UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

FACULTAD de CIENCIAS
Departamento de Qumica

DETERMINACIN de la ACTIVIDAD de
COLINESTERASA SRICA en SUERO de
TRABAJADORES de JESUS del VALLE y AUCALLAMA
(HUARAL) EXPUESTOS a COMPUESTOS
ORGANOFOSFORADOS

Integrantes:

HUASASQUICHE SARMIENTO, Lucero

PALACIOS NEYRA, Miguel ngel
SILVA CANO, Renzo Andres
VELSQUEZ JUREGUI, Neyda Pierina

LIMA-PER
2 de Diciembre 2013

RESUMEN
Se midi la actividad enzimtica de la colinesterasa srica en 17 muestras de suero de trabajadores de Jess
del Valle y Aucallama que estuvieron expuestos a compuestos organofosforados y en 5 muestra de suero de
personas que no tuvieron exposicin, con el objetivo de conocer el efecto de estas sustancias frente a la
actividad de la enzima. Se obtuvo como resultados valores de actividad (KU/l) que se encontraban dentro
del rango de 1.02 7.74, y los controles slo dentro de 2.1 - 4.5 KU/l, concluyendo que los trabajadores de
Jess del Valle y Aucallama no han sido afectados por la exposicin a plaguicidas con compuestos
organofosforados.

FUNDAMENTO
Aunque su funcin es desconocida, la colinesterasa se utiliza clnicamente para verificar envenenamiento
con insecticidas. Si se encuentra a niveles bajos, indica intoxicacin con compuestos organofosforados. Esta
enzima cataliza la hidrlisis de la butiriltiocolina en tiocolina y cido butrico. La concentracin de esta
enzima se determina a partir de la velocidad de desaparicin del hexacianoferrato (III), el cual es medido a
405 nm. Las reacciones involucradas son:
Butiriltiocolina + H2O Tiocolina + Butirato
Tiocolina + Hexacianoferrato (III) Hexacianoferrato (II)

Para esta prctica se cuenta con el reactivo R1, que contiene buffer pirofosfato de pH 7.6 y hexacianoferrato
(II) de potasio; y con el reactivo R2 que contiene yoduro de s-butiriltiocolina. Al adicionar la muestra al
reactivo R1, seguido del reactivo R2, se desencadenarn las reacciones mostradas arriba. El
hexacianoferrato (III) es de color amarillo y el hexacianoferrato (II) de color ms transparente. La actividad
de la enzima se expresa en kU/L (Analyticon Biotechnologies AG).

REVISIN DE LITERATURA
El trmino colinesterasa es un trmino genrico que abarca a todas las enzimas que pueden hidrolizar la
acetilcolina. Existen dos categoras principales de colinesterasas. El trmino acetilcolinesterasa designa a
todos los componentes de una familia de isoenzimas dependientes de la serina que hidrolizan de manera
muy selectiva la acetilcolina y, en consecuencia, se conocen con el nombre de colinesterasas verdaderas, o
especficas; en realidad, estas enzimas no son en verdad especficas, puesto que pueden hidrolizar otros
steres de la colina a baja velocidad. La acetilcolinesterasa se concentra en la regin de la placa motora, en
los ganglios autnomos, en las neuronas colinrgicas en el interior y en el exterior del SNC y en los
eritrocitos (Gennaro, 2003). Esta colinesterasa se usa como monitor del efecto relajante del msculo
(succinilcolina), que es usado en ciruga (Meja y Ramelli, 2006).
El trmino butirilcolinesterasa (pseudocolinesterasa o colinesterasa inespecfica) designa a diversas enzimas
que pueden hidrolizar la acetilcolina pero para las cuales el sustrato ptimo es la butirilcolina y no la
acetilcolina. La butirilcolinesterasa se encuentra presente en las clulas gliales y satlites del SNC y los
ganglios autnomos, el msculo liso, las glndulas exocrinas, algunos rganos como el hgado y el plasma
(Gennaro,2003). Esta colinesterasa es usada cuando existen sospechas de intoxicacin por plaguicidas,
rgano fosforados y carbamatos que producen un cuadro txico caracterizado por un sndrome muscarnico,
sndrome nicotnico y sndrome Down SNC (Meja y Ramelli, 2006).
La inhibicin de la acetilcolinesterasa y la butirilcolinesterasa se asocia con varias consecuencias que
dependen del nivel de inhibicin enzimtica. La butirilcolinesterasa plasmtica y la acetilcolinesterasa
eritrocitaria no desempean ninguna funcin fisiolgica conocida, y la inhibicin de estas enzimas no se
asocia con consecuencias fisiolgicas identificables, salvo un aumento moderado de la vida media y la

concentracin plasmticas de la acetilcolina y algunos otros steres de la colina hidrolizables (Meja y

Ramelli, 2006).
Existen dos categoras principales de inhibidores de la colinesterasa: los compuestos amnicos o de amonio
cuaternario, los cuales interactan con los sitios aninicos de la colinesterasa adems del sitio estertico; y
los compuestos por lo comn organofosforados (pero que pueden contener otras fracciones nucleoflicas),
los cuales esterifican el grupo serina hidroxilo en el sitio estertico. Las anticolinesterasas amnicas
reaccionan en forma reversible con las enzimas, fenmeno compatible con una unin inica; la accin de
este tipo de inhibidor dura entre algunos minutos y horas (Gennaro, 2003). Las anticolinesterasas
organofosforadas establecen una unin ms estable, en algunos casos casi irreversible, que puede tardar, en
ocasiones, hasta semanas para deshacerse (Bataller, 2004).

RESULTADOS Y CLCULOS
Se midi la absorbancia de 46 tubos, de los cuales, 6 fueron controles (suero de personas no expuestas a
compuestos organofosforados) y 17 fueron muestras de suero de trabajadores expuestos a estas sustancias,
cada tubo con su respectiva repeticin. Las lecturas obtenidas se muestran en la Tabla 1 junto con el
coeficiente de variabilidad.
Tabla 1. Absorbancias de los controles y muestras, con sus respectivos coeficientes de variabilidad
MUESTRA

TIEMPO

Inicial
30'
CONTROL 1
60'
90'
Inicial
30'
CONTROL 2
60'
90'
Inicial

CONTROL 3

30'
60'
90'

TUBO

LECTURA de
ABSORBANCIA

r-M

1.386
1.543
1.361
1.523
1.33
1.489
1.285
1.439
1.572
1.661
1.548
1.633
1.511
1.59
1.454
1.516

1.219

r-M

1.247

1.199
1.232
1.181
1.216
1.163

M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M

r-M
M
r-M
M

PROMEDIO

DESVIACIN
ESTANDAR

CV%

1.4645

0.1110

7.58

1.442

0.1146

7.94

1.4095

0.1124

7.98

1.362

0.1089

8.00

1.6165

0.0629

3.89

1.5905

0.0601

3.78

1.5505

0.0559

3.60

1.485

0.0438

2.95

1.233

0.0198

1.61

1.2155

0.0233

1.92

1.1985

0.0247

2.06

1.182

0.0269

2.27

r-M

1.201
1.226
1.284
1.21
1.267

1.194

r-M

1.25
1.179
1.233
1.326
1.294
1.31
1.274
1.293
1.255
1.277
1.236
1.52
1.448
1.503
1.417
1.482
1.39
1.461
1.366
1.725
1.38
1.688
1.334
1.647
1.295
1.606
1.25
1.549
1.404
1.533
1.373
1.519
1.343
1.506
1.314

r-M
Inicial
30'
CONTROL 4
60'
90'
Inicial
30'
CONTROL 5
60'
90'
Inicial
30'
CONTROL 6
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 1
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 2
60'
90'

M
r-M
M

M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M

1.255

0.0410

3.27

1.2385

0.0403

3.25

1.222

0.0396

3.24

1.206

0.0382

3.17

1.31

0.0226

1.73

1.292

0.0255

1.97

1.274

0.0269

2.11

1.2565

0.0290

2.31

1.484

0.0509

3.43

1.46

0.0608

4.17

1.436

0.0651

4.53

1.4135

0.0672

4.75

1.5525

0.2440

15.71

1.511

0.2503

16.57

1.471

0.2489

16.92

1.428

0.2517

17.63

1.4765

0.1025

6.94

1.453

0.1131

7.79

1.431

0.1245

8.70

1.41

0.1358

9.63

Inicial
30'
MUESTRA 3
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 4
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 5
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 6
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 7
60'
90'
MUESTRA 8

Inicial

M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M

1.648
2
1.625
1.988
1.6
1.979
1.578
1.971
1.539
1.33
1.516
1.29
1.491
1.252
1.462
1.216
1.747
1.53
1.726
1.499
1.707
1.46
1.687
1.43
1.363
1.314
1.358
1.304
1.347
1.294
1.336
1.285
1.483
1.482
1.46
1.458
1.439
1.433
1.416
1.41
1.238

1.824

0.2489

13.65

1.8065

0.2567

14.21

1.7895

0.2680

14.98

1.7745

0.2779

15.66

1.4345

0.1478

10.30

1.403

0.1598

11.39

1.3715

0.1690

12.32

1.339

0.1739

12.99

1.6385

0.1534

9.36

1.6125

0.1605

9.95

1.5835

0.1747

11.03

1.5585

0.1817

11.66

1.3385

0.0346

2.59

1.331

0.0382

2.87

1.3205

0.0375

2.84

1.3105

0.0361

2.75

1.4825

0.0007

0.05

1.459

0.0014

0.10

1.436

0.0042

0.30

1.413

0.0042

0.30

1.2225

0.0219

1.79

r-M
30'
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 9
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 10
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 11
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 12
60'
90'
MUESTRA 13

Inicial

M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M

1.207
1.217
1.185
1.197
1.161
1.177
1.137
1.27
1.215
1.248
1.187
1.228
1.16
1.207
1.132
1.253
1.271
1.233
1.25
1.213
1.229
1.193
1.206
1.243
1.333
1.22
1.315
1.198
1.297
1.176
1.276
1.302
1.307
1.283
1.288
1.265
1.27
1.248
1.25
1.393
1.371

1.201

0.0226

1.88

1.179

0.0255

2.16

1.157

0.0283

2.44

1.2425

0.0389

3.13

1.2175

0.0431

3.54

1.194

0.0481

4.03

1.1695

0.0530

4.53

1.262

0.0127

1.01

1.2415

0.0120

0.97

1.221

0.0113

0.93

1.1995

0.0092

0.77

1.288

0.0636

4.94

1.2675

0.0672

5.30

1.2475

0.0700

5.61

1.226

0.0707

5.77

1.3045

0.0035

0.27

1.2855

0.0035

0.28

1.2675

0.0035

0.28

1.249

0.0014

0.11

1.382

0.0156

1.13

30'
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 14
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 15
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 16
60'
90'
Inicial
30'
MUESTRA 17
60'
90'

M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M
M
r-M

1.355
1.327
1.283
1.246
1.177
1.126
1.135
1.44
1.113
1.42
1.064
1.388
0.996
1.335
1.515
1.462
1.48
1.443
1.414
1.417
1.322
1.372
1.701
1.457
1.678
1.421
1.637
1.357
1.569
1.262
1.406
1.547
1.373
1.51
1.31
1.457
1.216
1.365

1.341

0.0198

1.48

1.2645

0.0262

2.07

1.1515

0.0361

3.13

1.2875

0.2157

16.75

1.2665

0.2171

17.14

1.226

0.2291

18.69

1.1655

0.2397

20.57

1.4885

0.0375

2.52

1.4615

0.0262

1.79

1.4155

0.0021

0.15

1.347

0.0354

2.62

1.579

0.1725

10.93

1.5495

0.1817

11.73

1.497

0.1980

13.23

1.4155

0.2171

15.34

1.4765

0.0997

6.75

1.4415

0.0969

6.72

1.3835

0.1039

7.51

1.2905

0.1054

8.16

Se calcul la actividad enzimtica de la colinesterasa srica mediante la diferencia de absorbancia por

minuto multiplicado por el factor (65.8) indicado en la descripcin del kit comprado. Los resultados se
observan en la Tabla 2.

Tabla 2. Actividad enzimtica (UK/l) de los controles y las muestras.

DIFERENCIA
DIFERENCIA
DE
DE
ACTIVIDAD
MUESTRA
TIEMPO
ABSORBANCIA
ABSORBANCIA ENZIMTICA
(t - t)
POR MINUTO
0.0225
30''
0.045
CONTROL 1

CONTROL 2

CONTROL 3

CONTROL 4

CONTROL 5

CONTROL 6

MUESTRA 1

MUESTRA 2

MUESTRA 3

MUESTRA 4

MUESTRA 5

MUESTRA 6

0.055

60''

0.055

0.1025

90''

0.068

0.026

30''

0.052

0.066

60''

0.066

0.1315

90''

0.088

0.0175
0.0345
0.051
0.0165
0.033
0.049
0.018
0.036
0.0535
0.024
0.048
0.0705

30''

0.035

60''

0.035

90''

0.034

30''

0.033

60''

0.033

90''

0.033

30''

0.036

60''

0.036

90''

0.036

30''

0.048

60''

0.048

90''

0.047

0.0415

30''

0.083

0.0815

60''

0.082

0.1245

90''

0.083

0.0235

30''

0.047

0.0455

60''

0.046

0.0665

90''

0.044

0.0175

30''

0.035

0.0345

60''

0.035

0.0495

90''

0.033

0.0315

30''

0.063

0.063

60''

0.063

0.0955

90''

0.064

0.026

30''

0.052

0.055

60''

0.055

0.08

90''

0.053

0.0075

30''

0.015

0.013

60''

0.013

0.028

90''

0.019

3.69211111

4.51095556

2.2701

2.16408889

2.36148889

3.13646667

5.4285

3.00121111

2.24816667

4.16002222

3.51664444

1.02355556

MUESTRA 7

MUESTRA 8

MUESTRA 9

MUESTRA 10

MUESTRA 11

MUESTRA 12

MUESTRA 13

MUESTRA 14

MUESTRA 15

MUESTRA 16

MUESTRA 17

0.0235

30''

0.047

0.0465

60''

0.047

0.0695

90''

0.046

0.0215

30''

0.043

0.0435

60''

0.044

0.0655

90''

0.044

0.025

30''

0.050

0.0485

60''

0.049

0.073

90''

0.049

0.0205

30''

0.041

0.041

60''

0.041

0.0625

90''

0.042

0.0205

30''

0.041

0.0405

60''

0.041

0.062

90''

0.041

0.019

30''

0.038

0.037

60''

0.037

0.0555

90''

0.037

0.041

30''

0.082

0.1175

60''

0.118

0.2305

90''

0.154

0.021

30''

0.042

0.0615

60''

0.062

0.122

90''

0.081

0.027

30''

0.054

0.073

60''

0.073

0.1415

90''

0.094

0.0295

30''

0.059

0.082

60''

0.082

0.1635

90''

0.109

0.035

30''

0.070

0.093

60''

0.093

0.186

90''

0.124

3.06701111

2.85498889

3.22785556

2.71242222

2.69414444

2.45653333

7.74612222

4.05401111

4.85457778

5.48333333

6.29486667

ANLISIS ESTADSTICO
Se colect datos de edad, sexo, tiempo de exposicin y plaguicidas a los que estn expuestos a cada muestra
y se plasmaron en la Tabla 3.

Tabla 3. Datos estadsticos para cada muestra.

MUESTRA EDAD
C1
C2
C3
C4
C5
C6
Mta. 1

21
19

SEXO

21
38

Hombre
Mujer
Hombre
Mujer
Hombre

Mta. 2

85

Hombre

Mta. 3
Mta. 4

54
24

Hombre
Hombre

Mta. 5

49

Hombre

Mta. 6

23

Hombre

Mta. 7

43

Hombre

Mta. 8
Mta. 9
Mta. 10
Mta. 11
Mta. 12
Mta. 13
Mta. 14

50
56
45
37
37
58
58

Hombre
Hombre
Hombre
Hombre
Hombre
Hombre
Hombre

Mta. 15

33

Hombre

Mta. 16
Mta. 17

59
20

Hombre
Mujer

PLAGUICIDAS UTILIZADOS
ciclon, private, tifon
ciclon, private, tifon, olympix, bidrin,
vexter
cciclon,private, tifon
ciclon, private, tifon, lorban
ciclon, private, tifon, olympix, bidrin,
vexter, lorban, prethor
ciclon, private, tifon, olympix, bidrin,
vexter, lorban, prethor
ciclon, private, tifon, olympix, bidrin,
vexter, lorban, prethor
ciclon, private, tifon, vexter, prethor
ciclon, tifon, vexter, lorban
ciclon, private, tifon, olympix, lorban
ciclon, private, tifon, bidrin, vexter
ciclon, vexter, lorban
ciclon, bidrin, vexter, lorban
ciclon, tifon, bidrin, vexter, lorban
ciclon, private, tifon, olympix, bidrin,
vexter, lorban, prethor
ciclon, tifon, vexter, lorban
bolitos

TIEMPO DE
EXPOSICION
5 aos
64 aos
3 aos
6 aos
30 aos
7 aos
26 aos
10 aos
10 aos
8 aos
10 aos
10 aos
44 aos
30 aos
3 aos
46 aos
1 dia

Se ordenaron las actividades enzimticas de menor a mayor tanto de los controles como de las muestras y
se consideraron slo dos factores: edad y tiempo de exposicin, los cuales se plasmaron en la Tabla 4.

Tabla 4. Actividad enzimtica en orden creciente

MUESTRA

EDAD

Mta. 6
C4
Mta. 3
C5
C3
Mta. 12
Mta. 11
Mta. 10
Mta. 8
Mta. 2
Mta. 7
C6
Mta. 9
C1
Mta. 5
Mta. 14
Mta. 4
C2
Mta. 15
Mta. 1
Mta. 16
Mta. 17
Mta. 13

23 aos
19 aos
54 aos
21 aos

T. de EXPOSICION
(aos)
23
54

37 aos
37 aos
45 aos
50 aos
85 aos
43 aos
21 aos
56 aos

10
10
8
10
64
26

49 aos
58 aos
24 aos
21 aos
33 aos
38 aos
59 aos
20 aos
58 aos

30
30
6

10

33
5
59
20
58

ACTIVIDAD
1.0236
2.1641
2.2482
2.2701
2.3615
2.4565
2.6941
2.7124
2.8550
3.0012
3.0670
3.1365
3.2279
3.3192
3.5166
4.0540
4.1600
4.511
4.8546
5.4285
5.4833
6.2949
7.7461

Tomando en cuenta el factor exposicin se consideran dos tratamientos: personas expuestas a

compuestos organosfosforados (muestras) y no expuestas (controles).Con ello se realiz un Diseo
Completamente al Azar (DCA) para determinar si existe alguna diferencia significativa entre estos dos
tratamientos.

Ho: 1= 2 Ha: 1 2
Nivel de significacin: 5%
ANVA
FV

GL

SC

CM

FC

Tratamientos

3.2251

3.2251

1.3704

Error

21

49.4220

2.3534

Total

22

52.6571

FT
Ft (0.95,1,21)=4.32

SIGNIFICANCIA
NS

Tomando en cuenta el factor tiempo de exposicin nicamente en la muestras, se consideran 5

tratamientos (Tabla 5). Con ello se realiz un DCA para determinar si existe alguna diferencia significativa
entre estos tratamientos.

Tabla 5. Frecuencias absolutas de cada tratamiento.

Tratamiento
T1
T2
T3
T4
T5

Tiempo de exp.
(aos)
0-13
13-26
26-39
39-52
52-65

Numero de
muestras
10
1
2
2
1

No se tom en cuenta la muestra 17, debido a que el tiempo de exposicin de esta fue de solo 1 da.

Ho: 1= 2= 3= 4= 5 Ha: 1 2 3 4 5
Nivel de significacin del 5%
ANVA
F. de v.

GL

SC

CM

FC

Tratamientos

20.7166

5.1792

3.1426

Error
Total

11
15

18.1283
38.8450

1.6480

FT
Ft (0.95,4,11)=3.36

SIGNIFICANCIA
NS

DISCUSIONES Y CONCLUSIONES
La actividad enzimtica de la colinesterasa en estudio muestra valores bastante bajos respecto al rango de
valores esperados (Analyticon Biotechnologies AG). Todos muestran una actividad menor a 4 kU/L, excepto
el control 2 y las muestras 1, 4, 13, 14, 15, 16 y 17. Como los controles deberan mostrar valores dentro del
rango esperado, es probable que no se haya dado as debido a la temperatura de trabajo, la cual fue 22C
(T ambiente), mientras que Analyticon Biotechnologies AG trabaj con 37C, un factor que puede afectar a
la velocidad de reaccin de la colinesterasa (Pea, 2004). Adems, las absorbancias de las muestras 1, 2, 3,
4, 5, 11, 14, 16 y 17 y el control 1, muestran coeficientes de variabilidad mayores que 5%, haciendo que los
resultados no sean confiables.
Al realizar un diseo completamente al azar (DCA) considerando los tratamiento, exposicin y no exposicin,
se concluy a un nivel de significacin del 5% que no existen diferencias significativas entre dichos
tratamientos, es decir, la exposicin de los trabajadores a plaguicidas organofosforados no influyeron sobre
la actividad de la colinesterasa, ya que dichas actividades estuvieron dentro de los rangos establecidos.
Por otro lado, en el DCA de tiempo de exposicin (en el cual se elaboraron cinco intervalos de tiempo que
correspondan a cada tratamiento) a un nivel de significacin de 5% no presento diferencias significativas
como en el caso anterior, esto muestra que no hay una relacin directa ni inversa entre el tiempo en que
estuvieron expuestos los trabajadores y la actividad de la colinesterasa. Prueba de ello, se observa en la
tabla 4, el trabajador con 64 aos de exposicin a estos compuestos txicos presento una actividad dentro
de los valores establecidos.
En cuanto a la edad, no existe una relacin proporcional con la actividad enzimtica, los valores para
mujeres mayores de 40, hombres y nios deben estar entre 5.1 y 11.7 KU/l y para mujeres de 16 hasta 39
aos, entre 4 y 12.6 KU/l (Analyticon Biotechnologies AG), dichos valores no concuerdan con lo presenta en
la tabla 4.

Cabe resaltar que la mayora de los controles presentaron actividad disminuida de la enzima, estas
actividades deberan ser mayores debido a que estas personas no han sido expuestas a compuestos
organofosforado. Dichos controles fueron tomados de una poblacin distinta a lo de los trabajadores de
Jess del Valle y Aucallama, este hecho afecta en la comparacin de los datos porque como lo menciona
Analyticon Biotechnologies AG, se debe establecer un rango de valores normales especficos para cada
poblacin ya que las personas tiene diferentes estilos de vida, alimentacin, etc.
Se concluye as, que la actividad de la colinesterasa de los trabajadores de Jess del Valle y Aucallama no
han sido afectadas por la exposicin a plaguicidas con compuestos organofosforados.

BIBLIOGRAFA
o
o
o
o
o

Gennaro, A. 2003. Remington Farmacia, Volumen 2. Vigsima Edicin. Editorial Mdica

Panamericana. Buenos Aires, Argentina. 2506 p.
Meja, G.; Ramelli, M. 2006. Interpretacin clnica de laboratorio. Stima Edicin. Editorial Mdica
Panamericana. Bogot, Colombia . 702 p.
Bataller, R. 2004. Toxicologa clnica. Primera Edicin. Editorial Universidad de Valencia. Espaa.
226p.
Analyticon Biotechnologies AG. Fluitest CHE. Colinesterasa. Alemania.
Pea, A. 2004. Bioqumica. 2 edicin. Editorial Limusa.