1/10

ESTUDO DA ATIVIDADE ANTIOXIDANTE E ANTIMICROBIANA DE

EXTRATOS DE Bromelia balansae Mez E Eugenia uniflora L VISANDO
SUA APLICAO NA PRODUO DE COSMTICOS


H.F. Divensi*, J. H. B. de Arajo**

*Aluno da Universidade Tecnolgica Federal do Paran, cmpus Campo Mouro, Brasil.
** Professor da Coordenao de Engenharia Ambiental da Universidade Tecnolgica Federal do
Paran, cmpus Campo Mouro, Brasil

e-mail: ferdivensi@gmail.com



Resumo

Nesse trabalho determinou-se o teor de
fenis totais, a capacidade de sequestrar
radicais livres e a atividade
antimicrobiana dos extratos de folhas de
Eugenia uniflora L e da Bromelia
balansae Mez visando sua aplicao na
formulao de cosmticos.
Palavras-chave: fenis, radicais livres,
antimicrobiana, cosmticos.

Abstract

In this study we determined the total
phenolic content, the ability to sequester
free radicals and antimicrobial activity of
leaf extracts of Eugenia uniflora L and
Bromelia balansae Mez for their
application in the formulation of
cosmetics.
Keywords: phenols, free radicals,
antimicrobial, cosmetics.

Introduo

A flora nativa do Brasil possui
espcies que so potencialmente
produtoras de extratos para a fabricao
de frmacos e cosmticos. Com a
crescente preocupao das pessoas com
a melhoria da qualidade de vida e do bem
estar, atravs da elevao da autoestima
pessoal, essas pessoas sentem necessidade de
ficarem belas, cuidadas e protegidas,
assim, surge a necessidade e oportunidade de
desenvolvimento de novos produtos a partir da
ampla variedade de plantas existente no Brasil.
Nosso pas possui uma das
vegetaes mais ricas do mundo e usa diversas
plantas de sua flora para a fabricao de
cosmticos, que pode impulsionar a gerao de
empresas para a produo de novas
substncias, com seu cultivo sustentvel,
gerando empregos e elevao de renda para
setores da populao residentes em reas de
preservao, matas nativas, entre outras.
Visto que a aplicao de plantas na
formulao de frmacos e cosmticos de
grande benefcio para os seres humanos, cada
vez mais se investe em tecnologias que
aprimoram ou desenvolvam novas substncias
para posterior incorporao na formulao


2/10
dessas substncias na produo de
medicamentos e cosmticos.
Alm disso, cosmticos
naturais possuem a mesma finalidade
dos demais e, ainda, tm uma
caracterstica atrativa ao consumidor,
que preocupados com geraes futuras
ou at mesmo com seu conforto, tentam
de alguma forma agredir menos o meio
ambiente, bem como, encontrar o melhor
produto para seu corpo, o que faz da
cosmetologia uma busca incessante de
novos produtos para diferentes gostos e
aplicaes.
A formulao de cosmticos a
partir extratos vegetais significa
substituir, sempre que possvel,
substncias sintticas e de origem
animal, por derivados vegetais, onde
torna-se de extrema importncia realizar
um balanceamento lgico e coerente
entre as matrias-primas sintticas e
naturais, maximizando a ao
farmacolgica, afim de alcanar
melhores efeitos e tornando este em
cosmticos ecologicamente corretos,
biocosmticos e/ou cosmticos naturais ,
que no deixam de ter as mesmas
finalidades e/ou definio de cosmticos
propriamente ditos [1].
Assim, os cosmticos naturais
podem ter em sua formulao diferentes
plantas e partes destas, como flores,
frutos, sementes, folhas, entre outras, de onde
so extrados resinas, corantes, leos
essenciais e extratos, sendo que com a
expanso da demanda por produtos naturais, a
indstria reorientou-se para extratos e leos
essenciais [2].
Como prospeco de incorporao de
derivados vegetais em novos produtos
cosmticos, nesse trabalho foi estudada as
caractersticas antioxidantes e antimicrobianas
dos extratos das plantas, Bromelia balansae
Mez, pertencente famlia dos abacaxis
(Bromeliaceae), conhecida popularmente,
como gravat ou caraguat, cuja florao
ocorre entre dezembro e fevereiro, enquanto a
frutificao em janeiro, sendo que seus frutos
so utilizados na medicina popular contra tosse
e para amaciar feridas [3]. E a Eugenia
uniflora L, da famlia Myrtacea, conhecida
vulgarmente, como pitanga, que produz frutos
de sabor extico, contendo vitaminas A e C,
sendo reconhecida como alimento natural e
saudvel, portanto, podendo ser utilizada nas
misturas entre sucos de outras frutas, como
tambm pode ser utilizada como aditivo em
bebidas lcteas e, ainda, na forma de refresco
em p e nctares, alm disso, tem sua
frutificao de outubro a novembro e, floresce
de agosto a outubro [4];
Com este trabalho podemos mostrar
que esses extratos oriundos da flora nativa
podem posteriormente serem usados na
formulao de diversos produtos cosmticos.


3/10

Materiais e Mtodos

O desenvolvimento deste trabalho foi
dividido em coleta das plantas, extrao
de princpios ativos, anlises qumicas e
microbiolgicas e interpretao dos
resultados.
Coleta de plantas As folhas do
Gravat e da Pitanga foram obtidas nos
fundos da Universidade Tecnolgica
Federal do Paran, campus Campo
Mouro, BR 369 - km 0,5, no municpio
Campo Mouro sada para Cascavel.
A escolha das plantas a serem
testadas para incorporao de novos
cosmticos foi feita com a ajuda do
professor Dr. Marcelo Galeazzi
Caxamb e professor Dr. Jos Hilton
Bernardino de Arajo, de acordo com a
disponibilidade no local e perodo de
frutificao e florao.
Alm disso, as espcies Eugenia
uniflora L e Bromelia balansae Mez
esto registradas com os nmeros de
Voucher 6368 e 9902, respectivamente,
no Herbrio HCF da Universidade
Tecnolgica Federal do Paran, cmpus
Campo Mouro.

Extrao de princpios ativos As
folhas de Gravat e Pitanga foram
coletadas, lavadas, congeladas e secas
por liofilizao a -60C, durante 24 horas, aps
isso, as mesmas foram trituradas para depois
sofrerem extrao de seus princpios ativos
utilizando metanol. Trs extraes foram
realizadas sob agitao em homogeneizador
usando 0,5 g de amostra e 10 mL de metanol,
durante um perodo de 24 horas.
Depois de homogeneizado, os tubos
contendo o extrato foram centrifugados por 15
minutos a 5000 rpm e, ento, separando o
sobrenadante, que era armazenado em tubos
refrigerados para posterior realizao das
anlises.
Ensaio de determinao de fenis totais
A quantificao de compostos fenlicos foi
realizada por Folin-Ciocalteau (FC), mtodo
que envolve a reduo do reagente pelos
compostos fenlicos das amostras com
concomitante formao de um complexo azul
cuja intensidade aumenta linearmente a 765
nm, conforme descrito por [5].
Os extratos foram dissolvidos em metanol,
sendo retirado 0,1 mL da amostra e
adicionado, 7 mL de gua destilada, seguido
de 0,5 mL de reagente FC e, ento esperado de
1 a 8 minutos temperatura ambiente, aps
isso, foi adicionado 1,5 mL de soluo de
carbonato de sdio e completado o volume de
um balo de 10 mL com gua destilada at o
menisco, deixando em repouso por 2 horas
sem contato e isento de luminosidade.
Finalmente, aps esse perodo, uma
alquota da soluo era transferida para uma


4/10
cubeta de plstico de 04 cm e medido as
respectivas absorbncias a 765 nm em
espectrofotmetro, usando gua como o
branco de referncia.
Alm disso, a curva padro foi
preparada com cido glico, sendo que
os resultados obtidos pelo
espectrofotmetro foram jogados na
equao da reta (frmula abaixo),
encontrados o valores de x e ento
interpretados.
y = 0,0011x + 0,0105 (1)
A quantificao dos compostos
fenlicos nos extratos foi realizada em
triplicata.
Determinao da capacidade de
seqestrar radicais livres O radical
estvel 2,2-difenil-1-picril hidrazil
(DPPH) tem sido amplamente utilizado
para avaliar a capacidade de
antioxidantes naturais em sequestrar
radicais livres.
Para a determinao da
capacidade de sequestrar radicais livres,
foram lidas as absorbncias das amostras
dos extratos da Pitanga e do Gravat, do
branco e do controle da seguinte forma:
Para absorbncia da amostra
usou-se 1,0 mL de DPPH, 2,5 mL de
extrato. Para medir a absorbncia do
controle utilizou-se 1,0 mL de DPPH e
2,5 mL metanol. Antes da leitura, as
amostras eram deixadas por 30 minutos
no escuro e ento lidas em espectrofotmetro a
518 nm.
A capacidade de sequestrar radical
livre foi expressa como percentual de inibio
de oxidao do radical e calculado conforme
frmula abaixo:

control
blank sample
Abs
x Abs Abs
AA
100 ) (
100 %
(2)
Onde Abs sample a absorbncia da
amostra, Abs blank a absorbncia do branco
e Abs control a absorbncia do controle.
Determinao da atividade
antimicrobiana Para os testes de atividade
antimicrobiana foram utilizadas cepas da
bactria Staphylococcus aureus e Escherichia
coli. Para a utilizao dos microrganismos nos
testes de atividade antimicrobiana, as cepas
eram repicadas para tubos de ensaio contendo
caldo nutriente e incubadas em estufa por 24h
a 37C para reativao.
O meio de cultivo utilizado foi o gar
Muller-Hinton, este meio foi formulado no
laboratrio de microbiologia do Campus,
seguindo as indicaes do Manual Descrio
dos Meios de Cultura Empregados nos Exames
Microbiolgicos, elaborado pela Agncia
Nacional de Vigilncia Sanitria [6].
Aps o preparo do meio, a soluo
contendo caldo nutriente e microrganismos era
padronizada de acordo com a escala de 0,5 de
Mc Farland, ou seja, a mesma foi lida a
absorbncia a 625 nm, ajustada com soluo
salina estril at obter a leitura de 0,08 a 0,1,
com a finalidade de que a turbidez de ambas


5/10
suspenses bacterianas fossem iguais,
sendo padronizadas para que
correspondessem a uma concentrao de
10
8
UFC/mL.
Os inculos foram espalhados sobre
as placas nas diluies de 1:10.000 para
Staphylococcus aureus e Escherichia
coli, com o auxilio do swab, alm disso,
sobre estes foram colocados os discos de
papel previamente esterilizados de
acordo com a metodologia de Kirby-
Bauer, estes tinham rea equivalente a
20mm
2
e eram embebidos com 20L das
solues dos extratos do Gravat,
Pitanga e do antibitico cloranfenicol,
usado como padro para posterior
comparao. A concentrao usada desse
antibitico foi de 1,0mg/mL, dissolvido
em etanol.
As placas foram incubadas a 37C
durante 24 horas em posio invertida, e
ento, realizadas leituras visuais
observando-se os halos de inibio de
crescimento bacteriano e quantificando
seu dimetro em milmetros com o
auxilio de paqumetro.
Aps os testes de atividade
antimicrobiana, todo o material
microbiolgico utilizado sofria
inativao em autoclave a 121C por 30
min. para evitar contaminao.


Resultados

Determinao do teor de fenis totais
O mtodo de Folin-Ciocalteau permite
quantificar os compostos fenlicos presentes
nas amostras. A Tabela 1 demostra a
quantidade total de fenis dos extratos
provenientes das folhas do Gravat e da
Pitanga.

Tabela 1. Fenis totais presentes nos
extratos

Extrato da Folha Fenlicos totais (gAG/mL
extrato)
Pitanga 4384
Gravat 520

Determinao da capacidade de
sequestrar radicais livres A capacidade de
sequestrar radicais livres em relao radical
estvel 2,2-difenil-1-picril hidrazil (DPPH)
dos extratos das folhas de Gravat e Pitanga
demonstrada nas Figuras 1 e 2.


0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
12,5 50 100 200


6/10
Figura 1. Atividade antioxidante (%) dos
extratos das folhas de Pitanga pelo mtodo do
sequestro do radical livre DPPH.

Figura 2. Atividade antioxidante (%) dos
extratos das folhas do Gravat pelo mtodo do
sequestro do radical livre DPPH.

Determinao da atividade
antimicrobiana Os ensaios de
atividade antimicrobiana demonstraram
que apenas em concentraes elevadas
ocorreu inibio do crescimento dos
microrganismos Staphylococcus aureus
e Escherichia coli, (Tabelas 4 e 5).


Tabela 4: Atividade antimicrobiana da
Pitanga.
Conc
Pitang
a
(ppm)
Halo
inibi
o E.
coli
(cm)
Halo
control
e E.
coli
(cm)
Halo
inibio
S.aureu
s (cm)
Halo
control
e S
aureus
(cm)
200 2,2 2,2 2,4 2,3
100 2,1 2,2 2,1 2,3
50 - 2,2 - 2,3
12,5 - 2,2 - 2,3

Tabela 5: Atividade antimicrobiana do
Gravat.
Conc
Gravata
(ppm)
Halo
inibio
E. coli
Halo
controle
E. coli
Halo
inibio
S.aureus
Halo
controle S
aureus
(cm) (cm) (cm) (cm)
200 2,0 2,2 1,9 2,3
100 1,9 2,2 1,9 2,3
50 - 2,2 - 2,3
12,5 - 2,2 - 2,3

Discusso

Teor de fenis totais O extrato da
Pitanga apresentou o maior contedo de fenis
totais comparado com o do Gravat (Tabela 1).
De acordo com [7], a espcie Malus
everest, vulgo ma polinizadora, que possui
1444 g/mL torna esta interessante para a
industrializao de alimentos funcionais ou
indstria no alimentcia, como a de
cosmticos. Pode-se verificar que o extrato da
Pitanga possui 3 vezes mais quantidade de
fenlicos totais que a ma polinizadora.
Uma vez que a quantidade de fenlicos est
relacionada com a melhor conversao do
cosmtico e com a preveno do
envelhecimento, ento, quanto maior a
presena destes, melhor sua aplicao, ou seja,
os compostos fenlicos tm influencia na
qualidade dos cosmticos, uma vez que
possuem em sua composio qumica
propriedades antioxidantes [8].
O contedo destas propriedades est
relacionado ao estgio de maturao, pois, de
acordo com [9], a capacidade de sequestro de
radicais do extrato da fruta ligada ao
contedo de fenlicos como consequncia do
avano da maturao e a interrupo de
radicais livres, o que significa que so
eficientes na preveno da autoxidao, ou
0
10
20
30
40
50
60
70
80
12,5 25 50 100


7/10
seja, previnem a decomposio de
matrias orgnicos e inorgnicos que
podem causar odores desagradveis,
chamados de rano, alm disso,
presentes em plantas, reduzem a
oxidao lipdica em tecidos, vegetal e
animal, conservando a qualidade de
alimento, bem como, de cosmticos
quando a eles incorporados, e
principalmente, esto associados ao
envelhecimento e/ou danos celulares
[10].
Capacidade de seqestrar radicais
livres - Observando os grficos podemos
verificar que a capacidade de sequestrar
radicais livres se eleva medida que a
concentrao dos extratos tambm
elevada, com os maiores valores sendo
obtidos na concentrao de extrato de
100 ppm para o Gravat e de 200 ppm
para a Pitanga, sendo 73% e 86% de
inibio de radicais livres,
respectivamente.
De acordo com [11], os radicais livres
so molculas produzidas pelo
metabolismo celular, causadoras de
mudanas na pele, como
desenvolvimento de rugas de menor e
maior profundidade, manchas, perda de
luminosidade, perda de elasticidade e da
flacidez, perda de vio e aumento do
ressecamento da pele [12]; [13]; [14] e, a
percentagem de atividade antioxidante
quanto so eficientes na inibio destes, bem
como, na preveno da autoxidao, ou seja,
estes tambm podem prevenir a decomposio
de materiais orgnicos e inorgnicos que
podem causar odores desagradveis, chamados
de rano, presentes em plantas, o que pode
conservar a qualidade do alimento e do
cosmtico [11].
Consequentemente, quanto maior a
percentagem de atividade antioxidante, maior
a capacidade de prevenir a autoxidao do
cosmtico e, principalmente, a capacidade de
inibir os radicais livres, o que significa que
estudos podem ser realizados para verificar a
possibilidade de incorporao de extratos das
folhas da Pitanga e do Gravat na produo de
cosmticos [15].
Atividade antimicrobiana - As amostras
contendo a Pitanga e o Gravat inibiram o
crescimento das cepas Staphylococcus aureus
e Escherichia coli, em concentraes maiores,
alm disso, o extrato de Pitanga apresentou
melhor desempenho que o Gravat, pois seus
halos de inibio foram maiores.
Os resultados de inibio para o controle,
antibitico Cloranfenicol, apresentam halos de
inibio com dimetro mdio de 2,2mm para a
Escherichia coli e para 2,3 mm para a
Staphylococcus aureus.
A capacidade de inibir o crescimento de tais
organismos de fundamental importncia na
formulao de cosmticos, uma vez que estes
quando no inibidos podem causar produo


8/10
de substancias toxicas, irritao e
infeco quando em contato com a pele,
alm de deteriorao do cosmtico [16].

Concluso

Nosso pas possui uma flora rica e
diversificada da qual podemos obter
princpios ativos que podem ser
utilizados na produo de alimentos,
cosmticos ou novos frmacos. Em
especial, foram estudadas variedades da
Pitanga silvestre e do Gravat, que
mostraram um elevado potencial
antioxidante, com destaque para a
pitanga, alm de apresentarem um teor
de compostos fenlicos que do
caractersticas interessantes para seu uso
na formulao de novos produtos,
principalmente em formulaes
cosmticas, agregando valor a essas
plantas.

Agradecimentos

Para a realizao do projeto, tivemos
o apoio da UTFPR, com concesso de
bolsa atravs do Programa de Inovao
da PROREC.

Referncias

[1] SALVAGNINI, L. E.; MIGLIATO, K. F.;
ISAAC, V. L. B.; CORREA, M. A.;
SALGADO, H. R. N.; PIETRO, R. C. L. R.
Evaluation of efficacy of preservatives
associated with Achillea millefolium L. extract
against Bacillus subtilis. Braz. J. Microbiol.
So Paulo, v. 37, n. 1, 2006. Disponvel em:
<http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_ar
ttext&pid=S151783822006000100014&lng=e
n&nrm=iso>. Acesso em: 28 set. 2011.
[2] SANTANA, A.; OKAMOTTO,P. T.;
BARBOZA, L. C.; SANTOS, C. A. dos;
FIGUEIREDO, L. C. de P.; GRACIOSO, F.;
ROSSITER, R.; ZITZ, M. M.; MAYANA, P.;
GALLUCCI, L.; OLIVEIRA, M. R. D.;
POSER, D. V.; CUNHA, R. D. Informaes
de Mercado sobre Cosmticos Base de
Produtos Naturais - SEBRAE - Servio
Brasileiro de Apoio s Micro e Pequenas
Empresas, relatrio completo, 2007.
Disponvel em:
<http://www.biblioteca.sebrae.com.br/bds/bds.
nsf/3e9d015cd05409e703256c6e005f3408/8ca
5fd46d529b9d28325747300460ef0/$FILE/NT
00038A6A.pdf>. Acesso em: 29 set. 2011.
[3] COELHO, R. G.; COUTINHO, I. D.;
HONDA, N. K.; BRUM, R. L.; CARDOSO,
C. A. L. Flavonis glicosilados e avaliao da
atividade antioxidante de Bromelia balansae
(Bromeliaceae). Sociedade Brasileira de
Qumica ( SBQ), 31 Reunio Anual da
Sociedade Brasileira de Qumica, 20--.
Disponvel em:


9/10
<http://sec.sbq.org.br/cdrom/31ra/resum
os/T0341-2.pdf>. Acesso em: 27 set.
2011.
[4] BEZERRA, J. E. F.; LEDERMAN, I.
E.; FREITAS, E. V. de; SILVA, J. F. da
Jr. Propagao de gentipos de
Pitangueira (Eugenia uniflora L.) pelo
mtodo de enxertia de garfagem no topo
em fenda cheia. Rev. Bras. Frutic.,
Jaboticabal, v. 24, n. 1, abr. 2002
.Disponvel em:
<http://www.scielo.br/pdf/rbf/v24n1/991
7.pdf>. Acesso em 28 set. de 2011.
[5] SINGLETON, V. L.; ROSSI, J. A.
Jr. Colorimetry of total phenolics with
phosphomolybdic-phosphotungstic acid
reagents. Amer. J. Enol. Viticult. v.16,
p. 144-158, 1965.
[6] BRASIL ANVISA. Descrio dos
Meios de Cultura Empregados nos
Exames Microbiolgicos. Dirio Oficial
da Unio; Poder Executivo, D.O.U.
2002. Disponvel em: <
http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/
microbiologia/mod_4_2004.pdf>.
Acesso em: 28 set 2011.
[7] GULARTE, J. P. Do A.; PEREIRA,
M. C.; VIZZOTTO, M. Compostos
Fenlicos Totais e Atividade
Antioxidante em Produtos Da Cadeia
Produtiva Da Ma. XVI Congresso de
Iniciao Cientfica, 2007. Disponvel
em
<http://www.ufpel.edu.br/cic/2007/cd/pdf/CA/
CA_01631.pdf>. Acessado 28 set. 2011.
[8] SCOTTI, L.; SCOTTI, M. T.; CARDOSO,
C.; PAULETTI, P.; CASTRO-GAMBOA, I.;
BOLZANI, V. da S.; VELASCO, V. R.;
Menezes, C. M. de S.; FERREIRA, E. I.
Modelagem molecular aplicada ao
desenvolvimento de molculas com atividade
antioxidante visando ao uso cosmtico. Rev.
Bras. Cienc. Farm. vol.43 no.2 So
Paulo Apr./June 2007. Disponvel em
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_artt
ext&pid=s1516-93322007000200002>.
Acessado em: 01 mai. 2012.
[9] SOUSA, C. M. de; SILVA, H. R. e;
VIEIRA, G. M. Jr.; AYRES, M. C. C.;
COSTA, C. L. S. da; ARAJO, D. S.;
CAVALCANTE, L. C. D.; BARROS, E. D.
S.; ARAJO, P. B. de M.; BRANDO, M. S.
e CHAVES, M. H. Fenis Totais E Atividade
Antioxidante De Cinco Plantas Medicinais.
Quim. Nova, Vol. 30, No. 2, 351-355, 2007.
Disponvel em
<http://www.scielo.br/pdf/qn/v30n2/20.pdf>.
Acessado em 01 de mai. de 2012.
[10] BRAGA, G. K. Estudo de Estabilidade -
Comparao entre a Regulao Brasileira e a
Harmonizada da Unio Europia, do Japo e
dos Estados Unidos da Amrica (EUA) - Parte
II: Fotoestabilidade, 2010. Revista Frmacos
& Medicamentos. Disponvel em
<http://www.racine.com.br/industria-
cosmetica/portal-racine/setor-


10/10
industrial/industria-cosmetica/estudo-de-
estabilidade-comparacao-entre-a-
regulacao-brasileira-e-a-harmonizada-
da-uniao-europeia-do-japao-e-dos-
estados-unidos-da-america-eua-parte-ii-
fotoestabilidade>. Acessado em 03 mai.
de 2012.
[11] RIBEIRO, C.J. Cosmetologia
aplicada a Dermoesttica. 1. ed. So
Paulo: Pharmabook, 2006.
[12] BUCHLI, L. Radicais livres e
antioxidantes. Cosmetics & Toiletries,
So Paulo, v. 14, n. 2, p. 54-57, mar./abr.
2002.
[13] DUARTE, A. C. Semiologia
imunolgica nutricional. Rio de Janeiro:
Axcel Books, 2003. 253p.
[14] OLIVEIRA, J. M. Fundamentos dos
radicais livres. Cosmetics & Toiletries,
So Paulo, v. 14, n. 2, p. 40-45, mar./abr.
2002.
[15]FREIS, A. T.; FRASSON, A. P. Z.
Avaliao Da Atividade Antioxidante
De Cosmticos Anti-idade. REVISTA
CONTEXTO & SADE IJU
EDITORA UNIJU v. 10 n. 19
JUL./DEZ. 2010 p. 17-23. Disponvel
em
<http://www.google.com/url?sa=t&rct=j
&q=&esrc=s&frm=1&source=web&cd=
1&ved=0CFEQFjAA&url=http%3A%2
F%2Fwww1.unijui.edu.br%2FPortal%2
FModulos%2Frevistas%2F%3FrfSLZsN
TiWtEKgSSld6ZUnuml85ADWxjYLUU4b9Q
1ulcxxvyyyO__SLA__l__SLA__5AvyhLW5j
veXOki__PLS__SChJ0XVZFgb0S__SLA__zI
VB0zpxJPk5RrL6MXXarxDfC7FTRyjeA__S
LA__x1__SLA__2XZS5Ld%3D&ei=QtTkT4
7rJePu0gHYyYyPCg&usg=AFQjCNGNQtmiJ
Pao5aZbHyM4T6BZaogBCQ&sig2=JrXahW
ToGaQvVaaG-gC-3w>. Acessado em 03 mai.
de 2012.
[16] RODRIGUES, D. D. P. Microbiologia de
cosmticos - Natura Inovao E Tecnologia
De Produtos Gerncia De Avaliao De
Produtos, 2011. Disponvel em
<http://www.eurofins.com.br/media/3534672/
cosmeticos.pdf>. Acessado em 05 mai. 2012.