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e-mail: mgarrett@icr.ac.uk Figura 1. Los puestos de control y el ciclo celular.

LA CIENCIA ACTUAL, VOL. 81, NO. 5, 10 DE SEPTIEMBRE 2001 515

Control del ciclo Celular y cncer


Michelle D. Garrett
CRC Centro para la Teraputica del Cncer en el Instituto de Investigacin del Cncer, Haddow laboratorios, Sutton, Surrey, SM2 5NG, Reino Unido


El cncer es una enfermedad multifactorial, pero una
caracterstica comn de la mayora de los tumores es
que puerto de una o ms mutaciones genticas que
permiten que proliferen fuera de sus restricciones
normales de crecimiento. Proliferacin est restringido
normalmente a travs del control del ciclo de divisin
celular, que a su vez, est regulada por la familia CDK
de serina / treonina quinasas y sus parejas reguladoras
las ciclinas. Aqu, las funciones de los complejos CDK /
ciclina en el control del ciclo celular se describen,
seguido de un examen de las lesiones genticas en estos y
protenas asociadas que pueden contribuir a la
progresin del tumor.

UNA de las preguntas ms comunes sobre el cncer debe ser,
qu es exactamente? En el nivel ms bsico, que es una
enfermedad en la que la proliferacin celular ya no est bajo
control del crecimiento normal. Con el tiempo, este
crecimiento incontrolado y la divisin de las clulas
cancerosas interfiere con el funcionamiento normal del
cuerpo, ya sea en el lugar de origen o a travs de la difusin a
otro lugar, con el tiempo dando como resultado la muerte de
la vctima. Por supuesto, hay otras caractersticas que las
clulas cancerosas pueden poseer, tales como la capacidad de
inducir la vascularizacin del tumor con el fin de recibir
oxgeno y nutrientes (angiognesis) o para dispersar desde el
sitio de origen y viajar a una parte distante del cuerpo
(metstasis), y tambin para suprimir la muerte celular
programada (apoptosis). Pero al final del da es la
proliferacin desenfrenada de estas clulas, que se encuentra
en el corazn de la enfermedad. Y as, para entender el
cncer que tenemos que entender qu es la proliferacin de
clulas y cmo se controla?

Ciclo de divisin celular

En el centro de la proliferacin celular es el ciclo de divisin
celular, el proceso por el cual una clula crece, replica su
ADN y luego se divide para dar dos clulas hijas. Este
proceso se divide en cuatro fases secuenciales (Figura 1). A
menudo se considera que los dos ms importantes de estos
son la fase S, cuando se produce la replicacin del ADN y la
mitosis (tambin conocida como la fase M), cuando la clula
se somete a divisin para dar dos clulas hijas. De hecho, un
concepto clave del ciclo celular es que la fase S siempre debe
seguir la fase M y la fase M no debe comenzar hasta que la
fase S se ha completado. En otras palabras, la replicacin del
ADN no debe comenzar hasta que se haya completado la
mitosis y la mitosis no debe comenzar hasta que la ronda
anterior de la replicacin del ADN ha terminado, por lo
tanto, se mantiene la integridad del genoma. En-entre S y la
fase M son dos brechas G1 y G2. G1 continuacin de la
mitosis y es un momento durante el ciclo de la clula cuando
la clula es sensible a las seales de crecimiento tanto
positivos como negativos. G2 es la brecha despus de la fase
S, cuando la clula se prepara para la entrada en la mitosis.
Por ltimo, hay un quinto estado, G0 (tambin conocida
como quiescencia) en el que la clula puede salir de forma
reversible de G1, si se le priva de las seales promotoras del
crecimiento apropiadas.

Los puestos de control del ciclo celular

Movimiento a travs de cada fase del ciclo celular y la
transicin de una fase a otra se regula a una serie de
posiciones en el ciclo celular conocido como puntos de
control. Hartwell y Weinert define por primera vez el
trmino punto de control del ciclo celular como un
mecanismo que mantiene el orden observado de eventos de
cada ciclo celular
1
. O, dicho de otra manera, los puntos de
control son mecanismos del sensor dentro de la clula que
monitorizan el entorno celular y determinar si se han
cumplido las condiciones apropiadas antes de que pueda
progresar an ms a travs de un ciclo de divisin celular. En
consecuencia, una funcin importante de estos puntos de
control es ver que la integridad del genoma permanece
intacta a lo largo del ciclo celular. Cada punto de control se
compone de tres componentes. El primero es un mecanismo
de sensores que detecta eventos del ciclo celular aberrantes o




incompletos, tales como daos en el ADN. Esto es seguido
por una va de transduccin de seal, que transporta la seal
desde el sensor hasta el tercer componente, el efector que
puede invocar una detencin del ciclo celular hasta que el
problema se ha resuelto. Los principales puntos de control
del ciclo celular se representan en la Figura 1. El primero de
estos se produce en la fase de transicin G1 / S y es un
sensor importante de dao en el ADN. La clula tambin
puede detener ms tarde en la fase S debido a la replicacin
de ADN incompleto o ms, daos en el ADN. Luego viene el
punto de control G2 / M, que vela por la fidelidad de la
replicacin del ADN y como el punto de control G1 / S es un
sensor importante de dao en el ADN. Esto es seguido por el
husillo de control, que se invoca durante la mitosis si un huso
mittico funcional no se ha formado correctamente.
Tambin se muestra en la primera figura es el punto de
restriccin (R), que tiene lugar entre mediados y finales de
G1. Este es el punto en el que las clulas compruebe si ha
recibido las seales de crecimiento necesarios (en gran parte
extracelular de origen) para que pueda ser eliminado de G1 a
la fase S, replicar su ADN y completar una ronda de divisin
celular
2
. Si son suficientes, la clula pasar el punto R y
durante el resto del ciclo celular que no requerir que estas
seales. Si sin embargo, la clula no ha recibido las seales
apropiadas, no pasar el punto de restriccin, y en su lugar
entrar en G0. Por consiguiente, el punto de restriccin se
diferencia de los otros puntos de control en el que no se
determinan especficamente si el genoma es intacto. Sin
embargo, es un punto de control esencial en que restringe la
proliferacin celular, si no se han recibido las seales de
crecimiento necesarias.
Si estos puntos de control del ciclo celular no estn en su
lugar y luego la proliferacin inadecuada puede ocurrir - la
caracterstica del cncer. Ahora tambin sabemos que
probablemente todos los tumores puerto alteraciones
genticas en los genes humanos que la progresin del ciclo
celular de control y la funcin de control. Por lo tanto para
entender la relacin entre los puntos de control del ciclo
celular y el cncer, primero debemos entender la maquinaria
molecular que impulsa la progresin del ciclo celular.

El control del ciclo de divisin celular

En el ncleo del ciclo de divisin celular de mamfero es la
familia quinasa dependiente de ciclina (Cdk) de serina /
treonina quinasas
3
. El nombre de Cdk describe el hecho de
que la actividad completa de cada una de estas quinasas es
dependiente de su asociacin con una subunidad reguladora
conocida como una ciclina. En clulas de mamferos,
diferentes Cdk son activos y se requiere en las diferentes
fases del ciclo celular. Y, mientras que la expresin de la
subunidad CDK es generalmente constante en todo el ciclo
celular, la expresin de cada ciclina (de los cuales hay toda
una familia) tiende a ser dependiente del ciclo celular de
modo que una CDK especfico tendr plena actividad cuando
su socio ciclina se expresa (Figura 2).
Figura 2. Ciclinas, Cdk y el ciclo celular.El papel de las
Cdk es el control de la progresin del ciclo celular a travs
de la fosforilacin de protenas que funcionan en etapas
especficas del ciclo celular (Figura 2). Por ejemplo, el
producto del gen supresor de tumores del retinoblastoma,
pRb es un regulador clave de la progresin de G1 y posee 16
sitios potenciales de fosforilacin de CDK. En G1 temprana,
pRb se encuentra en un estado fosforilado bajo
(hipoglucemia) y se une firmemente y reprime la actividad
de la familia E2F de factores de transcripcin que son
funcionalmente necesarios para la expresin de genes
necesarios para la fase S
5
. Durante la fase G1, pRb se
fosforila a los sitios de consenso Cdk, lo que altera su
interaccin con las protenas E2F que permiten la
transcripcin dependiente de E2F que se produzca. Esto es
necesario a fin de que la clula pase a travs del punto final
de G1 restriccin. La fosforilacin de pRb en los sitios de
consenso Cdk parece ser un proceso secuencial, iniciada por
Cdk4 y Cdk6 actuando cada uno en asociacin con una de las
tres subunidades estrechamente relacionados, ciclina D1, D2
y D3. Esto permite la expresin de la ciclina E mediante la
interrupcin de la interaccin de pRb con protenas
conocidas como histonas desacetilasas (HDAC), que estn
implicados en la cromatina remodelling6. La expresin de
ciclina E permite la formacin de complejos de E
cdk2/ciclina activos que a continuacin siguen la
fosforilacin de pRb. Esto conduce a la interrupcin de la
interaccin pRb-E2F de tal manera que E2F es
transcripcionalmente activo, un requisito para que la clula
progresar de G1 a la fase S
6
.
A pesar del pRb parece ser el sustrato primario para las
quinasas dependientes de ciclina D-CDK4 y Cdk6,
CDK2/ciclina E es conocida para fosforilar varios tipos
distintos de protenas, al menos in vitro
7-8
. Como las clulas
avances en la fase S, la ciclina A se expresa y se convierte en
el principal asociada a la ciclina Cdk2. Esta conmutacin de
socio ciclina Cdk2 permite tambin para cambiar la
especificidad del sustrato de modo que ahora puede dirigirse
a un nuevo conjunto de protenas durante la fase S. Estos
incluyen Cdc6, una protena necesaria para la iniciacin de la
replicacin que cuando est fosforilada por CDK2/ciclina A,
relocaliza desde el ncleo hasta el citoplasma y el factor de
thetranscription E2F (refs 9, 10). La progresin de G2 a la
mitosis requiere la actividad de la CDK, Cdc2 (tambin
Figura 2. Ciclinas, Cdk y el ciclo celular.
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conocida como Cdk1) formando complejo con la ciclina B,
que se ha demostrado que fosforilan protenas reguladas
durante la mitosis
11-13
.
Asociacin subunidad ciclina no es la nica forma de
regulacin impuesta a las CDK. Tambin hay degradacin
proteoltica temporizada de las ciclinas, la fosforilacin tanto
de la CDK y ciclina subunidades, y la interaccin con
otherregulators. La degradacin proteoltica de las ciclinas se
produce a travs de la proteolisis mediada por ubiquitina, un
proceso en el que cada protena est dirigida a la proteosoma
26S para la degradacin por la unin de mltiples molculas
de ubiquitina en uno o ms residuos de lisina
14
. Este proceso
se conoce como polyubiquitination e implica una cascada de
tres enzimas, E1, E2 y E3 (ref. 15). La ubiquitina se
convierte inicialmente unido a la enzima E1 a travs de una
reaccin ATPdependent. Se transfiere a continuacin a uno
de 12 o menos enzimas E2 y finalmente se aade a uno o
ms residuos de lisina en la protena diana a travs de la
enzima ligasa E3. Hay dos tipos conocidos de ligasa E3, el
complejo SCF y la promocin de complejos anafase (APC).
Para las ciclinas G1 D1 y ciclina E, la ubiquitinacin se lleva
a cabo a travs del sistema de ubiquitina ligasa SCF y es
dependiente de la fosforilacin de un residuo de treonina
especfica en cada protein14. En contraste, las ciclinas A y B
son poliubiquitinados por la APC
14
. Esto es mediado por un
motivo de secuencia presente en el extremo N-terminal de
estos y otros ciclinas conocidos como la "caja de destruccin
', que acta como una seal para la degradacin temporizada
de estas protenas
14
.
La fosforilacin de la subunidad CDK puede tener tantos
efectos positivos y negativos sobre su actividad. Se requiere
la fosforilacin en un residuo de treonina especfica hacia el
centro de la protena (T161 en Cdc2) con el fin de la CDK /
ciclina complejo que tiene actividad completa. Sin embargo,
la fosforilacin de un par adyacente de treonina y residuos de
tirosina en el extremo N-terminal de la CDK ejemplificado
por treonina 14 (T14) y la tirosina 15 (Y15) de Cdc2, inhibe
la actividad de CDK, incluso cuando est fosforilada en
T161 (ref. 17). La fosforilacin en T14 de Cdc2 se lleva a
cabo por la quinasa Myt1, mientras que Y15 es
predominantemente fosforilado por la quinasa Wee1
18-19
.
Esto permite que el complejo de estar presente, pero inactivo
durante la fase G2 hasta que se requiera la entrada en mitosis
despus de lo cual la fosfatasa de especificidad dual Cdc25C
puede desfosforilar ambos residuos
20
. Curiosamente,
mientras Cdk2 tiene tanto la treonina y una tirosina
equivalente a T14 y Y15 de Cdk2, las quinasas dependientes
de ciclina D-CDK4 y Cdk6 slo poseer el residuo de tirosina.
Dos familias de protenas se han identificado que puede
unirse e inhibir las CDK. El primero fue identificado el INK4
(Los inhibidores de la cdk4) de la familia, a travs de la
clonacin de la primera p16
INK4A
miembro y su identificacin
como un inhibidor de la cdk4 21 (Figura 2). Otros tres
miembros de la familia posteriormente se han identificado
p15
INK4B
, p18
INK4C
y p19
INK4D
todos los cuales se unen
especficamente a e inhiben las quinasas dependientes de
ciclina D-, CDK4 y CDK6 (ref. 22). En contraste, la CIP /
KIP (Cdk protena de interaccin / Protena Quinasa
inhibidora) de la familia de protenas p21
Cip1
, p57
Kip2
p27
KIP1

y se pueden unir a una gama mucho ms amplia de las Cdk
que incluye Cdk4, Cdk6, Cdk2 y Cdc2 (ref. 22, Figura 2).
Ahora, aunque la familia CIP / KIP se identificaron
originalmente como inhibidores de CDK, que recientemente
ha salido a la luz que al menos en el caso de las quinasas
dependientes de ciclina D-que en realidad puede promover la
actividad de estas Cdk mediante la estabilizacin de la
subunidad CDK-ciclina interaccin
23-24
. Sin embargo,
todava inhiben fuertemente la actividad de CDK2. El
"modelo de secuestro 'de G1 CDK / ciclina activacin
proporciona una posible explicacin de su comportamiento
de contraste hacia las quinasas dependientes de ciclina D-
frente a Cdk2 (ref. 25). En este escenario, como las ciclinas
de tipo D se expresan se unen a Cdk4 y Cdk6. Este conjunto
se promueve a travs de la asociacin estequiomtrica con
protenas CIP / KIP, de tal manera que estos complejos son
todava activos y pueden iniciar la fosforilacin de pRb. Una
segunda funcin de las quinasas dependientes de ciclina D-es
que por consiguiente secuestran las protenas CIP / KIP lejos
de CDK2/ciclina E, promoviendo as la actividad de la
quinasa CDK2, que puede entonces continuar la fosforilacin
de pRb que conduce a la transcripcin E2F-dependiente. En
conclusin, estas mltiples formas de regulacin son
indicativas del hecho de que la actividad de CDK es un
regulador crtico de la progresin del ciclo celular y por lo
tanto debe ser en s mismo bajo un estricto control.

Cdk, puestos de control del ciclo celular y el cncer

Habiendo descrito la maquinaria molecular que impulsa la
progresin del ciclo celular, y, en particular, las Cdk, ahora
es posible de describir cmo funcionan los puntos de control
del ciclo celular y su relacin con el cncer. Al hacer esto, se
convertir en claro que hay una serie de genes clave que
participan en mltiples puntos de control del ciclo celular,
que tambin son blanco frecuente de alteracin gentica en el
cncer. Tambin hay que sealar que gran parte del trabajo la
identificacin de los actores clave en estos puntos de control
se ha llevado a cabo en la fisin y la levadura en ciernes (S.
pombe y S. cerevisiae, respectivamente) y tambin en el
sistema bioqumico de Xenopus laevis. Por consiguiente, un
nmero de los genes descritos aqu son homlogos de los
identificado y caracterizado el uso de estos sistemas de
modelo primero. Debido a las limitaciones de espacio no es
posible entrar en esto, pero muchas excelentes crticas se
pueden encontrar en la literatura.

G1

La fase G1 del ciclo celular es un momento crtico donde las
seales extracelulares tanto positivos como negativos se
integran en la regulacin de la progresin del ciclo celular.
Esto ocurre hasta que el punto de restriccin momento en el
que la clula se convierte en el compromiso de una ronda de
la divisin celular. Si la clula no recibe las seales correctas
durante G1, no puede pasar por el punto de restriccin y en
cambio entrar en el estado de reposo, G0. A nivel molecular,




que es las quinasas dependientes de ciclina D que actan
como integradores de estas seales extracelulares. Un
ejemplo de esto es que la expresin de ciclina D1 puede ser
inducida por tanto la PI3 quinasa vas de sealizacin Ras y,
promoviendo as la progresin de G1
26-27
. Por lo tanto, las
quinasas dependientes de ciclina D-, sus reguladores y pRb
son un punto central de control para la progresin de G1 y
por tanto no es sorprendente que sus vnculos con el cncer
son muy fuertes. Este enlace comienza realmente con las vas
de sealizacin que regulan la actividad de la quinasa
dependiente de ciclina D-. Por ejemplo, los propios genes
ras, el gen PIK3CA que codifica la subunidad P110A de la
PI3 quinasa y el gen supresor de tumores PTEN, que acta
como una fosfatasa de lpidos y revierte la reaccin de PI3
quinasa, todos han demostrado ser mutados en el cncer.
28-29

Todas estas alteraciones genticas tienen la capacidad de
provocar la activacin de las quinasas ciclina D dependente
que conducen a la fosforilacin de pRb apropiado y
regulacin deficiente del punto de restriccin. Aguas abajo
de las quinasas dependientes de ciclina D-, sus reguladores,
as como el gen que codifica la misma (RB) pRb son todos
los objetivos cncer. De hecho, la mayora de los tumores
contienen una alteracin gentica en uno de estos genes.
Ciclina D1 fue identificado por primera vez como el gen
BCL1, que se encuentra en la t (11; 14) translocacin en el
linfoma de clulas del manto y tambin como
PRAD1/CCND1 el gen en la inversin de una parte del
cromosoma 11, inv (11) (p15; q13) encontrado en adenoma
de paratiroides. La amplificacin de la ciclina D1 locus
11q13, tambin ha sido identificado en un nmero de tipos
de cncer incluyendo cncer de mama, de pulmn y el
glioma. El tumor supresor CDKN2 gen que codifica la
protena p16
INK4A
tambin se encuentra eliminado, mutado o
silenciado su expresin en varios tipos de cncer
30
. La
amplificacin de CDK4 Tambin se ha informado, mientras
que los niveles bajos de la protena de la CKI p27
KIP1
se han
demostrado para indicar mal pronstico tanto en cncer de
colon y de mama
30-31
. En cuanto a todas estas alteraciones
genticas, es claro ver que el denominador comn es que
todos ellos tienen la capacidad de promover la fosforilacin
inapropiada e inactivacin de pRb. En cuanto al propio gen
RB, mutacin o delecin es una ocurrencia comn en el
cncer, por lo tanto abrogar directamente el requisito de la
actividad ciclina quinasa Ddependent durante la fase G1 (ref.
30). Una ltima cosa a tener en cuenta es que en algunos
tipos de tumores parece que hay un comportamiento
mutuamente excluyentes en las alteraciones genticas en la
p16INK4A/cyclin D / pRb pathway30. Un ejemplo de esto es
en el cncer de pulmn donde los tumores tienden a albergar
ya sea deleciones o mutaciones en RB o CDKN2
codificacin p16
INK4A
, pero no en both30. Esto sugiere que,
en ciertas circunstancias, la alteracin gentica en un
miembro de esta va es una contribucin suficiente para la
progresin del tumor.
Aunque muchos factores de estrs celular pueden invocar
los puestos de control del ciclo celular (hipoxia, la privacin
de nucletidos y daos en el ADN, por nombrar slo
algunos), el puesto de control de las vas descritas al lado de
G1 / S, S, y la transicin G2 / M son las que se invocan en
respuesta al dao del ADN causado por roturas de doble
cadena en el ADN (DSB). Este tipo de dao en el ADN
puede ser provocado por una serie de agentes de la cual la
radiacin ionizante, productos qumicos genotxicos y
especies reactivas de oxgeno son tres culpables principales.
Los puntos de control del ciclo celular se describen en el
contexto de estas formas de insultos, como DSB afectan la
integridad del genoma, que si no se mantiene correctamente
puede conducir al cncer.

G1 / S

Una respuesta primaria de la clula normal a DSBs es la
activacin de las vas celulares que inducen la detencin del
ciclo celular en la transicin G1 / S. Esto es para que las
clulas que estn en G1 y han sufrido daos en el ADN no
entran en la fase S. La induccin de esta detencin parece ser
un proceso de dos pasos, un rpido inicio de la detencin
seguido de un mantenimiento ms lenta (Figura 3). Hasta la
fecha, dos eventos celulares han sido identificados que
pueden participar en la iniciacin del punto de control G1 /
S. El ms recientemente descrito es activacin de la
degradacin de la ciclina D1
32
. Esto conduce a una liberacin
de p21
Cip1
de cdk4 para inhibir la Cdk2. El segundo es un
aumento en la fosforilacin inhibidora de Cdk2 en el sitio
equivalente a la tirosina 15 de Cdc2 (ref. 33). Esto es debido
a la degradacin de la fosfatasa Cdc25A, que desfosforila
este sitio. La degradacin de Cdc25A es inducida por la
activacin de una serina / treonina quinasa puesto de control
conocido como Chk1 (ref. 33).

El mantenimiento del punto de control del ciclo celular
G1 / S es dependiente en el producto del gen supresor de
tumores TP53. Este gen est mutado o suprimido en ms de
la mitad de todos los cnceres espordicos haciendo cambios
genticos en TP53 el defecto ms comn en el cncer
humano
34
. Una explicacin de esto es el papel que el
producto del gen TP53, p53, juega como "guardin del
genoma '. La protena p53 realiza esta funcin al actuar como
un receptor de seales de estrs (incluyendo dao en el
ADN) que provocan la activacin y la acumulacin de la
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protena p53 en la clula. Esto entonces induce
transcripcionalmente la expresin de genes que puede
invocar la detencin del ciclo celular y la apoptosis. Uno de
ellos es el miembro de la familia CIP / KIP, p21
Cip1
, que en la
induccin de p53, se une a cdk2/ciclina E causando la
detencin del ciclo celular en la transicin G1 / S
transition35 (Figura 3). Una de las maneras en las que se
induce la regulacin positiva de la expresin de p53 es
mediante el bloqueo de su degradacin. Al igual que las
ciclinas, p53 se degrada a travs de la proteolisis mediada
por ubiquitina, en este caso instigado por el E3 ligasa Mdm2
(ref. 36). Una ruta por la que la degradacin puede ser
abrogada que conduce a la regulacin positiva de los niveles
de p53 y la induccin de p21Cip1, es a travs de la
activacin del punto de control del ciclo celular serina /
treonina quinasa Chk2 (tambin conocido como hCDS1).
Chk2 se activa en respuesta al dao del ADN y fosforila la
serina 20 de p53 (ref. 37). Esto interrumpe la interaccin de
p53 con Mdm2, la degradacin de p53 est bloqueada y por
consiguiente protena es upregulated, conduce a la expresin
de p21
Cip1
(ref. 36). Chk2 se activa a travs de la
fosforilacin de treonina 68 por la protena quinasa ATM, un
jugador clave en la activacin de los puntos de control del
ciclo celular
38
. El gen ATM es responsable de la enfermedad
autosmica recesiva ataxia telangiectasia (AT), caracterizado
por ataxia cerebelosa, oculocutneo telangiectasia y lo ms
interesante, sensibilidad extrema a la radiacin ionizante que
causa DSBs y una predisposicin a ciertas formas de cncer.
Adems, las clulas deficientes en ATM muestran reduccin
de las respuestas a agentes genotxicos que causan DSBs,
destacando la importancia de los puntos de control del ciclo
celular defectuosos en el cncer
39
. Las mutaciones en Chk2
tambin se han encontrado en un subconjunto de pacientes
con el sndrome de Li-Fraumeni un fenotipo de cncer
familiar por lo general asociada con la mutacin del gen
TP53, proporcionando evidencia gentica de que p53 y Chk2
ponen sobre la misma va
40
.

Fase S

Dao en el ADN durante la fase S no invocar un punto de
control del ciclo celular, a pesar de nuestra comprensin de
cmo funciona es limitada. Despus de la exposicin a
agentes que daan el ADN, la tasa de sntesis de ADN se
hace ms lenta, pero en contraste con el punto de control G1
/ S se ha descrito anteriormente no hay una detencin
completa. En su lugar, parece que hay una desaceleracin de
la fase de replicacin y S se alarga. Esto ha llevado a la
sugerencia de que la fase S de ADN control de daos en
realidad no detiene la replicacin con el fin de completar la
reparacin del ADN, pero en vez ralentiza la replicacin si el
dao tiene occurred42. En clulas de mamferos se han
mostrado cuatro protenas de participar en este puesto de
control. Estos son, la protena quinasa ATM, Nibrin (tambin
conocido como NBS1), una novela hebra de protena de
reparacin del ADN de doble ruptura que est mutado en el
sndrome de rotura de Nijmegen (NBS), Mre11 que est
mutado en un trastorno de AT-como y Rad50. En la celda,
NBS1, Mre11 y Rad50 se encuentran en un complejo
conjunto que puede llevar a cabo ATP dependiente de ADN
desenrollado y corte de horquilla, un proceso necesario para
el ADN repair44. Un enlace entre el cajero automtico
protena de punto de control y la reparacin del ADN es
proporcionado por Nibrin, que puede ser fosforilado por
ATM.
Dado que la exposicin a la radiacin ionizante provoca
un aumento en los niveles de la inhibicin p21Cip1 y Cdk, se
ha sugerido que p21Cip1 tambin puede desempear un
papel en la fase S de control. En apoyo de esta propuesta, se
ha demostrado que p21Cip1 puede ralentizar la replicacin
del ADN mediante la inhibicin de la actividad de CDK. Por
otra parte, en una lnea celular en la que el gen p21Cip1,
CDKN1A ha sido eliminado, la fase S daan el ADN puesto
de control est intacto p21Cip1 lo que sugiere que no es
esencial para este function47. Por ltimo, si se requiere
p21Cip1 o no, en clulas de ratn, parece que la fase S de
ADN daos puesto de control depende de la desfosforilacin
de pRb al bloque de progresin de la fase S.

G2 / M

Las funciones del puesto de control de dao en el DNA G2 /
M al final de G2 y consiste en que muchos de los jugadores
que participan en el punto de control G1 / S (Figura 3). Sin
embargo, su objetivo esta vez no es cdk2/ciclina E, pero el
complejo Cdc2/ciclina B, que se requiere para la progresin
de G2 a la mitosis. Por consiguiente, la funcin principal del
punto de control es mantener Cdc2/ciclina B1 en un estado
inactivo. La principal va por la cual esto se logra es por la
defensa de la fosforilacin inhibidora sobre los T14 y Y15
residuos de Cdc2. Esto se logra mediante el bloqueo de la
funcin de la fosfatasa Cdc25C, que desfosforila estos sitios
sobre Cdc2. Una vez ms ATM juega un papel, por la
mediacin de la fosforilacin y la activacin de las quinasas
Chk1 y Chk2 punto de control. Ambas quinasas pueden
fosforilar Cdc25C en la serina 216, que promueve su
asociacin con protenas 14-3-3. Esto conduce a la retencin
de Cdc25C en el citoplasma, donde no pueda dephophorylate
la Cdc2/ciclina localizada en el ncleo B. Tambin hay
evidencia de que p53 puede desempear un papel en este
puesto de control para mantener la detencin G2 (Figura 3).
La expresin de p53 es upregulated en el punto de control G2
conduce a la induccin de p21Cip1, que puede unirse e
inhibir la actividad de Cdc2/ciclina B en la nucleus50.
Upregulation de p53 tambin induce la expresin de los 14-
3-3s protein51. Esto no se une a Cdc25C, pero en lugar
secuestra cdc2/ciclina B en el citoplasma lejos de sus
objetivos nucleares. As p53 ofrece un seguro doble que la
actividad Cdc2/ciclina B se inhibe fuertemente.
En trminos de cncer, la relacin entre muchas de estas
protenas y la gnesis tumoral ya se ha descrito. Sin
embargo, hay algunas excepciones. Aunque no se ha
establecido una conexin entre Chk2 y cncer, lo mismo no
puede decirse de la quinasa Chk1 funcionalmente
relacionados. En esta etapa, sin embargo, es difcil
determinar si esto se debe a Chk1 mutaciones no se producen
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en los tumores o si an no se han descubierto. De la misma
manera, las mutaciones inactivantes de p21Cip1 no se han
identificado en los tumores. Sin embargo, tal vez esto es
redundante, ya que su principal regulador, p53 se encuentra
mutado en el 50% de los derechos humanos tumours34.
Curiosamente, se ha demostrado recientemente que en los
cnceres de mama la funcin de p21Cip1 puede ser
interrumpido a travs de fosforilacin que causa la
relocalizacin de p21Cip1 desde el ncleo hasta el
citoplasma. La fosforilacin se lleva a cabo por el proto-
oncogen Akt, que se encuentra sobreexpresado en los
cnceres de mama que sobreexpresan Her2/neu y
proporciona un nuevo mecanismo por el cual la funcin de
p21 en un tumor se puede quitar sin mutacin del gen.

Mitosis

La mitosis es el tiempo en una clula cuando el ADN recin
replicado (como cromtidas hermanas condensados) est
segregado de manera que los posteriores dos clulas hijas
tendrn genomas idnticos. Esto se logra a travs de una
serie de eventos altamente organizada de partida con la
condensacin de cromosomas y culminando en la divisin
celular. Un punto crtico se produce cuando las cromtidas
hermanas se convierten en condensados unidos al huso
bipolar que emana de los dos centrosomas en lados opuestos
de la clula (metafase). Este accesorio es a travs de
complejos de protenas en las cromtidas llamados
cinetocoros. Los dos conjuntos de cromtidas hermanas
idnticas a continuacin, se retiraron a los polos opuestos
(anafase), una reforma envoltura nuclear alrededor de cada
conjunto de cromtidas (telofase) listas para la divisin
celular (cytokenesis). Si se produce mala segregacin de las
cromtidas hermanas, a continuacin, las clulas hijas
resultantes tendrn el nmero incorrecto de cromosomas
(aneuploida), un fenotipo comnmente observado en el
cncer y cree que contribuyen al fenotipo maligno del tumor.
Por lo tanto la mitosis se plante la hiptesis de que un
objetivo importante de la mutacin gentica en el cncer y
los recientes descubrimientos corroboran.
Defectos fenotpicos en los centrosomas, los centros de
organizacin de la huso bipolar, se han reportado en muchas
formas de cncer. Una posible causa de esto es la quinasa
Aurora2/STK15/BTAK, que es centrosoma durante la
interfase asociada y tanto centrosoma y el husillo asociado
durante mitosis54. El gen se sobreexpresa en los carcinomas
colorrectales y mapas a una regin en el cromosoma 20 se
encuentra con frecuencia amplificado en un nmero de tipos
de tumores. Aurora2 tambin puede actuar como un
oncogn, transformando ambos Rata-1 y NIH3T3
fibroblastos in vitro. Su funcin no est clara aunque los
experimentos antisentido han demostrado que el agotamiento
de Aurora2 provoca un paro mittico con un huso bipolar
intacta, pero un defecto en la unin de cromtidas.
Apego Chromatid al huso bipolar es esencial para la
mitosis correcta y si es defectuoso, invoca el huso mittico
puesto de control en la transicin metafase-anafase. Durante
la mitosis normal, como el ltimo de cromtidas se apega al
huso bipolar, la APC E3 ligasa se convierte en active55. Esto
requiere la asociacin con la subunidad reguladora y la
fosforilacin de Cdc20 por cdc2/ciclina B (ref. 56). Una vez
activo, APC/Cdc20 inicia la degradacin de securin, una
protena asociada con la proteasa mittico, Separin. Despus
de la degradacin de Securin, Separin se libera y la protena
se unir (s) que participan en cromtida hermana de
cohesin, lo que permite su separacin. Humano Securin es
idntico al producto del gen del tumor-la transformacin de
la pituitaria (PTTG), que se sobreexpresa en algunos tumores
y provoca la transformacin celular cuando se sobreexpresa
en clulas NIH3T3. No hay relacin directa entre separin y el
cncer no se ha identificado.
Si las cromtidas no se conviertan conectados
correctamente a la huso bipolar (debido al dao del ADN o
un inhibidor del huso mittico), se invocar el puesto de
control mittico. Varios homlogos de las protenas que
participan en la levadura huso mittico puesto de control se
han identificado en clulas de mamferos. El primero de
estos Mad1 y Mad2, se unen a los cinetocoros fosforilados en
cromtidas no unidas. Mad2 entonces inhibe el complejo
APC/Cdc20 travs de la asociacin con Cdc20, lo que
bloquea la degradacin de securin y hermana cromtidas
separation55 posterior. Normalmente, como el ltimo
cinetocoro se adjunta, la contratacin de Mad2 a APC/Cdc20
extremos y la separacin de cromtidas entonces ocurre que
los disminuye interaccin Cdc20/Mad2. Otros tres jugadores
en el puesto de control mittico de mamfero son las dos
protenas quinasas relacionadas hBub1 y hBub1R, y la
tercera Bub3 protena. Los tres estn unidos a cinetocoros en
la mitosis y probablemente actan aguas arriba de Mad1 y
Mad2 en el puesto de control mittico mamferos. La
importancia de este punto de control en el mantenimiento de
la integridad del genoma se enfatiza por el hecho de que
muchas de estas protenas tienen enlaces con cncer. La
leucemia de clulas T humano tipo 1 del virus abroga el huso
mittico puesto de control dirigindose Mad1 con el
Impuesto oncoprotein59. La supresin de un alelo del gen
MAD2 en cualquiera de las clulas tumorales humanas o
murinas fibroblastos primarios resultados embrionarias en un
puesto de control mittico defectuoso. Adems, Mad2 + / -
ratones desarrollan tumores de pulmn a altas tasas despus
de latencias largas, la conexin de defectos en el puesto de
control mittico a la tumorignesis. Dos mutaciones
inactivantes de Bub1 se han encontrado en el cncer de colon
y demostrado que causa un puesto de control mittico
anormal. Las mutaciones de la BubR1 relacionada con
quinasa tambin se han encontrado en el cncer colorrectal a
pesar de las consecuencias funcionales de estas mutaciones
an no se han determinado.
Mitosis tarda no escapa a la atencin. El Aurora1
quinasa, relacionado con Aurora2 est activo al final de la
mitosis durante la anafase y posiblemente telophase54. La
sobreexpresin de una forma muerta quinasa de rata Aurora
1 (aim1) en las clulas epiteliales de pulmn de visn crea
clulas con ms de una ncleos causada por una interrupcin
en el surco de segmentacin generado en cytokenesis.
Aurora1 humana se encuentra altamente expresado en
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muchas muestras de tumor y se aisl originalmente en una
pantalla de PCR para identificar quinasas sobreexpresados en
el cncer de colon.
Para concluir esta seccin, una mencin debe ir a la
quinasa de la familia de serina / treonina cinasas conservadas
polo-like (PLK). Esta familia de quinasas funcin a lo largo
de la mitosis, a partir de la activacin de Cdc2/ciclina B por
fosforilacin y activacin de la fosfatasa Cdc25C. Ms tarde
se fosforilan y activan la APC (que ha sido prefosforilado
por Cdc2/ciclina B), lo que conduce a la degradacin de la
ciclina B y la salida de mitosis. Tambin hay indicios de que
estas protenas estn implicadas en cytokenesis62, 63. En
cuanto a los puestos de control del ciclo celular y el cncer,
se han producido varios acontecimientos recientes. Actividad
Plk1 humano se inhibe en G2 en respuesta a damage64
ADN. Esta respuesta requiere cajero automtico y funciona
probablemente mediante la inhibicin de Plk1 de modo que
ya no puede fosforilar y activar Cdc25C. Dao en el ADN
tambin provoca la inhibicin de Plk1 en la mitosis. Esto va
acompaado de un bloque en la degradacin de la ciclina B1
y la inhibicin de la salida de mitosis, que muestra
claramente que el dao del ADN no induce un puesto de
control mittico. Adems, los anticuerpos a PLK inducen
una anormalidad mittico, lo que contribuye a aneuploida
cuando micro-inyectado en clulas y recientemente han sido
mostrados mutaciones del gen de PLK encontrado en lneas
celulares tumorales humanas para disminuir la estabilidad de
la protena.

Genmica, el ciclo celular y el cncer

No sera apropiado para completar esta resea sin hacer
referencia a las recientes publicaciones sobre el primer
borrador de la secuencia del genoma humano por el proyecto
financiado con fondos pblicos internacionales del Genoma
Humano (PGH) y la compaa Celera Genomics con fondos
privados. Uno de los hechos ms interesantes para ser
revelados por las dos publicaciones es que el nmero de
genes en realidad codificadas por el genoma humano es
probablemente mucho menor que la de cien mil que se haba
predicho. El proyecto Celera identific 26.500 con alrededor
de otros 12.000 candidatos, mientras HGP estima alrededor
de 33.000. Por supuesto, esto plantea la pregunta de si por lo
tanto, el medio ambiente juega un papel ms importante de lo
previsto en lo que somos. Por otro lado, nuestros genes son
ms complejos que la mayora de los eucariotas, con ms
variantes de corte y empalme. Sin embargo, no est dentro
del alcance de esta revisin para examinar todas las
consecuencias del proyecto de secuenciacin del genoma
humano, pero en lugar de dar una perspectiva en relacin con
el ciclo celular y el cncer.
Como se mencion anteriormente, muchos de los grandes
descubrimientos en el campo del ciclo celular no han venido
de la investigacin en clulas de mamfero, pero a partir de
los estudios tanto bioqumicos y genticos de otros
organismos. As que ahora que la secuencia del genoma
humano est disponible, qu beneficios puede tener en la
comprensin de este proceso? Hay dos posibilidades obvias.
La primera es que los nuevos miembros de familias de genes
implicados en la regulacin del ciclo celular, tales como las
Cdk y ciclinas, pueden ser identificados. La segunda es que
los genes se han encontrado para jugar slo un papel en el
ciclo de divisin celular de otros organismos podran tener
homlogos en la secuencia del genoma humano. Un
excelente artculo de Murray y marcas que acompaa al
papel HGP en Nature, revela algunas de estas posibilidades.
Comparacin de los genes de ciclina conocidos con la
secuencia del genoma humano conducir a la identificacin de
un homlogo humano del gen de pollo ciclina B3 y tres
nuevos genes de ciclina, ciclinas M, O y P. Tambin revel
que hasta el momento no parece haber ningn homlogo
humano de la protena de levadura en ciernes CAK1, que
fosforila la treonina activador sobre Cdc28, anloga a T161
de Cdc2 mamferos. Por lo tanto, este anlisis inicial de la
secuencia del genoma humano no ha proporcionado un salto
adelante en nuestra comprensin del ciclo celular en
mamferos, y es evidente que la comprensin del contexto de
cmo funcionan estos genes es esencial para el progreso
constante en esta rea.
Qu pasa con el cncer? Incluso de slo mirar en el
papel del ciclo celular juega en el cncer es evidente que en
la mayora de casos de esta enfermedad no es una derivada
de una sola mutacin gentica, pero a partir de alteraciones
en un nmero de genes que surgen para dar un tipo de
cncer. Hasta ahora, muchos de los genes supresores de
tumores, que desempean un papel en el cncer han sido
identificados a travs de la duro esfuerzo de mapeo de un
locus gentico de un cromosoma y luego en busca de genes
candidatos. Ser la secuenciacin del genoma humano hacer
el trabajo ms fcil? Esta cuestin se aborda en un artculo de
Futreal et al. Tambin publicado, junto con el documento de
HGP en Nature. Al igual que Murray y Walker, que buscaron
la base de datos del genoma humano, pero esta vez para las
secuencias novedosas relacionadas con conocidos genes
supresores de tumores. La idea era que si se identificaron una
secuencia de este tipo, entonces puede tambin ser gen
supresor de tumores. Sin embargo no se identific ninguno.
Tambin probaron si era posible identificar reordenamientos
de los genes implicados en el cncer mediante la
comparacin de secuencias del genoma de cncer contra la
secuencia del genoma humano. Result que se encontraron
con aproximadamente el mismo nmero de tales secuencias
quimricas, tanto en el normal y secuencias de cncer, lo que
sugiere una alta tasa de falsos positivos. En conclusin, la
generacin del primer borrador de la secuencia del genoma
humano es slo el primer paso en el camino hacia la
comprensin de cmo el genoma contribuye al cncer.