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El microscopio (del prefijo micro- y el sufijo -scopio, y estos del prefijo griego - micro-, muy pequeo, y la raz griega -

scop-, ver)
[1]
es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. El tipo ms
comn y el primero que se invent es el microscopio ptico. Se trata de un instrumento ptico que contiene dos o ms lentes que
permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refraccin. La ciencia que investiga los objetos pequeos
utilizando este instrumento se llama microscopa.

Microscopio compuesto fabricado hacia 1751 por Magny. Proviene del laboratorio del duque de Chaulnes y pertenece al Museo de
Artes y Oficios, Pars.
El microscopio fue inventado por Zacharias Janssen en 1590. En 1665 aparece en la obra de William Harvey sobre la circulacin
sangunea al mirar al microscopio los capilares sanguneos y Robert Hooke publica su obra Micrographia.
En 1665 Robert Hooke observ con un microscopio un delgado corte de corcho y not que el material era poroso, en su conjunto,
formaban cavidades poco profundas a modo de celditas a las que llam clulas. Se trataba de la primera observacin de clulas
muertas. Unos aos ms tarde, Marcello Malpighi, anatomista y bilogo italiano, observ clulas vivas. Fue el primero en estudiar
tejidos vivos al microscopio.
A mediados del siglo XVII un holands, Anton van Leeuwenhoek, utilizando microscopios simples de fabricacin propia, describi por
primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glbulos rojos. El microscopista Leeuwenhoek, sin ninguna preparacin cientfica,
puede considerarse el fundador de la bacteriologa. Tallaba l mismo sus lupas, sobre pequeas esferas de cristal, cuyos dimetros no
alcanzaban el milmetro (su campo de visin era muy limitado, de dcimas de milmetro). Con estas pequeas distancias focales
alcanzaba los 275 aumentos. Observ los glbulos de la sangre, las bacterias y los protozoos; examin por primera vez los glbulos
rojos y descubri que el semen contiene espermatozoides. Durante su vida no revel sus mtodos secretos y a su muerte, en 1723, 26
de sus aparatos fueron cedidos a la Royal Society de Londres.
Durante el siglo XVIII continu el progreso y se lograron objetivos acromticos por asociacin de Chris Neros y Flint Crown obtenidos
en 1740 por H. M. Hall y mejorados por John Dollond. De esta poca son los estudios efectuados por Isaac Newton y Leonhard Euler. En
el siglo XIX, al descubrirse que la dispersin y la refraccin se podan modificar con combinaciones adecuadas de dos o ms medios
pticos, se lanzan al mercado objetivos acromticos excelentes.
Durante el siglo XVIII el microscopio tuvo diversos adelantos mecnicos que aumentaron su estabilidad y su facilidad de uso, aunque no
se desarrollaron por el momento mejoras pticas. Las mejoras ms importantes de la ptica surgieron en 1877, cuando Ernst Abbe
public su teora del microscopio y, por encargo de Carl Zeiss, mejor la microscopa de inmersin sustituyendo el agua por aceite de
cedro, lo que permite obtener aumentos de 2000. A principios de los aos 1930 se haba alcanzado el lmite terico para los
microscopios pticos, no consiguiendo estos aumentos superiores a 500X o 1,000X. Sin embargo, exista un deseo cientfico de observar
los detalles de estructuras celulares (ncleo, mitocondria, etc.).
El microscopio electrnico de transmisin (TEM) fue el primer tipo de microscopio electrnico desarrollado. Utiliza un haz de electrones
en lugar de luz para enfocar la muestra consiguiendo aumentos de 100.000X. Fue desarrollado por Max Knoll y Ernst Ruska en Alemania
en 1931. Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrnico de barrido








Tipos de microscopios

Microscopio electrnico de barrido.
Microscopio ptico
Microscopio simple
Microscopio compuesto
Microscopio de luz ultravioleta
Microscopio de fluorescencia
Microscopio petrogrfico
Microscopio de campo oscuro
Microscopio de contraste de fases
Microscopio de luz polarizada
Microscopio confocal
Microscopio electrnico
Microscopio electrnico de transmisin
Microscopio electrnico de barrido
Microscopio de iones en campo
Microscopio de sonda de barrido
Microscopio de efecto tnel
Microscopio de fuerza atmica
Microscopio virtual

Un microscopio ptico es un microscopio basado en lentes pticos. Tambin se le conoce como microscopio de luz, (que utiliza luz o
"fotones") o microscopio de campo claro. El desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton van Leeuwenhoek.
Los microscopios de Leeuwenhoek constaban de una nica lente pequea y convexa, montada sobre una plancha, con un mecanismo
para sujetar el material que se iba a examinar (la muestra o espcimen). Este uso de una nica lente convexa se conoce como
microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros aparatos pticos.
Microscopio simple
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Microscopio simple de Leeuwenhoek. La muestra se colocaba en la punta del tornillo, en frente de la nica lente, de la que destaca la
pequeez de su dimetro.
Un microscopio simple es aquel que utiliza una sola lente para ampliar las imgenes de los objetos observados. Es el microscopio
ms bsico. El ejemplo ms clsico es la lupa.
[1]
El microscopio ptico estndar utiliza dos sistemas de lentes alineados.
Microscopio compuesto
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Objetivos de un microscopio moderno.
Un microscopio compuesto tiene ms de una lente objetiva. Los microscopios compuestos se utilizan especialmente para examinar
objetos transparentes, o cortados en lminas tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imgenes de
objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio ptico comn est conformado por tres sistemas:
El sistema mecnico est constituido por una palanca que sirve para sostener, elevar y detener los instrumentos a observar.
El sistema de iluminacin comprende un conjunto de instrumentos, dispuestos de tal manera que producen las ranuras de luz.
El sistema ptico comprende las partes del microscopio que permiten un aumento de los objetos que se pretenden observar
mediante filtros llamados "de antigel subsecuente".
Microscopio de luz ultravioleta
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Microscopio de luz fluorescencia - Las lentes del objetivo, que habitualmente se componen de vidrio se sustituyen por lentes de
cuarzo, y la iluminacin se produce por lmparas de mercurio. No usa filtros y se observa en placas fotogrficas. La variedad de
fluorescencia, si usa filtros, y la observacin es directa.
Microscopio de luz ultravioleta depende de la absorcin de esa luz por las molculas de la muestra. La fuente de luz ultravioleta
tiene una longitud de onda de 200 nm, por lo tanto puede alcanzar una resolucin de 100 nm. La microscopia ultravioleta no es muy
diferente del funcionamiento de un espectrofotmetro pero sus resultados son registrados en fotografas. La muestra no se puede
observar directamente a travs del ocular porque la luz ultravioleta puede daar la retina. El mtodo sirve para detectar cidos
nucleicos, protenas que contienen determinados aminocidos. Mediante longitudes de ondas especficas para la iluminacin se puede
obtener mediciones espectrofotomtricas para cuantificar el ADN y el ARN de cada clula.
El microscopio de luz ultravioleta utiliza el rango ultravioleta del espectro luminoso en lugar del rango visible, bien para aumentar la
resolucin con una longitud de onda menor o para mejorar el detalle absorbiendo selectivamente distintas longitudes de onda de la
banda ultravioleta. Dado que el vidrio no transmite las longitudes de onda ms cortas de la luz ultravioleta, los elementos pticos de
estos microscopios estn hechos con cuarzo, fluorita o sistemas de espejos aluminizados. Adems, dado que la radiacin ultravioleta es
invisible, la imagen se muestra con fosforescencia (vase Luminiscencia), en fotografa o con un escner electrnico. El microscopio de
luz ultravioleta se utiliza en la investigacin cientfica.Fue creado por Sebastin das en 1954
Microscopio de fluorescencia
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El microscopio de fluorescencia Olympus BX61, acoplado con una cmara digital.
El microscopio de fluorescencia... es una variacin del microscopio de luz ultravioleta en el que los objetos son iluminados por rayos
de una determinada longitud de onda. La imagen observada es el resultado de la radiacin electromagntica emitida por las molculas
que han absorbido la excitacin primaria y reemitido una luz con mayor longitud de onda. Para dejar pasar slo la emisin secundaria
deseada, se deben colocar filtros apropiados debajo del condensador y encima del objetivo. Se usa para detectar sustancias con
autofluorescencia (vitamina A) o sustancias marcadas con fluorocromos.

Microscopio de luz polarizada
El microscopio petrogrfico, microscopio polarizador o de luz polarizada es un microscopio ptico al que se le han aadido dos
polarizadores (uno entre el condensador y la muestra y el otro entre la muestra y el observador). El material que se usa para los
polarizadores son prismas de Nicol o prismas de Glan-Thompson (ambos de calcita), que dejan pasar nicamente la luz que vibra en un
nico plano (luz polarizada). Esta luz produce en el campo del microscopio claridad u oscuridad, segn que los dos ncoles estn
paralelos o cruzados.
Algunos compuestos inorgnicos responden al efecto de la luz, stos tienen un alto grado de orientacin molecular (sustancias
anistropas), que hace que la luz que los atraviesa pueda hacerlo en determinados planos vibratorios atmicos.
El prisma de Nicol permite el paso de luz en un solo plano, as la calcita gira la posicin de polarizacin, facilitando la identificacin de
sustancias que extinguen la luz. Al fenmeno de extincin de luz causado por estos planos atmicos y orientaciones moleculares se
llama birrefringencia.
Este tipo de microscopio se usa para poder identificar sustancias cristalinas (minerales) o fibrosas (como el citoesqueleto), sustancia
amiloide, asbesto, colgeno, cristales de uratos, queratina, slice, polen, etc.
Algunos tejidos vivos pueden ser observados bajo microscopa ptica de luz polarizada debido a la birrefrigencia provocada por la
orientacin de sus fibroinas,
[1]
tales como la actina o miosina. Algunos animales tales como los Anisakis pueden observarse mediante
esta tcnica.


Tronco de Anisakis visto al microscopio ptico con polarizadores cruzados. 100x aumentos. La birrefrigencia se da por la orientacin de
las fibroinas proteicas componentes de los tejidos blandos de estos animales.
El primer microscopio de polarizacin completa fue construido en 1830 por Amici
Microscopio confocal
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Principios en los que se basa la microscopa confocal.
El microscopio confocal es un microscopio que emplea una tcnica ptica de imagen para incrementar el contraste y/o reconstruir
imgenes tridimensionales utilizando un "pinhole" espacial (colimador de orificio delimitante) para eliminar la luz desenfocada o
destellos de la lente en especmenes que son ms gruesos que el plano focal.
[1]
El pinhole es una apertura localizada delante del
fotomultiplicador que evita el pasaje de fluorescencia de las regiones de la muestra que no estn en foco, la luz que proviene de
regiones localizadas por encima o por debajo del plano focal no converge en el pinhole y no es detectada por el fotomultiplicador. Esta
tcnica ha ido adquiriendo cada vez mayor popularidad entre las comunidades cientfica e industrial. Se aplica tpicamente en las
ciencias biolgicas y en la inspeccin de semiconductores.
Microscopio electrnico
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Microscopio electrnico.
Un microscopio electrnico es aqul que utiliza electrones en lugar de fotones o luz visible para formar imgenes de objetos
diminutos. Los microscopios electrnicos permiten alcanzar ampliaciones hasta 5100 veces ms potentes que los mejores microscopios
pticos, debido a que la longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los fotones "visibles".
El primer microscopio electrnico fue diseado por Ernst Ruska y Max Knoll entre 1925 y 1930, quienes se basaron en los estudios de
Louis-Victor de Broglie acerca de las propiedades ondulatorias de los electrones.
Un microscopio electrnico, como el de la imagen, funciona con un haz de electrones generados por un can electrnico, acelerados
por un alto voltaje y focalizados por medio de lentes magnticas (todo ello al alto vaco ya que los electrones son absorbidos por el
aire). Un rayo de electrones atraviesa la muestra (debidamente deshidratada y en algunos casos recubierta de una fina capa metlica
para resaltar su textura) y la amplificacin se produce por un conjunto de lentes magnticas que forman una imagen sobre una placa
fotogrfica o sobre una pantalla sensible al impacto de los electrones que transfiere la imagen formada a la pantalla de un ordenador.
Los microscopios electrnicos producen imgenes sin ninguna clase de informacin de color, puesto que este es una propiedad de la
luz y no hay una forma posible de reproducir este fenmeno mediante los electrones; sin embargo, es posible colorizar las imgenes
posteriormente, aplicando tcnicas de retoque digital a travs del ordenador.