Protocolo de Validacion de Diclofenaco Final PDF

Protocolo de validacin
Diclofenaco potsico, tabletas 50mg

Estudiantes Uniatlantico
Gisela Hernndez Oquendo

Bernando Polo Flrez
Brenda Suarez Paternina
Anglica Tovar Jimnez
Kelly Valderrama
UNIVERSIDAD DEL
ATLNTICO
2014-2
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Protocolo de validacin del
mtodo analtico para la
valoracin de Diclofenaco
potsico, tabletas por 50mg
Cdigo: PVD-14
Versin: 001
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Elaborado por :__________________________________Fecha:__________________
Nombre/ Area
YYYY-MM-DD
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Nombre/ rea
YYYY-MM-DD
Aprobado
por:_______________________________________Fecha:___________________
Nombre/rea
YYYY-MM-DD
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Fecha: 29/11/14
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Fecha: 29/11/14
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Armando Bermdez
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PROTOCOLO DE
VALIDACIN
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Tabla de contenido
1.
OBJETIVO .................................................................................................................... 5
2.
ALCANCE ..................................................................................................................... 5
3.
RESPONSABLES ....................................................................................................... 5
4.
FUNDAMENTO DEL MTODO ............................................................................... 5
5.
PARMETROS DE DESEMPEO DEL MTODO ANALTICO ........................ 6
6.
MATERIALES .............................................................................................................. 6
7.
MUESTRA .................................................................................................................... 8
7.1 Productos ................................................................................................................... 8
7.2 Placebos ..................................................................................................................... 8
8.
EQUIPOS ...................................................................................................................... 8
9.
METODO DE ANALISIS ............................................................................................ 8

9.1
Mtodo de anlisis del producto final. .......................................................... 8
9.1.1 Preparacin de soluciones ............................................................................... 8

10.
PARMETROS A EVALUAR .............................................................................. 11

10.1 SELECTIVIDAD ................................................................................................ 11
10.2 SELECTIVIDAD INDICADORES DE ESTABILIDAD ......................... 13
10.2.2
Solucin Stock de Preparacin del Placebo .............................. 13
10.2.3
Solucin Stock muestra............................................................... 13
10.2.4
Solucin Stock materia prima ..................................................... 14
10.3 LINEALIDAD ......................................................................................... 16

10.3.1
Soluciones .................................................................................... 16
10.3.2
Procedimiento .............................................................................. 19
10.3.3
Clculos. ....................................................................................... 20
10.3.4
Criterio de aceptacin .................................................................. 21
10.3.5
Reportar los resultados ............................................................... 21
10.4 EXACTITUD..21
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10.5 PRECISIN..24
10.5.1
PRECISIN INSTRUMENTAL ..................................................... 24
10.5.2
REPETIBILIDAD ............................................................................ 25
10.5.3
PRECISIN INTERMEDIA ............................................................ 26
10.6 ROBUSTEZ...28
ANEXOS....3029
TABLA 16. Reporte de linealidad ................................................................................... 29
TABLA 17. Reporte de exactitud .................................................................................... 30
TABLA 18. Reporte de repetibilidad .............................................................................. 31
TABLA 19. Reporte precisin intermedia ...................................................................... 31
TABLA 21. Reporte de robustez..................................................................................... 32
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VALIDACIN
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1. OBJETIVO
Validar el mtodo analtico utilizado para la valoracin de Diclofenaco Potsico, en
tabletas por 50mg.
2. ALCANCE
El protocolo describe la validacin del mtodo analtico de valoracin por
Cromatografa Liquida de Alta Resolucin (HPLC), para el principio activo
Diclofenaco potsico, en la forma farmacutica de tabletas de 50 mg.
3. RESPONSABLES
El personal descrito a continuacin ser responsable de:
Analista:
Ejecutar los pasos establecidos en el protocolo de validacin y dejar
evidencia documentada de las pruebas desarrolladas.
Documentar todos los resultados que se encuentren fuera de las
especificaciones.
Coordinador de validacin de mtodos analticos:
Elaborar y verificar el cumplimiento del protocolo.
Elaborar el reporte de validacin.
Jefe de desarrollo analtico:
Conocer el procedimiento establecido en el protocolo y vigilar el
cumplimiento del mismo.
Jefe de cumplimiento:
Aprobar el protocolo y el reporte de validacin.
4. FUNDAMENTO DEL MTODO

Para la cuantificacin de Diclofenaco potsico en tableta, se utilizar la tcnica
de Cromatografa Liquida De Alta Resolucin, comparando con un estndar de
concentracin conocida.
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5. PARMETROS DE DESEMPEO DEL MTODO ANALTICO

Las caractersticas de desempeo a valorar en el mtodo analtico corresponden a
la categora I y se relacionan a continuacin:
Selectividad
Especificidad
Linealidad
Exactitud
Precisin
Repetibilidad
Precisin intermedia
Robustez
6. MATERIALES
6.1 Reactivos
Los reactivos utilizados durante la validacin del mtodo de valoracin de
Diclofenaco potsico tabletas son los siguientes:
Tabla 1. Reactivos
REACTIVOS
Solucin amortiguadora de fosfato
Fase mvil
Diluyente
Solucin de resolucin
cido fosfrico
Acido monobsico de sodio
Metanol
Solucin amortiguadora de
fosfato.
Metanol
Agua
ftalato de dietilo
ER Compuesto relacionado A de
Diclofenaco USP
6.2 Materias primas

Las materias primas que se utilizaran durante la ejecucin del este protocolo, son
las siguientes:
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FORMULACIN
Tabla 2. Formulacin Del Producto
Forma farmacutica: Tabletas

Cdigo
Sustancias
20140921
20142511
Diclofenaco potsico
Lactosa monohidrato
Glicolato sdico de almidn
(pH 5.5 7.5)
Povidona
Almidn de maz
alcohol isoproplico, anhidro
refinado
Estearato de magnesio
20142703
20141128
20145623
20148952
20146289
Concentraci
n: 50mg/
tableta
Cantidades
(mg/tableta)
50
85
22
5
4
0.073 mL
2
Figura 1. Estructura del

diclofenaco de potasio
6.3 ESTNDAR
Nombre:
Cdigo:
Registro:
Concentracin:
Fecha de Anlisis
Fecha de re-anlisis:
NOTA: conservar en envases impermeables, resistentes a la luz, almacenar a
temperatura ambiente controlada.
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7. MUESTRA
7.1 Productos:
Tabla 3. Producto
Nombre
Cdigo
DICLOFENACO POTSICO 50 mg
7.2 Placebos:
Los placebos a utilizar durante la valoracin sern suministrados por el
Departamento de Investigacin y Desarrollo
8. EQUIPOS
- Cromatgrafo liquido de alta resolucin (HPLC) marca VWR HITACHI cromaster,
modelo CM5210, serial 1102-005, bomba modelo 5110, automuestreador 5210,
horno 5310, detector de arreglo de diodos 5430.
- Centrifugadora
- Balanza analtica
-Agitador mecnico de vaivn
9. METODO DE ANALISIS
9.1 Mtodo de anlisis del producto final.
9.1.1 Preparacin de soluciones
Solucin amortiguadora de fosfato de pH 2,5: Mezclar volmenes

iguales de cido fosfrico 0,01 M y fosfato monobsico de sodio 0,01 M.
NOTA: Si fuera necesario, ajustar con porciones adicionales de los componentes

adecuados a un pH de 2,5 +0,2.
Fase mvil: Preparar una mezcla filtrada y desgasificada de metanol y una

solucin amortiguadora de fosfato de pH 2,5 en una proporcin de 70: 30.
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NOTA: Hacer ajustes si fuera necesario; por lo que es necesario remitirse al

captulo <621> Aptitud del sistema en Cromatografa
Diluyente: Preparar una mezcla de metanol y agua en una proporcin de

70: 30.
Preparacin estndar: Disolver una cantidad pesada con exactitud, de

ER Diclofenaco Potsico USP en Diluyente, y dilu r cuantitativamente, en
diluciones sucesivas si fuera necesario, para obtener una solucin con una
concentracin conocida de aproximadamente 0.5mg por mL.
Preparacin de valoracin: Pesar y pulverizar finamente no menos de 20

Tabletas. Transferir una porcin del polvo, pesada con exactitud, que
equivalga aproximadamente a 50 mg de Diclofenaco potsico, a un matraz
volumtrico de 100 mL. Agregar aproximadamente 70 mL de Diluyente,
mezclar durante 60 minutos, diluir a volumen con Diluyente, mezclar y
centrifugar.
Solucin de resolucin: Preparar una solucin en Diluyente que contenga

0.4 mg por mL de ftalato de dietilo, 0,5 mg por mL de ER Diclofenaco
Potsico USP y 37,5 mg por mL de ER Compuesto Relacionado A de
Diclofenaco USP.
9.1.2 Sistema cromatogrfico

El cromatgrafo debe tener las siguientes condiciones:
Detector: 254 nm
Columna: 4,6 mm x 6,25 cm con material de relleno L7 (Octadecilsilano) de 5 mm
Velocidad de Flujo: 1 mL por minuto
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9.1.3 Procedimiento
Tabla 4. Orden de Inyeccin y test de idoneidad del sistema
ORDEN SOLUCIN NUMERO DE
TEST DE
ESPECIFICACIN
INYECCIONES ADECUABILIDAD
Solucin
N/A
N/A
1
diluyente
1
2
Solucin
de
resolucin
Resolucin
RSD de las reas.
Solucin
estndar
Muestra (3 1 por
rplicas)
replica
cada RSD de las reas.
La resolucin, R,
entre el ftalato de
dietilo
y
el
compuesto
relacionado A de
Diclofenaco no es
menor de 2,5, y la
resolucin, R, entre
el
compuesto
relacionado A de
Diclofenaco y el
Diclofenaco no es
menor de 3,5.
La
desviacin
estndar
relativa
para
inyecciones
repetidas (5) no es
ms de 2,0%.
La
desviacin
estndar
relativa
para
inyecciones
repetidas (5) no es
ms de 2,0%.
9.1.4 Clculos
Para determinar la cantidad, en mg, de Diclofenaco potsico en cada Tableta
tomada, se debe aplicar la siguiente formula:
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)( )

En donde:
V: es el volumen del matraz empleado para preparar la preparacin de valoracin.
C: es la concentracin, en mg por mL, de ER Diclofenaco Potsico USP en la
Preparacin Estndar.
: rea de pico de Diclofenaco en el cromatograma de la Solucin muestra.
: rea de pico de Diclofenaco en el cromatograma de la Solucin Estndar.
10. PARMETROS A EVALUAR
En esta validacin se tendrn en cuentan aquellos parmetros sugeridos por el
captulo <1225> de la USP 37 NF 32 Validacin de procedimientos farmacopeicos
con relacin a la categora uno Procedimientos analticos para la cuantificacin de
los compones principales de frmacos a granel o ingredientes activo en productos
farmacuticos terminados. Estos parmetros son: Selectividad, Linealidad,
Exactitud (Porcentaje recuperado), precisin (Precisin instrumental, repetibilidad
y precisin intermedia), estabilidad de la muestra y robustez.
10.1 SELECTIVIDAD
Para el desarrollo de la prueba de selectividad se elaborar un placebo de
acuerdo a la formulacin del producto como se indica a continuacin:
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Tabla 5. Formulacin Del Producto

Forma farmacutica: Tabletas
Cdigo
20140921
20142511
20142703
20141128
20145623
20148952
20146289
Sustancias
Diclofenaco potsico
Lactosa monohidrato
Glicolato sdico de almidn
(pH 5.5 7.5)
Povidona
Almidn de maz
alcohol isoproplico, anhidro
refinado
Estearato de magnesio
Concentracin: 50mg/
tableta
Cantidades (mg/tableta)
50
85
22
5
4
0.073 mL
2
10.1.1 Solucin estndar de Diclofenaco potsico:

Remitirse al numeral 9.1.1
10.1.2 Solucin Stock de Preparacin del Placebo (Diclofenaco potsico 50
mg)
Tomar un peso equivalente a 20 tabletas del placebo y trasferir a un matraz
aforado de 100 mL sonicar
y agitar constante hasta la disolucin total de la
cantidad de placebo. Dejar reposar y posteriormente aforar a volumen con la

mezcla metanol /agua.
-Solucin Placebo (Diclofenaco potsico 50 mg):
Tomar una alcuota de 2ml de la solucin stock de la preparacin del placebo y
transferirla a un matraz volumtrico de 100 mL, aforar a volumen con la solucin
de diluyente y mezclar, filtrar la solucin con filtros GHP. De esta forma se obtiene
soluciones con concentraciones tericas de 0.67mg/ml
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10.1.3 Procedimiento
El proceso de inyeccin de las soluciones se realizara atendiendo al siguiente
orden:
Tabla 6. Orden de inyeccin
Solucin diluyente
Solucin estndar
Solucin diluyente
Solucin Placebo (Presentacin de
50mg)
Solucin diluyente
Solucin estndar
1 Inyeccin
1 Inyeccin
3 Inyeccin
2 Inyeccin
2 Inyeccin
2 Inyeccin
1 Inyeccin
10.2 SELECTIVIDAD INDICADORES DE ESTABILIDAD

10.2.1 Solucin estndar de Diclofenaco potsico:
Remitirse al numeral 9.1.1
10.2.2 Solucin Stock de Preparacin del Placebo
aforado de 100 mL sonicar y agitar constante hasta la disolucin total de la
cantidad de placebo. Dejar reposar y posteriormente aforar a volumen con la
mezcla metanol /agua.
10.2.3 Solucin Stock muestra
Tomar un peso equivalente a 20 tabletas del producto y trasferir a un matraz
aforado de 100 mL sonicar y agitar constante hasta la disolucin total de la
cantidad del producto. Dejar reposar y posteriormente aforar a volumen con
la mezcla metanol/ agua.
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10.2.4 Solucin Stock materia prima

Pesar 1000 mg de diclofenaco potsico y transferir a un matraz volumtrico
de 100mL agitar constante hasta la disolucin total de la cantidad de materia
prima. Dejar reposar
y posteriormente aforar a volumen con
la mezcla
metanol / agua.
Una vez preparadas las soluciones stock se tomaran alcuotas tal y como se
enuncia en las siguientes tablas para la realizacin de la evaluacin respectiva:
Tabla 7. Condiciones de degradacin Solucin Stock Placebo
Cdigo de
Identificacin
Solucin
Stock
Alcuota
(mL)
Condicin
5.0
100
Normal
5.0
100
Medio
cido
5.0
100
Medio
bsico
5.0
100
Oxidativas
100
Calor
100
Luz solar
Placebo de
tabletas de 5.0
50 mg de
diclofenaco
5.0
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Volumtrica
final (mL)
5.0
100
5.0
100
4.0
100
Tratamiento
Ninguno
Adicionar 10mL HCl 0.1N, y
calentar a 70C en bao de
agua, por 24 horas
Adicionar 10mL NaOH 0.1N, y
agua, por 24 horas
Adicionar 10mL de Perxido de
Hidrogeno al 3% (v/v) y
calentar a 70C por 48 horas.
Calentar a 70C por 48horas
Exponer por 24 horas en una

volumtrica transparente, a la
luz solar directa.
Luz 254nm volumtrica transparente, a la
luz solar directa.
Luz 365nm volumtrica transparente, a la
luz solar directa.
Adicionar 1mL de solucin de
Oxidativas tricloruro frrico al 1% (w/v) y
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Tabla 8. Condiciones de degradacin Solucin Stock muestra

Cdigo de
Identificacin
Solucin
Stock
Muestra de
50mg
Alcuota
(mL)
Volumtrica
final (mL)
Condicin
Tratamiento
5.0
100
Normal
Ninguno
5.0
100
Medio
cido
5.0
100
Medio
bsico
5.0
100
Oxidativas
5.0
100
Calor
5.0
100
Luz solar
5.0
100
Luz 254nm
5.0
100
Luz 365nm
4.0
100
Oxidativas

agua, por 24 horas
agua, por 24 horas
luz solar directa.
luz solar directa.
luz solar directa.
tricloruro frrico al 1% (w/v) y
Tabla 9. Condiciones de degradacin Solucin Stock Materia prima

Cdigo de
Identificacin
Solucin
Stock
Muestra de
50mg
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Alcuota
(mL)
Volumtrica
final (mL)
Condicin
Tratamiento
5.0
100
Normal
Ninguno
5.0
100
Medio
cido

agua, por 24 horas
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VALIDACIN
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5.0
100
Medio
bsico
5.0
100
Oxidativas
5.0
100
Calor
5.0
100
Luz solar
5.0
100
Luz 254nm
5.0
100
Luz 365nm
4.0
100
Oxidativas

agua, por 24 horas
luz solar directa.
luz solar directa.
luz solar directa.
tricloruro frrico al 1% (w/v) y
10.2.5 Reporte de Resultados

Reportar los resultados obtenidos en la tabla 20.
10.3 LINEALIDAD
10.3.1 Soluciones
Solucin Stock Estndar 1:
Transferir aproximadamente 250 mg del Estndar de diclofenaco potsico,
exactamente pesados, a una volumtrica de 100 mL. Aforar a volumen con
Solucin Diluyente y mezclar. Rotular como Solucin Stock Estndar 1.
(Esta solucin contiene una concentracin terica de aproximadamente 2.5 mg
2500 g de diclofenaco por mL).
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PROTOCOLO DE
VALIDACIN
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Solucin Stock Estndar 2:

Transferir aproximadamente 80 mL del Solucin Stock Estndar 1 de
diclofenaco potsico, exactamente pesados, a una volumtrica de 100-mL.
Aforar a volumen con Solucin Diluyente y mezclar. Rotular como Solucin
Stock Estndar 2.
(Esta solucin contiene una concentracin terica de aproximadamente 2 mg
Solucin Estndar:
Transferir una alcuota de 25 mL de la Solucin Stock Estndar 2 a la respectiva
volumtrica de 100 mL, aforar a volumen con Solucin Diluyente y mezclar. No
usar la solucin despus de 7 das de preparada.
Filtrar una porcin de cada solucin, a travs de filtro GHP de 0.45 m de
tamao de poro.
Solucin Nivel (50%):

Transferir una alcuota de 5.0 mL de la Solucin Stock Estndar 1 a la
respectiva volumtrica de 50-mL, aforar a volumen con Solucin Diluyente y
mezclar. No usar la solucin despus de 7 das de preparada.
tamao de poro.
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tamao de poro.

tamao de poro.

Transferir una alcuota de 15 mL de la Solucin Stock Estndar 2 a respectivas
volumtricas de 50 mL, aforar a volumen con Solucin Diluyente y mezclar. No
tamao de poro.
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Fecha: 29/11/14
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PROTOCOLO DE
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tamao de poro.
El procedimiento es llevado a cabo usando la metodologa analtica descrita en
el tem 8.
Inyectar las soluciones en el orden de inyeccin siguiente:
Tabla 10. Orden de inyeccin de soluciones

Solucin
Diluyente
Resolucin
Estndar
Estndar 1
Nivel 50%
Nivel 50%
Nivel 50%
Nivel 80%
Nivel 80%
Nivel 80%
Nivel 100%
Replicas
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
# Inyeccin
1
1
5
1
1
1
1
1
1
1
1
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PROTOCOLO DE
VALIDACIN
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Nivel 100%
Nivel 100%
Nivel 120%
Nivel 120%
Nivel 120%
Nivel 150%
Nivel 150%
Nivel 150%
Estndar 1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
Pgina: 20 de 33
1
1
1
1
1
1
1
1
1
10.3.3 Clculos.
Elabore una grfica de regresin lineal con las concentraciones versus las reas
de cada solucin, y calcule los siguientes valores empleando el mtodo de los
mnimos cuadrados:
Coeficiente de Correlacin: (r)
Coeficiente de determinacin: (r2)
Intercepto: (a)
Pendiente: (b)
Factor de respuesta: (f)
Desviacin estndar relativa de los factores de respuesta
Desviacin estndar del intercepto: (Sa)
Varianza: (S2yx)
Desviacin estndar de la pendiente: (Sb)
Desviacin estndar del intercepto: (Sa)
La regresin lineal y el valor nominal de la ecuacin al 100% (Obtenido a
partir de la ecuacin).
Intercepto expresado como porcentaje de 100%.
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Cdigo: PVD-14
Versin: 001
Pgina: 21 de 33
Desviacin estndar residual (RSD).
10.3.4 Criterio de aceptacin
Coeficiente de correlacin: (r)
r0.990
Coeficiente de determinacin: (r2)
r20.980
Diagrama de residuales
La distribucin de los puntos debe ser al azar y no refleja ninguna tendencia
Prueba de la pendiente
La desviacin estndar relativa (RSD) de los factores de respuesta es menor o

igual a 2.0%
Prueba Proporcionalidad:
El valor de la interseccin, expresado como un porcentaje del valor y del 100%,

es inferior o igual al 2,0%.
La desviacin estndar residual de la interseccin es menor que o igual a
2.0%.
10.3.5 Reportar los resultados
10.4 EXACTITUD DEL MTODO

Este para metro es medido en trminos de porcentaje de recuperacin.
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Cdigo: PVD-14
Versin: 001
Pgina: 22 de 33
Preparacin de la solucin Stock enriquecida (Diclofenaco potsico 50 mg):

aforado de 200 mL, agregar 1000 mg de diclofenaco potsico ER, sonicar y
agitar constante hasta la disolucin total de la cantidad de placebo. Dejar reposar
y posteriormente aforar a volumen con la mezcla metanol /agua.
SOLUCIN NIVEL 50% DICLOFENACO POTSICO 50 mg (EXACTITUD):
Transferir una alcuota de 5 mL de la solucin Stock enriquecida a una volumtrica
de 100 mL, aforar a volumen con Solucin Diluyente y mezclar.
Filtrar una porcin de cada solucin, a travs de filtro GHP de 0.45 m de tamao
de poro.
Transferir una alcuota de 10 mL de la solucin Stock enriquecida a una
volumtrica de 100 mL, aforar a volumen con Solucin Diluyente y mezclar.
de poro.
500 g de Diclofenaco por mL).

Transferir una alcuota de 15 mL del sobrenadante de la solucin Stock
enriquecida a una volumtrica de 100 mL, aforar a volumen con Solucin
Diluyente y mezclar.
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Cdigo: PVD-14
Versin: 001
Pgina: 23 de 33
de poro.
750 g de Diclofenaco por mL).
Inyectar las soluciones en el sistema cromatogrfico para cada presentacin en
el siguiente orden:
Tabla 11. Orden de inyeccin de soluciones para exactitud
Solucin
Diluyente
Resolucin
Estndar
Estndar 1
Estndar 2
SN 50%
SN 50%
SN 50%
SN 100%
SN 100%
SN 100%
SN 150%
SN 150%
SN 150%
Replicas
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
# Inyeccin
1
1
5
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
10.4.2 CLCULOS
Calcular la concentracin obtenida de diclofenaco potsico en cada nivel en
mg/mL
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Cdigo: PVD-14
Versin: 001
Pgina: 24 de 33
Calcular el porcentaje diclofenaco potsico en cada nivel, mediante la
siguiente formula:
(%) =
(/)
100
(/)
Calcular el porcentaje recuperacin promedio para el Diclofenaco en cada
nivel (Redondear los valores a una cifra significativa).
Calcular el valor de RSD % para cada nivel (Redondeado a una sola cifra
significativa).
10.4.3 CRITERIO DE ACEPTACIN
El porcentaje recuperacin promedio para quince valores debe estar entre el
rango de 90.0%-110.0%.
El RSD total para el porcentaje recuperado de los quince datos obtenidos para
ambas presentaciones debe ser menor o igual 2.0%.
10.4.4 REPORTE DE RESULTADOS
10.5 PRECISIN
10.5.1 PRECISIN INSTRUMENTAL
10.5.1.1 Soluciones
Ver preparacin de soluciones en el item 9.1.1 de este protocolo.
10.5.1.2 PROCEDIMIENTO
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Cdigo: PVD-14
Versin: 001
Pgina: 25 de 33
Inyectar las soluciones en el siguiente orden:

Tabla 12. Orden de inyeccin de soluciones en precisin instrumental
Solucin diluyente
1 Inyeccin
1 Inyeccin
Solucin estndar
1 Inyeccin
10.5.1.3 Criterio de Aceptacin

El RSD 2.0%.
10.5.1.4 Reporte de Resultados
Reportar los resultados obtenidos en la tabla x.
10.5.2 REPETIBILIDAD
10.5.2.1
Solucin
Preparar seis soluciones muestra como se indica en el tem 9.1.1.

10.5.2.2
Procedimiento

Solucin diluyente
1 inyeccin
1 Inyeccin
Solucin estndar
3 Inyeccin
Solucin muestra
1 Inyeccin
Solucin muestra
1 Inyeccin
Solucin muestra
1 Inyeccin
Solucin muestra
1 Inyeccin
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14
Cdigo: PVD-14
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Versin: 001

Pgina: 26 de 33
Solucin muestra
1 Inyeccin
Solucin muestra
1 Inyeccin
10.5.2.3
Criterio de Aceptacin
El RSD 2.0%.
10.5.2.4
Reporte de resultados

10.5.3 PRECISIN INTERMEDIA
10.5.3.1
Solucin
Preparar tres soluciones muestras como se describe en el item 9.1.1 por dos
analista en tres das.
10.5.3.2
Procedimiento
Los factores a ser evaluados son:

Analista:
Analista 1 y Analista 2
Das:
Da 1, da 2, dia 3

Solucin muestra (Analista 1 Da 1)
1 Inyeccin x 3 muestras
Solucin diluyente
1 Inyeccin
1 Inyeccin
Solucin estndar
1 Inyeccin
Solucin diluyente
1 Inyeccin
1 Inyeccin
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14
Cdigo: PVD-14
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Versin: 001

10.5.3.3
Pgina: 27 de 33
Solucin estndar
5 Inyeccin
Solucin diluyente
1 Inyeccin
1 Inyeccin
Solucin estndar
5 Inyeccin
Solucin diluyente
1 Inyeccin
1 Inyeccin
Solucin estndar
5 Inyeccin
Solucin diluyente
1 Inyeccin
1 Inyeccin
Solucin estndar
5 Inyeccin
Solucin diluyente
1 Inyeccin
1 Inyeccin
Solucin estndar
5 Inyeccin
Valor total del RSD para todos los datos debe ser menor o igual al 2.0%
10.5.3.4
Reporte de Resultados
Reportar los resultados obtenidos en la tabla 19

10.6 ROBUSTEZ
10.6.1 Solucin
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Cdigo: PVD-14
Versin: 001
Pgina: 28 de 33
Se prepara la solucin estndar y la tres soluciones muestra cmo se describe en

el tem 8.1.1.
Los parmetros del mtodo analtico a modificar, en sus valores son resumidos en
la tabla 9
Tabla 15. Parmetros de Robustez

Parmetros
Valor 1
Valor 2*
Valor 3
Temperatura de la Columna (C)
25
30
35
Flujo (mL/min)
0.6
0.8
1.0
Volumen de Inyeccin (L)
* Valores especificados en el mtodo. tem 9.1.2
10.6.3 Clculos
Calcular los parmetros para el SST, y los mg por tableta en cada experimento,
deben cumplir con las especificaciones indicadas en el mtodo analtico.
10.6.4 Criterio de Aceptacin

Las especificaciones de la adecuabilidad del sistema (SST por sus siglas en ingls
System Suitability Test) y los resultados para el producto terminado deben cumplir
con lo indicado en el mtodo analtico.
10.6.5 Reportar los resultados
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Cdigo: PVD-14
Versin: 001
Pgina: 29 de 33
ANEXOS
REPORTE DE RESULTADOS PARA LINEALIDAD:
Los resultados obtenidos durante la evaluacin de la linealidad debern ser
registrados en el siguiente formato
TABLA 16. Reporte de linealidad
X
(Concentracin)
Y (rea)
XY
X2
Y2
Factor de
Respuesta
(f) (Y/X)
50%
50%
50%
80%
80%
80%
100%
100%
100%
120%
120%
120%
150%
150%
150%
sumatoria
Coeficiente de Correlacin (r)

Intercepto (a)
Pendiente (b)
Varianza residual (S2y,x)
Desviacin estndar de la pendiente (Sb)
Desviacin estndar del intercepto (Sa)
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14
Cdigo: PVD-14
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Versin: 001

Pgina: 30 de 33
Ecuacin de la lnea recta

Valor Nominal obtenido a partir de ecuacin
[(a)/Valor Nominal]x100
[(Sa)/Valor Nominal]x100
RSD de los factores de respuestas
REPORTE DE RESULTADOS PARA LA EXACTITUD

Los resultados de la evaluacin de la exactitud debern ser reportados en el
siguiente formato
TABLA 17. Reporte de exactitud

NIVEL
(%)
I (50%)
No.
REPLICAS
1
2
3
RECUPERACION
(%)
% RSD
El promedio
recuperado es
entre
90.0%-110.0%
para cada nivel
evaluado y el RSD
para los nueve
niveles es menor o
igual a 2.0%
Promedio
II (100%)
1
2
3
Promedio
III (150%)
CRITERIO
ACEPTACIN
1
2
3
Promedio
Referencia
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14
CONCLUSION
Cdigo: PVD-14
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Versin: 001

Pgina: 31 de 33
REPORTE DE RESULTADOS PARA LA REPETIBILIDAD

Los resultados de la evaluacin de la repetibilidad debern ser reportados en el
siguiente formato
TABLA 18. Reporte de repetibilidad
Inyeccin
rea
No.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Referencia
RSD
Conclusin
El RSD debe ser menor

de 2.0%(verificar )
REPORTE DE RESULTADOS PARA LA PRECISIN INTERMEDIA

TABLA 19. Reporte precisin intermedia
Resultados de la Precisin
Intermedia
Equipo
Da 1
Da 2
Dia 3
Analista 1
HPLC
Promedio
Promedio
RSD
RSD
Promedio
Promedio
RSD
RSD
promedio
Analista 2
Referencia
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Cdigo: PVD-14
Versin: 001
Pgina: 32 de 33
Tabla 20. Reporte de estabilidad de soluciones

Tiempo de almacenamiento
Criterio de Conclusi
condicin 1
Replica No.
Inicial (%y0)
Aceptacin
n
4 das
8 das
1
di (para
2
cada
3
tiempo) es
y1menor o
Promedio
y0-promedio=
y2-promedio=
promedio=
igual a
di=[yipromedio2.0%
d1=
d2=
y0promedio]
REPORTE DE LOS RESULTADOS DE ROBUSTEZ

TABLA 21. Reporte de robustez
Resultados
Parmetros
Resolucin
Especificacin
Exp 1
Nominal
La resolucin, R, entre el ftalato

de dietilo y el compuesto
relacionado A de Diclofenaco no
es menor de 2,5, y la resolucin,
R,
entre
el
compuesto
relacionado A de Diclofenaco y el
Diclofenaco no es menor de 3,5.
Desviacin
Estndar
La desviacin estndar relativa
Relativa
de para inyecciones repetidas (5) no
las
reas es ms de 2,0%.
(RSD)
Asimetra
La asimetra para el pico de

diclofenaco debe ser menor de
2.0.
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14
Exp 2
PROTOCOLO DE
VALIDACIN
Cdigo: PVD-14
Versin: 001
Pgina: 33 de 33
FORMATO DE MODIFICACIONES
En caso de presentarse modificaciones en las caractersticas descritas en este
protocolo, estas debern ser notificadas en el registro que se presenta a
continuacin:
Cdigo
No.
Numero de
modificacin
Elaborado por:
Fecha: 29/11/14
Fecha de
modificacin
Descripcin de
la modificacin
Revisado por:
Fecha: 29/11/14
Responsable para
aprobar los
cambios
Aprobado por:
Armando Bermdez
Fecha: 29/11/14

Protocolo de Validacion de Diclofenaco Final PDF

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Protocolo de validacin

Diclofenaco potsico, tabletas 50mg

Gisela Hernndez Oquendo

Elaborado por :__________________________________Fecha:__________________

FUNDAMENTO DEL MTODO ............................................................................... 5

PARMETROS DE DESEMPEO DEL MTODO ANALTICO ........................ 6

METODO DE ANALISIS ............................................................................................ 8

Mtodo de anlisis del producto final. .......................................................... 8

9.1.1 Preparacin de soluciones ............................................................................... 8

PARMETROS A EVALUAR .............................................................................. 11

Solucin Stock de Preparacin del Placebo .............................. 13

Solucin Stock muestra............................................................... 13

Solucin Stock materia prima ..................................................... 14

10.3 LINEALIDAD ......................................................................................... 16

Criterio de aceptacin .................................................................. 21

Reportar los resultados ............................................................... 21

PRECISIN INTERMEDIA ............................................................ 26

Protocolo de validacin del

4. FUNDAMENTO DEL MTODO

5. PARMETROS DE DESEMPEO DEL MTODO ANALTICO

6.2 Materias primas

Protocolo de validacin del

Forma farmacutica: Tabletas

Figura 1. Estructura del

Solucin amortiguadora de fosfato de pH 2,5: Mezclar volmenes

NOTA: Si fuera necesario, ajustar con porciones adicionales de los componentes

Fase mvil: Preparar una mezcla filtrada y desgasificada de metanol y una

NOTA: Hacer ajustes si fuera necesario; por lo que es necesario remitirse al

Diluyente: Preparar una mezcla de metanol y agua en una proporcin de

Preparacin estndar: Disolver una cantidad pesada con exactitud, de

Preparacin de valoracin: Pesar y pulverizar finamente no menos de 20

Solucin de resolucin: Preparar una solucin en Diluyente que contenga

9.1.2 Sistema cromatogrfico

Protocolo de validacin del

RSD de las reas.

cada RSD de las reas.

Protocolo de validacin del

Tabla 5. Formulacin Del Producto

10.1.1 Solucin estndar de Diclofenaco potsico:

y agitar constante hasta la disolucin total de la

cantidad de placebo. Dejar reposar y posteriormente aforar a volumen con la

10.2 SELECTIVIDAD INDICADORES DE ESTABILIDAD

Protocolo de validacin del

10.2.4 Solucin Stock materia prima

y posteriormente aforar a volumen con

Exponer por 24 horas en una

Protocolo de validacin del

Tabla 8. Condiciones de degradacin Solucin Stock muestra

Adicionar 10mL HCl 0.1N, y

Tabla 9. Condiciones de degradacin Solucin Stock Materia prima

Adicionar 10mL HCl 0.1N, y

Protocolo de validacin del

Adicionar 10mL NaOH 0.1N, y

10.2.5 Reporte de Resultados

Solucin Stock Estndar 2:

Solucin Nivel (50%):

Solucin Nivel (80%):

Solucin Nivel (100%):

Solucin Nivel (120%):

Solucin Nivel (150%):

Inyectar las soluciones en el orden de inyeccin siguiente:

Tabla 10. Orden de inyeccin de soluciones

Elaborado por :________________Fecha: