UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

CENTRO UNIVERSITARIO DE OCCIDENTE

CARRERA DE MEDICINA. II AO.
AREA DE HISTOLOGIA

PAUTAS PARA EL MANEJO DE LOS ESPECIMENES QUIRRGICOS MS

COMUNES E IMPORTANTES.
ADAPTACION

Recomendaciones Generales Para el Manejo de Especmenes Anatmicos de los

Talleres del rea de Histologa.
Dra. Thelma Lpez Loarca de Rodas.
Patologia Forense.
DOCENTE HISTOLOGIA.
El presente documento debe servir como referencia al estudiante para el manejo,
descripcin y muestreo de los especimenes quirrgicos que sern utilizados
durante los talleres contemplados dentro del programa del curso
Contiene pautas generales que provienen de la experiencia de la prctica de
Patologa Quirrgica en el Instituto Guatemalteco de Seguridad Social, aunque el
Groos room manual, usado durante aos en el Laboratorio de Patologa
Quirrgica del Barnes Hospital de St. Louis, al que dieron difusin los patlogos
quirrgicos de la Universidad de Stanford, ha servido como modelo para muchos
procedimientos.
Las instrucciones han sido adaptadas al nivel del estudiante, de acuerdo a sus
conocimientos y habilidades, a los recursos disponibles, as como a los objetivos
especficos del curso de Histologa.
Durante el desarrollo de la prctica, que se llevar a cabo dentro del aula, ( no en
un laboratorio de Histopatologa), se proceder a: OBSERVAR, DESCRIBIR,
ANALISAR Y REPORTAR LA ANATOMA MACROSCOPICA, as como efectuar
una REVISION DOCUMENTAL DE LA HISTOLOGIA de cada espcimen. Como
tarea, cada uno de los estudiantes revisar el CD-Room de preparados
histolgicos del libro de texto bsico recomendado, y como resultado de trabajo en
equipo, entregarn un reporte escrito, por grupo, con los requisitos indicados en el
programa.
Las dudas e inquietudes sern resueltas en la discusin de grupo, con la docente
tutora.

OBSERVACION:
LOS
ESPECIMENES
PERTENECEN A LABORATORIO PRIVADO DE
PATOLOGIA. SE LES RECOMIENDA TRATAR
CADA UNO DE ELLOS CON RESPETO Y
DELICADEZA PARA SU CONSERVACION.
APENDICE: (APENDICECTOMIA)
Descripcin:
1. Longitud y dimetro mayor.
2. Superficie externa: fibrina? pus? hemorragia? hiperemia?
perforacin? condicin del mesenterio?
3. Pared: alguna lesin localizada?

4. Luz: obliterada? dilatada?; contenido: fecalitos? clculos?

TROMPAS DE FALOPIO: (SALPINGECTOMIA)

Descripcin:
1. Longitud y dimetro mayor
2. Serosa: fibrina? hemorragia? adherencias fibrosas al ovario o a
otros rganos?
3. Pared: espesor normal? ruptura?
4. Mucosa: atrfica? hiperplsica?; aspecto del extremo fimbriado,
invertido?
5. Luz: permeable? dilatada?; contenido; dimetro si es
anormalmente grande.
6. Ndulos: tamao, aspecto, invasin.
7. Quistes en la regin paraovrica: dimetro, espesor de la pared,
contenido: ssiles o pedunculados?
8. En casos de sospecha de embarazo ectpico se identifican la
placenta o el embrin? Cantidad de hemorragia; hay ruptura?

FETO (ABORTO):
Descripcin:
1. Longitud corona-nalgas o corona-taln, sexo y peso.
2. Tiempo aproximado de gestacin.
3. Condicin general: est bien preservado? macerado?
4. Anomalas y otros cambios.
5. Cordn umbilical: aspecto.

VESICULA BILIAR (COLECISTECTOMIA):

Descripcin:
1. Longitud y dimetro mayor de la vescula.
2. Serosa: est engrosada? hay adherencias fibrosas? fibrina?
3. Pared: est engrosada? Si lo est, el engrosamiento es focal o
difuso? hay hemorragias?
4. Mucosa: color, aspecto, ulcerada? hiperplsica? colesterolosis?
5. Conducto cstico: est dilatado? est impactado con clculos?
hay ganglios linfticos presentes? Tamao y aspecto.
6. Volumen aproximado, color y consistencia de la bilis.
7. Clculos: nmero aproximado, forma y tamao, color y aspecto al
corte transversal, tipo de clculo.

RION (NEFRECTOMIA POR UNA CONDICION NO TUMORAL):

Descripcin:
1. Peso y tamao del rin.
2. Cpsula: cantidad de tejido pericapsular, espesor de la cpsula,
adherencias a la cortical.
3. Superficie externa: lisa? Cicatrices: nmero, tamao, forma (son
planas o en V?; hay quistes? (si es as, nmero, tamao, localizacin
y contenido)4. Cortical: color, ancho; hay glomrulos aparentes? las estriaciones
son aparentes y ordenadas?
5. Medular: color, ancho; son aparentes y ordenados los rayos
medulares?
6. Pelvis: tamao; estn dilatadas? son romos los bordes caliciales?
hay engrosamiento? hemorragias? depsitos cristalinos?
Clculos: nmero, tamao y forma, cantidad de grasa peripelviana.
7. Urter: dimetro, longitud, evidencias de dilataciones o estenosis.

8. Arteria y vena renales: apariencia.

RION (NEFRECTOMA POR TUMOR):

Descripcin:
1. Peso y dimensiones de la pieza, longitud y tamao del urter.
2. Caractersticas
del
tumor:
tamao,
forma,
localizacin,
homogeneidad, necrosis, hemorragia, invasin de la cpsula, tejidos
perirrenales, clices, pelvis y vena renal.
3. Rin no comprometido: superficie externa, cortical y medular.
4. Pelvis: est dilatada? estn aplanados los clices? hay clculos?
5. Presencia, nmero, tamao y aspecto de los ganglios linfticos
perirrenales.

INTESTINO GRUESO
TUMORAL):

(COLECTOMA

POR

CONDICIN

NO

Descripcin:
1. Segmento intestinal resecado, longitud de la pieza y cantidad de
mesenterio.
2. Mucosa: tipo de lesiones, extensin, ulceraciones lineales o
transversas, profundidad, seudo plipos, hemorragias, fisuras.
3. Pared: engrosamiento (focal o difuso), atrofia, fibrosis, necrosis.
4. Serosa: fibrina, pus, fibrosis, adherencias del mesenterio.
5. Divertculos: nmero, tamao, localizacin en relacin con las tenias,
contenido, evidencias de inflamacin, hemorragia o perforacin.

INTESTINO GRUESO (COLECTOMIA POR TUMOR):

Descripcin:
1. Parte del intestino resecada, longitud de la pieza y cantidad de
mesenterio.
2. Caractersticas del tumor: tamao (incluyendo el espesor), extensin
alrededor del intestino; forma (vegetante, plano, ulcerado); presencia
de necrosis o hemorragia; extensin a travs de la pared intestinal;
compromiso de la serosa; ndulos satlites; evidencias de invasin
vascular; invasin de rganos adyacentes; distancia entre el tumor y
la lnea pectnea, la lnea de reflexin peritoneal y cada una de las
lneas de reflexin.
3. Otras lesiones intestinales, y aspecto de la mucosa no
comprometida; si no hay plipos, dejar constancia.
4. Estimacin del nmero de ganglios linfticos encontrados; si
aparecen o no comprometidos por el tumor; tamao del ganglio ms
grande.

OVARIO (OOFORECTOMIA):
Descripcin:
1. Forma y tamao; peso si est agrandado.
2. Cpsula: est engrosada? hay adherencias? hemorragias?
rupturas? la superficie externa es irregular o lisa?
3. Superficie de corte: carcter de la cortical, de la mdula y del hilio;
quistes (tamao y contenido); hay cuerpo lteo? calcificaciones?
hemorragias?
4. Tumores: tamao; apariencia externa; es liso o papilar? slido o
qustico?; contenido de las masas qusticas; hay hemorragias,
necrosis o calcificacin?

PLACENTA (UNICA)
Procedimiento y descripcin:
1. Examinar en este orden: membranas, cordn, superficie fetal y
superficie materna.
2. Examinar membranas, fijndose si estn completas,
3. Medir longitud del cordn y la distancia ms corta desde la insercin
del cordn hasta el margen placentario.
4. Examinar el cordn; (insercin no membranosa o membranosa, si
es sta ltima estn intactos los vasos?), nmero de vasos
umbilicales a travs de uno o dos cortes transversales, color, nudos
verdaderos, torsin, estenosis, hematomas, trombosis.
5. Examinar la superficie fetal: color, opacidad, fibrina subcorinica,
quistes (nmero y tamao) amnios nodoso, metaplasma
pavimentosa, trombosis de vasos superficiales, corangioma.
6. Examinar superficie materna: si est completa, las fisuras normales,
laceraciones
(extensin),
reas
deprimidas,
hemorragias
retroplacentarias (tamao y distancia desde el margen).
7. Medir el dimetro mximo, el espesor central, peso y forma.
8. Examinar los cortes transversales en busca de infartos (localizacin,
nmero y tamao), trombos intervellosos (nmero, son o no son
laminados), depsitos de fibrina perivellosos, palidez, consistencia,
calcificaciones (extensin), quistes, tumores.

PRSTATA (PROSTATECTOMA SUPRAPBICA)

Descripcin:
1. Peso de la pieza.
2. Forma, color y consistencia.
3. Presencia de ndulos hiperplsicos, quistes, clculos, reas
sospechosas de carcinoma.

INTESTINO DELGADO (EXTIRPACION):

Descripcin:
1. Longitud y dimetro de la pieza.
2. Mucosa: aspecto; edema? hemorragia? ulceraciones?
tumor? (tamao, localizacin, compromiso circunferencial,
profundidad de la invasin).
3. Pared: espesor, anormalidades.
4. Serosa: fibrosis, peritonitis, adherencias.
5. Ganglios linfticos: tamao y apariencia.
6. Mesenterio: vasos mesentricos.

BAZO (ESPLENECTOMA):
Descripcin:
1. Peso y dimensiones
2. Hilio: naturaleza de los vasos, presencia de ganglios
linfticos o bazos accesorios.
3. Cpsula: color, espesor, cambios focales, adherencias,
laceraciones (localizacin, longitud y profundidad)
4. Superficie de corte: color consistencia, procidencia,
corpsculos de Malpighi (tamao, color, son conspicuos?)
trabculas fibrosas, ndulos o masa, infiltracin difusa?

ESTMAGO (GASTRECTOMA POR TUMOR):

Descripcin:
1. Tipo de reseccin (total o subtotal); longitud de la curvatura
mayor, de la curvatura menor y del manguito duodenal.
2. Caractersticas del tumor: localizacin, tamao, espesor,
forma (vegetante, extensiva, ulcerada), profundidad de la
invasin, compromiso de la serosa, invasin vascular,
extensin al duodeno, distancia de ambas lneas de la
reseccin.
3. Apariencia de la mucosa no neoplsica.

TESTICULO (ORQUIECTOMIA)
Descripcin:
1. Peso y dimensiones del testculo.
2. Longitud del cordn espermtico.
3. Caractersticas del tumor, si est presente: tamao, color,
consistencia,
homogeneidad,
quistes,
necrosis,
hemorragia, huesos, cartlago, extensin del tumor a la
tnica albugnea, epiddimo, cordn y otras estructuras.
4. Caractersticas del testculo no neoplsico: atrofia?
fibrosis? ndulos?

TIROIDES (TIROIDECTOMIA)
Descripcin:
1. Tipo de pieza: lobectoma, ismectoma, tiroidectoma
subtotal, tiroidectoma total.
2. Peso, forma, color y consistencia de la pieza.
3. Superficie de corte: es lisa o nodular?, si es nodular:
nmero, tamao y apariencia de los ndulos (son
qusticos? hemorrgicos? necrticos?, encapsulados o
invasores?, distancia a la lnea de la reseccin.

UTERO (HISTERECTOMIA)
Descripcin:
1. Tipo de histerectoma: total? radical? con salpingoooforectoma?
2. Forma del tero: deformado? abultamiento subserosos?
3. Serosa: adherencias fibrosas?
4. Pared: espesor, anormalidades.
5. Endometrio: apariencia, espesor, plipos? (tamao,
forma) quistes?
6. Cuello:
aspecto
del
ectocrvix,
de
la
unin
ectoendocervical, del canal endocervical; hay erosiones?
plipos? quistes?
7. Leiomiomas: nmero, localizacin (subserosa, intramural,
submucosa) tamao: son ssiles o pedunculados? hay
hemorragia, necrosis o calcificacin? hay ulceracin del
endometrio que los cubre?
ESOFAGO:
Descripcin:
1. Longitud y dimetro o circunferencia de la pieza.
2. Tumor:
apariencia
(vegetante?-bordes
enrollados?ulcerado?)
compromete
toda
la
circunferencia?,

3.

4.
5.
6.

prodfundidad de la invasin extensin a estmago, distancia

entre ambas lneas de reseccin.
Mucosa: apariencia de mucosa no neoplsica, mucosa
esofgica reconocible o no distal al tumor, dilatacin de la
luz, proximal al tumor.
Pared: engrosada? Vrices?
Estomago: descripcin si est presente.
Ganglios linfticos: nmero encontrado, tamao del ms
grande.

LARINGE:
Descripcin:
1. Tipo de laringectomia: total, hemigltica, supraglotica o infragltica,
presencia de faringe o vaciamiento cervical.
2. Caractersticas del tumor: localizacion, extensin, tamao, ulceracin,
profundidad de la invasin, es gltico, supra-infra o transglotico? Cruza la
lnea media? hay extensin extra-larngea? Caractersticas de la mucosa
no neoplsica, especialmente en cuerdas vocales verdaderas.
PENE:
Descripcin:
1. Tipo de operacin: parcial, total, con o si piel escrotal, testculos, ganglios
inguinales.
2. Longitud y dimetro de la pieza.
3. Tumor: localizacin en relacin al glande, prepucio, pie y uretra; tamao,
color, bordes, profundidad de la invasin.
4. Glande: hay balanitis? Atrofia? Leucoplasia?
5. Uretra: est invadida por el tumor?
MAMA:
Descripcin:
1. Lado (derecho o izquierdo) y tipo de mastectoma: superradical, radical,
modificada, simple, subcutnea.
2. Enumeracin de las estructuras includas en la pieza: pezn, mama,
musculos pectorales mayor y menor, fascia, tejido axilar, estructuras de
pared torcica.
3. Peso y dimensiones (longitud mayor de la piel y longitud perpendicular a
sta).
4. Caracteristicas de la apariencia externa:
a. Forma y color de la piel
b. Localizacin y extensin de cambios cutneos:cicatrices, incisiones
quirurgicos recientes, eritema, edema, aplanamiento, retraccin,
ulceracin.
c. Apariencia del pezn y la arola: ulceraciones, retraccin, ulceracin,
inversin.
d. Localizacion de lesiones y otras caractersticas, las que pueden
designarse estableciendo su distancia desde el pezn y el cuadrante
al que pertenecen, o en direccin de las agujas del reloj.
e. Descripcin de las anormalidades de la palpacin si las hay.
5.Caracteristicas de la superficie de corte
a. Cantidades relativas de grasa y parnquima.
b.
Quistes y conductos dilatados: tamao, nmero, localizacin,
contenido.

c. Ndulos: cuadrante y distancia desde el pezn, profundidad por

debajo d la piel, tamao, forma consistencia, color, necrosis,
hemorragia, calcificacin relacin o adherencias a la piel, msculos,
fascias o pezn.
d. Ganglios linfticos si estn presentes: nmero de ganglios en cada
grupo, tamao del ganglio ms grande.
AMIGDALAS PALATINAS:
Descripcin:
a. Tamao de la pieza.
b. Aspecto de la superficie de corte: color, nodularidad, hemorragia , necrosis
c. Si hay tumor, caractersticas del tumor: tamao, forma (ulcerado, polipoide)
, distancia a los margenes.
GLANDULA SALIVAL:
Descripcin:
a. Tamao de la pieza
b. Aspecto de la superficie de corte: color, nodularidad, hemorragia, necrosis.
c. Si hay tumor, caractersticas del tumor: tamao, forma (ulcerado, polipoide),
distancia a los mrgenes.
PANCREAS:
Descripcin:
d. Tamao de la pieza
e. Aspecto de la superficie de corte: color, nodularidad, hemorragia, necrosis.
f. Si hay tumor, caractersticas del tumor: tamao, forma (ulcerado, polipoide),
distancia a los mrgenes.

BIBLIOGRAFIA
1. ROSAI, Juan. SURGICAL PATHOLOGY. X Edicin. 2009.
Mosby-Year Book, Inc.
St. Louis, Missouri 63146.
2. STERNBERG, Stephen. SURGICAL PATHOLOGY OF
THE
FEMALE
REPRODUCTIVE
SYSTEM
AND
PERITONEUM. 2010. Raven Press, Ltd. Hong Kong.
1. WEIDNER, Noel. THE DIFFICULT DIAGNOSIS IN
SURGICAL PATHOLOGY. 2011. W.B. Saunders
Company. Philadelphia, Pennsylvania 19106.

UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA.

CENTRO UNIVERSITARIO DE OCCIDENTE.
CARRERA DE MEDICINA.
AREA DE HISTOGIIA. II AO.

LA HISTOLOGIA Y SUS METODOS DE ESTUDIO

Dra. Thelma Lpez Loarca de Rodas.
Patloga Forense.
DOCENTE DE HISTOLOGIA.
GENERALIDADES
El vocablo HISTOLOGA, proviene del griego histos, tejido, y logos, tratado. Es la
ciencia que trata de los tejidos. Este trmino fue utilizado por primera vez con
sentido biolgico por Bichat, anatomista y fisilogo francs, quien sinti gran
curiosidad por las contexturas de las diversas capas y estructuras que analiz al
disecar el cuerpo. Las observaciones microscpicas confirmaron que el organismo
est integrado por diferentes tejidos, y que las clulas constituyen las unidades
vivas fundamentales con las cuales se forman animales y plantas.
Las clulas pueden ser observadas en estado vivo. Comnmente se obtiene
informacin al estimular la multiplicacin de las clulas en sistemas de cultivo, que
pueden ser estudiados por medio del microscopio y mtodos afines. (Estudios in
Vitro). En ste mtodo, muchas clulas no dejan de realizar sus funciones,
inclusive fuera del cuerpo, e incluso, si se les suministra l medio apropiado en el
cultivo, pueden pasar por fases mayores de especializacin y expresar nuevas
caractersticas y funciones. Sin embargo el medio artificial in Vitro, en el que estn
las clulas fuera del cuerpo, rara vez sostiene el patrn de organizacin
intercelular que tenan y hasta puede afectarse la forma en que se desarrollan. Por
medio de tcnicas microquirrgicas es posible operar a las clulas in Vitro, por
ejemplo, se puede transplantar el ncleo de una clula a otra, inducir fusin de
clulas de dos tipos o especies diferentes, etc.
La totalidad del conocimiento actual, referido a la estructura y funcin de los
organismos biolgicos se fundamenta en los METODOS DE INVESTIGACIN DE
LAS CLULAS Y LOS TEJIDOS. En algunos casos, los grandes avances en la
comprensin y el conocimiento fueron consecuencia DIRECTA DE UNA NUEVA
TECNICA.
La creacin de la microscopa electrnica, los mtodos de fraccionamiento celular,
la inmunocitoqumica y la tecnologa del DNA son claros ejemplos.
Es necesario contar con ciertos conocimientos respecto de los principios
fundamentales de los mtodos aplicados con mayor frecuencia, PARA QUE EL
ESTUDIO DE LA HISTOLOGIA NO SEA TAN SOLO EL APRENDIZAJE DE
DETERMINADOS HECHOS, SINO QUE ADEMS PERMITA ADOPTAR UNA
POSTURA CRITICA FRENTE A ELLOS.
CLASIFICACIN DE LOS METODOS HISTOLOGICOS
o Observacin directa de clulas y tejidos vivos
o Anlisis de material muerto o inanimado
o Tcnicas de aislamiento de componentes de clulas vivas a travs
de centrifugacin.
En TODOS los casos se comienza con EL ANLISIS MICROSCOPICO.
ANALISIS MICROSCOPICO
El microscopio es el instrumento ms importante en la histologa, debido al
pequeo tamao de las estructuras analizadas.

Cuando la luz atraviesa un material biolgico, por ejemplo un preparado

histolgico, cambian sus caractersticas, y estas modificaciones se hacen visibles
a travs de los sistemas de lentes. El ojo puede diferenciar variaciones de
intensidad de la luz y color, en consecuencia es necesario modificar la luz para
que el preparado se observe formado por elementos oscuros, claros o de colores.
Las clulas y los tejidos no coloreados, se suelen captar con el microscopio de luz,
como carentes de luz y transparentes, y, con la ayuda de tinciones histolgicas se
obtiene una absorcin diferencial de la luz, para la visualizacin de estructuras.
Microscopa ptica:
Un microscopio, ya sea simple (una sola lente) o compuesto (mltiples lentes), es
un instrumento que aumenta el tamao de una imagen y permite ver mayores
detalles de lo que sera posible a simple vista.
El poder de resolucin del ojo humano, o sea la distancia que debe haber entre
dos objetos para que se vean separado y no parezcan una solo (0.2 mm), est
determinado por el espacio que hay entre las clulas fotorreceptoras
contiguas de la retina. La funcin de un microscopio es la de ampliar una
imagen hasta un grado en el cual la retina pueda resolver la informacin, que
de otro modo estara por debajo de su lmite de resolucin.
LA RESOLUCIN depende no solo del sistema ptico sino tambin de la longitud
de onda de la luz y de otros factores, tales como: EL ESPESOR DE LA
MUESTRA, LA CALIDAD DE SU FIJACION Y LA INTENSIDAD CON QUE EST
TEIDA.
En la investigacin biolgica moderna se dispone de diversos microscopios
pticos para uso general o especializado, mencionaremos algunos:
o MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO
o MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASE
o MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO
o MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA
o MICROSCOPIO CONFOCAL DE BARRIDO
o MICROSCOPIO DE LUZ ULTRAVIOLETA
o MICROSCOPIO DE POLARIZACION
o MICROSCOPIO ELECTRONICO
Microscopio de Campo Claro:
Es el ms utilizado por estudiantes e investigadores, es descendiente directo de
los microscopios usados en el siglo XIX, sus componentes son los siguientes:
Fuente luminosa
Lente condensadora
Platina
Lente objetivo
Lente Ocular.
Para que una muestra pueda observarse con el microscopio ptico de campo
claro, tiene que ser suficientemente fina, para que la luz pase a travs de ella,
adems es necesario utilizar tcnicas de coloracin
Microscopio de Contraste de Fase:
Permite examen de clulas y tejidos no teidos, de especial utilidad para estudiar
clulas vivas. Aprovecha las pequeas diferencias en el ndice de refraccin que
hay en diferentes partes de una muestra de clulas o tejidos. Existen dos subtipos:
el de interferencia, que tambin cuantifica masa tisular, y el de interferencia
diferencial, para evaluar propiedades de superficie de las clulas y otras muestras.
Microscopio de Campo Oscuro:
La lente objetivo no capta luz directa proveniente de la fuente luminosa, solo los
rayos de luz refractados por las estructuras de la muestra, para lograrlo el
microscopio posee un condensador especial que ilumina el preparado con mucha
intensidad y de manera MUY oblicua, as el campo se ve oscuro y destacan solo
las partculas pequeas de la muestra que reflejan la luz y aparecen brillantes. La
resolucin de ste microscopio no es mejor que la del de campo claro peo, por el

contraste obtenido se detectan partculas ms pequeas. En la investigacin este

microscopio se usa para examinar preparados radio autogrficos, en los cuales los
grnulos de plata se ven blancos sobre el fondo negro. En clnica, sirve para
detectar cristales en orina y para identificar espiroquetas.
Microscopio de Fluorescencia:
Aprovecha la capacidad de ciertas molculas de fluorescer bajo la luz ultravioleta.
Detecta molculas con auto fluorescencia, como la vitamina A y algunos
neurotransmisores, sin embargo el verdadero uso de este microscopio consiste en
estudiar la fluorescencia secundaria, como cuando se quieren detectar antgenos
o anticuerpos con tcnicas de inmunocitoqumica, de gran utilidad en el estudio de
uniones intercelulares (tipo nexo), trayecto de fibras nerviosas o marcadores
fluorescentes en tejidos mineralizados.
Microscopio Confocal de Barrido:
Combina los componentes del microscopio ptico de campo claro, con sistema de
barrido para disecar ptimamente una muestra. Es un sistema relativamente
nuevo, utiliza un sistema de iluminacin lser convergente, produciendo un punto
de barrido muy superficial. Un sistema de espejos mueve el haz lser sobre la
muestra de manera que se ilumine un punto a la vez, los datos de cada punto de
la muestra barrida por este punto se registran y almacenan por un ordenador
(computadora), sta informacin se enva a un monitor de alta resolucin para
crear una imagen visual ntida, (en este aspecto se parece a la Tomografa Axial
computarizada), usa escasa profundidad de la imagen en foco, y es posible crear
mltiples imgenes de distintas profundidades de una muestra muy delgada ( de 1
micrmetro de espesor), siendo posible a la vez tener imgenes tridimensionales,
pudiendo rotarse y verse desde cualquier ngulo.
Microscopio de Luz Ultravioleta:
Utiliza lentes de cuarzo con una fuente de luz UV, y la imagen depende de la
absorcin de la luz UV por las molculas de la muestra. Tiene un funcionamiento
similar al de un espectrofotmetro, pero los resultados se registran en una placa
fotogrfica. La muestra no puede inspeccionarse en forma directa a travs del
ocular, porque la luz UV no es visible y lesiona al ojo. Es til para detectar cidos
nucleicos, protenas de aminocidos, o evaluar el grado de ploidia en tumores.
Microscopio de Polarizacin:
Se fundamenta en el hechote que las molculas pueden rotar el ngulo del plano
en que vibra la luz polarizada. Este microscopio es una modificacin del
microscopio ptico de campo claro, con un filtro llamado polarizador, y otro
llamado analizador. Ambos pueden rotarse, y la diferencia entre sus ngulos de
rotacin determina el grado en el que una estructura afecta el haz de luz
polarizada. La capacidad de los cristales o sustancias para cristalinas de rotar el
plano de luz polarizada recibe el nombre de birrefrigencia.
Microscopio Electrnico:
Hay dos tipos:
Microscopio Electrnico de Transmisin (MET)
Microscopio Electrnico de Barrido (MEG)
El MET utiliza un haz de electrones con la muestra para producir una imagen, (en
lugar de un haz de luz, como el microscopio ptico). As:
Una fuente (filamento de tungsteno calentado) que emite electrones:
ctodo.
Los electrones son atrados hacia un nodo.
La diferencia elctrica entre ctodo y nodo produce un voltaje de
aceleracin, generando un haz
Este haz atraviesa lentes electromagnticos, con la misma funcin
de las lentes de cristal de un microscopio ptico.
La imagen final se ve en una pantalla fosforescente, que puede
fotografiarse o vdeo grabarse.
La preparacin e las muestras es similar a la de microscopa ptica,
excepto por el uso de mtodos ms refinados.

PREPARACION DEL TEJIDO

LA TECNICA DE PARAFINA ES LA QUE SE UTILIZA EN
GUATEMALA PARA PREPARAR CORTES DE TEJIDO, AS MISMO
EL CORTE DE RUTINA TEIDO CON HEMATOXILINA Y EOSINA
ES LA MUESTRA QUE MAS FRECUENTEMENTE SE ESTUDIA.
LA TECNICA ESTNDAR INCLUYE LAS FASES SIGUIENTES:
MUESTRA DE TEJIDO: un fragmento pequeo de tejido, llamado bloque,

se obtiene por biopsia (procedimiento que consiste en la extraccin de un

fragmento con fines diagnsticos o la ablacin quirrgica o la toma en un
cadver). La diseccin debe hacerla una persona capacitada y hbil, con
instrumental adecuado para obtener una buena muestra.
FIJACIN: una vez obtenida la muestra, debe de colocarse una solucin
fijadora, para CONSERVAR LA ESTRUCTURA. En general la fijacin se
obtiene mediante el empleo de sustancias qumicas individuales o
mezcladas, que detienen el metabolismo celular, evitando la degeneracin
post-mortem y los cambios que deforman la estructura de clulas y tejidos,
endureciendo los tejidos blandos. Gran parte de sta accin se atribuye a
la coagulacin de protenas, (algunos fijadores son ms eficaces que
otros), estableciendo enlaces cruzados entre las molculas o causando la
desnaturalizacin y precipitacin de la mismas, al sustituir el agua.
Adems el fijador evita que las enzimas hidrolticas que quedan en libertad
al morir las clulas degraden los componentes hsticos; tambin la
coagulacin hace que queden en su sitio ciertas macromolculas que
contienen carbohidratos y grasas, que de otra manera se perdera durante
el procesamiento histolgico. Adems muchos fijadores son antispticos
potentes, que destruyen bacterias en tejidos infectados, y adems la
FIJACIN MEJORA LAS CARACTERSTICAS DE TINCIN DEL TEJIDO.
La solucin fijadora ms utilizada el formaldehdo al 4% en solucin
acuosa, hasta obtener un pH neutro (FORMOL).
DESHIDRATACIN: el principio de la tcnica a la parafina es sustituir con
dicha sustancia el agua que inicialmente estaba en el tejido, para as cortar
fcilmente el bloque de tejido. Se realiza en dos fases: la primera es una
deshidratacin gradual, logrndose al pasar la muestra en alcohol
isoproplico en diferentes potencias, hasta llegar al absoluto, en un tiempo
determinado.
ACLARAMIENTO: como el alcohol no es un solvente de la parafina, se
utiliza el xilol en esta etapa, tambin en pasos sucesivos, en un tiempo
determinado, para sustituir el alcohol por xilol en la preparacin para la
inclusin.
INCLUSION EN PARAFINA: para poder examinar la muestra hay que
infiltrarla en un medio de inclusin, en este caso parafina derretida,
caliente, (en el mercado existe parafina purificada con polmeros plsticos
con pesos moleculares regulados), con un punto de fusin de 56oC. La
parafina llena los espacios antes ocupados por el agua, y al endurecerse,
cuando se enfra, hace que el bloque est listo para el corte. (Para efectuar
los pasos desde la fijacin hasta la inclusin existe equipo especializado,
mecnico o computarizado, conocido como PROCESADOR DE TEJIDOS).
CORTE: Una vez hecho el bloque o taco, de tamao adecuado, se coloca
en una mquina cortadora especial, EL MICRTOMO, para hacerlo en
rebanadas de 4 micrmetros, con una cuchilla de acero. Si se necesita

cortes ultra finos, se incluye el tejido en plstico o resina epxica, en vez

de parafina. Los cortes obtenidos se montan sobre portaobjetos de vidrio, a
los que se les ha aadido albmina para que funcione como adhesivo.
TINCION Y MONTAJE: Dado que los cortes de parafina son incoloros, la
muestra an no est lista para su examen bajo el microscopio ptico. Para
colorear o teir los cortes histolgicos, la parafina debe disolverse y
extraerse, de nuevo con xilol (xileno) y los tejidos deben rehidratarse
tambin a travs de alcoholes de concentracin decreciente. El corte en la
laminilla, est listo para tincin; casi todas las tcnicas de tincin se hacen
con soluciones acuosas, para que la parafina que ha penetrado en el corte
sea sustituida por agua. La mayor parte de los mtodos de tincin
histolgicos se desarrollaron funcin de su capacidad para teir
selectivamente los distintos componentes tisulares. El mtodo de tincin
ms utilizado es la combinacin de HEMATOXILINA Y EOSINA, que tie
los componentes nucleares de azul violceo, mientras que casi todas las
estructuras citoplasmticas adquieren una tonalidad rosada. En
consecuencia la tincin con HE, muestra con nitidez la forma y la
estructura del ncleo, adems de la forma y extensin de la clula. La
tincin histolgica es un procedimiento qumico, y actualmente se ha
producido un gran desarrollo en los mtodos que informan la composicin
qumica de las clulas y tejidos. Luego del procesamiento de tincin, la
muestra de tejido se monta, se cubre con una gota de medio de montaje
transparente (DEPEX, EUKITT), se coloca un cubreobjeto para proteger el
preparado, y el tejido est listo para ser examinado al microscopio.

CORTES POR CONGELACION

Siempre que haya alguna urgencia en cuanto a la necesidad de hacer cortes
de tejidos, como durante una operacin quirrgica, que requiere confirmacin
rpida de un diagnstico, es posible preparar el tejido a travs de cortes por
congelacin. El tejido se congela con rapidez a base de nitrgeno lquido, y
se corta en un gabinete refrigerado, por medio de un criostato, que conserva
la cuchilla del micrtomo y el tejido a temperaturas inferiores durante toda la
operacin de corte.

PROBLEMAS EN LA INTERPRETACION DE CORTES DE

TEJIDO

ARTEFACTOS: el artefacto es un cambio artificial en el corte

preparado, consecuencia de un accidente o tcnica inadecuados:
DEGENERACIN POSTMORTEM.
CONTRACCION
PRECIPITADO
PLIEGUES Y ARRUGA
MUESCAS DE LA CUCHILLA
MANEJO BURDO DE LOS TEJIDOS

BIBLIOGRAFIA
7. EVENNETT PJ, Light microscopy, Image anlisis in
histology. Ugeskr Laeger, 1992; 154: 1487-1491.
8. DIXON K, Principles of some tinctorial an cytochemical
methods. An introduction to the Biology of Skin. Oxford,
Blackwell, 1985.
9. HOPWOOD D, Cell and Tissue Fixation 1972-1982.
Histochem J. 1985; 17: 389-442.