Objetivo. Construir un espectrofotmetro, caracterizar la fuente y el detector, y hacer
mediciones sencillas de absorcin. INTRODUCCIN. Cualquier espectrofotmetro incluye una fuente, un transductor, un amplificador, y un dispositivo de lectura. Tambin tienen un selector de longitud de onda con el fin de grabar absorbancias-longitud de onda especfica. Un diagrama de bloques de un espectrofotmetro se muestra en la figura:
Espectrofotmetros comerciales son instrumentos complejos que emplean componentes especializados y puede costar decenas de miles de dlares. Para este experimento, se va a construir un espectrofotmetro utilizando un circuito electrnico sencillo y componentes baratos. Fuente. Se construir una fuente visible usando un LED (diodo emisor de luz), una resistencia, una potencimetro (resistencia variable) y una fuente de alimentacin. La funcin de la resistencia variable es controlar la cantidad de corriente que fluye a travs del LED. Selector . La seleccin de longitud de onda se lleva a cabo utilizando un LED de color (rojo, azul, amarillo, o verde) o un LED blanco con un filtro de vidrio de color. Muestra. Cubetas de plstico desechables se utilizan para mantener la muestra. Transductor. El transductor ser una clula fotoelctrica, un dispositivo con una resistencia que vara con la luz intensidad. Amplificador. Conectar un circuito amplificador operacional sencillo que convierte la corriente que fluye a travs del transductor en una tensin. Display. Un multmetro se utiliza para mostrar la tensin producida por el amplificador operacional. Este voltaje es proporcional a la corriente que fluye a travs del transductor, que a su vez es proporcional a la intensidad de la luz medida por el transductor.
Fuente Selector Muestra Transductor Amplificador Display LED Color del Led Cubeta Fototransistor Amp. Operacional Voltmetro El circuito que se va a construir se muestra en la Figura
Segn la ley de Ohm (V = IR), el cambio del valor de la resistencia variable cambia la cantidad de corriente (I) que fluye a travs del LED puesto que el voltaje (V) se mantiene constante. El rango de longitud de onda del espectrofotmetro se puede cambiar mediante el uso de un LED de color diferente o mediante el uso de un LED blanco con un filtro. Como parte de este experimento, caracterizar la dependencia de la longitud de onda de la luz producida por la fuente con el fin de seleccionar la mejor fuente para el anlisis de una muestra desconocida. Un simple convertidor de corriente a voltaje se utiliza en el circuito detector. La corriente que fluye a travs de la transductor I(in) se convierte a una tensin de salida, V(out), que depende de la magnitud de la resistencia de realimentacin R(f):
Puesto que la corriente a travs del transductor es proporcional a la intensidad de la luz, la tensin de salida es tambin proporcional a la intensidad de la luz. Para medir la absorbancia de una solucin, entonces, se mide simplemente la tensin para un espacio vacio (VBlank) y una muestra (Vsample), la convierte a una transmitancia (T), y luego calcula la absorbancia (A):
La alineacin del LED y el transductor no es crtica, siempre y cuando sus posiciones relativas no lo hacen cambiar durante el curso de un experimento. La cubeta, sin embargo, debe ser estrictamente posicionada para evitar errores. Recordemos que el color de una solucin es el complemento del color de la luz que absorbe. Esto es de gran importancia en espectrofotometra, como la longitud de onda de anlisis debe ser absorbida por la molcula de inters. La siguiente tabla le ayudar a seleccionar la longitud de onda apropiada para el anlisis en este experimento.
PROCEDIMIENTO. Este procedimiento experimental tiene varias partes diferentes, pero no hay que hacer secuencialmente. Sin embargo, usted debe hacer la parte 4 al final. 1. Caracterizacin de la Fuente Construir la porcin de fuente del circuito, la seleccin de cualquiera de los LED. Ajuste la resistencia variable para que la luz del LED sea visible pero no demasiado brillante (se puede destruir el LED). 2. Construccin del Transductor Construir la parte de detector del circuito. Pruebe el circuito antes de continuar; el bloqueo del fototransistor debe hacer que el voltaje de salida caiga a cero. 3. Caracterizacin del espectrofotometro Seleccione un LED con una longitud de onda de salida coincide con el intervalo de absorcin de la solucin a medir. Montar el espectrofotmetro completo utilizando este LED. Apunte el LED directamente en el fototransistor, pero dejan un aprox. Separacin de 1 cm. (En la siguiente seccin se colocar la cubeta en este espacio.) Coloque todo el circuito dentro de la caja oscura. Ajuste el potencimetro para que Vout sea parecido pero que no exceda-10V. Debe registrar tanto la corriente y el voltaje. Ajuste el potencimetro de forma que la intensidad de la luz disminuye (es decir, Vout se hace menos negativa) y registre la corriente y la tensin. Repita este proceso hasta que tenga al menos 5 corriente-voltaje pares. 4. Mediciones de absorcin Nota: Cuando se hacen mediciones de absorcin, se debe evitar cualquier cambio en la alineacin del LED y el fototransistor. Una vez que estn posicionados de manera que una cubeta pueda fcilmente desplazarse en el espacio que hay entre ellos, no hacer ms ajustes. Adems, no ajuste el potencimetro durante estas mediciones. Coloque una cubeta que contiene un espacio en blanco en el espectrofotmetro y ajustar el potencimetro de modo que Vout est cerca-9V. Llenar las cubetas de plstico con la solucin Mida Vout para el vaco, y cada serie de soluciones con el espectrofotmetro en la caja oscura. Repetir dos veces para que tenga un total de 3 mediciones para cada solucin. Cada vez que realice una repeticin de medicin, asegrese de retirar y reemplazar la cubeta. (Esto ayudar a dar cuenta de errores de posicionamiento.). Para examinar el efecto de la luz difusa, repita este conjunto de medidas sin la tapa en la caja oscura.