TEMA-1 INTRODUCCIN

1 DESARROLLO HISTRICO.
-La microbiologa es la ciencia que estudia los microorganismos, y un microorganismo
o germen es un ser vivo diminuto y para verlo se necesita un microscopio.
-Las acciones perjudiciales de un microorganismo pueden ser las enfermedades, que
son producidas por un agente patgeno, pero los agentes patgenos solo son un
pequeo porcentaje de todos los microorganismos y son muchos mas los que producen
efectos benefciosos.
-Entre las acciones benefciosas que estos producen se puede dar el ejemplo de los
protozoos marinos los cuales son el primer eslabn de la cadena alimenticia de
algunos ecosistema acuticos, otro ejemplo tambin podra ser el de algunas bacterias
que se encuentran en nuestro organismo, las cuales son las responsables de la sntesis
de la vitamina B que acta en el metabolismo o de la vitamina K la cual interviene en
la coagulacin. Tambin encontramos microorganismos en el suelo los cuales son los
responsables de la transformacin de materia inorgnica en orgnica, otros realizan la
fotosntesis. Y otros son utilizados en la industria de los alimentos para producir
fermentaciones.
-los microorganismos se pueden clasifcar en 5 grupos:
1.Bacterias las cuales son las ms numerosas.
2.Hongos que se subdividen en:
A. Mohos que son pluricelulares.
B. Levaduras que son unicelulares.
3.Protozoos.
4.Algas.
5.Virus que son los de menor tamao
-La microbiologa nace con la invencin del microscopio en 1610 que se le atribuye a
Galileo, pero el primero en observar una clula fue Hooke en 1664, y ya en 1674
Leeuwenhoek fue el primero en observar un bacilo.
-Antes de creer en la microbiologa se crea en la teora de la generacin espontnea la
cual deca que todo sala a partir de la materia inerte y en contra de esto apareci la
teora de la biognesis que dice que un ser vivo solo puede preceder de otra clula viva
prexistente.
-El prximo hombre importante en la historia de la microbiologa es el francs Pasteur
el que demostr que los microorganismos eran quienes contaminaban los diferentes
medios. Esto coincidi con la edad de oro de la microbiologa cuyo periodo comprende
desde 1861 hasta 1914, la mayora de los acontecimientos de esta poca se deben a 2
grandes escuelas la francesa encabezada por Pasteur y la alemana en la cual destaca
el nombre de Kock, en esta poca se mejoraron los microscopios y se evoluciono mucho
ACONTECIMIENTOS IMPORTANTES:
-En 1861 Pasteur demostr que los microorganismos producan la alteracin de
alimentos y descubri la pasterizacin que consiste en aplicarle a un liquido durante
un periodo de 30 minutos una temperatura de 65 grados.
-En 1865 se descubri la teora infecciosa de las enfermedades, es decir, se demostr
que las enfermedades estn producidas por microorganismos este descubrimiento
tambin se le debe a Pasteur.
-En 1876 el alemn Kock descubri que una bacteria causaba una cierta enfermedad e
ideo los medios de cultivo. Descubri el agente causante de la tuberculosis.
-En 1880 Pasteur descubri el fundamento de las vacunas mediante la inyeccin de
bacterias viejas, las cuales, haban perdido la capacidad de producir la enfermedad
pero en cambio inducan a la inmunidad frente a los ataques de bacterias jvenes. Se
conoce como vacunacin debido a que en 1800 Jenner fue el primero en aplicarla y
descubri que las personas que ordeaban las vacas eran inmunes a una enfermedad
y el coga raspados de vacas muertas para inocular a la gente.
-Despus de todos estos acontecimientos la quimioterapia que nace alrededor de 1890
fue una tcnica muy utilizada; esta tcnica consista en la busca de sustancias
qumicas para destruir a diversos microorganismos.
Esta tcnica se puede dividir a su vez en 2 tcnicas mas:
1.La qumica de sntesis en la cual se probaba una bacteria con una sustancia
sintetizada.
-En 1910 se descubri el Salvansaw efectivo contra la sflis.
-En 1930 se descubren las sulfamidas.
2.La natural la cual utiliza agentes qumicos naturales como son los antibiticos.
-En 1928 se descubre la penicilina, este descubrimiento fue casual.
EDAD MODERNA
Cabe destacar como precursor la invencin del microscopio electrnico en 1940.
-En 1940 Florey, Chain y Fleming consiguen sintetizar la penicilina en forma
cristalina, por este trabajo recibieron en 1945 el premio Nbel.
-En 1960 se descubre el interferol que puede inhibir la replicacin de algunos virus el
interferol esta en nuestro propio organismo.
-En esta poca nace la virologa que es la ciencia dedicada al estudio de los virus. El
primer virus fue descubierto por Dimitri Iwanoski y fue el del polio del tabaco.
EDAD ACTUAL
Nace la tecnologa del ADN recombinante y surgen 2 ramas la gentica y la biologa
molecular.
-1944 McLead, McCartry y Awery descubren que el ADN es el material gentico de las
bacterias.
-1953 Watson y Crickdescubren la estructura del ADN y como se replica.
Estos dos hechos abrieron el camino de la denominacin de ADN recombinante, que es
la unin de fragmentos de ADN (genes) de origen vegetal o animal que son unidos a
otros genes bacterianos, entonces este ADN recibe el nombre de ADNhibrido. El cual se
le introduce a la bacteria y esta lo toma como propio y empieza a sintetizar las
protenas ordenadas.
http://html.rincondelvago.com/microbiologia_3.html
Alexander Fleming
Alexander Fleming naci el 6 de agosto de 1881 en Lochfeld Darvel
(Escocia). Con 13 aos, tras la muerte de su padre, marcha a Londres
junto con un hermanastro y su hermano John, ambos estudiantes de
Medicina.
A los 20 aos, gracias a una pequea herencia que le permite dejar
de trabajar, decide estudiar Medicina y, tras una prueba de admisin,
logra una plaza en el St. Marys Hospital Medical School de Paddington,
de Londres, centro al que estuvo vinculado profesionalmente durante
toda su vida.
Fleming desarroll importantes investigaciones en los campos de la
bacteriologa, la quimioterapia y la inmunologa.
En su poca de estudiante obtuvo diversas menciones y premios, y en
1906 supera el examen fnal y es admitido en el Royal College de
Cirujanos de Inglaterra, aunque apenas ejerci esta profesin, ya
que muy pronto entr en el laboratorio de vacunaciones del
St. Marys Hospital.
En 1921 pasa a ser director suplente de
este laboratorio.
En 1922 descubri la lisozima, un antisptico presente en las lgrimas,
las secreciones corporales, la albmina y ciertas plantas.
En 1928 gana la Ctedra de Bacteriologa de
la Universidad de Londres.
En 1933 asume la direccin del Institute
of Pathology and Research.
En Espaa
Un poco antes de la primavera de 1944, un ingeniero corus y una
nia madrilea de 9 aos esperaban la llegada de la penicilina como
nica posibilidad de salvar sus vidas. Por distintos caminos y desde
diferentes lugares, las ampollas con el antibitico llegaban a su
destino el mismo da y fueron aplicadas a los enfermos.
El 10 de marzo de 1944, con dos horas de diferencia, se administraron
las dos primeras dosis de penicilina en Espaa.
Las tropas norteamericanas que ocupaban un puerto del Norte de Africa
enviaron 40.000 unidades de penicilina a travs de Gibraltar rumbo a
Galicia, donde fue aplicada por Rafael Fernndez, mdico del sanatorio
San Nicols, de La Corua.
El antibitico que recibi Amparo Peinado, la nia de Madrid,
sali de Ro de Janeiro en avin. A pesar de la urgencia con que
se traslad la medicacin, en ambos casos ninguno de los pacientes
logr salvar la vida.
En esos momentos, uno de los mayores retos que se les planteaba a
los cientfcos era lograr aumentar la produccin del frmaco para
responder a la enorme demanda que exista.
El descubrumiento de la penicilina:
En 1928, trabajando sobre la infuencia de los virus, observ que
se haba desarrollado moho de forma accidental en el plato de cultivo
de los estaflococos y que, adems, ste haba creado un crculo a
su alrededor libre de bacterias. Esta casualidad le inspir para
experimentos posteriores en los que observ cmo el cultivo del moho
prevena el crecimiento de estaflococos. A esta sustancia activa
Fleming la bautiz como penicilina, por haberla encontrado en el
hongo Penicillium notatum. Esta aportacin le vali el mximo galardn
de la Medicina en 1945, compartido con Sir Howard Florey y Ernst Chain.
En un principio Fleming habl de jugo de moho y en 1929 utiliz por
primera vez la denominacin de penicilina, nombre que emple cuando
public su primer informe sobre sus hallazgos en el British Journal
of Experimental Pathology. El informe apareci el 10 de mayo de 1929
con el ttulo Sobre la accin antibactericida de los cultivos de
Penicillium.
Aunque consciente de su hallazgo, en un primer momento se mostr
cauto y slo coment que la sustancia por l descubierta parece
que tena algunas ventajas sobre los antispticos conocidos,
demostrando que acta con una alta efcacia contra las bacterias
generadoras de pus y contra los bacilos de la difteria.
Se trataba probablemente de un antisptico efcaz que poda a
dministrarse superfcialmente o en forma de inyeccin, en los casos
de infecciones producidas por microorganismos sensibles a la
penicilina.
A pesar de haber descubierto una sustancia capaz de combatir las
infecciones bacterianas, Fleming y sus colaboradores no lograron
aislar la penicilina, el primer medicamento antibacteriano.
El Prontosil lo desarroll el qumico Gerhard Domagk en 1935.
La penicilina en estado puro la produjeron en 1940 Ernst Boris Chain
y Howard Walter Florey.
Realmente, el frmaco empez a utilizarse masivamente en la Segunda
Guerra Mundial, y gracias a ella se han salvado muchas vidas.
Al estallar la I Guerra Mundial Fleming se convirti en Capitn del
Cuerpo Mdico del Ejrcito, actividad por la que fue condecorado en
diversas ocasiones. Una vez concluida la contienda (1918) volvi a
Santa Mara donde tres aos ms tarde lleg a ser suplente de
laboratorio.
Posteriormente escribi numerosos tratados de bacteriologa,
inmunologa y qumica, en los que hizo las primeras descripciones
de la lisozima y penicilina. No obstante, ante la incapacidad qumica
para aislar la sustancia abandon sus trabajos.
Fleming fue nombrado sir en 1944.
En 1945 comparti el Premio Nobel de Fisiologa y Medicina con los
cientfcos britnicos Howard Walter Florey y Ernst Boris Chain
por sus contribuciones al desarrollo de la penicilina.
Muri el 11 de marzo de 1955.
ACTUACION. Al igual que cualquier otro antibitico, la efcacia de la
penicilina depende de que exista la cantidad sufciente de este
medicamento en el lugar exacto en el que se concentran las bacterias
que causan la enfermedad. Cuando la penicilina entra en contacto con
el foco de infeccin, acta contra la pared de la clula bacteriana,
causando su ruptura.
Plsmido
Un plsmido consiste en una cadena doble de ADN cerrada por sus extremos y que
tiene por lo tanto forma circular. En otras palabras, un plsmido es ADN bicatenario
circular, a diferencia del ADN celular que siendo bicatenario (dos hebras formando la
archiconocida doble hlice), no est cerrado por sus extremos.
Los plsmidos son literalmente material gentico accesorio. Se replican
independientemente de los cromosomas y la informacin que contienen puede conferir
a la clula que los alberga resistencia a antibiticos, capacidad para la degradacin de
compuestos aromticos, fermentacin de azcares, etc. El nmero de plsmidos
presentes en una clula puede oscilar; as, algunas no contendrn ningn plsmido
mientras que otras contendrn varias copias del mismo. Si el plsmido posee la
capacidad de insertarse en el cromosoma bacteriano se le denomina episoma. Dentro
de este grupo de plsmidos se encuentran los factores de fertilidad o plsmidos F, que
regulan el proceso de conjugacin bacteriana.
Estas caractersticas de independencia de replicacin y potencial insercin en el
genoma celular convierte a los plsmidos en herramientas de ingeniera gentica muy
verstiles para producir ADN recombinante.
Los plsmidos bacterianos son los ms usados, debido a lo fcil que resulta
manipularlos en un tubo de ensayo. Para ello se utilizan las llamadas enzimas de
restriccin, que cortan el ADN del plsmido slo en sitios determinados muy precisos.
Algunas de esas enzimas cortan por secuencias de nucletidos que facilitan la labor de
ensamblaje con nuevos fragmentos de ADN que, previamente, han sido cortados con
dicha enzima. El paso fnal es soldar ambos fragmentos para obtener el plsmido
recombinante, lo que se consigue con otras enzimas llamadas ligasas. Una vez
obtenido el plsmido recombinante comienza el proceso de clonacin. El primer paso
es volver a introducir el plsmido en la bacteria, un proceso que se puede conseguir
por ejemplo permeabilizando la membrana celular. El segundo paso es realizar un
cultivo bacteriano para incrementar el nmero de bacterias que han incorporado el
plsmido a su estructura.
Los plsmidos poseen mltiples aplicaciones. Por ejemplo, se utilizan plsmidos con
resistencia a los antibiticos para identifcar aquellas colonias que contienen el
plsmido deseado. Los usos que se den al ADN as clonado entran en el campo de la
ingeniera gentica.
La serie televisiva MS ALL DEL LMITE ha tratado este tema en el captulo
NATURALEZA CRIMINAL. Un detective trata de prevenir los estragos que hacen en su
ciudad unos nios mejorados genticamente mediante unos potenciadores genticos
consistentes en fragmentos de ADN que se integran en el ADN mitocondrial.
Obviamente se trata de episomas muy particulares, ya que se integran en la
mitocondria.
Otro ejemplo del uso de los plsmidos puede encontrarse en SEGADORES DE VIDA,
de Xavier Pacheco y Jos Antonio Bonilla, donde una compaa de bioingeniera
disea un virus mejorado de la viruela casi indestructible al transportar en su
estructura un plsmido que confere a las clulas infectadas resistencia a diversos
antibiticos y antivricos.
Jos Joaqun Ramos de Fco., Jacobo Cruces Colado, 6 de agosto de 2001
http://www.ciencia-fccion.com/glosario/p/plasmido.htm
Terapia de de-escalacin (de-escalation therapy)
Qu signifca de-escalacin? Signifca que si se acta con un antibitico de amplio
espectro desde el momento preciso, cuando llegue el cultivo, dependiendo del estado
del paciente, se puede bajar a un antibitico de menor espectro e incluso suspender si
no se demuestra la presencia de infeccin. La tendencia es a mantener el antibitico,
ya que son pacientes tremendamente complejos, pero si se quiere volver atrs, es decir,
desescalar, no se provocarn problemas en trminos de resistencia, pero se habrn
ganado tres o cuatro das en trminos de mortalidad.
Quines son los ms benefciados? El consenso del grupo de trabajo de Quito est
orientado a pacientes con infecciones de origen nosocomial, particularmente en
unidades de cuidados intensivos, sepsis graves sin foco conocido, infecciones
polimicrobianas, imunocomprometidos, postquirrgicos con comorbilidad grave,
antibioticoterapia previa, patgenos multirresistentes, entre otros. Se trat este tema
en el Congreso de Medicina Intensiva de Barcelona, y el consenso fue que la terapia de
de-escalacin es una alternativa teraputica vlida, apoyada en evidencia bastante
slida en la unidad de cuidado intensivo, que tambin debe ser considerada en
pacientes de la comunidad.
Al elegir el antimicrobiano se da preferencia a los bactericidas y se busca asociacin
sinrgica, administracin endovenosa, el mayor espectro posible, baja toxicidad, bajo
potencial de desarrollo de resistencia, perfl farmacocintico favorable y buena relacin
costo-benefcio global. Cules son los antibiticos que cumplen mejor estos
requisitos? Los betalactmicos, sobre todo las cefalosporinas de cuarta generacin; los
betalactmicos asociados con inhibidores de betalactamasas; los monobactmicos,
como el aztreonam, que se usa en los Estados Unidos, pero que se dej de usar en
Chile porque no tuvo buenos resultados; y los antibiticos con mayor espectro
conocido hasta el momento, que son los carbapenmicos, con o sin asociacin de
aminoglicsidos; y fuoroquinolonas, dependiendo de la realidad local, con o sin
asociacin de glicopptidos.
Para concluir, la terapia de de-escalacin consiste en iniciar la terapia de amplio
espectro lo ms precozmente posible, sin tener miedo a la seleccin de cepas
resistentes. No hay generacin de cepas resistentes si la terapia emprica se utiliza por
un tiempo corto y posteriormente se cambia. Es una terapia dirigida a salvar vidas.
Referencias
1. ACCP/SCCM : Consensus conference. Chest 1992;101:1644-1655.
2. Kollef et. al. Inadequate Antimicrobial Treatment Of Infections: A Risk Factor For
Hospital Mortality Among Critically Ill Patients, Chest 1999. 115(2);462-74.
3. Luna CM et al. Chest 1997; 111: 676-685
4. Alvarez-Lerma F et al. Intensive Care Med 1996;22:387-394.
5. Ibrahim EH et al. Chest 2000;118L146-155.
6. Kollef MH et al. Chest 1998;113:412-420.
7. Rello J et al. Am J Resp Crit Care Med 1997;156:196-200.
8. Bochud P-Y et al. Intensive Care Med 2001;27:S33-S48.
Medwave. Ao 3, No. 6. Edicin Julio 2003. Derechos Reservados.
http://www.medwave.cl/congresos/Descalacion/2.act
Esta alarmante situacin ha llevado a elaborar programas de vigilancia de la
resistencia bacteriana, regionales y locales, como parte del programa de prevencin de
la resistencia. En pases de la Comunidad Europea
16
y en Amrica,
10,15,17
donde desde
hace algunos aos existen programas con este propsito. Uno de ellos involucra a la
Organizacin Mundial de la Salud, llamado programa de Vigilancia de la Resistencia
Antimicrobiana y conocido como "WHONET".
18
En nuestro pas existe un programa
nacional de Vigilancia de la Resistencia Antimicrobiana (GVRB) desde 1988.
Es una preocupacin compartida con el resto del mundo, la gran capacidad de
resistencia por parte de microorganismos nosocomiales. Por tanto es de gran
importancia conocer en nuestro medio sobre algunos aspectos de ella. Lo hacemos a
travs del estudio de la resistencia a -lactmicos, aminoglicsidos y quinolonas en P.
aeruginosa, proveniente de centros Mdicos de Venezuela, usando el programa
WHONET, evaluando cepas procedentes de la comunidad y hospitales (pblicos y
privados).
MATERIALES Y MTODOS
En Venezuela, en 1988, se cre el Grupo Venezolano de Vigilancia de la Resistencia
Bacteriana (GVRB), integrado por 26 investigadores de 29 instituciones de salud o
centros de enseanza universitaria. En todos los laboratorios participantes se emple
el mtodo de difusin en agar, usando discos de reconocida calidad (Difco, BBL, Oxoid);
siguiendo las normas originales de Bauer y Kirby.
19
Se siguieron las normas de efcacia
publicadas por la NCCLS (Comit Nacional de estndares para laboratorios clnicos).
20

Todos los centros hospitalarios pblicos o privados (desde pequeas clnicas
privadas hasta hospitales universitarios de ms de 500 camas) participantes registran
los datos segn formato ad-hoc. En estos formatos se registra la informacin sobre
cada una de las cepas bacterianas identifcadas: datos del paciente, origen de la
muestra, nombre de la bacteria, procedencia dentro del hospital y nmero de
milmetros de los halos de inhibicin.
Esta informacin es transcrita a computadoras IBM ubicadas actualmente en la
Unidad de Microbiologa e Infectologa del Hospital Vargas de Caracas. De esta forma
se registra, organiza, analiza y publica informacin sobre bacterias aisladas de
muestras clnicas, procedentes de pacientes con infecciones tanto comunitarias como
adquiridas en los hospitales.
21
Esta informacin se adapta al programa WHONET,
21
lo
que ha permitido la incorporacin de Venezuela a la red internacional coordinada por
la OMS.
WHONET (red de la Organizacin Mundial de la Salud) es un programa "software", el
cual acepta y analiza los resultados de las pruebas de sensibilidad in vitro a los
antimicrobianos. La informacin es almacenada en archivo que acepta resultados de
diferentes regiones, para ser comparados de acuerdo con las recomendaciones de la
OMS. Tambin acepta resultados que van a ser analizados epidemiolgicamente. Este
programa integra los resultados de los laboratorios participantes a travs de todo el
mundo.
18
http://www.scielo.org.ve/scielo.php?pid=S1315-
25562003000100007&script=sci_arttext