Patologa Forestal

Reporte No. 1 Elaboracin de medios para el cultivo de organismos Pgina 1

Universidad de San Carlos de Guatemala
Facultad de Agronoma
rea
Sub rea de
Patologa Forestal
Ing. agro. Emerson Herrera






ELABORACION DE MEDIOS PARA EL CULTIVO DE
MICROORGANISMOS
MTODOS Y TCNICAS DE ESTERILIZACIN







Pablo Alejandro Prez Portillo
200916245
Guatemala 1 de septiembre de 2014





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1 INTRODUCCIN
Los medios de cultivo contienen los nutrientes necesarios, para que los
microorganismos, puedan sobrevivir y de esta forma poder propagarse, debido al
tamao de estos es necesario cultivarlos y de esta forma poder analizar y estudiar
sus caractersticas mediante poblaciones.
Los medios de cultivo para los microorganismos pueden ser de diferente forma; ya
sea slido, lquido o semislido. En donde los lquidos se pueden transformar en
solidos al adicionarles algn tipo de solidificante tal como el agar, gelatina o silica
gel.
Antes de preparar un medio de cultivo para cualquier microorganismo se debe de
tomar en cuenta las caractersticas y las necesidades que cada uno de estos poseen;
en donde los factores a considerar son: el agua, minerales, pH, el contenido de
nutrientes, etc. y estos variaran en cuanto a los propsitos de estudio y el
organismo que se requiera cultivar.
Para la preparacin de los medios hoy en da se utilizan medios deshidratados que
se obtiene de forma comercial, tal es el caso del agar utilizado durante la prctica,
para los cual solo se requiere disolver una cantidad conocida en un volumen
conocido. Otro factor a considerar en este proceso es la esterilizacin de los
materiales a utilizar en donde se eliminan los microorganismos presentes en cada
uno de estos instrumentos y de esta forma cultivar nicamente los organismos de
inters.
Para realizar la esterilizacin existen diferentes mtodos los cuales se basan
principalmente en el incremento de la temperatura, ya que la mayora de los
microorganismos mueren a cierto grado elevado de esta.




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2 OBJETIVOS
Conocer la importancia que presentan los medios de cultivo para el estudio
de los microorganismos
Obtener los conocimientos para la preparacin de los medios de cultivo de
microorganismos utilizados en el laboratorio de Patologa Forestal.

Aprender la metodologa para la esterilizacin de los instrumentos y
materiales utilizados en el laboratorio de Patologa Forestal.


3 Materiales y mtodos
3.1 Preparacin del Medio de Cultivo

Pesar 37.5 gr. de papa sin pelar o peladas (previamente lavadas)
Pesar 2.4 gr. de Dextrosa.
hacer rodajas de la papa para que quepan en un erlenmeyer de 250 cc.
donde previamente se han agregado 75 cc. de agua destilada.
hervir el agua con la papa durante 30 minutos
En otro erlenmeyer de 250 cc. agregar 75 cc. de agua destilada y Luego
agregar la dextrosa.
Filtrar el caldo de papa que se obtuvo
Mezclar el filtrado en el otro erlenmeyer que contiene la dextrosa.
Ajustar el volumen de 150 cc.; agregar agar 1.6 % del volumen.
Calentar. Esperar hasta que el agar se haya disuelto.
Ajustar el pH a 6.0 utilizando HCl 1 N, agregndole gota a gota y verificar con
papel pH.
Tomar 6 tubos de ensayo de 18 cm x 17 mm y colocar a cada uno 10 ml. del
medio.
Tomar 4 tubos de ensayo de 18 cm x 22 mm y colocar en cada uno 20 ml. del
medio
Colocar el tapn de algodn respectivo a cada tuvo y esterilizar en el
autoclave.
Sacar el material estril del autoclave.
Los tubos de 15 x 17 colocarlos inclinados sobre una regla de madera de 3 cm
de alto hasta que el medio se solidifique.







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Con el medio estril de cada tubo de 18 x 22 se preparan 4 cajas petri de la
siguiente manera:
o Esperar que la temperatura baje en el medio, de tal forma que la
soporte en la mejilla y cuidando que el mismo no se endurezca (ms o
menos 45 grados centgrados).
o Pasar un algodn con alcohol sobre la mesa de trabajo y colocar las 4
cajas de Petri estriles que sern entregadas.
o Lavarse las manos con agua y jabn, posteriormente humedecrselas
con alcohol.
o Verter el tubo de cada caja, teniendo cuidado de que la aplicacin se
haga en el mnimo tiempo posible y cerca del mechero.


3.2 Esterilizacin


Preparar los instrumentos que se van a esterilizar
Verificar que las llaves de la camisa y de la cmara estn cerradas.
Encender la autoclave. Esperar 10 a 15 minutos mientras el vapor de agua se
concentra en el chaleco de la autoclave.
Abrir la autoclave, cuidando que el manmetro de la cmara no marque ninguna
presin.
Colocar los materiales que se van a esterilizar. Cerrar la autoclave.
Abrir la llave del chaleco cuando la presin en el manmetro del chaleco marque
20 PSI
La presin en el manmetro del chaleco empieza a descender y la del
manmetro de la cmara empieza a subir. Esto es porque el vapor del chaleco
pasa a la cmara. La temperatura tambin se incrementa.
Esperar a que la presin en el chaleco y en la cmara se estandarice a 20 PSI y
una temperatura de 120 grado centgrados.
Esperar 20 minutos a partir de la estabilizacin de la presin y temperatura.
Abrir lentamente la llave de purga del aparato.
Espere que baje la presin totalmente.
Si va a seguir esterilizando cerrar la llave del chaleco.
Si no va a seguir esterilizando, apagar el aparato.
Sacar el material estril.






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4 MARCO TEORICO
4.1 Nutricin
La nutricin es el proceso por el que los seres vivos toman las sustancias qumicas
que necesitan para crecer, del medio donde habitan. Dichas sustancias se
denominan nutrientes, y se requieren para dos objetivos:
Energticos: Los microorganismos requieren energa del exterior.
Biosintticos: formar sustancias que constituyen la clula (Ej.:
protenas)

Los nutrientes pueden clasificarse en:
Universales: Son aquellos nutrientes que todos, o bien la mayora de los
microorganismos, requieren para su crecimiento. Los ms importantes son:
agua, dixido de carbono (CO2), fosfatos, sales minerales.
Particulares: Se trata de elementos que pueden ser cubiertos de modo muy
distinto, dependiendo de las capacidades biosintticas del microorganismo
que se considere. Concretamente consideraremos los elementos N y S (que
requieren todos los seres vivos).
Factores de crecimiento: Son molculas orgnicas especficas que algunas
bacterias necesitan, en muy pequea cantidad, para crecer. Salvo
excepciones no tienen funcin plstica, ni sirven como fuente de energa.
Suelen ser coenzimas o sus precursores, vitaminas, que determinadas
bacterias no pueden fabricar por s mismas, al carecer de parte (o toda) de
una ruta biosinttica. Consideraremos como ejemplos, oligoelementos,
vitaminas y minerales.
4.2 Medios de cultivo
Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es
observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el
Medio de Cultivo; el cual es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y
otros componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos. La diversidad metablica de estos es tan grande que la variedad
de medios de cultivo es enorme, no existiendo un medio de cultivo universal
adecuado para todos ellos, ni siquiera refirindonos a las bacterias con exclusividad.
Para que las bacterias u otro organismo crezcan adecuadamente en un medio de
cultivo artificial, ste debe reunir una serie de condiciones tales como: temperatura,
grado de humedad y presin de oxgeno adecuado, as como un grado correcto de
acidez o alcalinidad, adems deben estar exentos de todo microorganismo
contaminante.
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4.3 CONSTITUYENES HABITUALES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

AGAR. Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo. En
el agar bacteriolgico el componente dominante es un polisacrido que se obtiene
de ciertas algas marinas y que presenta la indudable ventaja de que a excepcin de
algunos microorganismos marinos, no es utilizado como nutriente.
EXTRACTOS. Su preparacin consiste en que ciertos rganos o tejidos animales o
vegetales (p.e. carne, hgado, cerebro, semillas, etc.) son extrados con agua y calor
y posteriormente concentrados hasta la forma final de pasta o polvo. Estos
preparados deshidratados son a menudo empleados en la elaboracin de los
medios de cultivo. Los ms utilizados son el extracto de carne, de levadura y el de
malta.
PEPTONAS. Son mezclas complejas de compuestos orgnicos, nitrogenados y sales
minerales, que se obtienen por digestin enzimtica o qumica de protenas
animales o vegetales (soja casena carne, etc.). Las peptonas son muy ricas en
ppticos y aminocidos, pero pueden ser deficientes en determinadas vitaminas y
sales minerales.
FLUIDOS CORPORALES. Con frecuencia es necesario aadir a los medios de cultivo
de algunos patgenos sustancias como sangre completa, sangre desfibrinada,
plasma o suero sanguneo, sobre todo para conseguir el primer aislamiento a partir
del hospedador. La sangre no puede ser esterilizada, y por tanto debe de ser
obtenida en condiciones aspticas directamente de un animal sano, y adicionada al
medio de cultivo despus de que este haya sido auto clavado. Los fluidos corporales
no solo aportan factores de crecimiento sino que tambin aportan sustancias que
neutralizan a inhibidores del crecimiento de algunas bacterias. Un ejemplo podra
ser la catalasa presente en las clulas sanguneas destruye el perxido de hidrgeno
que algunas bacterias que no poseen este enzima acumulan como producto del
metabolismo del oxgeno.
SISTEMAS AMORTIGUADORES. Para mantener el pH dentro del rango optimo del
crecimiento bacteriano a veces, es necesario aadir algunos componentes al medio
de cultivo. Debido a que la mayora de las bacterias son neutrfilas, se suelen
emplear sales del tipo de los fosfatos bisodicos bipotsicos u otras sustancias
como las peptonas para prevenir la desviacin del pH.
INDICADORES DE PH. Con el objeto de poder detectar variaciones en el pH debido a
fermentaciones u otros procesos, se hace necesario a veces aadir indicadores
acido-base que nos lo indiquen.
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AGENTES REDUCTORES. Con el objetivo de crear en los medios de cultivo
condiciones que permitan el desarrollo de los grmenes microaerofilos
anaerobios se aaden estos agentes reductores siendo, los ms empleados la
cisteina y el tioglicolato entre otros.
AGENTES SELECTIVOS. La adicin de determinadas sustancias a un medio de cultivo
puede convertirlo en selectivo. As, por ejemplo, la adicin de cristal violeta, sales
biliares, azida sodica, telurito potasico, antibiticos, etc., a la concentracin
adecuada har que acten como agentes selectivos frene a determinados
microorganismos.
4.4 Clasificacin de medios de cultivo:
4.4.1 Segn su estado fsico:
a. Lquidos: Usualmente se denominan caldos ya que contienen los nutrientes
disueltos en agua. Permiten obtener suspensiones con un elevado nmero de
microorganismos. Ej. Caldo nutritivo.
b. Slidos: Se pueden preparar a partir de medios lquidos a los cuales se les
aaden agentes solidificantes como agar, gelatina o slica gel. Se utilizan con
frecuencia en el aislamiento y mantenimiento de los microorganismos en el
laboratorio. Ej. Agar nutritivo.
4.4.2 Segn la naturaleza de sus constituyentes:
a. Medios naturales, complejos o indefinidos: Estn constituidos por sustancias
complejas de origen animal o vegetal y usualmente se complementan con el
aadido de minerales y otras sustancias. No se conocen todos los componentes del
medio de cultivo, ni las cantidades exactas en que estn presentes. Este tipo de
medio es el ideal para cuando simplemente se pretende obtener un buen
crecimiento microbiolgico, ya que su confeccin es fcil y rpida (Basta pesar una
cierta cantidad del extracto desecado, suministrado por casas comerciales,
disolverlo en agua y esterilizar en autoclave). Ej. Extracto de carne, extracto de
levaduras.
b. Medios sintticos: Se preparan a partir de ingredientes qumicamente puros
y por lo tanto se puede conocer exactamente su composicin cuali y cuantitativa.
Por su costo slo se emplean en procedimientos especiales.
c. Medios mezcla de los anteriores: Denominado medio semisinttico, llevan
algunas sustancias qumicas cuya naturaleza y cantidad se conoce, junto con
sustancias de naturaleza y composicin indefinida.

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4.4.3 Segn sus propsitos de uso:

a. Medios de enriquecimiento: Se llama enriquecimiento a cualquier cultivo en
medio lquido que resulte en un incremento en el nmero de un tipo dado de
microorganismo en relacin con el nmero de otros tipos de microorganismos que
puedan estar en el inculo.
Un medio de enriquecimiento puede contener sustancias que favorezcan el
crecimiento del microorganismo que nos interesa o que inhiban el crecimiento de
los otros tipos de microorganismos presentes. La selectividad de un cultivo de
enriquecimiento no est determinada nicamente por la composicin qumica del
medio usado, sino que en un medio dado puede ser variada significativamente
modificando otros factores tales como: temperatura, pH, fuerza inica, iluminacin,
aireacin, etc. Ej. Caldo tetrationato utilizado para el enriquecimiento de las
especies del gnero Salmonella provenientes de muestras de heces, orina, agua o
alimentos.
b. Medios selectivos: Son bsicamente iguales a los de enriquecimiento, se
diferencian por ser medios slidos y estn diseados para el aislamiento de
microorganismos especficos. Ej. Agar desoxicolato citrato utilizado para el
aislamiento de patgenos entricos.
c. Medios diferenciales: No contienen sustancias inhibidoras, es decir, permiten
el crecimiento de muchos tipos de microorganismos, pero s contienen indicadores
de productos derivados de la actividad metablica de los microorganismos sobre
algunos de los componentes del medio. Se utilizan para la identificacin de los
microorganismos. Ej.: Agar base rojo fenol utilizado para detectar fermentacin de
carbohidratos.

4.5 Esterilizacin:
Es el proceso de destruir aquellos microorganismos indeseables en los medios de
cultivo, recipientes o ambientes utilizados en microbiologa. Esta condicin es
necesaria para asegurar la pureza de los microbios que se desean estudiar.
4.6 Desinfectantes
Es un agente, por lo regular qumico capaz de matar las formas en desarrollo, pero
no necesariamente las esporas resistentes de microorganismos patgenos.
Desinfeccin es la operacin de destruir agentes infecciosos.
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4.7 Antisptico
Toda sustancia que se opone a la sepsis o impide el desarrollo o accin de los
microorganismos, ya sea por destruirlos o inhibir su crecimiento y actividad.
Generalmente se refiere a las sustancias aplicadas al cuerpo.
4.8 Germicida (Microbicida)
Agente que mata las formas de desarrollo pero no forzosamente las esporas
resistentes; en la prctica un germicida es casi lo mismo que un desinfectante,
aunque los germicidas se utilizan para todo tipo de grmenes (microbios) y en
cualquier tipo de aplicacin.
4.9 Bactericida
Agente que mata bacterias. De manera similar, los trminos fungicidas, virucida y
esporacida se refieren a agentes que matan respectivamente hongos, virus y
esporas.
4.10 Bacteriostsis
Es la supresin del desarrollo de bacterias (agente bacteriosttico). De la misma
manera, los fungistticos se refieren a los hongos. Los agentes que tienen en comn
la capacidad de inhibir el desarrollo de microorganismos se designan
colectivamente microbiostticos.

Existen diversos mtodos de esterilizacin. La seleccin del mtodo a aplicar en
cada caso est determinada por el tipo de producto a esterilizar.
4.11 CLASIFICACIN DE LOS MTODOS DE ESTERILIZACIN
4.11.1 Agentes fsicos
El calor se puede aplicar como agente esterilizante de dos formas: el calor en
hmedo el cual destruye a los mitroorganismos por desnaturalizacin de las
protenas y el calor en seco que destruye a los microorganismos por oxidacino de
sus componentes celulares. El calo es cnsiderado como el mtodo de esterilizacin
por exelencia siempre y cuando el material a esterilizar soporte altas tempreaturas
sin sufrir ningn tipo de dao.
La radiacin o emisin y propagacin de la energa a travez de un medio pude ser
utilizada como agente para la eliminacin de microorganismos de materiales
termolbiles, como un ejemplo materiales plsticos y las radiaciones no ionizantes
como la luz ultravioleta puede ser empleada en el control de reas cerradas.
4.11.2 Agentes mecnicos
La filtracin permite la remocin de todos los microorganismos presentes en un
lquido o un gas retenindolos sobre la superficie de un material.
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4.11.3 Agentes qumicos
Algunas sustancias qumicas puden ser usadas como agentes esterilizantes porque
tienen la capacidad de promover una a mas reacciones qumicas capaces de daar
los componentes celulares de los microorganismos (protenas, membranas, etc)
4.12 CONTROL DEL PROCESO DE ESTERILIZACIN
Todos los procesos de esterilizacin se deben controlar para poder asegurar que
han sido efectivos. Para ello se pueden utilizar indicadores fsicos, qumicos y/o
biolgicos, los cuales deben ser colocados en cada carga de esterilizacin.
4.12.1 Indicadores fsicos
Entre los principales indicadores fsicos se encuentran los medidores de presin y
los termmetros los cuales permiten constatar las condiciones fsicas dentro de la
cmara de esterilizacin. Tambin existen los termgrafos los cuales, adems de
registrar la temperatura alcanzada en el proceso, permiten conocer durante cunto
tiempo sta se mantuvo.
4.12.2 Inidicadores qumicos
La mayora de estos indicadores son cintas adhesivas que se adhieren al material a
esterilizar, estas cintas estn impregnadas con una sustancia qumica que cambia de
color cuando el material ha sido sometido al proceso de esterilizacin, este tipo de
cintas no son completamente confiables debido a que muchas veces solo indican
que se lleg a la temperatura deseada, pero no indican por cuanto tiempo esta se
mantuvo. Tambin existen cintas diseadas de manera que el cambio de color es
progresivo, estas cintas son un poco ms seguras por que permiten estimar si el
tiempo de esterilizacin fue el adecuado.
4.12.3 Indicadores biolgicos
Son preparaciones de una poblacin especfica de esporas de microorganismos los
cuales son altamente resistentes a un proceso de esterilizacin en particular.
Estos indicadores se deben de colocar junto con la carga de esterilizacin, en el sitio
que se considera que es mas difcil que llegue el vapor y despus del proceso, se
deben de incubar durante 24 horas en condiciones adecuadas. Si despus de este
periodo hay evidencia de crecimiento microbiano, el proceso de esterilizacin no
fue satisfactorio.




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5 Resultados y Discusin

5.1 Preparacin del medio nutritivo
Se obtuvieron 125 ml de solucin la cual contena papa y dextrosa, esta
solucin se le agreg agar, el cual funciona como un soldificante para ello fue
necesario que a la solucin se le aplicar calor y a medida que trascurra el
tiempo esta fue adoptando una consistencia slida. Lo cual indicaba que se
realiz de forma correcta y poda ser medio de cultivo utilizado
posteriormente.
Se utiliz agar ya que es un producto que es extrado de algas lo cual aporta
los nutrientes necesarios para el desarrollo de microorganismos, adems
este es capaz de soportar temperaturas hasta cerca de los 100 C cuando se
encuentra slido, lo cual es un rango amplio para el cultivo de una gran
variedad de microorganismos que necesitan una temperatura relativamente
elevada para su ptimo desarrollo

5.2 Esterilizacin
Se esterilizaron diferentes mtodos del laboratorio (cajas de Petri, pipetas)
atraves del mtodo en hmedo el cual se bas en colocar cada uno de ellos
dentro de la auto clave de manera que se alcanzara una presin de 15 psi; a
partir de ese momento se contabilizaron 15 minutos tiempo necesario para
finalizar el proceso de esterilizacin.
Los instrumentos se encontraban protegidos con papel peridico, esto con la
finalidad de crear una capa aislante a los posibles contaminantes del ambiente
al momento de sacarlos de la auto clave y de esta forma no realizar un
esfuerzo en vano.

5.3 Preparacin Final
Una vez obtenido el medio nutritivo y las cajas de Petri esterilizadas se
procedi a colocar una cantidad suficiente del medio en cada una de las cajas
para ello fue necesaria la utilizacin de alcohol al 95% para poder desinfectar el
rea de trabajo y de igual forma las manos de personal que realizo este
procedimiento as como tambin los instrumentos utilizados esto con la
finalidad de mantener libres de contaminantes el medio utilizado, al llenar
cada una de las cajas de petri se colocaron en refrigeracin cada una de ellas
para que el medio se solidificara para su uso posterior


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6 Conclusiones

Al finalizar la prctica de laboratorio se logr conocer que los medios de
cultivos son importantes para la reproduccin de microorganismos ya que
los medios le brinda a estos las condiciones ptimas para su desarrollo lo
cual nos permite conocer el comportamiento de cada uno de estos. Adems
el cultivo de microorganismos nos ayuda para poder realizar ensayos
posteriores sobre alguna especie de planta y tejido en particular, esto con la
finalidad de conocer su posible comportamiento en campo al momento en
que se presente en alguna plantacin.

Para la realizacin de medios de nutritivos existen diferentes tcnicas y
solidificantes de los cuales el uso ser determinado por el tipo de organismo
que se est analizando, ya que cada uno de estos poseen diferentes
nutrientes o constituyentes los cuales le aportan caractersticas diferentes
por lo que el desarrollo de los microorganismos puede verse afectado,
adems de las condiciones ambientales y el cuidado que se tomen al
momento de realizar cada uno de ellos.

La esterilizacin de los instrumentos tanto para la realizacin de la solucin
nutritiva as como el medio de cultivo es importante es por ello que se logr
identificar y aprender cada uno de los pasos adecuado para su correcta
realizacin, comenzando con el medio de esterilizacin el cual fue un medio
en hmedo para lo cual fue necesario la utilizacin de la auto clave, en la cual
se colocaron cada uno de los instrumentos a utilizar envueltos en papel
peridico el cual se utiliza por sus caracterstica de absorcin. Adema se
logr conocer las medidas de seguridad al utilizar el auto clave esto para
evitar accidentes en el laboratorio al momento de su uso. De igual forma se
determin la manera correcta para la manipulacin de cada uno de estos una
vez estos ya han sido des infectos y de esta forma evitar contaminacin
posible de forma posterior



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7 Bibliografa

Santambrosio E. et al 2009, Preparacin de Medios de Cultivos. Universidad
Tecnolgica Nacional. Rosario, Argentina. (En lnea) consultado el 31 de agosto de
2014. Disponible en:
http://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/quimica/5_anio/biotecnologia/pract
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Universidad de Granada 2009, Preparacion de medios de cultivo. Granada,
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http://www.ugr.es/~cjl/medios%20de%20cultivo.pdf

Gutirrez S. 2010, Mtodos de Esterilizacin. Universidad Central Venezuela.
Caracas Venezuela. (en lnea) consultado el 31 de agosto de 2014. Disponible en:
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_M%C3
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Gepp V. 2012, Metodos de Esterilizacion y desinfeccin. Universidad de la
Republica de Uruguay (en lnea) consultado el 31 de agosto de 2012. Disponible en:
http://www.pv.fagro.edu.uy/fitopato/cursometodosfito/02-
Esterilizacion_desinfeccion2012VG.pdf








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8 Anexos
8.1 Cuestionario

Qu es la esterilizacin intermitente?

Qu es el punto trmico letal, tiempo trmico y reduccin decimal de tiempo?
Tiempo trmico mortal: es el tiempo mnimo requerido para que mueran
todas las bacterias de una determinada suspensin a una determinada
temperatura.
tiempo de reduccin decimal: es el tiempo requerido para reducir al 10% la
densidad de la suspensin, a una determinada temperatura (tambin
llamado valor D);
punto trmico mortal: es la temperatura mnima que mata a todas las
bacterias en un tiempo determinado (normalmente el tiempo de referencia
empleado es de 10 min).
Qu es la pasteurizacin?
Este procedimiento, cuyo nombre proviene justamente de su creador, Louis
Pasteur, se basa en someter a los lquidos a altas temperaturas durante un periodo
de tiempo determinado. Puede sonar simple, pero se trata de un clculo complejo,
ya que si no se hace de forma correcta no slo quedan agentes infecciosos, sino los
alimentos podran perder parte de sus propiedades.
Existen tres mtodos de pasteurizacin que se aplican actualmente y se diferencian
tanto por la temperatura utilizada, como tambin por el tiempo y forma de proceso
industrial en que se usa.
VAT: Consiste en calentar los lquidos hasta una temperatura de
aproximadamente 63 C y luego dejarla enfriar durante 30 minutos dentro
del mismo recipiente. Al terminar, se les envasa de inmediato para prevenir
contaminacin.
HTST: Los lquidos se calientan rpidamente a entre 71 C y 89 C,
dependiendo de su tipo, por slo 15 segundos. Es el ms utilizado por la
industria, ya que es rpido y se puede trabajar con grandes volmenes.
UHT: Tambin conocido como la ultra pasteurizacin, consiste en someter a
los lquidos a a una temperatura de 137 C por slo 2 segundos, para luego
enfriarla rpidamente.
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La UHT tiene una variante conocida como asptica, donde las temperaturas
pueden llegar a los 150 C por 4 segundos, para luego esperar que se enfre a
temperatura ambiente.
El mtodo que se utiliza, depende del tipo de lquido con que se trabaja


Describa el mtodo que generalmente se emplea para esterilizar el material de
vidrio. Mencione as mismo la temperatura y el tiempo de calentamiento.
El mtodo fue esterilizacin en hmedo el cual consiste la utilizacin de la auto
clave, en donde se colocan todos los instrumentos a utilizar, de tal forma que
alcance una presin de 15 psi y a partir de all se contabilizan 15 minutos el cual es el
tiempo necesario para que algn organismo que no es de nuestro interese se
desintegre por el calor y la presin alcanzada

Describa el tipo de nutricin de los hongos y de las bacterias



2. Describa las condiciones fsicas necesarias para el desarrollo de las bacterias
Un medio adecuado que proporcione nutrientes: El medio adecuado va a
depender del tipo de microorganismo que se desea aislar, muchos no
presentan demasiadas exigencias en este aspecto, otros en cambio, necesitan
de un medio especfico para poder desarrollarse.

Una atmsfera adecuada: puede significar la presencia o ausencia de oxgeno,
o la previsin de otro medio gaseoso. A este respecto se debe distinguir entre:
o Los aerobios obligados: que no crecen sin oxgeno.
o Los anaerobios obligados: que no crecen en presencia de oxgeno.
o Los anaerobios facultativos: que pueden crecer tanto en ausencia como
en presencia de oxgeno.

Temperatura apropiada
La temperatura ms adecuada vara tambin, desde la requerida por los
Psicrfilos, organismos capaces de desarrollarse a temperaturas bajas de O a 15
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oC, hasta la necesaria; los Mesfilos, que crecen mejor a temperaturas de 15 a
45 oC y los Termfilos que crecen a temperaturas superiores a los 45 oC.

Presin osmtica y pH adecuados
Una presin osmtica adecuada depende de las concentraciones de sales o de
azcar en el medio. Un pH adecuado depende de las concentraciones de in
hidrgeno, que debe regularse con los amortiguadores apropiados.
Humedad
La humedad es un requisito que deben tener en comn todos los seres vivos.
Sin agua no hay ser vivo que pueda desarrollarse.

3. Por qu es necesario ajustar el pH de los medios de cultivo?
Con el objeto de poder detectar variaciones en el pH debido a fermentaciones u
otros procesos.
4. De dnde se obtiene el agar?
En el agar bacteriolgico el componente dominante es un polisacrido que se
obtiene de ciertas algas marinas y que presenta la indudable ventaja de que a
excepcin de algunos microorganismos marinos, no es utilizado como nutriente.