Las 'oras de transisin son los isos Aue "ara el ,I(D o sea se=ualD
sangu&nea 3 "erinatal.
4n el %er? la in'eccin "or (*L,B1 a'ecta "articularente a ciertas etnias 3 a gru"os Aue
constitu3en "oblaciones de riesgo "ara en'eredades de transisin se=ual. 4n un estudio
"eruano de ujeres asinto;ticas se noti'icaron tasas de 1.3N en la "oblacin Auec5ua de
!3acuc5o 3 de 3.2N tanto en la +ona norte de Lia coo $5inc5a en los Aue "redoinan los
"obladores esti+os 3 con ascendientes de ra+a negra res"ectivaente. 4n "oblacin !3ara
1.2N 3 en "ersonas nativas de la selva 9.7ND 1#N de la "riera generacin de inigrantes
ja"oneses en el %er? es sero"ositiva a (*L,B1D a nivel de gestantes asinto;ticas de
Ouillababa se re"orta 2.3N de (*L,B1.
4n trabajadoras se=uales "eruanasD en 5obre con actividad 5oose=ual 3 en 5obres
drogadictos no endovenoso 'luct?a entre 2 3 25ND en 5obres "eruanos ,I( "ositivos una
"revalencia de (*L,B1 de 12.#N.
La transisin adreBniMo ocurre "rinci"alente a trav/s de la lactancia aterna 3 de los
di'erentes trabajos reali+ados 'luct?a entre 5.1 3 31.5N.
4l riesgo de transisin de (*L,B1 a trav/s de sangre co"leta containada se 5a estiado
entre 59 3 #9ND el riesgo disinu3e cuando la sangre se antiene alacenada ;s de una
seana.
4l tai+aje debe ser reali+ado a trav/s de t/cnicas de 4LI6!. Los ensa3os Aue e"lean
lisados virales o "rote&nas recobinantes "resentan un 6*&".' )(1, &' "*'%3'."-"."&)& 7
#').."2* .#$8)&) con el (*L,BII.

Los reactivos Aue e"lean "/"tidos sint/ticos es"ec&'icos "eriten di'erenciar las in'ecciones
"or (*L,B1 de las de (*L,B2 coo es el caso de las "ruebas con'iratorias "ara este
diagnostico.
.3 H'3)1"1"% V"#)('%
6e 5an descrito cinco virus denoinados con las "rieras letras del al'abeto !D BD $D CD 4D los
cuales son ca"aces de "roducir una in'eccin selectiva en c/lulas 5e";ticas 5uanas.
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Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
,irus Failia
)
e
n
o

a
*
a

a
M
o
%er&odo de
incubacin
,&a de
*ransisin
$
r
o
n
i
c
i
d
a
d
8arcador de
tai+aje en $entro
de (eotera"ia 3
Banco de 6angre
,(! %icornavirus :F! 21 4 se FecalBoral Fo Fo
,(B
(e"adnaviru
s
CF! 42 1B# se
%arenteralD
se=ualD
vertical
6i (Bs!g. !ntiB(B$
,($ Flavivirus :F! P#9 1B5 se
%arenteralD
se=ualD vertical
6i !ntiB,($
,(C
6at/lite
anial
:F! 22 2B# se %arenteral 6i Fo
,(4 $alicivirus :F! 32B34 # se FecalBoral no Fo
Las in'ecciones deterinadas "or los virus de la 5e"atitis B -,(B.D $ -,($. "ueden ser
ina"arentes o sinto;ticas 3 a su ve+D estas "ueden evolucionar en 'ora aguda o crnica.
8u3 raraente las 'oras agudas evolucionan de odo 'ulinante con alta letalidad. 4n el
,(B la evolucin 5acia la cronicidad se correlaciona con el estado del "ortador de ant&geno de
su"er'icie del agente. ! su ve+ el estado del "ortador de"ende de la edad de la in'eccin
variando desde el 79N en los niMos de adres "ortadoras de antigeno e -(Be!g.D 5asta el 5B
19 N en adultos. 6e estia Aue el 59N de las in'ecciones "or el ,($ evolucione 5acia la
cronicidad.
Las 5e"ato"at&as crnicas asociadas con el ,(B 3 el ,($ consisten en 5e"atitis crnica
"ersistente o activaI estas "ueden "rogresar 5asta tornarse en una cirrosis o un carcinoa
5e"atocelular. *abi/n se 5a descrito la asociacin del ,($ con las 5e"atitis auto inune.
.3. V"#$% &' () H'3)1"1"% B /VHB0
Los estudios serolgicos reali+ados en donantes de sangreD "eriten estiar la e=istencia de
casi 19 illones de "ortadores de ,(B en !/rica latina e=iste una alta endeicidad en la
regin !a+nica OccidentalD as& coo ;reas de ,ene+uelaD $olobiaD %er? 3 :e"ublica
Coinicana. 4l %er? un "a&s con una "oblacin de 21Q217D2#4. de 5abitantesD se tiene un
"roedio de "revalencia entre 1 a 2N "ara ant&geno de su"er'icie -(Bs!g. 3 de 29B39N "ara
anticuer"os contra (Bcore del virus de la (e"atitis B -,(B.. La "revalencia de la 5e"atitis B
var&a de acuerdo a las di'erentes regiones geogr;'icasD localidadesD 5;bitat 3 los gru"os de
"oblacin distribuidas en las diversas ;reas geogr;'icasD "resenta +onas 5i"erend/icas en la
regin de la selva alta Aue inclu3e a 19 de"artaentos Aue cuentan con selva alta 3 ;reas
rurales de la selva baja. !de;s en algunos valles de la vertiente oriental de la cordillera de los
!ndes coo !banca3 3 (uanta.
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HB%A9K !nt&geno de su"er'icie del virus B. !"arece en el suero al 'inal del "eriodo de
incubacin de la 5e"atitis BD en la 'ase aguda 3 en el estadio crnico. Curante la in'eccin
agudaD si esta evoluciona 'avorableente desa"arece entre el 2G 3 4G es. 6i se detecta as
all; de los # eses indica "aso a la cronicidad. 4s un arcador u3 ?til "ara detectar
"ortadores crnicos.
A*1"-HB.K !nticuer"os totales 'rente al core. 4s el "rier anticuer"o Aue a"arece 3 el Aue ;s
tie"o "eranece durante aMos. 6e detecta en todas las 'asesK In'eccin agudaD
convalecenciaD crnica 3 de reisin.
.3.2 V"#$% &' H'3)1"1"% C /VHC0
4l virus se contagia 'undaentalente a trav/s de la sangreD "ocas veces "or relaciones
se=uales 3 e=ce"cionalente de adre a 5ijo. 8uc5os casos de 5e"atitis $ se diagnostican en
"acientes sin s&ntoas Aue no recuerdan 5aber "asado una 5e"atitis aguda. ! veces el
diagnstico se 5ace cuando los "acientes van a donar sangre o si se reali+an an;lisis de rutina.
4n !/rica Latina la "revalencia del ,($ en donantes de sangre varia de 9.1N al 2ND
de"endiendo de las regiones estudiadasD en el %er? en el aMo 2991 se tuvo un "roedio de
9.#9ND 9.27N en la 6elvaD 9.#9N en la $osta 3 9.4#N en la 6ierra en donantes de sangre.

Las "ruebas serolgicas en bancos de sangre est;n basadas en la deteccin de anticuer"o
contra el ,($ "or t/cnicas 4LI6!D es"ec&'icaente contra ant&genos estructurales 3 no
estructurales del virus. 4n la actualidadD los 4LI6! utili+an una e+cla de ant&genos derivados
de la regin core 3 de las regiones F63D F64 3D 'recuenteenteD F65 del genoa del ,($.
(istricaente los "rieros /todosD llaados Hde "riera generacinJD conten&an
e=clusivaente e"&to"es de la "rote&na F64. %osteriorente se ejoraron con la incor"oracin
de e"&to"es de las "rote&nas core 3 F63D denoin;ndose "or ello Hde segunda generacin.
4ste cabio su"uso un auento considerable de la sensibilidadD aunAue no introdujo una
ejora objetiva de la es"eci'icidad. Las odi'icaciones "osteriores Aue dieron origen a los
llaados /todos de Htercera generacinJD consistieron en la incor"oracin de e"&to"es de la
"rote&na F65 3 en el uso de e+clas de ant&genos recobinantes junto con "/"tidos sint/ticos
"ara ejorar la es"eci'icidad. La sensibilidad co"arativa de los distintos /todos suelen venir
de'inida "or su ca"acidad "ara detectar anticuer"os 'rente a la "rote&na F63 -anti F63.D
es"ecialente cuando se trata de detectar estadios "recoces de la seroconversin.
.4 T#73)*,%,+) C#$8" /E*-'#+'&)& &' C:)9)%0
4l "ar;sito Tripanosoma cruzi es el agente causal de la en'eredad de $5agas
*ri"anosoiosis !ericana 3 es transitida al ser 5uano "or insectos
5eat'agosD conocidos coo triatoinos. La en'eredad a'ecta diversos rganosD
sisteas 3 a"aratosD es"ecialente el cora+n 3 tubo digestivo.
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Curante los 3 "rieros eses 3 es"or;dicaente en el transcurso de la in'eccin el "ar;sito se
encuentra circulando en el torrente sangu&neo "or lo Aue tabi/n se "uede
contraer la in'eccin al recibir sangre in'ectada con Trypanosoma cruzi.
6e estia Aue en el %er? e=isten 24D119 in'ectados "or Tripanosoma cruzi; de los cuales
1D297 corres"onden a 'oras agudas u oligosinto;ticas 3 22D7#2 a 'oras crnicas de la
en'eredad. La in'eccin "or se=o es eAuitativa 3 el gru"o de edad ;s a'ectado est; entre los
29 a 59 aMos. -8IF6!0O)4B1772.. La sero"revalencia de la in'eccin en ;reas de riesgo oscila
entre 1D3N 3 12ND en donantes de sangre a nivel nacional entre 9.14N 3 9.5N. 4n el 2995 el
"orcentaje de unidades Aue resultaron reactivas en el tai+aje "ara $5agas alcan+ el 9.51N.
-%:OF!(4B!6..
4l ensa3o Inunoen+i;tico 4LI6!D es la t/cnica de eleccin "ara reali+ar el tai+aje de la
in'eccinD "or "resentar la a3or sensibilidad 3 tener la ca"acidad de detectar anticuer"o anti B
Trypanosoma cruzi des"u/s de los 29 d&as de ocurrida la in'eccin . !s& iso "uede evaluar
a3or n?ero de sueros "or corrida.
La sensibilidad 3 es"eci'icidad de la t/cnica est; en 'uncin de la calidad del ant&genoD los
e=tractos antig/nicos totales del "ar;sito uestran una alta sensibilidadI 3 los recobinantes 3
"/"tidos sint/ticosD buena es"eci'icidad.
.5 T#'3,*'+) P)(("&$+ /S6-"("%0
La 6&'ilisD llaada tabi/n c5ancro duroD en'eredad de LuesD es una in'eccin "roducida "or
Treponema pallidum sub es"ecie pallidumD bacteria en 'ora es"iriladaD a"liaente
distribuida en el undo. 4n los 4stados <nidosD en el aMo 2992D se registraron 32D999 casos de
s&'ilisD de los cuales #D2#2 eran casos de s&'ilis "riaria 3 secundariaD asiisoD se re"ortaron
412 casos de s&'ilis cong/nita - 'uente .D 4l %:OF!(4B!6D "ara el aMo 2995 re"orto
reactividad en 1.39 N
4l 5obre es el ?nico 5u/s"ed "ara esta bacteria la cual "roduce lesiones ulcerativas indoloras
de evolucin crnicaD la in'eccin suele "resentarse en 3 'ases de'inidasK "riariaD secundaria 3
terciariaD sin ebargo "uede a"arecer un "eriodo de latencia -s&'ilis latente. "udiendo /sta ser
te"rana o tard&a de"endiendo del tie"o en Aue a"arecen las lesiones.
La "rinci"al v&a de transisin de esta en'eredad es la se=ualD "uede 5aber otras 'oras de
transisinK adre B niMoD trans'usin sangu&neaD ani"ulacin de lesiones si'il&ticas 3 todo ti"o
de uestras biolgicas de "acientes si'il&ticos.
4l tai+aje "ara s&'ilis se reali+a ediante "ruebas serolgicasD utili+;ndose ant&genos no
tre"on/icos -:%:D <6:..
Las "ruebas de 4LI6! son "ruebas tre"on/icas utili+adas en $entros de (eotera"ia 3
Bancos de sangre donde e=iste gran deanda de uestras "or d&aD "or lo Aue estas "ruebas
son "rocesadas "or eAui"os autoati+ados
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2. M<TODOS SEROL=GICOS PARA TAMI!AJE
2. T4.*".) ELISA
4s una de las "ruebas serolgicas ;s utili+adas en el tai+aje de las unidades de sangre en
los $entros de (eotera"ia 3 Bancos de 6angre.
4LI6! -4n+3e LinRed Inuno 6orbent !ssa3. es una t/cnica sensible Aue nos "erite
detectar ant&genos o anticuer"os en 'luidos biolgicos. 4ste inunoensa3o involucra la 'ijacin
de ant&geno o anticuer"os sobre una 'ase slida.
4n abos casos se 'orar; el co"lejo ant&genoLanticuer"oD el cual ser; unido "or una antiB
inunoglobulina arcada inunoen+iaticaente.
Las en+ias son 'os'atasa alcalina o "ero=idasaD estas en+ias son ca"aces de odi'icar un
sustrato en "resencia de un crogeno -co"onente "roductor de color. "roduciendo un
"roducto coloreado Aue "uede ser edido utili+ando un es"ectro'otetro -lector de 4LI6!.D
es directaente o inversaente "ro"orcional a la concentracin del ant&geno o anticuer"o
"resente en la uestraD de"endiendo del ti"o de 4LI6!..
<na reaccin t&"ica en+iaBsustrato "uede ser la siguienteK
(2O2 S O%C0*8B %ero=idasa de r;bano (2O S OB
-sustrato. -crogeno. -en+ia. -agua. -radical.
OB S O%C0*8B %roducto coloreado
-radical. -crogeno o=idante.
4l e=ceso de reactantes en cada "aso es eliinado con los sucesivos lavados.
4l "roducto coloreado detectado "or el es"ectro'otetro debe ser edido en una es"ec&'ica
longitud de onda lu&nica en la Aue el color absorbe la lu+ incidente. 4sto resulta en una seMal
Aue con el instruento se convierte usualente en unidades de densidad "tica -CO..
10
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
4=isten una variedad de "ruebas 4LI6!D las ;s utili+adas sonK
ELISA D"#'.1,
4sta "rueba es generalente de ti"o s;nd@ic5D con revelado en+i;ticoD utili+ando un
anticuer"o onoclonal ligado a una 'ase slida -"ocilloD es'era "l;stica. el cual ca"ta al
ant&geno "resente en el suero. ! continuacin se agrega un anticuer"o "oliclonal arcado con
una en+ia -"ero=idasaD 'os'atasa alcalina. 3 se "roueve el desarrollo de color tras la adicin
de substrato croog/nico.
ELISA I*&"#'.1,
6e basa en la 'ijacin de un ant&geno en la 'ase slidaD el cual atra"a los anticuer"os de la
uestra Aue "osteriorente son identi'icados con un anticuer"o anti Inunoglobulina 5uana
es"ec&'ico arcado con una en+ia. 4n estos casos la cantidad de !nticuer"o es directaente
"ro"orcional a la cantidad de "roducto en+i;tico 'oradoD "or lo cual se "roduce ;s color a
edida Aue la concentracin de anticuer"os auenta en la uestra dando lecturas de CO
altasD 3 viceversa.
ELISA C,+3'1"1">,
6e basa en la co"etencia Aue se establece entre el anticuer"o de la uestra 3 el conjugado
-Aue es un anticuer"o dirigido contra el ant&geno. "ara ocu"ar sitios reactivos en el ant&geno
'ijado. 4n este 4LI6! de ti"o co"etitivo tanto la uestra Aue contiene el anticuer"o coo el
conjugado se agregan al iso tie"o. 6i la concentracin de anticuer"os en la uestra es
alta u3 "oco conjugado "uede 'ijarse en los ant&genos inovili+adosD "or lo tanto 5abr;
ausencia de coloracin "or la "oca 'ijacin de la en+ia con el sustrato. Inversaente con
uestras Aue contienen "oco o nada de anticuer"osD ;s conjugado se 'ijar; al ant&geno 3 la
"osterior adicin de sustrato "roducir; la "resencia de color.
11
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
4n estos casos la cantidad de anticuer"os en la uestra es inversaente "ro"orcional a la
cantidad de "roducto en+i;tico 'orado -"roducto coloreado..
ELISA &' C)31$#) &' A*-69'*,
La "rueba 4LI6! de ca"tura "uede ser de ti"o indirecto o co"etitivo 3 solo di'iere en la eta"a
inicial de 'ijacin del ant&geno en la 'ase slida. <n anticuer"o onoclonal -anticuer"o u3
es"ec&'ico dirigido slo a un deterinante antig/nico. es 'ijado al so"orte slido "ara Hca"turarJ
a un ant&geno es"ec&'ico. 4sto tiende a disinuir la cantidad de sustancias containantes
ad5eridas al so"orte slido resultando una enor 'ijacin no es"ec&'ica. 4stas "ruebas son
consideradas ;s es"ec&'icas Aue las "ruebas indirectas Aue incor"oran "rote&nas totales del
icroorganiso.
!unAue las "ruebas de 4LI6! utili+adas "ara detectar los anticuer"os son suaente
sensiblesD es"ec&'icas 3 re"roduciblesD ninguna es in'alibleI "or lo tanto se reAuiere Aue las
"ruebas de tai+aje tengan una sensibilidad 199 N 3 no enor de 72N de es"eci'icidad.
C,*%"&'#).",*'% 9'*'#)('% 3#'>")% )( &'%)##,((, &' () T4.*".)
a. *oda uestra de sangre debe ser considerada coo aterial "otencialente in'eccioso 3
seguir las edidas de bioseguridad establecidas en el 8anual de Bioseguridad vigente.
b. Las uestras a "rocesar no deben "resentar 5elisis ni turbide+. Ceben estar rotuladas
con el cdigo 3 'ec5a de obtencin de uestra 3 ser conservadas en re'rigeracin -4E$.D
5asta su "rocesaiento.
12
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
c. <tili+ar Rits con 'ec5a de venciiento vigente. Fo e+clar reactivos "rocedentes de
di'erentes lotes.
d. $onservar los Rits a te"eraturas es"eci'icadas "or el 'abricante.
e. Cejar Aue todos los reactivos alcancen la te"eratura abiental -12B25G$. antes de
e"e+ar el ensa3o.
'. 8e+clar suaveente los reactivos l&Auidos antes de su uso.
g. Ciluir la solucin de lavado concentrada seg?n lo indicado "or el 'abricanteD e"leando
agua destilada. :otular el 'rasco con 'ec5a de "re"aracin 3 el Rit al Aue "ertenece. Cebido
a su alta concentracin en algunos RitsD "ueden 'orar cristales "or lo cual se debe
5oogeni+ar "reviaente a la dilucin. 4l reanente de la solucin diluida debe
conservarse seg?n las indicaciones del 'abricanteD
5. 6eguir estrictaente las instrucciones "ro"orcionadas "or el 'abricante 3 descritas en el
inserto del Rit tanto "ara el "rocesaiento de las uestras coo "ara anali+ar la valide+.
Incluir todos los sueros controles "ositivosD negativosD "ocillo blanco indicados en el inserto.
i. La valide+ del ensa3o debe de 5acerse de acuerdo a las indicaciones del Rit ;s el suero
control de calidad interno.
j. $alcular el valor de corte 3 la +ona indeterinada seg?n indicaciones del Rit. *odo Rit debe
indicar la +ona gris o indeterinada
R. <tilice "rotocolos de trabajo de acuerdo a la t/cnica a utili+ar -ver !ne=o F 3 ).
l. 4"lear eAui"os e instruentos en buenas condiciones de o"eratividad con anteniiento
"reventivo 3 calibrados -incubadoraD "otencietroD lector 4LI6!D lavador de "lacasD
icro"i"etasD teretro abiental..
. 6eguir los instructivos de uso de cada eAui"oD c5eAuear los 'iltros del lector 4LI6! antes de
iniciar los ensa3os 3 llevar el registro de tie"o de uso.
n. %re"arar los "rotocolos de trabajo o a"as de distribucin de uestras Aue ser;n
"rocesadas.
o. :eali+ar 3 registrar el control diario de la te"eratura abiental del laboratorio 3 de los
siguientes eAui"osK :e'rigerador donde se conservan los RitsD incubadora e"leada "ara
los "asos de incubacin 31 E$ 3 congeladora donde se conservan los sueros controles 3
otros reactivos.
". <tili+ar agua destilada o desioni+adaD de alta calidad.
13
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
M)1'#")('% 7 '?$"3,% *'.'%)#",% 3)#) () T4.*".) &' ELISA
Tit 4LI6! "araK ,I( 1B2D (*L, I0IID (Bs!g D !ntiB(BcD (,$D 6&'ilisD en'eredad de $5agas.
8icro"i"etas unicanal de rango 'ijo 30o variable -9.5 L19D 2B29D 29 L 299D 199 L 1999 ul.
8icro"i"etas ulticanal de rango 'ijo 30o variable de acuerdo a lo indicado en el inserto del
Rit
*i"s -"untas. universales de 299 uL
*i"s -"untas. universales de 1999 uL
:eservorios "ara icro"i"eta ulticanal
Lentes "rotectores "ara laboratorio
8ascarillas descartables
Lavador de icro"lacas 4LI6!
Lector de icro "lacas 4LI6! -con 'iltros adecuados a la t/cnica.
)uantes de l;te= descartables no est/riles
6olucin de (i"oclorito de 6odio al 5N -lej&a.
Ce"sito "ara descarte de aterial containado
)uarda"olvo anga larga
$ronetro de laboratorio
!gua destilada o desioni+ada
%a"el toalla -absorbente.
Incubadora 31E $
:e'rigeradora
P#,.'&"+"'*1, &' () T4.*".) &' ELISA
a. Ceterinar el n?ero total de "ocillos teniendo en cuenta todos los controles Aue indica el
inserto del Rit 3 control de calidad interna. :etire las tiras necesarias.
b. Cis"ensar los icrolitros indicados -seg?n el inserto. de sueros controles "ositivos 3
negativosD sueros "roblea 3 sueros control interno en los res"ectivos icro"ocillosD
e+clar suaveente.
c. Incubar a la te"eratura indicada "or el tie"o necesarioD generalente en esta eta"a se
cubren los icro"ocillos con "a"el ad5esivo Aue aco"aMa al RitD "ara evitar su
eva"oracin.
14
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
d. :etirar el aterial ad5esivo 3 "roceder con los ciclos de lavado teniendo en cuenta el
voluen dis"ensado 3 el tie"o de reojo indicados en el instructivo. Ces"u/s del ?ltio
lavado secar la icro"laca sobre un "a"el absorbente d;ndole "eAueMos gol"es "ara
reover cualAuier e=ceso de l&Auido de los "ocillos.
e. $olocar la cantidad necesaria de conjugado en cada "ocilloD la dilucin del conjugado debe
reali+arse durante el ?ltio ciclo de lavado.
'. $ubrir la "laca con el "a"el ad5esivo e incubar a la te"eratura indicada "or el tie"o
necesario.

g. :etirar el aterial ad5esivo 3 "roceder con los ciclos de lavado de acuerdo al "aso 4.
5. Curante el lavado "re"are el voluen reAuerido de la solucin substratoBcrogenoD la
cual debe estar a te"eratura abiente 3 debe ser incoloraD si se observa alguna
coloracin descartar la solucin.
i. $olocar la cantidad necesaria de substrato en cada "ocillo e incubar en oscuridad a
te"eratura abiente "or el tie"o indicado.
j. Cetener la reaccin agregando la cantidad indicada de solucin de "arada en la isa
secuencia Aue se agreg el substrato.
R. Leer la absorbancia de los "ocillos en un lector de 4LI6! teniendo en cuenta los 'iltros
indicados. 4s recoendable una lectura bicro;tica teniendo coo 'iltro de re'erencia #29B
#39 n. l Leer la icro"laca en el tie"o indicado "or el inserto.
l. 4valuar la "rueba teniendo en cuenta los criterios de validacin Aue se indican en el
instructivo del Rit 3 suero control interno. 6i la "rueba es v;lida calcular el valor de corte e
inter"retar los resultados.
. Las uestras con resultados no reactivos se in'oran coo tales.
n. Las unidades de sangre cu3as uestras tienen resultados reactivos deber;n ser
eliinadas.
o. Los donantes cu3os resultados son reactivos deben ser reitidos a la unidad de
e"ideiolog&a.
I*1'#3#'1)."2* &' R'%$(1)&,%
REACTIVO @ 6e detecta la "resencia de ant&geno 30o anticuer"o del agente
etiolgico corres"ondiente.
15
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
NO REACTIVO @ Fo se detecta la "resencia de ant&genos 30o anticuer"os del agente
etiolgico corres"ondiente.
!ONA GRIS @ ,alores co"rendidos inediataente "or debajo del valor de corte
de la "rueba de acuerdo a lo indicado en el inserto.
ObservacinK 4n la t/cnica 4LI6! co"etitiva inversa los resultados FO :4!$*I,O son
a3ores al cutBo''D 3 las lecturas enores Aue el cutBo'' son :4!$*I,O.
2.2 TECNICA RPR
4l :%: es una "rueba serolgica no tre"on/ica de 'loculacin acrosc"icaD Aue se basa en
la deteccin de anticuer"os conocidos coo reaginasD "resentes en suero o "lasa de
"acientes con 6&'ilis 3 a veces en "ersonas con otras en'eredades agudas o crnicasD estos
anticuer"os se cobinan con las "art&culas de naturale+a li"&dica del ant&geno -cardioli"inaD
lecitina 3 colesterol. 3 "or el contenido de carbn 'ora gruos de color oscuroD sobre el 'ondo
blanco de la tarjeta. 6i no 5a3 anticuer"os la e+cla es 5oog/nea.
La uestra a utili+ar "uede ser suero o "lasaD /ste ?ltio no debe tener ;s de 24 5oras de
5aberse obtenido.
FuenteK Organon *eRniRa
16
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
M)1'#")( *'.'%)#",
Tit :%: conteniendoK
6us"ensin de an'&geno ,C:L odi'icado
$ontrol "ositivo
$ontrol negativo
*arjetas "lasti'icadas desec5ables
%i"etas de "l;stico desec5ables.
4s";tulas de "l;stico desec5ables
Botella de "l;stico con dis"ensador
!gujas "ara dis"ensar
:otador auto;tico graduado a 199 S0B 2 r".
8icro"i"eta de un canalD rango 'ijo de 59 ul o variable de 19B199l -o"cional.
*eretro abiental.
*i"s "ara icro"i"etas - *I%6. de 1B199 l
)uantes de l;te= descartables no est/ril
8andil anga larga
6olucin de (i"oclorito de 6odio al 5N -lej&a.
Ce"sito "ara descarte de aterial containado
P#,.'&"+"'*1, &' () T4.*".) RPR
RPR C$)("1)1">,
a. 4n una tarjeta "lasti'icada codi'iAue los c&rculosD de odo Aue el "rier c&rculo
corres"onda al control reactivo -:. el segundo c&rculo al control no reactivo -F:. 3 a
continuacin un c&rculo "ara cada uestra con su cdigo res"ectivo.
b. $on el dis"ensador del Rit coloAue una gota de suero -59L. de cada una de las
uestras 3 de los controlesD sobre el c&rculo corres"ondiente.
c. $on a3uda del a"licadorD e=tender la uestra abarcando todo el c&rculo sin sobre"asar el
borde.
d. !gitar suaveente el 'rasco Aue contiene el ant&geno :%: "ara 5oogeni+arlo 3 luego
trasvasarlo en el 'rasco de "l;stico -dis"ensador..
e. !segurarse Aue la gota de ant&geno -11l. no "resente burbuja al oento de colocarla
sobre la uestra -eliinar la "riera gota..
17
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
'. $oloAue la tarjeta con las uestras sobre el rotador a 199 U 2 r" durante 2 inutos.
g. *erinada la rotacinD coger la tarjeta con abas anos bajo una buena 'uente de lu+ 3
ag&tela con oviientos de vaiv/n de 3 a 4 vecesD observando la "resencian de 'lculos
-gruos.D los cuales "ueden ser grandes o "eAueMos "ero de'inidos.
4F $!6O C4 O<4 64 <64 TI*6 $<VO6 %!6O6 CIFI4:!F C4 LO !F*4:IO:84F*4
C46$:I*OD 64)<I: L!6 IFCI$!$IOF46 C4L IF64:*O.
R'3,#1' &' R'%$(1)&,%
:4!$*I,O @ $uando un suero "resenta gruos grandes a edianos en el
centro o "eri'eria.
:4!$*I,O C4BIL@ $uando un suero "resenta "eAueMos gruos en el centro o "eri'eria.
FO :4!$*I,O @ $uando un suero no "resenta gruos al 'inali+ar la rotacin
I*1'#3#'1)."2* &' R'%$(1)&,%@
a. <n resultado reactivo "uede indicar in'eccin "resente o "asada con *re"oneas
"atgenosI sin ebargo esto "uede ser una reaccin 'alsa "ositiva la cual se con'ira con
"ruebas tre"on/icas.
b. <n resultado no reactivo indica Aue no 5a3 in'eccin "or *re"oneas.
18
Los donantes con resultados reactivos deben de ser derivados a la o'icina de
e"ideiolog&a donde se les indicara una nueva evaluacin de las "ruebas de
tai+aje 3 la con'iracin de estas con "ruebas su"leentarias cooK Western BlotD
Inunoensa3o en l&neaD Inuno'luorescencia indirectaD *%(!. F*! seg?n el agente
etiolgico corres"ondiente.
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
CAPITULO II
CONTROL DE CALIDAD INTERNO EN INMUNOSEROLOGA PARA CENTROS DE
HEMOTERAPIA Y BANCOS DE SANGRE
2. CONTROL DE CALIDAD
6e entiende coo control de calidadD a las actividades 3 t/cnicas o"erativas a"licadas sobre
cada uno de los 'actores Aue in'lu3en en los resultados de las "ruebas de tai+aje.
2. P#,.'&"+"'*1,% 9'*'#)('%
4l control de calidad involucra una serie de as"ectos Aue deben considerarseD tales cooK
a. Obtencin e identi'icacin de la uestra.
b. *rans"orte de la uestra al laboratorio.
c. !lacenaiento de la uestra.

d. 8/todo de an;lisis -"rocediientos 3 reactivos..
e. 8anteniiento 3 calibracin de eAui"os.
'. Cis"oner de anuales de "rocediientos actuali+ados 3 al alcance del
"ersonal.
g. Cis"oner de noras 3 "r;cticas de bioseguridad.
5. Cis"oner de noras 3 "r;cticas de bioseguridad.
i. I"leentacin de un "rograa de control de calidad interno orientado al ejoraiento
continuo de la calidad.
j. %artici"acin en un "rograa de control de calidad e=terno -evaluacin e=terna del
dese"eMo..
R. !signacin de un "ro'esional su"ervisor de control de calidad Aue asegure Aue los
"rocediientos de control en uso se a"liAuen adecuadaenteD "ro"orcione ca"acitacin 3
19
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
asistencia al "ersonalD e=aine los datos de control 3 es"eci'iAue cuando 3 co deben
a"licarse acciones correctivas.
l. %rograa de ca"acitacin 3 educacin continua del "ersonal del laboratorio con res"ecto a
los e'ectos 'undaentales del control de calidad.
. 4valuacin de la co"etencia del "ersonal de los $entros de (eotera"ia 3 Bancos de
6angre.
2.2 F$'*1'% &' V)#")."2*
$on el "ro"sito de "oder a"licar edidas "reventivas en el control de la variacin es
necesario conocer las "osibles 'uentes de variacin de un "roceso anal&tico.
6e "ueden clasi'icar en 'uentes de variacionesK biolgicas 3 anal&ticasD cada una con
nuerosas subdivisionesD
INTRA-INDIVIDUO
VARIACION BIOLOGICA
INTER-INDIVIDUO
VARIACION
TOTAL PRE ANALITICA
VARIACI=N ANALITICA
ANALTICA
V)#")."2* B",(29".)
)0 V)#")."2* I*1'#"*&">"&$,@
6e re'iere a las di'erencias en el valor verdadero de un analito entre individuos .$oo las
"oblaciones son 5eterog/neasD en la "r;ctica se las subdivide "orK edadD se=oD ra+aD etc.
A0 V)#")."2* I*1#)-"*&">"&$,@
Inclu3e todos los 'enenos regulatorios 3 en "articular todos los ritos biolgicosD edadD
estado nutricional etc.D generalente se "roducen variaciones en los resultados de laboratorio
en relacin a estos 'enenos. 4s di'&cil se"arar las 'uentes de variacin "or estar
20
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
estrec5aente relacionadas.
V)#")."2* A*)(61".)
)0 P#' )*)(61".,
6on la suatoria de las 'uentes de variacinD desde la obtencin de la uestra 5asta Aue la
uestra ingresa al sistea anal&ticoD inclu3endo los errores adinistrativos 3 aAuellos
in5erentes a las uestras.
A0 A*)(61".,
6e "roducen debido a las condiciones del abiente del laboratorio 3 del /todo de an;lisis
-eAui"os.
Las 'uentes de variacin anal&tica se deben a errores siste;ticos o deterinados 3 a errores
aleatorios o indeterinados.
E##,#'% S"%1'+B1".,%@
6on errores Aue se 5allan sie"re en una direccin originados "or causas identi'icables 3
corregibles. 6on generados "or dese"eMo ina"ro"iado del analistaD uso de ateriales
inadecuados o de'ectuososD eAui"os al calibradosD etc. %ueden ser detectados "or controles
e=ternosD el "ar;etro Aue los ide es la 'C).1"1$&.
E##,#'% )(')1,#",%@
4rror "ositivo o negativo cu3a agnitud e=acta no "uede "redecirse Aue in'lu3en en cada
edicin en 'ora di'erente. 6u a3or o enor agnitud es la 3#'."%"2* del /todo o
edicinD es una edida de la #'3'1"A"("&)& de los isos.
EC).1"1$&.
)rado de concordancia entre los resultados de una edicin 3 un valor verdadero del
ensurado.
P#'."%"2*
)rado de concordancia entre los resultados de "ruebas inde"endientesD obtenidos en
condiciones deterinadas -esti"uladas.
2.3 EVALUACI=N DE LOS METODOS SEROL=GICOS
21
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
2.3. I*&".)&,#'% &'( >)(,# &' ()% 3#$'A)% &' 1)+"8)D'
4l criterio e"leado "ara conocer el valor diagnstico de una "rueba utili+ada "ara descartar
sangre a trans'undirD es evaluar su ca"acidad "ara distinguir una "oblacin de uestras
"rovenientes de in'ectados de otra "oblacin de no in'ectados.
S'*%"A"("&)&@
Ce'inida coo la "ro"orcin de uestras "ositivas -reactivas. correctaente identi'icadas
-ausencia de 'alsos negativos..
La sensibilidad de una "rueba se "uede calcular utili+ando la siguiente 'rulaK
,erdaderos "ositivos
S'*%"A"("&)& E X 199
,erdaderos "ositivos S Falsos negativos

E%3'."-"."&)&@
Ce'inida coo la "ro"orcin de uestras negativas -no reactivas. correctaente identi'icadas
"or la "rueba e"leada -es decir no "roduce 'alsos "ositivos..
La es"eci'icidad de una "rueba se "uede calcular utili+ando la siguiente 'rulaK
,erdaderos negativos
E%3'."-"."&)& E X 199
,erdaderos negativos S 'alsos "ositivos
Otros "ar;etros i"ortantes "ara evaluar una "rueba son los de V)(,#'% P#'&".1">,%
-"ositivos 3 negativos. Aue tienen en cuentaD ade;s de la sensibilidad 3 es"eci'icidad de una
"ruebaD la "revalencia de la in'eccin en el ;rea donde se usar;.
V)(,# P#'&".1">, P,%"1">, /VPP0@
22
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
4s la "robabilidad Aue tiene un individuo de estar in'ectadoD cuando el resultado de la "rueba
Aue se "ractica 5a resultado reactivo.
V)(,# P#'&".1">, N'9)1">, /VPN0@
4s la "robabilidad Aue tiene un individuo de no tener la in'eccin Aue detecta la "rueba cuando
el resultado de la isa es no reactivo
2.4 ESTUDIO ESTADSTICO DE LOS DATOS SEROL=GICOS
4l control estad&stico es de utilidad en el laboratorio "ara antener un rendiiento ace"table
"or edio de la evaluacinD correccin 3 docuentacin de la variabilidad del "roceso anal&tico.
M'&"&)% &' 3,%"."2* 7 >)#")A"("&)& &' (,% &)1,%.
a. 6i se re"ite una edida con todos los cuidados recoendadosD "or un iso o"erador 3
condicionesD los valores obtenidos no ser;n id/nticos.
b. 4stos valores se distribuir;n alrededor de uno ;s 'recuenteD Aue cuando el n?ero de
edidas es su'icienteente grandeD la re"resentacin gr;'ica de estas 'recuencias versus
sus valoresD se acerca a la cl;sica ca"ana de )auss o de distribucin noral.

c. 4n esta distribucin noral o de )aussD el ;rea co"rendida entre la 8edia -=. U 1
desviacin est;ndar re"resenta cerca del #2N del ;rea total. O sea el #2N de las
ediciones se estian co"rendidas en ese rango.
d. 6i se considera el ;rea co"rendida entre -=. U 2 desviaciones est;ndarD se abarca cerca
del 75N de las ediciones.
e. Las edidas de "osicin 3 variabilidad Aue se de'inen son la edia arit/tica o ediaD la
desviacin est;ndar 3 el coe'iciente de variacin.
M'&") )#"1+41".) , +'&") /C0@ es el valor "roedio del conjunto de las ediciones.
D'%>")."2* '%1B*&)# /%0@ es una edida del alejaiento de los datos del valor "roedio.
C,'-"."'*1' &' >)#")."2* /CV0@ es la desviacin relativa de los datos res"ecto del valor
"roedio.
2.5 MONITOREO DE LOS PROCESOS SEROLOGICOS DE TAMI!AJE
*odos los "rocesos anal&ticos deben controlarse ediante la co"aracin con sueros de
control. 4=isten b;sicaente dos aneras de 5acerloK con los controles diarios "lani'icados "or
23
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
cada laboratorio -control interno. 3 con los "rograas interlaboratorio -control e=terno.
"lani'icados 3 ejecutados anualente "or el Instituto Facional de 6alud.
2.5. C,*1#,( I*1'#*,
4l control interno de la calidad tiene "or objetivo asegurar el cu"liiento de todos los
"rocediientos establecidos "ara el trabajo del laboratorio 3 el onitoreo de la "recisin de los
resultados -construccin de gr;'ica de control. con el "ro"sito de detectar 3 de corregir
eventuales errores.
4l suero de control interno -suero "ositivo d/bil.D 4s un 6uero $ontrol 4st;ndarD obtenido de
uestras o "lasa des'ibrinado de donantes negativos 3 "ositivosD "re"arados "or cada
laboratorio "ara cada "rueba Aue se va a controlarD 3 deben ser alicuotados 3 conservados de
odo Aue asegure su calidad 3 sus isas caracter&sticas iniciales.
*odos los controles deben tratarse e=actaente del iso odo Aue las uestras
desconocidas "ara validar el 'uncionaiento de la "rueba. Los controles se trabajan
siult;neaente 3 bajo las isas condiciones Aue las uestras desconocidas. Luego de
co"letado el "rocediiento de la "ruebaD se e=ainan los resultados utili+ando el iso
criterio "ara la inter"retacin.

$uando los controles conocidos "roducen resultados ace"tablesD el control de calidad indica
AueK
la "rueba es v;lida
*odas las condiciones de la "rueba 5an sido cu"lidas
*odos los resultados de la "rueba son con'iables
2.5.2 G#B-".)% &' C,*1#,(
4l onitoreo diario del "roceso anal&tico de cada "rueba se reali+a a trav/s de la evaluacin de
la "rueba con sueros de controlD constru3endo )r;'icas de $ontrol de L'>'7 J'**"*9% con la
re"eticin diaria de los resultados de estos sueros.
2.5.3 U%, &'( %$'#, C,*1#,( "*1'#*,
a. 8antener las al&cuotas del suero control interno en viales 3 conservarlos a enos 29 G$
b. :eali+ar de 29 a 39 deterinaciones del suero control interno en di'erentes d&as "ara cada
arcador serolgico
c. $alcular la relacin densidad "tica 0 cut o'' o valor de corte -CO0$O. de las
24
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
deterinaciones reali+adas "or arcador.
d. $alcular la edia 3 la desviacin est;ndar - U2s 3 U3s. de los datos obtenidos en el "aso c
e. $onstruir el gr;'ico con los datos obtenidos "ara cada arcador.
'. Incluir en cada corrida el suero control interno.
g. $alcular la relacin CO0$O de las corridas sucesivas 3 ubicar los "untos en la gr;'ica
elaborada "ara cada arcador.
G#B-".) &' C,*1#,( &' L'>'7 J'**"*9%

25
X
+ 2s
- 2s
+ 3s
- 3s
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
cORRIDAS

,alores CO0$O
$O::IC!
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ED'+3(,@
2.5.4 I*1'#3#'1)."2* &' () G#B-".) &' C,*1#,( &' L'>'7 J'**"*9%
La a"licacin diaria de la gr;'ica "erite al laboratorio observar cuando se "roducen
irregularidades Aue se re'lejan en los valores del iso suero de control interno re"etido "ara
cada "ruebaK
4l valor obtenido est; 'uera del l&ite de U 2s
,arios valores consecutivos uestran una tendencia al al+a o sea valores cercanos
al l&ite su"erior
,arios valores consecutivos uestran tendencia a la bajaD o sea valores cercanos
al l&ite in'erior.
$uando los resultados de los sueros control interno caen 'uera de los l&ites establecidosD
deber; contarse con un esAuea de decisiones a toarD seg?n sea el casoK
2.5.5 R'9()% MF(1"3('% &' S:'G)#1
:egla 1K 2s @ <na observacin control e=cede el l&ite control X U 2s. 4sta es una regla
de advertencia 3 es inter"retada coo un reAueriiento "ara una
ins"eccin adicional de la data control.
26
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:egla 1K 3sK <na observacin e=cede el l&ite control en X U 3sD La corrida debe ser
rec5a+ada.
:egla 2K 2sK 2 observaciones de controles consecutivos e=ceden la edia U 2s. La
corrida debe ser rec5a+ada
:egla 4K 1sK $uando cuatro observaciones consecutivas e=ceden la edia U 1s. La
corrida debe ser rec5a+ada
:egla 19K X@ $uando die+ observaciones consecutivas est;n en un iso lado de la
edia. La corrida debe ser rec5a+ada
$uando la corrida est; 'uera de controlD deterinar el ti"o de error Aue se "rodujo bas;ndose
en la regla de control Aue 'ue trasgredida. Investigar las "osibles 'uentes de este ti"o de errorD
corregir el "roblea luego volver a anali+ar toda la corrida inclu3endo calibradoresD controles 3
uestras.
TABLA DE DECISIONES.
2.6 CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA ELISA
La "rueba 4LI6! es un "rocediiento Aue involucra uc5os "asos "or lo cual se deben
controlar adecuadaente "ara obtener el ;=io rendiiento en "recisin 3 e=actitud.
%ara el adecuado control de la t/cnica se debe observar lo siguienteK
Leer el inserto Aue aco"aMa al Rit antes de e"e+ar la "rueba "ara veri'icar si se
cuenta con todo lo necesario "ara reali+arla
27
D)1,
C,*1#,
(
BAJO CONTROL ACEPTAR LA CORRIDA
FUERA DE CONTROL RECHA!AR LA CORRIDA
2
26
4
16
19
X
1
36
1
26
6I 6I 6I 6I 6I
6I FO
FO
FO FO FO FO
: 46
SISTEMA DE REGLAS MULTIPLES
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
:eali+ar la "rueba coo lo indica el inserto colocando todos los controles Aue
solicitaD res"etando la te"eraturaD tie"o de incubacinD n?ero 3 voluen de
lavados.
Cis"ensar los controles 3 uestras evitando la 'oracin de burbujas Aue "ueden
alterar el voluen de las isas.
<tili+ar "untas nuevas en cada "rueba.
4vitar el uso de aterial reciclado Aue "odr&an contener residuos de detergentes 3
"roducir resultados errneos.
$olocar el suero control interno en cada "rueba "ara obtener la gr;'ica de control
Leve3 >ennings.
Fo utili+ar reactivos 'uera de la 'ec5a de venciiento.
:eali+ar la validacin de la "rueba antes de ace"tar los resultados.
6i los criterios de validacin no se cu"lenD se invalida toda la corrida 3 se debe
reali+ar una nueva "rueba.
2.H CONTROL DE CALIDAD DEL RPR
)0 A*169'*, RPR
6i la a"olla se trans"orta congeladaD descongelar una sola ve+.
La te"eratura del abiente de trabajo 3 de todo el aterialD inclu3endo el ant&genoD debe
ser de 23 a 27 E$.
La sus"ensin de ant&geno no debe usarse des"u/s de la 'ec5a de e="iracin.
!ntes de anali+ar la uestra la sus"ensin de ant&geno debe controlarse con sueros
controles de reactividad conocida.
A0 A(+).'*)+"'*1, &'( A*169'*,
6e recoienda guardar el ant&geno en re'rigeracin -2 a 2 E$..
La a"olla conteniendo el ant&genoD sin abrir 3 re'rigeradaD se antiene bien durante 12
eses des"u/s de la 'ec5a de anu'actura. Fo debe congelarse.
La sus"ensin de ant&geno guardadoD en 'rasco de "l;stico se antiene bien 5asta 3
eses si se guarda re'rigerada entre 2 a 2 E$.
.0 T)#D'1) &' &")9*2%1".,
Fo tocar con los dedos el ;rea dentro de los c&rculos a 'in de no engrasarla.
$ada c&rculo debe usarse una sola ve+.
Cescartar la tarjeta des"u/s de 5aberse usado al igual Aue las Aue se observen sucias o
arrugadas.
28
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
&0 F#)%., &' 3(B%1"., 3)#) #'3)#1"# '( )*169'*,
6e debe usar con la sus"ensin de ant&geno Aue trae la caja -estuc5e o Rit..
Cescartar al terinarse el ant&geno.
!notar en el 'rasco el n?ero de loteD 'ec5a de e="iracin del ant&geno 3 'ec5a en Aue se
vaci el ant&geno de la a"olla al 'rasco de "l;stico. 6e recoienda anotar estos datos en
una etiAueta ad5erido al 'resco.
'0 A9$D) 3)#) #'3)#1"# '( )*169'*,
La aguja debe estar calibrada de acuerdo a las indicaciones del 'abricante.
-0 R,1)&,#
Ceterinar la velocidad de 199 r". 6i la velocidad est; "or debajo de 75 r" o sobre 119
r"D la reaccin tiende a disinuir la intensidad en suero no diluido.
$ontrolar la velocidad del rotor.
90 I#') &' 1#)A)D,
La te"eratura del ;rea de trabajo 3 de los reactivos del RitD deben estar entre 23 a 27E$.
Cebe ser bien iluinada 3 li"ia
:0 L'.1$#) &' () 3#$'A) RPR
:eali+ar la lectura inediataente des"u/s de la agitacin en el rotador bajo una 'uente
luinosa "otente.
Fo se debe leer la "rueba :%: con lu+ 'luorescente "orAue las reacciones &nias o
oderadas "ueden oitirse.
!ntes de leerD rotar nuevaente la tarjeta 5aciendo oviientos 5acia atr;s 3 adelante 3 a
4 veces.
"0 C)$%)('% &' '##,# '* () 3#$'A) RPR

F)(%) N'9)1">)@ 8al 'uncionaiento del rotadorD e=ceso de sueroD ant&geno en cantidad
e=cesivo o insu'icienteD reactivos 'r&os -sueroD ant&geno.D te"eratura abiente "or debajo
29
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
de 23 E$D ant&geno vencidoD e=ceso de agitacin del ant&genoD ant&geno "oco sensibleD
error de lectura es"ecialente en reactivo &nio.
F)(%) P,%"1">)@ 4l suero se 5a dejado secar antes de agregar el ant&genoD rotacin
"rolongada -as de 2 inutos.D te"eratura abiente sobre 27 E$D error de lecturaD
ant&geno rugoso
3. MANTENIMIENTO Y CALIBRACION DE EJUIPOS
6e debe incluir un "rograa de anteniiento de eAui"os "reventivo "ara asegurar un
dese"eMo "tio del eAui"o. 4l anteniiento "reventivo es la ejor edida "ara asegurar
Aue el eAui"o 'uncionar; adecuadaente. *odos los re"ortes Aue se generen de estas
calibraciones 3 anteniiento deben ser arc5ivados a"ro"iadaente.
3.. A*)("8)&,# &' ELISA /L'.1,# &' M".#,3().)%0
CiariaenteK
$5eAuear Aue los 'iltros 'uncionen correctaente o cada ve+ Aue se utilice el
eAui"o.
,eri'icar Aue la calibracin del anali+ador es adecuada. $uando se inician las
o"eraciones diariasD "eritir Aue el anali+ador se caliente durante 39 inutos. !
continuacin reali+ar una lectura en blanco 3 luego leer una "laca llena de sustrato.
Las lecturas deben ser id/nticas. 6i no lo son invertir la "laca 3 re"etir la lecturaD a
'in de deterinar si la desviacin se origina en la "laca o en el lector.
4=ainar el avance auto;tico de la "laca. 4l iso debe ser suave 3 constante.
6eanalenteK
:eali+ar una li"ie+a e=terna del eAui"o con alco5ol de 19N 30o una solucin
adecuada no abrasiva.
:eali+ar el anteniiento "reventivo del eAui"o triestral o seestralente de
acuerdo al uso. 6iguiendo las recoendaciones dadas "or la O%6.
$ada seis eses reali+ar una li"ie+a de los 'iltros 3 una calibracin "or un
"ersonal debidaente entrenado.
3.2. L)>)&,# &' +".#,3().)% ELISA
CiariaenteK
,eri'icar el voluen dis"ensado.
$o"robar la uni'oridad del llenado.
,eri'icar la e'iciencia del subsistea de as"iracin.
$on'irar la li"ie+a de las agujas de suinistro 3 e=traccin.
Li"iar el lavador con agua destilada des"u/s de 5aberlo utili+adoD "ara reover
cualAuier vestigio de sal en los conductos de los subsisteas de suinistro 3
e=traccin. Las agujas "ueden antenerse suergidas en agua destilada.
30
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
,eri'icar la li"ie+a del cuer"o del lavador. 6i es el casoD li"iar las su"er'icies
e=teriores con una "ie+a de tela 5uedecidaD con un detergente suave.
Cescartar la solucin de desec5o antes Aue se sature el 'rasco.
:eali+ar el anteniiento "reventivo del eAui"o triestral o seestralente de
acuerdo al uso. 6iguiendo las recoendaciones dadas "or la O%6.
$ada seis eses reali+ar una li"ie+a de los 'iltros 3 una calibracin "or un
"ersonal debidaente entrenado.
3.3 E?$"3,% A$1,+)1"8)&,%
)eneralente estos eAui"os cuentan con un "rograa de calibracin interno "or lo
cual antes de iniciar un ensa3o veri'icar Aue el re"orte Aue eite el eAui"o est/n
dentro de los "ar;etros de calidad establecidos "ara el eAui"o en cuanto al
sistea "ticoD ec;nico 3 de te"eratura.
6olicitar Aue la e"resa "roveedora del eAui"o realice triestralente el
anteniiento "reventivo del eAui"o "ara asegurar su e'iciencia.
3.4 I*.$A)&,#)
:egistrar La te"eratura diariaente al iniciar 3 al terinar la jornada de trabajo
.$olocar los registros en un lugar visible.
Cesconectar la incubadora antes de iniciar los "rocesos de li"ie+a. $ada 15 d&as
reali+ar una li"ie+a e=terna e interna del eAui"o con alco5ol al 19N o con solucin
no abrasiva. 4s"erar a Aue la incubadora este seca libre de 5uedad antes de
"roceder a su reconeccin.
:eali+ar el anteniiento "reventivo del eAui"o triestral o seestralente de
acuerdo al uso. 6iguiendo las recoendaciones dadas "or la O%6.
<na ve+ al aMo 5acer la calibracin del eAui"o "or un "ersonal debidaente
entrenado.
3.5 R,1)&,# S'#,(29".,
6eanalente reali+ar una li"ie+a e=terna del eAui"o con alco5ol al 19N o con
solucin no abrasiva.
<na ve+ al aMo 5acer la calibracin del eAui"o "or un "ersonal debidaente entrenado.
31
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
3.6 M".#,3"3'1)%
Las icro"i"etas son instruentos b;sicos en todo laboratorioD la 'ora en Aue se
ani"ulan estos instruentos tienen un e'ecto directo en la "recisin de los resultados del
laboratorio "or lo cual es necesario tener en cuenta algunas consideracionesK
6eleccione una icro"i"eta con el rango adecuado al voluen Aue necesita.
Funca e=ceda el rango de la icro"i"eta "orAue se "uede daMar 3 descalibrar.
:ecoendaciones generalesK
,eri'iAue Aue la icro"i"eta se encuentra en "osicin verticalD cuando se reAuiera
as"irar un l&Auido. La "osicin vertical garanti+a Aue no se "resente incertidubre
"or variaciones &nias en la cabe+a del l&Auido.
!l utili+ar la icro"i"eta "resione el /bolo 5asta el "rier to"eD coloAue la "unta
a"enas "or debajo de la su"er'icie de la uestraD veri'icar la "ro'undidad de
acuerdo al anual del 'abricanteD luego as"ire lentaente 3 as& obtendr; el
voluen adecuado.
$olocar la "unta de la icro"i"eta en la "ared del reci"iente donde se dis"ensar;
el l&Auido. ,eri'icar Aue el ;ngulo 'orado entre la "unta de la icro"i"eta 3 la
"ared de eleento rece"tor est/ entre los 39G 3 45G.
Cis"ensar el contenido de la icro"i"eta "resionando el /bolo 5asta el "rier
to"e anteniendo en todo oento el contacto entre la "unta de la icro"i"eta 3
la "ared del reci"iente rece"tor.
%resionar el /bolo suaveente 5asta el segundo to"e "ara e="ulsar cualAuier
'raccin de l&Auido Aue 5ubiera "odido Auedar en la "unta de la icro"i"eta. :etirar
la icro"i"eta 3 liberar suaveente el /bolo 5asta su "osicin inicial.
4="ulsar la "unta de la icro"i"eta con el botn del ecaniso de e="ulsin.
Ins"eccin diariaK
,eri'icar la integridad 3 ajuste de los ecanisos. Los isos deben "oder
overse de 'ora suave. 4l "istn debe des"la+arse suaveente.
$on'irar Aue el "orta "untas no "resente distorsiones o arcas de desgasteD
dado Aue es esencial "ara la e=actitud de las edidas.
,eri'icar el ajuste de las "untasD "ara ello colocar una de ellas 3 llenarla con agua
32
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
destilada
Li"ie+a 3 descontainacinK
,eri'icar cada d&a Aue la icro"i"eta se encuentra li"iaD en sus su"er'icies
interiores 3 e=teriores. Ciariaente realice una li"ie+a e=terna Aue "uede ser con
alco5ol de 19 N o con lej&a al 1N "ara eliinar el aterial biolgico Aue "udiera
contener.
4sterili+ar la icro"i"eta siguiendo las indicaciones del 'abricante. 6i una
icro"i"eta 5a sido utili+ada con sustancias "eligrosas "ara la salud es
res"onsabilidad del usuario asegurar Aue este co"letaente descontainadaD
antes de Aue la isa sea utili+ada en otros "rocediientos o sea retirada del
laboratorio
$ada seis eses calibre la icro"i"etaD algunas icro"i"etas traen un instructivo
de calibracin 3 5erraientas "ara 5acer los ajustes necesarios.
33
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ANEXOS
ANEXO A
VIH 7 HTLV
34
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35
Tamizaje serolgico de
VIH /HTLV
Suero a evaluar
Descartar la unidad
N
!utoriza uso
SI
"eactivo
Derivar a
#$idemiolog%a
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ANEXO B
HB%A9; A*1"-HB.
36
Tamizaje serolgico de H&s!g
/ !nti-H&c
Suero a evaluar
Descartar la unidad
N
!utoriza uso
SI
"eactivo
Derivar a
#$idemiolog%a
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ANEXO C
A*1" HVC
37
Tamizaje serolgico de
HV'
Suero a evaluar
Descartar la unidad
N
!utoriza uso
SI
"eactivo
Derivar a
#$idemiolog%a
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
ANEXO D
SIFILIS
38
Tamizaje serolgico de
S%(ilis
Suero a evaluar
Descartar la unidad
N
!utoriza uso
SI
"eactivo
Derivar a
#$idemiolog%a
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
ANEXO E
ENFERMEDAD DE CHAGAS
39
Tamizaje serolgico de
')agasS%(ilis
Suero a evaluar
Descartar la unidad
N
!utoriza uso
SI
"eactivo
Derivar a
#$idemiolog%a
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ANEXO F
PROTOCOLO DE TRABAJO ELISA
FO8B:4 C4L :4!$*I,OK ..............................................
F'.:) M)#.) &'( R').1">,
V)(,# &' C,#1' L,1' NK
!,*) G#"% F'.:) &' V.1,.
2 3 4 5 6 H L M N 2
A
B
C
D
E
F
G
H
RESPONSABLE REVISADO POR
FIRMA FIRMA
A&D$*1)# :,D) "+3#'%) &'( #'3,#1' &'( A*)("8)&,# &' ELISA
40
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ANEXO G
PROTOCOLO PARA PRUEBAS DE TAMI!AJE SEROL=GICO DE SIFILIS /RPR0
FO8B:4 C4L :4!$*I,OK......................................................................................................
Fec5a de "rocesaientoK ..................................
!nt&genoK 8arcaK............................................... Lote FE..................................... .
Fec5a de ,enciientoK ...................................... %resentacin del RitK ..................
CONTROLES RESULTADO
%ositivo
Fegativo
41
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NK
C2&"9, &' ()
+$'%1#)
R'%$(1)&, &'( )*B("%"%
C$)("1)1">,
91
92
93
94
42
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
95
9#
91
92
97
19
11
12
13
14
15
1#
11
12
17
RESPONSABLE REVISADO POR
FIRMA FIRMA
ObservacionesK

43
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H.-NIVELES DE RESPONSABILIDAD
1.1 4s res"onsabilidad del Cirector del 4stableciiento de 6aludD del >e'e del Ce"artaento
30o 6ervicio al Aue est; adscrito el $entro de (eotera"ia 3 Banco de 6angreD del >e'e del
Ce"artaento 30o 6ervicio de %atolog&a $l&nica del $entro de (eotera"ia 3 Banco de
6angre del 6ector 6aludD di'undir e i"leentar todos los as"ectos relacionados a la
a"licacin del "resente 8anual.
1.2 Cel res"onsable de la calidad 3 del "ersonal Aue labora en los $entros de (eotera"ia 3
Bancos de 6angre Aue reali+an el tai+aje inunoserolgico de las unidades de sangreD
cu"lir con a"licar todos los as"ectos considerados en el "resente 8anual.
L. ABREVIATURAS
DOK Censidad Y"tica.
COK $ut O'' o ,alor Ce $orte.
S@ Cesviacin est;ndar.
X@ %roedio
RPR@ :eagina %las;tica :;"ida.
VDRL@ ,enereal Cisease :esearc5 Laborator3.
TRUSK *oluidine :ed <n5eated 6eru *est.
FTA-ABSK Fluorescent *re"oneal !ntibod3 L !bsor"tion.
TPHA@ (eaglutinacin "ara anticuer"os a Treponema pallidum.
44
Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
M. GLOSARIO DE TERMINOS
A*1".$'#3,%K -Inunoglobulinas. %rote&na "rotectora "roducida durante la res"uesta inune
ala estiulacin causada "or una sustanciaD generalente una "rote&na e=traMa. !ct?a en la
de'ensa contra los icroorganisosD a enudo "or neutrali+acin o reconociiento de los
"atgenos coo agentes e=traMos Aue deben ser eliinados.
A*169'*,@ 6ustancia reconocida coo e=traMa Aue induce una res"uesta "or "arte del sistea
inunolgico.
A*169'*, &' #'.,+A"*)."2*K !nt&genos Aue se "roducen cuando "arte del genoa del
icroorganiso -ant&geno. se inserta en un ve5&culo biolgicoD lo Aue redunda en la "roduccin
de "roductos gen/ticos Aue "ueden ';cilente re"licarse en el 5u/s"ed.
A(6.$,1)K 4s una "arte deterinada de un todo con su isa co"osicin. */rino general
Aue se re'iere a cualAuier disolucinD uestraD e+claD etc.
C)("A#)."2*@ %rocediiento ediante el cual se relaciona la lectura con la agnitud Aue se va
a leer
C,'-"."'*1' &' >)#")."2*@ el grado con el Aue los datos nu/ricos tienden a alejarse del
"roedioI un indicador de la re"roducibilidad de los valores.
C,*D$9)&,@ 4n la "rueba 4LI6!D una en+ia unida a un anticuer"o.
C,*1)+"*)."2* '*1#' +$'%1#)%K In'luencia de una uestra sobre la siguiente. %roblea Aue
a'ecta a los instruentos autoati+ados
C,*1#,( &' C)("&)&@ /CC0 !Auellas edidas Aue deben ser incluidas durante cada "rueba "ara
veri'icar Aue la "rueba est; 'uncionado correctaente.
C,*1#,( &' C)("&)& I*1'#*, , "*1#)()A,#)1,#",@ %rocediiento "or el cual se e"lea los
resultados de un solo laboratorio con 'ines de control de calidad.
C,*1#,( &' .)("&)& EC1'#*, , I*1'#()A,#)1,#",@ %rocediiento "or el cual se e"lean los
resultados de varios laboratorios Aue anali+an el iso es"/cien con 'ines de control de
calidad.
C,##"&)@ ensa3o en el Aue un gru"o de sueros son anali+ados juntos.
C#,+29'*,@ $o"uesto sint/tico soluble Aue cabia de color coo consecuencia de la
o=idacinD reduccin u otra odi'icacin Au&ica "rovocada "or el arcador en+i;tico
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Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
C$1 O-- , V)(,# D' C,#1' /CO0@ %unto de re'erencia "ara deterinar si la lectura de la
densidad "tica Aue se obtiene de una "rueba 4LI6! re"resenta un resultado :eactivo o Fo
reactivo. 4l "unto de corte se calcula 5abitualente sobre la base del "roedio de los valores
de los controles negativos
D'*%"&)& 231".)K <nidades e="resadas "or un lector icro"lacas 4LI6! Aue re"resentan la
lu+ absorbida "or el "roducto 'inal coloreado de una reaccin 4LI6!.
D'%>")."2* '%1B*&)#K 8edida de variacin Aue de'ine el rango es"erado de un valor en
relacin al valor "roedio.
E##,# S"%1'+B1"., , &'1'#+"*)&,@ 4rror originado "or causas identi'icables 3 corregible.
ELISA@ 4n+ieBlinRed inunosorbent assa3 -ensa3o inunoen+i;tico ligado a en+ias..
E*8"+)@ $atali+ador org;nico. 4n la "rueba de 4LI6!D la en+ia act?a sobre un sustrato
es"ec&'ico "ara crear un "roducto 'inal coloreado Aue se ide 3 re'leja la cantidad de en+ia
'ijada es"ec&'icaente en la reaccin.
E##,# )(')1,#",; "*&'1'#+"*)&, , .)$%)(K 4rror originado "or causas aleatorias o 'ortuitas 3
"robableente no corregibles
E%3'."-"."&)&@ ca"acidad de la "rueba "ara identi'icar todos los negativos correctaente.
F)(%, N'9)1">, /FN0@ :esultados negativos -no reactivos. obtenidos "or la "rueba con las
uestras de la "oblacin in'ectada.
F)(%, P,%"1">, /FP0@ :esultados "ositivos -reactivos. obtenidos "or la "rueba con las
uestras de la "oblacin no in'ectada.
F(,.$()."2*@ Foracin de 'lculos -gruos. sus"endidos en el edio acuoso a consecuencia
de la reaccin ant&genoBanticuer"o.
I*&'1'#+"*)&,K :esultado Aue no "uede ser clasi'icado coo "ositivo o negativo en base a los
resultados de una "rueba.
S$'#,% C,*1#,('%K suero "ositivo 3 negativo incluidos en el estuc5e de una "rueba -Rit. 3
anali+ados en cada corrida
N, #').1">,K In'oracin del resultado de una "rueba de deteccin de anticuer"os indicando
Aue la "rueba no detect evidencia de in'eccin.
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P431"&,% %"*141".,%K %/"tidos creados en el laboratorio cobinando aino;cidos en una
secuencia conocida "ara 'orar un "/"tido deseado.
P'#6,&, &' V'*1)*)@ %er&odo Aue transcurre entre la in'eccin 3 a"aricin de ant&genos o
anticuer"os detectables
P()%+). %arte l&Auida de la sangre 3 la lin'a. $onstitu3e del 39 al 59 "or ciento de la sangreD
conteniendo nutrientesD electrolitosD Aue son sales disueltasD gasesD alb?inaD 'actores de
coagulacinD des"erdicios 3 5oronas.
P#'>)('*."). F?ero de casos de un eventoD "or eje"lo una en'eredadD en una "oblacin
es"ec&'ica 3 en un oento deterinado. :egularente se e="resa en t/rinos de "orcentaje.

R').1">,K In'oracin del resultado de una "rueba de deteccin Aue indica Aue se identi'ic la
in'eccin.
R')9"*)@ !nticuer"o "las;tico ines"ec&'ico.
R'()."2* D.O.5COK Lectura de la densidad "tica de una "rueba dividida "or el valor de corte.
S'*%"A"("&)&@ $a"acidad de una "rueba "ara detectar u3 "eAueMas cantidades de
substancias a se anali+adas en un suero o la ca"acidad de una "rueba "ara detectar individuos
in'ectados.
S'#,.,*>'#%"2*K %unto en el cual "uede detectarse "or "riera ve+ un anticuer"o es"ec&'ico
en un individuo in'ectado Aue "reviaente 5ab&a tenido un resultado negativo en una "rueba
"ara detectar anticuer"os.
S'#,3#'>)('*."). %orcentaje de "ersonas en un lugar 3 tie"o deterinados Aue tienen
anticuer"os contra alguna en'eredadD lo Aue indica Au/ "orcentaje de ellos 5an tenido
contacto con un agente in'eccioso es"ec&'ico
S$'#, C,*1#,( 'C1'#*,@ 6uero de control con valores conocidos derivados de una 'uente
distinta a los incluidos en el Rit de "rueba. 4stos controles se inclu3en en las corridas de la
"rueba "ara controlar el dese"eMo uni'ore o la variacin entre los lotes del reactivo
S$%1#)1,@ Ou&ico es"ec&'ico activado "or una en+ia "ara 'orar un "roducto coloreado.
T)+"8)D'@ 6eleccin
V'#&)&'#, P,%"1">, /VP0@ :esultado "ositivo -reactivo. obtenido "or la "rueba con las
uestras de la "oblacin de in'ectados.
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V'#&)&'#, N'9)1">, /VN0@ :esultados negativos -no reactivos. obtenidos "or la "rueba
con las uestras de la "oblacin no in'ectada.
!,*) 9#"%@ :esultados de "ruebas Aue caen dentro de una +ona de'inida inediataente "or
debajo del valor de corte. Los resultados Aue caen dentro de esta +ona justi'ican a enudo la
evaluacin "or otras "ruebas 30o de una nueva uestra.
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Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre
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