ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA DEL EJRCITO

LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR

CONSTANTE OSORIO PRISCILA
NRC: 4942
Ttulo: Identificacin Microscpica de Clulas Epiteliales a Partir de Muestras Tomadas de la
Cavidad Interna de la Boca (Mucosa Bucal), Utilizando Tincin Simple con Azul de Metileno.
Objetivos:
Identifica y diferenciar mediante observacin microscpica formas y estructuras de clulas
epiteliales comparndolas con una galera de imgenes desde bibliografa confiable.
Manipular material de laboratorio para toma de muestras de epitelio bucal respetando normas de bioseguridad y el medio ambiente.
Utilizar el mtodo de tincin con azul de metileno en las clulas epiteliales.
Manipular correctamente el microscopio ptico de campo claro para la observacin de clulas epiteliales, siguiendo normas universales.
Introduccin:
Las clulas epiteliales recubren la superficie interna y externa del cuerpo1; su principal funcin es la de proteger de infecciones causadas por factores externos. Algunas de estas clulas pueden ser glandulares, es decir pueden producir algunas secreciones. Las ms fciles de recoger para
obtener una muestra se encuentran en la parte interna de las mejillas, al desplazar la muestra en el
portaobjetos las separamos por lo cual despus de teirlas con azul de metileno las podemos encontrar de forma individual, o en un grupo amplio.
El azul de metileno se usa como antisptico y cicatrizante interno, sin embargo es tambin
utilizado como colorante en las tinciones para la observacin al microscopio y para teir los resultados en los laboratorios.2 La tincin con azul de metileno es una de las ms simples por lo que
puede realizarse con bastante seguridad, adems de que este procedimiento aclara la visin de las
clulas al observarla en el microscopio, cabe recalcar que este mtodo no sirve con toda clase de
clulas, como son las de la sangre. Esta sustancia tiene forma de cristales o polvo cristalino y presenta un color verde oscuro, y sus soluciones en agua o alcohol presentan un color azul oscuro.
Hiptesis:

1
2

La mayora de las clulas del frotis se tien con el azul de metileno.

Se puede localizar fcilmente las clulas con el objetivo 4x.
Se puede observar generalmente las clulas con el objetivo 10x.
Se puede observar ms profundamente las clulas con el objetivo 40x.
Las clulas del frotis se encontrarn de manera individual en su mayora.

(Ecu Red, 2013)

(Wikipedia, 2013)

Metodologa:
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Se limpi una placa porta objetos con papel toalla y alcohol antisptico.
Con un palillo estril se frot suavemente la parte interna de la mejilla.
Se extendi la muestra, frotando con el palillo de madera sobre la placa portaobjetos.
Se fij la muestra con el calor del mechero de alcohol, pasando la placa varias veces en la
llama procurando no sobrecalentar la placa.
Se ti la muestra, cubrindola con 1 o 2 gotas de azul de metileno, durante 2 a 3 minutos.
Se enjuag con agua (piceta), depositando el exceso de colorante dentro de la bandeja para
este fin.
Se sec la placa al aire libre o pasndola en la llama del mechero para eliminar el agua.
Se observ en el microscopio ptico de campo claro con los objetivos 4, 10 y 40x e identificando las clulas epiteliales.

Resultado:

Clulas Epiteliales teidas con azul de metileno

observadas en 40X
Membranas fina y ncleos de color azul y
citoplasma ms claro

Grupo de Clulas Epiteliales teidas con azul de

metileno y observadas en 40X
algunas se encuentran traspuestas por lo que se observan ms obscuras.

Tintura del frotis

Clula Epitelial teida con azul de metileno y

observada en 40X
Se pueden observar ligeras deformaciones causadas probablemente por el frotis.

Discusin:
Se puede observar en los resultados obtenidos que las clulas tienen una forma de escamas,
lo cual concuerda con Jerez3.
El azul de metileno tie eficazmente este tipo de clulas, como podemos observar la membrana es una finsima capa de color azul oscuro, el citoplasma de un color un poco turquesa,
y finalmente el ncleo de azul oscuro tindolo completamente.
Las clulas escamosas se caracterizan por ser las ms superficiales (Wikipedia, 2012) , es
por eso que pudimos recogerlas fcilmente de la superficie interior de la boca.
Son clulas muy delgadas de forma casi hexagonal, pudimos observarla ya en el frotis y en
algunos casos cuando estaban unidas en grupo podamos observar la estrecha relacin.

Conclusiones:
Se logr realizar el proceso de tincin con azul de metileno de la manera ms correcta, colocando apenas una gota.
Se observ correctamente al microscopio las clulas obtenidas con el frotis en los objetivos
4x, 10x y 40x.
Se manej correctamente el microscopio y otros materiales del laboratorio.
Se pudo observar de manera clara la forma de las clulas epiteliales recogidas.
Se comprobaron las hiptesis planteadas anteriormente.

Bibliografa:
Wikipedia. (16 de 06 de 2012). Recuperado el 15 de 04 de 2013, de clulas escamosas:
http://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lulas_escamosas
Ecu Red. (14 de 02 de 2013). Recuperado el 15 de 04 de 2013, de
http://www.ecured.cu/index.php/C%C3%A9lulas_epiteliales
Wikipedia. (23 de 03 de 2013). Recuperado el 15 de 04 de 2013, de Azul de metileno:
http://es.wikipedia.org/wiki/Azul_de_metileno
Jerez, A. G. (s.f.). Prcticas Laboratorio. Recuperado el 15 de 04 de 2013, de Curso de Biologa:
http://laboratoriobiologaunad.blogspot.com/

Jerez, A. G. (s.f.). Prcticas Laboratorio. Recuperado el 15 de 04 de 2013, de Curso de Biologa:

http://laboratoriobiologaunad.blogspot.com/