PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATOLICA DEL ECUADOR SEDE IBARRA

ESCUELA DE CIENCIAS AGRCOLAS Y AMBIENTALES

GUIA DE ACTIVIDADES PRACTICAS N 001
1. DATOS INFORMATIVOS
ASIGNATURA: Biologa
RESPONSABLE CLASE TEORICA: MSc. Santiago Mafa
RESPONSABLE CLASE PRCTICA: MSc. Santiago Mafa
2. TEMA: ESTRUCTURA DE LA CLULA ANIMAL Y VEGUETAL
. OB!ETIVO:
Apreciar y comprender cada
uno de los procesos implicados
en la preparacin
de placas (obtencin de la muestra,
montaje, fjacin, tincin, lavado,
secado,
observacin
!econocer algunas
caractersticas mor"olgicas
generales de c#lulas
representativas
como las c#lulas de sangre peri"#rica,
las c#lulas de la mucosa bucal y
c#lulas de epidermis de cebolla.
". FUNDAMENTO TORICO:
$na de las principales aplicaciones del
microscopio se presenta en el campo
de la biologa celular. %a posibilidad de
observar m&s detalladamente las
estructuras
celulares ampli de "orma
impresionante nuestro conocimiento
en
esta &rea. Aun cuando e'isten los
microscopios electrnicos, capaces de
lograr
magnifcaciones de m&s de ()).)))*
con una resolucin apro'imada de ).+
nm, es el microscopio ptico el de
mayor uso en los laboratorios y por
tanto es
importante recalcar ,ue muc-as de las
estructuras celulares, observadas con
#l, presentan en general muy poco
contraste entre s y es necesario
-acerlas
resaltar selectivamente, ya sea a
trav#s de reacciones ,umicas con
tinciones
especfcas ,ue desta,uen la reaccin
,umica con elementos celulares,
mediante
reacciones ,ue aumenten
especfcamente la densidad ptica de
los mismos o
bien mediante ciertas t#cnicas de
sombreado ,ue permitan apreciar los
relieves
de la superfcie ,ue se observa.
".1. MATERIALES Y REACTIVOS:
".1.1. M#$%&'#(%)

Parte I
PARTE 1
1 Lanceta (estudiante), algodn, alcohol antisptico,
2 portaobetos
1 cubreobetos, li!uido "right, solucin ta#pn$
"right,
toallas absorbentes, aceite de in#ersin, guantes,
tapabocas
PARTE 2Parte II
1 esp%tula de #adera (estudiante), 1 portaobetos,
a&ul de #etileno,
toallas absorbentes, aceite de in#ersin, guantes,
tapabocas
Parte III
'ebolla (E()*IA+TE), 1 portaobetos, 1
cubreobetos , lugol,
toallas absorbentes, aceite de in#ersin, guantes,
tapabocas
Parte I,
'ulti-o de #icroorganis#os o agua estancada
(estudiante), algas (E(T)*IA+TE .P'I.+AL),
2 portaobetos, 2 cubreobetos,
toallas absorbentes, aceite de in#ersin, guantes,
tapabocas
Microscopio
". PROCEDIMIENTO
Parte I/ Estudio de un e0tendido de sangre
peri1rica
Las clulas sangu2neas constitu3en un e0celente
siste#a para estudiar algunas
caracter2sticas #or1olgicas celulares (Ane0o 2)/
Ade#%s, su estudio es de
esencial i#portancia desde el punto de -ista
#dico/ ,ale la pena entonces
!ue nos 1a#iliarice#os con los tipos #%s
i#portantes !ue se encuentran en la
circulacin peri1rica 3 con uno de los #todos
!ue #%s co#4n#ente se usa
para estudiarlos5 el e0tendido de sangre
peri1rica/
Preparacin del e0tendido
1/ )tili&ando una lanceta o pun&n 3 despus de
li#piar cuidadosa#ente la
3e#a del dedo #edio de la #ano i&!uierda
puncinala sin causar una herida
pro1unda/
2/ Aprieta un poco hasta obtener una pe!ue6a
gota de sangre/
7/ 'olcala sobre un portaobeto li#pio en la
&ona indicada en la 1igura 1/
8/ 'on la a3uda de otro portaobeto e0tindela
con-eniente#ente 3 dala
secar (Ane0o 7)/
9/ .bsr-ala al #icroscopio e#pleando el
obeti-o de 1:;7 3 gra1ica/
Tincin
1/ A6ade cuidadosa#ente unas gotas de li!uido
de "right sobre el e0tendido
seco hasta cubrirlo, espera 7 #inutos/ +ota5 Las
gotas de "right deben
per#anecer sin secarse para continuar el
siguiente paso/
2/ Agrega la solucin ta#pn (bu11er) enci#a
del "right para !ue se #e&cle con
l 3 1or#e en la super1icie un brillo #et%lico/
*ea actuar por tres #inutos
7/ La-a la preparacin con un poco de agua
corriente/ El chorro debe caer
perpendicular#ente sobre la l%#ina/
8/ *ea secar la l%#ina en posicin -ertical 3
li#pia, si es necesario, la parte
in1erior con una gasa o trapo #oado/
9/ .bser-a la preparacin al #icroscopio
utili&ando pri#ero el obeti-o 1:;,
3 gra1ica/
</ Pasa ahora al obeti-o 89;/ =ra1ica/ +ota5 +o
ol-ides rotular tus dibuos
inclu3endo el au#ento !ue tienen 3 los
ele#entos !ue en l reconoces/
>/ )sa ahora el obeti-o 1::;/ A6ade una gota
de aceite de in#ersin sobre
el cubreobeto/ 'oloca el obeti-o de in#ersin
con la punta su#ergida en
el aceite/ Aclara la i#agen con el tornillo
#icro#trico/ +ota5 Recuerda
baar lenta#ente pues puede partirse la placa
#ontada/
?/ E0a#ina una clula te6ida de rosa p%lido,
e0a#ina luego algunas de las
clulas te6idas intensa#ente de color #orado/ (i
no aparecen en el ca#po
original #ue-e la preparacin hasta encontrar
los dos tipos de clulas/
@/ E0a#ina -arios tipos de leucocitos hasta
encontrar -arios di1erentes/ .rintate
con la gu2a #or1olgica del Ane0o 2/
.pcional/ E-al4a el poder de resolucin del
#icroscopio usando otros #edios
de dispersin (agua, cetona, benceno)
Parte II/ Estudio de las clulas epiteliales de
la #ucosa oral
La ca-idad oral se encuentra re-estida por una
#e#brana celular de capas #4ltiples/
Es 1%cil desprender las clulas #%s super1iciales
de dicha #e#brana sin
causar de#asiado trau#atis#o a la #is#a 3
estudiar sus caracter2sticas generales/
Preparacin del e0tendido
'on un baa lenguas o una esp%tula pe!ue6a,
e1ect4a un raspado de la #eilla
interna 3 colcala sobre un portaobetos tratando
!ue el #aterial !uede bien
e0tendido/
Tincin
Agrgale una gota de a&ul de #etileno, desecha
el e0ceso 3 obser-a la preparacin
al #icroscopio utili&ando obeti-os 1:; 3 89;/
*ibua las clulas de la #ucosa oral 3 se6ala las
estructuras 3 organelas celulares
!ue distingues (incl43elo en tu in1or#e)/
Parte III/ 'lulas de epider#is de cebolla
Las cebollas parecen #ateriales #uertos cuando
las co#pra#os en el #ercado/
En realidad son bulbos 1or#ados por clulas
-i-as de las cuales pueden
crecer ra2ces 3 hoas cuando las cebollas se
plantan o se al#acenan en un
sitio h4#edo/
Preparacin del e0tendido
1/ 'orta un bulbo de cebolla en cuatro partes/
.bser-ar%s !ue cada parte se
separa por s2 sola en capas lla#adas cat%1ilos/
2/ To#a un de estos cat%1ilos con la super1icie
cnca-a hacia ti 3 r#pela,
entonces -eras !ue se desprende con 1acilidad
una capa #u3 delgada 3
transparente !ue es la epider#is/
7/ To#a un 1rag#ento de epider#is 3 colcala
en un portaobeto con una gota
de agua de #odo !ue la super1icie !ue estaba en
contacto con el cat%1ilo
!uede hacia arriba/
8/ 'olcale un cubreobetos 3 obser-a al
#icroscopio/ *ibua/
Tincin
1/ Ahora saca la preparacin del #icroscopio 3
colcale una gota de Lugol en
el borde del cubreobetos para !ue la solucin
penetre por di1usin/
2/ E0trae el l2!uido sobrenadante con papel
toalla/
7/ .bser-a al #icroscopio nue-a#ente/ *ibua/
Parte I,/ Proto&oarios 3 algas
Las algas 3 los proto&oarios son organis#os
unicelulares de #a3or ta#a6o !ue
las bacterias/ Las pri#eras consideradas
-egetales 3 los segundos considerados
co#o ani#ales/ 'uando las algas alcan&an un
deter#inado ta#a6o se di-iden5
las dos clulas hias pueden separarse o
per#anecer en cadenas (1ila#entos) o
#asas (colonias)/
Preparacin
'oloca una gota de culti-o de #icroorganis#os
sobre el portaobetos, coloca
una la#inilla o cubreobeto 3 obser-a al
#icroscopio e#pleando el obeti-o de
1:;/ (i algunos #icroorganis#os se #ue-en tan
r%pida#ente !ue se di1iculta
su obser-acin usa una gota de una solucin
a&ucarada sobre la gota de culti-o,
luego colcale la la#inilla 3 obser-a/ Aa& lo
#is#o con las algas/
".". CUESTIONARIO:
BCu di1erencias obser-as con respecto al
gr%1ico anteriorD (inclu3e esto en
el 2te# correspondiente a los resultados dentro
de tu in1or#e de laboratorio)
1/ BA !u se debe la tincin espec21ica de los
n4cleos en las clulas sangu2neas
cuando se utili&a este protocoloD
2/ BCu e#pleo se le da al e0tendido de sangre
peri1rica a ni-el diagnsticoD
7/ BEn !u consiste la 1iacin del #aterial 3
c#o 1ue reali&ada en este casoD
$ BCu 1or#a tienen estas clulasD BPoseen
adaptaciones relacionadas con su
1uncinD
$ 'on el obeti-o de 1:; Bcu%l es el color 3 la
1or#a del n4cleo despus de la
adicin del LugolD
$ B'u%l es la otra estructura celular !ue se
obser-a dentro del n4cleoD
$ BCu di1erencias se encuentran entre la clula
te6ida 3 la !ue no lo est%D
$ 'o#para las clulas de la cebolla con las
clulas de la #ucosa oral/ BEn !u
se ase#ean, en !u se di1erencianD
$ BCu di1erencias encuentras entre las algas 3
los proto&oarios !ue estas
obser-andoD
$ *ibua por lo #enos tres di1erentes ee#plares
de los !ue has obser-ado/
* BIBLIOGRAFA DE CONSULTA
. /A0123.1. Microbiologa m#dica.
edit 4nteramericana, M#'ico (567.
8 (9.
: %4;<=.8. M#todos de laboratorio +.
edit. 4nteramericana, M#'ico (56:.
8 ()>(+.
6 1A8>3AM?!A;?. Biologa,
8r&cticas de laboratorio.
PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATOLICA DEL ECUADOR SEDE IBARRA
ESCUELA DE CIENCIAS AGRCOLAS Y AMBIENTALES
IINFORME DE ACTIVIDADES PRACTICAS N 001
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