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Medicina ADI
GUIA DIDCTICA
MICROBIOLOGA I
PROCESAMIENTO DE UROCULTIVOS
M.Sc. SANDRA ROMERO
Las infecciones del tracto urinario tienen un gran impacto en la sociedad debido a que
son una causa importante de ausentismo laboral y escolar con sus obvias
consecuencias econmicas. Adicionalmente, las infecciones del tracto urinario son la
principal causa de sepsis y choque sptico a nivel comunitario, la principal causa de
infecciones intrahospitalarias y la segunda causa en importancia de choque sptico a
nivel nosocomial.
La orina dentro del tracto urinario normal es estril y los microorganismos llegan a
colonizar solamente las porciones distales de la uretra. La orina, al pasar por las
porciones distales de la uretra durante la miccin, se puede contaminar con las
bacterias comensales. El nmero de bacterias presentes en la orina recin recolectada
de una persona saludable es relativamente bajo, usualmente 102 UFC/ml. Por
Razones fisiolgicas. Existen factores fisiolgicos por los cuales las infecciones del
tracto urinario son ms frecuentes en mujeres, incluyendo, por ejemplo, los cambios
hormonales que se presentan durante el embarazo, lo cual puede conducir a
alteraciones en la flora normal. Asimismo, durante el embarazo y despus del parto
puede ocurrir una disminucin del vaciamiento vesical debido a estiramiento de los
tejidos. Conforme mayor sea el nmero de hijos, mayor ser el riesgo a sufrir una
infeccin del tracto urinario. Por otra parte, la presencia de restos de sangre y de otras
secreciones, que durante la menstruacin permanecen en la regin periuretral, puede
promover la multiplicacin y la colonizacin bacteriana de la uretra distal y proximal.
Razones conductuales o sociales. Se incluyen los diferentes hbitos y
comportamientos de las mujeres:
Hbitos higinicos: se debe considerar la manera de limpiarse luego de orinar y de
defecar, lo cual puede conducir a la contaminacin con material fecal de las porciones
distales y proximales de la uretra, as como el uso de tampones o toallas sanitarias y
la frecuencia de su cambio.
Hbitos miccionales: el no orinar, sea por aguantar ganas, por rendimiento laboral
o por no tomar suficiente cantidad de lquidos, puede conducir a vejigas retencionistas
que presentan un mayor volumen total, con un menor volumen de vaciamiento y un
mayor volumen residual de orina, en la cual puede ocurrir multiplicacin de las
bacterias que all se encuentren.
Hbitos sexuales: la actividad sexual por s misma favorece el establecimiento de
infecciones en el tracto urinario por masajeo, compresin o traumatismo de la uretra,
as como otras prcticas asociadas a la actividad sexual, incluyendo el uso de
dispositivos intrauterinos, anticonceptivos orales, sustancias espermaticidas y duchas
vaginales.
Urocultivo
-Recuento del nmero de microorganismos presentes por mililitro de muestra
(UFC/ml). Identificacin del/de los microorganismo(s) aislados.
-Prueba de susceptibilidad a los antibiticos.
Pacientes Asintomticos: Bacteriuria (1O~ UFC/mI) por una misma especie
bacteriana detectada en dos urocultivos en un lapso de 7 a 15 das. No se da
tratamiento con antimicrobianos a los individuos, con excepcin de pacientes
inmunosupresos y mujeres embarazadas por el riesgo de partos prematuros y
mortinatos.
Pacientes Sintomticos:
Pacientes con una primoinfeccin, definida como la primera infeccin en la vida o
un perodo superior a seis meses entre las infecciones. Se da tratamiento de rutina.
Pacientes con una infeccin a repeticin, definida como dos o ms infecciones en
un perodo igual o inferior a seis meses entre las infecciones. Se puede presentar una
de dos condiciones:
Reinfecciones, las cuales ocurren por agentes bacterianos diferentes. A estos
pacientes se les da un tratamiento de rutina y un tratamiento de profilaxis por un
periodo mnimo de seis meses. La mayora de los pacientes ( 80%) no presenta
problemas de fondo y aproximadamente un 20% de los pacientes tiene alteraciones
funcionales o anatmicas y usualmente son mujeres mayores de 45 aos o pacientes
diabticos.
Recurrencias (recadas), las cuales ocurren por el mismo agente bacteriano. A
estos pacientes se les da un tratamiento de rutina y un tratamiento de profilaxis por un
perodo mnimo de seis meses. La mayora de los pacientes ( 80%) presenta algn
problema de fondo y requieren de estudios adicionales y las patologas ms
frecuentemente encontradas en estos pacientes incluyen la presencia de clculos y de
reflujo vesicoureteral. Aproximadamente un 20% de los pacientes no presentan
problemas de fondo.
Las muestras de orina deben ser siempre recolectadas en frascos estriles con tapa
de rosca, rotulados adecuadamente. Los recipientes conteniendo la muestra deben
estar acompaados de una solicitud de anlisis con la informacin completa cuando
llegan a la recepcin del laboratorio. Se recomienda recolectar una muestra por da
hasta un total de tres muestras en tres das consecutivos en pacientes asintomticos.
Pruebas de Tamizaje
Se han diseado diversos mtodos rpidos de tamizaje, automatizados y no
automatizados, para determinar si la muestra de orina contiene bacterias y/o
leucocitos en cantidades significativas. Las pruebas de tamizaje pueden ser
necesarias en laboratorios clnicos en los cuales el nmero de muestras enviadas para
urocultivo es muy alto y se requiere algn elemento para discriminar las muestras que
pueden dar un cultivo positivo de las que no. Algunas de estas pruebas disponibles se
presentan a continuacin:
Tiras Reactivas
Mtodos Microscpicos
Se han descrito varios mtodos microscpicos que pueden ser tiles en el diagnstico
de las infecciones del tracto urinario, particularmente cuando existe la presencia de
bacteriuria superior a 105 UFC/ml.
Deteccin de Bacteriuria:
a. Tincin de Gram:
1. Colocar 10 l de la muestra de orina, bien mezclada pero sin centrifugar, sobre un
portaobjetos.
2. Permitir secar al aire sin esparcir sobre la superficie del portaobjetos.
3. Fijar la lmina al calor.
4. Teir por Gram.
5. Determinar y reportar el nmero de microorganismos por campo de inmersin.
6. La presencia de uno o ms microorganismos por campo de inmersin correlaciona
con un recuento de colonias de 105 UFC/ml.
7. La presencia de abundantes clulas escamosas y diferentes morfotipos microbianos
son indicativos de que la muestra ha sido probablemente contaminada durante la
recoleccin. En este caso, se debe solicitar una segunda muestra.
Tincin de Gram
Sedimento Urinario
4. Si se observan colonias muy pequeas o diminutas, incubar las placas por 18-24
horas adicionales.
5. Si no se observa crecimiento y este resultado no correlaciona con lo observado en
la tincin de Gram de la muestra o con la condicin clnica del paciente, incubar las
placas por 18-24 horas adicionales.
6. Sin tampoco se observa crecimiento luego de una incubacin de 48 horas y este
resultado no correlaciona con lo observado en la tincin de Gram de la muestra o con
la condicin clnica del paciente, solicitar una muestra de orina recolectada por
puncin suprapbica para hacer un cultivo para bacterias anaerobias.
7. Si se observa crecimiento, examine los cultivos por nmero de colonias (UFC/ml) y
por los diferentes morfotipos coloniales.
Cronograma de actividades
Da 1 - Entrega de muestras de orina para urocultivo:
Realizar tincin de Gram.
Realizar dilucin 1:1000 de la muestra de orina como se describe anteriormente.
Sembrar en agar sangre y MacConkey.
Incubar a 35 C por 24 horas.
Da 2 - Observar morfologa colonial:
Realizar la tincin de Gram de colonias.
Subcultivar en ATS y agar sangre.
Realizar caracterizacin bioqumica segn corresponda al grupo bacteriano.
Da 3 -Continuar pruebas bioqumicas:
Leer los resultados.
Mantener en ATS para realizar PSA.
Resumen de la prctica
El profesor junto con los alumnos correlacionar el caso clnico con el diagnstico de
laboratorio y elaborarn un esquema grfico.
Evaluacin de la actividad practica: 15% ponderacin del total de la unidad
Referencias Bibliogrficas
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Jimnez Cruz JF. Infeccin urinaria. Monografas clnicas en Enfermedades
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Rodrguez-Juanic L., Schwedt E., Lombardi R., et al. Pautas teraputicas de las
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