Biodegradacin de residuos orgnicos de

plazas de mercado
Biodegradation of organic solid wastes from
market places
Carlos Ariel Cardona Alzate*, scar Julin Snchez Toro**, Julin
Andrs Ramrez Arango***, Luis Eduardo Alzate
Ramrez***
RESUMEN

En el presente trabajo se caracterizaron, clasificaron y acondicionaron los

residuos orgnicos de la plaza de mercado de Manizales (Caldas),
analizndose los posibles tratamientos para su conversin en productos de
valor agregado. Se eligi transformar el almidn y la celulosa presentes
en los residuos. Se establecieron las mejores condiciones de temperatura,
pH y dosificacin de enzima para transformar los polisacridos en
azcares reductores. Para la transformacin del almidn y la celulosa se
utilizaron glucoamilasa y celulasas comerciales. La conversin de
almidn alcanz valores del 60% a 50 C, y un pH de 6,0. La conversin
de celulosa fue de un 4% a 60 C y un pH de 4,0. Se llev a cabo el
estudio cintico de la hidrlisis de almidn con base en el modelo de
Michaelis-Menten. A partir de la nueva materia prima (azcares
reductores) se obtuvo etanol. Igualmente se evalu la produccin de
biogs y compost a partir de los residuos slidos estudiados. En la
produccin de biogs se determin que por cada kilogramo de residuos
tratados se producen, en el rango de temperatura mesoflica,
aproximadamente 4 L de biogs. A pesar de los valores relativamente
bajos de la relacin C/N para los residuos vegetales, se evidenci la
posibilidad de llevar a cabo un proceso de compostaje para este tipo de
desechos.
Palabras clave: hidrlisis enzimtica, etanol, biogs, compostaje,
almidn.
ABSTRACT

In this research, the organic wastes from local market place were
characterized, classified and conditioned. Feasible conversion treatments
into added value products were analyzed. The transformation of starch
and cellulose contained in wastes was chosen. The best conditions of

temperature, pH and enzyme doses were established in order to transform

the polysaccharides into reducing sugars. Commercial glucoamylase and
cellulases for converting starch and cellulose were used. Starch
conversion reached 60% at 50 C and pH of 6.0. Cellulose conversion
was of 4% at 60 C and pH of 4,0. The kinetic research of starch
hydrolysis based on Michaelis-Menten model was carried out. Ethanol
was obtained from new-formed raw material (reducing sugars). In the
same way, biogas and compost production was evaluated. It was
determined that from each kilogram of treated wastes can be produced
approximately 4 L of biogas at mesophilic range of temperature. It was
recognized the possibility to carry out a composting process of plant
wastes, despite their relatively low values of C/N ratio.
Key words: Enzyme hydrolysis, ethanol, biogas, composting, starch.
* Ingeniero qumico, M. Se, Ph. D., profesor asistente Departamento de Ingeniera
Qumica, Universidad Nacional
de Colombia, Sede Manizales, Calle 27 No. 64-60, Manizales, Colombia. Correo
electrnico:
cca rdona@nevado. manizales. unal.edu.co.
Ingeniero qumico, M. Se, profesor asistente, Departamento de Ingeniera, Universidad
de Caldas. Calle 65 No.
26-10, Manizales, Colombia. Profesor catedrtico, Departamento de Ingeniera
Qumica, Universidad Nacional de
Colombia, sede Manizales. Correo electrnico: osanchez@ucaldas.edu.co. ***
Ingeniero qumico.
Recibido: abril 16 de 2004. Aceptado: octubre 25 de 2004.

78
BIODEGRADACIN DE RESIDUOS ORGNICOS DE PLAZAS DE MERCADO

INTRODUCCIN
su alto estado de madurez; igualmente estos residuos estn
En el mundo se producen aproximadamente 1600 millones de toneladas constituidos por diferentes estructuras vegetales de desecho
por ao de residuos slidos (Skinner, 2000), los cuales generan graves (cscaras, tallos, semillas, etc.). Los polisacridos contenidos
problemas, no slo por el deterioro progresivo del medio ambiente, sinoen este tipo de materiales pueden ser aprovechados por medio
tambin desde el punto de vista econmico puesto que los costos dede la transformacin enzimtica de los complejos amilceos
recoleccin, transporte y disposicin final son cada vez mayores. Se (Guzmn y Paredes, 1995) y celulsicos (Ho-ward et al., 2003)
estima que los servicios de disposicin, tratamiento y aprovechamiento deen azcares que posteriormente son fermentados hasta
los residuos slidos mueven mundialmente un mercado anual de 100000 alcohol u otros productos de valor agregado.
millones de dlares, de los cuales 43000 millones corresponden a
La mayora de investigaciones sobre residuos orgnicos
Norteamrica, 42000 millones a la Unin Europea y slo 6000 millones a realizadas tanto en los pases desarrollados como en
Suramrica, siendo la produccin de residuos de 250,200 y 150 millones Colombia, han concentrado sus esfuerzos en la transformacin
de estos residuos a biogs y compost (Castillo et al., 2003;
de toneladas por ao respectivamente (Skinner, 2000).
En el caso de Colombia, las cifras del Ministerio de Ambiente, Faras etal., 1999; Hamzawi et al., 1999; Salas y Giraldo, 1996;

Vivienda y Desarrollo Territorial indican que en un da el pas produceTcho-banoglus et al., 1994; Cecchi y Traverso, 1988).
27300 toneladas de basura de las cuales el 65% son residuos orgnicos yIgualmente, se han llevado a cabo estudios para el diseo de
el 35% inorgnicos. Los componentes que constituyen la fraccin procesos de conversin de residuos slidos municipales a
orgnica de las basuras colombianas son residuos de alimentos, papel,alcohol, algunos de los cuales han sido patentados para su
cartn, madera y residuos de jardn (Stoecklein y Surez, 1998). Slo el implementacin a nivel comercial (Titmas, 1999). En particular,
40% de los residuos slidos municipales tiene un manejo adecuado, else ha reportado que la compaa Masada Resource Group pla50% es manejado de forma indebida y el 10% es recuperado gracias al nea iniciar en 2004 la operacin de la primera planta
reciclaje. En Manizales, ciudad intermedia de Colombia, y cuya reaproductora de etanol en Estados Unidos a partir de residuos
metropolitana cuenta con una poblacin estimada de 426000 habitantesslidos municipales mediante la hidrlisis cida de la celulosa
(DANE, 2004), la produccin de residuos slidos en el ao 2002 fue de contenida en los mismos (Ames y Werner, 2003). Sin embargo,
92000 toneladas equivalentes a 252 toneladas diarias, segn estadsticas la mayora de estos procesos se limita al tratamiento de la
generadas por la empresa local encargada de la recoleccin de basurascelulosa mediante hidrlisis cida y no explora la utilizacin de
(Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial, 2004).
enzimas ni la potencialidad de hidrolizar el almidn presente en
La mayor parte del comercio mayorista de productos agrcolas delos residuos slidos de origen vegetal.
consumo humano, y gran parte del minorista, se lleva a cabo en las
El presente trabajo tuvo por objeto estudiar en forma
centrales de abasto de las ciudades colombianas. En el caso de preliminar diferentes estrategias para el aprovechamiento
Manizales, la comercializacin se realiza en la central de abastos (galera)integral de los desechos orgnicos de origen vegetal
que en conjunto con los expendios ambulantes circundantes conforman el producidos en una plaza de mercado mediante procesos
sector de la plaza de mercado local. Los residuos slidos que sebiolgicos de degradacin: tratamiento enzimtico, conversin
producen diariamente en este sector son sobre todo de origen vegetal yen productos de valor agregado por fermentacin, digestin
estn constituidos por frutas y verduras que no alcanzan la calidad anaerbica y compostaje.
MATERIALES Y MTODOS
necesaria para su comercializacin debido, por ejemplo, a
Pretratamiento de residuos orgnicos. Se tom un total de
nueve muestras aleatorias de residuos orgnicos de las
unidades de almacenamiento del sector de la plaza de
mercado de Manizales durante nueve das diferentes. Los
materiales que componan las muestras fueron separados,
clasificados cualitativamente y pesados. Se determinaron los
79
REVISTA COLOMBIANA DE BIOTECNOLOGA VOL.VI No. 2 Diciembre 2004 78-89

porcentajes en peso de los diferentes materiales presentes en las regla de oro (dgar et al., 2001) en el rango10-100 |j.L/kg siendo el
muestras. Posteriormente los materiales fueron mezclados yvalor recomendado en la ficha tcnica de la enzima 70 |uL/kg de
sometidos a un pretrata-miento que consisti en su molienda ymateria prima, midindose la concentracin de azcares reductores
licuado, procedimiento que fue realizado en tres oportunidades al final de la reaccin. El criterio empleado en estos estudios para la
hasta la obtencin de un lodo fluido de 1,220,2 g/mL. Se llev a seleccin de las condiciones ptimas de la hidrlisis enzimtica se
cabo la caracterizacin fsico-qumica del lodo realizandoasoci a la maxi-mizacin de la conversin de almidn presente y de
determinaciones de humedad, almidn, azcares reductores yla formacin de azcares reductores.
celulosa.
La hidrlisis de celulosa se llev a cabo empleando un complejo

Hidrlisis enzimtica. La hidrlisis enzimtica del almidn y laenzimtico comercial con actividad celulsica (Celulasa TR-5000),
celulosa presentes en los residuos orgnicos se realiz en unevalundose dos niveles de temperatura (55 y 60 C) y tres de pH
reactor enchaquetado de hierro de 1 L con un revestimiento (4,0; 5,0 y 6,0) con dos repeticiones por tratamiento. Debido a que la
hidroltico y posterior niquelado superficial acoplado a un termosta-lignina presente en el material vegetal recubre la celulosa y no
to tipo MLW de 0-100 C. Al reactor se le adapt un agitadorpermite que acten las celulasas (Whitaker, 1994), se realiz un
mecnico MLW tipo MR 25 con un rango de 30-2500 rpm.
pretrata-miento adicional a la mezcla inicial agregando hidr-xido de
La hidrlisis del almidn se llev a cabo utilizando unasodio al 1 % en peso a una temperatura de 80 C durante 1,5 h con
glucoamilasa comercial (Naturalzyme GA-300). Se evaluaron tresuna relacin de materia prima a lcali de 1:5 (Osorio y Lasso, 1996;
diferentes niveles de temperatura (50, 55 y 60 C) y de pH (6,0; 6,5 Ros, 1996). Esta mezcla no se esteriliz. Luego del pretratamiento el
y 7,0) con tres repeticiones para cada tratamiento. En cada pH fue ajustado con cido actico inmediatamente antes de la
tratamiento se tomaron 600 g de residuos orgnicos pretratados de adicin de la enzima; a partir de este momento el pH no se control.
acuerdo con el procedimiento descrito anteriormente, y seSe determin la concentracin de azcares reductores al inicio y al
determin su contenido de humedad y de almidn. Se establecifinal del proceso de hidrlisis. La determinacin de la dosificacin
una relacin constante de almidn a agua de 1:8, adicionndose ptima de la enzima se llev a cabo con el mismo procedimiento
agua en caso de necesidad, y se ajust el pH con bicarbonato de aplicado a la hidrlisis del almidn. El rango de variacin de la dosis
sodio. El almidn de la mezcla se gelatiniz a temperaturasfue de 100-1000 ppm. Para el anlisis estadstico se emple
mayores de 70 C durante no menos de 15 min, regulando la igualmente el software Statgraphics Plus 2.0.
agitacin para permitir una adecuada homogeneizacin. EstaEstudio cintico de la hidrlisis de almidn. La cintica de la
mezcla no se esteriliz. Luego de este proceso se enfri la mezcla reaccin de hidrlisis enzimtica del almidn se realiz llevando a
hasta la temperatura definida y se adicion la glucoamilasa. cabo diferentes experimentos por lotes variando la concentracin
Cuando fue necesario, se ajust de nuevo el pH a los valores inicial del sustrato. Para ello se emplearon cinco soluciones
predefinidos para cada tratamiento inmediatamente antes de lapreparadas a partir de la mezcla inicial de residuos orgnicos
adicin de la enzima; a partir de este momento el pH no se pretratados considerando el contenido inicial de humedad de la
control. La reaccin de hidrlisis se llev a cabo durante 90 minmisma; las soluciones correspondieron a las siguientes proporciones
con agitacin. Se midi la concentracin de azcares reductores al de almidn y agua (en peso): 1:8, 1:9, 1:10, 1:11, 1:12. Se utilizaron
final de la reaccin as como la de almidn, evalundose sulas mejores condiciones determinadas de temperatura, pH y
conversin, definida como la cantidad de almidn transformada condosificacin de enzima. Durante el transcurso de la hidrlisis se
respecto al contenido inicial de almidn (en porcentaje). El anlisis tomaron muestras cada 3 minutos al inicio de la reaccin, y cada 15
estadstico se realiz mediante el software Statgraphics Plus 2.0 minutos al final hasta completar un tiempo de 2 h. Se simul la
usando herramientas de estadstica descriptiva y de inferenciacintica de la hidrlisis de almidn empleando el modelo de
estadstica (Montgomery, 1991).
Michaelis-Menten descrito ampliamente en la literatura (Bailey y Ollis,
Para la determinacin de la dosificacin ptima de la enzima1984)
se emple el diseo experimental de la
80
BIODEGRADACIN DE RESIDUOS ORGNICOS DE PLAZAS DE MERCADO

con ayuda de los paquetes MS Excel y Simulink v. 1.3c de Matlab v. 4.2c. 85 das, mientras que para las condiciones mesofli-cas se
Fermentacin alcohlica. El producto de las reacciones de hidrlisis fuetomaron datos durante 25 das.
sometido a fermentacin alcohlica en reactores de porcelana de 1 L de
El proceso de compostaje de los residuos orgnicos

capacidad. Se garantizaron las condiciones de fermentacin utilizadas sometidos a molienda y licuado se realiz en un recipiente de
industrialmente (32 C y pH entre 3,5 y 4,0). Se prepararon siete medios porcelana sellado con un agitador manual para el mezclado
con diferentes concentraciones iniciales de sustrato que correspondieron peridico de los residuos. Se utilizaron 2 kg de materia prima.
a 4, 6, 8, 10, 12, 14 y 23 Brix. Para preparar los medios de cultivo conEl inculo utilizado consisti en una suspensin de estircol
altos valores de Brix, se procedi a evaporar el agua contenida en los bovino, excretas de cerdo y suelo adicionado a razn de un 2%
hidrolizados. Se utiliz levadura comercial (levadura activada Fleis-en peso a la masa de residuos. Las condiciones fueron
chman, 1 g/L) y se adicionaron al medio urea (0,48 g/L) y sulfato de aerbicas y la agitacin se llev a cabo cada dos horas. Se
amonio (0,24 g/L). La fermentacin se llev a cabo durante 8 das. Se hizo el seguimiento tanto a la temperatura como al pH durante
determin la concentracin de azcares reductores al principio y al final70 h. Para la produccin de compostse evalu la relacin
del cultivo. El contenido de etanol se estableci al trmino del proceso.
inicial y final de carbono a nitrgeno (C/N), as como el
Produccin de biogs y compost. La digestin anaerbica para lacontenido de nitrgeno orgnico a los 10 das de haberse
obtencin de biogs (metanog-nesis) a partir de los residuos orgnicosiniciado el proceso.
sometidos a molienda y licuado se realiz en botellones de vidrio inerte, Tcnicas analticas. La determinacin de la humedad se
utilizando un volumen de trabajo de 8 L correspondientes a 9,8 kg derealiz por el mtodo de prdida de peso (AOAC, 1990a). El
residuos pretratados, los cuales fueron llevados a valores neutros de pH contenido de almidn se determin por el mtodo de Von
adicionando bicarbonato de sodio, y mantenidos en este rango durante Asboth, el de azcares reductores por el mtodo de Lanetodo el proceso. Se utiliz un inculo preparado a partir de digestiones Eynon y el de etanol por destilacin simple (Pearson y Cox,
anaerbi-cas anteriores realizadas en el Laboratorio de Aguas de la1976). La cuantificacin de la concentracin de celulosa se deUniversidad Nacional de Colombia, sede Mani-zales. El porcentaje desarroll por el mtodo de Updegraff (1969). El contenido de
inculo empleado fue del 15% (v/v). El volumen de biogs producido fue nitrgeno orgnico se determin por el mtodo de Kjeldahl
medido por el desplazamiento de agua en una botella invertidamodificado (AOAC, 1990b) y el carbono orgnico por el
garantizando la hermeticidad del sistema y realizando una purificacin del mtodo de prdidas durante la volatilizacin de la muestra a
biogs resultante mediante la remocin de CO2 por absorcin en una so-430 C (Navarro et al., 1993).
lucin de hidrxido de calcio. En todos los casos, la medicin del volumen RESULTADOS Y DISCUSIN
de biogs recolectado se hizo a presin atmosfrica y a temperatura La clasificacin cualitativa de los residuos orgnicos
ambiental, registrndose la misma con el fin de expresar los resultados aprocedentes de la plaza de mercado local arroj que la mayor
presin y temperatura normales. Para la me-tanognesis se fij un rangoparte de los mismos corresponde a tubrculos y frutas enteras
de temperatura crioflica correspondiente a la temperatura ambiente de la de mala calidad o con diferente grado de descomposicin
ciudad de Manizales (18 C en promedio) y otro de temperatura(papas, naranjas, mandarinas, papaya) con porcentajes que en
mesoflica (37 C) en condiciones anaerbi-cas. La metanognesispromedio fueron mayores al 20%. Los residuos son as mismo
mesoflica se desarroll en un digestor con serpentn integrado a un ricos en cscaras de papa, yuca, pltano, frutas (naranja,
termostato. Para el proceso crioflico se tomaron datos durante
banano, papaya) y hortalizas (cebolla, repollo) con porcentajes
superiores al 15%; cabe destacar el elevado contenido de
cscaras de papa que en algunas muestras alcanz
porcentajes mayores al 40%. Finalmente, se encontraron en
menor proporcin frutas y verduras no aptas para su consumo
como tomate, pia (pulpa y cscara), mango, pa-payuela,
pepino, as como diferentes desechos como bagazo de pltano

y de choclo, pasto y ramas.

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REVISTA COLOMBIANA DE BIOTECNOLOGA VOL.VI No. 2 Diciembre 2004 78-89
De la clasificacin realizada se puede inferir que estos residuosobserva que se alcanza la mayor conversin cuando lahidrlisis se lleva a
tienen un mayor contenido de almidn que de celulosa, lo que se cabo a 50 C y a un pH de 6,0. Asmismo, los datos obtenidos indican la
comprob al realizar su caracterizacin fsico-qumica.
prdida progresiva de la actividad enzimtica con el aumento de la temEn la tabla 1 se relacionan los resultados de las pruebas de peratura y del pH. Como estrategia para aumentar laconversin de almidn
caracterizacin realizadas a los residuos orgnicos. Se observa se plantea evaluar el empleo deenzimas que aceleren la licuefaccin de
que el almidn y la celulosa se constituyen en los mayores este biopol-mero (como la a-amilasa), aumentando de esta manera la
componentes de los desechos, lo que justifica su posteriorefectividad del proceso de sacarificacin conglucoamilasa.
aprovechamiento como fuente de azcares fermentables.
Para realizar el anlisis de la interaccin de los factores se
Hidrlisis enzimtica. En la tabla 2 se relacionan los resultados utiliz el programa Statgraphics Plus 2.0. Los resultados que arroja el
logrados para la hidrlisis enzimtica del almidn presente en elanlisis correspondiente se aprecian en la tabla 3 para un nivel de
homogeneizado obtenido luego de la molienda y el licuado de lossignificancia del 5%.
residuos slidos. Se
Tabla 1. Caracterizacin de la materia prima
De los datos de la tabla 3 se observa relevancia en
Componente o
Promedio aritmtico
Error estndar
el efecto tanto de la temperatura como del pH, as como
propiedad
de la interaccin de estas dos variables. Se verifica as
Humedad
81%
0,4083
la importancia de mantener estos parmetros en un
Almidn
10,327 g /100 g de residuos
0,4137
nivel constante durante el proceso de hidrlisis.
Azcares reductores
1,243 g/100 mL
0,0933
Celulosa*
pH
Densidad

3,16 g/100 g de residuos

4,3
1,22 g/mL

0,12355
0,0528
0,213

Porcentaje en base seca.

Tabla 2. Hidrlisis enzimtica del almidn presente en los residuos orgnicos
Media de la Concentracin de AR,
Desviacin
T,C pH
g/100 mL
estndar
50
6,0
6,762
0,2508
50
6,5
3,908
0,3694
50
7,0
2,015
0,1928
55
6,0
3,914
0,2105
55
6,5
1,688
0,3012
55
7,0
1,121
0,3160
60
6,0
2,120
0,4602
60
6,5
1,082
0,0917
60
7,0
0,306
0,1145

Los resultados obtenidos en la determinacin de la

mejor dosificacin de la glucoamilasa contenida en el
preparado enzimtico Naturalzyme GA-300 para la
hidrlisis del almidn se muestran en la tabla 4. La
dosificacin ptima del agregado enzimtico es de
88 JLLL por
Varianza de la
muestra
0,0629
0,1364
0,0372
0,0442
0,0907
0,0998
0,2118
0,0084
0,0131

Conversin(%)
58,8
33,98
17,52
34,04
14,68
9,84
18,43
9,41
2,66

AR: Azcares Reductores.

82
BIODEGRADACIN DE RESIDUOS ORGNICOS DE PLAZAS DE MERCADO

abla 3. Interaccin de los factores para la hidrlisis de almidn

Factores
Suma de
Relacin F
Valor p
independientes e
cuadrados
interactuantes
A
38,1086
380,19
0,000
B
39,5966
395,03
0,000
A*A
1,30298
13,00
0,002
A*B
6,07271
6,58
0,000
B*B
1,42905
14,56
0,0014
Bloques
0,193437
0,96
0,3990
R2= 0,98; error estndar: 0,3166 A: Temperatura; B: pH
bla 4. Dosificacin ptima de enzima para la hidrlisis del almidn
Dosificacin de enzima,
Azcares reductores, g
uL/kg
AR/100 mL de hidrolizado
40
1,80
64
2,31
79
2,86
87
3,07
88
3,17
93
3,19
103
3,23
3,24
167

kg de residuos slidos, debido a que dosis mayores no

representan un aumento considerable en el porcentaje de
azcares reductores obtenido. Como puede observarse, la
dosis ptima determinada es un 26% mayor a la recomendada
por la ficha tcnica de la enzima. El costo del biocatalizador se
estim en $5/kg de residuos tratados.
En la tabla 5 se relacionan los resultados obtenidos
para la hidrlisis enzimtica de la celulosa presente en el
homogeneizado obtenido luego de la molienda y el licuado
de los residuos slidos. La mayor conversin en la hidrlisis
de celulosa se obtiene a una temperatura de 60 C y un pH
de 4,0. Se puede observar la baja formacin de azcares
reductores a pesar de los diferentes tratamientos
efectuados, aunque aumenta su concentracin a medida
que se incrementa la temperatura y se disminuye el pH en
los intervalos estudiados. Una de las posibles causas de la
baja conversin del sustrato puede residir en el pretratamiento de la biomasa lignocelulsica presente en los
residuos orgnicos, por lo que se recomienda profundizar en
el mejoramiento del proceso qumico y explorar el
tratamiento
con
vapor
vivo
con
una
posterior
despresurizacin, evaluando los costos inherentes a este
proceso.
Para realizar el anlisis de la interaccin de los factores
de nuevo se utiliz el programa Stat-graphics Plus 2.0. Los
resultados que arroja el anlisis correspondiente se aprecian
en la tabla 6 para un nivel de significancia del 5%. Se
observa que el pH es el factor estadsticamente ms significativo. La interaccin entre los dos factores

Tabla 5. Hidrlisis enzimtica de la celulosa presente en los residuos orgnicos

PH
Media de la concentracin deAR,
Desviacin Varianza de la
T, C
g/100mL
estndar
muestra
55
4,0
0,624
0,013
0,00062
55
5,0
0,563
0,003
0,000002
55
6,0
0,324
0,016
0,000200
60
4,0
0,770
0,008
0,000060

Conversin(%)
3,90
3,52
2,02
4,81

60
5,0
60
6,0
AR: Azcares reductores.

0,550
0,272

0,006
0,009

0,000050
0,000080

3,43
1,70

83
REVISTA COLOMBIANA DE BIOTECNOLOGA VOL.VI No. 2 Diciembre 2004 78-89
Tabla 6. Anlisis estadstico para la hidrlisis de celulosa
Factores
Suma de
Relacin F Valor p
independientes e cuadrados
interactuantes
A
0,0021
0,06
0,8102
B
0,3188
93,77
0,0000
A*A
0,053
0,7762
0,4575
A*B
1,2083
2,9529
0,0161
B*B
0,196
9,4891
0,0000
Bloques
0,0021
0,06
0,8102
R2: 0,9096; error estndar: 0,0595028 A: Temperatura; B: pH

Estudio cintico de la hidrlisis del almidn.

El estudio cintico de la hidrlisis enzimtica del almidn presente en
el homogeneizado de residuos orgnicos permiti el modelamiento
matemtico de este proceso. Para ello se obtuvieron las curvas
cinticas experimentales de formacin de azcares reductores en
funcin del tiempo para diferentes valores de concentracin inicial de
almidn en los residuos orgnicos (figura 1).
Con los datos obtenidos para cada una de las concentraciones
iniciales de almidn obtenidas de acuerdo con las diferentes
diluciones del homogeneizado de residuos orgnicos, se constambin representa un aspecto influyente en la transformacin.
truyeron cuatro curvas cinticas adicionales como las de la figura 1.
En la tabla 7 se relacionan los resultados que permitieron
Cada una de las curvas se ajust a una ecuacin polinomial de
determinar la mejor dosificacin de Celu-lasa TR-5000, la cual
regresin. Al derivar cada una de las ecuaciones obtenidas y
correspondi a 367 ppm. Este valor est por fuera del intervalo
evaluarlas en el tiempo inicial, se obtuvo el valor de la velocidad
recomendado en la ficha tcnica del complejo enzimtico (30-150 inicial de la reaccin enzimtica de acuerdo con la definicin dada por
ppm). El costo del biocatalizador se estim en $2/kg de residuos
la ecuacin (1):
v
tratados.
dPd t
(1)
t=0= 0
Las bajas concentraciones de azcares obtenidas no permitieron eldonde P es la concentracin del producto (azcares reductores), t es el
estudio cintico del proceso de degradacin enzimtica de latiempo y v0 es la velocidad inicial de la reaccin enzimtica. Los valores
celulosa, tanto ms difcil si se tiene en cuenta que el preparadoobtenidos de las
enzimtico utilizado corresponde a un complejo conformado por
varias endo y exoen-zimas, las cuales hidrolizan el sustrato de diferente manera y con diferentes velocidades de reaccin.

Tabla 7. Dosificacin ptima de enzima para la hidrlisis de celulosa

Dosificacin de
enzima, ppm
100
344
367
405
556
1000

Azcares
reductores,g AR/ 1 0 0 mLd e hidrol
izado
0,20
0,79
1,03
1,05
1,06
1,07

Figura 1. Formacin de azcares reductores durante el transcurso de la hidrlisis

enzimtica del almidn presente en una mezcla de residuos orgnicos con una
concentracin inicial de sustrato de 13,26 g de almidn/100 mL (proporcin de almidnagua de 1:8).

84
BIODEGRADACIN DE RESIDUOS ORGNICOS DE PLAZAS DE MERCADO

velocidades iniciales de la reaccin se graficaron contra las 01073,S000865,+ S0

(2)
concentraciones iniciales de almidn (verfigura 2). Se asumi una donde S0 corresponde a la concentracin inicial de sustrato
velocidad inicial de cero para una concentracin nula de sustrato.
(almidn) en g/mL y v0 es la velocidad inicial de la reaccin
Con el fin de modelar la cintica de la hidrlisis enzimtica delenzimtica en g/(100 mL*min). En la figura 2 se muestra la
almidn de acuerdo con la ecuacin de Michaelis-Menten, securva calculada por el modelo y se confronta con los datos
determinaron los parmetros cinticos de esta ecuacin (Vmxyexperimentales, observndose una buena aproximacin.
KM)mediante tres procedimientos de linearizacin: Linewea-ver-Burk,
Aplicando el concepto segn el cual la velocidad de la
Langmuir (tambin llamado de Hanes) y Eadie-Hofstee, descritosreaccin enzimtica en un reactor por lotes corresponde al
ampliamente en la literatura (Blanch y Clark, 1997; Doran, 1995). Losritmo de consumo de sustrato con respecto al
resultados se compilan en la tabla 8, en donde es evidente que los tiempo( v d S / dt), y considerando las ecuaciones (1) y (2),
valores calculados por cada mtodo de linearizacin son muy similares,se pueden derivar las expresiones matemticas necesarias
siendo el ms efectivo en este caso el mtodo de Langmuir.
para simular el consumo de sustrato y la formacin de
De esta manera, se complet el modelo de Michaelis-Menten deproducto con respecto al tiempo de reaccin, as como la
acuerdo con la siguiente ecuacin:
conversin de almidn y el rendimiento del producto durante el
transcurso de la hidrlisis. La simulacin arroj una
concentracin de azcares reductores de 4,8 g/100mL y de
almidn remanente de 4,4 g/100 mL para una concentracin
inicial de almidn de 10,16 g/100mL (dilucin 1:10) y un tiempo
de reaccin de 120 min, siendo los valores experimentales
determinados para estas condiciones de 5,0 g/100 mL de

azcares reductores y de 4,5 g/100 mL de almidn.

Igualmente, la simulacin predice una conversin de
aproximadamente la mitad del almidn presente en la mezcla
inicial de residuos orgnicos para tiempos de reaccin entre
80-100 min, lo que se ve corroborado por los datos
experimentales correspondientes a las mejores condiciones de
temperatura, pH y dosificacin de enzima. Lo anterior indica
que el modelo de Michaelis-Menten es adecuado para describir
el comportamiento de la hidrlisis enzimtica del almidn
contenido en los residuos orgnicos en los rangos de
concentraciones estudiados.
Figura 2. Dependencia de la velocidad inicial de la reaccin de hidrlisis enzimtica (v0) enProduccin de etanol. Considerando el contenido en
funcin de la concentracin inicial de almidn (S0). 1) datos experimentales (); 2) curvaazcares reductores de la solucin lograda a partir de la
calculada de acuerdo con el modelo de Michaelis-Menten (-).
hidrlisis enzimtica de los residuos orgnicos, se evalu el
Tabla 8. Determinacin de los parmetros cinticos de la ecuacin de Michaelis-Menten
comportamiento del hidrolizado en calidad de sustrato como
Vmx
Procedimiento
Coeficiente
K M,
materia prima para la obtencin de etanol. En la tabla 9 se
de linearizacin
de regresin
g/mL
g/(100
observan los resultados obtenidos, en donde se evidencia el
mL*min)
incremento en la cantidad de alcohol etlico producido con el
Lineweaver - Burk
0,9781
0,08205
0,1048
aumento en la disponibilidad de azcares reductores del
Langmuir
0,9882
0,0865
0,1073
hidrolizado. La mayor conversin obtenida (28%) correspondi
Eadie - Hofstee
0,9366
0,0815
0,1045
al medio de cultivo con 23 Brix,
85
REVISTA COLOMBIANA DE BIOTECNOLOGA VOL.VI No. 2 Diciembre 2004 78-89
Tabla 9. Resultados de la fermentacin alcohlica de los medios
de cultivo preparados a partir de los hidrolizados de residuos
orgnicos
ARal inicio de la
ARal fina de la Etanol,% (v/v)
Bx
fermentacin,g/100mL fermentacin,
g/100 mL
4
2,34
1,83
0,15
6
3,08
2,57
0,17
8
3,96
3,29
0,27
4,84
4,1
10
0,34
12
5,17
4,38
0,36
14
5,5
4,01
0,75
23
9,95
7,15
1,44
AR: Azcares reductores.

sometidos a metanognesis en condiciones estrictamente

anaerbicas y a diferentes temperaturas. La formacin de
biogs en condiciones crioflicas se verific hasta los 70 das,
al cabo de los cuales se estanca la formacin de gas, mientras
en condiciones mesoflicas los volmenes producidos son
mayores obtenindose casi la mitad del biogs producido a los
4 das. Para la metanognesis mesoflica se produjo un
agotamiento en la produccin del gas alrededor del da 20 y se
determin que por cada kilogramo de residuos sometido a
metanognesis se producen 3,25 L de biogs. Evidentemente
la temperatura juega un papel crucial en este proceso, por lo
que se recomienda llevar a cabo la optimizacin de
esta variable, as como del pH, evaluando a su vez la composicin
preparado a partir de la evaporacin del hidrolizado de residuos
y el contenido calrico de los gases obtenidos.
orgnicos hasta un valor de aproximadamente 10 g/100 mL de
Produccin de compost. Para el homogeneizado de residuos
azcares reductores.

Los bajos niveles de etanol obtenido pueden explicarseorgnicos de origen vegetal se determin una relacin C/N de 23,8,
considerando la gran heterogeneidad de los residuos orgnicos siendo el contenido de nitrgeno orgnico de 3,14% en base seca.
utilizados,
Esta relacin se considera baja para fines de compostaje
los cuales pueden contener sustancias inhibidoras Tabla 10. Volumen de biogs obtenido durante la metanognesis crioflica (18 C)
Gas,cm3 Da
Gas,cm3 Da
Gas,cm3 Da
Gas,cm3
Da
del crecimiento de las levaduras, as como
0
0
16
3090
33
5980
61
10440
microorganismos que pudieran competir por las
1
0
17
3370
34
6190
63
10470
fuentes de carbono presentes. Se recomienda
2
380
18
3590
35
6190
64
10670
profundizar en el estudio de la fermentacin
3
490
19
3840
39
6950
65
10840
alcohlica de los hidrolizados de residuos or4
640
20
3920
41
7460
66
11000
gnicos evaluando factores como las condiciones
5
860
21
4090
42
7640
68
11140
ambientales, el volumen del inculo y la adicin de
6
1160 22
4240
46
8020
69
11280
complementos nutricionales al mosto obtenido. Sin
7
1370 23
4400
47
8320
70
11340
embargo, los resultados son perspectivos al
8
1500 25
4700
48
8560
72
11420
demostrar la viabilidad de obtener un producto de
9
1540 26
4950
49
8940
74
11610
valor agregado a partir de desechos de frutas y
10
1980 27
5150
50
9100
75
11640
verduras empleando procedimientos no intensivos
11
2090 28
5190
52
9420
76
11680
en energa, como s lo es la hidrlisis cida a altas
12
2370 29
5340
54
9540
79
11720
13
2540 30
5500
57
9960
82
11730
temperaturas.
14
2740 31
5720
58
10120
84
11730
Produccin de biogs. En las tablas 10 y 11 se
15
2760 32
5900
60
10280
85
11730
relacionan los volmenes obtenidos de biogs
cuando los residuos orgnicos pretratados
de la plaza de mercado local fueron
86
BIODEGRADACIN DE RESIDUOS ORGNICOS DE PLAZAS DE MERCADO
Tabla 11. Volumen de biogs obtenido durante la metano-gnesis mesoflica (37 C)
Gas,cm3
Gas,cm3
Da
Da Gas,cm3 Da
11590
0
0
7 7670
16
1200
11970
1
9 8850
17
1540
12010
2
10 9210
18
5490
12600
3
11 9330
22
6230
12800
4
14 10550
25

CONCLUSIONES
La caracterizacin de los residuos slidos urbanos de origen
vegetal mostr que sus principales componentes corresponden
al almidn y la celulosa contenidos en productos tales como
papa, naranja, mango y desechos relacionados, presentes en
forma mayoritaria en los residuos analizados. Estos
componentes son biopolmeros que se constituyen en la
debido a que la mayora de microorganismos utilizan ptimamente 30 materia prima necesaria para diferentes procesos de
partes de carbono por una de nitrgeno (Monroy y Viniegra, 1990),biodegradacin conducentes a la obtencin de productos de
aunque se encuentra cerca del rango inferior recomendado para el iniciovalor agregado como jarabes azucarados y etanol, y a la
de este proceso que es de 25-40 (Richard, 1992). Despus de 10 das seestabilizacin y tratamiento de los residuos orgnicos con
present un aumento del nitrgeno orgnico hasta un valor de 4,17%,generacin de biogs y compost.
El presente trabajo demostr la factibilidad de los
disminuyndose la relacin C/N a 16,6, lo cual est en consonancia con
procesos
de biodegradacin enzimtica de los residuos
los resultados obtenidos por Faras et al. (1999) para el compostaje de

residuos agroindus-triales de la poscosecha y cultivo de rosas, as comoorgnicos procedentes de una plaza de mercado, al probarse
para residuos slidos urbanos. La temperatura del compost aument la obtencin de cantidades significativas de azcares mediante
hasta alcanzar un valor de 50 C a los 10 das correspondiente a un rango un proceso simple de hidrlisis enzimtica del almidn y la
mesoflico considerado como ptimo para la formacin de compost. Porcelulosa presente en estos residuos utilizando glucoamilasa y
su parte, el pH se increment al principio de la fermentacin hasta valores celulasas comerciales. En particular, el grado de
de 7,6 debido al desprendimiento de amonaco caracterstico para valorestransformacin del almidn alcanz el 60% a 50 C y un pH de
bajos de la relacin C/N. Despus de 26 horas se inicia la disminucin del 6,0. Sin embargo, se hace necesario aumentar la conversin
pH como consecuencia de la produccin de cido lctico, neutralizando el de los sustratos, en especial de la celulosa, para optimizar el
amonaco y alcanzando valores de 6,0 a las 70 horas de proceso.
proceso. En este punto se requiere mejorar y desarrollar
Para compensar los valores relativamente bajos de la relacin C/N,nuevos procedimientos para el pretratamiento de los residuos
se recomienda mezclar los residuos orgnicos de frutas y hortalizas conligno-celulsicos, lo que indudablemente aumentar su grado
materiales ricos en carbono como paja, pasto, aserrn o papel hasta de hidrlisis y el rendimiento en la obtencin de azcares
alcanzar los valores ptimos requeridos. Sin embargo, se demuestra que reductores.
el compostaje de los residuos orgnicos estudiados tiene un comporA partir del seguimiento de las curvas biocinti-cas de
tamiento muy similar al de otros tipos de desechos orgnicos urbanos ysustrato y formacin de productos para el caso de la hidrlisis
de residuos agroindustriales que han demostrado su efectividad en la enzimtica del almidn, se pudo llevar a cabo el modelamiento
obtencin de compost de alta calidad.
del proceso con base en la ecuacin de Michaelis-Menten. La
simulacin subsiguiente, corroborada experimentalmente, permiti determinar el comportamiento en el tiempo de la
transformacin enzimtica a diferentes concentraciones de
sustrato presente en los residuos orgnicos, entre otros
aspectos de crucial importancia para el posterior diseo y
escalamiento de este bioproce-so. De esta manera, el
modelamiento matemtico de la cintica enzimtica puede
constituirse en una herramienta til al momento de desarrollar
un proceso de biodegradacin de residuos de origen vegetal a
nivel industrial.
87
REVISTA COLOMBIANA DE BIOTECNOLOGA VOL.VI No. 2 Diciembre 2004 78-89

El presente estudio muestra la posibilidad de obtener unpapel importante en el sector agrcola en calidad de un abono de bajo
producto de valor agregado como el alcohol etlico a partir de un costo, y el biogs producido puede contribuir a disminuir los costos
material tan heterogneo como los desechos vegetales. La energticos del proceso integral de biodegradacin. Estos aspectos
estrategia de hi-drolizar enzimticamente los polisacridos msdeben ser abordados en posteriores estudios.
relevantes de los mismos, permiti suministrar la materia primaBIBLIOGRAFA
Ames,
necesaria (en forma de azcares fermenta-bles) para la accin
de J.; Werner, C. 2003. Reaching the Environmental Com-munity: Designing an
las levaduras. Se precisa, por tanto, profundizar en la definicin de Information Program for the NREL Biofuels Program. Golden, Colorado, EUA: National
Re-newable Energy Laboratory. 93 p.
las mejores condiciones de la fermentacin alcohlica, consideAOAC. 1990a. Offical Methods of Analysis. Method 925.45D. Arlington, EUA: Association of
rando la complejidad en la composicin del medio de cultivoOfficial Analytical Chemists.

utilizado. El avance en esta directriz de trabajo contribuir sin AOAC.

duda 1990b. Offical Methods of Analysis. Method 988.05. Arlington, EUA: Association of
Analytical Chemists.
al desarrollo de nuevas alternativas en la obtencinBailey,
deOfficial
J.; Ollis, D. 1984. Biochemical Engineering Fundamentals. Mxico: McGraw H ill. 753
biocombustibles con todas las ventajas ambientales yp.
socioeconmicas que ello implica.
Blanch, H. W.; Clark, D. S. 1997. Biochemical engineering. Nueva York: Marcel Dekker. 702
Con este trabajo se estableci en forma preliminar que losp.
E. F.; Cristancho, D. E.; Arellano, V. 2003. Estudio de las condiciones de operacin
desechos slidos urbanos de una plaza de mercado puedenCastillo,
ser para
la digestin anaerobia de residuos slidos urbanos. Revista Colombiana de
sometidos a digestin anae-rbica con el objetivo de producir Biotecnologa. 5(2).
biogs. Al respecto, el rango mesoflico de temperaturas (paraCecchi,
este F.; Traverso, P. G. 1988. State of the art of research and development in the
caso, cercanas a 37 C) mostr ser el ms efectivo en cuanto a los anaerobic digestion process of municipal solid waste in Europe. Biomass. 26 (4).
Departamento Administrativo Nacional de Estadstica. 2004. Proyecciones Municipales.
volmenes obtenidos. Se requiere llevar a cabo trabajos
Disponible en: =proyecciones (visitada en mayo de 2004).
posteriores en donde se determine la composicin cuantitativa
del P. M. 1995. Bioprocess engineering fundamentals. Londres: Academic Press. 439.
Doran,
gas generado y su contenido calrico con el fin de evaluar
su T. F.; Himmelblau, D. M.; Lasdon, L. S. 2001. Optimiza-tion of chemical processes.
dgar,
Boston: McGraw-Hill. 651 p.
posible uso como combustible.
Faras, D. M.; Ballesteros, M. I.; Bendeck, M. 1999. Variacin de parmetros fisicoqumicos
Finalmente, el compostaje de los residuos orgnicos
durante un proceso de compostaje. Revista Colombiana de Qumica. 28 (1): 75-86.
vegetales arroj un comportamiento muy similar al de los residuos
Guzmn, H.; Paredes, O.1995. Amylolytic enzymes and prod-ucts derived from starch: a
orgnicos urbanos en su conjunto y al de los residuos review. Crit Rev Food Sci Nutr. 35: 373-403.
Hamzawi,
N.; Kennedy, K. J.; McLean, D. D. 1999. Review of Applications of High Solids
agroindustriales. Sin embargo, y de acuerdo con los valores de
la
Digestion to Solid Waste Management. Journal of Solid Waste Technol-ogy
relacin carbono a nitrgeno del homogeneizado de los residuos,Anaerobic
and Management. 26 (3,4).
se recomienda mezclarlos con materiales que aumenten dicha
Howard, R. L.; Abotsi, E.; Jansen van Rensburg, E. L.; Howard, S. 2003. Lignocellulose
relacin como paja, pasto y madera, y llevar a cabo de esta manera biotechnology: issues of bioconversion and enzyme production. African Journal of
Biotechnology. 2 (12): 602-619.
el proceso de compostaje en condiciones ptimas.
Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial. 2004. Observatorios Ambientales
Los resultados de este trabajo constituyen una primera etapa
Urbanos. Manizales. Disponible en: http:\\web.minambiente.gov.co/oau/
de recoleccin de datos a nivel de laboratorio y de banco tendientenivel3.php?indicador=GTRS&observ=6 (visitada en marzo de 2004).
al diseo de una estrategia integral de aprovechamiento y
tratamiento de residuos orgnicos de origen vegetal por medios
biotec-nolgicos y, por tanto, ecolgicamente limpios. Se demuestra la posibilidad de implementar un esquema de
biodegradacin del cual, adems del tratamiento y estabilizacin de
una amplia gama de desechos, se pueden obtener valiosos
insumos para otros sectores industriales como los azcares y el
etanol. Adicional-mente, el compost obtenido puede desempear
un
88
BIODEGRADACIN DE RESIDUOS ORGNICOS DE PLAZAS DE MERCADO
Monroy, O.; Viniegra G. 1990. Biotecnologa para el
Salas, J. E.; Giraldo, E. 1996. Aprovechamiento econmico de los desechos slidos
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municipales: modelo de anlisis para la evaluacin financiera: reciclaje y
Mxico: AGT. 260 p. Montgomery, D. C. 1991. Diseo y anlisis de experimentos.
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Mxico: Iberoamericana. 528 p. Navarro, A. F.; Cegarra, J.; Roig, A.; Garca, D. 1993. slidos. Memos de Investigacin No. 257, marzo. Santaf de Bogot.
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