Preparacin del material de vidrio

Se deben sacar 2 tubos 9 mL previamente esterilizados y llenar con solucin

salina 0.85%, tapar cada tubo con un tapn de algodn ayudado de unas pinzas
(pueden ser de diseccin de punta roma) se deben tomar los tubos y llevar a una
gradilla y cubrirlos con papel Kraft para evitar agentes contaminantes externos.
Llevar a autoclave y esterilizar a 121 C por 15 minutos.
Preparacin de medios de cultivo.
Debemos dirigirnos a la balanza y pesar tantos gramos para preparar 250 mL de
medio el Agar Nutritivo y el Agar Nutritivo sacarosa. Se debe preparar con agua
destilada y luego debe ser llevado a calentar hasta ebullicin para disolver. Medir
y ajustar. Se debe llevar a Esterilizar por 15 min a 121 grados en autoclave para
eliminar posibles microorganismos que estn durante el proceso de preparacin
del agar. Distribuir equitativamente el agar en cada caja petri, y dejar pasar un
tiempo hasta solidificacin llevar a esterilizar a 37 grados.
Procedimiento
Tomar 1 caja petri con cada uno de los agares y destapar en el lugar que se
quiera. Se debe dejar 1 caja por cada uno de los dos agares que tenemos. Djelo
por espacio de 1 hora abierto para que los microorganismos que estn presentes
en el ambiente empiecen a alimentarse de nuestro agar y formen sus debidas
colonias, una vez transcurrido el tiempo se debe tapar y rotular debidamente.
Llevar a Incubar a temperatura ambiente de 3 a 4 das. Una vez transcurrido el
tiempo efecte el registro de sus observaciones de las colonias formadas.
Se debe humedecer un copito con agua estril y frotar en la piel para tomar una
pequea muestra de microorganismos que habitan all,estrelo en la caja petri con
agar nutritivo. Se debe tapar y rotular debidamente. Incbelo a 37 C por 72 hrs.
Una vez transcurrido el tiempo efecte el registro de sus observaciones de las
colonias formadas.
Tomar un copito y humedecer con agua estril, frotar dentro de su boca, estrelo
en la caja petri con agar nutritivo con 5% sacarosa.tapar y rotular. Llevar a
incubar por 72 hrs a 37 grados. Una vez transcurrido el tiempo efecte el registro
de sus observaciones de las colonias formadas.
Colocar una gota de agua estril en un portaobjetos. Flamear el asa de siembra
hasta que adopte un color rojo eso para esterilizar el asa de posibles contaminates
o interferentes en nuestra prueba.

Tomar una muestra del lquido del yogurt intentando no tocar con el asa la parte
slida de la materia del yogurt ya que este contiene demasiada grasa y puede
dificultar la observacin. Realizar un frotis de la muestra en la gota de agua,
procurar extender para una mejor calidad de la prueba. Fjela con a la llama hasta
que el agua se evapore. Llevar el portaobjetos a puente de coloracin y cubrir con
azul de metileno, deje actuar por un minuto para que se tia bien la estructura y
se fije. Transcurrido el tiempo lavar cuidadosamente la preparacin con agua
para eliminar el exceso de colorante. Deje un par de gotas y cubra con el
portaobjetos intentando no dejarburbujas de aire (Splash). Observar en el
microscopio en el mayor aumento posible y registre sus observaciones.