02/12/2014

QumicaNovaLimeessentialoilintheteachingofthinlayerchromatography

QumicaNova

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PrintversionISSN01004042

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Qum.Novavol.32no.8SoPaulo2009

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http://dx.doi.org/10.1590/S010040422009000800042

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leoessencialdelimonoensinoda
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Limeessentialoilintheteachingofthinlayer
chromatography

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RosalyS.Silva*CarlosMagnoR.RibeiroMrciaN.BorgesGiselleS.
O.Blois
DepartamentodeQumicaOrgnica,InstitutodeQumica,Universidade
FederalFluminense,CampusdoValonguinho,OuteirodeS.JooBatista,
s/n,24020141NiteriRJ,Brasil

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ABSTRACT
Thispaperdescribesasimpleexperimentemployingtheessentialoiloflimeswhichcanbeappliedin
undergraduateorganicchemistrylaboratoryclassesfortheteachingofthinlayerchromatography(TLC).The
experimentconsistsinsubmitlimepeeloiltoTLCseparationemployinghexaneanddichloromethaneasthe
eluentsandfivedifferentsystemsforvisualizationofthechromatogram.Inoneexperimentitispossibleto
teachthedifferentvariablesoftheTLCtechnique.Thisexperimentmayalsobeperformedfollowingvapor
distillationandliquidliquidextractiontechniqueinexperimentalclasses.
Keywords:limeessentialoilTLCteachingvisualizationsystems.

INTRODUO
Acromatografiaemcamadadelgada(CCD)umtemaimportanteabordadonoscursosdegraduaoem
qumicaereasafins,principalmentenoensinodequmicaorgnicaexperimental.umatcnicasimplesede
execuorelativamenterpida.Naqumicaorgnica,aCCDutilizada,principalmente,comoumaferramenta
eficazdeanlisequalitativaparaavaliaodapurezadeumaamostrasimples,avaliaodonmerode
componentesdeumamistura,determinaodaidentidadedeumaamostraporcomparaocomumpadro,
identificaodeumaoumaissubstnciaspresentesemumamisturaporcomparaocompadres,
monitoramentodoprogressodeumareaoqumica,escolhadeumsolventeapropriadoparaumaseparao
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cromatogrficaemcolunaemonitoramentodeumaseparaocromatogrficaemcoluna.
NoscursosdeQumicaereasafinsdaUniversidadeFederalFluminense(UFF)temsidoobservadoqueoensino
destatcnicadeveserabordadoemtodasasdisciplinasexperimentaisdequmicaorgnica,paraqueoaluno
consigacompreendereassimilartodasasvariveisenvolvidasemumaboaseparaocromatogrfica.
DiversasexperinciasparaseremutilizadasnoensinodaCCDestodescritasnaliteraturaespecializada,tanto
emlivrostexto1quantoemartigosderevistas.29Entretanto,nasuagrandemaioria,apenasumavarivelda
tcnicaestudadacomo,porexemplo,comparaodefatoresderetenodesubstnciasdiferentesemum
mesmosistemadeeluio,2,5,8,9estudodediferentessistemasdeeluionaseparaodoscomponentesde
umadeterminadamistura3,4ouestudodesistemasderevelaodiferentesdeumcromatograma.6,8Tambm
estodescritasexperinciasondehaarticulaodaCCDcomoutrastcnicaslecionadasnasdisciplinasde
qumicaorgnicaexperimental,taiscomocromatografiaemcoluna2,9eextraocidobase.5,7
Dandoprosseguimentosnossaspesquisasemensinodequmica,10nopresentetrabalhodesenvolvemosuma
aulaexperimentaldefcilexecuo,podendoserrealizadaemumperodode3a4hdedurao,quetem
comotemaprincipalousodeCCDesuasvariveis,equetambmpodeserarticuladacomoutrastcnicasde
laboratrio.
Devidocomposioqumicadoleoessencialobtidodecascasdelimo,11queconsisteprincipalmentede
monoterpenoides,comumarazoveldiversidadedegruposfuncionais,possvel,emapenasumaaula
experimental,abordaracromatografiaemcamadadelgadasobdiferentesaspectos,taiscomopoderdeeluio
epoderderesoluodesolventes,reveladoresversusestruturaqumicaefatorderetenoversusestrutura
qumica.
Aexperinciaconsistenacromatografiaemcamadadelgadadoleoessencialdelimo,emdoissistemas
diferentesdeeluioenavisualizaodocromatogramaemcincosistemasdiferentesderevelao.Oleo
essencialdelimopodeserobtidorapidamenteatravsdacompressomanualdecascasdelimonoincioda
aulaexperimental,oupormeiodadestilaoporarrasteavapordecascasdelimoseguidaporextrao
lquidolquido,realizadasemumaouduasaulasanterioressobreestastcnicas.

PARTEEXPERIMENTAL
Procedimentosgerais
Foramutilizadoslimestaiti,adquiridosemumafeiralivrenacidadedeNiteri,RiodeJaneiro.SolventesPA
Vetecforamutilizadoseusadosdiretamentedosfrascos.ForamutilizadascromatofolhasF254marcaMerck.
LmpadadeUVMerckmodeloE,munidacomluzultravioletadecomprimentosdeondaslongoecurto,foi
utilizadacomorevelador,colocandoseasplacascromatogrficassobaincidnciadesualuzemcaixasescuras
adequadas.Soluesdevanilinasulfrica12ede2,4dinitrofenilhidrazina(DNFH),13preparadasatravsde
metodologiausual,foramutilizadascomoreveladores.Aaplicaodassoluesreveladorasnasplacas
cromatogrficasfoirealizadacomousodepipetaPasteur,quefoipassadahorizontalmenteaolongodecada
placa.Arevelaocomiodofoiefetuadacolocandoseasplacasemcubasdevidrodevidamentefechadas
contendocristaisdeiodo.
Naaplicaoemaula,sugeresequeosprocedimentosdescritossejamrealizadosporequipededoisalunose
queassoluesreveladorassejampreparadasantesdaauladeCCD.
Extraodeleoporaomecnica
Doislimessodescascadoscuidadosamentedemodoanopermitirapresenadebagaoesuco.Ascascas
doslimessomanualmenteespremidaspelaparteexterna,obtendosealgumasgotasdeumleoqueso
coletadasemumtudodeensaiode10mLdecapacidademunidocomumfunilsimplesde5cmdedimetro.
Emseguida,ofunillavadocom2mLdediclorometanoparaointeriordotubodeensaio(podendoser
utilizadoacetatodeetilacomoalternativa),obtendoseassimoextratoprontoparaseraplicadonasplacas
cromatogrficas.
Extraodeleoporarrasteavapor
Oprocedimentodeextraodescritoaseguiralternativoedeveserutilizadonocasodeseoptarpela
articulaodoensinodeoutrastcnicascomaCCD,epoderserrealizadoemumaouduasaulasanteriores,
ondedeveroserabordadasasteoriasdoarrasteavaporedaextraolquidolquido.
Doislimessodescascadosdemodoanopermitirapresenadebagaoesuconascascas.Emumbalode
250mLsocolocadasascascasdoslimeseguaadicionadaatovolumefinalaproximadode125mL.
Atravsdeumaaparelhagemdedestilaosimples,adaptadacomfunildeadiocomgua,efetuaseo
arrasteavaporcomocodestilao.Destilaseatobterumvolumetotaldeaproximadamente300mLde
destilado.Paracada100mLdedestilado,realizaseextraocom15mLdediclorometano,porcincovezes
(podendoserutilizadoacetatodeetilacomoalternativa).Asfasesorgnicassojuntadase,apssecagemcom
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sulfatodemagnsioanidroefiltrao,asoluofinalconcentradaemumevaporadorrotativo,obtendose
cercade1mLdeleo,aoqualsoadicionados5mLdediclorometano,obtendoseassimoextratoprontopara
seraplicadonasplacascromatogrficas.Oleodeveserguardadosobrefrigerao.
Separaocromatogrfica
Asplacascromatogrficassopreparadascortandosecuidadosamente,comtesoura,tirasdecromatofolhade
2x10cm.Comousodeumtubocapilar,umagotadoextratoaplicadanaparteinferiorcentraldecada
placa,aaproximadamente0,5cmdabordainferior.Apsevaporaodosolvente,asplacassosubmetidas
eluioemumacubacromatogrficacomhexano.Oprocedimentorepetidousandosediclorometanocomo
eluente.
Apsaeluio,asplacassoobservadassobluzultravioletadecomprimentosdeondalongoecurtoe,em
seguida,sosubmetidasexposioavaporesdeiodo.Asplacassoretiradasdacmaradeiodoeassimque
asmanchasobtidasdesaparecemdasplacas(reversodocomplexocomiodo),elassosubmetidas
revelaocomsoluodevanilinasulfricaoucomsoluode2,4DNFH.Emcadafaseosfatoresdereteno,
Rfs,dasmanchasobservadassomedidos.

RESULTADOSEDISCUSSO
Separaocromatogrfica
Osresultadosdacromatografiadoleodascascasdelimoobtidoporarrasteavapor,apsrevelaocomos
reveladoresespecificados,encontramsenaTabela1.Acromatografiadoleoobtidodiretamenteporao
mecnicaforneceresultadossemelhantes.
Constituintesdoleodelimo
Paraumaanlisecriteriosadosresultadosobtidos,sefaznecessrioconhecerumpoucodacomposiodoleo
delimo.NocatlogodesubstnciasqumicasMerckIndex,14encontraseumadescriosucintados
componentesdoleoessencialdelimo.Entretanto,preferimosnosdeternotrabalhodeCasanovae
colaboradores,11porserumestudobemdetalhadodacomposiodoleodelimo.Estespesquisadores
analisaramacomposioqumicadosleosessenciaisextradosdecascasefolhasdelimodasespciesCitrus
limon(L.)Burm,espciedolimosiciliano,15eCitrusaurantifolia(Christm)Swing.,espciedoslimestaitie
galego.15Sobreaespcieaquepertenceolimotaiti,utilizadonopresentetrabalho,elesrelatamoestudode
21cultivosdiferentesde7variaesbotnicas,consideradascomoespciesdiferentesnosistemaTanaka,
tendosidoidentificados62compostos.11Namaioriadasvariaesbotnicasestudadas,osleosobtidosdas
cascaseramconstitudosquasequeexclusivamentedemonoterpenoides,sendoafraodeolefinasbemmaior
queadesubstnciasoxigenadas,eolimonenooprincipalconstituintedetodososleos(39,994,4%).11Dentre
osterpenoidesoxigenados, terpineol,linalol,acetatodelinalila,neral,geranial,acetatodenerilaeacetatode
geranilaestavampresentesempraticamentetodasasamostras.AFigura1apresentaasestruturasqumicasde
algunsterpenoidesrepresentativosdadiversidadedegruposfuncionaisdosconstituintesdoleodelimo.

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AtravsdarelaoentreosRfs(fatoresdereteno)dasmanchasobservadasnasplacascromatogrficas
(Tabela1)easestruturasqumicasdospossveisconstituintesdoleoobtido(Figura1),podeseestimularuma
discussoemaulasobreasvariveisimportantesemumprocessocromatogrfico,citadasnaIntroduo.A
seguir,apresentamosumaanlisedoscromatogramas,separandoemitensasdiversasabordagensque
poderosertemadediscusso.
Poderdeeluioeresoluo
Omaiorpoderdeeluiododiclorometanocomparadoaohexano,noadsorventeslica,nitidamente
observadoemtodasasplacas(Tabela1).OsRfssomaioresnoprimeirosolvente.Observase,tambm,uma
separaomuitomelhordoscomponentesdoleodelimocomdiclorometanodoquecomhexano.Ouseja,
percebeseomaiorpoderderesoluododiclorometanoparaestamistura.Entretanto,observasetambm
quenohseparaodoscomponentesapolares,sendotodososmonoterpenos(hidrocarbonetoscom10
tomosdecarbono)eludosdamesmaformaemhexano(Rf0,75)ediclorometano(Rf0,79).Adiscussocom
osalunospodeprosseguirconsiderandoaspolaridadesdaslicaedoseluenteseaapresentaodasrie
eluotrpica.
Revelao
Tmseaoportunidadedecompararacapacidadederevelaodecincosistemasderevelaodiferentes.
Observasequeosreveladoresmaisgerais,ouseja,aquelesquerevelamumgrandenmerodegrupos
funcionais,sooiodoeasoluodevanilina.Adiscussopodeprosseguirconsiderandoautilidadede
reveladoresespecficosparaidentificaodegruposfuncionaisespecficos,comocarbonilasdealdedose
cetonascomoreagenteDNFH,ouapresenadeconjugaoedefluorescncia,comaobservaosobluzUV.
Caractersticasestruturaisdoscomponentesdasfraesobtidas
Asfraesobtidaspelaseparaocromatogrficadoextratodelimo,identificadaspelosvaloresdeRfs
(Tabela1),podemsertentativamenterelacionadascomascaractersticasestruturaisdeseu(s)componente(s),
devido,principalmente,aousodosdiversosreveladores.ATabela2apresentaumacorrelaoentreosRfseas
caractersticasestruturaispossivelmentepresentesnoscomponentesdasfraes.
DaanlisedaTabela2,observasequeoscomponentesmaispolares,osoxigenados(menoresRfs),interagem
maiscomaslicadoqueosapolares,oshidrocarbonetos(maioresRfs),nosdoissistemasdeeluio,sendo
queaseparaoentreapolaresepolaresmaiorcomoeluenteapolar.Observasetambmqueos
componenteshidrocarbonetosdoleodelimo,apesardadiversidadeedeestarempresentesemaltas
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propores,11nopodemserseparadosentresinossistemasutilizados.Entretanto,oscomponentespolares
apresentamumagrandeseparaoemdiclorometano,sendoumfatorfacilitadorparaidentificarapresenade
diversosconstituintesnoleodeacordocomacapacidadederevelaoemumououtrorevelador,enquanto
queemhexanopraticamentenoseseparam.
Autilidadedoleodelimoparaoaprendizadodatcnicadecromatografiaemcamadadelgadapodeser
observadapelosresultadosobtidoscomalunosdaUFF,descritosaseguir.
Aplicaoemaula
EstetrabalhofoiaplicadoemumaauladeQumicaOrgnicaIExperimentalcom4hdeduraoparaalunosdo
cursodeQumicadaUFF.Nestaaulafoiutilizadooleodelimoobtidoporextraomecnica.Entretanto,
poderiaserrealizadaadestilaoporarrasteavaporeextraolquidolquidoemaulasanteriores,eoleo
guardadoemgeladeiraataauladeCCD,comresultadossemelhantes.Oleofoisubmetidocromatografia
emcamadadelgadaconformerelatadonaParteExperimental.
Aturmaeradedozealunosefoidivididaemseisduplas.Cadaduplapreparouduascromatoplacas.Umafoi
eludaemhexanoeaoutraemdiclorometano.TodasasduplasrevelaramasduasplacasemUVlongoecurto.
Posteriormente,cadaduplasubmeteuasmesmasduasplacasaumarevelaoqumica,asaber,iodo,vanilina
sulfricaou2,4DNFH,sendoumreveladorqumicoselecionadoparacadaduasduplasdealunos.Osresultados
observadosdasrevelaesforamdesenhadosnoquadro,comparadoseiniciouseumaanlisedosresultados
feitaemconjunto.Inicialmente,observousequeapesardosalunosjteremfeitoexperinciadeCCDno
semestreanterior,elestraziamalgunsconceitosouconcepesequivocadas.Asprincipaisestavam
relacionadasaodesconhecimentodereveladoresdiferentesdalmpadadeUVeaofatodeacharemquea
revelaodeumanicamanchaasseguravaapurezadaamostraanalisada.Comoexperimentorealizadoeles
reformularamessesconceitoseverificaramqueaescolhadoseluentesestrelacionadacomaresoluode
umamisturaeosfatoresderetenoobservados.Puderamverificarquearevelaodeumasubstncia
dependedecaractersticasdesuaestruturaqumica,oudapresenadedeterminadosgruposfuncionais,edo
tipodereveladorusado.
Osalunosavaliaramdeformapositivaoexperimento.Acharamdefcilcompreensoebastanteinstrutivoem
relaoaosprincipaisfundamentosdaCCD.Amudanadeatitudedosalunospdeserobservadaquando,
duranteodesenvolvimentodoprojetofinaldadisciplina(comoformadeavaliao,osalunosdesenvolvemum
pequenoprojetoondeutilizamastcnicasaprendidas),todostiveramapreocupaodeutilizarmaisdeumtipo
deeluenteedereveladornaCCDdasamostrasanalisadas.

CONCLUSES
Nestetrabalhofoipossveldemonstrarqueumaexperinciasimples,empregandoumalimentodeuso
cotidiano,olimo,umafrutabemconhecida,podeserusadacombonsresultadosnoensinodacromatografia
emcamadadelgada(CCD).Ousodedoiseluentesecincosistemasderevelaodiferentespossibilitoua
separaodosconstituintesdoleodelimoemdiversasfraes,deacordocomascaractersticasestruturais
dassubstnciaspresentes.Comestaexperincia,osalunosdeumaturmadaUFFforamapresentados,ao
mesmotempoedeformaarticulada,aosprincpiosdaCCD,tendosidoobservadoqueoaprendizadopelos
alunosfoimaisrpidoeconsistentedoqueanteriormenteverificadocomoutrasexperincias.OensinodeCCD,
comodescritonaaulaproposta,tambmpodesercombinadocomoensinodeoutrastcnicas,taiscomo
destilaoporarrasteavaporeextraolquidolquido.

AGRADECIMENTOS
AS.J.Garden,M.C.SaraivadeMattoseL.M.Vianapelacolaboraonarealizaodestetrabalho.

REFERNCIAS
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Recebidoem9/1/09aceitoem15/4/09publicadonawebem6/10/09

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