Ascanio et al.

/ Mtodo de la Pendiente en Ascenso en papa

33
Rev. Fac. Agron. (Maracay) 29:33-47.2003





Mtodo de la Pendiente en Ascenso aplicado a
ensayos de cultivo de tejidos vegetales en papa
(Solanum tuberosum L.)*
Marisela Ascanio**; Margarita Cobo***;
Claret Michelangeli***; Franklin Chacn***;
Wilfre Machado***; Jos A. Guerrero****;
Carlos Ascanio ***

ABSTRACT
In this work, the Sequential Method of the Ascending curve is
applied to potato tissue culture trials in order to obtain response surfaces
that will allow to find the optimum values of the variables involved in this
process.
Key words: Tissue culture, Ascending curve Method, potato, Solanum
tuberosum, Response Surface
* Trabajo financiado por el CDCH-UCV.
** Instituto de Ingeniera Agrcola, Facultad de Agronoma. Universidad Central de Venezuela,
Apdo. 4579. Maracay 2101. Venezuela.
*** Instituto de Agronoma, Facultad de Agronoma, Universidad Central de Venezuela, Apdo.
4579. Maracay 2101. Venezuela.
**** Vicerrectorado de Infraestructura y Procesos Industriales, UNELLEZ. San Carlos. Cojedes.
Venezuela


Aceptado: marzo, 2003
REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (1) 2003

34
COMPENDIO
En este trabajo se aplica el Mtodo Secuencial de la Pendiente en
Ascenso en ensayos con el cultivo de tejidos de papa (SolanumtuberosumL.),
para la obtencin de Superficies de Respuesta que nos lleven a encontrar
los ptimos de las variables estudiadas.
Pal abras cl aves: Cultivo de tejidos, Mtodo de la Pendiente en Ascenso, papa,
Solanumtuberosum, Superficies de Respuesta
INTRODUCCION
En la experimentacin con cultivo de tejidos vegetales se utilizan, por
lo general, planificaciones experimentales con procedimientos estadsticos
previamente establecidos como el Anlisis de la Varianza, las
comparaciones mltiples de medias y el anlisis de correlacin y regresin
(Nowak y Asieda, 1992; Morpurgo, 1991; Park et al., 1995).

En este campo de la investigacin es muy frecuente la medicin de
variables cualitativas, existiendo para este tipo de variables, los
procedimientos no paramtricos; no obstante, muchos investigadores
realizan los anlisis errneamente aplicando procedimientos paramtricos a
las variables mencionadas.

El presente trabajo tiene como finalidad estudiar la aplicabilidad del
Mtodo de la Pendiente en Ascenso, que permita el hallazgo de los puntos
ptimos de los factores concentracin de cinetina, concentracin de cido
indol actico y glicina.
MATERIALES Y METODOS
Con el fin de estudiar el comportamiento del Mtodo de la Pendiente
en Ascenso en el campo del Cultivo de tejidos vegetales se hizo a una serie
de ensayos en el rea, donde se utiliz como material vegetal microestacas
de papa (SolanumtuberosumL.), las cuales se tomaron de plantas que se
encontraban creciendo en condiciones in vitro, en el medio de cultivo de
Murashige y Skoog modificado por Dodds-Roberts y Austin-Cassells, con una
Ascanio et al. / Mtodo de la Pendiente en Ascenso en papa


35
modificacin adicional realizada en el Laboratorio de Cultivo de Tejidos
del Centro de Investigaciones en Biotecnologa Agrcola de la UCV, Facultad
de Agronoma.
El Mtodo de la Pendiente en Ascenso fue generado por Box y Wilson
(1951) posteriormente al Mtodo del Factor Unico. Este mtodo ubica al
mximo mediante la puesta en marcha de una secuencia de experimentos
conectados de acuerdo a los resultados obtenidos. Cochran (1980) seala
que los primeros experimentos que se realicen deben incluir todos los
factores, ajustando despus de finalizado cada experimento una
aproximacin polinomial de la superficie de respuesta | (x
1
, x
2
, x
3
) a los
resultados, lo cual se usa para determinar las condiciones del experimento
posterior.
De acuerdo a Cochran (1980), los pasos a seguir para la aplicacin
de esta metodologa son los siguientes:
- Se sealan dos propsitos para el primer experimento
- Ajustar una ecuacin lineal
y = bo + b
1
x
1
+ b
2
x
2
+ b
3
x
3

como una aproximacin a | en la vecindad del punto inicial.
- Probar si la aproximacin lineal establecida, se ajusta dentro de los
lmites de los errores experimentales.
Para este caso se utilizaron los experimentos factoriales 2
k
. Chacn
(1994) seala que el experimento debe tener suficientes grados de libertad
para poder medir la falta de ajuste y estimar el error experimental, para lo
cual se puede recurrir a la adicin de puntos al centro del diseo o
repitiendo todos los puntos.
Por tratarse de un experimento realizado en el rea de cultivo de
tejidos vegetales, donde los errores experimentales son altos como lo refiere
Ascanio y Chacn (1995), se utilizaron siete repeticiones de todos los
puntos del diseo. El diseo ejecutado en el primer experimento fue
entonces un 2
3
con siete repeticiones, quedando los tratamientos
constituidos de la manera descrita en el Cuadro 1.
REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (1) 2003

36
Cuadro 1. Valores reales y codificados correspondientes a un diseo
factorial 2
3
para el experimento 1 del Mtodo de la Pendiente
en Ascenso
Valores reales Valores
codificados
Tratamiento X
1 =cinetina
X
2 =cido indol actico
X
3 =glicina
x
1
x
2
x
3

1 0 0 0 -1 -1 -1
2 0 0 39.96 -1 -1 -1
3 0 5.71 0 -1 -1 -1
4 0 5.71 39.96 -1 -1 -1
5 1.86 0 0 -1 -1 -1
6 1.86 0 39.96 -1 -1 -1
7 1.86 5.71 0 -1 -1 -1
8 1.86 5.71 39.96 -1 -1 -1
Obtenida la informacin de los datos, se determina la ecuacin lineal.
El paso siguiente consiste en establecer la variacin de los factores en
el primer experimento. Este punto por supuesto, depende del rea de trabajo
y de la experiencia del investigador, con lo cual logre obtener un efecto
considerable, tomando en cuenta la necesidad de no ampliar demasiado el
intervalo, evitando as que se produzcan respuestas curvas entre los mismos;
no obstante, es importante disponer de cierta informacin para lograr la
obtencin del ptimo rpidamente.
- Direccin de la mxima pendiente
Una vez finalizado el experimento 1, se realiza un cambio de la regin
experimental, con la finalidad de obtener el incremento mximo esperado en
la respuesta y . Para ello, se toma como origen de la nueva regin el centro
del experimento anterior; sin embargo, el problema consiste en hallar la
manera de trasladarse desde este punto con coordenadas x (0, 0, 0), a la
posicin p , con coordenadas (x
1
, x
2
, x
3
), para que sea mxima la
respuesta | (x
1
, x
2
, x
3
). El cambio que ocurra en estar en funcin del
cambio entre 0 y p , encontrndose esta distancia mediante la siguiente
expresin:

'
3 2 1
x ' x ' x r + + =
cuyo valor es seleccionado por el investigador.
Ascanio et al. / Mtodo de la Pendiente en Ascenso en papa


37
Escogido el valor de r, se hallan los valores correspondientes de x
i
,
que produzcan un valor | (x
1
, x
2
, x
3
) mximo, siendo la direccin de la
mxima pendiente aquella que va de 0 a p , donde las coordenadas son
las que maximizan a x
i.

El valor x
i
, que maximiza viene dado por:
i
i
x
' x
o
o|
= , donde

|
.
|

\
|
o
o
=
2
i
x
f
r

siendo | x
i
las derivadas parciales de | con respecto a x
i
, tomadas en el
punto p , donde es un multiplicador que se utiliza para satisfacer la
ecuacin de r .
La aplicacin del mtodo requiere la estimacin de las derivadas parciales
mencionadas, lo cual podra facilitarse si | es representada por medio de
una ecuacin lineal de la siguiente manera:
| = |
o
+ b
1
x
1
+ b
2
x
2
+ b
3
x
3

siendo |
o
el valor de | en el origen.
Por lo tanto | x
i
= b
i
si la ecuacin lineal es valida, siendo entonces el
cambio de x
i
en busca de la mxima pendiente, proporcional a b
i
.
- El siguiente paso, Chacn (1994) lo denomina prueba de una
investigacin factorial simple en algn punto del trnsito hacia la mxima
pendiente, refirindose ste, a la manera de describir si la prediccin del
incremento de y se obtiene realmente. El tamao de la distancia que
va a ser recorrida, est en funcin del criterio del investigador, tomando
la precaucin de no ampliar demasiado la distancia para evitar
sobrepasar la regin ptima, por omisin de alguna combinacin de
factores.
Obtenida la respuesta real del nuevo experimento, se compara con la
respuesta de prediccin. Si las mismas se encuentran muy cercanas, se
procede a realizar un nuevo recorrido a lo largo del mismo camino,
continuando este proceso hasta obtener resultados considerablemente
distintos.
REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (1) 2003

38
La conduccin del nuevo experimento factorial 2
3
se efecta,
utilizando como centro del mismo, el ltimo punto del experimento anterior,
comprobando si la regresin lineal se ajusta adecuadamente al mismo
conjunto de datos, de ser as, se halla un nuevo recorrido a la mxima
pendiente, realizando las pruebas correspondientes.
Cochran (1980), menciona que a medida que transcurren estos
experimentos, se pueden obtener con el factorial utilizado, alguna de estas
dos situaciones: a) es posible que se mantenga el ajuste de la ecuacin
lineal; sin embargo, los coeficientes sean pequeos, en cuyo caso, estaramos
en presencia de una regin semiestacionaria o b) La falta de ajuste sugiere
un ajuste inadecuado a la ecuacin lineal, por lo que se hace importante
tomar en consideracin la curvatura de la superficie, requirindose
posteriormente el uso de diseos de segundo orden, que permitan el clculo
de efectos cuadrticos.
- Correccin para errores de los niveles en el primer experimento
Cuando la escogencia de los niveles de un factor resultan muy poco
distanciados, posiblemente el efecto que produce el cambio de un nivel a
otro sea muy pequeo, requirindose hacer una correccin aumentando el
distanciamiento entre los mismos, permitiendo de esta manera el recorrido
hacia la mxima pendiente en experimentos posteriores. Si el efecto que
produce el factor es despreciable, este puede omitirse del experimento,
haciendo las aclaratorias pertinentes. En el caso de que los niveles de los
factores se encuentren muy distanciados, se producir posiblemente una
respuesta curvilnea en el intervalo entre los niveles, hacindose notorio el
error cometido por la significacin de la falta de ajuste, en cuyo caso, es
recomendable la aplicacin de diseos que permitan la obtencin de
respuestas cuadrticas, como los diseos de segundo orden.
- Simplificacin de la superficie cuadrtica
Obtenido el modelo polinomial cuadrtico, se calcula el punto
estacionario. El mismo se obtiene diferenciando con respecto a cada x.
Para el caso de este trabajo donde se estudiaron tres factores, la superficie
es de la siguiente manera:
y = bo + b
1
x
1
+ b
2
x
2
+ b
3
x
3
+ b
11
x
1
2
+ b
22
x
2
2
+ b
33
x
3
2
+ b
12
x
1
x
2
+
b
13
x
1
x
3
+ b
23
x
2
x
3

Ascanio et al. / Mtodo de la Pendiente en Ascenso en papa


39

1
x o
o|
= b
1
+ 2b
11
x
1
+ b
12
x
2
+ b
13
x
3
= 0

2
x o
o|
= b
2
+ 2b
22
x
2
+ b
12
x
1
+ b
23
x
3
= 0
3
x o
o|
= b
3
+ 2b
33
x
3
+ b
13
x
1
+ b
23
x
2
= 0
Las soluciones a estas ecuaciones serian respectivamente x
1s
, x
2s
y x
3s
,
las cuales dan una combinacin de niveles de los factores, donde la
respuesta y tiene un punto estacionario. Posteriormente, puede hacerse
una simplificacin a la ecuacin cannica, transfiriendo el origen de las
coordenadas x al punto estacionario, donde se efectan las siguientes
transformaciones:
x
1
= x
1
- x
1s

x
2
= x
2
- x
2s

x
3
= x
3
- x
3s
De esta forma los trminos lineales desaparecen, transformndose la
ecuacin original en:
y = y
s
+ b
11
x
1
2
+ b
22
x
2
2
+ b
33
x
3
2
+ b
12
x
1
x
2
+ b
13
x
1
x
3
+ b
23
x2x
3

en el cual, el valor de estimacin estacionario de y es:
y
s
= bo + (b
1
x
1s
+ b
2
x
2s
+ b
3
x
3s
)
Una transformacin adicional puede realizarse con los trminos de
productos cruzados en nuevas variables X, que se caracterizan por ser
funciones lineales ortogonales de las x
i
. Geomtricamente la transformacin
consiste en girar los ejes coordenados, hasta que los ejes principales de la
superficie cuadrtica se transformen en los ejes coordenados, reducindose
esta expresin algebraicamente, en su forma cannica.
Con las nuevas variables, la superficie de respuesta sera:
y = y
s
+
1
X
1
2
+
2
X
2
2
+
3
X
3
2

REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (1) 2003

40
siendo las
i
(races caractersticas) funciones de las b y las Xi,
combinaciones lineales de las x
i
.
- Interpretacin y ensayos adicionales
Obtenidos los resultados, se pueden presentar las siguientes situaciones:
- Las races caractersticas obtenidas (i), en su totalidad son nega-
tivas, por lo que la superficie cuadrtica tiene un mximo. Cuando el
mismo esta contenido en la regin de exploracin estudiada, se ha
logrado el xito en la obtencin de la mxima respuesta. Es
recomendable realizar pruebas de validacin
- Las races caractersticas obtenidas (i), igualmente son negativas y
determinan una respuesta mxima, sin embargo, esta se halla fuera
de la regin de exploracin, por lo que el mximo estimado se
encuentra posiblemente lejano a la verdadera respuesta mxima.
Para este caso se recomienda moverse en la direccin del mximo
estimado, y observar si se presentan valores variables, con el fin de
realizar ensayos para ajustar una nueva superficie, tomando en
consideracin los resultados anteriores
- Se presentan races caractersticas negativas y positivas, por lo que se
ha obtenido un punto de silla, es decir, para algunas x se presenta
un mximo, y para otras un mnimo, razn por la cual, este punto
tambin es denominado minimax. En este caso, se esperara un
incremento en la respuesta mas rpidamente, cuando se incrementan
las variables regresoras x , que tienen las ms altas races
caractersticas (i) positivas
- La superficie cuadrtica no se ajusta, recurrindose a la bsqueda de
ciertas soluciones tales como: adicin de puntos para estudiar la
superficie cbica, o realizar nuevos experimentos en una regin
contigua, que presente un punto de relativa alta respuesta, con
intervalos pequeos entre los factores.
Este Mtodo de Mxima Pendiente, resulta algo complejo, sin embargo,
conduce tericamente, a resultados ms completos.
Ascanio et al. / Mtodo de la Pendiente en Ascenso en papa


41
RESULTADOS Y DISCUSION
El primer experimento, consisti en el estudio de una parte inicial de
la regin de exploracin, tal como se describi en la metodologa, y
transcurridas tres semanas de comenzado el mismo, se ajust la ecuacin
lineal
Y: 0.03795 + 0.00948 X
1
+ 0.01488 X
2
+ 9.821x10
-4
X
3

Al realizar el anlisis de varianza, que aparece en el Cuadro 2, se
observa:
Cuadro 2. Anlisis de varianza correspondiente al experimento 1 del
Mtodo de Pendiente en Ascenso para la variable peso fresco
de brotes de papa (Solanum tuberosum L.) cultivadas in vitro
F. de V. G. de L. SC CM F
Regresin 3 0.01748 0.00583 12.67 **
X
1
1 0.00504 0.00504 10.95 **
X
2
1 0.01239 0.01239 26.93 **
X
3
1 5.402 x 10
- 5
5.402 x 10
- 5
0.117 ns
F. de A. 4 0.00052 0.00013 0.28 ns
Error Exp. 48 0.02233 0.00046
Total 55 0.04033
R
2
ajustado =0.4007 Cv =56.58 %

La ecuacin lineal logra ajustarse con este experimento, observndose
en el ANAVAR la significacin para el efecto de regresin, y no
significacin para la falta de ajuste. As mismo, al desglosar los efectos, se
detecta significacin para los factores X
1
(Kin) y X
2
(AIA), y no
significacin para el factor glicina, obtenindose igual repuesta en ensayos
previos a este experimento.

El siguiente paso, consisti en establecer la variacin de los factores,
con la finalidad de continuar el estudio de la regin de exploracin, para la
cual se estableci un nuevo experimento donde se traslad el nivel cero del
primer factor a un nivel de 0.2 mg/l, por lo tanto, siguiendo lo establecido
REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (1) 2003

42
en la metodologa, los restantes factores estaban en funcin de los valores de
los b
i
,
As:
b
1
= 0.00948 ; b
2
= 0.01488 ; b
3
= 9.821 x 10
- 4
Entonces:
Si el primer factor x
1
(Kin) se traslada al nivel 0.2 mg/l:
0.00948 X
1
------------------- 0.01488 X
2

0.20000 X
1
-------------------- X
2
= 0.31 mg/l de AIA
0.00948 X
1
--------------------- 9.821 x 10
- 4
X
3

0.20000 X
1
--------------------- X
3
= 0.02 mg/l de glicina
Los puntos de origen del experimento 2, de acuerdo a los clculos
realizados fueron:
X
1
= 0.20 mg/l de Kin ; X
2
= 0.31 mg/l de AIA
X
3
= 0.02 mg/l de Glicina
El experimento 2 qued constituido entonces de la manera descrita
en el Cuadro 3.
Cuadro 3. Estructura del experimento 2, del mtodo de la pendiente en
ascenso
Concentracin ( mg/l )
Tratamiento X
1
X
2
X
3

1 0.2 0.31 0.02
2 0.2 0.31 1.02
3 0.2 1.31 0.02
4 0.2 1.31 1.02
5 0.6 0.31 0.02
6 0.6 0.31 1.02
7 0.6 1.31 0.02
8 0.6 1.31 1.02


Ascanio et al. / Mtodo de la Pendiente en Ascenso en papa


43
donde, al igual que en los casos anteriores, transcurridos tres semanas de
iniciado el mismo, se obtuvo el siguiente modelo:
y = 0.08509 + 0.01295 X
1
0.01668 X
2
0.02175 X
3

Los resultados del anlisis de varianza se observan en el Cuadro 4.
Cuadro 4. Anlisis de varianza correspondiente al experimento 2 del
Mtodo de la Pendiente en Ascenso para la variable peso fresco
de brotes de papa (Solanum tuberosum L.) cultivadas in vitro

F. de V. G. de L. SC CM F
Regresin 3 0.01089 0.00363 1.84 ns
X
1
1 0.000375 0.000375 0.21 ns
X
2
1 0.00389 0.00389 2.18 ns
X
3
1 0.006625 0.006625 3.72 ns
F. de A. 4 0.01733 0.004332 2.43 ns
Error Exp. 48 0.08557 0.001782
Total 55 0.11379
R
2
=0.0436 CV =64.56 %
La repuesta para este segundo experimento, en el punto mximo fue
de 0.0488 g.
La estimacin de la respuesta en el punto mximo obtenida con el
modelo del experimento 1 fue:
Y = 0.03795 + 0.00948X
1
+ 0.01488X
2
+ 9.821 x 10
-4
X
3
Y = 0.03795 + 0.00948 (0.6) + 0.01488 (1.31)+ 9.821 x 10
-4
(1.02)
Y = 0.064 g.

Realizando la comparacin entre el resultado predicho Y = 0.064 g y el
resultado obtenido Y = 0.0488 g, se puede suponer que debido a que los
mismos presentan una diferencia suficientemente grande, la repuesta
obtenida no es lineal, por lo que se hace importante considerar la curvatura
de la superficie; no obstante, se esperara una falta de ajuste significativa, no
observndose en el Anlisis de Varianza mostrado en el Cuadro 4. Sin
embargo, la no significacin del efecto de regresin lineal, aunado a la baja
REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (1) 2003

44
determinacin obtenida (R
2
ajustado = 0.0436), sugiere la presencia de
curvatura en la superficie. Este resultado de la falta de ajuste puede ser
debido al alto valor del error experimental obtenido, que se refleja en un
elevado coeficiente de variacin (Cv = 64.56 %), lo cual posiblemente
pudo enmascarar el efecto significativo de la falta de ajuste, mostrndose de
esta manera, la alta sensibilidad de este mtodo a un error experimental
alto, tal como lo menciona Cochran (1980).
Se procedi a estudiar la curvatura de la superficie mediante un
diseo de segundo orden, para la cual se utiliz el diseo Compuesto
Central Ortogonal.
El nuevo experimento quedo constituido de la manera que se muestra
en el Cuadro 5.
Cuadro 5. Estructura de los tratamientos (valores reales y codificados)
del Diseo Compuesto Central Ortogonal para el mtodo de
la Pendiente en Ascenso.

Valores Reales Valores Codificados
Tratamiento X
1


X
2
X
3
X
1
X
2
X
3

1 0.27 0.7 0.5 -1 -1 -1
2 0.27 0.7 2.5 -1 -1 1
3 0.27 1.3 0.5 -1 1 -1
4 0.27 1.3 2.5 -1 1 1
5 0.53 0.7 0.5 1 -1 -1
6 0.53 0.7 2.5 1 -1 1
7 0.53 1.3 0.5 1 1 -1
8 0.53 1.3 2.5 1 1 1
9 0.2 1.0 1.5 - o 0 0
10 0.6 1.0 1.5
o
0 0
11 0.4 0.5 1.5 0 - o 0
12 0.4 1.5 1.5 0
o
0
13 0.4 1.0 0 0 0 - o
14 0.4 1.0 3 0 0
o
15 0.4 1.0 1.5 0 0 0
15 0.4 1.0 1.5 0 0 0
15 0.4 1.0 1.5 0 0 0
15 0.4 1.0 1.5 0 0 0
15 0.4 1.0 1.5 0 0 0
15 0.4 1.0 1.5 0 0 0
Los resultados del anlisis de la varianza correspondiente a este
experimento, se observan en el Cuadro 6.
Ascanio et al. / Mtodo de la Pendiente en Ascenso en papa


45
Cuadro 6. Anlisis de varianza del Diseo Compuesto Central
Ortogonal para la variable Peso fresco de brotes de papa
(Solanum tuberosum L.) cultivadas in vitro para el
Mtodo de la Pendiente en ascenso.
F. de V. G de L. SC CM F
Tratamiento 14 0.02870593 0.0020504 4.30 **
Regresin 9 0.0082110 0.0009123 1.91 ns
X
1
1 0.00044568 0.00044568 0.93 ns
X
2
1 0.00067556 0.00067556 1.41 ns
X
3
1 0.00148996 0.00148996 3.12 ns
X
1
2
1 0.003130776 0.003130776 6.57 *
X
2
2
1 0.000055814 0.000055814 0.11 ns
X
3
2
1 0.00005841 0.00005841 0.12 ns
X
1
X
2
1 0.00187056 0.00187056 3.92 ns
X
1
X
3
1 0.00045156 0.00045156 0.94 ns
X
2
X
3
1 0.00003306 0.00003306 0.06 ns
F. de Ajuste 5 0.02049493 0.004090 8.58 **
EE ( Tra Cent. ) 10 0.00635610
EE ( Rep/ Tra ) 15 0.00555723
EE ( Conjunto ) 25 0.01191333 0.00047653
Total 39 0.04061926
R
2
Ajustado =0.2597 CV =44.55 % Promedio =0.0491
El modelo obtenido fue:
Y = 0.01059 0.14373 X
1
+ 0.11728 X
2
0.031261 X
3
+
0.489819 X
1
2
+ 0.008722 X
2
2
+ 0.009142 X
3
2
0.277244 X
1
X
2

+ 0.040865 X
1
X
3
0.004792 X
2
X
3
Las dosis ptimas de los factores, realizando el anlisis cannico y el
anlisis Ridge, se presentan en el cuadro 7.
REV. FAC. AGRON. (MARACAY) 29 (1) 2003

46
Cuadro 7. Dosis ptimas de los factores cinetina, cido indol actico y
glicina, realizando el anlisis cannico y el anlisis Ridge
para el Mtodo de la Pendiente en Ascenso.
Factores
Valores
Codificados
Valores Reales ( mg/l ) M
X
1
( Conc. de Kin ) 0.46027 0.49205 2.28
X
2
( Conc. de AIA ) 0.72559 1.36279 7.75
X
3
( Conc. de Glicina ) -0.35526 0.96711 12.78

El punto estacionario es un punto de silla, donde se obtiene un valor
estimado de la variable repuesta de 0.040 g.
El anlisis de la varianza del Cuadro 6, indica significacin para el
efecto de tratamiento y no significacin para el efecto de regresin; as
mismo, al desglosar los efectos, se observa significacin para Kin en su
forma cuadrtica, presentndose la falta de ajuste altamente significativa. El
coeficiente de variacin fue relativamente alto y la determinacin (R
2
ajustado) baja, no obstante, el anlisis Ridge indica dosis ptimas dentro de
la regin de exploracin, lo que sugiere, que aun cuando se presentaron
ciertas dificultades en el proceso de anlisis, y siendo de acuerdo a Cochran
(1980) un mtodo que requiere errores experimentales muy pequeos,
puede ser til en esta rea, pues los resultados obtenidos en cuanto a los
niveles ptimos de los factores (0.49 mg/l de Kin, 1.36 mg/l de AIA, 0.96
mg/l de Glicina), no se encuentran muy alejados por los niveles
recomendados por los especialistas, excepto el nivel de glicina.
CONCLUSIONES
El Mtodo Secuencial de la Pendiente en Ascenso mostr algunas
dificultades al inicio de los anlisis, dado la alta variabilidad y el bajo ajuste
obtenido; no obstante, los niveles ptimos de los factores hallados se
encuentran dentro de la regin de exploracin, y cercanos a los niveles
recomendados por los especialistas en el rea, por lo que su utilizacin en
los estudios biotecnolgicos es factible, considerando la naturaleza de la
variable repuesta estudiada.
Ascanio et al. / Mtodo de la Pendiente en Ascenso en papa


47
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Ascanio, E., M. 1995. Comparacin de Diseos de Superficie de Respuesta
en la Experimentacin con Cultivo de Tejidos Vegetales. Trabajo de
Ascenso. Maracay, Venezuela; Facultad de Agronoma, Universidad
Central de Venezuela. 216 p.
Box, G.E.P.; K.B. Wilson. 1951. On the experimental attainment of
optimun conditions. Roy. Statistics. Soc. Serie B 13:1-45.
Chacn, L., F. 1994. Diseo y Anlisis de Experimentos para Generar
Superficies de Respuesta. Trabajo de Ascenso. Maracay, Venezuela;
Facultad de Agronoma, Universidad Central de Venezuela. 348 p.
Cochran, W. G. 1980. Diseos Experimentales. Mxico. Editorial Trillas.
661p.
Morpurgo, R. 1991. Correlation between potato clones growth in vivo and
under sodium chloride stress conditions. Plant Breeding. 107(1):8082.
Nowak, J.; S. Asieda. 1992. Gelling agent and light effects on in vitro
tuberization of potato cultivars. American Potato Journal. 69(7):461470.
Park, S.W.; J.H. Jeon,; H.S. Kim,; H. Joung. 1995. Effects of grapefruit
seed extract on penicillium growth and tuberization in tissue culture of
potato (SolanumtuberosumL.). Journal of the Korean Society for
Horticultural Science. 36(2):179184.