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El Mtodo ECIS
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ECIS Teora Webinar pregrabado (22:55)

ECIS (Electric clula-sustrato Impedancia de deteccin) es un mtodo basado en la impedancia en tiempo real, de etiqueta libre
para estudiar las actividades de las clulas cultivadas en cultivo de tejidos. Estos incluyen cambios morfolgicos, la locomocin
celular, y otras conductas dirigidas por el citoesqueleto de la clula. Esta tecnologa de monitoreo celular basada en la
impedancia fue inventado por los Dres. Ivar Giaever y Charles R. Keese que fund Biofsica Aplicada, Inc.
El enfoque ECIS se ha aplicado a numerosas investigaciones, incluyendo mediciones de la naturaleza invasiva de las clulas
cancerosas, la funcin de barrera de las clulas endoteliales, en las pruebas de toxicidad in vitro como una alternativa a los
ensayos con animales, y transduccin de seales que implica GPCR para el descubrimiento de frmacos modernos.
Cmo cuantificar el comportamiento celular
La funcin de la clula modula la morfologa celular. ECIS es capaz de detectar y cuantificar los cambios morfolgicos en el sub-
nanomtrica a micrmetro gama. En ECIS se aplica una pequea corriente alterna (I) a travs del patrn de electrodo en la parte
inferior de las matrices de ECIS (corriente continua no se puede utilizar). Esto resulta en un potencial (V) a travs de los
electrodos, que se mide por el instrumento ECIS. La impedancia (Z) est determinada por la ley de Ohm Z = V / I. Cuando se
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INICIO
ECIS Teora
Qu es la impedancia?
Las mediciones de
tiempo del curso
Reproducibilidad
Modelo ECIS
aaden las clulas a los ECIS Arrays y se unen a los electrodos, que actan como aislantes aumentando la impedancia. Como
las clulas crecen y cubren los electrodos, la corriente se ve impedida de una manera relacionada con el nmero de clulas que
cubre el electrodo, la morfologa de las clulas y la naturaleza de la unin de las clulas. Cuando las clulas son estimuladas para
cambiar su funcin, los cambios en la morfologa celular se acompaan alteran la impedancia. Los datos generados es la
impedancia en funcin del tiempo.
Cmo frecuencias revelan el comportamiento celular
Por qu son importantes mltiples frecuencias de CA? Para entender por qu la frecuencia de CA es importante en ECIS
tenemos que considerar cmo la frecuencia afecta a los circuitos de corriente con electrodos de pilas cubiertas. (Nota: la corriente
total se mantiene constante y se miden los cambios de voltaje.) A frecuencias relativamente bajas (<2.000 Hz) la mayora de la
corriente fluye en los canales de soluciones bajo y entre las clulas adyacentes (lneas rojas).
A frecuencias ms altas (> 40.000 Hz) actuales parejas ms ahora capacitivamente directamente a travs de las membranas
celulares aislantes (lneas verdes).
La impedancia de alta frecuencia se ve ms afectada por la cobertura celular, mientras que la baja frecuencia responde ms
fuertemente a los cambios en los espacios ya sea debajo o entre las clulas. Con el instrumento ms avanzado Z , donde la
impedancia se descompone en sus componentes (resistencia y la capacitancia), la informacin cuantitativa acerca de las clulas
se puede conseguir mediante el modelado (Giaever y Keese PNAS 1991). Usando datos de impedancia en mltiples frecuencias
AC el modelo ECIS calcula cambios de rumbo vez en:
La funcin de barrera (permeabilidad) de la capa de clulas
El grado de flujo restringido de la corriente en las clulas
La capacitancia de la membrana celular
Cmo Electrodo Designs revelan aspectos del comportamiento celular
Pequeos electrodos
pequeos electrodos (1E, 10E, 10E + arrays tipo) y su disposicin dentro de los pozos de asegurar que toda la corriente pasa a
travs de la monocapa celular. Esto permite la capacidad para analizar los datos con el software de modelado ECIS para
determinar la funcin de barrera, capacitancia de la membrana celular, as como el espacio entre la membrana de clulas basales
y el electrodo. Mantener el rea de superficie total de los electrodos pequea tambin permite una corriente alterna relativamente
baja para generar el gran campo elctrico necesario ya sea electroporate o matar las clulas en experimentos de migracin. Los
electrodos pequeos tambin proporcionan la capacidad de controlar los nano-escala no correlacionadas cambios morfolgicos de
las poblaciones individuales o pequeos de clulas (<100), mientras que los electrodos ms grandes o mltiples proporcionan la
respuesta morfolgica promediado de muchas clulas (1000). electrodos grandes algunos protocolos experimentales , tales
como la proliferacin celular, requieren inoculaciones dispersas que conducen a una variacin de la densidad celular en la parte
inferior del pozo. Electrodos grandes (matriz CP) o una gran coleccin de pequeos electrodos (10E + matriz) aumenta el tamao
de la muestra lo que resulta en una menor variabilidad.
Especializado Designs
Biofsica Aplicada ofrece arrays optimizados para la observacin de las clulas bajo una variedad de condiciones tales como el
estrs de alto cizallamiento y la hipoxia / hiperoxia. Adems, los arreglos especializados para microscopa correlativa y ECIS
estn disponibles.

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