Practica No.

7
Factores que influyen sobre la actividad
enzimtica
Equipo 1
Integrantes:

Daz Lpez Mnica

Fuentes Mrquez Bryan Omar
Salome Mndez Karen
Trejo Solrzano Alejandra

Introduccin:
Todas las reacciones qumicas que ocurren dentro de los seres vivos estn
catalizadas por las enzimas, las cuales cumple con la funcin de catalizadores
para acelerar la velocidad de las reacciones qumicas.
Como catalizadores las enzimas solo aceleran las reacciones que se pueden
dar de manera espontnea ms no hacen que sucedan aquellas reacciones
imposibles. Las enzimas hacen posible reacciones que sin ellas requeriran
condiciones elevadas de pH o temperatura.
Cabe destacar que las enzimas funcionan como catalizadores especficos, sea
que cada enzima acta en un tipo de reaccin y mayoritariamente sobre un
sustrato o grupo de ellos.
El sustrato se une a la regin de la enzima conocida como centro activo
(formado por aminocidos en contacto con el sustrato, adems de un sitio
cataltico formado por aminocidos implicados en la reaccin. Cuando la
reaccin termina y se ha formado el producto la enzima puede volver a
comenzar otro ciclo de reaccin, ya que la enzima no se consume durante la
reaccin.
Algunos factores que influyen sobre la actividad de las enzimas son el pH, la
temperatura y los inhibidores.
El pH recomendado para la accin de las enzimas es de 6 a 8, aunque algunas
pueden actuar en un pH de 1.5 a 2, muy cido. Dentro de las temperaturas la
recomendada es de 35C a 45C, despus de sobrepasar la temperatura lmite
las enzimas comienzan a desnaturalizarse, asimismo por cada 10C de
temperatura la velocidad de la enzima aumenta.

Los inhibidores actan buscando la reduccin o eliminacin de la actividad

enzimtica o de su accin catalizadora. Pueden ser de dos tipos: Irreversibles y
reversibles. Los primeros dejan inactiva a la enzima y los segundos se unen a
la enzima mediante puentes de hidrgeno o enlaces inicos, no presentan
reacciones qumicas cuando se unen a la enzima y pueden ser fcilmente
eliminados.

Objetivo general:
Reconocer la accin de una enzima y algunos factores que afectan la actividad
enzimtica.
Objetivos especficos:
*Reconocer la accin de enzimas que hidrolizan al almidn
*Estudiar algunos factores que afectan la actividad enzimtica: temperatura,
concentracin de sustrato y de enzima.

Problema biolgico:
Qu tanto influirn los diversos factores durante la accin de las enzimas?

Hiptesis:
La eficacia de la actividad de la enzima se ver afectada por los factores que
influyen sobre ella.

Resultados:

1. Extraccin de una enzima.

Se realiz la extraccin de una enzima para comprobar los factores que
influyen en la actividad enzimtica mediante diversos experimentos.

Extracto
enzimtico
Polvo
acetnico de
levadura
Fig1. Muestra el aspecto del
extracto obtenido y del polvo
acetnico de levadura
2. Observacin de la accin cataltica del extracto enzimtico libre de
clulas
Se realizaron diferentes reacciones en dos vidrios de reloj midiendo el tiempo
determinando y cantidad de azcar formado para observar la accin cataltica .
Reacciones en vidrios de
reloj

Vidrio A: 0.5ml de
agua

Vidrio B: 5ml de
sacarosa

Tiempo (min)
No. tira
Vidrio A
0
1
0
2
2
0
4
3
0
10
4
0
3. Reaccin de Benedict para identificar azucares reductores.
Para el experimento se prepararon las siguientes soluciones.

Vidrio B
250(15)+
250(15)+
250(15)+
500(30)+

Glucosa y
reactivo

Sacarosa y
reactivo

Fig2. Experimento de identificacin de

azucares reductores.

Fig3. Tobos testigos

4. Accin enzimtica de germinados de vegetales

Para el experimento se colocaron diferentes macerados de vegetales
germinadas en gelosa-almidn.

Alfalf
a

Lentej
a

Saliva
Trigo
Soya

Fig2. Muestra halos formados despus

de dejar la caja Petri 24hrs en el
refrigerador.

rea
Circulo pequeo
rea
Circulo grande

A=r2
=3.1416
r=0.5
A=r2

Operacin
A=(3.1416)(0.5)2
rea del
halo=
Acg - Acp
1

Operacin

Resultado
(cm2)
0.7854
Resultado
(cm2)

(3.1416)(1)2=
A= 3.14162.3562
3.1416
0.7854
3.1416)
2
A= 1.76710.9817
2
(0.75) =
0.7854
1.7671
=3.1416
3.1416)
3
A=4.9087-0.7854
4.1233
2
r=1.25
(1.25) =
4.1233
=3.1416
3.1416)(1.4)2=
4
A=6.1575-0.7854
5.3721
r=1.4
6.1575
=3.1416
3.1416)
5
A=4.9087-0.7854
4.1233
2
r=1.25
(1.25) =
Tabla 2 y 3. Muestran
el procedimiento para obtener el rea de los diferentes halos
4.1233
=3.1416
r=1
=3.1416
r=0.75

formados. Donde Acg = rea del circulo grande y Acp = rea del circulo pequeo

Anlisis de resultados y discusin:

Por medio de los experimentos realizados pudimos conocer la actividad
enzimtica. En el experimento de la glucocinta, de acuerdo a los resultados
obtenidos observamos que en el vidrio de reloj con agua y solucin enzimtica
no ocurri un cambio ya que las enzimas no se activan al no tener como
sustrato glucosa lo cual en la fila b si se logra cambiar de color debido a que
contiene sacarosa y las enzimas ayudan a obtener glucosa fructosa. Fig.1
Por medio de los tubos con sacarosa y glucosa con reactivo de benedict
podemos identificar las azucares reductoras el cambio del tubo con glucosa a
un color naranja es debido a que esta es una azcar reductora, la sacarosa no
cambia de color porque no es una azcar reductora.
Los macerados de distintas semillas o distintos extractos se colocan en la caja
Petri para observar la cantidad de glucosa contenidos, por eso las que tuvieron
mayor actividad enzimtica fueron los de mayor rea obtenida al dejar en
refrigeracin nuestra caja Petri.

Cuestionario:
1-. Cmo demostrara que la levadura se encuentra muerta despus
del tratamiento con acetona fra?
Porque ya no hay presencia de protenas y est deshidratada la clula. Se
puede observar al microscopio, para as comprobar que no est viva la clula.
2-. Si observa las tiras de glucocinta de la fila B desde el tiempo cero,
se nota que gradualmente va apareciendo un tono verde en ella
mientras se encuentran hmedas. Esto no se desarrolla en la muestra
comparativa de la fila A. A qu lo atribuye?
A que en la fila a no hay presencia de glucosa, mientras que en la fila b al
haber sacarosa esta se descompone en fructuosa y glucosa, por lo que la
glucocinta cambia de color.
3-. Cmo demostrara que la sacarosa por si sola es incapaz de
descomponerse en glucosa fructosa?
Mediante el uso de agua desionizada, ya que la mezcla que tena agua
desionizada no cambi en su concentracin. Se utiliza despus una glucocinta;
al no haber cambio de color despus de determinado tiempo se comprobar
que la sacarosa no se descompuso por s sola.
4. Investigue cual es la composicin del reactivo de Benedict.
El reactivo de Benedict contiene soluciones de carbonato anhidro de sodio,

sulfato cprico y citrato de sodio. (A veces se utiliza NaOH para alcalinizar el

medio).
5. Qu es un azcar reductor?
Los azcares reductores son aquellos que poseen su grupo carbonilo (grupo
funcional) intacto, y que a travs del mismo pueden reaccionar con otras
molculas. Se unen con otras molculas de manera inespecfica. Se dice que
un azcar es reductor cuando puede oxidarse.
6. Es la sacarosa un azcar reductor? Explique.
No contiene ningn tomo de carbono anomrico libre, puesto que los
carbonos anomricos de sus dos unidades monosacridos constituyentes se
hallan unidos entre s, covalentemente mediante un enlace O-glucosdico. Por
esta razn, la sacarosa no es un azcar reductor y tampoco posee un extremo
reductor.
7. Cmo se llama la enzima que se extrajo de la levadura?
Sacarosa.
8. Cmo explica el cambio observado en los dos ltimos tubos a los
que aadi reactivo de Benedict?
El Na2CO3 confiere a la solucin un pH alcalino necesario para que la reaccin
pueda llevarse a cabo. El citrato de sodio mantiene al ion Cu2+ en solucin ya
que tiene la propiedad de formar complejos coloreados poco ionizados con
algunos de los metales pesados. Con el cobre produce un complejo de color
azul. Si se le agrega al reactivo una solucin de azcar reductor y se calienta
hasta llevar la mezcla a ebullicin, el azcar en solucin alcalina a elevadas
temperaturas se convertir en D-gluconato y su ene-diol, rompindose luego
en dos fragmentos altamente reductores, los cuales con sus electrones
expuestos, reaccionarn con el Cu++. Se obtiene entonces un azcar oxidado
y dos iones Cu+. Posteriormente el Cu+ producido reacciona con los iones OHpresentes en la solucin para formar el hidrxido de cobre:

Cu + + OH - Cu (OH) (precipitado amarillo)

El hidrxido pierde agua
2Cu (OH) Cu2O (precipitado rojo ladrillo) + H2O
La aparicin de un precipitado amarillo, anaranjado, o rojo ladrillo evidencia la
presencia de un azcar reductor.
9. Por qu se utilizaron los diferentes germinados y la saliva?
Para comparar las diferentes cantidades de glucosa que cada uno posee.
10. Cul ser la explicacin si los halos son de diferentes dimetros?
A mayor dimetro de halo la concentracin de glucosa es mayor.
11. A qu se debe la coloracin azul alrededor de los halos?
Al reactivo de lugol que solo ha teido a la parte del agar que no tiene
presencia de glucosa pura.
12. Cul es el nombre del compuesto qumico que ha funcionado en
esta prueba y qu tipo de actividad ha realizado?
Enzimtica, el almidn de la caja de petri se empieza a descomponer por
accin de distintas enzimas, por ejemplo la saliva contiene una enzima capaz
de romper las cadenas de almidn: la ptialina.
13. A qu conclusiones se llegara, en caso de que se presente algn
cambio se deja a temperatura ambiente la caja de petri que se
mantuvo en el refrigerador?
La mayora de las reacciones qumicas aumentan su velocidad a medida que
aumentamos la temperatura. Un incremento en la temperatura resulta en un
importe mayor de energa cintica a las molculas reactantes, lo que conduce
en un mayor ndice de colisiones productivas por unidad de tiempo.

Conclusiones:
Por medio de los experimentos realizados los comprobamos como intervienen
los distintos factores como el sustrato, temperatura, pH, presencia de
inhibidores en la actividad enzimtica.
Tambin se conoci que la enzima es un catalizador biolgico que mejora la
activacin qumica en una reaccin.
Se pudo observar que factores como la concentracin de sustrato y la
temperatura influyen de gran manera en la actividad enzimtica, debido a que
menor concentracin del sustrato hay mayor actividad enzimtica y en menor
concentracin de sustrato hay mayor actividad enzimtica

Bibliografa:
Buenrostro Buenrostro, Jos Aniceto; Cano Gonzales, Mara Elena; Herper
Rincn, Guadalupe; Mendoza Garca, Miguel Obaldo; Mora Ramrez,
Rodolfo; Prez Campos, Josefina; Valadez Omaa, Mara Teresa (2011)
Antologa de Biologa Celular. Editorial Instituto Politcnico Nacional. Pg.
138
Hernndez Josep Luis, Enciclopedia Temtica Universal: CIENCIAS
NATURALES. Ediciones Nauta. Espaa. 2001. Pp. 61-62
Kobal Pablo, Mario Marino A. (1893) BIOLOGY. Editorial Worth Publishers.
Pg. 1223