GIBERELINAS

El descubrimiento por los japoneses de unas sustancias con propiedades

reguladoras del crecimiento fue consecuencia del estudio de la enfermedad del
arroz denominada Bakanae.
Estos trabajos permanecieron ignorados en el mundo occidental a causa de la
Segunda Guerra Mundial. En los aos cincuenta, investigadores americanos e
ingleses identificaron una sustancia a la que denominaron Giberelina X y Acido
giberlico.
Difera de la gliberelina A de los japoneses porque esta resulto ser una mezcla
de al menos 3 compuestos.
En principios podemos clasificar las giberelinas en dos grandes grupos:
giberelinas con 20 atamos de carbono y giberelinas con 19 tomos de carbono.
Como la nomenclatura sistemtica correcta de acuerdos con las normas IUPAC,
es muy engorrosa, se nombra con la expresin abreviada GA1,GA2..GAn
donde el subndice solo indica el orden de su descubrimiento. Existe un
sinnmero de posibilidades de variaciones en el anillo de la molcula desde
distintos estados de oxidacin del carbono-20, o la adicin de grupos OH,
principalmente en la giberelinas 19-C.
Si a todo esto se unen las posibilidades de estero isomera que pueden darse no
es de extraar que el nmero de giberelinas aisladas e identificadas hasta la
fecha sea tan elevado.


Localizacin y extraccin
Natural mente, las giberelinas fueron encontradas en el hongo Giberella; en
total son alrededor del centenar las encontradas hasta ahora, ms de 60 en
plantas superiores y hay 13 que se localizan en ambos, sin que pueda hablarse
de grandes diferencias entre las de uno u otro origen aunque quizs cabe
sealar que las plantas superiores muestran mayor variedad e la hidroxilacin.
Se han descrito giberelinas en ms de 30 especies de Angiosperma y
Gimnospermas. Existen muchos casos en que se habla de actividad tipo
giberelinas, al ser esta detectada solamente por ensayos biolgicos, pero sin
que hayan podido ser identificadas las estructuras moleculares. Esto hace
pensar que su presencia es universal en las plantas superiores y tambin se han
aislado de otros hongos, bacterias y algas.
Se ha detectado actividad giberelinas en tallos y races, hojas, flores, brotes,
frutos y semillas, e incluso en polen y cloroplasto aislados. En general, los tejidos
reproductores contienen mayores cantidades de giberelinas pudiendo alcanzar
valores de 10u/g de peso fresco. Sin embargo, el contenido en giberelinas varia
en relacin con el crecimiento, edad de la planta, floracin, desarrollo del fruto,
dormicin y germinacin de las semillas.
La extraccin se realiza a partir de un macerado de plantas o a partir del medio
donde crece el hongo. Se procede a una extraccin con mezclas hidroalcoholicas
y tras evaporar el solvente orgnico, se realiza una particin con acetato de
etilo a diferentes valores de Ph. De esta forma, al acetato de etilo pasas todas
las giberelinas presentes en el extracto, excepto aquellas que se encuentran
como glucsidos y los esteres glucosdicos mas polares. Tambin puede haber
alguna dificultad en extraer GA32, GA28, GA41, GA13, aunque todas ellas
pueden extraerse con butanol o partir del residuo acuoso. Mediante este
procedimiento puede obtenerse una extraccin que presente entre el 40 y el 80
por 100 de las giberelinas endgenas, dependiendo del cuidado de las tcnicas
desarrolladas y de la pureza de los solventes.


Biosntesis de giberelinas
La va biosinttica de las glicerinas propiamente dicha puede considerarse que
no comienza hasta la formacin de trans-geranil geranil pirofosfato.
La formacin de ent-kaureno a partir de geranil-geranil pirofosfato se demostr
en Giberella, en clulas libres de Marah macrocarpus, de Cucurbita munis y en
semillas de tomate en germinacin. La ciclacin de geranil-geranil pirofosfato a
ent-kaureno se hace en dos etapas pasando en la primera el geranil-geranil
pirofosfato a un biciclo intermedio, el copalil pirofosfato catalizado por la copalil
pirofosfato sintasa, y en una segunda reaccin catalizada por la kaureno sintasa
y actividad por Mg pasa e ent-kaureno. Estos enzimas se localizan en
proplastidios de tejido meristematicos y as se han localizado en plntulas de
trigo y leuco plastos de endospermo de calabaza. En cloroplasto maduro apenas
se detectan estas actividades.
Hay, en primer lugar, una oxidacin de ent-Kaureno a ent-Kaureno, luego a ent-
kaureno, luego de ent-kaurenal y por ultimo a cido ent-kaurenoico, catalizando
por unas momoxigenasas dependientes de citocromo P450; el cido 7-a-
hidroxikaurenoico: este compuesto tiene un recambio muy rpido y apenas se
acumula. Por tanto su deteccin es muy difcil y rpidamente se trasforma en
GA12 aldehdo al perder el C-7 por oxidacin y contraer el anillo.
Posteriormente es oxidado por monooxigenasas dependientes de P450 a Ga12 y
GA53 y a partir de este compuesto se formaran todos los dems. Los enzimas
complicados estn ligados a retculo endoplsmico y pueden ser inhibidos por
ancimidazol o paclobutrazol que interaccionan con el citocromo inhibiendo la
oxidacin de ent-kaureno, la prdida de tomo del C-20 para formar giberelinas
de 19 tomos de carbono se realiza mediante oxidacin secuencial del grupo
metilo de C-20 a un aldehdo y eliminacin de este tomo con la consiguiente
formacin del esqueleto de 19 tomos de carbono, todo ello catalizado por una
GA20-oxidasa.


Regulacin de la biosntesis de giberelinas
Los candidatos ms firmes en la regulacin de la biosntesis de las giberelinas
son la ciclacin de geranil-geranil pirofosfato para formar ent-kaureno y los
mecanismos de la desactivacin de las giberelinas mediante la hidroxilacion
en posicin 2 las giberelinas se sinteticen, al menos en parte en
proplastidios de tejidos meristematicos ha llevado a muchas investigadores a
plantearse el problema de la compartimentalizacin en la regulacin de los
niveles de giberelinas y a estudiar el papel del fitocromo en este proceso,
aunque tambin otros factores influyen sobre los niveles de giberelinas,
tales como luz, temperatura y otras hormonas.
En los ltimos aos se ha producido un gran avance en el conocimiento de
las biosntesis de las giberelinas y su regulacin mediante la clonacin de
genes que codifican los enzimas implicados. Se han clonado genes que
codifican para copalil y kaureno sintasas, citocromo P450 ent-kaureno
oxidasa y las oxigenasas GA20-oxidasa, GA3-oxidasa y GA2-oxidasa
La hidroxilacion en 2 probablemente tiene lugar en todas las plantas
superiores. Esta reaccin no es reversible y acarrea una disminucin o
prdida de la actividad biolgica, pudiendo servir como medio de regular el
nivel de giberelinas biolgicamente activas.
La unin de giberelinas con glucosa es el derivado ms comn, formndose
teres glucosdicos en que la giberelina se una al azcar a travs de un grupo
hidroxilo, o bien formndose esteres en que los azucares se unen a la
giberelina por el carboxilo en 7. No obstante, en todos los casos se forman
O--D-glucopiranosil esteres o esteres.
Pueden actuar como almacenadores, ya que siempre se localizan en
semillas maduras. Al germinar estas semillas se producir la hidrlisis de los
mismos. Sin embargo hay que tener en cuenta que en algunos casos,
adems de formarse el glucoderivado puede producirse una hidroxilacion en
2 con lo que habra perdida de actividad, como ya hemos dicho
anteriormente y por tanto no se tratara de un almacenamiento de
giberelinas activas

Lugares de sntesis de giberelinas
Se producen giberelinas en pices de tallos y races, hojas en expansin, frutos y
semillas en desarrollo. Quizs haya otros tejidos u rganos capaces de sinterizar
giberelinas.
Parece que las giberelinas se producen cuando se necesitan, ya que en semillas
en germinacin hay un aumento brusco al aumentar la semilla de tamao lo que
las hace muy tiles para el estudio de sus biosntesis. As se han extrado
enzimas que pueden convertir el cido mevalonico en giberelinas de 19C a
partir de frutos inmaduros y de semillas en desarrollo. Mas difcil es demostrar
su presencia en tejidos vegetativos (tallos y races) debido a que se encuentran
en mucha menos cantidad
Sntesis en tejidos apicales

Transporte de las giberelinas
Las giberelinas en aplicacin foliar se desplazan juntos con los productos de la
fotosntesis en el floema, aunque puede haber desplazamiento en el xilema
probablemente por desplazamiento radial desde el floema al xilema. Las
giberelinas endgenas se encuentran tanto en el floema como el xilema, y a
diferencia de los que suceda en el casi de las auxinas, no existe transporte polar
de las giberelinas. El transporte de giberelinas en Salix viminalis, Ulmus glabra y
Acer platamoides se ha demostrado que tiene lugar en formar de conjugados lo
que nos indica que las giberelinas conjugadas tambin se desplazan libremente
en la planta.
Debemos hacer notar que en trabajos recientes con peciolos jvenes de Coleus,
se ha estudiado el transporte en distancias cortas y se observ la existencia de
un transporte polar muy similar al del AIA en el mismo sistema.






Papel fisiolgico de las giberelinas
Una forma de estudiar la accin fisiolgica de las giberelinas seria utilizar
plantas o partes de plantas en que el nivel de las mismas estuviera reducido;
como consecuencia, el proceso que se trata de estudiar se encontrara una
respuesta normal. Este mtodo no ha dado resultado para el estudio de las
giberelinas, ya que las regiones de una planta que responden ellas tambin son
capaces de producirlas en muchos casos.
Un mtodo muy til para el estudio de la actividad fisiolgica de las giberelinas
es utilizar plantas que presenten un bloqueo gentico en las biosntesis de las
mismas. Estas plantas con frecuencia son enanas. Pero hay que tener la
seguridad de que el enanismo que se produce es debido al bloqueo de la
biosntesis de giberelinas y no a otras causas como la presencia de inhibidores o
la falta de capacidad para resolver a las giberelinas. De ah que previamente
haya que comprobar cul es el nivel de giberelinas endgenas en las plantas
objeto de estudios.


Influencia de los factores ambientales sobre las giberelinas

De los factores ambientales, el de ms clara influencia es la luz. Las giberelinas
se oponen a la inhibicin del crecimiento del tallo causado por la luz en un
guisante, alubias, calabazas y otras plantas. Por otra parte se haba visto que en
guisantes, el enanismo era consecuencia de la luz, pues cuando las plantas
crecan en la oscuridad, todas lo hacan igual, sin que se manifestaran los
sntomas de enanismo. Sin embargo cuando se analizan los niveles de
giberelinas en distas plantas crecidas a la luz o en oscuridad, los resultados que
se encuentran resultan tan muy conflictivos.
Cuando se tienen resultados ms uniformes es cuando se estudia la influencia
de la irradiacin n en periodos cortos con luz roja, ya que al extraer giberelinas
se obtiene un aumento considerable de su actividad. Este aumento producido
por la luz roja es probablemente causado por el fitocromo.












Otro aspecto de luz influye sobre el contenido de giberelinas es el fotoperiodo
se ve que las giberelinas pueden sustituir el fotoperiodo en las plantas de da
largo seria incrementar la sntesis de giberelinas y efectivamente as se ha
demostrado en algunas especies.

+ GA
3

Otro factor ambiental que tambin ejerce una importante influencia sobre el
contenido de giberelinas es la temperatura cuya influencia se ha estudiado en
relacin con la ruptura del periodo de dormicin en semilla (estratificacin) y en
la induccin de la floracin (verbalizacin). En ambos casos la aplicacin de
giberelinas puede sustituir el tratamiento por el frio, que aumenta el contenido
de aquellas.

Movilizacin de reservas del endospermo