Nombre Caldo RM-VP Caldo con nitrato Medio SIM

Medio Lquido Lquido Semislido en forma vertical

Siembra y cantidad de
inoculo recomendado
Difusin o punto de contacto Difusin o punto de contacto Picadura en forma vertical
Utilidad del medio de
cultivo o de la prueba
Produccin de acetona a partir de la
oxidacin de glucosa.
Determinar la capacidad de un organismo de
reducir el nitrato en nitritos o en nitrgeno
libre.
Determinar si un organismo es mvil o inmvil, si es capaz deliberar
cido sulfhdrico por accin enzimtica de los aminocidos que
contienen azufre ( cistina, cistena y metionina) produciendo una
reaccin visible de color negro y por ltimo la capacidad de
desdoblar el indol de la molcula triptfano, adems que la
consistencia del medio permite la observacin de la movilidad de
algunas bacterias.
Temperatura y tiempo
de incubacin
Tiempo: 24 - 48 horas
Temperatura: 372 C
Tiempo: 24 - 48 horas
Temperatura: 372 C
Tiempo: 24 - 48 horas
Temperatura: 372 C
Reactivos
necesarios(orden de
adicin y volumen)
1) catalizador/reactivo 3:1 alfa naftol 2-6
gotas
2) 2 gotas de KOH
3) Agitar el tubo para airar (reaccin en
contacto con el oxgeno).
15 minutos cuando menos antes de la
interpretacin.
1. Alfa - naftilamina 1:1
2. cido sulfanilico .
3 gotas y 3 gotas
Prueba de indol
Reactivo de Kovacs
Adicionar 5 gotas y agitar suavemente el tubo
Interpretar inmediatamente.
Tiempo mximo de
lectura del resultado
La mayora de los organismos capaces de
reducir el nitrato, lo hacen dentro de las 24
horas.
Indol
La reaccin positiva despus de 24 horas indica una prueba
completa.
Si el cultivo de 24 horas es negativo deber incubarse otras
24 horas y repetirse la prueba.
Interpretacin Positivo: (anillo) Rojo (presencia
de acetona).
Negativo: Amarillo o cualquier otro color.
Se interpretan los resultados un minuto
despus de adicionar los reactivos.
Positivo: Rojo quemado.
Negativo: Cualquier otro color.
Fase 2. Si no hay cambio de color adicionar Zn
(se rastrea el sustrato)
Negativo: Rojo
Positiva: No hay cambio de color.
1. cido sulfhdrico
Positivo: Ennegrecimiento del medio
Negativo: Sin ennegrecimiento
2. Indol
Positivo: Anillo rojo en la superficie del medio.
Negativa: No se produce color
Negativa: Color naranja en la superficie del medio. Indica desarrollo
de escatol, un compuesto metilado que puede ser el precursor de la
formacin de indol.
3. Movilidad
Positiva. Los organismos mviles migran de la lnea de siembra y se
difunden en el medio provocando turbiedad.
Negativa. Crecimiento bacteriano acentuado siguiendo la lnea de
siembra.
Reporte de resultados Positivo (+)
Negativo (-)
Positivo (+)
Negativo (-)
PRUEBA POSITIVO NEGATIVO
SH2 + -
Indol + -
Movilidad + -



Nombre y pH del medio MIO Agar fenilalanina desaminasa Agar almidn
Estado fsico Semislido en forma vertical Slido en pico de flauta Slido en placa
Siembra y cantidad de
inoculo recomendado
Por picadura Estra en pico de flauta. Estriado en tres cuadrantes
Utilidad del medio de
cultivo o de la prueba
El medio MIO se utiliza para la identificacin de
Enterobacterias sobre la base de movilidad, la produccin de
ornitina descarboxilasa.
Determina la capacidad de un organismo de
desaminar la fenilalanina en cido fenilpirvico por
su actividad enzimtica, con la consiguiente acidez
resultante.
Ayuda a la diferenciacin de especies entre
varios gneros de microorganismos aerobios
(Bacillus y Streptococcus)
Ayuda a la diferenciacin de especies entre
diversos gneros de microorganismos
anaerobios (Clostridium)
Ayuda a la diferenciacin de gneros en los
que todas las especies son:
Methylobacterium, Mobiluncus y
Roseomonas.
Saber si el microorganismo es capaz de
desdoblar el almidn.
Temperatura y tiempo de
incubacin
Tiempo: 24 - 48 horas
Temperatura: 372 C
Tiempo: 24 - 48 horas
Temperatura: 372 C
Tiempo: 24 - 48 horas
Temperatura: 372 C
Reactivos
necesarios(orden de
adicin y volumen)
Prueba de indol
Reactivo de Kovacs
Adicionar 5 gotas y agitar suavemente el tubo
Interpretar inmediatamente.
3 gotas Cloruro frrico.
Esperar de 1 a 5 minutos para leer la reaccin.
Lugol

Interpretacin 1. Ornitina descarboxilasa
Positivo: color prpura del medio
Negativo: Color amarillo quiere decir que no utiliz la ornitina
y utiliz glucosa.
2. Indol
Positivo: Anillo rojo en la superficie del medio.
Negativa: No se produce color
Negativa: Color naranja en la superficie del medio. Indica
desarrollo de escatol, un compuesto metilado que
puede ser el precursor de la formacin de indol
3. Movilidad
Positiva. Los organismos mviles migran de la lnea de siembra
y se difunden en el medio provocando turbiedad.
Negativa. Crecimiento bacteriano acentuado siguiendo la
lnea de siembra.
*Se leen las reacciones de movilidad y de ornitina
descarboxilasa antes de agregar el reactivo de Kovacs para
la prueba de indol.*
Positiva: verde botella en la superficie
Negativo: Cualquier otro color.
Positivo
Positivo: medio incoloro debido a que existe la
presencia de amilasa.
Negativo: Tonalidad morada debido a que no
se hidroliz el almidn.
Reporte de resultados Prueba Movilidad Indol Ornitina
Positivo + + +
Negativo - - -
Positivo (+)
Negativo (-)
Positivo (+)
Negativo (-)
Nombre y pH
inicial del medio
Caldo rojo de fenol ms
carbohidratos
Agar urea de Christensen Gelatina nutritiva Medio bsico de Hugh Leifson,
medio O/F.
Estado fsico Lquido Slido en pico de flauta Semislido Semislido (tambin permite la observacin de
movilidad).
Siembra y
cantidad del
inoculo
recomendado
Por difusin. Estra Picadura Picadura. De cinco a seis asadas cargadas .

Utilidad del
medio de cultivo
o prueba
Determinar la capacidad de una
bacteria de fermentar un
carbohidrato especfico incorporado
a un medio bsico, produciendo
cido, o cido con gas visible.
Determina la capacidad de un
organismo de desdoblar la
urea formando dos molculas
de amoniaco por la accin de la
enzima ureasa produciendo un
cambio a color rosa mexicano
intenso debido a que se
alcaliniza el medio.
Determinar la capacidad de
un organismo de producir
enzimas de tipo proteoltico
(gelatinasas) que licuan la
gelatina.
Determina el metabolismo oxidativo o
fermentativo de un hidrato de carbono. Se
utilizan dos tubos; uno abierto y el toro sellado.
Temperatura y
tiempo de
incubacin
Tiempo: 24 - 48 horas
Temperatura: 35 - 37 C
Tiempo: 24 - 48 horas
Temperatura: 35 - 37 C
Tiempo: 18 - 24 horas
Temperatura: 35 - 37 C
Al trmino de la incubacin
se coloca el tubo en un
refrigerador 20-30 min
determinar si se ha producido
o no la digestin de la
gelatina (licuefaccin).
Tiempo: 24 - 48 horas
Temperatura: 35 - 37 C
Indicador de pH Rojo de fenol:
cido: Color amarillo (pH = 6.8)
Alcalino : Color rojo ( pH = 8.4)
Medio no inoculado: Rojo (pH = 7.4)
Rojo de fenol
cido: Amarillo (pH = 6.8)
Alcalino : Rojo rosado (pH =
8.4)
Medio no inoculado: Amarillo
(pH = 6.8)
Azul de bromotimol
cido : Color amarillo (pH = 6)
Alcalino : Azul de Prusia intenso (pH = 7.6)
Medio no inoculado: Verde (pH = 7.1)
Interpretacin
del viraje
Positiva = Color amarillo (cido)
quiere decir que s fue fermentado.
Negativa = Color rojo(alcalina)
Color naranja (incubar 24h mas)
Positivo: Rosa mexicano
intenso.
Negativo: Cualquiero otro
color.
Positivo: Medio licuado
(estado lquido)
Negativo: Medio slido
Amarillo: cido
Azul de prusia: alcalino por las peptonas
Las bacterias oxidativas producen cido slo en
el tubo abierto expuesto al oxgeno atmosfrico.
Los microorganismos fermentadores producen
cidos en ambos tubos color verde.
Reporte de
resultados
A = cido
K = alcalino
Positivo (+)
Negativo (-)
Positivo (+)
Negativo (-)
Fermentativo: F, Ferm
Oxidativo: O, Oxi
No fue utilizado el hidrato en forma oxidativa.


Nombre TSI (triple sugar iron agar) LIA Citrato de Simmos
Estado fsico Slido en tubo Slido en tubo Slido
Siembra y cantidad
del inoculo
recomendado
Picadura y estra Por picadura y estra. Estra
Utilidad del medio
de cultivo o prueba
Determina la capacidad de un organismo de atacar un
hidrato de carbono especfico incorporado en un medio
de crecimiento bsico, con produccin o no de gases,
junto con la determinacin de posible cido sulfhdrico.
La glucosa se encuentra 10 veces en menor cantidad que
otra azcar.
Mide la capacidad enzimtica de un
organismo para descarboxilar un
aminocido (lisina y arginina) para
formar cadaverina, con la consiguiente
alcalinidad. Tambin se determina la
presencia de cido sulfhdrico.
Determina si un microorganismo es capaz de utilizar
citrato como nica fuente de carbono para
convertirlo en piruvato, provocando alcalinidad.
T y t de incubacin Temperatura: 35 37 C
Tiempo: 18 24 horas
Tiempo = 24 - 48 horas
Temperatura = 35 - 37 C
Indicador de pH Rojo de fenol:
cido: Color amarillo (pH = 6.8)
Alcalino : Color rojo ( pH = 8.4)
Medio no inoculado: naranja rojizo (pH =7.4)
Prpura de bromocresol
cido: color amarillo (pH = 5.2)
Alcalino: color prpura (pH = 6.8)
Medio no inoculado: color prpura
intenso brillante (pH = 6.0)
Azul de bromotimol (pH= 6)
Alcalino: color azul de Prusia intenso (pH = 7.6)
Medio no inoculado: Color verde (pH = 6.9)
Interpretacin del
viraje
Alcalino/cido (K/A): Fermentador de glucosa.
cido/cido (A/A): Fermentador de glucosa, lactosa y
sacarosa.
Alcalino/alcalino: No fermentador de carbohidratos; uso
de peptonas.
Alcalino/sin cambios: No fermentador de carbohidratos;
uso de peptonas. Produccin de H2S: precipitado negro
Produccin de gases: Produccin de burbujas,
descomposicin del medio, ligera muesca del medio
sobre el costado del tubo o desplazamiento del medio
del fondo, dejando un espacio libre.
K/K = prpura /prpura
K/A= violeta / amarillo
No desaminacin
Produccin de H2S = Ennegrecimiento
del medio
Desaminacin de la lisina= superficie
rojiza/ profundidad cida: esto sucede
con cepas del gnero Proteus,
Providencia y algunas de Morganella
spp.
Positivo: Crecimiento y el medio de color azul Prusia.
Negativo: No se observa crecimiento y medio de
color verde.

Reporte de
resultados
1. K / A (Fermentacin de glucosa solamente)
2. A / A (Fermentacin de glucosa y lactosa)
3. K / K (No fermentacin de glucosa y lactosa).
Los resultados se escriben siempre siguiendo un patrn.
Primero la reaccin del pico de flauta seguida por la
reaccin de la capa profunda, separadas por una barra.
A = cido
K = Alcalino
N = Neutra
R = Rojo (desaminacin
oxidativa)
Negativo (-)
Positivo (+)