1.

Introduo

As membranas, celular e nuclear so compostas principalmente por lipdios.

As protenas encontram-se aprisionadas na bicamada lipdica. Os organitos
celulares so compostos por protenas, cidos nucleicos ( DNA e RNA ), envolvidos
por uma membrana. As paredes celulares das clulas vegetais so compostas
essencialmente por polissacardeos. As pequenas estruturas celulares so
compostas por substncias com diferentes propriedades qumicas, pelo que os
procedimentos experimentais devem ser definidos de modo a separar um
determinado constituinte celular das restantes partes, sem causar muitos danos.
Cerca de 99% do DNA encontra-se no ncleo da clula. A extrao de DNA de
clulas eucariticas foi efetuada em trs etapas:

a) ruptura das clulas para liberao do ncleo;

b) desmembramento dos cromossomos em seus componentes bsicos, DNA e
protenas;
c) separao do DNA dos demais componentes celulares.

O presente relatrio descreve o experimento de extrao de material

gentico (DNA) da cebola (Allium cepa). O DNA (cidodesoxirribonucleico) uma
molcula orgnica que contm a informao que instrui o desenvolvimento e
funcionamento de todos os seres vivos. Existem inmeras tcnicas de extrao de
DNA e a escolha dessatcnica depende da fonte, quantidade, e idade da amostra.
A extrao do material gentico possui inmeras aplicaes em reas como
medicina, agricultura, criminalstica, entre outras.

2.

OBJETIVOS

O objetivo desse experimento conhecer os princpios bsicos da extrao

do DNA, utilizando como material biolgico fragmentos de bulbo de cebola.

3.

MATERIAIS E MTODOS

4.1.

Materiais Utilizados

Bquer;

Basto de vidro;

Pipeta;

Tubos de centrfuga;

Centrfuga;

Banho-maria (60C).

4.2.

Solues Utilizadas

Cloreto de sdio (NaCl);

Detergente lquido (incolor);

Etanol (gelado);

Cebola picada em pedaos pequenos;

Soluo de lise: detergente 10%, NaCl 20% em gua destilada.

4.3.

Procedimento Experimental

1) Picou-se a cebola em pedaos pequenos e colocou-se uma determinada

quantidade no tubo, adicionando-se posteriormente 5mL da soluo de lise.
2) Utilizou-se o basto de vidro para homogeneizar.
3) Deixou-se o tubo com o homogeneizado em banho-maria a uma
temperatura de 60C por 15 minutos.
4) Centrifugou-se o tubo por 8 minutos a 12000rpm.
5) Transferiu-se o sobrenadante para um tubo limpo.

6) Adicionou-se dois volumes de etanol gelado para a precipitao dos cidos

nucleicos.
7) Inverteu-se o tubo vrias vezes observando a precipitao.
8) Para a obteno do DNA, centrifugou-se o precipitado, desprezando o
etanol.
9) Ressuspendeu-se o DNA em 100mL de gua.

5.

RESULTADOS E DISCUSSO

A prtica foi realizada utilizando-se o bulbo da cebola por apresentar clulas

grandes, que so rompidas assim que a cebola picada e ainda pelo fato de a
cebola apresentar um DNA ampliado.
Cada reagente utilizado possui uma funo especfica que possibilita a
visualizao final, sendo:

NaCl: o NaCl responsvel por tornar o ambiente favorvel para a

extrao do DNA, visto que aps a dissociao, os ons positivos do
NaCl so responsveis por neutralizar a carga negativa do DNA e os
negativos permitem que o complexo formado junto ao DNA se
enovele. O sal responsvel pela no desintegrao do DNA.

Detergente: o detergente responsvel por dissolver as membranas

plasmtica e nuclear que so constitudas de lipdios. O detergente
desestrutura as molculas de lipdios e com a ruptura, o contedo
celular incluindo tambm o DNA ficam dispersos na soluo.

Etanol gelado: o lcool permite uma maior desidratao do DNA,

proporciona uma mistura heterognea e como o DNA tende a no ser
solvel em lcool, h a aglutinao das molculas, surgindo ento
uma massa filamentosa e esbranquiada. Utiliza-se o etanol gelado,
pois quanto mais gelado ele for, menos solvel ser o DNA.

Aps a realizao de pesquisas, observou-se que, a utilizao do banhomaria a 60C na extrao de DNA de importncia, pois esse aumento de
temperatura inativa algumas enzimas que podem degradar o DNA e ainda favorece
uma maior agitao das molculas, assim, favorecendo ao detergente a dissoluo
das membranas lipdicas.

6.

CONCLUSO

Mediante a realizao da prtica com o principal objetivo de extrair o DNA e

observar os princpios bsicos de extrao, conclui-se que a prtica foi de grande
importncia para o aprendizado da turma tanto em relao extrao em si quanto
funo especfica de cada reagente utilizado.

7.

REFERNCIAS

EXTRAO
DE
DNA
DA
CEBOLA.
Disponvel
em:
<http://www.seara.ufc.br/sugestoes/biologia/biologia003.htm>. Acesso em: 15
nov.2014.

ATIVIDADE PRTICA PARA EXTRAO DO DNA. Disponvel

<http://educador.brasilescola.com/estrategias-ensino/atividade-pratica-paraextracao-dna.htm>. Acesso em: 15 nov.2014.

em: