FACULTAD DE MEDICINA HUMANA ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA INFORME DE PRCTICA N 05 ORGANELAS CELULARES CATEDRA: BIOLOGIA (PRACTICAS) DOCENTE: RUIZ HUAPAYAZA, JOE CICLO : I ALUMNO: VALLADARES PINEDO, IVAN BILLYE GUYSIPE
HUACHO PERU - 2012 INTRODUCCIN Se denomina organelas (o tambin orgnulos, organelos, organoides o mejor elementos celulares) a las diferentes estructuras contenidas en el citoplasma de las clulas, principalmente las eucariotas, que tienen una forma determinada. La clula procariota carece de la mayor parte de los orgnulos. Una de las caractersticas distintivas de las clulas eucariotas respecto de las procariotas es su alto grado de compartimentalizacin. La presencia de un ncleo bien diferenciado, con una envoltura nuclear que confina el material gentico al interior del ncleo, es slo un aspecto de la separacin espacial de funciones dentro de la organizacin celular. El citoplasma, a su vez, se encuentra recorrido en todas direcciones por un sistema de sacos y tbulos, cuyas paredes de membrana ofician de lmite entre la matriz citoplasmtica y la luz o cavidad del sistema. Este conjunto de estructuras membranosas, incluida la envoltura nuclear, se conoce como sistema de endomembranas o sistema vacuolar citoplasmtico. Las clulas presentan una organizacin molecular de tipo jerrquico. Las macromolculas se unen entre si en complejos supramoleculares las cuales se ordenan para formar organelas. Las mitocondrias se encuentran tanto en clulas vegetales como animales provocando la oxidacin de los nutrientes y la conversin de la energa en ATP. Los lisosomas actan en la digestin de materiales introducidos por fagocitosis o Pinocitosis hacia la clula. El sistema de endomembranas es asiento de enzimas que participan en la sntesis de diversos tipos de macromolculas: protenas y glucoprotenas en el REG, lpidos en el REL y glcidos complejos en el aparato de Golgi. A la vez, el SVC proporciona una va intracelular para la circulacin de sus productos y una seccin de empaque para la exportacin de algunos de ellos. Por ltimo, maneja un sistema de seales que le permite dar a los mismos el destino final para el cual fueron sintetizados, ya sea en el interior de la clula o en el medio extracelular. Algo as como un estampillado, un sistema de cdigos postales que gua a las molculas en la direccin correcta. La va de trnsito intracelular implica un transporte desde el RE hasta el aparato de Golgi; a partir de ste hay dos caminos posibles: hacia las vesculas de secrecin y desde all a la membrana plasmtica, o bien hacia los lisosomas. El presente informe trata de ampliar nuestros conocimientos tericos obtenidos en clases y de la informacin bibliogrfica, plasmados en la prctica, mejorando la apreciacin sobre el tema citado, del mismo modo diferenciar organelas celulares en tejidos especiales y preparados previamente.
PARTE N1: OBSERVACION DE CELULAS EPITELIALES PLANAS
I.-GENERALIDADES: El epitelio es el tejido formado por una o varias capas de clulas unidas entre s, que puestas recubren todas las superficies libres del organismo, y constituyen el revestimiento interno de las cavidades, rganos, huecos, conductos del cuerpo y la piel y que tambin forman las mucosas y las glndulas. Los epitelios tambin forman el parnquima de muchos rganos, como el hgado. Ciertos tipos de clulas epiteliales tienen vellos diminutos denominados cilios, los cuales ayudan a eliminar sustancias extraas, por ejemplo, de las vas respiratorias. El epitelio plano simple est compuesto por una capa nica de clulas planas firmemente unidas. Las clulas presentan un ncleo prominente y aplanado, por lo que es difcil observarlo. Se encuentra en los vasos sanguneos y linfticos (endotelio vascular) , en la cubierta del ovario, en los alvolos pulmonares, el asa de Henle, la cpsula de Bowman y tambin el mesotelio de las serosas. Se adapta a funciones de revestimiento y desplazamiento de las superficies entre s. Su funcin es principalmente de intercambio y lubricacin. El epitelio estratificado plano, est formado por varias capas de clulas. Existen dos tipos segn la presencia o ausencia de queratina: Epitelio plano estratificado queratinizado: Es el que forma la epidermis de la piel, en el que las clulas ms superficiales estn muertas y cuyo ncleo y citoplasma ha sido reemplazado por queratina, que forma una capa fuerte y resistente a la friccin, impermeable al agua y casi impenetrable por bacterias, adaptndose a funciones de proteccin. Epitelio plano estratificado no queratinizado: Presenta varias capas de clulas planas, de las cuales, las ms superficiales presentan ncleo y las ms profunda est en contacto con la lmina basal. Las ms profundas son cuboides, las del medio polidricas y las de la superficie son planas. Este tipo de epitelio lo encontramos en las mejillas, la lengua, la faringe, el esfago, las cuerdas vocales verdaderas y la vagina.
II.-OBJETIVOS: Observar las clulas epiteliales planas e identificacin del ncleo, de localizacin central, intensamente teida o plida en otras clulas. Identificacin del citoplasma amplio, con una coloracin dbilmente rosada verduzca Diferenciacin de los limites celulares Identificacin de estructuras con mayor y menor aumento
III.-MATERIALES E INSTRUMENTOS:
1.-Muestra frotis vaginal 2.-Microscopio
IV.- PROCEDIMIENTOS: 1.-Identificacion de la lamina previamente preparado con de frotis vaginal 2.-Observacion de muestra al microscopio 3.-Descripcion y dibujo de lo observado
V.-OBSERVACION:
40X
100X
VI.-OBSERVACION: Se Observa las clulas del ncleo teidas de color oscuro y el citoplasma de color azul pero de menor intensidad pudindose en algunos casos ver de color dbilmente rosada verdusco VII.-FUNDAMENTO DE LA PRCTICA Tincin Papanicolaou La tincin de Papanicolaou es un mtodo de tincin policrmico que consta de una tincin nuclear y un contraste citoplsmicos. Tiene como ventaja una buena denicin del detalle nuclear, evidenciando el patrn de cromatina; un aspecto transparente del citoplasma, que permite apreciar los grados de diferenciacin celular y actividad metablica. La tincin de Papanicolaou utiliza tres colorantes: la Hematoxilina que tie selectivamente los ncleos, el Orange G y la Eosina Alcohol 50 que tie los citoplasmas
PARTE N2: OBSERVACION DE DE SUSTANCIA CROMFILA O GRNULOS DE NISSL
I.-GENERALIDADES: Los cuerpos de Nissl o grnulos de Nissl o tambin denominada sustancia cromfila, son acumulaciones basfilas, que se encuentran en el citoplasma de clulas nerviosas. Reciben el nombre por Franz Nissl, neurlogo alemn (1860-1919). Estos grnulos son retculo endoplasmtico rugoso (con ribosomas dispuestos en espiral) y son sitios de sntesis de protenas. Los cuerpos de Nissl se encuentran en el pericarion y en la primera porcin de las dendritas, faltan en el axn y en el cono axnico. Su presencia deja notar una coloracin intensa, ya que tienen gran afinidad por los colorantes bsicos, esta basofilia se debe al contenido de ARN. La presencia de cuerpos de Nissl puede ser demostrada por una tincin selectiva desarrollada por Nissl que se basa en una tincin de anilina usada para marcar grnulos extranucleares de ARN. Presentan variantes bajo ciertas condiciones fisiolgicas y en el caso de condiciones patolgicas pueden disolverse y desaparecer (cariolisis).
II.-OBJETIVOS: Observar en el citoplasma de las neuronas del asta anterior grnulos de diferentes tamaos intensamente teidas vede azul. Identificacin de los ncleos amplio y plido, con nuclolos redondeados y prominentes y color azul Identificacin de estructuras con mayor y menor aumento
III.-MATERIALES E INSTRUMENTOS: 1.-Lamina de medula espinal 2.-Microscopio
IV.- PROCEDIMIENTOS: 1.-Identificacion de la lmina de medula espinal con coloracin de azul de toluidina 2.-Observacion de muestra al microscopio 3.-Descripcion y dibujo de lo observado
V.-OBSERVACION:
100X
VI.-OBSERVACION: Se Observa las clulas del ncleo teidas de color oscuro y el citoplasma de color azul pero de menor intensidad pudindose en algunos casos ver de color dbilmente rosada verdusco VII.-FUNDAMENTO DE LA PRCTICA Tincin Papanicolaou La tincin de Papanicolaou es un mtodo de tincin policrmico que consta de una tincin nuclear y un contraste citoplsmicos. Tiene como ventaja una buena denicin del detalle nuclear, evidenciando el patrn de cromatina; un aspecto transparente del citoplasma, que permite apreciar los grados de diferenciacin celular y actividad metablica. La tincin de Papanicolaou utiliza tres colorantes: la Hematoxilina que tie selectivamente los ncleos, el Orange G y la Eosina Alcohol 50 que tie los citoplasmas
Ntese la coloracin y en algunos casos los espacios que indicaran las astas menores y la diferenciacin del ncleo
Fundamento de tincin de azul de toluidina: El azul de toluidina es una materia colorante derivada del aminotoluol homloga de la anilina derivada del toluol que se emplea en histologa para la tincin de ncleos. En suspensin presenta un color azul y cuando se expone a estructuras ricas en enlaces amnicos (heparina, colindroitn sulfatos, etc.) las molculas de esta sustancia se ordenan tomando un color rojo, por efecto de su propiedad metacromtica.
A. Observacion del aparato de Golgi Materiales: Muestra de epididimo Lamina cubre y porta objetos Tincin de Ahoyama
Procedimiento: Luego de haber sacado una muestra del epitelio pseudoestratificado cilndrico con estereocilios del epiddimo, se coloca en una lamina cubreobjetos y se tien con tincin ahoyama. Este se teir de color marron haciendo el reconocimiento del aparato de Golgi
Ntese las clulas del epiddimo junto al aparato de Golgi en 100 x ambos teidos por Ahoyama. Acotndose que este epiddimo es perteneciente a un ratn
Fundamento de tincin de azul de toluidina: La Tincion de ahoyama tie la regin de organizacin nucleolar (NOR por sus siglas en ingls) asociada a protenas. Esto provoca una regin oscura donde la plata se deposita, denotando la actividad de los genes de ARNr dentro de la NOR. Los cromosomas 13, 14, 15, 21, y 22 poseen NORs. Adems, las NORs aumentan la actividad de la tincin argntica mas de 50 veces. Esta protena fue descubierta por Watson y Crick.