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UFPA/ICB/ Mdulo: Processos Gerais de Agresso e Defesa.

Turma: B Data: 14/05/2012


Alunos: Bruna Angelina, Jssica Logrado, Larise Chaves, Larcio Almeida e Leandro Braga.
Nota:__________
2 EXERCCIO PRTICO DE BACTERIOLOGIA
1. COM RELAO AULA PRTICA, SOBRE COLORAO DE GRAM,
RESPONDA:
1.1. Descreva o fundamento da tcnica de Gram.
As bactrias podem ser classificadas como Gram-positivas ou Gram-negativas. As Grampositivas possuem uma membrana celular revestida por uma parede celular formada de
peptidoglicanos (NAM e NAG). Quando exposta ao corante cristal violeta toda a clula se
cora e uma vez submetida ao rpida de um lcool no se descora. Isso porque o lcool no
capaz de romper a parede espessa de peptidoglicanos e assim o complexo cristal violeta no
consegue atravessar esta. J as bactrias Gram-negativas possuem uma parede celular
formada por uma parede fina de peptidoglicanos e uma membrana celular externa de
lipopolissacardeos. As bactrias Gram-negativas tambm se coram com o cristal violeta,
porm se descora quando submetida ao de um lcool porque a membrana externa da
parede celular removida pelo lcool e assim o corante cristal-violeta consegue atravessar a
fina parede de peptidoglicanos que restou da parede celular. Ento, quando submetidas a outro
corante (safranina) a regio que foi descorada pelo lcool se cora e adquire uma colorao
rosa-avermelhada - diferente das bactrias Gram-positivas que por no terem sido descoradas
no se coram com segundo corante.
1.2. Comente cada uma das etapas da colorao de Gram.
1 Num esfregao fixado pelo calor aplica-se o corante cristal-violeta. O corante cristalvioleta penetra no citoplasma e cora a clula - tanto de bactrias gram-negativas como
bactrias gram-positivas. Posteriormente, lava-se o corante em curto perodo.
2 Recobre-se o esfregao agora com lugol. O lugol uma soluo de Iodo que tambm
penetra na clula e forma um complexo com o cristal-violeta. Lava-se o esfregao.
3 Lava-se a lmina agora com lcool. O lcool no consegue retirar o complexo das bactrias
Gram positivas devido espessa camada intacta de peptidoglicano, j das Gram negativas, o
lcool rompe a camada externa de lipopolissacardeo e ento o complexo removido atravs
da parede de peptidoglicano (essa, delgada). Agora as bactrias Gram negativas esto
descoradas e as Gram positivas, coradas. Lava-se a lmina.
4 A lmina recoberta com safranina, um corante bsico vermelho, que ir corar as bactrias
que esto descoradas (Gram negativas).
1.3. Cite um fator que pode influenciar na colorao de Gram, podendo inclusive levar a
erros.
O tempo de exposio do esfregao aos corantes ou ao lcool.
1.4. Descreva, resumidamente, a importncia da colorao de Gram para a rea mdica.
A colorao de Gram um procedimento til e simples que classifica as bactrias em dois
grandes grupos: Gram positivas e Gram negativas. Estes so diferentes principalmente pela

composio da parede celular que possui estruturas especficas a cada grupo como uma
parede espessa de peptidoglicanos com cido teicico nas Gram-positivas e uma parede fina
de peptidoglicanos revestida por uma bicamada lipdica com lipopolissacardeos (LPS) nas
Gram-negativas. Isso revela caractersticas que exigem substncias especficas para agir em
tais estruturas. Assim, a colorao de Gram fornece informao valiosa para o adequado
tratamento da doena medida que h antibiticos especficos para cada um desses grupos de
bactrias.
1.5. Faa um desenho esquemtico de cada uma das estruturas bacterianas visualizado no
microscpio, mostrando a morfologia bacteriana e a reao tintorial, que foram observadas
em aula.

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6. Faa um desenho esquemtico do esfregao corado pelo seu grupo e d morfologia


bacteriana e a reao tintorial da estrutura bacteriana corada.

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