Universidade de Braslia - UnB

Matria: Gentica Bsica Turma E

Professora: Zulmira Lacava
Alunas: Ana Carolina Macedo Lima 09/0042395
Ariane Mugnano Castelo Branco 09/0003501
Caroline Cardoso Mendes Souza 09/0004485
Clarisse Danielli Silva Albergaria 09/0022807
Jssica Lucena de Oliveira 09/0008057
Laryssa Ribeiro Braga Brito 09/0027710

Terapia Gnica
No momento que o mundo est ameaado pelo ressurgimento de doenas infecciosas,
que a vacina contra a AIDS permanece improvvel, que o cncer mata cada vez mais, a
esperana reside na medicina molecular. Ela comea a cumprir suas promessas.

Braslia - DF,
Julho de 2010.

Introduo

As modernas tcnicas da biotecnologia, em particular a engenharia gentica, tm

apresentado novas possibilidades, como a terapia gnica. medida que avanam os
estudos na engenharia gentica e nos mecanismos que estimulam o funcionamento do
sistema imunolgico, melhores verses e usos da terapia gnica tendem a surgir.
A terapia gnica promete ser uma rea frtil de pesquisas cientfica e clnica que
poder representar uma mudana de paradigma da medicina, com importantes
repercusses para a sociedade. Ela a esperana de tratamento para um grande nmero
de doenas at hoje consideradas incurveis por mtodos convencionais, das
hereditrias e degenerativas s diversas formas de cncer e doenas infeccionais.
O futuro est apenas comeando!

Terapia gnica
Terapia gnica o tratamento de doenas baseado na transferncia de material
gentico. Em sua forma mais simples, a terapia gnica consiste na insero de genes
funcionais em clulas com genes defeituosos, para substituir ou complementar esses
genes causadores de doenas. As tentativas clnicas de terapia gnica atualmente em
curso so para o tratamento de doenas adquiridas, como AIDS, neoplasias malignas e
doenas cardiovasculares, e para doenas hereditrias. Em alguns protocolos, a
tecnologia da transferncia gnica vem sendo usada para alterar fenotipicamente uma
clula de tal modo a torn-la antignica e assim desencadear uma resposta imunitria.
De maneira anloga, um gene estranho pode ser inserido em uma clula para servir
como um marcador genotpico ou fenotpico, que pode ser usado tanto em protocolos de
marcao gnica quanto na prpria terapia gnica.
O panorama atual indica que a terapia gnica no se limita s possibilidades de
substituir ou corrigir genes defeituosos, ou eliminar seletivamente clulas marcadas. Um
espectro teraputico muito mais amplo se apresenta medida em que novos sistemas
so desenvolvidos para permitir a liberao de protenas teraputicas, tais como
hormnios, citocinas, anticorpos, antgenos ou novas protenas recombinantes.

Histrico
A possibilidade de transferir informao gentica de um organismo para outro,
que constitui o fundamento da terapia gnica, conhecida, em bactrias, desde 1944, a
partir da clssica experincia de Avery, McLeod e McCarty. Nas dcadas de 60 e 70, a
idia de transferir genes para curar doenas em humanos tornou-se mais prxima da
realidade: desenvolveram-se linhas de clulas geneticamente marcadas; compreendeu-se
o mecanismo de transformao celular em mamferos pelos vrus polioma e SV40 e,
posteriormente, criaram-se as tcnicas de DNA recombinante permitindo, assim, a
primeira tentativa de transferncia gnica em organismos complexos.
Na dcada de 80, avanos na biologia molecular j permitiam que os genes
humanos fossem seqenciados e clonados. Cientistas que procuravam por um mtodo
para facilitar a produo de protenas tais como insulina pesquisaram a introduo
de genes humanos no DNA de bactrias. As bactrias geneticamente modificadas

passaram, ento, a produzir a protena correspondente, que podia ser recolhida e

injetada em pessoas que no a podiam produzir naturalmente.
Em 14 de setembro de 1990 pesquisadores do National Institutes of Health, nos
Estados Unidos, realizaram a primeira terapia gnica autorizada em Ashanti DeSilva, de
4 anos de idade. Nascida com uma rara doena gentica chamada Imunodeficincia
Combinada Grave, ela no tinha um sistema imunolgico saudvel, e era vulnervel a
todos os germes com que tivesse contato. Crianas com essa doena geralmente
desenvolvem muitas infeces e raramente sobrevivem idade adulta.
Na terapia gentica realizada em Ashanti, os mdicos recolheram glbulos
brancos do corpo da criana, e cultivaram as clulas em laboratrio. No segundo
momento, inseriram o gene que faltava nas clulas e reintroduziram os glbulos brancos
geneticamente modificados na corrente sangnea da paciente. Exames de laboratrio
mostraram que a terapia fortaleceu o sistema imunolgico de Ashanti; ela parou de
contrair resfriados recorrentes e pde voltar a freqentar a escola. Esse procedimento
no a curou; os glbulos brancos tratados geneticamente s funcionaram por poucos
meses, e o processo teve de ser freqentemente repetido.
Embora essa explicao simplificada de terapia gentica possa soar como um
final feliz, apenas um captulo inicial otimista numa longa histria. O percurso at a
primeira terapia gnica autorizada foi conturbado e cheio de controvrsia. A biologia da
terapia gentica em humanos muito complexa, e h ainda muitas tcnicas que
precisam ser desenvolvidas e doenas que precisam ser entendidas de maneira mais
completa antes que a terapia gentica possa ser usada apropriadamente.
Os avanos significativos da gentica humana nas ultimas dcadas propiciaram
um grande impacto na medicina clnica. O conhecimento da intimidade dos 46
cromossomos humanos e dos genes, estruturas complexas que carregam todo o conjunto
de informaes que particularizam cada indivduo, faz com que cada vez mais a
gentica faa parte dos consultrios mdicos.

Tipos de terapia gnica

Teoricamente possvel transformar tanto clulas somticas (a maior parte de
clulas do corpo) quanto clulas germinativas (espermatozides, vulos, e suas clulastronco precursoras).

Terapia gentica somtica o tipo mais comum de Terapia Gentica com

segmentao de genes anormais ou ausentes que ir resultar no tratamento de um nico
paciente sem alterar sua gentica hereditria.
Terapia gnica da linha germinal ocorre no nvel primrio do ovo e esperma.
Consiste em adicionar ou remover DNA que tem efeito sobre doenas hereditrias ou
simplesmente mudar o DNA para as geraes futuras.
Todas as terapias genticas realizadas at agora em humanos foram dirigidas a
clulas somticas, enquanto a engenharia de clulas germinativas continua altamente
controversa. Para que os genes introduzidos sejam transmitidos normalmente para a
descendncia, necessrio no apenas que sejam inseridos na clula, mas tambm que
sejam incorporadas aos cromossomos por recombinao gentica.
A terapia gentica com genes somticos pode ser dividida em duas grandes
categorias: ex vivo (em que as clulas so modificadas fora do corpo e, ento,
transplantadas novamente para o paciente) e in vivo (em que os genes so modificados
nas clulas ainda dentro do corpo). Abordagens in vivo baseadas em recombinao so
especialmente incomuns.

Como funciona?
Na maioria dos estudos a respeito de terapia gentica, um gene "normal"
inserido no genoma para substituir um gene "anmalo" causador de doena. Uma
molcula transportadora, chamada vetor, precisa ser usada para se enviar o gene
teraputico para as clulas-alvo do paciente. As formas de transferncia deste vetor
contendo o gene so muito variadas. Em primeiro lugar, importante definir se mais
apropriado introduzir o gene diretamente no organismo (in vivo) ou se,
alternativamente, clulas sero retiradas do indivduo, modificadas e depois
reintroduzidas (ex vivo). Algumas das formas de transferncia utilizam vrus, dos quais
os principais so os retrovrus, os adenovrus e os vrus adeno-associados. Outras
formas de transferncia incluem a injeo direta do gene no organismo, bem como
mtodos utilizando princpios fsicos (biolstica, eletroporao) ou qumicos
(lipofeco). Atualmente, o vetor mais comum um vrus que foi geneticamente
alterado para transportar DNA humano normal. Vrus evoluram de forma a encapsular
e transportar seus genes para clulas humanas, causando doenas. Cientistas tentaram

aproveitar essa capacidade e manipular o genoma dos vrus, removendo os genes

causadores de doena e inserindo genes teraputicos.
Clulas-alvo, tais como clulas do fgado ou dos pulmes do paciente, so
infectadas com o vetor. O vetor, ento, descarrega seu material gentico, contendo o
gene teraputico humano, na clula-alvo. A produo de protenas funcionais pelos
genes teraputicos restaura as clulas-alvo a um estado de normalidade. A avaliao do
sucesso do procedimento envolve a anlise da manuteno de expresso do gene nas
clulas transformadas e a correo da doena.

Terapia gnica usando um retrovrus como vetor.

Mtodos
Existe uma variedade de mtodos diferentes para substituir ou reparar os genes
focados na terapia gentica.

Um gene normal pode ser inserido num local no especfico no genoma para
substituir um gene problemtico. Essa abordagem a mais comum.

Um gene anmalo pode ser trocado por um gene normal por meio da
recombinao.

O gene anmalo pode ser reparado por meio de mutao reversa seletiva, que
devolve ao gene suas funes normais.

A regulao (o grau em que um gene est ativo ou inativo) de um gene em

particular pode ser alterada.

Vetores para terapia gnica

Os vetores empregados na terapia gnica so basicamente divididos em: vetores
virais, vetores no virais e mtodos hbridos.
Os vetores virais so vrus manipulados geneticamente, de modo a reduzir a sua
patogenicidade, sem anular totalmente o seu poder de infectar as clulas do hospedeiro.
Com as tcnicas da engenharia gentica possvel somar ao DNA do vrus o gene que
se quer transferir a determinada clula. Deste modo, o vrus infectando a clula, trar
consigo uma ou mais cpias do gene desejado.
Os retrovrus possuem a habilidade de integrar o seu DNA dentro dos
cromossomos da clula infectada. Ento, o gene ser inserido no genoma das clulas
hospedeiras e, podem assim ser transmitidos a todas as clulas-filhas das infectadas.
Eles infectam somente as clulas que esto proliferando.
Os lentivrus, como o HIV, permitem tambm transferir material gentico para
clulas que no proliferam (como os neurnios e clulas do fgado) ou para clulas
refratrias para o retrovrus (como as clulas retiradas da medula ssea).
Os adenoassociados de vrus tambm integram o seu DNA ao cromossomo da
clula hospedeira. Eles tm a vantagem de serem inofensivos para a natureza em relao
ao retrovrus, mas no so capazes de transportar genes de dimenses grandes.
Os adenovrus no so capazes de integrar o seu DNA ao cromossomo da clula
hospedeira. Eles podem transportar genes de grandes dimenses, mas a expresso deles
no dura muito tempo.
Vetores no virais: Os lipossomos so essencialmente os nicos vetores no
virais utilizados freqentemente. As esferas de lipdeos podem ser um importante meio
para a transferncia gnica. Em comparao aos vrus, eles tm a vantagem de no

introduzir algum risco em condies de segurana, mas eles no possuem grande

eficincia e so muito seletivos.
Mtodos hbridos: So mtodos que combinam duas ou mais tcnicas, devido a
todo mtodo de transferncia gentica ter falhas.
Virossomos so um exemplo: eles combinam lipossomos com HIV ou vrus da
gripe inativos. Esse mtodo se mostrou mais eficiente na transferncia de genes em
clulas epiteliais respiratrias do que mtodos virais ou lipossomais isolados. Outro
mtodo a mistura de outros vetores virais com lipdios catinicos.

Problemas e perspectivas da terapia gnica

Apesar dos diversos protocolos clnicos aprovados para a transferncia de
genes em humanos, os benefcios reais alcanados at o momento com a terapia gnica
so frustrantes e esto muito aqum das propostas iniciais. Muitas barreiras ainda
necessitam ser transpostas para que sejam alcanados resultados satisfatrios. Os
mtodos de transferncia gnica disponveis, ainda que variados, so pouco eficientes e
apresentam srias limitaes quanto ao direcionamento celular. O desenvolvimento de
sistemas de transferncia gnica hbridos que somem vantagens de vetores virais e novirais pode proporcionar uma melhora na eficincia de transfeco e na manuteno a
longo prazo da expresso do gene de interesse in vivo. Alm disso, a utilizao de
vetores virais em ensaios clnicos em humanos levanta questes sobre a segurana do
mtodo em relao mutagnese insercional e o alto potencial imunognico desses
vrus.
A baixa expresso e a ausncia de mecanismos precisos de regulao do gene
de interesse na clula-alvo dificultam ainda mais o avano da terapia gnica como
ferramenta teraputica. O estudo dos mecanismos relacionados regulao da expresso
gnica pode permitir uma modulao mais refinada das regies promotoras e a
conseqente ativao/represso do gene de interesse in vivo.
Outro ponto importante e que tambm requer maior ateno se refere biologia
da clula-alvo. Uma melhor caracterizao e o desenvolvimento de tcnicas para a
identificao e o isolamento dessas clulas podero facilitar o direcionamento dos
vetores e aumentar a eficincia de transfeco.

Alm disso, a exemplo do que ocorre com toda nova tecnologia, a terapia
gnica tambm tem levantado diversas discusses nos planos ticos e filosficos que
permanecem em debate. Existem hoje grandes discusses acerca das propostas para a
aprovao dos primeiros ensaios clnicos de terapia gnica a serem realizados durante a
vida intra-uterina ou ainda em clulas germinativas como forma de tratamento para
doenas hereditrias. Muitos esforos no campo da pesquisa bsica ainda so
necessrios para que a terapia gnica possa realmente proporcionar uma melhora
significativa e sem riscos aos pacientes e, alm disso, representar uma prtica rotineira
bem-sucedida no futuro. Infelizmente, os conceitos e as idias em torno da terapia
gnica esto, hoje, muito mais avanados do que as metodologias necessrias para
satisfazer seus objetivos.
O conhecimento cientfico deve ser acompanhado pela sabedoria, o que no
tem sido habitual na histria da humanidade. Grandes empresas tm desenvolvido e
tomado posse dessas descobertas, e seu emprego em atividades economicamente
importantes pode no acompanhar o interesse da sociedade como um todo. Estes
assuntos devem ser discutidos amplamente, de modo a permitir um maior nvel de
conscincia da populao em geral. Nos pases mais desenvolvidos, onde a comunidade
acompanha melhor o progresso cientfico, tem sido observada uma diviso muito grande
com relao s opinies sobre a terapia gnica. Os opositores temem, por um lado, as
conseqncias de um processo novo e pouco previsvel, e por outro sua utilizao em
uma nova onda de eugenia, colocando freqentemente a questo "estamos brincando de
ser Deus?". A corrente a favor da experimentao gentica argumenta que esta questo
deveria ser igualmente aplicada utilizao de medicamentos e outros procedimentos
clnicos que alteram o curso normal de qualquer doena, e que o j extenso
desenvolvimento destas pesquisas e seu grande potencial para a cura de doenas que
afetam grande parte da humanidade continuam justificando o investimento. A grande
questo seria: existem limites para a experimentao cientfica? Finalmente, deve ser
lembrado que qualquer mal que possa resultar da pesquisa para a espcie humana no
ser causado por qualquer descoberta, mas sim da utilizao que o homem fizer dela.

Referncias Bibliogrficas
http://www.ufv.br/dbg/trab2002/TERAPIAG/TRG001.htm
http://pt.wikipedia.org/wiki/Terapia_gen%C3%A9tica
http://cancer.battlingforhealth.com/tag/dna/pt/
http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S141381232002000100010&script=sci
http://www.colegiosaofrancisco.com.br/alfa/terapia-genetica/terapia-genetica1.php