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Recuento de clulas sanguineas

PRCTICA

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PRCTICA N 02
PRCTICA 2.1
RECUENTO TOTAL DE BLANCOS
INTRODUCCIN
Los leucocitos o glbulos blancos son clulas que estn principalmente en la sangre y
circulan por ella con la funcin de combatir las infecciones o cuerpos extraos; pero en
ocasiones pueden atacar los tejidos normales del propio cuerpo.
Se llaman glbulos blancos, ya que ste color es el de su aspecto al microscopio.
Hay diferentes grupos de glbulos blancos: los llamados polimorfonucleares
(neutrfilos, eosinfilos y los basfilos) y los mononucleares (los linfocitos y los
monocitos).

El origen de todas las formas de leucocitos es a partir de clulas madres de la mdula
sea.
La modificacin de la cantidad de leucocitos puede orientar al diagnstico de
enfermedades infecciosas, inflamatorias, cncer y leucemias, y otros procesos. Por ello
el recuento es muy orientativo en diferentes enfermedades.
OBJETIVO

Aplicar la metodologa para un recuento de Leucocitos por milmetro cbico de
sangre e interpretar el resultado.
Identificar la utilidad clnica del recuento de leucocitos.
Describir el fundamento del mtodo.
FUNDAMENTO

Para el conteo de leucocitos, se usan mtodos sistemticos que son ms rpidos y
precisos, y los mtodos manuales.

Todo mtodo manual de recuento celular incluye 3 fases:

o Dilucin de la sangre
o Muestreo de la sangre diluida en un volumen
o Recuento de clulas en ese volumen
o Para el recuento de leucocitos se cuentan los 4 cuadrados de las esquinas.
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Para su dilucin, utiliza la pipeta de blancos, se utiliza como diluyente el lquido de
Tounk. El lquido de Tounk es hipotnico de modo que se destruyen los hemates y as
no entorpecen en el recuento.
El lquido de Tounk consta de cido actico glaciar 2ml, violeta de genciana disolucin
de 1% 1ml y agua destilada en cantidad suficiente para 1000ml. Deber filtrarse a
menudo para evitar levaduras y hongos.
En un principio es un poco difcil distinguir los leucocitos de los restos de membranas
de los hemates hemolizados. Se debe tener en cuenta que los leucocitos son ms
refringentes (ms brillantes) al moverlo con el microscopio que los restos de hemates.
Se debe observar la presencia de la membrana citoplasmtica y de la membrana nuclear
(a veces ms) como lneas finas y brillantes. Esto se observa fcilmente moviendo el
microscopio hacia delante y hacia atrs
Esta prueba sencilla y rpida se solicita para detectar o diagnosticar procesos que
afectan a las clulas de la serie blanca de la sangre o leucocitos, como infecciones,
inflamaciones o cualquier otra enfermedad que repercuta sobre los leucocitos o glbulos
blancos; para monitorizar el tratamiento de algn transtorno sanguneo o en la
monitorizacin de tratamientos que pueden rener repercusiones sobre los leucocitos.
MATERIALES
o Sangre ml

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o Cmara de Neubauer

o Pipeta cuenta glbulos blancos

o Solucin de Tounk


o Microscopio
MTODO
1. Con la pipeta tomar sangre hasta la marca 0.5
2. Completar con solucin de Tounk hasta la marca 11
3. Dejar reposar 3`

4. Eliminar las primeras dos gotas y la tercera depositar en la cmara de Neubauer
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5. Contar con objetivo de 40X

RESULTADOS



Se observ los leucocitos, pero tambin los restos de eritrocitos

Los recuentos de leucocitos, se expresan como concentraciones, que en este caso seran
nmero de clulas por unidad de volumen de sangre, que es 1mm
3

Despus de contar los glbulos blancos de los 4 cuadrados angulares, se suman el total
de ellos y con dicha cantidad de hace el siguiente clculo:
N de leucocitos x mm
3
= altura x dilucin x rea
N de leucocitos x mm
3
= 1/10 x 1/20 x 4 = 1/10 000
N de leucocitos x mm
3
= 4/200 = 1/50
N de leucocitos x mm
3
= N de leucocitos contados x 50

En el anlisis hecho, los resultados de la cuenta de clulas quedaron as por casilla:
50+41+48+45=(184)50=9200 x mm3





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CONCLUSIONES

El recuento leucocitario representa el nmero de leucocitos en un litro de sangre
completa. La cuantificacin o recuento de leucocitos es muy importante para el
diagnstico de enfermedades.
Un bajo nmero de glbulos blancos se denomina leucopenia y puede deberse a:
o Insuficiencia de la mdula sea (por ejemplo: debido a infeccin, tumor o
cicatrizacin anormal).
o Enfermedades vasculares del colgeno (como el lupus eritematoso sistmico).
o Enfermedad del hgado o el bazo.
o Radioterapia o exposicin a la radiacin.

Un alto nmero de glbulos blancos se denomina leucocitosis y puede deberse a:
o Anemia.
o Tumores de la mdula sea.
o Enfermedades infecciosas.
o Enfermedad inflamatoria (como artritis reumatoide o alergia).
o Leucemia.
o Estrs emocional o fsico intensos.
o Dao tisular (por ejemplo, quemaduras).























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PRCTICA 2.2
RECUENTO DE EITROCITOS
INTRODUCCIN
El eritrocito maduro no es una verdadera clula: no posee ncleo, no se reproduce y
consume una cantidad mnima de oxgeno. Su membrana est compuesta de una
combinacin de lpidos y protenas, que le confieren propiedades especiales de
permeabilidad.
La funcin principal de la clula roja es transportar oxgeno hacia los tejidos y traer de
vuelta dixido de carbono de stos hacia los pulmones.
Contiene alrededor de un 60% de agua, el in predominante en su interior es el potasio
y el 34% de su peso corresponde a la hemoglobina

OBJETIVO

Aprender a realizar un recuento de eritrocitos por milmetro cbico de sangre,
interpretar el resultado, as como adiestrarse en el manejo de la cmara de Neubauer y la
pipeta de toma
FUNDAMENTO

Para el conteo de eritrocitos, se usan mtodos sistemticos que son ms rpidos y
precisos, y los mtodos manuales.
Como todo mtodo manual de recuento celular incluye 3 fases:
o Dilucin de la sangre
o Muestreo de la sangre diluida en un volumen
o Recuento de clulas en ese volumen

Una suspensin celular se caracteriza por presentar un nmero de partculas
microscpicas dispersas en un fluido. Habitualmente ser necesario determinar tanto la
densidad de las clulas en la suspensin como el porcentaje de stas que son viables.
Para determinar la densidad de las clulas se emplean diferentes tcnicas, desde la
relativamente simple cmara de contaje celular de la que existen numerosas variantes,
entre ellas la que utiliza la cmara de Neubauer

Para el conteo de eritrocitos, es necesario diluir la sangre con el lquido de Hayem, en
una proporcin exacta. Luego se examina en el microscopio con una cantidad pequea
colocada en la cmara de Neubauer, contando el nmero de elementos que se
encuentran en el retculo de la cmara y mediante una operacin se obtiene el nmero
total.
Para la realizacin del conteo manual se necesita un lquido de dilucin, una cmara de
recuento, una pipeta diluidora y un microscopio.

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MATERIALES
Sangre 3 ml

Cmara de Neubauer


Pipeta cuenta glbulos rojos

Solucin de Hayem(lquido de disolucin)

Microscopio
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MTODO
1. Tomar sangre con la pipeta, hasta la marca 0.5

2. Completar en la solucin de Hayem hasta la marca 101 y mezclar.

3. Dejar en reposo 3`

4. Eliminar las primeras dos gotas, la tercera depositar en la cmara de Neubauer

5. Contar con objetivos de 40X
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RESULTADOS

Los recuentos de eritrocitos se expresan como concentraciones, que en este caso seran
nmero de clulas por unidad de volumen de sangre, que es 1mm
3

Despus de contar los hemates de los 5 cuadrados pequeos, se suman y con dicha
cantidad de hace el siguiente clculo:
N de hemates x mm
3
= altura x dilucin x rea
N de hemates x mm
3
= 1/10 x 1/200 x 1/5 = 1/10 000
N de hemates x mm
3
= hemates contados x 10 000
El recuento de eritrocitos fue de 1 350, entonces 1350 x 10 000 = 13 500 000

Siendo los valores normales: 14 000 000 x mm3


CONCLUSIN

Los eritrocitos o glbulos rojos son clulas de color amarillento, con la forma de un
disco bicncavo, sin ncleo y contienen un pigmento llamado hemoglobina que les
otorga su caracterstico color.
Estos se forman constantemente en la medula sea, en el crneo, las costillas, las
vrtebras y el esternn, en un proceso conocido como eritropoyesis. Viven
aproximadamente 120 das y al envejecer son destruidos por las clulas
reticuloendoteliales del hgado, la medula sea y el bazo.
La falta de ncleo le confiere la virtud de acarrear oxigeno sin consumir nada de l.
La pipeta de toma para glbulos rojos est constituida por dos porciones capilares y un
bulbo central. El tubo capilar inferior est dividido en 10 partes iguales con marcas de
0.5 y 1.0. En el interior del bulbo existe una perlita de plstico roja para favorecer la
mezcla de sangre con el lquido y en el capilar superior hay una marca de 101.

El lquido de dilucin no solamente debe de diluir los eritrocitos hasta cifras legibles,
sino que tambin permita identificarlos y que destruya otros elementos celulares que no
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son de inters en este momento. En general se puede usar cualquier solucin isotnica
como diluyente y pueden ser:

o Soluciones de Gower
o Soluciones de Dace
o Solucin salina de NaCl al 0.9%
o Liquido de Hayem, el cual est formado de 5g de NaCl, 2.5g de Na
2
SO
4
, 2.5g de
MgCl
2
y agua destilada para un litro. Este ltimo es el ms usado.

Es muy importante observar que en la cmara de Neubauer las reas de recuento de
eritrocitos y linfocitos son diferentes.
Los glbulos rojos se cuentan en las reas coloreadas de rojo, mientras que los glbulos
blancos se cuentan en las reas coloreadas de azul.

Para realizar el conteo se enfoca con el objetivo 40x, y se localiza el cuadro central con
el condensador bajo y luz dbil.
Para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los cuadrados pequeos del retculo
marcado en color rojo, contando las clulas en cada cuadro, en barrido o fila.









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PRCTICA 2.3
RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS
INTRODUCCIN:

La frmula leucocitaria o el recuento diferencial cuenta seis tipos de glbulos blancos o
leucocitos: los llamados polimorfonucleares (neutrfilos, eosinfilos y los basfilos) y
los mononucleares (los linfocitos y los monocitos). Estos son reportados como el
porcentaje presente de cada tipo de glbulo blanco en el total de los mismos. Al ser un
porcentaje el aumento de un grupo de glbulo blanco disminuye otro, aunque en a veces
solo existe un aumento o disminucin de un tipo especfico de glbulo blanco y por ello
el porcentaje ofrecera solo una valoracin orientativa por lo que se debe conocer el
nmero total de cada grupo para conocer cul es en realidad la variable a considerar.
El procedimiento consta de una toma de sangre, la misma se disemina en un
portaobjetos de vidrio y luego se tie. A continuacin se determina el porcentaje de
cada tipo de leucocitos.

Este examen se hace para diagnosticar una infeccin, anemia y leucemia e igualmente
se utiliza para ver si el tratamiento para cualquiera de estas afecciones est funcionando.
Cualquier infeccin o estrs agudo ocasiona un aumento en la produccin de GB. Los
conteos altos de glbulos blancos pueden deberse a inflamacin, una respuesta
inmunitaria o hemopatas como la leucemia.
Es importante saber que el aumento anormal de un tipo de leucocito puede causar una
disminucin en los porcentajes de otros tipos de glbulos blancos.

Significado clnico.
El valor de referencia relativo y las alteraciones comunes de lasclulas leucocitarias son
las siguientes:

Neutrfilos segmentados = 45 a 60%; la neutrofilia se observa duranteprocesos
inflamatorios agudos e infecciosos; la neutropenia se presenta en ladepresin de la
mdula sea, inmunodeficiencia o inmunosupresin.

Linfocitos = 20 a 40%; la linfocitosis se manifiesta en alteraciones virales y enrespuesta
a procesos infecciosos; la linfopenia se observa en procesossimilares a la neutropenia.

Monocitos = 0 a 7%; la monocitosis

Neutrfilos en banda = 0 a 5 %; su nmero se observa incrementado cuandolos
neutrfilos segmentados disminuyen por reaccionar ante el agenteinfeccioso.

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Eosinfilos = 0 a 4%; la eosinofilia se presenta principalmente en respuesta acuadros
alrgicos y durante las parasitosis.

Basfilos = 0 a 1%; la basofilia se manifiesta cuando los eosinfilos aumentan,pues se
trata de clulas que controlan la respuesta alrgica

OBJETIVO:

Identificacin de tipos celulares en la sangre.
Identificacin de la morfologa leucocitaria.
Cuantificacin de cada tipo de clulas encontradas.
Determinacin de normalidades o anormalidades despus de la cuantificacin
FUNDAMENTO DE LA TCNICA:

Los leucocitos son teidos con un colorante especial (Wright) este permitir
que estas clulas puedan ser diferenciadas en cuanto a su morfologa, ya que permite
teir tanto el ncleo, los granos que contengan y su citoplasma entre otras cosas

MATERIAL
Sangre 3ml

Lmina portaobjeto
Colorante Wright o Giemsa
Microscopios con objetivo de inmersin.
MTODO
1. Limpiar la lmina porta obejto con algodn empapado en alcohol al 70%
(desgarsar)

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2. Colocar una gota de sangre en un extremo delporta objeto y realizar con otra la
extensin sangunea

Frotis sanguneo:

Este mtodo nos permite, mediante una tcnica de fcil realizacin y bajo coste, obtener
rpidamente contajes de clulas de la serie roja y blanca y, lo que es ms importante,
identificar anomalas morfolgicas o lesiones especficas de ambas series que suelen ser
uno de los signos ms tempranos en numerosas enfermedades (linfomas, anemias
inmunomediadas, procesos parasitarios, etc.).
3. Dejar secar, luego cubrir toda la lmina con wright o giemsa por un minuto,
agregar la solucin tampn por un minuto y lavar la lmina

4. Dejar secar

5. Observa y contar con objetivo de inmersin.



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Se ira observando en la direccin sealada

RESULTADOS
Por campo se observ alrededor de cuatro leucocitos, por campo.
CONCLUSIONES
Con la tcnica del frotis sanguneo se puede observar la morfologa de las diferentes
leucocitos. A diferencia de los humanos que lo general es encontrar entre uno o dos por
campo notamos que en la sangre caprina el nmero de clulas es mayor por campo.