Revista Eureka sobre Enseanza y Divulgacin de las Ciencias 10(1), 133-138, 2013 CIENCIA RECREATIVA

Estudio de la inhibicin de la respiracin/fermentacin

en clulas de levadura por fluoruro de sodio
Jos Pedro Lpez Prez
1
, Raquel oronat !il
"
1
I.E.S. La Baslica. !"#$ %lgezares. &urcia. Es'aa( De'arta)ento de Did*ctica de las Ciencias
E+'eri)entales. ,acultad de Educacin. -niversidad de &urcia. Ca)'us de Es'inardo. !"!! &urcia.
Es'aa. .ose'edro.lo'ez/)urciaeduca.es
2
I.E.S. %ntonio &en*rguez Costa. !$"!. Los %lc*zares. &urcia. ra0uel.boronat/)urciaeduca.es
[Recibido en junio de 2012, aceptado en octube de 2012!
En e"ta co#unicaci$n "e pe"entan %a" diectice" nece"aia" paa ob"e&a, en e% %aboatoio de Educaci$n
'ecundaia, %a in(ibici$n de% #etabo%i"#o de %o" a)*cae" en c+%u%a" de %e&adua po ,%uouo de "odio - "u
inc%u"i$n en %a #ateia de .io%o/0a en "e/undo cu"o de .ac(i%%eato1
Palabras clave# 2e&adua3 4e#entaci$n3 In(ibici$n3 4%uouo de "odio3 Educaci$n 'ecundaia1
$tud% of the inhibition of respiration/fermentation in %east cells b% sodium fluoride
T(i" pape pe"ent" t(e nece""a- /uide%ine" to ac(ie&e t(e ob"e&ation o, t(e in(ibition o, "u/a #etabo%i"# in
-ea"t ce%%" b- #ean" o, t(e co#pound "odiu# ,%uoide1 T(i" acti&it- i" appopiate ,o t(e "ubject o, .io%o/- in
'econda- Education a" 5e%% a" 6i/( 'c(oo%11
&e%'ords# 7ea"t3 4e#entation3 In(ibition3 'odiu# 4%uoide3 'econda- Education1
(ntroduccin % )ustificacin del traba)o
2a" %e&adua" "e de,inen co#o #icoo/ani"#o" unice%u%ae" inte/ante" en e% eino de %o"
(on/o"1 'u" c+%u%a" "on eucaiota", -a 8ue di"ponen de una #e#bana 8ue odea a% #ateia%
/en+tico, e% A9N1 9e"de tie#po" in#e#oab%e" (an "ido e#p%eada" en %a poducci$n de
&ino, ce&e)a - pan1 6o- d0a, ta#bi+n "e uti%i)an en %a ,abicaci$n de &ita#ina", en)i#a" -
,actoe" de ceci#iento1 A"i#i"#o, epe"entan una (ea#ienta &a%io"0"i#a en %o" e"tudio" de
biotecno%o/0a, po %a "i#i%itud con c+%u%a" ani#a%e" (:adi/an et al1 2003)1
'e de,ine e% #etabo%i"#o co#o e% conjunto de poce"o" bio8u0#ico" 8ue tienen %u/a en e%
inteio de %a c+%u%a, con e% objeti&o de obtene ene/0a o ,o#a #ateia popia paa %a
con"tituci$n ce%u%a1 9e"de un punto de &i"ta de "u #etabo%i"#o, %a" %e&adua" pueden
obtene co#pue"to" ico" en ene/0a (catabo%i"#o ce%u%a) #ediante do" &0a"; %a ,e#entaci$n
- %a e"piaci$n ce%u%a1 2a ,e#entaci$n "e de,ine co#o un poce"o catab$%ico pacia%, -a 8ue
%o" poducto" ,ina%e" coe"ponden a "u"tancia" o/<nica" 8ue no %%e/an a de"co#pone"e en
"u tota%idad1 =o %o tanto, e% poce"o de obtenci$n de ene/0a e" educido1 En ca#bio,
#ediante %a e"piaci$n, %a #ateia o/<nica 8ue "e incopoa a %a c+%u%a "e de"co#pone en
"u"tancia" ino/<nica" "enci%%a" (C>
2
- 6
2
>), %ibeando /an cantidad de ene/0a1
En %a pe"ente co#unicaci$n "e pe"entan %a" diectice" paa ob"e&a e% poce"o de
in(ibici$n de %a e"piaci$n?,e#entaci$n en c+%u%a" de %e&adua de pani,icaci$n po #edio de
,%uouo de "odio, "a%&ando %a" %i#itacione" (,a%ta de #ateia% e in"tu#enta% b<"ico) 8ue
pueden pe"enta"e en un %aboatoio de Educaci$n 'ecundaia - .ac(i%%eato1
Revista Eureka sobre Enseanza y Divulgacin de las Ciencias
-niversidad de C*diz. %1%C2Eureka. ISS34 "56$2!""7
D8I4 "!96:;"#!!< =tt'4;;=dl.=andle.net;"!96:;"#!!<
=tt'4;;reuredc.uca.es;
@>'A =E9R> 2B=EC =AREC, RADEE2 .>R>NAT E'TE9I> 9E 2A IN6I.ICIBN 9E 2A RE'=IRACIBN?4ER:ENTACIBN EN CA2E2A' 9E 2EVA9ERA111
Problem*tica de obtener una concentracin adecuada de
microor+anismos para el ensa%o
2o" e"tudio" de in(ibici$n #icobiana e8uieen de una coecta opti#i)aci$n de %a
concentaci$n de% a/ente anti#icobiano - de% n*#eo de #icoo/ani"#o" 8ue "e 8uiee
poba (2$pe) 200F)1 =o %o 8ue e"pecta a e"te n*#eo de #icoo/ani"#o" e" i#potante
pe/unta"e c$#o conoce %a cantidad peci"a1 'i to#a#o" una a%0cuota de #icoo/ani"#o",
%a "u"pende#o" en a/ua - pocede#o" a ea%i)a di%ucione" "eiada" de% #i"#o, no"
cue"tiona#o" 8u+ di%uci$n (den"idad #icobiana) "e< %a peci"a paa en"a-a %a concentaci$n
de anti#icobiano 8ue "e 8uiee e&a%ua1 Tanto e" a"0 8ue, "i to#a#o" una den"idad $ptica de
#icoo/ani"#o" po enci#a de un &a%o c0tico, e% e"tudio de %a acci$n de antibi$tico",
in(ibidoe" de ceci#iento, en)i#a", etc1, no tend0a e% e,ecto 8ue cab0a e"pea, "iendo +"te,
po e% contaio, e% objeti&o pincipa% a #o"ta con e"ta eGpeiencia1
2o" /ande" %aboatoio" de ciencia di"ponen de co#p%ejo" #ateia%e", %o" e"pecto,ot$#eto",
8ue dete#inan cu&a" de ceci#iento e%acionada" con den"idade" $ptica"1 C%<"ica#ente, e%
a%u#no pod0a tabaja #ediante un e"t<nda de den"idad $ptica, e% 0ndice de :c4a%and1 A"te
dete#ina una co#paaci$n &i"ua% ente una pecipitaci$n 8u0#ica %%e&ada a cabo #ediante e%
u"o de c%ouo de baio en #edio <cido - %a tubiedad 8ue dete#inan un n*#eo de
#icoo/ani"#o"1 E" deci, %a #a-o pecipitaci$n 8u0#ica de %o" eacti&o" e" e8ui&a%ente a
indica %a pe"encia de un #a-o n*#eo de #icoo/ani"#o" en %a #ue"ta1 =aa 8ue no"
(a/a#o" una idea, una den"idad $ptica #u- uti%i)ada en e% 0ndice de :c4a%and e" 0,H (8ue
puede "u#ini"ta un co#ecia% de poducto" de %aboatoio), e8ui&a%ente a peci"a un
n*#eo e"ti#ado de 1,HI10
J
#icoo/ani"#o" (Ka#a)o et al1 200H)3 e"ta cantidad e" e"t<nda
en #uc(o" en"a-o" de "en"ibi%idad a anti#icobiano" o in(ibicione"1 A(oa bien, &o%&a#o" a
%a pe/unta de "i un cento de Educaci$n 'ecundaia puede pe#iti"e %a ad8ui"ici$n - e%
#anejo de e"te co"to"o tipo de #ateia%e"1
,escripcin de la actividad- .etodolo+/a
.oonat-Ki% - 2$pe) (2011) poponen una #etodo%o/0a "i#p%e paa %a ob"e&aci$n de %o"
poducto" ,ina%e" de %a ,e#entaci$n de a)*cae" (/%uco"a) po pate de c+%u%a" de %e&adua, a"0
co#o toda una "0nte"i" de% poce"o te$ico de %a poducci$n de etano%1
E% e"tudio de %a in(ibici$n de %a e"piaci$n?,e#entaci$n en c+%u%a" de %e&adua con"ta de una
%aboio"a #etodo%o/0a; %o" a%u#no" &ete<n 2L / de %e&adua ,e"ca, junto a 200 #% de a/ua
de% /i,o, en un #ata) E%en#e-e de un %ito1 2a boca %a tapa<n con pape% de a%u#inio -
deja<n e% cu%ti&o a te#peatua a#biente duante 2M (oa"1 Ta"cuido e"te pe0odo de
tie#po, di%ui<n %a "u"pen"i$n to#ando 20 #% de %a #i"#a en una pobeta - ena"a<n con
a/ua de% /i,o (a"ta 100 #%1 A% no di"pone de eacti&o" ni #ateia% co#p%ejo paa %a
obtenci$n de% 0ndice de :c4a%and, de #anea e#p0ica - #ediante pueba" de en"a-o-eo,
"e (an opti#i)ado %a" concentacione" de in(ibido, ,%uouo de "odio (Na4), de% poce"o
catab$%ico1 9e e"ta #anea, %o" a%u#no" pocede<n a %a e%aboaci$n de una di%uci$n 1: de
Na4, to#ando M,2 / de eacti&o - 100 #% de a/ua de% /i,o en un #ata) E%en#e-e de 2H0
#%1 'i no pudiea di%ui"e e% eacti&o en "u tota%idad, "e0a peci"o ca%enta %a #e)c%a1 2a"
di%ucione" 8ue bu"ca#o" "e<n 0,H - 0,1 :1 =aa e%%o, "e to#a<n H0 - 10 #% de %a di%uci$n
"tocN #ade 1: de Na4, - "e #e)c%a<n con H0 - J0 #% de a/ua de% /i,o, e"pecti&a#ente1
E% "i/uiente pa"o e" %a e%aboaci$n de un e"pi$#eto o "i"te#a paa #edi %a cantidad de
di$Gido de cabono de"pendido po e% poce"o catab$%ico de %a" %e&adua" "obe %o" /%*cido"1
Nue"to "i"te#a &a a "e #u- "i#p%e - "u #edida &a a "e cua%itati&a, co#o "e de"pende de %a
ob"e&aci$n de %a ,i/ua 1, donde e% an<%i"i" de %o" e"u%tado" de#ue"ta c%aa#ente e"te
13M
Revista Eureka sobre Enseanza y Divulgacin de las Ciencias 10(1), 133138, 2013 CIENCIA RECREATIVA
poce"o1 =aa e%%o, di"ponde#o" de do" tipo" de tubo" de en"a-o; uno" de di#en"ione" 10
## I 1H0 ## - oto" de 8 ## I 100 ## (8ue "e intoduci<n en %o" pi#eo" de #anea
in&etida, ta% - co#o "e ob"e&a en %a ,i/ua 1)1
2o" a%u#no" otu%a<n M tubo" de en"a-o - &ete<n %a" cantidade" 8ue "e e"peci,ican en %a
tab%a 11 A continuaci$n, - ta" (o#o/enei)a %a" di%ucione" #ediante &o%teo, %o" a%u#no"
&ete<n %a cantidad peci"a en %o" tubo" de #eno di#en"i$n1 'e/uida#ente, cada tubo
pe8ueOo "e di"pond< en e% inteio de uno de #a-o di#en"i$n (pe&ia#ente otu%ado)1 Con
%a a-uda de un bo%0/a,o "e de"%i)a< po "u inteio, - ta" "u &o%teo 8ueda<n ta% - co#o "e
#ue"ta en %a ,i/ua 11 2a di%uci$n de %e&adua" #<" "u"tato" 8ueda< en e% inteio de% tubo
de en"a-o pe8ueOo, a %a e"pea de co#en)a %a eGpeiencia1 2a incubaci$n "e %%e&a< a cabo a
3F PC duante 2,H (oa"1 'i no "e di"pone de incubadoa, puede %%e&a"e a cabo a te#peatua
a#biente, nece"it<ndo"e toda una #aOana paa pode ob"e&a e"u%tado"1 'i "e e%i/e e"ta
"e/unda opci$n, e% cu%ti&o pod< /uada"e en e% ,i/o0,ico, ,ina%i)ada %a incubaci$n, a %a
e"pea de co#pobaci$n de %o" e"u%tado" po pate de% a%u#nado1
0abla 1- Co#po"ici$n de %o" tubo" de ,e#entaci$n en"a-ado" en %a eGpeiencia1 (Q) 9i"o%uci$n e%aboada a
pati de 1 / de /%uco"a en 20 #% de a/ua de /i,o1
Tubo 'u"pen"i$n de %e&adua A/ua de% /i,o 4%uouo de "odio 'o%uci$n de /%uco"a HR (Q)
A H #% 10 #% - -
. H #% H #% - H #%
C H #% - H #% (0,1 :) H #%
9 H #% - H #% (0,1 :) H #%
13H
1i+ura 1- A"pecto de %o" tubo" de e"piaci$n?,e#entaci$n a% inicio - ta" %a incubaci$n a 3F PC, duante 2,H
(oa"1 [A! Conto% (a/ua de% /i,o #<" cu%ti&o de %e&adua)1 [.! Cu%ti&o de %e&adua "up%e#entado con /%uco"a1 [C
- 9! Cu%ti&o de %e&adua "up%e#entado con /%uco"a - ,%uouo de "odio (0,1 - 0,H :, e"pecti&a#ente)1 [V
1
, V
2
-
V
3
! Vo%*#ene" de di$Gido de cabono poducido" ta" %a incubaci$n en %o" tubo" ., C - 91
@>'A =E9R> 2B=EC =AREC, RADEE2 .>R>NAT E'TE9I> 9E 2A IN6I.ICIBN 9E 2A RE'=IRACIBN?4ER:ENTACIBN EN CA2E2A' 9E 2EVA9ERA111
Resultados % discusin
2a ,i/ua 2 #ue"ta un e"8ue#a e"u#en 8ue e% a%u#no debe di"pone paa e% apatado
te$ico de %a eGpeiencia1
E% catabo%i"#o de %o" a)*cae" "e puede con"idea di&idido en &aia" etapa" con e% objeti&o de
,aci%ita e% e"tudio po pate de% a%u#nado1 A #odo de e"u#en; (1) ta" una etapa pe%i#ina,
donde "e pueden de"co#pone %o" /ande" po%i"ac<ido" (a%#id$n, /%uc$/eno) en
#ono"ac<ido", "e obtiene /%uco"a1 (2) :ediante una "eie de eaccione" de oGidaci$n
(/%uco%i"i"), %a /%uco"a "e tan",o#a en do" #o%+cu%a" de <cido pi*&ico1 A"te puede continua
po di,eente" &0a"1 =o un %ado, un catabo%i"#o oGidati&o (3), en pe"encia de oG0/eno, donde
e% piu&ato enta a %a #itocondia, "u,iendo un co#p%ejo cic%o de eaccione" donde "e
poducen de"caboGi%acione" oGidati&a", %ibe<ndo"e di$Gido de cabono, pode educto
(4A96
2
, NA96
2
) - #o%+cu%a" ene/+tica" (KT=); e% cic%o de Seb"1 E% pode educto "e<
conducido (a"ta %a cadena de tan"pote e%ect$nico, di"pue"ta en %a" ce"ta" #itocondia%e",
13L
1i+ura "- E"8ue#a e"u#en de %a poducci$n de di$Gido de cabono (C>
2
) a pati de <cido pi*&ico - %u/a de
%a in(ibici$n po pate de% ani$n ,%uouo1 2a uta oGidati&a e"peci,icada e"t< co#pue"ta po do" etapa"
i#potante" de% catabo%i"#o de /%*cido"; e% cic%o de Seb" - %a uta de ,e#entaci$n1 En e% pi#eo, %a #o%+cu%a
de piu&ato "u,e un conjunto de tan",o#acione" c0c%ica" en %a" 8ue "e poducen de"caboGi%acione" oGidati&a"
(pa"o de oGa%"uccinato a T-ceto/%utaato), pode educto (NA96
2
- 4A96
2
) - #o%+cu%a" ene/+tica" (KT=)1 E%
pode educto "e< conducido a %a cadena de tan"pote e%ect$nico (a"ta acaba en e% oG0/eno1 En e% ta"ie/o
e%ect$nico "e %ibea ene/0a 8ue e" uti%i)ada paa ,o#a %o" en%ace" ico" en ene/0a de% AT=1 =o %o 8ue e"pecta
a %a uta ,e#entati&a, %a e"peci,icada en e% e"8ue#a coe"ponde a %a poducci$n de etano%1 2a ,e#entaci$n e"
un poce"o catab$%ico pacia%, donde e% acepto de% pode educto e" una #o%+cu%a o/<nica1 En %a pi#ea
eacci$n de e"ta uta en paticu%a, %%e&ada a cabo po %a %e&adua Sacc=aro)yces cerevisiae, "e poduce una
de"caboGi%aci$n de %a #o%+cu%a de piu&ato (a"ta da aceta%de(0do1
Revista Eureka sobre Enseanza y Divulgacin de las Ciencias 10(1), 133138, 2013 CIENCIA RECREATIVA
donde cede< %o" (id$/eno" a %a #o%+cu%a de oG0/eno paa da a/ua1 En e% poce"o de $Gido-
educci$n, "e %ibea< ene/0a 8ue "e e#p%ea< en %a ,o#aci$n de en%ace" ico" en ene/0a
/uadado" en %a #o%+cu%a de AT=1
7, po oto %ado, "i no "e di"pone de oG0/eno en e% #edio (M), %a" c+%u%a" pueden %%e&a a cabo
un tipo de catabo%i"#o pacia%, %a" ,e#entacione", donde e% acepto de %o" (id$/eno" de%
pode educto e" una #o%+cu%a o/<nica1 En e"te ca"o, e% e"8ue#a e"peci,ica %a uta
,e#entati&a de poducci$n de etano%1 9uante e% poce"o, ta#bi+n "e poduce una
de"caboGi%aci$n de% piu&ato (a"ta aceta%de(0do, co#o pa"o pe&io a %a ,o#aci$n de a%co(o%
(Ne%"on - CoG 200L)1
En e"ta eGpeiencia, e% in(ibido e%e/ido de% poce"o catab$%ico e" e% ,%uouo de "odio1 E"ta
#o%+cu%a en di"o%uci$n acuo"a - en e% inteio de %a c+%u%a e" capa) de ,o#a un co#p%ejo con
e% cati$n #a/ne"io - e% ani$n ,o",ato in(ibiendo a %a en)i#a eno%a"a (,i/ua 2), e"pon"ab%e de
%a eacci$n de ,o#aci$n de 2-,o",oeno%piu&ato a pati de 2-,o",o/%iceato (de"pendi+ndo"e
una #o%+cu%a de a/ua)1 En pe"encia de e%e&ada" concentacione" de% in(ibido ,%uouo, +"te
co#pite acti&a#ente con e% "u"tato popio de %a en)i#a po e% cento acti&o (.a-ne" -
9o#inic)aN 200F), educi+ndo"e %a poducci$n de piu&ato - e"tin/i+ndo"e e% poce"o
catab$%ico de e"piaci$n?,e#entaci$n1 2a in(ibici$n de% catabo%i"#o de %a %e&adua "e pone
de #ani,ie"to po una educci$n d<"tica en %a ,o#aci$n de di$Gido de cabono1 En %a ,i/ua
1 puede co#poba"e ta% (ec(o cuando "e co#paan %o" &o%*#ene" de /a" poducido" en %o"
tubo" C - 9 (pe"encia de in(ibido) con e% de% tubo . ("in in(ibido)1 A #a-o concentaci$n
de ,%uouo (tubo 9) %a poducci$n de /a" e" #0ni#a, indicati&o de "u pode in(ibitoio de%
poce"o catab$%ico1
4ina%i)ada %a eGpeiencia - co#o #edida b<"ica de (i/iene, e" acon"ejab%e e% %a&ado de %a"
#ano" con a/ua - jab$n1 E% #ateia% de tabajo (pipeta", tubo" de en"a-o, #atace"111) debe
deja"e duante a%/una" (oa" en (ipoc%oito de "odio paa ,aci%ita "u %i#pie)a1
2ivel de pro+ramacin
2a acti&idad de"cita e" adecuada paa a%u#no" 8ue cu"an %a #ateia de .io%o/0a en "e/undo
cu"o de .ac(i%%eato, co#o acti&idad ,ina% a% .%o8ue M (UE% #undo de %o" #icoo/ani"#o" -
"u" ap%icacione"V) - co#p%e#ento de% .%o8ue 2 (U:o,o%o/0a, e"tuctua - ,unci$n ce%u%a; %a
e"piaci$n ce%u%a, "u "i/ni,icado bio%$/ico1 >/<nu%o" i#p%icado" en e% poce"o e"piatoio1
Ap%icacione" de %a" ,e#entacione"V) (.>E 200F)1
0emporalizacin
2a eGpeiencia "e ea%i)a en do" "e"ione"1 En una pi#ea "e"i$n e% po,e"o pe"enta %a
p<ctica, "u objeti&o pincipa% (ob"e&aci$n de% poce"o de e"piaci$n?,e#entaci$n en c+%u%a"
de %e&adua), ecodatoio de concepto" b<"ico" de #etabo%i"#o - ,i"io%o/0a #icobiana, a"0
co#o e% de"ao%%o de% #ontaje de toda %a eGpeiencia1 En una "e"i$n ,ina%, "e di"cuti<n -
e&a%ua<n %o" e"u%tado" obtenido" con e% #ode%o te$ico popue"to en %a ,i/ua 21 Ade#<",
%o" a%u#no" e"ponde<n en "u cuadeno de %aboatoio a cue"tione" de% tipo;
1) WA 8u+ "e deben %a" di,eencia" ob"e&ada" en %o" tubo" de ,e#entaci$n en"a-ado"X
2) WCu<% de %o" tubo" "e con"idea conto% de %a eGpeienciaX WDu+ tipo de in,o#aci$n o,ece
"u e"u%tadoX
13F
@>'A =E9R> 2B=EC =AREC, RADEE2 .>R>NAT E'TE9I> 9E 2A IN6I.ICIBN 9E 2A RE'=IRACIBN?4ER:ENTACIBN EN CA2E2A' 9E 2EVA9ERA111
Referencias
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educaci$n "ecundaia1 Revista Eureka sobre Enseanza y Divulgacin de las Ciencias 8(1),
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