para COFEPRIS

Listado de criterios y de actividades a desarrollar para realizar una validacin de

un mtodo normalizado o no normalizado.
1 CRITERIO No. 1
Clasificar el mtodo como Normalizado o no Normalizado conforme a lo siguiente:
1.1 Mtodo Normalizado es aquel mtodo publicado como primera instancia en:
1. Normas Oficiales Mexicanas (NOM)
2. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos (FEUM)
3. Normas Mexicanas (NMX).

Como segunda instancia:
4. Mtodos Oficiales del AOAC
5. Standard Methods
6. Environmental Protection Agency (EPA)
7. Pesticide Analytical Manual (PAM)
8. Collaborative International Pesticides Analytical Council (CIPAC)
9. United States Pharmacopoeia (USP)
10. British Pharmacopoeia (BP)
11. American Society for Testing Materials (ASTM)
12. International Standard Organization (ISO)
13. Codex Alimentarius
14. Food and Drug Administration (FDA)
15. Food and Agriculture Organization (FAO)
16. European Commission (CE)
17. United States Department of Agriculture (USDA)
5.1.2 Mtodo no Normalizado es aquel:
1. Desarrollado por el laboratorio (mtodo propio).
2. Mtodo obtenido de publicaciones cientficas (Journals, tesis, etc).
3. Mtodo normalizado modificado, ampliado o usado fuera de su alcance.

5.2 CRITERIO No. 2
Considerar los siguientes parmetros de desempeo de acuerdo al tipo de
mtodo.

CRITERIO 3
Clasificar el mtodo por tipo de prueba

Criterio 4


CRITERIO No. 5
Seleccionar el tipo de matriz a evaluar conforme a:
1. La ms solicitada.
2. La ms compleja.
3. Para mtodos generales que apliquen a diferentes matrices; FEUM, Residuos
orgnicos, metales contaminantes, etc. Se debe seleccionar una matriz
representativa por grupo (alimentos, principio activo, tipo de presentacin, entre
otros)
a. Alimentos: lcteos, crnicos, productos de la pesca agua, cereales,
frutas, vegetales, productos de panificacin, miel, productos de confitera,
especias, entre otros.
b. Medicamentos: cpsula, gragea, tableta, suspensin, jarabe, ungento,
colirio, espuma, gel, supositorio, parche, jalea, ovulo, entre otros.


CRITERIO No. 6
Evaluar los parmetros de desempeo correspondientes como se detalla en las siguientes tablas:
Parmetro Muestras Repeticiones Determinacin Observaciones





Intervalo Lineal




Blancos de muestra
(placebos) o muestras
adicionadas

Mnimo 5 niveles diferentes
de concentracin





Cada nivel por
triplicado

a) Graficar respuesta analtica (y) vs.
nivel de concentracin adicionado (x)

b) Confirmar visualmente la existencia de
linealidad del intervalo.

c) Elaborar grfico de residuales.

d) Confirmar aleatoriedad de los
residuales alrededor de la recta


a) Graficar respuesta analtica (y) vs.
nivel de concentracin adicionado (x)

b) Confirmar visualmente la existencia
de linealidad del intervalo.

c) Elaborar grfico de residuales.

d) Confirmar aleatoriedad de los
residuales alrededor de la recta





Intervalo de
trabajo



Blancos de muestra
(placebos) o muestras
adicionadas

Mnimo 5 niveles diferentes
de concentracin.





Cada nivel por
triplicado

a) Considerar los niveles que cumplen
con los criterios de recuperacin y
repetibilidad establecidos.

b) Graficar la concentracin obtenida (y)
vs. La concentracin adicionada (x)

c) Calcular la pendiente (m) y el
coeficiente de correlacin (r).




a) Utilizar los datos obtenidos en la
estimacin del intervalo lineal.

b) Reportar el intervalo de
concentraciones obtenido en las
unidades establecidas por el mtodo




Lmite de
deteccin
(pruebas
cualitativas)



Blancos de muestra
(placebos) o muestras
adicionadas.

Mnimo 5 niveles diferentes
de concentracin.








10 rplicas de
cada nivel





Elaborar tabla de respuesta de resultados
positivos y negativos con respecto a la
concentracin





Concentracin mnima en la cual se
obtienen 10 resultados positivos




Lmites de
deteccin y
cuantificacin



Blancos de muestra
(placebos) o muestras
adicionadas

Mnimo 5 niveles diferentes
de concentracin.





Cada nivel por
triplicado



a) Calcular la pendiente (m) y la
desviacin estndar de la ordenada al
origen (sbo) de la respuesta analtica (y)
vs nivel de concentracin adicionado (x)

b) Estimar los lmites con las siguientes
ecuaciones:


a) Utilizar los datos obtenidos en la
estimacin del intervalo de trabajo,

b) Reportar los lmites estimados
estadsticamente en las unidades
establecidas por el mtodo.

c) Considerar como lmite prctico de
cuantificacin el nivel inferior estimado
en el intervalo de trabajo.





Recuperacin y
sesgo


Blancos de muestra
(placebos) o muestras
adicionadas.

Mnimo 5 niveles diferentes
de concentracin




Cada nivel por
triplicado

a) Calcular la concentracin recuperada
para cada nivel de concentracin
adicionado.

b) Para el sesgo, efectuar la resta
aritmtica de la concentracin aadida
menos la concentracin recuperada.

a) Utilizar los datos obtenidos en la
estimacin del intervalo de trabajo

b) Reportar la recuperacin como
intervalo en % y el sesgo como intervalo
en las unidades establecidas por el
mtodo.










Repetibilidad






Blancos de muestra
(placebos) o muestras
adicionadas.

Tres niveles diferentes de
concentracin (niveles
inferior, medio y superior
estimados en el intervalo de
trabajo)









Cada nivel por
sextuplicado.





a) Analizar las muestras por un mismo
analista (analista 1) en 2 das diferentes
(3 niveles/triplicado /da).

b) Calcular el % de recuperacin de los 6
resultados para cada nivel

c) Calcular la media (x), desviacin
estndar (sr) y el coeficiente de variacin
(CVr) de los % de recuperacin obtenidos
para cada nivel adicionado.





a) Analizar las muestras por un mismo
analista (analista 1) en 2 das diferentes
(3 niveles/triplicado /da).

b) Calcular el % de recuperacin de los
6 resultados para cada nivel

c) Calcular la media (x), desviacin
estndar (sr) y el coeficiente de
variacin (CVr) de los % de
recuperacin obtenidos para cada nivel
adicionado.










Reproducibilidad
(Precisin
intermedia)




Blancos de muestra
(placebos) o muestras
adicionadas.

Tres niveles diferentes de
concentracin (niveles
inferior, medio y superior
estimados en el intervalo de
trabajo).






Cada nivel por
sextuplicado.

a) Analizar las muestras en 2 das
diferentes (3 niveles/triplicado/da) y por
un analista diferente (analista 2)

b) Calcular el % de recuperacin de los 6
resultados para cada nivel

c) Combinar estos resultados con los
datos obtenidos en la estimacin de la
repetibilidad y calcular la media (x),
desviacin estndar (sR) y el coeficiente
de variacin (CVR) de los % de recobro
para cada nivel.







Reportar la desviacin estndar (sR) o
coeficiente de variacin (CVR) mximos
obtenidos









Sensibilidad









Blancos de muestra o
muestras adicionadas con
cantidades conocidas de
interferencias, productos de
degradacin o impurezas









Por duplicado









Evaluar si la presencia de las
interferencias, impurezas o productos de
degradacin inhiben o incrementan la
deteccin del analito.

Pueden emplearse tcnicas
confirmatorias para asegurar la
identidad del analito como son la
utilizacin de detectores de
espectrometra de masas, arreglo de
diodos o infrarrojo. Cuando no se tienen
estndares de interferencias o
impurezas se pueden aplicar las
siguientes condiciones de
degradacin:

a) Temperatura: 70-120 C o 20 C por
debajo de su punto de fusin, durante 2
a 4 semanas.

b) Luz UV, luz fluorescente y/o humedad
relativa por un tiempo apropiado.

c) pH 1 a 2 y/o 10 a 12 y someterlas a
60-80 C por un tiempo apropiado.

d) Para lquidos y semislidos adicionar
perxido de hidrgeno.












Robustez








Blancos de muestra
(placebos) o muestras
adicionadas

Concentracin equivalente al
nivel medio estimado en el
intervalo de trabajo










8 muestras por
duplicado

a) Identificar de 4 a 7 factores que
puedan tener un efecto significativo en el
desempeo del mtodo y variar
ligeramente cada uno ellos.

b) Efectuar una serie de 8 combinaciones
de valores nominales con variaciones
deliberadas

c) Analizar una muestra por duplicado
con cada serie de combinaciones

d) Calcular las diferencias de las
mediciones de los subgrupos.

e) Graficar en una lnea los valores de las
diferencias de menor a mayor.

f) Calcular la desviacin estndar de las
diferencias (sDi).









a) Reportar los factores que ms
influyen en el resultado final.

b) Establecer si el mtodo es robusto
frente a las variaciones establecidas.





Incertidumbre





No aplica



Utilizar la
informacin
obtenida en el
proceso de
validacin.

a) Especificar el mensurando.

b) Identificar las fuentes de incertidumbre

c) Cuantificar los componentes de la
incertidumbre (u)

d) Calcular la incertidumbre estndar
combinada (uc)

e) Calcular la incertidumbre
expandida(Uexp)







Puede utilizarse como gua los criterios
establecidos en las referencias 2, 12,
14, 16 y 18.
Nota 1. Cuando no sea posible adicionar de manera directa el analito en la muestra, la adicin debe ser llevada a cabo en las primeras etapas.
Nota 2. Para la determinacin de: intervalo lineal y de trabajo, lmites de deteccin y cuantificacin, recuperacin, sesgo, repetibilidad y sensibilidad se debe aplicar el mtodo de
ensayo especfico por un mismo analista (el de ms experiencia en el anlisis) bajo las mismas condiciones.
Nota 3. Para mtodos fsicos cuantitativos la repetibilidad y reproducibilidad se calculan en base a la lectura directa.