UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

FACULTAD DE INGENIERA GEOGRFICA, AMBIENTAL Y

ECOTURISMO
ESCUELA DE INGENIERA AMBIENTAL

LIMA 2014
TECNICAS DE ESTERILIZACIN Y
DESINFECCIN
LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
ALUMNA: LLUNELI RUIZ MESA
PROFESORA: AMALIA DELGADO
PRCTICA N 2
TECNICAS DE ESTERILIZACIN Y DESINFECCIN

1. INTRODUCCIN:

La esterilizacin es un proceso a travs del que se logra la destruccin total de los
microorganismos viables presentes en un determinado material.
Este procedimiento es de gran utilidad dentro del campo farmacutico
microbiolgico y biolgico, ya que existen muchos procesos que requieren la
utilizacin de materiales estriles.

La esterilizacin implica la destruccin de todos los microorganismos, incluyendo
los esporos.

La desinfeccin supone la destruccin de los microorganismos vegetativos que
pueden causar enfermedades o en el contexto de las industrias de alimentos, los
que pueden producir alteraciones.

Entre stos podemos destacar: El acondicionamiento del material (pipetas, tubos,
placas de Petri, pinzas, etc.) que va a ser utilizado en los laboratorios de
microbiologa. La descontaminacin de material utilizado. La esterilizacin de
equipos a utilizar en el laboratorio y otros materiales de uso, con el propsito de
reducir el riesgo de contaminacin en alumnos y personal del laboratorio.

2. OBJETIVOS:
- Conocer los principios generales de las tcnicas de esterilizacin de materiales
de vidrio y medios de cultivo de uso comn en microbiologa.
- Observar el efecto de las condiciones de asepsia en el control de la
contaminacin microbiana en el laboratorio de microbiologa.

3. MTODOS:

- HORNO O ESTUFA: Calor seco que se efecta en estufas de aire seco u hornos
Pasteur y se manejan temperaturas entre 160 180C, por un espacio de dos
horas aproximadamente. Este mtodo se utiliza para esterilizar el material de
vidrio generalmente: tubos, cajas de Petri, pipetas y erlenmeyers. No se debe
emplear para esterilizar medios de cultivo o agua pues se evaporan hasta
secarse. Previo al horneado el material de vidrio se recubre con papel Kraft y se
sella con cinta indicadora de esterilidad, una vez realizado el proceso de
esterilizacin se revisa la cinta la cual debe tornarse de color caf oscuro lo que
indica una correcta esterilizacin. El calor seco tambin se utiliza para secar
material de vidrio como tubos y pipetas, este material se deja en el horno por
dos horas a 60C. Las lminas y laminillas se secan con un trapo suave. Los
dems materiales se secan a temperatura ambiente.
- AUTOCLAVE: Calor hmedo en autoclave se utiliza para esterilizar medios de
cultivo preparados, escobillones, gasas entre otros. Adicionalmente se tiene
otra autoclave para descontaminar cultivos antes de ser desechados. El
autoclave es un recipiente en el que se consigue exponer el material a
esterilizar a temperaturas superiores a la de ebullicin del agua, gracias al
aumento de la presin. El autoclave se opera a presin de 15 lb.y a 121C. El
tiempo de exposicin depende del material y volumen que se esterilice, pero
en general est comprendido entre 15 y 30 minutos.
- ESTERELIZACION MEDIANTE QUIMICOS: Empleo de soluciones qumicas: para
superficies, equipos, mesas y lavamanos se debe preparar hipoclorito de sodio
al 5% a 500 ppm. Para obtener esta solucin se mezclan 10 ml de hipoclorito
con 990 ml de agua y se obtiene un total de 1 litro de dilucin.
- El lavado del material de laboratorio se debe realizar a diario, utilizando
hipoclorito de sodio a 5.000 ppm y extraen alcalino o neutro dependiendo de la
clase de material. El material se debe dejar en esta solucin durante 2 o 3
horas. Posteriormente se procede al lavado por separado y en diferentes
condiciones de acuerdo al material, todo realizado con los elementos de aseo y
proteccin personal requeridos. Lminas y laminillas se limpian con un cepillo.
Tubos y pipetas se deben limpiar con churrusco. Cada elemento se enjuaga con
agua fra. El material lavado se sumerge en un recipiente con agua destilada y
posteriormente se pone a escurrir.


4. CONCLUSIONES:

- De acuerdo a lo anteriormente expuesto podemos concluir que la esterilizacin
es un proceso mediante el cual se elimina de forma completa la carga
microbiana de objetos inanimados, incluyendo las esporas. Para llevar a cabo
este proceso existen diversas etapas que deben seguirse para lograr la
esterilizacin, ellas son: limpieza/descontaminacin, inspeccin,
preparacin/empaque, esterilizacin, desinfeccin, almacenamiento y entrega
del material. Para realizar este proceso existen diversos mtodos. Entre ellos
encontramos: los mtodos fsicos o de esterilizacin a altas temperaturas, en
donde encontramos mediante calor seco o Pupinel o mediante calor hmedo o
Autoclave a vapor. Y tambin encontramos los mtodos qumicos donde estn
la inmersin en cido Peractico, el oxido de Etileno, el vapor de
Formaldehido, entre otros. Los principales son los mtodos fsicos o de alta
temperatura, en el que el ms eficiente es la autoclave, proceso en el cual se
eliminan microorganismo mediante la desnaturalizacin de protenas y es
acelerado por la presencia de agua. Este mtodo de esterilizacin se considera
el mtodo ms efectivo, econmico y rpido disponible en la actualidad, por lo
que debe ser la primera opcin en la seleccin de mtodos de esterilizacin.

- Una vez que se llevo a cabo el proceso de esterilizacin hay que realizar un
monitoreo de esta, estos son equipos o reactivos que permiten certificar que el
proceso de esterilizacin se llevo a cabo de una forma adecuada. Existen
diversos tipos de monitoreo, estn los fsicos que deben ser utilizados en cada
ciclo de esterilizacin. Los qumicos que se utilizan en cada paquete a esterilizar
y los biolgicos que se utilizan de forma semanal o en cada reparacin de
equipo.

- Tambin podemos concluir que existe una clasificacin que categoriza los
elementos, hablamos de la clasificacin de Spaulding; esta clasifica los
elementos en crticos, que son aquellos que entran en contacto con las
cavidades estriles del cuerpo, los elementos semi crticos son aquellos que
entran en contacto con piel no intacta o con mucosas y los elementos no
crticos son aquellos que entran en contacto con piel sana o simplemente no
entran en contacto con el paciente.

- Para finalizar podemos concluir que nuestros objetivos se cumplieron ya que
mediante la elaboracin de este trabajo pudimos conocer con mayor
profundidad el proceso de esterilizacin, sus mtodos, entre otras cosas, para
as poder ponerlo en marcha en nuestra prctica clnica.

5. CUESTIONARIO:
- DIBUJE LOS PRINCIPALES EQUIPOS DE LABORATORIO USADOS EN
ESTERILIZACIN.

- SEALE 4 EJEMPLOS DE MUESTRAS USADAS EN LOS DIFERENTES MTODOS
DE ESTERELIZACIN.
Placas de Petri, tubos de ensayo; cultivos, entre otros.
- QU MTODO DE ESTERILIZACIN UTILIZARA PARA CALDO UREA?
Esterilizar en autoclave por 15 minutos a 121C.

6. BIBLIOGRAFIA:
Collins C.H, Lyne Patricia, Mtodos Microbiolgicos Edicin Acribia, S.A, Zaragoza, Espaa,
quinta edicin.
Cappuccino G. James, Sherman Natalie, Microbiology A Laboratory,
Edicin Benjamn/ Cummings, New York, quinta edicin.
Salvat Bsico, Diccionario Enciclopdico, Edicin Carvajal S.A., tercera reimpresin, 1988.
Manual de Microbiologa y Parasitologa, 2006